专利名称：填充有除去了水不溶性微粒的吸附材料的直接血液灌注用吸附器、与除去了水不溶性微 ...的制作方法
技术领域：
本发明涉及填充有以粒子个数为基准算出的平均粒径为300μm～600μM，粒径分布的变动系数为10％～20％，且除去了水不溶性微粒的吸附材料的直接血液灌注用吸附器、与除去了水不溶性微粒的直接血液灌注用吸附材料的取得方法。
背景技术：
目前在大力尝试积极地除去患者血液中存在的病因物质的血液净化吸附疗法，发现对许多的难病有其效果。血液净化吸附疗法有血浆灌注方式和直接血液灌注方式。血浆灌注方式是血浆分离装置与血液净化装置的2段系统，需要用于安全操作的专用装置，治疗费用高，并且需要繁杂操作。另一方面，直接血液灌注方式由于是直接使血液灌注到吸附器中的1段系统，故操作简单，并且体外循环血液量少，可减轻患者的负担。但直接血液灌注方式中使用的吸附器课题之一存在涉及存在于吸附器内的水不溶性微粒的问题。
所谓水不溶性微粒，主要是来自吸附材料的微粒，是直接血液灌注方式治疗时理论上能从吸附器内流出而进入体内的粒子。水不溶性微粒大量地流入体内时，堵塞血管或蓄积于脏器内等，估计是安全上的大问题。
直接血液灌注用吸附器中作为现有市售制品的代表例有以下的吸附器(参照非专利文献1)。
其中一种是钟渊化学工业(株)的除去β2微球蛋白(分子量约12000)用的吸附器。该吸附器中使用的吸附材料(参照非专利文献2)是粒径约500μm且粒径分布均一的吸附材料。用途适用于伴随关节痛的淀粉样蛋白症，在血液透析时利用。由于吸附材料的粒径分布均一，故使用水不溶性微粒的除去装置(参照专利文献1)等时，在不使吸附材料损失的情况下容易除去水不溶性微粒。即，作为对于水不溶性微粒的一种对策，使用粒径分布均一的吸附材料。但制造粒径分布均一的吸附材料(参照专利文献2)需要特殊的造粒装置(参照专利文献3)。而实际状况是能适合作为吸附材料载体的具有均一粒径分布的通用水不溶性载体作为市售品不存在。
另一种是可乐丽医疗(株)的肾辅助用吸附型血液净化器。该吸附器中使用的吸附材料(参照非专利文献2)的粒径是400～900μm，用途是为了除去尿毒素原因物质(分子量约100～2000)而作为肾辅助使用。为了作为直接血液灌注用吸附材料使用，在活性炭表面实施涂布聚甲基丙烯酸羟乙酯，使之不产生水不溶性微粒。即，作为对于水不溶性微粒的一种对策，对吸附材料实施涂布。但由于吸附材料需要涂布故制造工序变得复杂。
如上所述，从水不溶性微粒产生的安全性的观点考虑，在直接血液灌注用时要采用特殊的工序制造这些吸附器。由于需要这些特殊的工序，故制品的制造成本也升高。因此，期望不需要特殊的造粒设备、涂布设备而使用通用的水不溶性载体等，能简便地取得的直接血液灌注用吸附器。
此外，目前为止也公开了有关医疗用吸附材料的除去水不溶性微粒的专利(参照专利文献1)，但其特征是具有多个循环·微粒除去管线，也没有记载除去水不溶性微粒的吸附材料的粒径分布，并且也没有记载除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸(mesh opening size)与吸附器的筛网眼尺寸的比的规定。
专利文献1特开平04-14594专利文献2特开平01-275601专利文献3特开昭62-191033非专利文献1日本医疗器材工业会，特定保险医疗用材料指南，p175～，2003年非专利文献2人工脏器，Vol.23，No.2，p439～，1994年非专利文献3化学工学，Vol.50，No.10，p685～，1986年发明内容本发明提供填充有不需要特殊的造粒设备、涂布设备，使用具有比较容易得到的粒径分布的水不溶性载体(以粒子个数为基准算出的平均粒径为300～600μm，粒径分布的变动系数为10％～20％)，并且除去了水不溶性微粒的吸附材料的直接血液灌注用吸附器、与除去了水不溶性微粒的直接血液灌注用吸附材料的取得方法。
本发明者们对填充有不需要特殊的造粒设备、涂布设备，使用具有比较容易得到的粒径分布的水不溶性载体，并且除去了水不溶性微粒的吸附材料的直接血液灌注用吸附器的取得进行了潜心研究。结果完成了填充有除去水不溶性微粒时不使吸附材料损失，并且治疗上达到安全水平地除去了水不溶性微粒的吸附材料的直接血液灌注用吸附器的发明。
即本发明涉及填充有吸附材料的直接血液灌注用吸附器，该吸附材料包含以粒子个数为基准算出的平均粒径为300～600μm、粒径分布的变动系数为10％～20％的水不溶性载体的粒子群，每个吸附器的存在于吸附器内的10μm以上的水不溶性微粒数的测定值的平均+6SD为24000个以下，每个吸附器的25μm以上的水不溶性微粒数的测定值的平均+6SD为4000个以下。
另外，本发明涉及使用除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸与吸附器的筛网眼尺寸的比为1.3～1.5的筛网，从包含以粒子个数为基准算出的平均粒径为300～600μm、并且粒径分布的变动系数为10％～20％的粒子群的吸附材料中除去水不溶性微粒，从而取得填充在直接血液灌注用吸附器中的吸附材料的方法。
根据本发明可以制得填充有不需要用于制造容易除去水不溶性微粒而粒径分布均一的吸附材料的特殊造粒装置，并且不进行抑制水不溶性微粒产生的涂布处理而使用具有比较容易得到的粒径分布的水不溶性载体，并且除去了水不溶性微粒在治疗上达到安全水平的吸附材料的直接血液灌注用吸附器。根据本发明容易取得直接血液灌注用吸附器，通过使用这种吸附器也可以提高治疗时有关水不溶性微粒的安全性。
图1为微粒除去的概况。
图2为吸附器。
图3为流量与压力损失的关系。
符号说明1 吸附材料2 水不溶性微粒3 除去水不溶性微粒的筛网4 过滤器5 泵6 喷嘴7 微粒除去槽8 血液流入口9 血液流出口10 柱11 吸附器12 吸附器的筛网具体实施方式
以下，举出具体例对本发明的实施方式进行说明。
本发明中的吸附材料只要是对病因物质有亲和性的物质则没有特殊限定。作为一例可举出将对病因物质有亲和性的配位体固定在水不溶性载体上的吸附材料等。
本发明中的水不溶性载体在常温常压下是固体、水不溶性，并且具有适当大小的细孔，即具有多孔结构。水不溶性载体可以使用形状为球状或粒状的载体。可以使用凝胶过滤剂、离子交换体的原料、亲和性色谱用载体、高分子载体、体液净化用载体、化妆品添加剂等用途中历来使用的通用的载体。
直接血液灌注方式中，使用球状或粒状的水不溶性载体时，为了确保血球等通过的流路，必须使粒子径比流过血浆等液态成分时(血浆灌注方式)大。然而，随着粒径变大，吸附的病因物质的扩散距离增加，动态吸附性能降低。即治疗时间延长。作为本发明中的吸附材料，优选在直接血液灌注方式中能够发挥良好的通血与吸附效率的吸附材料的平均粒径是300～600μm，更优选是400～500μm。
直接血液灌注方式中从通血性方面考虑，优选水不溶性载体的粒径分布更均一。但粒径分布均一的载体造粒变得困难，需要特殊的设备。另一方面，粒径分布变宽时，吸附材料被紧密填充，由于血液的流路变窄故通血变得困难。而且，粒径分布宽时，除去水不溶性微粒时，伴随除去处理的吸附材料的损失量也增多。
本发明的吸附材料可以使用具有不需要特殊的造粒设备而比较容易得到的粒径分布的通用的水不溶性载体等。其粒径分布的变动系数(样本中的以粒子个数为基准算出的标准偏差/平均粒径×100)现实优选10％～20％。此外，吸附材料的平均粒径与粒径分布的变动系数，由体视显微镜等得到的吸附材料的放大照片逐个地测定100个以上直径以粒子个数为基准求出。
本发明中的水不溶性载体的强度，太软、容易破坏不优选。流过血液时如果产生压实则不能得到足够的血液流量，会产生处置时间不能延长进而不能继续进行处置。为了防止吸附材料的压实，优选吸附材料是具有足够机械强度的吸附材料(硬质)。这里所谓硬质，如后述参考例所示，是指将吸附材料均匀地填充到圆筒状柱中，流过水性液体时的压力损失与流量的关系至少直至0.3kgf/cm2时呈直线关系。另外，不优选输送、填充等各种工序时不断产生水不溶性微粒的水不溶性载体。
本发明中的水不溶性载体的材质没有特殊限定，作为代表例可举出由纤维素、醋酸纤维素、甲壳质、壳聚糖、糊精、琼脂糖等多糖类构成的有机载体，聚苯乙烯、苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚乙烯醇等合成高分子等。另外，虽然不是必需的，但也可以具有聚甲基丙烯酸羟乙酯等具有羟基的高分子材料、具有聚环氧乙烷链的单体与其他的聚合性单体共聚的这类接枝共聚物等的涂层。还可以使用玻璃、氧化铝、陶瓷等无机物等。其中纤维素、包括聚乙烯醇等的合成高分子，由于在载体表面容易引入活性基团故在实用上优选使用。
其中最优选使用由纤维素制成的载体。由纤维素制成的载体由于机械强度比较高、强韧，故被破坏或产生水不溶性微粒的情况少，填充到吸附器中时由于即使以高流速流过血液也难压实，故可以以高流速流过血液。此外，具有安全性比合成高分子载体高等优点，最适合作为本发明中的水不溶性载体使用。
作为本发明中的病因物质的例子，可举出存在于体液中的低比重脂蛋白、超低比重脂蛋白等作为动脉硬化的原因物质的脂蛋白，免疫球蛋白(A.D.E.G.M)、抗DNA抗体、抗乙酰胆碱受体抗体、抗血液型抗体、抗血小板抗体等自身抗体与抗原抗体复合物，内毒素、类风湿因子、巨噬细胞、癌组织浸润T细胞等。
作为对本发明中的病因物质有亲和性的物质，只要是吸附目标病因物质的物质则没有特殊限定。对病因物质有亲和性的物质与病因物质的亲和力，分成利用生物学的相互作用和物理化学的相互作用的亲和力。作为利用了生物学的相互作用的亲和力，可举出固定抗原的亲和力、固定抗体的亲和力、利用了补体结合或Fc结合、其他生物学的相互作用而对病因物质有亲和性的物质。作为利用物理的相互作用的亲和力，有利用了静电的相互作用、疏水的相互作用而对病因物质有亲和性的物质。
作为利用了物理化学的相互作用而对病因物质有亲和性的物质的具体例，要吸附低比重脂蛋白时，可以使用例如对具有阴性基的病因物质有亲和性的物质。若例举对具有阴性基的病因物质有亲和性的物质，则可举出硫酸葡聚糖、肝素、硫酸软骨素、多硫酸软骨素、硫酸乙酰肝素、硫酸木聚糖、硫酸卡洛宁、硫酸纤维素、硫酸甲壳质、硫酸壳聚糖、硫酸果胶、硫酸菊粉、硫酸褐藻酸、硫酸糖原、硫酸聚乳糖、硫酸角叉菜胶、硫酸淀粉、硫酸聚葡萄糖、硫酸昆布多糖、硫酸半乳聚糖、硫酸果聚糖、mepesulfate等硫酸化多糖，磷钨酸、聚硫酸化茴香醚、硫酸聚乙烯醇、多聚磷酸、聚丙烯酸等。其中硫酸化多糖的效果特别大。从临床上实用性方面考虑，作为优选例可举出肝素、硫酸葡聚糖。
作为利用了疏水的相互作用而对病因物质有亲和性的物质的具体例，要吸附血纤维蛋白原时，可以使用作为疏水性氨基酸的色氨酸衍生物。所谓色氨酸衍生物，是指色氨酸、色氨酸乙酯、色氨酸甲酯等色氨酸酯类，色胺、色氨醇(tryptophanol)等具有与带有吲哚环的色氨酸类似结构的化合物。另外，这些色氨酸衍生物也可以是L体、D体、DL体、或这些的混合物的任何一种。还可以是2种以上的色氨酸衍生物的混合物。这些色氨酸衍生物中，安全上优选色氨酸，其中，L-色氨酸由于是天然型的氨基酸，有关其安全性的数据丰富，价廉而容易得到，故实用上最优选使用。
如以上例示对具有阴性基与疏水基的病因物质有亲和性的物质那样，可以根据目标的病因物质，使用对显示相互作用的各种病因物质有亲和性的物质。此外，还可以将对上述病因物质有亲和性的物质多个固定。作为具体例，要同时吸附低比重脂蛋白与血纤维蛋白原时，也可以同时选择硫酸葡聚糖和色氨酸衍生物作为对病因物质有亲和性的物质。
作为本发明中在水不溶性载体上将对病因物质有亲和性的物质固定的方法，有共价键、离子键、物理吸附、包埋、对表面的沉淀不溶化等公知的方法，可以根据对病因物质有亲和性的物质和上述水不溶性载体的材质选择适当的方法。若考虑灭菌时对病因物质有亲和性的物质的溶出性，优选利用共价键进行固定化、不溶化。另外，也可以根据需要在水不溶性载体与对病因物质有亲和性的物质之间引入间隔物。
在水不溶性载体上利用共价键将对病因物质有亲和性的物质固定时，作为提高水不溶性载体与对病因物质有亲和性的物质的反应性的方法的例子，众知卤化氰法、环氧氯丙烷法、双环氧化物法、溴代乙酰溴法等。采用这些方法在水不溶性载体上引入氨基、羧基、羟基、硫醇基、酸酐基、琥珀酰亚胺基、氯基、醛基、环氧基、tresyl基等官能团。其中从加热灭菌时的稳定性考虑，可举出采用环氧氯丙烷法衍生的环氧基作为特别优选的例子。
本发明中的水不溶性载体的球状蛋白质的排除极限分子量必须比病因物质的分子量大，优选使用2×104以上的分子量。所谓排除极限分子量，是指如专题著作(尺寸排除色谱、森定雄著、共立出版)所述，在尺寸排除色谱中流入具有各种分子量的试料时，在不能侵入细孔内(被排除)的分子内，具有最小分子量的物质的分子量。具体地说，例如吸附的病因物质为低密度脂蛋白与血纤维蛋白原时，球状蛋白质的排除极限分子量低于5×105时纤维蛋白原与低密度脂蛋白的吸附能力小，不耐实用。而球状蛋白质的排除极限分子量超过1×108，孔径大小(细孔径)太大，对吸附有用的表面积降低，结果纤维蛋白原与低密度脂蛋白的吸附能力降低。因此，本发明中水不溶性载体的球状蛋白质的排除极限分子量优选5×105～1×108，从发挥吸附性能的观点考虑更优选1×106～1×108，进一步优选2×106～1×108。
本发明的吸附器在具有血液的流入口与流出口、在流入口与流出口安装有含血球成分的血液通过而吸附材料不通过的筛网的柱中填充本发明的吸附材料。为了降低血液中病因物质的浓度，本发明中吸附器的容量必须是100mL以上。从吸附性能的观点出发，对吸附器的容量没有限制，但由于排到体外的血液量太多时有引起血压降低的危险性，故优选吸附器容量是600mL以下。另外，从即使组装到血液透析等其他的血液净化疗法的回路中而血液的体外循环量也不过分地增大，尽可能防止随血液流到体外而有可能发生的血压降低的观点考虑，优选吸附器容量为400mL以下。
本发明的吸附器由于用于操作简便的直接血液灌注法，吸附器的筛网必须是吸附材料不从吸附器流出的筛网眼，并且必须是不捕捉血球成分的筛网眼。如果将吸附器的筛网的网眼比血球成分小的筛网安装在吸附器上，血球成分被吸附器捕捉。而将吸附器的筛网的网眼比吸附材料大的筛网安装到吸附器上时，吸附器内的吸附材料流出到通血中而进入体内。因此吸附器的筛网眼优选100～200μm。
所谓本发明中的水不溶性微粒，是指治疗时没有被吸附器的筛网捕捉而能够从吸附器流出而进入体内的水不溶性粒子。因此作为水不溶性微粒所定义的粒径的上限值依赖于所使用的吸附器的筛网眼。例如，吸附器的筛网眼尺寸为150μm时，水不溶性微粒的粒径的上限值是150μm。
可以从吸附器流出的尺寸的水不溶性微粒存在于吸附器内在安全性方面是个大问题。根据“第14改正局方制剂总则17注射剂”的“水不溶性微粒试验法”所述的某注射剂(容积100mL以上)的不溶性微粒的标准，可如下所述考虑有关与直接血液灌注用吸附器相关的水不溶性微粒的安全性的标准。
上述试验方法记载了两种，而在限度比第1法“使用光遮蔽型自动微粒测定装置的方法”更严格的第2法“使用显微镜的方法”中，注射剂(容量100mL以上)的水不溶性微粒数的标准为在1mL中100μm以上的水不溶性微粒是12个以下，并且25μm以上的水不溶性微粒是2个以下。也有如血液过滤那样作为补充液大量注入15-18L到静脉中的例子，但如专题著作(图表输液手册，北村建树著，中外医学社出版)所述，通常作为输液使用的输液总量为1天2～2.5L以下。这里将2L作为总输液量，此时容许输液中含有的最大值，在治疗时即使吸附器内的全部水不溶性微粒进入体内也安全时，与水不溶性微粒数的安全有关的指标是10μm以上的水不溶性微粒每个吸附器为24000个以下，并且25μm以上的水不溶性微粒每个吸附器为4000个以下。因此，与水不溶性微粒数的安全有关的指标，考虑每个吸附器内的水不溶性微粒数偏差时，10μm以上的水不溶性微粒数的测定值的平均+6SD每个吸附器为24000个以下，25μm以上的水不溶性微粒数的测定值的平均+6SD每个吸附器为4000个以下。再者，本发明中的水不溶性微粒数的测定值的平均与SD，是由6个吸附器分别测定的以粒子个数为基准的每个吸附器的水不溶性微粒数的平均值与标准偏差。6SD是标准偏差的6倍值。本发明中水不溶性微粒数的测定，采用上述第2法“使用显微镜的方法”进行，但也可以使用库乐尔特颗粒计数器(通过检测粒子通过孔隙时的电阻而测定相当于等体积球的直径)进行测定。
本发明中水不溶性微粒数如以下所述求出。边向填充有吸附材料的吸附器中通入使用0.22μm的过滤器过滤过的水，边将吸附材料装入不会产生水不溶性微粒的容器(例市售的生理食盐液的空容器)中，把全部浆液转移到另一个准备的容器中，在容器间重复5次这种转移操作从而充分搅拌吸附材料后，静置到吸附材料进行沉降。吸附材料是否沉降，取上层澄清液，采用上述测定方法测定上层澄清液中的微粒浓度。由该微粒浓度的测定值算出吸附器内含有的水不溶性微粒数而求出每个吸附器的水不溶性微粒。
水不溶性微粒的除去也可以采用倾析等间歇操作进行，但需要时间、效率低。即优选如下所述能连续地除去水不溶性微粒。有关本发明中的水不溶性微粒的除去，图1中示出了一实施例的简略图。图1中1为吸附材料，2为水不溶性微粒，3为除去微粒的筛网，4为过滤器，5为泵，6为喷嘴，7为微粒除去槽。使吸附材料分散在设置有水不溶性微粒通过而吸附材料不通过的筛网的容器内的洗涤液中，从利用筛网分隔的吸附材料不存在的部位，使用具有捕捉水不溶性微粒的过滤器的循环·水不溶性微粒除去管线，边利用过滤器捕捉洗涤液中的水不溶性微粒边经喷嘴再注入洗涤液，使微粒除去槽内的吸附材料长时间分散，进行水不溶性微粒的除去。
图1只不过是一例，只要是具有除去水不溶性微粒的筛网的装置则没有特殊限定。另外，水不溶性微粒的除去管线也可以是多个。
除去该水不溶性微粒的筛网眼尺寸太小时不能除去水不溶性微粒，若太大则除去水不溶性微粒时吸附材料从筛网流出而产生损失。此外，从筛网流出的吸附材料的量多时，除去水不溶性微粒的过滤器产生堵塞，难以连续处理。除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸，优选使除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸与吸附器的筛网眼尺寸的比为1.3～1.5。
接着，对于本发明的吸附器，将一实施例的简略截面图示于图2。图2中1为吸附材料，8为血液的流入口，9为血液的流出口，10为柱，12为吸附器的筛网，11为吸附器。然而本发明的吸附器并不限定于这样的具体例，只要是在具有液体入口与出口，并且具有防止吸附材料往容器外流出的机构的容器内填充了病因物质的吸附材料的吸附器，则形状没有特殊限定。
实施例以下，根据本发明的实施例具体地进行说明。
(参考例)在两端安装有孔径15μm的过滤器的玻璃制圆筒柱(内径9mm，柱长150mm)中分别均一地填充琼脂糖材料(Bio-rad公司制的BiogelA-5m，粒径50～100目)、乙烯基系高分子材料(东曹公司制的TOYOPEARL HW-65，粒径50～100μm)与纤维素材料(Chisso公司制的Cellulofine GC-700m，粒径45～105μm)，使用蠕动泵通水，求出流量与压力损失ΔP的关系。把其结果示于图3。
如图3所示，TOYOPEARL HW-65与Cellulofine GC-700m大致与压力的增加成正比地增大流量，而BiogelA-5m引起压实，即使增大压力而流量并不增大。本发明中如前者那样，把压力损失ΔP与流量的关系直到0.3kgf/cm2时呈直线关系的材料称为硬质。
(制造例)加入平均粒径约446μm、粒径分布的变动系数14％、球状蛋白质的排除极限分子量5×107的多孔纤维素球珠24L、4N的NaOH水溶液6.6L与环氧氯丙烷7L，加水使总量为33L，在40℃下搅拌2小时进行反应。反应后用水充分洗涤球珠而得到环氧化纤维素球珠。环氧化纤维素球珠的环氧基量是16.4μmol/ml(湿润体积)。
制备将3kg的硫酸葡聚糖(硫含量约18％，分子量约4000)溶解于15L水的硫酸葡聚糖水溶液，加入用水湿润状态的环氧化纤维素球珠24L，使用NaOH水溶液成为碱性后，在45℃下反应6小时。反应后，使用水与食盐水充分洗涤球珠后，加入将0.34kg的L-色氨酸溶解于11L稀NaOH水溶液而得到的溶液，在50℃下反应8小时。然后，用水与食盐水充分洗涤球珠，得到硫酸葡聚糖与色氨酸固定化纤维素球珠的吸附材料。该吸附材料的平均粒径是446μm，粒径分布的变动系数是14％。此外，平均粒径与粒径分布的变动系数，是充分地搅拌水不溶性载体与吸附材料的浆液，取适当量置于玻璃皿上，由使用体视显微镜把焦点对准约150μm以上的吸附材料摄影的放大照片，采用3点圆法测定100个吸附材料，以粒子个数为基准求出。
(实施例1)把制造例的吸附材料填充在两端安装有网眼150μm的聚对苯二甲酸乙二醇酯制筛网的内径10mm、长34mm的丙烯酸制柱(容积2.7mL)中，得到吸附器。然后相对于血液1mL添加5单位的肝素，使抗凝固的健康人血液40mL按流速6.5mL/分循环2小时。循环2小时前后的混合血液的血球数如表1所示，任何一种情况的血球均显示良好的通过性。另外，循环前后的混合血液中的LDL-胆甾醇、血纤维蛋白原、与HDL-胆甾醇的浓度如表2所示，LDL-胆甾醇从163mg/dL降低到105mg/dL，血纤维蛋白原从210mg/dL降低到152mg/dL，而HDL-胆甾醇只从49mg/dL降到46mg/dL。
此外，制造例的吸附材料的色氨酸固定化量由吸附材料的氮含量求出。即，将1mL的制造例的吸附材料用水充分洗涤后，在60℃下减压干燥6小时以上后，使用微量全氮分析装置进行定量。其结果，制造例的吸附材料的色氨酸固定化量是7.8μmol/mL。
此外，制造例的吸附材料的硫酸葡聚糖固定化量利用硫酸葡聚糖与甲苯胺蓝具有亲和性而测定。即，相对于3mL的制造例的吸附材料，加入100mL左右调节为约90mg/L的甲苯胺蓝(碱性蓝17(东京化成))水溶液，搅拌10分钟，静置后，采用630nm下的吸光度对上面澄清的甲苯胺蓝进行定量，由其减少量求出。其结果制造例的吸附材料的硫酸葡聚糖固定化量为0.23μmol/mL。
表1
表2
(实施例2)使制造例的吸附材料(浆液浓度30％，液量16L)分散在设置有网眼212μm的筛网的槽内，从被筛网分隔的吸附材料不存在的部位，将浆液-溶剂液(水)使用循环管线，经喷嘴把浆液-溶剂液再注入到槽内，边使槽内的吸附材料长时间分散，边按流量32L/分进行10分钟浆液-溶剂液的循环。另外，在处于设置有筛网的槽外的浆液-溶剂液的循环管线上设置网眼104μm的筛网，求出上述10分钟循环中从网眼122μm的筛网流出而被网眼104μm的筛网捕捉的吸附材料的量。该量如表3所示，是8.0mL。
假定安装捕捉水不溶性微粒的0.22μm的过滤器而代替循环管线中的网眼104μm的筛网，在上述条件下进行了水不溶性微粒的除去时，估计伴随水不溶性微粒的除去的吸附材料的损失(流出)量为约8.0mL，该量少。另外，如果是该流出量，则连续运转时，通过在捕捉水不溶性微粒的过滤器前设置预过滤器，也可以避免流出的水不溶性微粒造成的过滤器堵塞。
此外，吸附器的筛网眼采用与实施例1相同尺寸，水不溶性微粒除去槽的筛网眼采用与本实施例相同尺寸的场合，除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸(212μm)与吸附器的筛网眼尺寸(150μm)的比是1.41。
(比较例1)使制造例的吸附材料(浆液浓度30％，液量16L)分散在设置有网眼233μm的筛网的槽内，从被筛网分隔的吸附材料不存在的部位，将浆液-溶剂液(水)使用循环管线，经过喷嘴把浆液-溶剂液再注入到槽内，边使槽内的吸附材料长时间分散，边按流量32L/分进行10分钟浆液-溶剂液的循环。另外，在处于设置有筛网的槽外的浆液-溶剂液的循环管路上设置网眼104μm的筛网，求出上述10分钟循环中从网眼233μm的筛网流出而被网眼104μm的筛网捕捉的吸附材料的量。该量如表3所示，是20mL。
假定安装捕捉水不溶性微粒的0.22μm的过滤器而代替循环管线中的网眼104μm的筛网，在上述条件下进行了水不溶性微粒的除去时，估计伴随水不溶性微粒的除去的吸附材料的损失(流出)量约为20mL。该量比实施例2多。而连续运转时，为了避免除去水不溶性微粒的过滤器的堵塞，即使设置了预过滤器，预过滤器的尺寸也比实施例2大。
此外，吸附器的筛网眼采用与实施例1相同的尺寸，水不溶性微粒除去槽的筛网眼利用与本例相同的尺寸的场合，除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸(233μm)与吸附器的筛网眼尺寸(150μm)的比是1.55。
表3
(实施例3)使制造例的吸附材料(浆液浓度15％，液量16L)分散在设置有网眼212μm的筛网的微粒除去槽内的洗涤液中，从被筛网分隔的吸附材料不存在的部位，使用具有捕捉自212μm的筛网流出的水不溶性微粒的0.2 2μm的过滤器的循环·水不溶性微粒除去管线，边利用过滤器捕捉洗涤液中的水不溶性微粒，边按流量32L/分循环洗涤液，经喷嘴将洗涤液再注入到微粒除去槽内，使微粒除去槽内的吸附材料长时间分散，进行10分钟水不溶性微粒的除去。此外，除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸(212μm)与吸附器的筛网眼尺寸(150μm)的比是1.41。
在封闭系统中向6个具有实施例1中使用的吸附器的筛网、容器250mL的柱中填充除去了水不溶性微粒的约250mL的吸附材料后，边向吸附器内通入用0.22μm的过滤器过滤的水边驱出吸附材料，测定吸附器内的水不溶性微粒数。(因吸附器的筛网眼尺寸是150μm，故水不溶性微粒的粒径的上限值是150μm)有关水不溶性微粒的测定方法，在第14改正局方制剂总则17注射剂的水不溶性微粒试验法中，由于纤维素系吸附材料是半透明的，故采用该方法不能进行测定。因此，使用通过检测粒子通过孔隙时的电阻而测定相当于等体积球的直径的库乐尔特颗粒计数器测定了水不溶性微粒。但由于吸附材料的水不溶性载体是多孔质，故实际粒径为采用库乐尔特颗粒计数器测定的粒径乘以修正系数的值(实际粒径＝测定的粒径×2)。(以后的实施例与比较例的水不溶性微粒数的测定采用本测定方法实施)6个吸附器的吸附器内的水不溶性微粒数的测定结果如表4所示，每个吸附器中10～150μm的水不溶性微粒测定值的平均+6SD是8474个，每个吸附器中25～150μm的水不溶性微粒的测定值的平均+6SD是1648个。如上所述，水不溶性微粒数达到了安全水平。
(实施例4)使制造例的吸附材料(浆液浓度30％，液量16L)分散在设置有网眼212μm的筛网的微粒除去槽内的洗涤液中，从被筛网分隔的吸附材料不存在的部位，使用具有捕捉自212μm的筛网流出的水不溶性微粒的0.22μm的过滤器的循环·水不溶性微粒除去管线，边利用过滤器捕捉洗涤液中的水不溶性微粒边按流量32L/分循环洗涤液，经喷嘴把洗涤液再注入到微粒除去槽内，使微粒除去槽内的吸附材料长时间分散，进行10分钟水不溶性微粒的除去。此外，除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸(212μm)与吸附器的筛网眼尺寸(150μm)的比是1.41。
在封闭系统中向6个具有实施例1中使用的吸附器的筛网、容量为250mL的柱中填充除去了水不溶性微粒的约250mL的吸附材料后，边向吸附器内通入用0.22μm的过滤器过滤的水边驱出吸附材料，测定吸附器内的水不溶性微粒数。(因吸附器的筛网眼尺寸是150μm，故水不溶性微粒的粒径上限值是150μm)6个吸附器的吸附器内的水不溶性微粒数的测定结果如表4所示，每个吸附器中10～150μm的水不溶性微粒的测定值的平均+6SD是8501个，每个吸附器中25～150μm的水不溶性微粒的测定值的平均+6SD是1652个。如上所述，水不溶性微粒数达到了安全水平。
(实施例5)使制造例的吸附材料(浆液浓度50％，液量6L)分散在设置有网眼212μm的筛网的微粒除去槽内的洗涤液中，从被筛网分隔的吸附材料不存在的部位，使用具有捕捉自212μm的筛网流出的水不溶性微粒的0.22μm的过滤器的循环·水不溶性微粒除去管线，边利用过滤器捕捉洗涤液中的水不溶性微粒边按流量32L/分循环洗涤液，经喷嘴把洗涤液再注入到微粒除去槽内，使微粒除去槽内的吸附材料长时间分散，进行10分钟水不溶性微粒的除去。此外，除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸(212μm)与吸附器的筛网眼尺寸(150μm)的比是1.41。
在封闭系统中向6个具有实施例1中使用的吸附器的筛网、容量为250mL的柱中填充除去了水不溶性微粒的约250mL的吸附材料后，边向吸附器内通入用0.22μm的过滤器过滤的水边驱出吸附材料，测定吸附器内的水不溶性微粒数。(因吸附器的筛网眼尺寸是150μm，故水不溶性微粒的粒径上限值是150μm)6个吸附器的吸附器内的水不溶性微粒数的测定结果如表4所示，每个吸附器中10～150μm的水不溶性微粒的测定值的平均+6SD是4412个，每个吸附器中25～150μm的水不溶性微粒的测定值的平均+6SD是831个。如上所述，水不溶性微粒数达到了安全水平。
(比较例2)使制造例的吸附材料(浆液浓度30％，液量16L)分散在设置有网眼180μm的筛网的微粒除去槽内的洗涤液中，从被筛网分隔的吸附材料不存在的部位，使用具有捕捉自180μm的筛网流出的水不溶性微粒的0.22μm的过滤器的循环·水不溶性微粒除去管线，边利用过滤器捕捉洗涤液中的水不溶性微粒边按流量32L/分循环洗涤液，经喷嘴把洗涤液再注入到微粒除去槽内，使微粒除去槽内的吸附材料经长时间分散，进行10分钟水不溶性微粒的除去。此外，除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸(180μm)与吸附器的筛网眼尺寸(150μm)的比是1.20。
在封闭系统中向6个具有实施例1中使用的吸附器的筛网、容量为250mL的柱中填充除去了水不溶性微粒的约250mL的吸附材料后，边向吸附器内通入用0.22μm的过滤器过滤的水边驱出吸附材料，测定吸附器内的水不溶性微粒数。(因吸附器的筛网眼尺寸是150μm，故水不溶性微粒的粒径上限值是150μm)。6个吸附器的吸附器内的水不溶性微粒数的测定结果如表4所示。每个吸附器中10～150μm的水不溶性微粒的测定值的平均+6SD是23909个，每个吸附器中25～150μm的水不溶性微粒的测定值的平均+6SD是13142个。如上所述，水不溶性微粒数没有达到安全水平。
表4
权利要求
1.直接血液灌注用吸附器，是填充有吸附材料的直接血液灌注用吸附器，该吸附材料包含以粒子个数为基准算出的平均粒径为300μm～600μm、粒径分布的变动系数为10％～20％的水不溶性载体的粒子群，每个吸附器的存在于吸附器内的10μm以上的水不溶性微粒数的测定值的平均+6SD为24000个以下，每个吸附器的25μm以上的水不溶性微粒数的测定值的平均+6SD为4000个以下。
2.权利要求1所述的直接血液灌注用吸附器，其中，吸附材料的球状蛋白质的排除极限分子量为2×104～1×108。
3.权利要求1或2所述的直接血液灌注用吸附器，其中，吸附材料为纤维素类载体。
4.权利要求1所述的直接血液灌注用吸附器，其中，吸附材料为纤维素类载体，吸附材料的球状蛋白质的排除极限分子量为5×105～1×108，并且填充了低密度脂蛋白和血纤维蛋白原的吸附材料。
5.取得填充到直接血液灌注用吸附器中的吸附材料的方法，其中，使用除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸与吸附器的筛网眼尺寸的比为1.3～1.5的筛网，从包含以粒子个数为基准算出的平均粒径为300μm～600μm且粒径分布的变动系数为10％～20％的粒子群的吸附材料中除去水不溶性微粒。
全文摘要
提供不需要特殊的造粒设备、涂布设备，使用具有比较容易得到的粒径分布的水不溶性载体，并且填充有除去水了不溶性微粒的吸附材料的直接血液灌注用吸附器、与除去了水不溶性微粒的直接血液灌注用吸附材料的取得方法。使用除去水不溶性微粒的筛网眼尺寸与吸附器的筛网眼尺寸的比为1.3～1.5的水不溶性微粒除去筛网，实现没有吸附材料损失而填充有以粒子个数为基准算出的平均粒径为300～600μm、粒度分布的变动系数为10％～20％，并且除去水不溶性微粒达到安全水平的吸附材料的直接血液灌注用吸附器的取得。
文档编号A61L33/00GK1988926SQ20058002488
公开日2007年6月27日 申请日期2005年7月20日 优先权日2004年7月23日
发明者藤田耕资, 中谷胜, 小林明, 西本岳弘 申请人:株式会社钟化