专利名称：间接式免疫耐受诱导法的制作方法
技术领域：
本发明涉及免疫学技术，是一种帮助动物(包括哺乳动物和人)取得对指定 抗原的特异性免疫耐受性(以下称免疫耐受)，使该抗原在体内免于被排异的方 法，用于诱导宿主对移植物的免疫耐受、移植物对宿主免疫耐受、机体对自身抗 原的免疫耐受、以及机体对其它抗原的免疫耐受等。
背景技术：
国际国内现有的免疫耐受诱导方法，都是将拟耐受抗原直接给入拟取得免疫 耐受者的体内进行的，其基本过程为-
A抗原植入前对其采取非特异性免疫抑制措施，如放射线照射、抗淋巴 细胞血清、抗代谢药物、皮质类固醇类激素、环胞素A等的应用等，压制机体 的免疫系统，减轻对抗原的排异反应能力；
B抗原植入；
C植入后继续前述非特异性免疫抑制措施，甚至终身。 直接诱导免疫耐受的方法存在以下问题
A取得的免疫耐受性的难度大多数情况下，拟取得免疫耐受者的免疫系统 均趋于成熟，诱导免疫耐受很困难；
B取得的免疫耐受性不完全为外周耐受，受个体差异、抗原相容性、机体 的免疫状态等的不同，几乎无一例外地存在不同程度的排异性；
C免疫抑制的副反应严重A机体的抵抗力下降，易受病原体的侵袭；B机 体其它生理机能改变，如皮质类固醇类激素可引发机体的代谢紊乱；C经济负担 较大，且为长期负担；
技术内容
本发明即是针对上述存在问题，提出的间接式免疫耐受诱导法，特征在于 首先用拟耐受抗原在拟取得免疫耐受者体外的孵育环境中诱导免疫耐受的发生， 再将所产生的耐受细胞输入拟取得免疫耐受者体内，使之过继性取得对拟耐受抗 原的免疫耐受性，步骤包含
A将拟取得免疫耐受者的造血细胞，如造血干细胞，植入一个能保障造血细 胞增殖分化成熟，并含有拟耐受抗原的孵育环境中，令植入的造血细胞在此孵育 环境中建立一个对拟耐受抗原耐受的"派出免疫系"；
B将该"派出免疫系"或其有效组分(如T淋巴细胞或T淋巴细胞亚群)， 从孵育环境中取出，回输给拟取得免疫耐受者，籍以将免疫耐受性回传，使拟取 得免疫耐受者取得对拟耐受抗原的免疫耐受。
上述孵育环境3包括人工孵育环境(如孵育器)和自然孵育环境(如异体， 包含同种异体和异种异体，特别是幼稚的异体，尤其是胚胎状态的异体) 与现有的直接诱导免疫耐受的方法相比，本发明具有如下优点 A取得的免疫耐受性的难度低a如在胚胎时期，是免疫耐受最易诱导的时
期；b又如在胚胎时期，可为植入的造血细胞提供了良好的增殖分化成熟环境； B取得的免疫耐受性完全如在胚胎期取得的免疫耐受为中枢性免疫耐受； C免疫抑制的副反应弱A回输的免疫细胞为自身细胞，不会被拟取得免疫
耐受者排异；B为回输的"派出免疫系"取得更强势的地位而釆取的措施免疫抑
制措施，均为选择性和临时性的。
具体实施例方式
以下结合本发明的实施例，对本发明的内容和技术特征作进一步的说明。
实施例一宿主对移植物的免疫耐g,用于一般器官移植(如肾移植) 甲动物与乙动物为异物动物，甲为马，乙为骡。马1拟接受骡2的肾脏。 取马1的造血干细胞11，在宫腔镜的辅助下，注入处于胚胎期的骡2的脐 血管；
注入的马造血干细胞ll,在骡体内增殖分化，建立起一个对骡抗原21耐受 的"派出免疫系"12;
骡2娩出并生长一段时期后，将"派出免疫系"12从骡体内分离出来，回 输给马，籍以将免疫耐受性回传；回输前，对马1行亚致死量的X线照射； 将骡的肾脏移植给马。
实施例二移植物与宿主相互免疫耐受(胚胎式)
甲动物与乙动物为同种动物，均为猪。猪2的造血干细胞21移植给猪1。 取猪1的骨髓细胞11，在除去其间混杂的成熟淋巴细胞后，给入胚胎期的
猪2中，建立一个对猪2免疫耐受的"派出免疫系"12;猪2则对猪1形成"天
然"免疫耐受；
待猪2娩出并生长一段时期后，将"派出免疫系"12的有效组分，如T淋 巴细胞121，从猪2体内分离出来，回输给猪l。回输前，用抗T淋巴细胞血清 处理猪1;
将猪2的白细胞22和造血干细胞21输注给猪1 。
T淋巴细胞121作用于猪1的免疫系统，使之免于发生宿主抗移植物反应； 白细胞22作用于作用于猪2造血干细胞21所分化的免疫系统，使之免于发生移 植物抗宿主反应。
实施例三移植物与宿主相互免疫耐受(孵育器式)
甲动物1和乙动物2为同种动物，均为人。人2的骨髓细胞移植给人1。
取人l的造血干细胞ll，以及人2的造血干细胞21,共同植入一个含有同 种动物胚胎期胸腺和骨髓组织，以及其它多种细胞因子的孵育器3中，两组造血 干细胞在孵育器中分别建立一个彼此相互耐受的"派出免疫系"12和22;
将12和22从孵育器3中取出，回输给人l;
将人2的骨髓细胞23输给人1 。
12作用于人1的免疫系统，使之免于发生宿主抗移植物反应；22作用于输
入的人2骨髓细胞23所分化的免疫系统，使之免于发生移植物抗宿主反应。
实施例四对自身抗原的免疫耐受(孵育器式) 某动物对其自身抗原(如甲状腺蛋白)产生排异。
取该动物1的造血干细胞11，植入一个含有其自身抗原(如甲状腺蛋白) 的孵育器内，建立一个对其自身抗原(如甲状腺蛋白)免疫耐受的"派出免疫系" 12;
将12从孵育器内分离出来，回输给该动物l。回输前，用抗T淋巴细胞血 清处理该动物1。
实施例五对其它抗原的免疫耐受(孵育器式)
某动物对某种微生物抗原产生超强免疫反应，对机体造成不良后果。 取该动物1的造血干细胞11,植入一个含有该微生物抗原的孵育器内，建 立一个对该微生物抗原免疫耐受的"派出免疫系"12;
将12中的T淋巴细胞从孵育器内分离出来，并扩增，回输给该动物l。回 输前，用抗T淋巴细胞血清处理该动物1。
权利要求
1、一种间接式免疫耐受诱导法，用于帮助动物(包括哺乳动物和人)取得对指定抗原的特异性免疫耐受性，诱导宿主对移植物的免疫耐受、移植物对宿主免疫耐受、机体对自身抗原的免疫耐受、以及机体对其它抗原的免疫耐受等，特征在于首先用拟耐受抗原在拟取得免疫耐受者体外的孵育环境中诱导免疫耐受的发生，再将所产生的耐受细胞输入拟取得免疫耐受者体内，使之过继性取得对拟耐受抗原的免疫耐受性，步骤包含A将拟取得免疫耐受者的造血细胞，如造血干细胞，植入一个能保障造血细胞增殖分化成熟，并含有拟耐受抗原的孵育环境中，令植入的造血细胞在此孵育环境中建立一个对拟耐受抗原耐受的“派出免疫系”；B将该“派出免疫系”，或其有效组分(如T淋巴细胞或T淋巴细胞亚群)，从孵育环境中取出，回输给拟取得免疫耐受者，籍以将免疫耐受性回传，使拟取得免疫耐受者取得对拟耐受抗原的免疫耐受。
2、 如权利要求1所述的孵育环境，包括人工孵育环境(如孵育器)和自然 孵育环境(如异体)，特征在于其能够满足植入的造血细胞增殖分化，发育为成 熟的免疫系统。
3、 如权力要求2所述的异体，包括同种异体和异种异体，特别是幼稚的异 体，尤其是胚胎状态的异体。
4、 如权力要求2所述的人工孵育环境，特征在于含有幼稚动物(尤其是动 物胚胎)的胸腺和骨髓组织。
5、 如权力要求1所述的间接式免疫耐受诱导法，特征在于在"派出免疫 系"回输前，可先对拟取得免疫耐受者进行非特异的免疫抑制，包括使用抗淋巴 细胞血清或单克隆抗体、亚致死量X线照射、环胞素A应用等，以削弱其原有 免疫系统可能对将植入抗原的排异作用。
6、 如权力要求1所述的间接式免疫耐受诱导法，特征在于在"派出免疫系"回输前，可先对其或其有效组分(如T淋巴细胞或T淋巴细胞亚群)进行 扩增，以增强其传递免疫耐受的能力。
7、 如权力要求l所述的造血细胞，包括造血干细胞、除去成熟T淋巴细胞 的骨髓细胞等。
全文摘要
一种间接式免疫耐受诱导法，特征在于首先用拟耐受抗原在拟取得免疫耐受者体外的孵育环境中诱导免疫耐受的发生，再将所产生的耐受细胞输入拟取得免疫耐受者体内，使之过继性取得对拟耐受抗原的免疫耐受性，步骤包含A将拟取得免疫耐受者的造血细胞，如造血干细胞，植入一个能保障造血细胞增殖分化成熟，并含有拟耐受抗原的孵育环境中，令植入的造血细胞在此孵育环境中建立一个对拟耐受抗原耐受的“派出免疫系”；B将该“派出免疫系”或其有效组分，从孵育环境中取出，回输给拟取得免疫耐受者，籍以将免疫耐受性回传，使拟取得免疫耐受者取得对拟耐受抗原的免疫耐受。
文档编号A61K35/14GK101347457SQ20071013034
公开日2009年1月21日 申请日期2007年7月18日 优先权日2007年7月18日
发明者李伏林 申请人:李伏林