专利名称：：对肿瘤生长的抑制的制作方法对肿瘤生长的抑制本发明涉及瘤性组织的治疗方法。特别地，它涉及通过使用例如肽的致溶解化合物(lyticcompound)使肿瘤细胞溶解以诱导炎症反应的方法。通过引发炎症反应，激活了固有和获得性免疫系统的途径，促进肿瘤特异性免疫应答。这种对免疫系统的引发赋予了受试者抗相应肺瘤细胞的获得性免疫，从而抑制继发性肿瘤的生长。细胞的不受控生长和分裂可产生胂瘤。以扩散和侵袭为标准，肿瘤通常分为良性或恶性。恶性肿瘤能够入侵和破坏周围的组织。其细胞也可扩散至肿瘤原发部位之外。良性肿瘤不具有这些性质，但是良性肺瘤可发展到恶性阶段，因此治疗良性肿瘤和恶性肺瘤都可能是有益的。例如，口腔鳞状细胞肺瘤通常不被治疗，但是这种状况很快就会t艮到恶性阶段，此时就不得不通过手术将舌头部分或全部切除。此外，良性肿瘤本身可能也是不良的，特别是如果它们很大并生长在重要器官邻近，因此，也可能希望对良性肿瘤进4亍治疗由此减少了随后类似的良性肿瘤。来自恶性胂瘤的细胞从原发性肺瘤上脱离并通itjfii流或淋巴系统扩散到体内其它器官的过程被称作转移。当这些细胞达到体内新的区域时，它们可侵入组织并继续分裂，并可形成新的肿瘤。这种新的肿瘤通常被称作"继发性肺瘤"。继发性肿瘤的生长经常对受试者的健康构成威胁，因此需要开发抑制继发性肿瘤形成或生长的方法。从长期来看，由于胂瘤细胞的继续存在和之前未检测到的微转移随后的生长，晚期实体肿瘤的切除通常是无效的。在乳腺癌患者中，这一直是复发和最终造成死亡的主要原因。术后，散布的细胞经常休眠于细胞周期G0期。因此，这些非增殖性细胞经常对化疗有抗性。晚期头颈癌患者的治愈率在过去十年里并没有显著提高。这些患者中，大多数复发的病例是局部或局域性的，并以使它们难以被接近的方式存在。一个例子为局部晚期食管癌，它们通常不宜手术并且预后差。寻找抑制继发性肿瘤生长的方法最大的障碍是肿瘤是由来源于受试者自身的细胞形成的。免疫系统尽力将这些细胞识别为异常细胞。外源或异常细胞的识别通常包括检测位于细胞表面上的分子以及抗原。多数肿瘤细胞具有至少一种区别于正常细胞的抗原，并且在大多数情况下所述抗原是特定的癌症类型特异性的。一些肿瘤细胞可能具有多种抗原，而其它的细胞可能只具有单一类型的抗原。细胞表面上抗原的类型、不同抗原的数目以及抗原的优势性都可能影响免疫系统将这些肿瘤细胞识别为异常的机率。多数类型的肿瘤具有的抗原非常少，或者只具有不易净皮免疫系统识别为外源性的抗原，因此它们能够逃过免疫系统的识别和破坏。因此，任何特定肿瘤类型所具有的抗原的种类和数量在确定肿瘤的"免疫原性"如何中起到重辨用。"免疫原性"意为引起免疫应答的能力，因此一种肿瘤的免疫原性越强，则它越可能被免疫系统识别并攻击。已经进行了许多尝试来帮助免疫系统抵抗肿瘤。一种早期方法包括通过对免疫系统进行一般性剌激，例如，通过施用细菌(活的或灭活的)来引发一般性免疫应答，其也可以用于抵抗肿瘤。这也被称为非特异性免疫。最近的一些针对帮助免疫系统特异性识别肺瘤特异性抗原的方法包括对受试者施用肿瘤特异性抗原，特别是与佐剂(已知可引起或提高免疫应答的物质)联合施用。该方法需务本外分离和/或合成抗原，这不仅昂贵而且耗时。一种可以降低不同类型癌症复发率的替代方法为釆用免疫治疗。大多数癌症在使用免疫治疗时都存在一些困难。通常并未鉴定出所有的肿瘤特异性抗原，例如，乳腺癌中，所发现的已知抗原占总肿瘤的20%-30%。因此，^使用肿瘤特异性疫苗只取得了有限的成功。仍然非常需要抑制继发性胂瘤生长或形成的替代方法。本发明人令人惊奇的发现，致溶解化合物可用于溶解患者体内第一肿瘤的细胞，并因此抑制所述患者体内继发肿瘤的生长。如本文实施例中所述，使用致溶解肽证明了此效果。其它一些致溶解化合物是本领域已知的，其实例包括去污剂如TritonX-100和酸如盐酸。基于其溶解肿瘤细胞的能力，在本领域中已经提出致溶解肽用于肿瘤治疗的用途(Rissoetal"Cell.Immunol.[1998107和WO01/19852)。有关这种致溶解肽不仅用于治疗第一肿瘤、还抑制第二肿瘤生长的发现是完全出人意料。不受理论的限制，怀疑第一肿瘤的溶解引发了炎症反应。所述溶解可6造成癌细胞特异性抗原的暴露。"暴露，，意为使得抗原可以被免疫系统识别为外源物质。因此"暴露，，包括使抗原更容易被免疫系统接近和/或使其以一种更可能被免疫系统识别的方式呈递给免疫系统，例如，它是在细胞片段上，而不是在整个细胞上。因此，术语"暴露"包括从细胞间隙内释放抗原，但也包括任何细胞结构上的其它变化，使得抗原变得更容易被免疫系统识别。暴露的抗原可激活免疫系统中特异性B细胞和/或T细胞并使得这些细胞其中一些成熟成为记忆细胞。记忆细胞通常具有很长的寿命，并且当它们第二次或又一次遇到相同抗原时，它们比处女型(virgin)B或T细胞更容易应答。该产生和维持特异记忆细胞的过程通常被称作"免疫记忆"或"获得性免疫"。因此，本发明的发明人出人意料的发现致溶解试剂(例如肽)可用来i秀导抗肿瘤的免疫记忆。本发明的发明人已证实通过用致溶解化合物成功治疗肿瘤后，就观察不到第二肺瘤的生长了。在模式实验中，来自先前用致溶解化合物成功治疗(治愈)的动物的脾(免疫)细胞的过继转移显示出赋予未治疗的接受者以特异性免疫。因此，接受来自之前治愈小鼠的脾细胞的接受者能够消除^的肿瘤，而接受来自未处理(naive)小鼠的脾细胞的接受者不能消除植入的胂瘤。这些结果证明保护性作用是由于先前成功的肿瘤消除赋予了对随后肿瘤的长期的特异性免疫，特别是随后的同类型肿瘤。而且，肿瘤通常诱导一般性免疫抑制，因此本发明中所观察到的免疫系统的引发是非常有利的。因此，一方面本发明提供了在受试者中诱导获得性免疫的方法，所述方法包括对所述受试者施用有效量的致溶解化合物，其中所述致溶解化合物通过第一肺瘤内细胞的溶解产生抑制第二肿瘤生长或形成的免疫应答。简单的说，本发明提供了在受试者中诱导获得性免疫的方法，它包括对所述受试者施用有效量的致溶解化合物。在本文中，获得性免疫应被理解为抗肺瘤生长或形成的免疫，特别是抗与所述致溶解化合物直接靶向溶解的肿瘤相同或相似的肿瘤。因此，致溶解化合物被设计或选择成用来溶解肿瘤细胞。从另一个角度看，本发明提供了治疗受试者中癌症的方法，它包括对所述受试者施用有效量的致溶解化合物，其中所述的致溶解化合物通过第一肺瘤内细胞的溶解而产生抑制第二肿瘤生长或形成的免疫应答。再从另一方面看，本发明的发明者们发现致溶解化合物可用于第一肿瘤的治疗以产生抗第二肺瘤的疫苗。疫苗是原位产生的，即"i秀导免疫应答和产生免疫记忆的抗原由于胂瘤细胞的溶解而被呈递给免疫系统。在对受试者施用例如肽的致溶解化合物而原位(体内)产生抗原的这类疫苗与现有技术中的疫苗完全不同，后者通常是在实验室(即体外)制备好抗原然后再施用于受试者。因此，另一个方面本发明提供了致溶解化合物在制备用作抗肿瘤生长或发展疫苗的药剂中的用途。"生长和n，包括肿瘤的形成。本发明还提供了通过对所述患者施用致溶解化合物(优选致溶解肽)来对受试者进行免疫接种以抗肿瘤生长或发展的方法。所提及的"疫苗"和"免疫接种"均表示预防作用，因此，尽管可能有对已有肿瘤的有利的直接治疗方法，但一个重要动机是预防或减轻未来的肿瘤形成、生长或发展。不受理论的限制，相信溶解事件诱导炎症反应，其对于第一肿瘤的消除以及诱导抗一个或多个第二肿瘤的获得性免疫保护来说似乎非常重要。本发明人的发现证明在同系动物模型中(具有完整的免疫系统)经常可以成功使得第一肿瘤完全消退，而在棵鼠(不具有功能性免疫系统)中，对第一肿瘤的生长抑制无法超过50%。因此，溶解第一肿瘤的一些部分可能就足够了，其可促进对肿瘤剩余细胞的定向免疫应答，以及诱导抗继发性肿瘤的保护性抗肿瘤记忆。因此，在受试者体内产生抗肿瘤的获得性免疫，特别是抗与被溶解的第一肿瘤类型相同或相似的肿瘤。本发明还提供了致溶解化合物在制备诱导受试者体内产生获得性免疫的药剂中的用途。特别地，本发明提供了致溶解化合物在制备诱导受试者体内产生获得性免疫的药剂中的用途，其中所述致溶解化合物通过第一肿瘤中细胞的溶解而产生抑制第二肿瘤生长或形成的免疫应答。本发明也提供了用于诱导受试者体内产生获得性免疫的致溶解化合物。更特别地，本发明提供了用于诱导受试者产生获得性免疫的致溶解化合物，其中所述致溶解化合物通过第一肿瘤中细胞的溶解而产生抑制第二肿瘤生长或形成的免疫应答。因此，"第一肿瘤"是指已在受试者内鉴定的并打算通过使其直接且立即溶解来治疗的肿瘤。第一肺瘤通常是原发性肿瘤，即在受试者体内发生和/或被鉴定出来的此类型的第一个肿瘤。然而，所述"第一肿瘤"实际上也可能是继发性肿瘤。这种情况可能出现在原发性肿瘤从受试者中除去(手术或其它方法)的例子中。因此，"第一肿瘤"并不意P未着必须是在受试者体内发生的第一个肿瘤；术语"第一"的使用与本发明的方法中各事件发生的顺序有关。通常会将致溶解化合物局部施用于第一肿瘤，例如，注射入该第一肿瘤或其紧邻部位，尽管全身性给药也在预期中。注射液可例如以常规方式生产，如添加例如对羟基苯甲酸酯之类的防腐剂或例如EDTA的稳定剂。随后将所述溶液填充入注射小瓶或安瓿中。本发明方法和用途的一个目标是产生免疫记忆并由此抑制经受体内第一肿瘤溶解的患者中第二肿瘤的生长或形成。生长抑制包括肿瘤的消退，即尺寸减小，优选减小到肺瘤完全消失和/或不再能检测到的程度。抑制也包括预防第二肿瘤的形成。因此，才艮据本发明的有效治疗可意为患者在对第一肿瘤进行初始溶解治疗之后不再发展出可检测到的肿瘤。生长抑制还包括降低肿瘤生长的正常速度，减緩或防止实体肿瘤内血管网络的建立。术语"第二肺瘤"通常是指继发性胖瘤，也称作转移，也就是由来自其它肿瘤并扩散到新部位的细胞m成的肿瘤。然而，在本发明的范围内，术语"第二钟瘤"也可包括原发性肺瘤。这种情况出现在两个或更多肺瘤共存时，例如两个独立出现的原发性肺瘤，或一个原发性和一个继发性肿瘤并且其中直接用致溶解肽治疗所述继发性胂瘤以诱导抗该类肿瘤(包括原发性肿瘤)的免疫记忆。术语"第二，，肺瘤包括字面上的第二个和任何随后或另外的肿瘤。因此，可根据本发明抑制数个继发性肿瘤的生长。所述"第二"肿瘤也可能是在初始治疗后复发的肿瘤，其中所述的初始治疗可能采用常规治疗(即不一定通过溶解)。所述笫一胂瘤和第二肺瘤优选具有相似的免疫原性，优选所述第一肿瘤和第二肿瘤是相同类型的癌症。应该理解的是，在任何给定的肿瘤中，并非所有的细胞都具有相同的表型，因此肿瘤的各个细胞可能具有不同的抗原。这可能会导致溶解后暴露出大量抗原，并可能提供抗多种癌细胞类型的免疫记忆。由于对免疫记忆的^l"导，如上所讨论，在施用致溶解化合物时受试者中可能不存在"第二肿瘤"或至少检测不到。因为最初的溶解事件"引发"了受试者并激活了免疫系统，因此认为产生了原位癌症疫苗是恰当的。整篇文章中，除非文中另有清楚说明，任何前面没有"第一"或"第二"修饰的术语"肿瘤"都应被理解为适用于第一和第二肿瘤。第一肿瘤的"溶解，，应被理解为意味着所述肿瘤一个或多个细胞的溶解。因此并不需要整个肺瘤溶解。本文所用的"溶解"包括细胞的部分和完全溶解。部分溶解意味着已充分地使细胞外膜去稳定化而造成细胞成分从细胞内泄漏和/或造成外膜的部分从细胞上脱离下来。抗原呈递并不要求肿瘤细胞完全破碎。优选的，肿瘤选自'淋巴瘤、癌瘤(carcinoma)和肉瘤，最优选B细胞淋巴瘤。黑色素瘤也涵盖在内。总的来说，肿瘤是天然发生的、病理性肺瘤；如上所述，良性胂瘤可以是耙标。本发明另一个优选应用是良性肿瘤的治疗，例如，口腔上皮细胞良性肿瘤。以前，这类肺瘤在最初确诊后可能没有进行治疗，而是"观察并等待"一段时间。通过对该肿瘤的早期治疗，可能会阻止它向恶性肿瘤转化的过程。对化疗有抗性的良性肿瘤特别适合作为目标。本发明并不涉及化学诱导的肿瘤。"化学诱导肿瘤"是指由人类干预，通常是用于研究目的而故意导致产生的肿瘤。这些属于"非天然肿瘤"。化学诱导的肿瘤的一个实例是由曱基胆蒽诱导的MethA纤维肉瘤。因此本文中所涉及的所有肿瘤应排除这类化学诱导肿瘤。在并非任何有意造成肿瘤发生的情况下由于暴露于环境化学品而在受试者体内产生的肿瘤不在"化学诱导肿瘤"的定义范围之内，因此本发明涵盖了这些肿瘤。"环境化学品，，是指受试者可以自然接触到的任何化学品，例如空气传播的、7JC传播的和/或食品传播的化学品，这些化学品通常都以低剂量存在。10受试者可能是任何人或非人动物，优选哺乳动物，最优选人。"致溶解化合物"是指任何能够造成动物细胞溶解的化合物。优选地，致溶解化合物对肺瘤细胞具有相当高的特异性，也就是与相当的健康细胞相比，它会优先溶解肿瘤细胞，从而使受试者施用化合物所经受的副作用最小。致溶解化合物优选地是肽。合适的致溶解肽是本领域已知的，其包括例如在WO00/12541、WO00/12542、WO01/19852和WO01/66147中以及在下列文献中所描述的PapoN,ShaharMEisenbachL，ShaiY."AnovellyticpeptidecomposedofDL-aminoacidsselectivelykillscancercellsinculture肌dinmice"./及V/C%ctw2003;278(23):21028匪23。PapoN,Bra皿steinA，EshharZjShaiY.SuppressionofhumanprostatetumorgrowthinmicebyacytolyticD-,L-aminoAcidPeptide:membranelysis,increasednecrosis,andinhibitionofprostate~specificantigensecretion.Clawm*W^2004;64(16):5779-86。LeuschnerC，HanselW.Membranedisruptinglyticpeptidesforcancertreatments.C"iri^flf附"es2004;10(19):2299-310。JohnstoneSA,GdmonK,MayerLD,HancockRE,BallyMB./"v/加characterizationoftheanticanceractivityofmembrane-activecationicpeptides.I.Peptide國mediatedcytotoxicityandpeptide-enhancedcytotoxicactivityofdoxorubicinagainstwild-typeandp-glycoprotdnover-expressingtumorcelllines.^4wftVwicerDrwgDra.2000;15:151-60以及SelstedME,NovotnyMJ，MorrisWL,TangYQ,SmithW,C函rJS.Indolicidin,anovelbactericidaltridecapeptideamidefromneutrophils./Cte1992;267(7):4292-5。致溶解肽作为致溶解剂是特别优选的。通常它们的半衰期较短，也就是说，它们通常在溶解细胞之后很快会分解，例如由于从细胞内释放的蛋白酶和类似的物质所致。半衰期短会降低全身毒性的风险，并且因此可能具有优势，但是在一些情况下更长的半衰期可能合乎需要。肽的半衰期可能被操控，也就是根据需要而增长或缩短。例如，肽的半衰期可以通过引入D-氨基酸和/或修饰C-末端和/或N-末端来延长。另一类优选的致溶解化合物是已知或预测的致溶解肽的拟肽。目前在该领域中用具有在功能上相当的活性的拟肽取代基于肽或蛋白质的活性剂如治疗性肽。通常，这类化合物可以简单的用替代性的线性柔性主链例如(-C(R)NHCO)-n或(-C(R)CH2CH2)-n或者非线性主链(例如基于环己烷稠环结构的一类物质)替换肽的(-C(R)CONH)-n主链。除了主链的变化，侧链官能团(原肽中的侧链)以相似的方式存在，使得该化合物具有相似的溶解活力。已知有各种分子文库和组合化学技术，它们可用于通过标准技术鉴定、选择和/或合成这类化合物(Kieber-Emons,T.etal.CurrentOpinioninBiotechnology19978:435-441)。所述肽通常的长度是至少3个氨基酸，例如4-30个，优选长5-30个氨基酸，优选长7-25个氨基酸，并且会带有一个或多个，优选2-8个，更优选4-8个正电荷。优选的，所述肽包括大的，例如4个或更多个，优选7个或更多非氢原子的亲脂性基团，这些基团4皮认为与细胞膜相互作用并有助于溶解，优选地所述肽^^有2-6个这样的基团。在一个优选实施方案中，致溶解肽包含至少一个联苯基丙氨酸(Bip)和/或至少一个二苯基丙氨酸(Dip)残基。更优选的肽包含l-5个，例如2-4个色氨酸残基。优选地，致溶解肽不是乳铁蛋白的衍生肽，更特别地，它优选不是环状乳铁蛋白(LFB，其一级结构为FKCRRWQWRMKKLGAPSrrCWRAF)。肽或拟肽类(特别是上面所提到的那些肽)的酯、酰胺或环状f汴生物也是本发明所预期的。致溶解肽或拟肽(或其酯、酰胺或环状衍生物)可以其游离形式或者例如以缀合物或盐的形式使用。所述盐优选是可药用盐，例如醋酸盐。在一个优选实施方案中，所述致溶解肽或拟肽以三氟乙酸(TFA)盐的形式存在。三氟乙酸盐在色谱技术中经常使用，用于在肽合成之后对肽的纯化。非肽类致溶解试剂优选肿瘤内递送。致溶解肽可以通过这种方式释放，但因其与具有相同组织类型的健康细胞相比对肿瘤细胞的选择性，它们也可能全身性递送。在这方面具有较高选择性的致溶解肽是优选的。另外，所有的致溶解试剂可能通过其它方式靶向第一肿瘤的位点，例如采用脂质体递送，糊精缀合，或其它合适的载体溶液。因此，非肽致溶解试剂也可12能采用全身性递送。优选地，所述致溶解化合物本身是弱免疫原性的，更优选完全没有免疫原性，即它本身不引起任何抗体反应。下面将参照下列非限定性的实施例对本发明进行描述，其中图l表示用不同肽治疗后Balb/c小鼠中A20B细胞淋巴瘤的itA。图2表示用不同肽成功治疗A20实体肿瘤一个月后重新接种A20细胞的小鼠中肺瘤的t艮。图3表示在已成功用Mod28或Mod39治疗过的动物中重新接种A-20细胞的效果。图4表示在已成功用C12治疗过的动物中重新接种A-20细胞的效果。字母a)和b)表示不同的小鼠。图5表示在成功用Mod28或Mod39治疗过的动物中重新接种A-20细胞的效果。阳性对照表明在未用肽预治疗的小鼠中A20细胞的生长情况。图6表示NDDOl对C26结肠癌的初始作用。图7表示在成功用NDDOl治疗过的小鼠中重新接种C26细胞的效果。图8表示相比于初次实验的(naiVe)未处理小鼠，来自成功治愈的小鼠(用Mod39致溶解肽治疗)的特异性抗A20癌症免疫的过继转移。接受来自之前治疗过的小鼠的脾脏细胞之接受者能够排斥^的肿瘤，而接受来自未处理(naive)小鼠的脾脏细胞之接受者不能排斥^v的肿瘤。实施例实施例1a)同系Balb/c小鼠作为模型系统使用。通过皮下注射用A20B细胞淋巴母细胞瘤的细胞(5xl(^个)接种小鼠。使肿瘤生长至20-30mii^大小。小鼠被随机分为6-8只一组，并用选自下表l的肽直接治疗肿瘤。所述治疗包括一天一次注射50jil的肽溶液以提供0.5mg的肽，连续注射三天。通过测量肿瘤大小来跟踪肺瘤的t艮。从图1中可以看出，对照肿瘤(未治疗)在15天内表现出尺寸持续增加。用表l中的肽治疗肿瘤可以造成肿瘤尺寸减小，从而使得肺瘤^Jf见上完全消失。表1:狀<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>bip-联苯基丙氨酸dip二二苯基丙氨酸b)重新用A20B细胞淋巴母细胞肿瘤(5xl(^个)接种如上所述成功消除A20B细胞淋巴母细胞肿瘤的小鼠。未治疗的小鼠作为阴性对照。不再进一步施用肽或任何其它抗肿瘤剂。结果如图2所示。当未治疗的小鼠接种了肿瘤细胞，发生了明显的肿瘤生长。当先前用cLfinB治疗过的小鼠再用肺瘤细胞接种时，发生了一些初始肿瘤生长，但是在第l天其中的肿瘤就明显小于对照小鼠中的肿瘤，并且没有进一步的生长发生。甚至注意到某些肿瘤消退。用肿瘤细胞接种先前用C12或L-Mod39治疗过的小鼠，开始会出现非常小的肺瘤，但分别在第6天或第10天后完全消失。实施例2在同系Balb/c小鼠中，研究了三种不同肽抗A20B细胞淋巴母细胞肿瘤的抗肿瘤活性。如实施例1中定义，所述肽是Model28、Model39和C12。将肿瘤细胞(5xl(^个)皮下接种于小鼠腹部，肿瘤在用肽治疗之前生长至合适的尺寸(20-30mm2)。小鼠随机分成5-6只一组，并一天一次用0.5mg/50nl肽对肿瘤进行胂瘤内治疗，连续三天。用电子卡尺测量肿瘤尺寸(长和宽的平均)。三周后，成功治疗的小鼠(即表现出完全肿瘤消退)，在如上所述的相似条件下接受相同数量和相同类型的肺瘤细胞。结果如图3-5所示。实施例3在同系Balb/c小鼠中建立的小鼠C26结肠癌模型中，对Ad-LFB14-31A2、3、6、10、17、F7、R4、Kll、L14-NH2、(NDDOl)等肽的抗肿瘤活性进行测试。将C26细胞(50nl中5xl06个细胞)皮下接种于小鼠(3只)腹部，肿瘤在开始治疗之前生长至合适的尺寸(20-30mm2)。在第7天时，一天一次用0.5mg/50jil肽对胂瘤进行胂瘤内治疗，连续三天，并跟踪肿瘤的iU艮。在一只小鼠中，获得了肿瘤完全消退(图6)。在该小鼠中，在肽治疗三周后重新皮下接种C26肺瘤细胞(50^1中5xl(^个细胞)。在未经任何其它治疗的情况下，肿瘤在初始生长后消退(图7)，表明所述小鼠得到了获得性免疫应答。实施例4初始肿瘤治疗选择同系Balb/c小鼠作为模型系统用于研究由致溶解肽(H2N-WKKWdipKKWK-COOH-Mod39)初始治疗所赋予的抗A20B细胞淋巴母细胞瘤的长期抗胂瘤免疫力。在小鼠腹部皮下接种肿瘤细胞(5乂106个)，肿瘤在开始治疗之前生长至合适尺寸(20-30mm2)。一天一次用0.5mg/50nl肽对小鼠进行肺瘤内治疗，连续三天，并跟踪胂瘤的t艮。在肿瘤消除后3周，选择成功治疗的小鼠作为脾脏细胞过继转移的M(经治疗供体)。脾脏细胞转移第一天-对未处理过的(naive)接受者小鼠进行500cGy的全身照射(TotalBodyIrradiation,TBI),以准备接受来自脾脏供体的免疫细胞的过继转移。第二天-如前所述方法制备来自经治疗供体小鼠和未处理小鼠的不含红细胞的脾细胞单细胞悬液(Ward,B.Aetal"J.ImmunologyAughust.1988,vol141p1047)，除了其中用无菌7JC代替氯化铵以除去红细胞。根据BogenB.etal"EurJImmunology,May1983,vol13(5),pages353-359中所描述的方法，将供体脾细胞(大约4000万个)静脉内注射至受体小鼠的尾静脉中。15第三天-将肿瘤细胞(5xl(^个)皮下接种于小鼠腹部，并通过用卡尺测量肿瘤的大小来追踪其生长。结果表明从先前成功治疗的小鼠中转移的免疫细胞使接受小鼠获得对相同类型肿瘤的免疫(图8-"治愈"组)。相反地，从未处理供体小鼠中转移免疫细胞后，植入的肿瘤并未减小(图8-"未处理(na'ive)"组)。这些结果表明保护效果是由于先前成功的肿瘤消除，所述肿瘤消除赋予了对该肿瘤类型的长期的特异性免疫力。实施例l-3采用所提及肽的三氟乙酸(TFA)盐形式来实施。权利要求1.致溶解化合物在制备用于在受试者中诱导抗肿瘤生长或形成的获得性免疫之药剂中的用途。2.致溶解化合物在制备用作在受试者中抗肿瘤生长或形成的疫苗之药剂中的用途。3.根据权利要求1或2的用途，其中所述致溶解化合物通过溶解第一肿瘤的细胞产生抑制第二肿瘤形成、生长或发展的免疫应答。4.根据权利要求1到3中任意一项的用途，其中所述致溶解化合物为肽。5.根据权利要求4的用途，其中所述肽的长度是至少3个氨基酸，并且带有一个或多个正电荷。6.根据权利要求4或5的用途，其中所述肽包含大的亲脂性基团。7.根据权利要求6的用途，其中所述大的亲脂性基团具有7个或更多的非氢原子。8.根据权利要求7的用途，其中所述致溶解肽包含至少一个联苯基丙氨酸(Bip)和/或至少一个二苯基丙氨酸(Dip)残基和/或1-5个色氨酸残基。9.根据权利要求1到3中任意一项的用途，其中所述致溶解化合物为拟肽。10.根据权利要求1到9中任意一项的用途，其中肿瘤内递送所述致溶解化合物。11.根据权利要求1到10中任意一项的用途，其中所述生长抑制是肿瘤的消退。12.根据权利要求1到11中任意一项的用途，其中所述生长抑制包括防止第二胂瘤的形成。13.根据权利要求1到12中任意一项的用途，其中所述第二肿瘤是继发性肺瘤。14.根据权利要求1到13中任意一项的用途，其中所述第一肿瘤和所述第二肺瘤具有相似的免疫原性。15.根据权利要求14的用途，其中所述第一肿瘤和所述第二肿瘤的癌症类型相同。16.根据权利要求l到15中任意一项的用途，其中所述肿瘤选自，淋巴瘤、癌瘤和肉瘤。17.根据权利要求1到15中任意一项的用途，其中所述肿瘤为良性肿瘤。18.根据先前任意一项权利要求中的用途，其中所述受试者为人。19.在受试者中诱导抗肿瘤形成、生长或发展的获得性免疫的方法，所述方法包括对所述受试者施用有效量的致溶解化合物。20.对受试者进行免疫接种以抵御肿瘤形成、生长或发展的方法，所述方法包括对所述受试者施用有效量的致溶解化合物。21.根据权利要求19或20的方法，其中所述致溶解化合物通过溶解第一肿瘤中细胞产生抑制第二肿瘤生长或形成的免疫应答。22.治疗受试者癌症的方法，所述方法包括对所述受试者施用有效量的致溶解化合物，其中所述致溶解化合物通过溶解第一肿瘤中细胞产生抑制第二肿瘤生长或形成的免疫应答。23.根据权利要求19到22中任意一项的方法，其中所述致溶解化合物为肽。24.根据权利要求23的方法，其中所述肽的长度是至少3个氨基酸，并且带有一个或多个正电荷。25.根据权利要求23或24的方法，其中所述肽包括大的亲脂性基团。26.根据权利要求25的方法，其中所述大的亲脂性基团具有7个或更多的非氢原子。27.根据权利要求26的方法，其中所述的致溶解肽包含至少一个联苯基丙氨酸(Bip)和/或至少一个二苯基丙氨酸(Dip)残基和/或1-5个色氨酸残基。28.根据权利要求19到22中任意一项的方法，其中所述致溶解化合物为拟肽。29.根据权利要求19到28中任意一项的方法，其中肺瘤内递送所述致溶解化合物。30.根据权利要求21到29中任意一项的方法，其中所述生长抑制是肿瘤的消退。31.根据权利要求21到30中任意一项的方法，其中所述生长抑制包括防止第二肺瘤的形成。32.根据权利要求21到31中任意一项的方法，其中所述第二肿瘤为继发性肺瘤。33.根据权利要求21到32中任意一项的方法，其中所述第一肿瘤和所述第二肺瘤具有相似的免疫原性。34.根据权利要求33中的方法，其中所述第一肿瘤和所述第二肿瘤的癌症类型相同。35.根据权利要求19到34中任意一项的方法，其中所述肿瘤选自'淋巴瘤、癌瘤和肉瘤。36.根据权利要求19到34中任意一项的方法，其中所述肿瘤为良性肿瘤。37.才艮据权利要求19到36中任意一项的方法，其中所述受试者为人。全文摘要本发明提供了一种致溶解化合物特别是一种致溶解肽在制备用于在受试者中诱导抗肿瘤生长或形成的获得性免疫之药剂中的用途，以及一种癌症治疗和免疫接种的方法。文档编号A61K38/16GK101466391SQ200780015435公开日2009年6月24日申请日期2007年3月21日优先权日2006年3月21日发明者利夫·托内·埃利亚森,厄于斯泰因·雷克达尔,巴尔杜尔·斯文比约恩松,格尔德·贝格,约翰·西居尔·斯文森申请人:莱特克斯生物制药股份有限公司