专利名称：一种病毒灭活袋装冻干血浆及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物制品领域，具体说是涉及一种经病毒灭活的袋装冻干血浆。
背景技术：
血浆对于失血性休克的扩容、烧伤的抢救以及由于输用库存血或代用品导致 的渗血等都是主要的治疗措施。
目前，国内外临床上应用的血浆制品有io余种，血浆分为新鲜血浆和普通
血浆两种，新鲜血浆又分为新鲜冰冻血浆(又称FFP)和新鲜液体血浆；普通血
浆分为普通冰冻血浆、保存的液体血浆。新鲜冰冻血浆和普通冰冻血桨都是将抗
凝全血在4。C条件下离心后分离，再经一3(TC冰箱速冻而得，需保存在一20。C冰 柜或低温冰箱中，且保存体积较大。新鲜液体血桨是将保存期内的抗凝全血在4 。C条件下经离心后分离得到，在fC保存条件下，24h之内必须输注，保存时间 短。
相比之下，无需低温保存设备的冻干血浆保存更容易，但常用的冻千血浆主 要是玻璃瓶装冻干血浆，由大量混合血浆制备而成，传播乙型肝炎病毒、丙型肝 炎病毒和艾滋病毒的风险性较高。另外玻璃瓶易碎，不适于空投和颠簸运输，为 防止玻璃瓶破裂，有的玻璃瓶外面套上一个金属罐，但这种包装的冻干血浆分量 重，运输携带也不方便。如果选用目前临床输血采用的PVC血袋进行冻干血浆， 则存在不易冻干等问题，无法达到生物制品规程的要求。
发明内容
本发明提供了一种经病毒灭活后制备的袋装冻干血浆，其制备方法是将新鲜
分离的血浆置于特制的冻干血浆袋(已获得国家实用新型专利授权，专利号
ZL2005 2 0001469.3)中经病毒灭活后冷冻干燥而得。
本发明是通过以下技术方案实现的
(1) 血浆的分离
1) 新鲜血浆将采集时间在6h以内的抗凝全血4。C下离心，分离得到的血浆；
2) 新鲜冰冻血浆将新鲜血浆在一2(TC下冻存，冷冻状态一直持续到使用之前， 有效期自采血日起l年；
3) 普通血浆来源于保存期内，或过期不满5天的抗凝全血分离得到；
4) 普通冷冻血浆来源于保存期满1年的新鲜冷冻血桨，或普通血浆在一20'C 以下冻存，冷冻状态一直持续到使用之前，有效期自采血日起为5年。
(2) 血浆病毒灭活目前用于血浆病毒灭活的方法较多，常用的有有机溶剂/ 清洁剂法、光化学法、加热法、紫外线(UVA) /光敏剂法等，各种方法对
血浆病毒的灭活效果不一，但选择合适的条件，都能达到较好的灭活效果。
1) 有机溶剂/清洁剂法(S/D法)将分离得到的同种血型血浆置于容器中，加入
有机溶剂磷酸三丁酯(TNBP)和TritonX-lOO处理后，植物油萃取TOBP， 固相层析法去除TritonX-lOO，除菌后分装入特制的冻干血浆袋中；
2) 光化学法将分离得到的单袋血浆置于特制的冻干血浆袋中，加入光敏剂亚 甲蓝，病毒灭活装置处理后，去除亚甲蓝；
3) 加热分离得到的同种血型血浆置于容器中，加入保护剂后边搅拌边加热， 加热处理后用超滤等方法除去保护剂，除菌后分装入特制的冻干血浆袋中；
4) 紫外线(UVA) /光敏物法将分离得到的血浆置于特制的冻干血浆袋中，加 入光敏剂补骨脂类化合物S-59，然后用紫外线(UVA)进行照射处理，灭活 血浆中的病毒。
(3) 血浆预冻
经病毒灭活后的血浆置于特制的冻干血浆袋中，放入一40'C以下的低温冰箱 或冰柜中预冻，使其成为固体。
(4) 病毒灭活冻干血浆的制备
预冻后的血浆置于冻干机中，剪开蒸发管，在阱底温度一56"C，真空度10Pa 以下，经48h真空升华去水制成淡黄色疏松体，从冻干机中取出后迅速封口。
本发明中应用的特制冻干血浆袋是经中华人民共和国国家知识产权局授权 的实用新型(专利号ZL 2005 2 0001469.3)，结构简单、重量轻、不易破碎、 便于运输。由于该冻干血浆袋在袋身上设置有多根蒸发管，使袋身形成贯通型多 通路，可使血浆在干燥时增加水分蒸发渠道，缩短水分蒸发路径和时间，从而达 到冻干血浆的目的。
本发明的病毒灭活冻干血浆直接冻存于特制冻干血浆袋中，重量轻，便于携 带和运输，耐摔、耐压，避免了空投和颠簸运输造成的玻璃瓶易碎问题，无需低 温保存设备，保存容易，且复溶速度快， 一旦救治需要，可用灭菌注射用水迅速 溶解后立即使用，是一种快速、有效的抗休克药物。病毒灭活袋装冻干血桨特别 适用于因突发情况下出现的大量伤员的及时救治，发挥扩容、抗休克、稳定血压 等作用，可避免因大量失血引起的休克和循环衰竭等的发生，为后续治疗争取时 间。亦可用于烧伤的救治，也可用于交通事故、安全生产事故及其它突发伤毁事 件引起休克的救治，具有巨大的社会经济价值，应用前景广阔。
图1专用冻干血浆袋及外观呈淡黄色疏松体的病毒灭活袋装冻干血浆 图2复溶后的血浆呈黄色混浊液体，无异物
具体实施例方式
实施例1新鲜血浆的分离
新鲜釆集的200ml抗凝全血，4。C条件下，3800转离心15min，小心分离得 到100ml血浆。
实施例2普通血浆的分离
全血采集后超过6h，保存期内的抗凝全血200ml， 4。C条件下，3800转离心 15min，小心分离得到105ml血浆。
实施例3血浆病毒灭活
血浆病毒灭活的方法较多，现以亚甲蓝/光化学法为例，说明血浆病毒的灭 活方法。在洁净工作台中取0.9%的静脉注射用生理盐水25.7ml，加入10mg/ml 的亚甲蓝注射液(江苏济川制药有限公司产品)lml，混匀得到lmmol/L的亚甲
蓝工作液。取分离获得的lOOml血浆分装入特制的冻干血桨袋(国家实用新型专 利授权，专利号ZL 2005 2 0001469.3)中，加入亚甲蓝工作液10(^1使其终浓 度为lpmol/L，热合封口后用波长为630nm的光源在光强度不低于40 000Lux条 件下照射处理30min以灭活血浆中的病毒。
实施例4病毒灭活袋装冻干血浆的制备
将经过病毒灭活的装于特制冻干血浆袋中的100ml血浆放入一4(TC以下的 低温冰箱或冰柜，预冻4h，待血浆冻成固体状态后取出，放入LGJ-10型冷冻干 燥机，剪丌封口，在阱底温度一56°C，真空度10Pa以下，冻干48h，得到淡黄 色疏松体，取出后快速封口，即为病毒灭活袋装冻干血桨。
实施例5病毒灭活袋装冻干血浆水分含量测定
将冻干的病毒灭活血浆按照《生物制品规程》(1995版)中的费氏测定方法 进行水分检测，水分含量在2.2%-2.5%间，符合《生物制品规程》(1995版)冻 干血浆水分《3%的要求。
实施例6病毒灭活袋装冻干血浆的复溶及凝血因子活性检测
将各100ml灭菌注射用水分别加入到室温保存30、 60、 90及180天的病毒 灭活冻干血浆中，迅速溶解得到的溶液为淡黄色混浊液，分别测定复溶血浆中的 凝血因子活性(测定方法参见国家《生物制品规程》，2000版)，结果显示(表l)， 随室温存放时间的延长，病毒灭活冻干血浆中凝血因子活性有所下降，但其活性 均保持在80%以上，符合《生物制品规程》(1995版)中对冻干血浆的要求。
储存条件
II
凝血因子活性(％)
V
V1D
IX
XT
新鲜冷冻血浆100100100100100
冻干血浆(0d)10010010097,8訓
室温30d98.898.510091.495.2
室温60d92.594.298.883.592.7
室温卯d91.7肌593.995.991.2
室温180d85.983.4卯.290.886.权利要求
1、一种病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于所述的病毒灭活袋装冻干血浆是将分离的血浆经病毒灭活后，于专用的冻干血浆袋中进行冻干而得，其制备方法包括以下步骤(1)血浆的分离；(2)对分离出的血浆进行病毒灭活；(3)经病毒灭活后的血浆置于冻干专用血浆袋中于-40℃以下预冻；(4)预冻后的血浆置于冷冻干燥机中冻干；(5)冻干后快速封口。
2、 根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于冻干所用的血浆 袋为专用血浆袋，袋身上设置有蒸发管，与袋身形成贯通型多通路，可使血 浆在干燥时增加水分蒸发渠道，縮短水分蒸发路径和时间，从而达到冻干血 浆的目的。
3、 根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于所用的血浆是新 鲜血浆、新鲜冷冻血桨、普通血浆或普通冷冻血浆。 .
4、 根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于所用的血浆是单 袋血浆或同种血型的混合血浆。
5、 根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于对血浆进行病毒 灭活时的方法是有机溶剂/清洁剂法、光化学法、加热法或照射法。
6、 根据权利要求5所述的病毒灭活方法，其特征在于所述的光化学法所用的光 敏剂为亚甲蓝。
7、 根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于冻干条件为阱底 温度一56。C，真空度10Pa以下冻干48h。
8、 病毒灭活袋装冻干血浆的应用，其特征在于可作为一种抗休克药物用于创伤 导致的失血性休克的扩容治疗，交通事故、安全生产事故及其它突发伤毁事 件引起休克的院前处置。
9、 病毒灭活袋装冻干血浆的应用，其特征在于作为一种药物用于烧伤的治疗。
10、 病毒灭活袋装冻干血浆的应用，其特征在于作为一种药物用于由于输用库 存血或代用品导致渗血的治疗。
全文摘要
本发明涉及生物制品领域，具体说是涉及一种经病毒灭活的袋装冻干血浆。本发明的袋装冻干血浆与传统的瓶装冻干血浆相比，特点是重量轻，便于携带和运输，且不易碎、耐压，无需低温保存，是一种快速、有效的抗休克药物。特别适用于因突发事件出现的大量伤员的及时救治，发挥扩容、抗休克、稳定血压等作用，避免因大量失血引起的休克和循环衰竭等的发生，为后续治疗争取时间。亦可用于烧伤的抢救，也可用于交通事故、安全生产事故及其它突发伤毁事件引起休克的救治，具有巨大的社会经济价值，应用前景广阔。
文档编号A61K35/16GK101190234SQ20061014549
公开日2008年6月4日 申请日期2006年11月20日 优先权日2006年11月20日
发明者吕丽萍, 周锡鹏, 张艳宇, 许金波, 舫 闫, 平 马 申请人:中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所