新型盐Ⅰ的制作方法

专利名称：：新型盐Ⅰ的制作方法新型盐I:汰术领域本发明涉及哌啶衍生物的盐、包含所述盐的药物组合物以及所述盐在治疗中的用途。背景4支术趋化因子受体l(CCR1)在受以下疾病影响的组织中高度表达不同的自身免疫性疾病、炎性疾病、增生性疾病、过度增生性疾病和免疫介导的疾病，例如哮喘、慢性阻塞性肺病、多发性硬化和类风湿性关节炎。因此，利用本发明的盐，例如通过细胞活化和迁移来抑制CCR1介导的事件，这被期望在治疗这些病症时是有效的。在制备药物制剂时，重要的是，活性化合物的形式使其可方便地处理和加工，以便得到商业可行的制备工艺。就此而言，活性化合物的化学稳定性和物理稳定性是重要的因素。活性化合物和包含其的制剂必须能有效地贮存相当长的时段，而没有显示活性化合物的理化性质(例如化学成分、密度、吸湿性和溶解性)的显著变化。此外，如果要将活性化合物加入例如通过干粉吸入器(如Turbuhaler⑧装置)的肺部给药用制剂，则期望活性化合物能容易地微粉化以得到具有良好流动性质并且包括高度细微结晶颗粒级分(即质量中值空气动力学直径(massmedianaerodynamicdiameter)小于10|iim(樣i米)的活'f生4匕合物茅贞4立的纟及分)的粉末。这种级分能很深地进入肺部，从而加快和提高了活性化合物的吸收。国际专利申请公开文本WO03/051839—4殳性地4皮露了具有CCR1拮抗剂活性的某些哌啶基衍生物，具体为化合物4-({(25)-3-[2-(乙酰氨基)-5-羟基苯氧基]-2-羟基-2-曱基丙基}氨基)-1-(4-氯苄基)哌啶及其可药用盐或溶剂化物。在此申请中具体披露的这种化合物的唯一盐为二-三氟乙酸盐，这种盐由于在性质上为无定形的，因而不适用于肺部给药的干粉制剂。现已令人惊讶地发现，可制备具有良好理化性质的化合物4-({(25>3-[2-(乙酰氨基)-5-羟基苯氧基]-2-羟基-2-曱基丙基}氨基)-1-(4-氯千基)哌啶的盐，其能配制在用于肺部给药的干粉制剂中。4-({(25>3-[2-(乙酰氨基)-5-羟基苯氧基]-2-羟基-2-曱基丙基}氨基)-1-(4-氯千基)哌啶的结构如下所示OH
发明内容因而，本发明提供4-({(25>3-[2-(乙酰氨基)-5-羟基苯氧基]-2-羟基-2-甲基丙基}氨基)-1-(4-氯苄基)哌啶的苯曱酸盐(在下文中称为^-{2-[((26>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐，"所述苯曱酸盐")。本发明也提供所述苯曱酸盐的溶剂化物(包括水合物)。然而，所述苯甲酸盐优选为无水的，并且优选为非溶剂化形式。在本发明的实施方案中，所述苯曱酸盐或其溶剂化物具有结晶性质(crystallineproperties),并且优选至少为50%结晶，更优选为至少60%结晶，更更优选为至少70%结晶，最优选为至少80%结晶。结晶度可通过常规的X射线衍射技术进行评价。在本发明的另一个实施方案中，所述苯曱酸盐或其溶剂化物为50%、60%、70%、80%或90°/。至95%、96%、97%、98Q/0、99%或100%结晶的。不受限于任何具体理论，所述苯曱酸盐被认为是多晶型的，目前已分离并且表征了两种形式。一种多晶型物(在下文中称为A型)显示至少以下的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰(以。2e表达)(误差界限与有关X射线衍射的UnitedStatesPharmacopeiageneralchapter(USP941)—致，参见UnitedStatesPharmacopeiaConvention.X-RayDiffraction,GeneralTest<941>.t/m'/ec/5Wes^PZ/OTmacope/a,25thed.Rockville，MD:UnitedStatesPharmacopeialConvention;2002:2088-2089):<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>。可通过包括以下步骤的方法，制备A型而基本上没有其它物理形式(i)使溶解在合适溶剂或溶剂混合物(例如有机溶剂，如极性溶剂，其实例包括曱醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丙酮和乙酸乙酯)中的1{2-[((25)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺的热溶液与(ii)溶解在合适溶剂或溶剂混合物(例如有机溶剂，如极性溶剂，其实例包括曱醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丙酮和乙酸乙酯)中的苯曱酸的热溶液接触，得到混合物，(iii)使混合物冷却至环境温度(例如20。C)，得到A型1{2-[((25)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯甲酸盐的沉淀，以及(iv)从混合物分离沉淀。另一种多晶型物(在下文中称为B型)显示至少以下的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰(以。2e表达)(误差界限与有关X射线衍射的UnitedStatesPharmacopeiageneralchapter(USP941)—致，参见UnitedStatesPharmacopeiaConvention.X-RayDiffraction,GeneralTest<941>.L/w.toi&<2/^尸/zar廳co戸-a，25thed.Rockville，MD:UnitedStatesPharmacopeialConvention;2002:2088-2089):(<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>(6)6.5、9.3、10.5、12.0、12.4、13.0、13.6、15.5、17.6、17.8和19.2,或(7)6.5、9.3、10.5、12.0、12.4、13.0、13.6、15.5、17.6、17.8、19.2、20.2、22.8和26.0，或(8)6.5、9.3、10.5、12,0、12.4、13.0、13.6、15.5、17.6、17.8、19.2、20.2、22.8、24.2、26.0和30.7。可通过以下三种方法，制备B型而基本上没有其它物理形式如在实施例中所述那样控制对A型的加热；或浆化技术，包括将例如20%w的A型样品溶解在合适的溶剂(例如有机溶剂例如极性溶剂，其实例包括曱醇、乙醇、正丙醇、异丙醇和丙酮)中，形成混悬液，在环境温度(例如20。C)对混悬液进行勻化至少7天；或将A型和苯曱酸溶解在合适的溶剂(例如加热的异丙醇)中，形成混合物，使该混合物冷却至环境温度，定时地将B型的晶体作为晶种加至混合物。在本说明书指出A型或B型基本上没有其它物理形式(或基本上是纯的)的情况下，其意思是，优选地，以重量计本发明所述苯曱酸盐的至少90%例如卯、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100%w为这种物理形式。下表1提供了在室温测定的所述苯曱酸盐A和B型的其它晶体学数据。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本发明的化合物可用作CCR1或MIP-lot趋化因子受体活性的调节剂[在例如本申请实施例部分所描述的人CCR1结合测定中1{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺二三氟乙酸盐的ICso低于50nM]，并且可将本发明的化合物给予哺乳动物包括人，用于治疗自身免疫性疾病、炎性疾病、增生性疾病、过度增生性疾病和免疫介导的疾病。这些病症的实例有1.呼吸道气道阻塞性疾病，包括哞喘，包括支气管。孝喘、过敏性译喘、内源性哮喘、外源性哮喘、运动诱发性译喘、药物诱发性(包括阿司匹林和NSAID诱发的)哮喘，慢性哮喘或顽固性(inverterate)哮喘(例如，迟发性哮喘和气道高反应性)和粉尘诱发性哮喘，间歇性哮喘和持续性哞喘，以及各种严重度的哮喘，及其它原因引起的气道高反应性；慢性阻塞性肺病(COPD)，例如不可逆性COPD;支气管炎，包括传染性支气管炎和嗜酸性支气管炎；肺气肿；支气管扩张；嚢性纤维化；结节病；农民肺及相关疾病；超敏感性肺炎；肺纤维化，包括隐原性纤维化肺泡炎、特发性间质性肺炎、抗肿瘤治疗和慢性感染(包括结核病和曲霉病及其它真菌感染)并发的纤维化；肺移植的并发症；肺血管的血管炎和血栓形成疾病及肺动脉高压；镇咳活性，包括治疗与气道炎症和分泌情况相关的慢性咳嗽及医源性咳嗽；急性、过敏性、萎缩性(atropic)鼻炎和慢性鼻炎，包括干酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、化脓性鼻炎、干燥性鼻炎和药物性鼻炎及血管运动性鼻炎；膜性鼻炎，包括格鲁布性鼻炎、纤维性鼻炎和假膜性鼻炎及腺病性鼻炎；常年性(perennial)和季节性(过敏性)鼻炎，包括神经性鼻炎(花粉症)；鼻息肉病；急性病毒感染，包括普通感冒和由呼吸道合胞病毒、流行性感冒、冠状病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染；2.骨和关节与骨关节炎/骨关节病相关或包括骨关节炎/骨关节病的关节炎，包括原发性和继发性关节炎，例如先天性髋关节发育不良；颈和腰脊推炎及腰背痛和颈部疼痛；类风湿性关节炎和斯蒂尔病(Still，sdisease);血清阴性脊柱关节病，包括强直性脊柱炎、牛皮癣性关节炎、反应性关节炎和未分化脊柱关节病；脓毒性关节炎和其它感染相关的关节病和骨疾病，例如结核病，包括波特病(Potts，disease)和蓬塞综合征(Poncet，ssyndrome);急性和慢性晶体性滑膜炎，包括尿酸盐沉积病、焦磷酸4丐沉积病和钩磷灰石相关的腱、粘液囊和滑膜炎症；贝切特病(Behcet'sdisease);原发性和继发性斯耶格伦综合征(Sjogren'ssyndrome);全身性硬化和局限性硬皮病；系统性红斑狼痴、混合性结締组织病和未分化结締组织病；炎性肌病，包括皮肌炎和多肌炎；风湿性多肌痛；幼年型关节炎，包括分布在任何关节的特发性炎性关节炎及相关综合征和风湿热及其全身性并发症；血管炎(vasculitis),包括巨细月包性动月永炎、高安动脉炎(Takayasu，sarteritis),丘-施综合征(Churg-Strausssyndrome)、结节性多动脉炎、显《效镜性多动脉炎和与病毒感染、超敏反应、冷球蛋白和异蛋白相关的血管炎；背下部疼痛；家族性地中海热、穆-韦综合征(Muckle-Wellssyndrome)和家族性爱尔兰热(FamilialHibernianFever)、菊池病(Kikuchidisease);药物诱发性关节痛、腱炎和月几病；和莱特病(Reiter，sdisease);3.由损伤(例如运动损伤)或疾病引起的疼痛和结締组织再造的肌肉骨骼疾病关节炎(例如类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风或晶体性关节病)、其它关节疾病(例如推间盘变性或颞下颌关节变性)、骨再造疾病(例如骨质疏松、佩吉特病(Paget，sdisease)或骨坏死)、多软骨炎、硬皮病、混合性结締组织病、脊推关节病或牙周病(例如牙周炎)；4.皮肤牛皮裤、特应性皮炎、接触性皮炎或其它湿渗性皮肤病及迟发型超敏反应；植物性和光照性皮炎；脂溢性皮炎、疱疹样皮炎、扁平苔癣、萎缩性硬化性苔癣、坏疽性脓皮症、皮肤结节病、盘状红斑狼疮、天疱疮、类天疱疮、大疱性表皮松解、荨麻疹、血管性水肿、血管炎、红斑、皮肤嗜酸粒细胞增多、斑秃、男性型脱发、斯威特综合征(Sweet，ssyndrome)、韦-克综合征(Weber-Christiansyndrome)、多形性红斑；蜂窝组织炎，包括传染性和非传染性蜂窝组织炎；脂膜炎；皮肤淋巴瘤、非黑素瘤皮肤癌和其它发育不良性损伤；药物诱发的疾病，包括固定性药疹；大疱性天疱疮；色素层炎和春季结膜炎；5.眼睑炎；结膜炎，包括常年性(perennial)或春季过敏性结膜炎；虹膜炎；前色素层炎和后色素层炎；脉络膜炎；自身免疫；影响视网膜的变性或炎性疾病；眼炎，包括交感性眼炎；结节病；感染，包括病毒、真菌和细菌感染；6.胃肠道舌炎、龈炎、牙周炎；食管炎，包括返流；嗜酸性胃肠炎、肥大细胞增多、克罗恩病(Crohn，sdisease)、结肠炎包括溃疡性结肠炎、直肠炎、肛门瘙痒；腹部疾病、肠应激综合征，以及具有远离肠作用的食物相关的变态反应(例如偏头痛、鼻炎或湿渗)；7.腹部肝炎，包括自身免疫性、酒精性和病毒性肝炎；肝纤维化和硬化；胆嚢炎；胰腺炎，包括急性和慢性胰腺炎；8.生殖泌尿系统肾炎，包括间质性和肾小球性肾炎；肾病综合征；膀胱炎，包括急性和慢性(间质性)膀胱炎和杭纳溃疡(Hunner'sulcer);急性和慢性尿道炎、前列腺炎、附睾炎、卵巢炎和输卵管炎；女阴阴道炎；佩伦涅病(Peyronie，sdisease);勃起机能障碍(男性和女性)；9.同种异体移植物排斥在例如肾脏、心脏、肝脏、肺脏、骨髓、皮肤或角膜移植后或在输血后出现的急性和慢性同种异体移植物排斥；或慢性移4直物抗宿主病；10.CNS:阿耳茨海默病(Alzheimer'sdisease)和其它痴呆疾病包括CJD和nvCJD;淀粉样变性病；多发性硬化和其它脱髓鞘综合征；脑动脉粥样硬化和血管炎；颞动脉炎；重症肌无力；急性和慢性疼痛(急性、间歇性或持续性疼痛，无论是中枢源性的还是外周源性的)，包括内脏痛、头痛、偏头痛、三叉神经痛、不典型面痛、关节和骨痛、由癌症和肿瘤侵入引起的疼痛、神经性疼痛综合征包括糖尿病性、疱渗后和HIV相关的神经病；神经性肉样瘤病；恶性、感染性或自身免疫性过程的中枢和外周神经系统并发症；11.其它自身免疫性和变态反应性疾病，包括桥本曱状腺炎(Hashimoto'sthyroiditis)、格雷夫斯病(Graves，disease)、阿狄森病(Addison'sdisease)、糖尿病、特发性血小板减少性紫癜、嗜酸性筋膜炎、高IgE综合征、抗磷脂综合征；12.其它带有炎性或免疫性组成的疾病，包括获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、麻风病、塞扎里综合征(Sezarysyndrome)和瘤外综合征；系统性红斑狼掩(systemiclupus)、全身性红斑狼掩(erythematosus);瘤型麻风；I型糖尿病、肾病综合征；13.心血管影响冠脉和外周循环的动脉粥样硬化；心包炎；心肌炎；炎性和自身免疫性心肌病，包括心肌结节病；缺血性再灌注损伤；心内膜炎、心瓣炎和主动脉炎，包括传染性(例如梅毒性)的；血管炎；近端和外周静脉的疾病，包括静脉炎和血栓形成包括深静脉血栓形成及静脉曲张的并发症；14.肿瘤对一般癌症的治疗，包括前列腺、乳腺、肺(例如非小细胞肺癌(NSCLC))、卵巢、胰腺、肠和结肠、胃、皮肤和脑肿瘤及鳞状肉瘤及影响骨髓(包括白血病)和淋巴增生系统(例如何杰金(Hodgkin，s)和非何杰金淋巴瘤)的恶性胂瘤；包括对转移性疾病和肿瘤复发及瘤外综合征的预防和治疗；和15.胃肠道腹部疾病、直肠炎、嗜酸性胃肠炎、肥大细胞增生、克罗恩病、溃疡性结肠炎、显微镜性结肠炎、不确定性结肠炎、肠应激病、肠应激综合征、非炎性腹泻、具有远离肠作用的食物相关的变态反应(例如偏头痛、鼻炎或湿渗)。因而，本发明提供用于治疗用途的^-{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐或其溶剂化物。另一方面，本发明提供,{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐或其溶剂化物在制备用于治疗的药物中的用途。在本申请说明书的上下文中，除非另有相反的具体说明，术语"治疗"也包括"预防"。术语"治疗的"和"治疗地"也可相应地解释。预防被认为与患有所述疾病或病症的先前发作的人员的治疗特别有关，或被认为与处于所述疾病或病症的增加危险之中的人员的治疗特别有关。处于形成具体疾病或病症的危险之中的人员，通常包括具有该疾病或病症的家族史的那些人员，或已经通过遗传学试验或筛选确定为对特别易患该疾病或病症的那些人员。本发明也提供治疗患有炎性疾病的患者或者面临所述疾病危险的患者中所述疾病的方法，所述方法包括将治疗有效量的iV-(2-[((25)-3-([l-(4-氯千基)哌啶_4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-轻基苯基}乙酰胺苯曱酸盐或其溶剂化物给予患者。本发明还提供治疗患有气道疾病(airwaysdisease)例如可逆性阻塞性气道疾病的患者或者面临所述疾病危险的患者中所述疾病的方法，所述方法包括将治疗有效量的AM2-[((2Q-3-Ul-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基卜2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐或其溶剂化物给予患者。对于上述治疗用途，所给予的剂量当然随给药的模式、期望的治疗和适应病症而变化，但通常的范围可为0.001mg/kg至30mg/kg。本发明的苯曱酸盐或其溶剂化物可单独使用，但通常以药物组合物的形式给予，在所述药物组合物中，所述苯曱酸盐或其溶剂化物(活性成分)与可药用辅料、稀释剂或载体混合一起。例如在"Pharmaceuticals-TheScienceofDosageFormDesigns",M.E.Aulton,ChurchillLivingstone,1988中，描述用于选择和制备合适药物制剂的传统方法.基于给药模式，药物组合物可包括0.05至99。/。w(重量百分比)，更优选为0.05至80。/。w,更更优选为0.10至70%w,甚至更优选为0.10至50%w的活性成分，所有重量百分比均基于整个组合物。本发明也提供一种药物组合物，其包括iV-(2-[((25)-3-([l-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐或其溶剂化物以及混合有可药用辅料、稀释剂或载体。本发明还提供用于制备本发明药物组合物的方法，包括混合1{2-[((25>3-{[1-(4-氯千基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐或其溶剂化物及可药用辅料、稀释剂或载体。所述药物组合物可以局部给药(例如给药至皮肤或给药至肺和/或气道)，例如以乳膏剂、溶液剂、混悬剂、七氟代烷(HFA)气雾剂和干粉制剂(例如在称为Turbuhale^的吸入装置中的制剂)的形式局部给药；或全身给药，例如以片剂、胶嚢剂、糖浆剂、粉剂或颗粒剂的形式口服给药；或溶液剂或混悬剂的形式胃肠外给药；或皮下给药；或以栓剂的形式直肠给药；或经皮给药。在本发明的实施方案中，对本发明的苯曱酸盐进行吸入给药。在另一个实施方案中，本发明的苯曱酸盐通过干粉吸入器(drypowderinhaler)给药。吸入器可以是单剂量的吸入器或多剂量的吸入器，并且可以是呼吸驱动的干粉吸入器(breathactuateddrypowderinhaler)。当通过吸入给药时，本发明化合物(即苯曱酸盐)的剂量范围通常可为O.l吗至10000(xg、0.1至5000吗、0.1至IOOO吗、0.1至500jxg、0.1至200吗、0.1至200pg、0.1至100|ig、0.1至50(ig、5吗至5000吗、5至1000^ig、5至500)ig、5至200|ig、5至100(ig、5至50pg、10至5000(ig、10至1000吗、10至500pg、10至200(ig、10至10(Vg、10至50pg、20至500(Vg、20至IOOO吗、20至500吗、20至200|ag、20至100pig、20至50吗、50至5000吗、50至IOOO昭、50至500昭、50至200吗、50至IOO吗、100至5000jag、100至IOOO吗或100至500(ig。本发明化合物的干粉制剂和加压HFA气雾剂可通过口或鼻吸入给药。就吸入而言，化合物理想的是微细分散的。微细分散的化合物的质量中值直径优选小于10jxm,并且可在分散剂(例如C8-C2Q脂肪酸或其盐(例如油酸)、胆汁盐、磷脂、烷基糖、全氟化或聚乙氧基化表面活性剂或其它可药用分散剂)的辅助下，将微细分散的化合物悬浮于喷射剂混合物中。一种可能性是混合微细分散的本发明化合物与载体物质例如单糖、二糖或多糖、糖醇或另一种多元醇混合。合适的载体有糖例如乳糖、葡萄糖、棉子糖、松三糖、乳糖醇、麦芽醇、海藻糖、蔗糖、甘露醇和淀粉。可供选择地，微细分散的化合物可用另一种物质包衣。也可将该粉末混合物分装到硬明胶胶嚢中，每个胶囊均包含所需剂量的活性化合物。另一种可能性是将微细分散的粉末制成球，所述球在吸入操作期间碎裂。可将这种球化粉末装到多剂量吸入器(例如称为Turbuhale,)的储药器中，其中计量给药单元计量出所需的剂量，所需的剂量然后会被患者吸入。利用该系统，在存在或不存在载体物质的情况下，将活性化合物给予患者。对于口服给药，本发明的化合物可与辅料或载体，例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇；淀粉，例如马铃薯淀粉、玉米淀粉或支链淀粉；纤维素衍生物；粘合剂，例如明胶或聚乙烯吡咯烷酮，和/或润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、聚乙二醇、蜡、石蜡等混合，然后压制成片。如果需要包衣片，那么如上所述制备的片芯可用浓的糖溶液包衣，所述糖溶液可包含例如阿拉伯胶、明胶、滑石和二氧化钛。可供选择地，片可用溶解在易挥发有机溶剂中的合适聚合物包衣。为了制备软明胶胶嚢，可将本发明的化合物与，例如植物油或聚乙二醇混合。硬明胶胶嚢可包含所述化合物的颗粒，所述颗粒使用用于片剂的任一上述赋形剂。也可将本发明化合物的液体或半固体制剂装到硬明胶胶用于口服给药的液体制剂的形式可以是糖浆剂或混悬剂，例如包含本发明化合物以及余量为糖以及乙醇、水、甘油和聚丙二醇的混合物的溶液。任选地，这些液体制剂可包含着色剂、调味剂、糖精和/或作为增稠剂的羧曱基纤维素或本领域技术人员已知的其它赋形剂。本发明的化合物也可与用于治疗以上病症的其它化合物一起给予。因此，本发明还涉及联合治疗，其中本发明的化合物或包含本发明化合物的药物组合物或制剂与另一种治疗剂或多种治疗剂同时或先后给予，或与另一种治疗剂或多种治疗剂一起作为组合制剂而给予，用于治疗一种或多种所列病症。现通过参考以下说明性实施例，进一步解释本发明。图1显示丛{2-[((26>3-{[1-(4-氯千基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐(A型)的X射线粉末衍射图。图2显示^-{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基)乙酰胺苯曱酸盐(B型)的X射线粉末衍射图。图3显示如实施例中描述的微粉化的#-{2-[((25)-3-{[1-(4-氯爷基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐(B型)和PulmicortTurbuhaler⑧制剂的质量中值空气动力学直径(MMAD)和几何标准偏差(GSD)。误差棒为CI950/。。图4显示如实施例中描述的微粉化的^-{2-[((25>3-{[1-(4-氯千基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐(B型)和PulmicortTurbuhale^制剂的微细颗粒分数(FPF)。误差棒为CI95%。具体实施方式一般方法在VarianUnity/"ova400MHz(软件VNMR6.1C和VNMRJUD;探针Nalorac5mmDG400-5AT)或VarianMwcwj-VX300MHz(软件VNMR6.1C;探针Varian5mmAutoSWPFG)仪器上，在298K记录^NMR光谱。将丙酮-A或二曱基亚砜(DMSO)-^的中间峰用作内标。将以下方法用于LC/MS分析MS仪器Agilent1100系列，配备有APCI界面LC仪器Agilent1100系列，配备有UV检测器VWD、自动采样器ALS、二元泵和脱气器LC柱ChromolithSpeedROD,RP-C18,04.6x50mm洗脱剂溶剂A:水+0.1%三氟乙酸(TFA);溶剂B:乙腈+0.1%TFA条件LC:流速为2.5ml/分钟，梯度为5至95%B,运行时间为3.6分钟，UV220nm;MS:正离子检测，毛细管电压为3kV实施例1制备A型厍{2-[((25)-3-{[1-(4-氯苄基)旅咬-4-基1氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐(1:1盐)(a)将丛{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]_4-羟基苯基}乙酰胺(其可通过WO03/051839描述的方法或通过类似于WO01/982734皮露的方法来制备；462mg,1.0mmol)的乙酸乙酯(IOml)热溶液和苯甲酸(244mg，2.0mmol)的乙酸乙酯(IOml)溶液混合。在密闭的小瓶中，将所得混合物放冷至环境温度(20。C)。形成白色沉淀，而没有出现浑浊。在于环境温度放置过夜之后，所得沉淀用乙酸乙酯(3xlOml)洗涤，在60。C真空干燥过夜，得到标题盐(506mg,86%),为灰白色固体。所述盐包含痕量的乙酸乙酯。固R(399.99MHz，丙酮-^)58.77(s,1H),8,07-8.04(m，2H)，7.83(d，8.7Hz，1H),7.55-7.50(m，1H),7.46-7.41(m，2H),7.36-7.31(m,4H),6.52(d,/=2.6Hz,1H)，6.40(dd，8.7,2.6Hz,1H)，3.97(d，9.3Hz,1H),3.89(d，/=9.3Hz,1H),3.48(s,2H)，3.29(d,/=12.1Hz,1H)，2.94(d,/=12.2Hz，1H),2.91-2.77(m,3H),2,09-2.00(m，4H)，1.98(s,3H)，1.72-1.59(m,2H),1.30(s,3H)APCI-MS:m/z462[MH+]NMR确认了碱与酸的化学计量为1:1。通过以下方法，制备额外量的标题盐(b)将1{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]_4-轻基苯基}乙酰胺(4.0g，8.65mmol)的乙酸乙酯(75ml)热溶液与苯曱酸(1.16g,9.5mmol)的乙酸乙酯(75ml)溶液混合。当所得混合物已冷却至环境温度(20。C)时，利用在以上(a)中所得标题盐的颗粒对所述混合物进行种晶，在密闭的烧瓶中放置过夜。所得沉淀用乙酸乙酯(3x50ml)洗涤，在60。C真空干燥过夜，得到标题盐(4.41g,87%),为灰白色固体。所述盐包含痕量的乙酸乙酯。实施例2制备B型-{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐(1:1盐)(a)将通过实施例l(b)方法制备的苯曱酸盐(A型，10至15mg)置于差示扫描量热盘(带有折压盖(lidcrimped))中，以5lOmin"的加热速率将其加热至155。C。一旦盐已熔化(在所用条件下，记录的开始熔化温度为146.5。C)，就以5K.min"的速率使熔化的样品冷却至环境温度(20。C)。然后，以5K.min-1的加热速率将同一盘再次加热至151。C，在148。C历时10分钟扫描记录等温线。然后，使盘迅速冷却至环境温度，使晶体形成，随后该晶体通过X射线粉末衍射(XRPD)确认为丛{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐的新物理形式(B型)。一些无定形的苯曱酸盐可能作为所述方法的副产物而形成。(b)在以上(a)中描述的B型盐也通过以下方法制备在小瓶中，将200/。w的通过实施例1(b)方法制备的苯曱酸盐样品(A型)溶解在溶剂，例如曱醇(>20mg/ml)、乙醇(>20mg/ml)、正丙醇(>20mg/ml)、异丙醇(8.5mg/ml)或丙酮(9.6mg/ml)中。在括号中的数字表示所述盐在这些溶剂中估计的溶解度。然后，将小瓶密封，在环境温度(20。C)使用磁铁对混悬液进行匀化。使搅拌和温度维持至少7天，在此之后，干燥所得物质样品，通过XRPD片企验。XRPD确认A型已完全转化成B型。(c)在以上(a)中描述的B型盐也通过以下方法制备在圓底烧瓶中，将通过实施例l(b)方法制备的苯曱酸盐(A型)(22.0g,37.7mmol)和苯曱酸(0.46g,3.8mmol)溶解在热2-丙醇(190ml)中，得到淡红色溶液。使用旋转蒸发器装置，使烧瓶在40。C的水浴上旋转，直到溶液已冷却至40。C,于是利用B型盐的一些晶体对该溶液进行种晶。使水浴緩慢冷却至环境温度，过夜，同时使烧瓶旋转，不时利用B型盐的一些晶体对该混合物进行种晶。通过抽吸分离所形成的粉红色沉淀，用2-丙醇(2x50ml)洗涤，然后在100。C真空干燥20小时，得到标题盐(通过XRPD确认)(18.5g,84%),为淡粉红色固体。所述盐含有痕量的2-丙醇。&画R(299.95MHz,DMSO-^)58.87(s,1H)，7.96-7.91(m,2H),7.59-7.52(m，1H)，7.49-7.47(m,1H),7.46-7,42(m，2H),7.36(d,/=8.6Hz,2H),7.29(d，/=8.6Hz，2H)，6.39(d，J=2.5Hz,1H)，6.29(dd，/=8.5，2.5Hz,1H)，3.78-3.72(m,2H)，3.41(s，2H)，2.79-2.66(m,4H)，1.98(s，3H),1.97-1,88(m,2H)，1.85-1.76(m，2H)，1.41-1.25(m，2H)，1.19(s，3H)APCI-MS:m/z462[固+]NMR确认了碱与酸的化学计量为1:1。实施例3X射线粉末衍射分析一般方法可根据标准方法，对所制备的样品进行X射线粉末衍射(XRPD)分析(参见例3口Giacovazzoetal"eds.,FundamentalsofCrystallography,OxfordUniversityPress(1992)、Jenkins&Snyder,eds.，IntroductiontoX-RayPowderDiffractometry,JohnWiley&Sons,NewYork(1996)、Bunn,ed"ChemicalCrystallography,ClarendonPress,London(1948)和Klug&Alexandereds.,X-rayDiffractionProcedures,JohnWiley&Sons,NewYork(1974))。如下所述得到在以上实施例1和2中描述的A型和B型盐(为无水形式)的X射线粉末衍射图将使用单色CuKa辐射(45kV和40mA)的Bragg-Brentano仲聚焦粉末X射线衍射仪用于该分析。第一光学器件包含Soller狭缝和自动发散狭缝(automaticdivergenceslit)。在观'J量期间S走寿争的零背景氺反(zerobackgroundplate)上制备扁平的样品。第二光学器件包含Soller狭缝、自动防散射狭缝、接收狭缝和单色器。衍射信号用成比例的氙气填充检测器检测。以连续的扫描模式，采集2。^2e^40。之间的衍射图，扫描步幅为0.016°20,扫描速率为4°26/分钟。储存电子形式的原始数据。对原始或平滑处理过的衍射图进行评价。领域技术人;;设置粉末X射线衍射仪的仪器参数，从而使得能够采集与所提供的数据相当的衍射数据。获得的结果示于图1和图2中。实施例4差示扫描量热法(DSC)4吏用标准方法，例如H6hne，G.W.H.etal(1996)，DifferentialScanningCalorimetry,Springer,Berlin中描述的那些方法，利用Q1000调节的温度差示扫描量热仪(ModulatedTemperatureDifferentialScanningCalorimeter,MTDSC)以"只加热(heatonly)"模式，用5。C/分钟的斜线上升速率(ramprate)研究试验样品对升高温度的量热响应。在氮气气氛下，将约2至5mg试验样品置于带有盖(没有任何折压)的铝杯中。众所周知的是，DSC开始温度和峰温度可由于样品纯度和仪器参数尤其是温度扫描速率而变化。本领域技术人员可使用常规的优化和/或校准，设置差示扫描量热器的仪器参数，从而使得能够采集与所提供的数据相当的衍射数据。测得无水A型盐的典型样品的熔化温度为146°C±2°C(开始)。测得无水B型盐的典型样品的熔化温度为154。C±2。C(开始)。实施例5吸湿性测定使用对称蒸汽吸附分析仪SGA-100(VTICorporation),由不同的方法记录吸附-解吸等温线，由此研究试验样品在室温(25。C)和80%相对湿度(朋)时的重量变化，主要特征为单次吸附/解吸循环为0至卯％RH，步幅为10%RH，dm/dt触发值为0.002%(dm/dt=质量随时间的变化一当平衡稳定度在此值内时，自动开始下一步；然而，如果没有达到这些条件，那么每步骤的默认最大时间为6小时)。将约2至10mg试验样品置于样品容器中，接触不同的相对湿度。试验样品80%RH的吸水量(％w/w)无水A型<2无水B型<0.8实施例6评价微粉化的盐的解聚性质方法这种筛选研究旨在就无水B型,{2-[((25>3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-曱基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯曱酸盐(在本实施例的以下部分称为"B型盐")的解聚性质给出一些评价。将结果与以相同方式检验的现有产品粉末PulmicortTurbuhale^制剂的结果比较。使B型盐微粉化，以便得到小于5pm的粒度。将PulmicortTurbuhaler粉末从PulmicortTurbuhale,倒出。所述PulmicortTurbuhaler吸制剂包括微粉化的布地奈德(Budesonide)粉末，将该粉末球化成小丸粒(smallpellet)。在螺旋喷射磨(spiraljetmill)中，使B型盐微粉化。螺旋分级器位于喷射磨的内部环形空间中。微细颗粒经过此分级区域，通过喷射磨底部的旋风分离器而出来。抛弃在喷射磨的排出滤器(exhaustfilter)中收集的级分。为了使粉末(Pulmicor^Turbuhale^制剂的粉末和B型盐的粉末)解聚，刮下粉末，并将其填充至包括L形圆筒状通道的简易吸入器装置中，所述L形圆筒状通道包括垂直构件和水平构件。将Turbuhale^喷嘴(mouthpiece)固定到水平构件的端部以促进粉末的解聚，并且通过垂直通道将所要检验的粉末置入通道的弯曲部分(即L形通道的拐角)中。然后，气流脉沖(见下)使气流活动经过通道的垂直构件，从而携带出位于弯曲部分中的粉末，之后空气-颗粒混合物经过圓筒的水平构件，最后经过Turbuhale^喷嘴。在离开Turbuhale^喷嘴之后，将气雾转移至带有ImpactorInlet3306装置的TSI空气动力颗粒筛选器(AerodynamicParticleSizer,APS),在此分析气雾云(aerosolcloud)的空气动力学性质和微细颗粒分数(fineparticlefraction)。将APS装置布置成可以以任选的气流进行剂量抽吸，接下来逐粒地对颗粒进行计数和空气动力学分级(约0.3-20(im)。简要地，将三通气动阀和NGI预分离器安置在USP喉部和3306ImpacterInlet之间。另外，以T形连接的方式，将通过计时器控制的电磁阀(TriggorBox)而与真空源连接的管路安置在所述阀和所述预分离器之间。然后，使用Triggor盒，产生短的气流脉冲，使之通过吸入器、USP喉部和预分离器。在气流脉沖结束之后，气动阀转换，从而通过3306ImpacterInlet将在预分离器中的气雾云引到APS中，用于空气动力学评价。以持续0.4秒而最大气流为60升/分钟的气流脉沖抽吸每份剂量，接着将样品采集到APS仪器中。将APS软件中的采样时间设置为20秒。APS给出的结果参数为质量中值空气动力学直径(MMAD)、几何标准偏差(GSD),称为微细颗粒剂量(fmeparticledose,FPD)的剂量的测量值(利用颗粒密度=1将颗粒计数数据转换成质量数据)。释放两个第一剂量(对于每种制剂)，并进行重量测量。将表示为"定量齐'J量(metereddoses)"或力口载齐寸量(loadeddoses)的这些重量剂量(gravimetricdoses)的平均值用于对FPD进行归一化，从而得到微细颗粒分数(fineparticlefraction,FPF)的量度。因此，可将FPF用于直接比较两种粉末制剂(就所使用的仪器设置而言)。将微细颗粒的限度设置为7lam的空气动力学粒度。然后，分别对于？11111^011@Turbuhale^制剂和对于B型盐，用APS分析七份和五份剂量。结果结果示于表2。微细颗粒分数为FPD除以定量剂量，而对于每种制剂，FPD为两个测量值的算术平均值。将结果绘制在图3(MMAD和GSD)和图4(FPF)中。MMAD和GSD结果显示非常小的变异性(^艮小的置信区间)，就这两个参数而言，两种制剂之间的差异是非常小的，并且可以或多或少地认为是相等的。就FPF而言，对于B型盐，得到较大的变异性，这可归结于没有就装填性质对粉末进行优化这个因素。然而，令人惊讶地注意到，与Pulmicort⑧Turbuhale^制剂相比，B型盐的FPF通常是较高的，这也在B型盐的归一化FPF中得以反映。表2结果数据。剂量1-7为PulmicortTurbuhaler⑧数据。剂量8-12为B型盐数据。将归一化的B型盐FPF值3计算为B型盐平均FPF/PulmicortTurbuhale,制剂平均FPF。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>PulmicortTurbuhaler制剂平均值1322.151.6191B型盐平均值1822.161.59B型盐归一化值149164%aPulmicortTurbuhaler制剂标准偏差18.10.030.0112.5B型盐标准偏差56.20.080.0346.1PulmicortTurbuhaler制剂CI9513.40.030.019.3B型盐CI9549.30.070.0240.4从以上提供的结果可得出以下结论B型盐制剂显示非常类似于现有产品制剂(PulmicortTurbuhale^制剂)的粒度中点(MMAD)和粒度分布(GSD)。对于两种不同的粉末，分配成微细颗粒的粉末的分数(微细颗粒分数)的范围是类似的，就B型盐而言是更好的，微细颗粒分数对于成功地将药物递送到呼吸道是至关重要的。因此，从在这项研究中得到的数据得出以下结论B盐制剂显示有利的解聚性质。人CCR1结合测定膜使用稳定表达重组人CCR1的HEK293细胞(HEK-CCR1)(获自ECACC)，制备包含CCR1的细胞膜。将膜贮存在-70。C。将每批次的膜浓度调整为10%特异性结合的33pM[1251]MIP-lot。结合测定将HEK-CCR1膜稀释在添加有17500单位/L杆菌肽(Sigma,CatNoB1025)的测定緩冲液pH7.4(137mMNaCl(Merck,CatNo1.06404)、5.7mM葡萄糖(Sigma,CatNoG5400)、2.7mMKCl(Sigma,CatNoP-9333)、0.36mMNaH2P04xH20(Merck,CatNo1.06346)、10mMHEPES(Sigma,CatNoH3375)、0.1。/。(w/v)明胶(Sigma，CatNoG2625))中，将100此稀释液加至96孔过滤板(0.45|im不透明的MilliporecatnoMHVBN4550)的每个孔中。添加12pL化合物的测定緩冲液(包含10%DMSO)，使最终化合物浓度为1xl(T55至1xl(T95M。某些孔(没有化合物)中包含12pi冷的人重组MIP-loc(270-LD-050,R&DSystems,Oxford,UK)(在补充有10%DMSO的测定緩冲液中的最终浓度为10nM)，作为非特异性结合对照(NSB)。将12^tl具有10%DMSO的测定緩冲液加至某些孔(没有化合物)，以检测最大结合(BO)。将[1251]MIP-lot加至所有孔中，使其在测定緩冲液中稀释至各孔中的最终浓度为33pM。然后，在室温将带有盖的板孵育1.5小时。孵育之后，真空过滤(MultiScreenResistVacuumManifoldSystem,Millipore)清空各孑L，用200(il测定緩沖液洗涤一次。洗涤之后，所有孔接受额外的50nL闪烁液(OptiPhase"Supermix",WallacOy,Turko,Finland)。使用WallacTrilux1450MicroBeta计数器，测量结合的[1251]MIP-loc。窗设置(windowssetting):低5-高1020,1分钟计数/孔。计算置换百分比和IC50将以下方程式用于计算置换百分比。置换百分比=1-((cpmtest-cpmNSB)/(cpmB0-cpmNSB))其中cpmtest=含有膜和化合物及[1251]MIP-la的一式两份孔中的平均cpm(每分钟的计数)；NSB=含有膜和MIP-la及[1251]MIP-loc(非特异性结合)的孔中的平均cpm;BO=含有膜和测定緩沖液及[1251]MIP-loc(最大结合)的孔中的平均cpm。使用基于Excel的程序XLfit(2.0.9版)，将数据拟合成4-参数logistics函数，推导出产生50。/o置换的化合物摩尔浓度(ICso)。权利要求1.一种化合物，其为N-{2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯甲酸盐或其溶剂化物。2.权利要求l的化合物，所述化合物是无水的。3.权利要求2的化合物，所述化合物显示至少以下的特征X射线粉末衍射峰(以。加表达)(1)6.1、10.7和19.3，或(2)6.1、12.2和14.1,或(3)6.1、10.7、12.2、14.1、18.1和19.3，或(4)6.1、10.7、12.2、14.1、15.7、18.1和19.3,或(5)6.1、10.7、12.2、14.1、15.1和19.3，或(6)6.1、10.7、12.2、14.1、15.1、15.7、18.1和19.3,或(7)6.1、10.7、12.2、14.1、15.1、15.7、18.1、19.3、21.2和24.6。4.权利要求3的基本上纯的化合物，具有与图1所示基本上相同的X射线粉末衍射图。5.权利要求2的化合物，所述化合物显示至少以下的特征X射线粉末衍射峰(以。加表达)(1)6.5、9.3和10.5，或(2)6.5、9.3、17.6和17.8,或(3)6.5、9.3、10.5、12.0和12.4，或(4)6.5、9.3、10.5、12.0、12.4、13.0、13.6、15.5、17.6和17.8,或(5)6,5、13.0和20.2，或(6)6.5、9.3、10.5、12.0、12.4、13.0、13.6、15.5、17.6、17.8禾口19.2，或(7)6.5、9.3、10,5、12.0、12,4、13.0、13.6、15.5、17.6、17.8、19.2、20.2、22.8和26.0，或(8)6.5、9.3、10.5、12.0、12.4、13.0、13.6、15.5、17.6、17.8、19.2、20.2、22.8、24.2、26.0和30.7。6.权利要求5的基本上纯的化合物，具有与图2所示基本上相同的X射线粉末衍射图。7.—种药物组合物，包括权利要求1至6中任意一项的化合物以及结合有可药用辅料、稀释剂或载体。8.权利要求1至6中任意一项的化合物或权利要求7的药物组合物，与干粉吸入器的组合。9.权利要求1至6中任意一项的化合物，其用于治疗。10.权利要求1至6中任意一项的化合物在制备用于治疗对趋化因子受体1(CCR1)活性的调节是有益的人类疾病或病症的药物中的用途。11.权利要求1至6中任意一项的化合物在制备用于治疗慢性阻塞性肺病的药物中的用途。12.权利要求1至6中任意一项的化合物在制备用于治疗译喘的药物中的用途。13.治疗患有气道疾病的患者或面临所述疾病危险的患者中所述疾病的方法，所述方法包括将治疗有效量的权利要求1至6中任意一项的化合物或权利要求7的药物组合物给予患者。全文摘要本发明提供N-{2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟基苯基}乙酰胺苯甲酸盐或其溶剂化物、包含所述盐或溶剂化物的药物组合物和所述盐或溶剂化物在治疗中的用途。文档编号A61K31/4468GK101238103SQ200680028495公开日2008年8月6日申请日期2006年7月31日优先权日2005年8月2日发明者博-戈兰·约瑟夫森,朱利恩·乔范尼尼申请人:阿斯利康(瑞典)有限公司