专利名称：一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂及其制备方法，该复方制剂具有免疫增强作用，在肿瘤的预防和治疗，体弱多病者的扶正，以及在病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性肾炎及肾功能衰竭、慢性支气管炎等方面具有治疗作用，属于药品制剂技术领域。
背景技术：
随着人类生活环境、生活水平和生活方式的变化以及医学的进步，人类疾病谱发生了显著的变化，一般性传染病逐渐被控制，而恶性肿瘤则成为日益常见且严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一。世界卫生组织统计资料表明，世界癌症每年发病1000万人，死亡700万人，是仅次于心血管病的人类第2杀手。
寻找有效的抗癌药物与方法，彻底攻克癌症，是世界医学界重要的研究课题。化疗、放疗、手术治疗是当今治疗肿瘤的主要手段，但毒副作用较大。能否找到既能杀伤肿瘤细胞，毒副作用又比较小的药物及治疗方法，在肿瘤的治疗中显得尤其重要。
黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.vat.Mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。黄芪属植物是一种多年生、深根性的草本药用植物，别名绵芪，绵黄芪，在我国主要分布于北方地区，普遍生长在东北的东部山区的长白山、小兴安岭、完达山脉和辽宁东部山区及大兴安岭，部分平原地区亦可见到，此外河北、山西、山东、内蒙古、陕西、甘肃、宁夏、青海、新疆等省区均有，朝鲜、蒙古、苏联也有分布。
黄芪中提取的多糖类成分可刺激动物的T淋巴细胞体外增殖，从而增强其特异性免疫功能；黄芪多糖还可使小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数明显升高，表明其可增强动物体内非特异性免疫功能；黄芪多糖还对多种病毒具有较强的抑制作用，可参见河南农业科学，2005年第4期，78-90页。黄芪中提取的黄芪甲苷，具有益气养血、扶正祛邪、养心通脉、健脾利湿之功效，常作为含黄芪的中药制剂检测的指标成分。
香菇多糖系从人工培养的伞菌科真菌香菇[Lentinus edodes(Berk)Sing]子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖。香菇多糖(Lentinan)是一种免疫调节型静脉给药的免疫增强药物，具有剂量低，疗效好，毒副作用小等优点。临床上主要应用于不能手术的癌症病人，能显著延长患者的存活时间，以及防止手术后癌症的复发。1966年日本首先从香菇子实体中获得香菇多糖，20世纪70年代应用于临床。我国于1988年从日本进口，取得良好的疗效。但进口价格十分昂贵。1994年我国研制成功与日本香菇多糖同样剂型的香菇多糖冻干粉针剂并投产。
香菇多糖是一种有效的肿瘤药物。一般与化疗药物联合使用。对于复发的胃癌和结肠癌患者的III期临床4年跟踪观察，1、2、3和4年存活率分别较单独使用化疗药物提高〔Tsuburs E.Rationale of Biological Response modifiersin cancer treatment.AmsterdanExcerpta Medica.1985151〕。香菇多糖与白介素-2联合使用可大大增加抗肿瘤活性。香菇多糖的毒副作用与通常化疗药物比较，由于轻微，故可忽略不计。在实际应用中，香菇多糖因其主要表现为免疫增强作用，所以在临床应用中通过和其它药物配伍，有助于增强其它药物的抗肿瘤、抗病毒、抗炎等作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种适于临床应用的药物剂型的黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂，同时具有在肿瘤的预防和治疗、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性肾炎及肾功能衰竭、慢性支气管炎、体弱多病者的扶正等方面能起到协同的治疗作用，使用方便。
为实现以上目的，本发明的技术方案是提供一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂，其特征在于黄芪提取物与香菇多糖的重量比为1∶0.1-5，适于临床应用的药物剂型包括片剂、胶囊剂、粉针剂、冻干粉针剂、水针剂、输液剂。
一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂，其特征在于，将香菇多糖的免疫增强作用与抗病毒和抗炎的黄芪提取物联合使用，其制备方法为
(1)按重量计称取香菇多糖0.1-5份，放入容器中用0.3-1mol/L的氢氧化钠水溶液室温溶解；(2)在步骤(1)溶解液中加入香菇多糖100-300倍重量10-30％甘露醇注射液，搅匀；(3)在步骤(2)溶解液中加入黄芪提取物1份，然后用酸液调pH至6-10，过滤，按照中药冻干粉针剂的操作要求制得复方黄芪—香菇多糖冻干粉针；(4)或在步骤(1)溶解液中加入黄芪提取物1份，搅拌溶解，用酸液调pH至6-10，过滤，按照中药水针剂的操作要求制得复方黄芪—香菇多糖水针剂；(5)或在步骤(1)溶解液中加入黄芪提取物1份，溶解后加入等当量盐酸溶液，再用相同浓度的氢氧化钠溶液或盐酸溶液调pH至6-10，过滤，按照中药输液剂的操作要求制得复方黄芪—香菇多糖输液剂；(6)或在步骤(1)溶解液中加入黄芪提取物1份，加入黄芪提取物10-100倍重量的淀粉，以水或60-90％的乙醇水溶液为粘合剂，按胶囊剂的操作要求制得复方黄芪—香菇多糖胶囊。
所述的黄芪提取物是从中药黄芪中按常规方法提取纯化后得到的水溶性成分，其中黄芪多糖的含量在30％-100％(W/W)；所述的黄芪提取物或者是从中药黄芪中按常规方法提取纯化后得到的脂溶性成分，其中黄芪甲苷的含量在10％-100％(W/W)；所述的黄芪提取物或者是将从中药黄芪中按常规方法分别提取纯化后得到的水溶性成分和脂溶性成分再进行混合后得到的混合物，其重量比为1∶0.1-5；步骤(3)、(4)中所述的调节pH至6-10的酸液为盐酸溶液或柠檬酸水溶液。
本发明所述的由黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂在肿瘤的预防和治疗、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性肾炎及肾功能衰竭、慢性支气管炎、体弱多病者的扶正等方面的应用。
本发明的香菇多糖是指从香菇子实体[Lentinus edodes(Berk)Sing]提取、精制的，符合国家药品质量标准WS-320(X-263)-94的注射用香菇多糖。
本发明针对现有技术，提供的复方制剂能使黄芪中增强免疫作用的有效提取物与香菇多糖组合后能发挥更强大的协同的免疫增强作用；同时通过与香菇多糖的配伍，还能更好发挥黄芪中有效提取物抗病毒和抗炎等作用。
在研究黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂的过程中发现，当黄芪的水溶性提取物中黄芪多糖的含量低于30％时，该黄芪提取物与香菇多糖所组成的复方制剂如水针剂在存放过程中会出现澄明度不合格的现象，所以本发明的特征之一是从黄芪中按常规方法提取纯化后得到的水溶性成分中黄芪多糖的含量应在30％-100％(W/W)。
在研究黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂的过程中同样发现，当黄芪的脂溶性提取物中黄芪甲苷的含量低于10％时，该黄芪提取物与香菇多糖所组成的复方制剂如水针剂在存放过程中会出现澄明度不合格的现象，所以本发明的特征之一是从黄芪中按常规方法提取纯化后得到的脂溶性成分中黄芪甲苷的含量应在10％-100％(W/W)。
本发明的优点是适于临床应用，同时具有在肿瘤的预防和治疗、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性肾炎及肾功能衰竭、慢性支气管炎、体弱多病者的扶正等方面能起到协同的治疗作用，使用方便。
具体实施例方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1取注射用香菇多糖2克，放入容器中用0.6mol/L的氢氧化钠水溶液700ml室温溶解，溶解后加入普通20％甘露醇注射液400ml，搅匀，加入含黄芪多糖50％的黄芪提取物4克，溶解后用稀酸溶液调pH为7-9，过滤，减压浓缩至1000ml，无菌过滤，消毒，测含量，分装，1ml/瓶，冷却干燥，封口，得复方黄芪—香菇多糖冻干粉针。
实施例2取注射用香菇多糖1克，放入容器中用0.2mol/L的氢氧化钠水溶液700ml室温溶解，溶解完全后，加入含黄芪甲苷20％的黄芪提取物0.5克，溶解后用稀酸溶液调pH为7-9，过滤，加注射用水至1200ml，无菌过滤，消毒，分灌于适当容器中，封口，即得复方香菇多糖水针。
实施例3取注射用香菇多糖0.1克，放入容器中用1mol/L的氢氧化钠水溶液923ml室温溶解，溶解完全后，加入含黄芪甲苷30％的黄芪提取物0.2克及含黄芪多糖70％的黄芪提取物0.3克，溶解后加入1mol/L盐酸溶液923ml，再用相同浓度的氢氧化钠溶液或盐酸溶液调pH至7-9，过滤，加注射用水至6000ml，无菌过滤，灭菌，分灌于适当容器中，即得复方黄芪—香菇多糖输液。
实施例4取香菇多糖10克，放入容器中用加入含黄芪甲苷10％的黄芪提取物60克及含黄芪多糖30％的黄芪提取物30克，加入淀粉3000克，混合均匀后，以75％的乙醇水溶液为粘合剂，制成软材。放入颗粒机中，制成颗粒。干燥后整粒，装胶囊即得复方黄芪—香菇多糖胶囊。
本发明进行了系列药理实验来验证黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂的药效。
1.肿瘤抑制试验以含黄芪甲苷0.15mg/ml及含香菇多糖1mg/ml的复方水针剂为实验药品。4～5周龄昆明种小鼠，体重在20±5g，雌雄兼用，随机分组，每组平均10-12只，各组均在相同条件下饲养，自由饮水。实验设阴性对照组小鼠接种相应的瘤株后不做处理；阳性对照组小鼠接种相应的瘤株后第二天腹腔内(ip)给予市售黄芪注射液，1ml/只，每天一次，连用二周；实验组小鼠接种相应的瘤株后第二天腹腔内(ip)给予含黄芪甲苷1mg/ml及含香菇多糖1mg/ml的复方水针，1ml/只，每天一次，连用二周。将S180、H22腹水型瘤株经昆明小鼠ip传代，用注射器从腹腔抽取后，生理盐水稀释成适当浓度的细胞悬液，细胞量为5×106/0.2ml，小鼠ip注入，然后根据腹水消长程度来判定其抑瘤作用。最后结果表明该复方水针剂对小鼠移植瘤有显著的抑制作用，能显著延长荷瘤小鼠的生存时间，并且实验组荷瘤小鼠的生存时间明显长于阳性对照组。
复方黄芪香菇多糖水针剂与黄芪注射液对荷瘤小鼠的生存时间影响对比表
2.淋巴细胞增殖试验以含黄芪甲苷0.15mg/ml、黄芪多糖1.5mg/ml及香菇多糖1.5mg/ml的复方黄芪香菇多糖水针剂为实验药品，以市售黄芪注射液为对照。无菌采鸡心脏外周血，肝素抗凝。Percoll细胞分层液分离淋巴细胞。制备好的淋巴细胞加入到96孔细胞培养板，50μL/孔，然后加入待测药液(水针)50μL，以刀豆素A、细菌脂多糖分别作为T、B淋巴细胞丝裂原，浓度分别为45、22.5μg/ml。每个处理3个复孔，置40℃、5％ CO2条件下培养60h后，Brdu-ELISA试剂盒(Bioehringer Mannheim公司)标记、显色，用318～MC酶标仪测定OD450nm值。数据用SPSS软件进行统计。结果如下
结果表明该复方水针剂对刀豆素A诱导的鸡T淋巴细胞增殖及对细菌脂多糖诱导的鸡B淋巴细胞增殖均有明显的促进作用。
权利要求
1.一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂，其特征在于黄芪提取物与香菇多糖的重量比为1∶0.1-5，适于临床应用的药物剂型包括片剂、胶囊剂、粉针剂、冻干粉针剂、水针剂、输液剂。
2.一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂，其特征在于，将香菇多糖的免疫增强作用与抗病毒和抗炎的黄芪提取物联合使用，其制备方法为(1)按重量计称取香菇多糖0.1-5份，放入容器中用0.3-1mol/L的氢氧化钠水溶液室温溶解；(2)在步骤(1)溶解液中加入香菇多糖100-300倍重量的10-30％甘露醇注射液，搅匀；(3)在步骤(2)溶解液中加入黄芪提取物1份，然后用酸液调pH至6-10，过滤，按照中药冻干粉针剂的操作要求制得复方黄芪—香菇多糖冻干粉针；(4)或在步骤(1)溶解液中加入黄芪提取物1份，搅拌溶解，用酸液调pH至6-10，过滤，按照中药水针剂的操作要求制得复方黄芪—香菇多糖水针剂；(5)或在步骤(1)溶解液中加入黄芪提取物1份，溶解后加入等当量盐酸溶液，再用相同浓度的氢氧化钠溶液或盐酸溶液调pH至6-10，过滤，按照中药输液剂的操作要求制得复方黄芪—香菇多糖输液剂；(6)或在步骤(1)溶解液中加入黄芪提取物1份，加入黄芪提取物10-100倍重量的淀粉，以水或60-90％的乙醇水溶液为粘合剂，按胶囊剂的操作要求制得复方黄芪—香菇多糖胶囊。
3.根据权利要求1或2所述的一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂及制备方法，其特征在于，所述的黄芪提取物是从中药黄芪中按常规方法提取纯化后得到的水溶性成分，其中黄芪多糖的含量在30％-100％(W/W)。
4.根据权利要求1或2所述的一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂及制备方法，其特征在于，所述的黄芪提取物或者是从中药黄芪中按常规方法提取纯化后得到的脂溶性成分，其中黄芪甲苷的含量在10％-100％(W/W)。
5.根据权利要求1或2所述的一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂及制备方法，其特征在于，所述的黄芪提取物或者是将从中药黄芪中按常规方法分别提取纯化后得到的水溶性成分和脂溶性成分再进行混合后得到的混合物，其重量比为1∶0.1-5。
6.根据权利要求2所述的复方香菇多糖制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)、(4)中所述的调节pH至6-10的酸液为盐酸溶液或柠檬酸水溶液。
7.根据权利要求1或2所述的一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂，其特征在于，所述的黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂可用于肿瘤的预防和治疗、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性肾炎及肾功能衰竭、慢性支气管炎、体弱多病者的扶正等方面的治疗应用。
全文摘要
本发明涉及一种黄芪提取物与香菇多糖组成的复方制剂及制备方法，其特征在于，按重量计称取香菇多糖，用氢氧化钠水溶液室温溶解，溶解液中加入甘露醇注射液，搅匀；再加入黄芪提取物份，然后用酸液调pH，无菌过滤，制得复方黄芪与香菇多糖冻干粉针、水针剂、输液剂和胶囊。本发明的优点是适于临床应用，同时具有在肿瘤的预防和治疗、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性肾炎及肾功能衰竭、慢性支气管炎、体弱多病者的扶正等方面能起到协同的治疗作用，使用方便。
文档编号A61P37/04GK1850149SQ200610024289
公开日2006年10月25日 申请日期2006年3月2日 优先权日2006年3月2日
发明者金幸 , 汤磊, 陈林祥, 朱益峰 申请人:上海慈瑞医药科技有限公司