专利名称：盐酸吉西他滨稳定的过饱和溶液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种药物的过饱和溶液及其制备方法，具体涉及含有盐酸吉西他滨的过饱和溶液及其制备方法。
背景技术：
吉西他滨，英文名Gemcitabine，其化学名为2’-脱氧-2’，2’-二氟腺苷(β-异构体)，分子式为C9H11F2N3O4，分子量为299.66。
吉西他滨是美国Lilly制药公司生产的抗肿瘤药物，1996年美国FDA批准作为治疗胰腺癌的一线药物，1998年批准作为治疗非小细胞肺癌药物。我国于1999年批准进口，国产仿制产品在2000年6月15日批准进行临床试验。
目前国内外生产的吉西他滨均为盐酸吉西他滨冻干粉针剂。其原因是盐酸吉西他滨溶液型注射剂不稳定，不能较长时间储存。据报道盐酸吉西他滨在0.1N盐酸溶液中40℃条件下放置4周分解至86％，在0.1N氢氧化钠的碱性条件下分解至72％。
药品的注射制剂有溶液型和干粉剂，不稳定的药物采用干粉剂，使药物能较长时间保存。干粉剂与水溶液比较1)工艺复杂，生产成本高；2)需注入溶液溶解，使用不方便，增加了污染的机会；3)盐酸吉西他滨水性溶液pH2.5～3.0，室温放置稳定性较差；4)盐酸吉西他滨在pH＞4时，溶解度降低，低于23℃时仅为15g/L(g/L是指每升体积的溶液含吉西他滨的质量，以下同)，不能满足制备较高浓度注射液的要求。因此，有人为了解决盐酸吉西他滨溶液的稳定性和提高其在pH＞4环境中的溶解度，进行了大量的研究。
CN00133414X公布了吉西他滨溶液制剂，其主要内容是吉西他滨碱和溶解吉西他滨碱的溶剂。生产工艺将吉西他滨碱用水、乙醇、丙二醇等溶解。
CN1650883A公布了盐酸吉西他滨溶液型注射剂，该注射剂含有碱性物质或弱酸盐作为稳定剂。该文献用盐酸吉西他滨作原料，用注射用水溶解，加入稳定剂、等渗剂，调溶液pH值在3.6～7.5，得到稳定的溶液注射剂，其稳定性符合要求。将盐酸吉西他滨配制成溶液注射剂与吉西他滨碱配制成溶液注射剂比较，不需要将盐酸吉西他滨原料药转变为吉西他滨碱基，减化生产工艺和减少成本。该文献认为解决了国内外公认的盐酸吉西他滨溶液注射剂在偏碱性条件下不稳定的问题。
WO2005014010公布了一种含有环糊精作为增溶剂的盐酸吉西他滨药用组合物。该组合物在pH4～9的条件下盐酸吉西他滨的溶解度可达到40g/L，室温放置两年是稳定的。
按照CN1650883A制备注射剂时，在23℃、pH4～7条件下，盐酸吉西他滨的溶解度仅15g/L，不易制备高浓度的注射剂，且制得的溶液在60℃条件下放置10天，降解物明显增加。按照WO2005014010虽可使盐酸吉西他滨的溶解度达到40g/L，但需加入环糊精作为增溶剂；大量的研究证明环糊精有一定的肾毒性，因此制剂中尽量避免使用环糊精。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种盐酸吉西他滨过饱和溶液及其制备方法。
本发明的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是在pH4～8的条件下，通过加热使定量的盐酸吉西他滨完全溶于溶媒，得到浓度为超过盐酸吉西他滨在23℃时的饱和浓度(浓度以吉西他滨计，以下同)至45g/L的盐酸吉西他滨过饱和溶液。
上述的盐酸吉西他滨过饱和溶液需要趁热过滤除菌，降温前按单个包装剂量直接灌装至最终的容器密封；得到的产品降温后无盐酸吉西他滨固体析出。据文献报道，在23℃、pH4～8条件下，盐酸吉西他滨的溶解度仅为15g/L。本发明的盐酸吉西他滨过饱和溶液特点是在23℃时浓度超过15g/L，可达45g/L。
优选的，盐酸吉西他滨过饱和溶液的浓度为20～40g/L。
优选的，上述溶媒为水或生物相溶性的等渗水溶液。pH值优选5～7，最优选pH6。
优选的，上述盐酸吉西他滨溶解加热温度为30～90℃，更优选45～80℃。
优选的，盐酸吉西他滨过饱和溶液中充入氮气和/或加入抗氧剂，可进一步抑制盐酸吉西他滨的降解，其中抗氧剂选自药学上可接受的物质。
上述抗氧剂选自但不限于亚硫酸盐、抗坏血酸及衍生物、硫代化物、氨基酸类、酚类、胺类或螯合剂。其中亚硫酸盐类选自亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、偏重亚硫酸钠或硫代硫酸钠；抗坏血酸衍生物选自抗坏血酸或D-异坏血酸；硫代化物选自硫代甘油、2-巯基乙醇、5-硫代-D-葡萄糖或巯基乙酸中的一种或多种；氨基酸类选自L-半胱氨酸或其盐、L-蛋氨酸、L-精氨酸、L-色氨酸中的一种或多种；胺类选自吡哆胺盐酸盐；螯合剂选自乙二胺四乙酸二钠或乙二胺四乙酸钙钠。
上述抗氧剂的加量为0.01％～0.5％W/V，质量体积比。
本发明的盐酸吉西他滨过饱和溶液的制备方法，是在pH4～8、加热温度30～90℃，将定量的盐酸吉西他滨完全溶于水或生物相溶性的等渗水溶液，形成过饱和溶液，吉西他滨的浓度为15～45g/L，趁热过滤除菌，降温前按单个包装剂量直接灌装至最终的容器密封。这样就不会析出结晶。
为进一步提高盐酸吉西他滨过饱和溶液的稳定性，可在装入最终容器时充入氮气和/或加入抗氧剂。抗氧剂的选择和用量如前所述。
上述的溶解温度不宜太高，如果温度达100℃，保温时间超过5小时，降解物质增加明显。溶液的pH亦不可太高，当将pH调至8以上，100℃保温时间超过4小时，降解物质亦有明显增加。
本领域技术人员所熟知的，为更好的控制溶液的pH，可加入缓冲剂，如碳酸盐、磷酸盐、乳酸盐、醋酸盐、枸橼酸盐、马来酸盐等。pH范围不宜超过8，不低于4。优选pH5～7，最优选pH值为6。缓冲剂可单独使用一种或组合使用。
另外，本领域技术人员所熟知的，溶液中可加入等渗剂，如氯化钠、葡萄糖、甘露醇，含生理耐受量的钾、钙、镁溶液。等渗剂可单独使用一种或组合使用。
本发明提供的盐酸吉西他滨过饱和溶液具有稳定、高浓度的特点，可用于制备静脉给药的药物制剂。
盐酸吉西他滨过饱和溶液的稳定性研究一是观察过饱和溶液的物理稳定性(析晶情况)，一是采用高效液相色谱仪测定盐酸吉西他滨的含量和其降解物质。
稳定性试验中，含量和有关物质测定方法为高效液相色谱仪测定吉西他滨的含量。Waters色谱仪，C18柱，测定波长268nm，流动相醋酸铵缓冲液-甲醇＝90∶10。
以下是本发明注射剂稳定性试验数据，用以说明本发明的有益效果。
表1用本发明盐酸吉西他滨过饱和溶液与现有技术制备制备样品物理稳定性对比
表2用本发明盐酸吉西他滨过饱和溶液与现有技术制备样品化学稳定性对比
盐酸吉西他滨水溶液pH约2.7，100℃2h降解20％以上，化学稳定性较差；正如专利CN1650883AH和专利WO2005014010所描述，在pH4～8之间，盐酸吉西他滨水溶液的化学稳定性较好，100℃2h降解3％左右，但是，在23℃左右、pH 4～8时，盐酸吉西他滨在水中的溶解度最高15g/L，达不到制备高浓度注射液的要求。而本发明的盐酸吉西他滨过饱和溶液令人惊喜的是浓度可达到45g/L，且常温下长期放置无固体析出。将盐酸吉西他滨溶液加热到至少30℃以上时，在pH4～8的条件下可制得吉西他滨浓度15～45g/L的过饱和溶液，该溶液趁热除菌过滤直接分装于单个包装剂量的最终容器中密封，获得的过饱和溶液不会析出盐酸吉西他滨固体，当加入抗氧剂时，其化学稳定性远好于按照CN1650883A制备的盐酸吉西他滨注射剂。
本发明首次将盐酸吉西他滨制成一定浓度的、稳定的过饱和溶液，加入抗氧剂可进一步增加溶液的稳定性。该过饱和溶液可用于制备盐酸吉西他滨的溶液型注射剂。该过饱和溶液含有抗氧化剂作为稳定剂，采用加热溶解的方法制备成含盐酸吉西他滨的过饱和溶液。该过饱和溶液可制备静脉途径给药的药物制剂。
具体实施例方式
以下通过实施例进一步说明本发明，这些实例不应作为本发明的限制。
实施例1取盐酸吉西他滨227.7mg(含吉西他滨200mg)，用6ml注射用水溶解，加入0.09g氯化钠，再加入0.5N氢氧化钠，调节pH为4.5，上述溶液加热至30～40℃，使析出的结晶溶解完全，用注射用水定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于10ml的安瓿中，每支10ml，封口。
实施例2取盐酸吉西他滨341.6mg(含吉西他滨300mg)，用6ml注射用水溶解，加入0.09g氯化钠，再加入0.5N氢氧化钠，调节pH为6.0，上述溶液加热至50～60℃，使析出的结晶溶解完全，用注射用水定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于安瓿中，充氮气，封口。
实施例3取盐酸吉西他滨455mg(含吉西他滨400mg)，用6ml注射用水溶解，加入0.09g氯化钠，再加入0.5N氢氧化钠，调节pH为5.5，上述溶液加热至60～80℃，使析出的结晶溶解完全，用注射用水稀释至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于5ml的安瓿中，每支5ml，充氮气，封口。
实施例4取盐酸吉西他滨512mg(含吉西他滨450mg)，用6ml注射用水溶解，加入10mg L-精氨酸和0.09g氯化钠，然后加入0.5N氢氧化钠，调节pH为8.0，上述溶液加热至45～50℃，使析出的结晶溶解完全，用注射用水定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于安瓿中，封口。
实施例5取盐酸吉西他滨455mg(含吉西他滨400mg)，用6ml生理盐水溶解，加入10mg L-精氨酸，然后加入0.5N氢氧化钠，调节pH为6.0，上述溶液加热至45～50℃，使析出的结晶溶解完全，用生理盐水定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于5ml的西林瓶中，每支5ml，充氮气，封口。
实施例6取盐酸吉西他滨455mg(含吉西他滨400mg)，用6ml注射用水溶解，加入15mg亚硫酸钠和0.09g氯化钠，再加入0.5N氢氧化钠，调节pH为7.0，上述溶液加热至45～50℃，使析出的结晶溶解完全，用注射用水定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于安瓿中，充氮气，封口。
实施例7取盐酸吉西他滨455mg(含吉西他滨400mg)，用6ml注射用水溶解，加入5mg巯基乙酸和0.09g氯化钠，然后加入0.5N氢氧化钠，调节pH为6.0，上述溶液加热至45～50℃，使析出的结晶溶解完全，用注射用水定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于10ml的西林瓶中，每支5ml，封口。
实施例8取盐酸吉西他滨455mg(含吉西他滨400mg)，用6ml生理盐水溶解，加入5mg L-精氨酸、20mg L-蛋氨酸和0.09g氯化钠，然后加入0.5N氢氧化钠，调节pH为4.5，生理盐水定容至10ml。上述溶液加热至80～90℃，使析出的结晶溶解完全，然后趁热除菌过滤、分装于安瓿中，封口。
实施例9取盐酸吉西他滨455mg(含吉西他滨400mg)、乙二胺四乙酸二钠0.9mg，用50～60℃6ml生理盐水溶解，加入10mgL-精氨酸，然后加入1N氢氧化钠0.7ml，调节pH为7.0，用50～60℃生理盐水定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于安瓿中，封口。
实施例10取盐酸吉西他滨512mg(含吉西他滨450mg)，用6ml磷酸盐缓冲液(PH6.0)溶解，加入20mg抗坏血酸和0.09g氯化钠，加入0.5N氢氧化钠，调节pH为5.0，上述溶液加热至45～50℃，使析出的结晶溶解完全，用磷酸盐缓冲液定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于安瓿中，充氮气，封口。
实施例11取盐酸吉西他滨455mg(含吉西他滨400mg)，用6ml磷酸盐缓冲液(PH6.0)溶解，加入50mg盐酸吡哆胺和0.09g氯化钠，再加入0.5N氢氧化钠，调节pH为6.0，上述溶液加热至45～50℃，使析出的结晶溶解完全，用磷酸盐缓冲液定容至10ml。然后趁热除菌过滤、分装于安瓿中，封口。
以上实施例制备的产品均可作为静脉给药的药物应用。
表3盐酸吉西他滨过饱和溶液的稳定性试验结果
权利要求
1.盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是在pH4～8的条件下，通过加热使定量的盐酸吉西他滨完全溶于溶媒，得到浓度为超过盐酸吉西他滨在23℃时的饱和浓度至45g/L的盐酸吉西他滨过饱和溶液。
2.如权利要求1中所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是，所述过饱和浓度是20～40g/L。
3.如权利要求1中所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是，所述溶媒为水或生物相溶性的等渗水溶液。
4.如权利要求1中所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是，所述pH值5～7，优选pH 6。
5.如权利要求1中所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是，所述的加热温度是30～90℃，优选45～80℃。
6.如权利要求1中所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是，所述盐酸吉西他滨过饱和溶液中充入氮气和/或加入抗氧剂。
7.如权利要求6中所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是，所述抗氧剂选自亚硫酸盐、抗坏血酸及衍生物、硫代化物、氨基酸类、酚类、胺类或螯合剂。
8.如权利要求7中所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是，所述亚硫酸盐选自亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、偏重亚硫酸钠或硫代硫酸钠；所述抗坏血酸衍生物选自抗坏血酸或D-异坏血酸；所述硫代化物选自硫代甘油、2-巯基乙醇、5-硫代-D-葡萄糖、巯基乙酸中的一种或多种。
9.如权利要求7中所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液，其特征是，所述氨基酸类选自L-半胱氨酸或其盐、L-蛋氨酸、L-精氨酸、L-色氨酸中的一种或多种；所述胺类选自吡哆胺盐酸盐；所述的螯合剂选自乙二胺四乙酸二钠或乙二胺四乙酸钙钠。
10.一种盐酸吉西他滨过饱和溶液的制备方法，在pH4～8、加热温度在30～90℃条件下，将定量的盐酸吉西他滨完全溶于水或生物相溶性的等渗水溶液，形成过饱和溶液，吉西他滨的浓度为15～45g/L，趁热过滤除菌，降温前按单个包装剂量直接灌装至最终的容器密封。
11.权利要求1～9任一项所述的盐酸吉西他滨过饱和溶液的应用，用于制备静脉途径给药的制剂。
全文摘要
本发明公开了一种盐酸吉西他滨稳定的过饱和溶液及其制备方法。在pH 4～8的条件下，加热使定量的盐酸吉西他滨完全溶于溶媒，得到浓度为超过23℃时的饱和浓度至45g/L的盐酸吉西他滨过饱和溶液，并按单个包装剂量趁热灌装于最终的容器中。该溶液室温长期放置不会析出，如充氮气和/或加入抗氧剂可进一步增加其化学稳定性。该溶液可制备盐酸吉西他滨的静脉注射用药物制剂。
文档编号A61K31/7068GK101088492SQ20061004467
公开日2007年12月19日 申请日期2006年6月12日 优先权日2006年6月12日
发明者杨清敏, 刘宝明, 张桂婷, 韩作宏, 张明会, 王晶翼 申请人:齐鲁制药(海南)有限公司