专利名称：：一种中药组合物在制备治疗慢性心功能不全的药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明属医药领域，具体涉及芪参益气滴丸在制备预防和治疗慢性心功能不全的药物中的应用。
背景技术：
：心功能不全又称充血性心力衰竭(简称心力衰竭或心衰)，是指静脉回流正常的情况下，由于原发的心脏损害或者心室长期压力或容量负荷过重引起的左心排血量减少和心室充盈压升高，临床上以组织血液灌注不足以及肺循环和(或)体循环瘀血为主要特征的一种临床综合征，表现为心悸怔仲、气短乏力、呼吸困难、肢体水肿、肝脏肿痛等。慢性心功能不全几乎是所有器质性心脏病患者的最终归宿，该病临床发病率高，是重点研究的医学难题之一。心功能不全的治疗，西医常用的药物包括利尿剂、血管扩张剂、强心剂、洋地黄、非样地黄类正性肌力药物、转换酶抑制剂、(3受体阻止剂等，但都有不同程度的副作用或使用禁忌；常用的中成药主要为参附注射液、参脉注射液等，但疗效不甚理想，且出现不同程度的不良反应。芪参益气滴丸由黄芪、丹参、三七和降香组成，由天津天士力制药股份有限公司生产，用以治疗气虚血瘀型冠心病心绞痛，疗效显著，无任何明显的毒副作用。中国专利申请CN1375316A公开了该制剂的组成、制法以及在冠心病心绞痛方面的用途，中国专利申请CN200510013503.3A、CN200510013504.8、CN200510013505.2、CN200510013506.7、CN200510013507.1分别公开了该组合物在制备防治老年痴呆药物、制备抑制白蛋白外漏药物、制备抑制肥大细胞脱颗粒药物中的应用、制备防治高原缺氧药物中的应用、制备治疗急性胰腺炎药物中的应用，但该药在防治慢性心功能不全方面的作用尚未见报道。
发明内容本发明的目的是提供一种中药组合物在制备治疗慢性心功能不全的药物中的用途，该组合物由下列重量百分比的原料药制备而成黄芪22.2%66.8%，丹参11.6%33.4%，三七2.5%13.5%，降香14.5%44.3%。本发明所述的中药组合物，可以改善慢性心功能不全者左心室收縮功能，增加慢性心功能不全者的左室射血分数(LVEF)和短轴縮短率(FS)，改善慢性心功能不全者的能量代谢，表现为ATP升高，ATP/ADP比值升高，能合(energycharge,EC)升高。本发明所述的中药组合物，其优选的配比为黄芪30.8%57.2%,丹参15.4%28.6%，三七3.5%6.5%，降香20.6%38.2%;其最佳配比为黄度44.7%、丹参26.7%、三七6.3%、降香22.3%;或者为黄疾41.2%、丹参23.8%、三七4.5%、降香30.5%。本发明的中药组合物，可以分别对原料药按照常规的方法或者现有技术的方法进行提取制备，然后混合而成，优选地，按照下述方法制备取经粉碎的丹参、三七药材，水煎煮，滤过，滤液适当浓缩后醇沉，上清液回收乙醇，浓缩成浸膏，即丹参三七浸膏；另取经粉碎的黄芪药材，水煎煮，滤过，滤液适当浓縮后醇沉，上清液适当浓縮后再醇沉，上清液回收乙醇，浓縮成浸膏，即黄芪浸膏；再取降香药材，加水，回流提取，收集挥发油。将以上两种浸膏及挥发油和辅料混和均匀后，制成制剂任何一种药剂学上所说的剂型，其中优选剂型为滴丸剂。例如，滴丸剂制法取上述丹参三七浸膏、黄芪浸膏及浸膏总重量25倍的聚乙二醇-6000，水浴溶化，化匀后，加入降香挥发油，混匀，按常规制滴丸的方法进行制备，即得；照常规片剂方法可制成片剂；等等。为了更好的理解本发明，下面通过本发明的中药组合物(以下称"芪参益气滴丸浸膏")对慢性心功能不全大鼠的影响，并行超生心动图检查测定左室射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)，心肌组织匀浆测定ATP、ADP、AMP，说明芪参益气滴丸在治疗慢性心功能不全中的作用。试验目的观察丧参益气滴丸对于慢性心功能不全大鼠的治疗作用。材料及方法1，动物SD大鼠，雄性，清洁级，购自上海斯莱克实验动物有限公司，合格证号0016807、00172992，受试药物(1)疾参益气滴丸浸膏按照实施例l的方法制备，每l克浸膏含14.3g生药，小鼠实验LDs。为25.807g/kg，折算为大鼠LD5',为:18.0649g/kg，人临床使用剂量为6.25mg/kg，黄芪浸膏丹参三七浸膏降香挥发油=1:1:0.0735。去离子水溶解。(2)万爽力(能量代谢调节剂，VAS0REL，Trimetazidinedihydrochloride):由法国施维雅药厂提供(SERVIER，France),每粒20mg，产品批号(Batch):5J4515。去离子水溶解。(3)雅施达(肾素-血管紧张素转换酶抑制剂，ACERTIL，Perindopriltablets):由由法国施维雅药厂提供(SERVIER，France),每粒4mg，产品批号(Batch):5K0401。去离子水溶解。受试药物给药途径均胃饲，每鼠每天lml。3，试剂及溶液(1)异丙肾上腺素(Sigma,DL-Isoproterenolhydrochloride):No:15627-25G，055kl021用生理盐水溶解，皮下注射用。(2)肝素钠注射液(中国江苏常州千红生化制药有限公司)产品批号051229，2ml:12500单位，用生理盐水稀释，500单位/ml。(3)水合氯醛溶液(江苏省中医院，苏药制字H04001110):产品批号060412，用生理盐水稀释为7.5%待用。4，实验仪器及设备(1)常规设备Ph213微处理pH计(HANNA)、WS-1磁力搅拌器、大鼠灌胃针、剪刀、镊子、血管夹、纱布等(2)超声心动图机GE公司VIVID7型5,实验造模除正常对照组大鼠外，模型组及治疗组大鼠在正常饲养3-7天后开始进行造模，方法如下第1天皮下注射异丙肾(ISO)20mg/Kg,第2天皮下注射异丙肾(ISO)10呢/Kg，第3天ISO5mg/Kg，第4-12天ISO3mg/Kg。6,实验分组SD大鼠142只，体重201.86±6.68g，随机分为两组正常组(n=18)及模型组(n=124)。实验第一天始模型组大鼠给予ISO皮下注射造模，方法同上，一个月后，检测部分大鼠超声，随机将部分存活模型组大鼠分为芪参益气高剂量组(n=16)、芪参益气中剂量组(『16)、芪参益气低剂量组(n=16)、万爽力组(n=15)及雅施达组(n=15)剩余模型组(n=16)，芪参益气高、中、低剂量组大鼠分别每鼠每天灌胃芪参益气浸膏78.125mg/kg、39.063mg/kg及19.531mg/kg，万爽力组大鼠每鼠每天灌胃万爽力10mg/kg,雅施达组大鼠每鼠每天灌胃0.417mg/kg。治疗持续4周，每天一次，治疗4周后每组处死6-IO只大鼠，余SD大鼠持续治疗，第6周处死。7，观察指标(1)大鼠一般情况活动度、体重、死亡数等。(2)大鼠超声指标实验结束前大鼠水合氯醛麻醉，行二维超声记录左室射血分数(EF)和短轴縮短率(FS)。(3)心肌组织匀浆测定ATP、ADP、細P。标本处理A.ATP测定a)试剂准备三乙醇胺缓冲液(50腿ol/L):pH7.2;NADP10誦o1/1;MgCl20.1mol/l;葡萄糖0.5mol/l;酶缓冲液G6P-DH(80U/ml):HK(100U/ml)=l:1ATP标准品100umol/1;200umol/1;400ymol/1.空白缓冲液TEA:NADP:MgCl"葡萄糖=7:1:1:1反应缓冲液为每毫升空白缓冲液加20u1的l隱ol/lATPb)实验步骤空白管反应管样本200ul中和的高氯酸200ul空白缓冲液1000ul反应缓冲液1000酶缓冲液20ill20yl加酶混匀并放回冰浴中，全部加完后一起放入37度水裕中，20min后在波长339nm处比色，以空气调零，记空白管为A。，反应管为A。AA=A-A。AA与ATP的浓度成正比。B.ADP/AMPa)试剂准备三乙醇胺缓冲液(50隱ol/L):PH8.0;PEP/MgS04/KCl(PEP14國o1/1，MgSO40.5mol/l，KC11.8mol/l);NADH(16隱o1/1);LDH2500U/ml;PK2000U/ml;MKlOOU/ml.反应缓冲液TEA(600ul)+PEP/MgSOyKCl(120u1)+NADH(35ul)十LDH(20ul)标准品配置AMP200Umol/1300iimol/1400ymol/1AMP标准品中应含有相同浓度的ATPADP100ymol/1150umol/1200timol/1b)实验步骤空白管反应管样本600u1中和的高氯酸600Hi反应缓冲液600y1600n1混匀5min339nm处读数记AlPK20li120u1混匀20niin339nm处读数记A2MK100ul100Pi混匀20min339nm处读数记A3aa鮮=aa△aaa^与样本中adp浓度成正比A州p-ZXA样本(A:i-A2)空白(A3-A2)AA，与样本中AMP浓度成正比7、数据分析及统计以均数土标准差表示计量资料，计量资料多组比较采用ANOVA分析，组间两两比较采用S-N-K检验；两组均数比较采用T检验；计数资料采用卡方检验。所有统计利用SPSS12.0软件分析完成，P〈0.05为有统计学差异。结果(1)一般情况、体重及死亡率比较异丙肾造模后死亡数及体重与正常组相比见表1，异丙肾造模型后大鼠死亡数显著高于正常组，有统计学差异，造模第28天后体重较正常组减轻。造模30天后进行药物治疗，各治疗组死亡数及体重比较见表2。治疗期间仅1只模型组大鼠死亡，各组间体重无明显变化。表l治疗前正常组、模型组死亡率、体重比较结果(体重单位g)分组n歹E亡数9d-BW23d-BW30d-BW正常组180288.00±6.78(12)406.10±14.91(10)453.56±15.90(18)模型组12426(20.97%)*277.00±17.80(12)378.20±20.55(10)*429.41±27.17*(97)经检验，正常组与模型组大鼠死亡数P-O.044(PearsonChi-sqL1are=4.620);*与正常组相比，P<0.05表2治疗后各组死亡数、体重比较(体重单位g)分组n死亡数44d-BW51d-BW58d-BW68d_BW正常组160462.81±19.92492.31±20.25502.00±16.05511.50±11.95模型组161441.25±37.46469.63±39.71484.40±40.47504.83±63.40錢高160448.75±22.60479.25±26.16510.75±25.95506.30±31.22芪参中160459.56±24.07487.44±23.09510.56±27.05舰.78±31.46<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>(2)大鼠超声心动图比较结果异丙肾造模后30天模型组与正常组各取8只大鼠行超声心动图检测，结果见表3，模型组EF和FS明显低于正常组，有统计学差异。造模30天后进行药物治疗。表3治疗前(实验30天)正常组与模型组超声心动图比较<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*与正常组相比，P〈0.05;治疗4周和6周后，分别取每组大鼠4-6只行超声心动图检测，各组超声心动图比较见表4。结果提示模型组及各药物治疗组EF、FS均低于正常组，各药物治疗组FS均高于模型组。芪参益气高剂量组、万爽力组EF高于模型组，有统计学差异。芪参益气高剂量组EF高于雅施达组有统计学差异。表4治疗6周后各组大鼠超声心动图比较<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*与正常组相比，P〈0.05;S与模型组相比，P〈0.05;$与芪参高剂量组相比，P〈0.05;&与芪参中剂量组相比，P〈0.05;%与芪参低剂量相比，P〈0.05;@与万爽力组相比，P<0.05(4)大鼠心肌高能磷酸化合物含量比较治疗6周各组大鼠心肌高能磷酸化合物含量见表5。表5治疗6周大鼠心肌高能磷酸化合物含量<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*与正常组相比，P〈0.05;tt与模型组相比,P〈0.05;$与芪参高剂量组相比，P〈0.05;&与芪参中剂量组相比，P〈0，05;%与芪参低剂量相比，P〈0.05;@与万爽力组相比，P<0.05结果1.异丙肾上腺素持续皮下注射可造成大鼠病理呈现心脏间质呈纤维化、钙化、结缔组织增生、正常心肌细胞呈岛状，心肌纤维排列紊乱，部分伴有炎症细胞浸润，超声心动图示LVd、LVs、EDV、ESV明显增高，EF、FS、IVS、LVPW明显降低，类似慢性心功能不全改变。2.芪参益气浸膏治疗SD心衰大鼠6周，能提高心衰大鼠心功能LVEF和FS。3.疾参益气浸膏治疗能改善慢性心衰大鼠的能量代谢，结果变化与临床常用西药万爽力、雅施达相似。综上，可以看出芪参益气浸膏可以增加心衰大鼠心功能LVEF和FS，改善慢性心功能不全大鼠的左室收縮能力，改善慢性心衰大鼠的能量代谢。具体实施方式下面结合实施例对本发明的药物做进一步说明，下述各实施例仅用于说明本发明而并非对本发明的限制。实施例一取黄芪86.5g、丹参21.3g、三七3.5g、降香20.6g、辅料聚乙二醇-600030g。将经粉碎的丹参、三七，水煎煮2次，每次加7倍量水，每次2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓縮至900ml，加入95%乙醇，使醇浓度达到70%，静置1224小时，滤过，回收乙醇，浓縮成相对密度为1.321.38(506(TC)的浸膏；将经粉碎的黄芪，加水煎煮2次，每次加6倍量水，依次提取2小时、1小时，合并滤液，浓縮至1500ml左右时，加95%乙醇使醇浓度为60%，静置1224小时，滤过，滤液回收乙醇，浓縮至400ml左右时，加95%乙醇使醇浓度为80%，静置1224小时，滤过，滤液回收乙醇，浓縮成相对密度为1.321.38(5060°C)的浸膏；取降香，加5倍量水，回流提取5小时，收集挥发油；取上述丹参三七浸膏、黄芪浸膏，加入降香挥发油，混匀。实施例二取实施例一的丹参三七浸膏、黄芪浸膏及聚乙二醇-6000，水浴溶化，化匀后，加入降香挥发油，混匀，移至滴丸机中，制成1000粒滴丸。实施例三取黄芪40.6g、丹参44.8g、三七11.2g、例一和实施例二的方法制成1000粒滴丸。实施例四取黄芪77.3g、丹参22.8g、三七4.8g、例一和实施例二的方法制成1000粒滴丸。实施例五取黄芪42.3g、丹参39.2g、三七8.2g、例一和实施例二的方法制成1000粒滴丸。实施例六取黄芪65.2g、丹参38.9g、三七9.3g、例一和实施例二的方法制成1000粒滴丸。实施例七取黄芪56.2g、丹参32.5g、三七6.2g、例一和实施例二的方法制成1000粒滴丸。降香38.6g，辅料聚乙二醇-600030g，按实施降香30.5g、辅料聚乙二醇-600028g，按实施降香46.8g、辅料聚乙二醇-600025g,按实施降香32.5g、辅料聚乙二醇-600040g，按实施降香41.6g、辅料聚乙二醇-600022g，按实施实施例八取黄芪36.5g、丹参32.4g、三七6.2g、降香41.7g、辅料聚乙二醇-600022g，按实施例一和实施例二的方法制成1000粒滴丸。实施例九取黄芪65.6g、丹参25.8g、三七9.5g、降香46.4g,按实施例一的制备工艺制成浸膏，取清膏、蔗糖和糊精按重量比l:3:l的比例，按照常规方法制成片剂200片。实施例十取黄芪35.5g、丹参50.8g、三七16.3g、降香52.3g，按实施例一的制备工艺制成浸膏，取清膏、蔗糖和糊精按l:3:l的比例，按照常规方法制成颗粒剂125袋。实施例十一取黄芪86.5g、丹参21.3g、三七3.5g、降香20.6g，按实施例一的制备工艺制成浸膏，取清膏、蔗糖和糊精按l:3:l的比例，按照常规方法制成颗粒，按照常规方法灌制胶囊。权利要求1.一种中药组合物在制备治疗慢性心功能不全的药物中的用途，该组合物由下列重量百分比的原料药制备而成黄芪22.2％～66.8％，丹参11.6％～33.4％，三七2.5％～13.5％，降香14.5％～44.3％。2.如权利要求1的用途，其特征在于所述的中药组合物能改善慢性心功能不全者左心室收縮功能。3.如权利要求2的用途，其特征在于所述的中药组合物能增加慢性心功能不全者的左室射血分数。4.如权利要求2的用途，其特征在于所述的中药组合物能增加慢性心功能不全者的短轴缩短率。5.如权利要求1的用途，其特征在于所述的中药组合物能改善慢性心功能不全者的能量代谢。6.如权利要求15的任一用途，其中所述的中药组合物由下列重量百分比的原料药制备而成黄芪30.8%57.2%，丹参15.4%28.6%，三七3.5%6.5%，降香20.6%38.2%。7.如权利要求6的用途，其中所述的中药组合物由下列重量百分比的原料药制备而成黄芪44.7%，丹参26.7%，三七6.3%，降香22.3%。8.如权利要求6的用途，其中所述的中药组合物由下列重量百分比的原料药制备而成黄芪41.2%，丹参23,8%，三七4.5%，降香30.5%。全文摘要本发明涉及一种中药组合物在制备治疗慢性心功能不全的药物中的用途，该组合物由下列重量百分比的原料药制备而成黄芪22.2％～66.8％，丹参11.6％～33.4％，三七2.5％～13.5％，降香14.5％～44.3％。文档编号A61K36/537GK101239099SQ200710056720公开日2008年8月13日申请日期2007年2月6日优先权日2007年2月6日发明者吴迺峰申请人:天津天士力制药股份有限公司