专利名称：：具有止痛活性并因此用于治疗或预防疼痛的吡唑基衍生物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及吡唑衍生物或其可药用盐的新用途，发现这些吡唑基衍生物具有止痛活性(analgesicactivity),因而可用于治疗或预防人体或动物体的疼痛病症，例如在制备用于治疗或预防温血动物例如人的药物中的用途。
背景技术：
：当前疼痛病症的治疗方案所用的化合物利用非常有限范围的药理学机理。一类化合物，即阿片样物质，刺激内源性内啡肽系统；这类物质的实例有吗啡。阿片样物质类的化合物具有数个限制它们用途的缺陷，例如催吐和便秘作用，以及对呼吸能力的负面影响。它们的用途也受到它们的上瘾倾向的限制。第二类主要的止痛剂，即COX-l或COX-2类型的非甾体抗炎止痛剂，也具有诸如严重疼痛病症疗效不充分等倾向性，并且长期使用时COX-l抑制剂引起粘膜溃疡。目前使用的其它药物的止痛作用机理的特点不足和/或治疗潜力有限。受体酪氨酸激酶(RTKs)是蛋白激酶的亚家族，其在细胞信号传导中起着关键作用，并且牵涉在多种癌症相关的过程中，包括细胞增殖、存活、血管生成(angiogenesis)和转移。目前，已经识别出多达100种不同的RTKs,包括原、月几工求蛋白#目关;敫酶(tropomyosin-relatedkinases，Trks)。Trks是高亲合性受体，由一组称作神经营养因子(neurotrophins,NT)的可溶性生长因子激活。Trk受体家族拥有3个成员，即TrkA、TrkB和TrkC。在这些NT中，(i)神经生长因子(NGF)激活TrkA，(ii)脑源性生长因子(BDNF)和NT-4/5激活TrkB,以及(iii)NT3激活TrkC。各Trk受体含有胞外结构域(配体结合)、跨膜区和胞内结构域(包括激酶结构域)。当激酶与配体结合时，激酶催化自动磷酸化，并引发下游信号转导路径。Trk在其发展过程中广泛地表达在神经元组织中，其在神经元组织中Trk对这些细胞的维持和存活是至关重要的。然而，对Trk/神经营养因子轴(neurotrophinaxis)(或途径)的胚后期作用存在疑问。大量报道表明，Trk对神经系统的发育和功能均有重要的作用(Patapoutian，A.等人的综述，CWwwfOpzm'owf"脸歸6油gv，2001,11，272-280)。在过去的十年中，发表了大量将Trk信号传导与引起疼痛联系起来的文献。NGF水平在发炎后增加，并且NGF促使基础和刺激引发的感觉增敏(例^口,Safieh-Garabedianofetal.5n77\s/zJbw/Tw/o/i^armaco/ogy1995，115，1265)如mRNA水平增加所表明的，BDNF水平在发炎后于背才艮神经节中也得到增力口(Choetal.5raz'"ie"ac/71997，749,358)。对于TrkA/TrkB和它们的配体NGF/BDNTF在疼痛中的关系，有力的支持来源于利用抗体以及清除NGF或BDNF的免疫球蛋白对NGF或Trk受体的融合蛋白的研究。一些这样的研究已经表明了在诱发有炎症的动物中的止痛作用(例如，Lewin等人Jbwma/o/iVemwdewce1994,6,1903;McMahonetal.7Va/i^eMe血/"e1995，1，774)。尽管这些研究并不处理Trk受体激酶本身，但是它们表明了，对NGF或BDNF受体偶联的酪氨酸激酶的抑制也可以产生止痛作用。近期的文献也表明，利用NGF激活TrkA，产生了一些离子通道的下游增量调节，这对从发炎的神经末梢增加电信号是重要的，从而引起疼痛(例如，VR-1，Winstonetal.Pain2001，89,181;Sodiumchannels,Choietal.MolecularandCellularBiology2001，21,2695;ASIC,Mametetal.Tow腦/o/5油g/ca/C/z麵'考2003,278，48907)。NGF也被暗示为导致牛皮癣和搔痒(痒(itch))的因素，这表明TrkA抑制剂可能用于这些适应症(BritishJournalofDermatology2006,155，876)。我们已经意料不到地发现，一些吡唑衍生物通过起到TrkA和TrkB抑制剂的作用而具有有效的止痛活性。一些报道指出，对TrkA和TrkB具有高度选择性的选择性Trk酪氨酸激酶抑制剂。Cephalon描述了CEP-751、CEP-701(George,D,等人Omceri"earc/z,1999，59,2395-2401)和其它吲哚并呻唑类似物(WO0114380)作为Trk抑制剂。这表明，当将与CEP-701/751相关的生物碱K252a注射至患有胰腺炎(pancreatite)的大鼠时，生物碱K252a能够抑制机械超敏反应(Winstonetal./owma/0/尸a/"2003,4,329)。日本专利申请2003-231687披露，在4，5-位上稠合亚环烷基的吡唑基化合物起到神经营养因子受体抑制剂的作用，并且能够用作止痛剂。GlaxoSmithKline披露了一些羟吲哚化合物，这些羟吲哚化合物用作TrkA抑制剂，并且可用于治疗疼痛和癌症(W00220479，WO0220513)。图1.不同剂量时后抓重量分布。
发明内容本发明涉及选自下列的化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防疼痛的药物中的用途(S)-S-溴-N、(l-(S-氟吡啶J-基)乙基)-N、S-异丙氧基-lH-吡唑-:3-基)嘧啶-2,4-二胺；5-氯-N2-[(lS)-l-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-N4-(5-异丙氧基-lH-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；(8)-5-溴-#-(1-(3,5-二氟吡啶_2-基)乙基)-#-(5-异丙氧基-lH-吡唑冬基)嘧啶-2,4-二胺；(S)-5-氯-A^-(l-(3,5-二氟吡啶-2-基)乙基)-A^(5-异丙氧基-lH-吡唑-3-基)嘧咬-2,4-二胺；5-氟-#-[(18)-1-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-7^-(5-异丙氧基-1乐吡唑-3-基)嘧咬-2，4-二胺；(S)-A^-(l-(3,5-二氟吡啶-2-基)乙基)-5-氟-#-(5-异丙氧基-17f-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺；(S)-5-溴-7V^-(5-环丙基-1//-吡唑-3-基)-#-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)嘧啶-2,4-二胺；(S)-5-氯-A^-(5-环丙基-l/Z-吡唑-S-基)-y-(l-(5-氟吡啶-2-基)乙基)嘧啶画2,4-二胺；(S)-5-氯-V-(5-环丙基-lH-吡唑-3-基)-A^-(l-(3，5-二氟吡啶J-基)乙基)嘧啶-2,4-二胺；以及5-氯-#-[(15>1-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-#-(5-曱基-1//-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺。上述的本发明化合物可根据WO2006/123113中描述的方法进行制备。本发明化合物的合适可药用盐为，例如具有足够碱性的本发明化合物的酸加成盐，例如，与无机酸或有机酸(例如，盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、柠檬酸或马来酸)的酸加成盐。此外，具有足够酸性的本发明化合物的合适可药用盐是碱金属盐，例如钠酸或钾盐；碱土金属盐，例如钓盐或镁盐；铵盐；或与能够提供生理学可接受的阳离子的有积"碱形成的盐，例如与曱胺、二曱胺、三曱胺、哌啶、吗啉或三-(2-羟基乙基)胺形成的盐。在本发明的另一方面，本发明化合物(特别是选自实施例中任一的化合物)的合适可药用盐为与选自下述的酸形成的盐苯曱酸、2-(苯曱酰氨基)乙酸、1，2-乙二磺酸、富马酸、马来酸、扁桃酸、萘-l，5-二磺酸、磷酸、琥珀酸、硫酸或十一碳-10-烯酸(undec-10-enoicacid)。在一个方面，所述盐为磷酸盐。在另一个实施方案中，所述盐为碌u酸盐。在另一个方面，所述盐为富马酸盐。在另一个实施方案中，所述盐为马来酸盐。酸加成盐的其他实例包括乙酸盐、己二酸盐、抗坏血酸盐、苯曱酸盐、苯磺酸盐、碳酸氬盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐(camphorate)、樟脑磺酸盐(camphorsulfonate)、与胆碱形成的盐、柠檬酸盐、环己基氨基磺酸、与二亚乙基二胺形成的盐、乙磺酸盐、富马酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、半硫酸盐、2-羟基乙磺酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氬石典酸盐、羟基马来酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、曱磺酸盐、与葡甲胺形成的盐、2-萘^^黄酸盐、硝酸盐、草酸盐、朴酸盐、过;s克酸盐、苯基乙酸盐、磷酸盐、焦磷酸盐(diphosphate)、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、奎尼酸盐(quinate)、水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、氨基磺酸盐、磺胺酸盐(sulfanilate)、硫酸盐、酒石酸盐、对曱苯磺酸盐(对曱苯磺酸盐)、三氟乙酸盐和十一烷酸盐。碱式盐的实例包括铵盐，碱金属盐例如钠盐、锂盐和钾盐，碱土金属盐例如铝盐、钓盐和镁盐，与有机碱形成的盐例如二环己基胺盐、N-曱基-D-葡糖胺盐，以及与氨基酸例如精氨酸、赖氨酸和鸟氨酸形成的盐，等等。此外，碱性含氮基团可以用诸如低级烷基囟化物如曱基闺化物、乙基卣化物、丙基卣化物和丁基卣化物；二烷基硫酸盐如二曱基硫酸盐、二乙基硫酸盐、二丁基石危酸盐和二戊基硫酸盐；长链卣化物如癸基卣化物、月桂基卣化物、肉豆蔻基卣化物和硬脂基卣化物；芳烷基卣化物如千基溴化物等进行季铵化。无毒生理学上可接受的盐是优选的，但是其它盐也是可用于，例如分离或纯化产物中。盐可以通过常规方法形成，例如将游离4^形式的产物与一当量或多当量的合适酸在盐不溶于其中的溶剂或介质中反应，或者在诸如水等溶剂中反应，所述溶剂可真空除去或冷冻干燥除去，或者在合适的离子交换树脂上将已有盐的阴离子与另一种阴离子交换来分离。还应当理解的是，一些本发明化合物能够以溶剂化和非溶剂化的形式，例如水合形式存在。应当理解，本发明包括所有这些溶剂化形式。用途上述化合物或其可药用盐具有激酶抑制活性，因此它们被认为可用于治疗或预防疼痛病症，因而相信能够用于治疗人体或动物体的方法。本发明也涉及使用含有所述化合物的药物组合物，以及它们在制备用于在温血动物(例如人)中产生止痛作用的药物中的用途。本发明包括这样化合物的可药用盐或前药的用途。根据所要求保护的发明，所使用的化合物的性质期待在治疗疼痛状态，特别是用于治疗和/或预防疼痛，所述疼痛可具有各种不同的起因，包括极性疼痛以及慢性疼痛状态。实例有由化学、机械、辐射、热、感染或发炎的组织创伤或癌症所引起的疼痛。其它实例有创伤后疼痛(posttraumaticpain)、头痛(headache)和偏头痛(migraine)、各种关节炎和炎性病症如骨关节炎和类风湿性关节炎、慢性炎症相关的肌筋膜痛(myofascial)和腰背痛(lowbackpain)、骨病(boendisease)和细月包增殖(cellproliferation)如癌症(实体瘤和白血病)。使用上述化合物或可药用盐，中枢或外周源性疼痛的神经病症也可得以治疗或预防。这些疼痛病症的实例有三叉神经痛(trigeminalneuralgia)、带状疱渗后神经痛(postherpeticneuralgia,PHN)、疼痛性糖尿病单/多神经病变(painfUldiabeticmono/polyneuropathy)，以及与神经损伤、脊髓损伤、中枢性中风后疼痛(centralpoststroke)、多发性硬化、牛皮癣、搔痒和帕金森病有关的疼痛。其它疼痛可能具有内脏源性，例如由溃疡、痛经、子宫内膜异位、IBS、消化不良等引起的疼痛，并且也可用上述化合物或可药用盐治疗或预防。本发明一个实施方案涉及上述化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防疼痛的药物中的用途。本发明另一个实施方案涉及上述化合物或其可药用盐在制备用于治疗炎症性疼痛(inflammatorypain)或神经性疼痛(neuropathicpain)的药物中的用途。炎症性疼痛的进一步实施方案是慢性炎症性疼痛。在本发明的一个实施方案中，所述用途为治疗。在本发明的另一个实施方案中，所述用途为预防。在本发明的一个实施方案中，所述疼痛选自由化学、机械、辐射、热、感染或发炎的组织创伤引起的疼痛。在本发明的另一个实施方案中，所述疼痛为创伤后疼痛或由头痛和偏头痛所引起的疼痛，选自如下的关节炎和炎性病症由骨关节炎和类风湿性关节炎所引起的疼痛、慢性炎症相关的肌筋膜痛和腰背痛、骨病或细胞增殖例如癌症(实体瘤和白血病)。在本发明的进一步实施方案中，所述疼痛为中枢或外周源性的疼痛(ofcentralorperipheralorigin),所述疼痛选自由三叉神经痛、带状疱渗后神经痛(PHN)、疼痛性糖尿病单/多神经病变所引起的疼痛，以及与神经损伤、脊髓损伤、中枢性中风后疼痛、多发性硬化或帕金森氏病有关的疼痛。在本发明的一个实施方案中，所述疼痛是内脏源性的，所述疼痛选自由溃疡、痛经、子宫内膜异位、IBS、消化不良等引起的疼痛。本发明的另一个实施方案涉及在患有疼痛、(慢性)炎症性疼痛或神经性疼痛以及上述任何疼痛或面临所述疾病的病人中治疗或预防所述的疾病的方法，所述方法包括向患者给药治疗有效量的上述化合物或其可药用盐。另一个实施方案涉及用于治疗或预防疼痛、(慢性)炎症性疼痛或神经性疼痛以及上述任何疼痛的药物，所述药物含有作为活性成分的上述化合物或其可药用盐。当确定对于具体患者最合适的个体方案和剂量水平时，剂量取决于给药途径、疾病的严重性、患者的年龄和体重以及主治医师通常考虑的其它因素。本发明化合物用于治疗疼痛的有效量，是在温血动物中，特别是人中，足以緩解疼痛感觉的病症、减緩疼痛感觉的进展，或者在含有疼痛的患者中降低疼痛恶化的危险。通常，剂量会在l至1000mg活性物质/天的范围内。本发明另一个实施方案涉及上述用途，其中上述化合物的每日剂量在约0.1mg至约1000mg范围内。本发明另一个实施方案涉及上述用途，其中上述化合物的每日剂量在约1mg至约750mg范围内。本发明一个实施方案涉及上述用途，其中上述化合物的每日剂量在约1mg至约500mg范围内。术语"每日剂量"的定义如下吡唑基化合物可以以单位剂量，例如片剂或胶嚢剂每日给药一次，或者吡唑基化合物可以每日给药两次。每日剂量可以在以下描述的剂量范围内改变，并且取决于患者个体对治疗的反应。本申请中使用的术语"治疗"是指给药本发明上述化合物或可药用盐以治疗疼痛，同时当患有疼痛的患者感觉到疼痛时，緩解疼痛感觉。这意味着所述化合物可用于治疗完全或部分发展的疼痛病症，例如由化学、机械、辐射、热、感染或发炎的组织创伤或癌症所引起的疼痛。本申请中使用的术语"预防性治疗"是指可将本发明的吡唑基衍生物给药于患者，以预防疼痛发作以及减轻发作的严重性或持续时间。此外，可在疼痛发作产生完全症候或仅仅轻微症候开始前给药。药物组合物为了使用本发明化合物或其可药用盐治疗(包括预防性治疗)哺乳动物包括人，通常根据标准药物实践将所述化合物或其可药用盐配制成药物组合物。本发明一个实施方案涉及含有如上所述本发明化合物或其可药用盐和可药用助剂、稀释剂和/或载体的药物组合物在制备用于治疗或预防疼痛、慢性炎症性疼痛或神经性疼痛的药物中的用途。本发明所使用的化合物可以口服或肠胃外给药，并且可经口腔、阴道、直肠、吸入、吹入、舌下、肌内、皮下、局部、鼻内、腹膜内、胸内、静脉内、硬膜外、膜内和脑室内以及通过注入关节给药。为了从本发明的化合物制备药物组合物，可药用惰性载体可以是固体或液体。固体形式的制剂包括粉剂、片剂、可^i颗粒、月交嚢剂、扁嚢剂和栓剂。固体载体可以为一种或多种物质，其可以作为稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂或片剂崩解剂(tabletdisintegratingagents);其也可以是形成月交嚢的材泮+(encapsulatingmaterial),在粉剂中，载体为微细粉碎固体，其可以为与微细粉碎的活性组分的混合物。在片剂中，活性组分与具有必要粘合性质的载体以合适的比例混合，并压制成所需的形状和尺寸。为了制备栓剂组合物，首先熔化低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯和可可脂的混合物)，然后例如通过搅拌，在其内分散活性组分。然后将熔化的均匀混合物倒入适当尺寸的模具中并使之冷却和凝固。合适的载体/稀释剂包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、乳糖、蔗糖、果胶、糊精、淀粉、黄蓍胶、曱基纤维素、羧曱基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。液体形式的组合物包括溶液剂、混悬剂和乳液。活性化合物的无菌或丙二醇溶液可列举作为适用于肠胃外给药的实例。液体组合物也可以配制成聚乙二醇的水溶液。口服给药的水溶液可如下制备将活性成分溶于水中，然后可根据需要添加合适的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂。口服用水性混悬剂可如下制备将微细粉碎的活性成分与粘性材料一起分布在水中，所述粘性材料例如天然或合成树胶、树脂、曱基纤维素、羧基曱基纤维素钠和药物制剂领域已知的其它悬浮剂。药物制剂可以是单位剂型的形式。在这样的形式中，将制剂分成含有合适量活性成分的单位剂量。单位剂型可以是包装的制剂，该包装含有离散量的制剂，例如包装的片剂、胶嚢剂和小瓶或安瓿中的粉剂。单位剂型也可是胶嚢剂、扁嚢剂或片剂本身，或者单位剂型可以是合适数目的任何这些包装的形式。联用除了本发明化合物，本发明的药物组合物也可含有或与一种或多种对本申请所述的一种或多种疾病有治疗价值的药理学试剂共同给药(同时或依序)。本申请定义的疼痛治疗可以作为单独疗法，或者，除了本发明所用的化合物之外，可以包括给药其它的止痛剂或助剂疗法。这些疗法可包括，例如与一种或多种下述类型的疼痛减缓成分同时、单独或依序联用。a)阿片样止痛剂，例如吗啡、酚哌丙酮或芬太尼b)NSAID或COX-l或COX-2类止痛剂，例如布洛芬、萘普生、塞来考昔或乙酰基水杨酸，以及它们含有氧化一氮供应基团(nitricoxide-donatinggroup)类4以并勿。c)止痛剂佐剂，例如阿密曲替林、米帕明、度洛西汀或美西律d)NMDA拮抗剂，例如氯胺酮、美金刚胺或右美沙芬e)钠通道阻滞剂，例如利多卡因或美西律f)抗惊厥剂，例如卡马西平、托吡酯或拉莫三溱g)抗惊厥剂/止痛氨基酸，例如加巴喷丁或普加巴林h)大麻素类i)NGF或TNF-a有关的抗体生物试验体内实验当将根据本发明所使用的化合物系统给药至小鼠或大鼠时，这些化合物在如由Tonussi和Ferreira(Pain1992,48，421-427)所述的大鼠角叉菜胶实验中特别地减轻了疼痛。因此可推断出，所述化合物可用作治疗剂来緩解各种起源的疼痛。由大鼠角叉菜月交诱发的单关节炎直接向大鼠膝关节单次注射大鼠角叉菜胶，在3-4小时产生症状峰，持续l-2天，并且对通过大多数抗伤害感受药物所进行的治疗是敏感的(TonussiandFerreira，Pain1992,48,421-42"。实验步骤利用异氟烷麻醉，将50^L角叉菜胶(7.5mg/mL)从背侧注入左胫跗(踝)关节。注射导致局部炎症，该炎症在诱发后4h-6h之间增强到最大值，之后逐渐降低，并且动物呈现所述肢上的负重降低以及对该肢的防护行为。试验方法脚爪印装置(PawPrintsetup)脚爪印通道(walkway)由100x10cm路径(path)构成，所述路径在一个短端具有入口，并且在另一个末端具有出口，训练大鼠使其迅速、连续通过。所述通道具有玻璃底面，其中光通过纤维光学器件冲殳射进入一个长边缘中。采用这种形式的光投射允许在玻璃底面内视觉完全的内部反射(virtuallycompleteinternalreflection)。仅在物体接触玻璃的地方(例如大鼠脚爪放置的地方)，光在该接触点散射并产生发亮的印记(Betts，Duckworth,Eng.Med.1978，7,223-228),通过力文置在所述通道下方的广角照相才几对所述发亮的印记进行记录。发亮的光强度(0-255范围)取决于与底面接触的程度，并且随所施加的压力增强而增强(Clarke，Physiology&Behavior1995，58，415-419)。所述脚爪印装置是对由Hamers,Lankhorst，vanLaar，Veldhuis,Gispen(J.Neurotrauma2001,18，187-20l)提供的CatWalk的改进版本，并且具备计算机化的步态才全测运算法贝寸(computerizedgaitdetectionalgorithm),该法则提取几个与大鼠的步态模式(gaitpattern)和负重有关的参数。在诱发单关节炎前的一天或两天训练动物使其通过通道两次。随后在试验当天如下进行记录在大鼠角叉菜胶注射后随即进行记录和在大鼠角叉菜胶注射后3-5小时进行记录，对应于将测试化合物口服给药后2-4小时。使用下述参数进行分析每只脚爪的负重=在一只脚爪印记中的全部像素的最大光强度的总和乘以印记区域中像素的数目。脚爪部位包括许多光强度高于特定阈值(该研究中为80)的像素。在一只脚爪放置的时程内，针对每一个像素记录最大光强度值。基于负重结构，爪印运算法则选择在一次通道通过中每只脚爪中值印记。每一脚爪的负重中值构成了所有四只脚爪的负重中值结果之和的百分比。显示了两只后爪之间在负重百分比上的不同("步行疼痛(Walkingpain)")。在诱发单关节炎后60分钟给药试验化合物。数据分析显示的值为中值士SEM。利用l-WayANOVA对结果进行分析，然后通过Newman-Keuls用于比较处理组之间在给药后在每一时间点获得的数据。显著性水平设置在p〈0.05(SigmaStat⑤2.03)。结果爪印装置诱发单关节炎之前的每只脚爪的负重构成了由爪印运算法则所给出的所有脚爪负重中值结果之和的百分比，对于两只后爪分别为21.8±1.6和24.6±1.10/。(中值土SEM)。与大鼠角叉菜胶注射之前的后爪重量分布值-0.2士1.8和-2.6士1.0(中值土SEM)相比，在通过大鼠角叉菜胶诱发单关节炎3-5小时后，后爪重量分布在不同的试验时间为30.2±3.2和34.9±2.8。/。(中值士SEM),以及22.1±4.6和39.0±2.1%(中值±SEM)。图l显示了5匿氯-N2-[(lS)-l國(5画氟吡咬-2-基)乙基]-N气(5-异丙氧基-lH-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺在大鼠角叉菜胶-诱发的单关节炎中对两只后腿之间在负重分布上的效果，在脚爪印装置中进行评定。每一脚爪的负重中值构成了所有四只脚爪的负重中值结果之和的百分比。显示了两只后爪之间在负重百分比上的不同。在通过大鼠角叉菜胶诱发关节炎1小时后，通过口服来给药5-氯-N2-[(1S)-1-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-N4-(5-异丙氧基-lH-p比唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺。(每组n-8)。通过l-wayANOVA进行统计学分析，然后通过Newman-Keul方法用于全部成对多次比4交。将用5-氯"^-[(15)-1-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-:^4-(5-异丙氧基-111-吡唑-3-基)嗜啶-2,4-二胺处理的不同剂量组统计学地与用载体处理的大鼠对照组进行比较。显著性水平("设定在p0.05。与载体处理组相比，5-氯-N、[(1S)-l-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-N、5-异丙氧基-lH-吡唑-3-基)嘧咬-2，4-二胺的全部三个剂量，即30、60和120nmol/kg明显降低后爪重量分布，这两个试验都是在通过口服给药2-4小时后进行。在剂量间隔试验中，没有观察到明显的剂量依赖性。因此，剂量30[imol/kg降低两只后爪之间在负重上的不同，从在载体组中大鼠角叉菜胶后3小时时的30.2±3.2%降至9.2±4.0%,而剂量120pmol/kg将负重上的不同降低至14.9±4.4%(中值±SEM)。结论这些结果说明，所有剂量的TrkA拮抗剂5-氯-N、[(lS)-l-(5-氟吡啶-2-基)乙基]—N4-(5-异丙氧基-lH-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺(30)imol/kg,60pmol/kg和30pmol/kgp.o.)对由关节内踝注射大鼠角叉菜胶诱发的炎症性疼痛都有明显作用。使用脚爪印计算机化步态检测运算法则测量大鼠角叉菜胶诱发的降低的负重。TrkA测定模式4吏用方文大发光亲近观'J定(AmplifiedLuminescentProximityAssay)(Alphascreen)4支术(PerkinElmer,549AlbanyStreet,Boston,MA)，si"TrkA激酶活性进行测定，测定其在普通多肽底物中使合成酪氨酸残基磷酸化的能力。为了测定TrkA激酶活性，将HIS-标记的人TrkA激酶的胞内结构域(TrkA的氨基酸442-796，Swiss-Prot初级登录号P04629)在SF9细胞中表达并利用标准镍柱色谱法进行纯化。在将所述激酶与生物素化的底物和三磷酸腺酐(ATP)在室温培养20分钟后，通过加入30mM乙二胺四乙酸(EDTA)使激酶反应停止。反应在384孔微滴定板中进行，加入链霉抗生物素蛋白涂覆的供体珠子和磷酸酪氨酸特异性抗体涂覆的受体珠子利用EnVision多标签板读数器在室温培养过夜后对反应产物进行检测。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>尽管如上所述的本发明化合物的药物性质随结构变化而不同，但大体上，本发明如上所述化合物具有的活性可以ICso浓度(获得50。/。抑制时的浓度)表示或以在范围(0.01)LiM至1OpM)内的剂量表示。当在上述体外测定进行试验时，下述实施例的Trk抑制活性测定为如下IC50。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>权利要求1.选自下列的化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防疼痛的药物中的用途(S)-5-溴-N2-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；5-氯-N2-[(1S)-1-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；(S)-5-溴-N2-(1-(3，5-二氟吡啶-2-基)乙基)-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；(S)-5-氯-N2-(1-(3，5-二氟吡啶-2-基)乙基)-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；5-氟-N2-[(1S)-1-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；(S)-N2-(1-(3，5-二氟吡啶-2-基)乙基)-5-氟-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；(S)-5-溴-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)嘧啶-2，4-二胺；(S)-5-氯-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)嘧啶-2，4-二胺；(S)-5-氯-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-(1-(3，5-二氟吡啶-2-基)乙基)嘧啶-2，4-二胺；或5-氯-N2-[(1S)-1-(5-氟吡啶-2-基)乙基]-N4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺。2.权利要求l所述的用途，其中所述疼痛选自慢性炎症性疼痛或神经性疼痛。3.含有如权利要求l所定义的化合物和可药用助剂、稀释剂和/或载体的药物組合物在制备用于治疗或预防疼痛、慢性炎症性疼痛或神经性疼痛的药物中的用途。4.权利要求l-3任一项所述的用途，其中所述可药用盐为硫酸盐或马来酸盐。5.斥又利要求l-4任一项所述的用途，其中所述用途为治疗。6.权利要求l-4任一项所述的用途，其中所述用途为预防。7.权利要求l-6任一项所述用途，其中所述疼痛为由化学、机械、辐射、热、感染或发炎的组织创伤引起的疼痛。8.权利要求l-6任一项所述用途，其中所述疼痛为创伤后疼痛或由头痛和偏头痛所引起的疼痛、选自如下的关节炎和炎性病症由骨关节炎和类风湿性关节炎所引起的疼痛、慢性炎症相关的肌筋膜痛和腰背痛、骨病或癌症。9.权利要求l-6任一项所述用途，其中所述疼痛为中枢或外周源性的疼痛，选自三叉神经痛、带状疱瘆后神经痛、疼痛性糖尿病单/多神经病变，以及与神经损伤、脊髓损伤、中枢性中风后疼痛、多发性硬化或帕金森氏病有关的疼痛。10.权利要求l-6任一项所述用途，其中所述疼痛为内脏源性的疼痛，选自由溃疡、痛经、子宫内膜异位、IBS、消化不良引起的疼痛。11.权利要求1-10任一项所述的用途，其中如权利要求l定义的化合物的每日剂量在约0.1mg至约1000mg范围内。12.权利要求IO所述的用途，其中如权利要求1定义的化合物的每日剂量在约lmg至约750mg范围内。13.权利要求12所述的用途，其中如权利要求1定义的化合物的每日剂量在约lmg至约500mg范围内。14.在患有疼痛、慢性炎症性疼痛或神经性疼痛的患者中或在面临所述疾病风险的患者中治疗或预防所述疾病的方法，所述方法包括向患者给药治疗有效量的在权利要求1中定义的化合物。15.权利要求14所述的方法，其中所述疼痛选自由化学、机械、辐射、热、感染或发炎的组织创伤或癌症引起的疼痛。全文摘要本发明披露了吡唑基衍生物及其可药用盐的新用途，已经发现所述吡唑基衍生物及其可药用盐具有止痛活性，因此用于在人体或动物体中治疗或预防疼痛病症，例如用于制备用于在温血动物例如人中治疗或预防疼痛的药物。文档编号A61K31/506GK101534830SQ200780040878公开日2009年9月16日申请日期2007年10月31日优先权日2006年11月1日发明者阿尔夫·克里森申请人:阿斯利康(瑞典)有限公司