专利名称：：华佗再造丸在制备防治缺血性心脏病药物方面的用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及华佗再造丸在制备防治心肌缺血、心肌梗死缺血性心脏病药物方面的新用途。技术背景华佗再造丸与云南白药一样，是申请人独家生产的我国的中药保密品种。具有活血化瘀、化痰通络、行气止痛的功能。用于痰瘀阻络之中风恢复期和后遗症，症见半身不遂，拘挛麻木、口月l歪斜、言语不清。该药疗效确切，在国内外相关患者中享有较高声誉。但迄今为止，未见华佗再造丸在制备防治心肌缺血、心肌梗死等缺血性心脏病药物方面应用的报道。
发明内容本发明就是为了提供华佗再造丸在制备防治心肌缺血、心肌梗死等缺血性心脏病药物方面的新用途。动物实验发现，以大鼠心肌缺血再灌注所致心肌梗死模型试验，结果表明华挖再造丸对心肌梗死程度明显减轻，梗死面积减少，梗死区重量减轻，梗死区占心室及心脏百分比降低，同时血清SOD活性升高，MDA含量降低，与模型组比较均有显著性差异。对麻醉犬的试验期，华佗再造丸具有明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗死的作用，明显减轻由心外膜电图标测的心^L缺血程度G-ST);减小由心外膜电图标测的心肌缺血范围(N-ST);缩小经N-BT染色所显示的梗死区；对心肌缺血及心肌梗死引起的血清乳酸脱氢酶(LDH)的释放、肌酸激酶(CK)活性升高及血浆内皮素(ET)的活性有明显抑制作用，同时升高心肌缺血时血浆6-酮-前列环素F^(6-Keto-PGFJ和6-Keto_PGFla/TXB2的比值。华佗再造丸对正常麻醉犬心脏血流动力学、心肌耗氧量的影响，实验结果显示华佗再造丸对动脉血压、心率、标准II心电图PR间期、QRS间期、QT间期及T波等参数均无明显影响；可明显扩张冠脉，增加冠脉血流量，增加心肌供血能力；可增加心脏左室作功，增加LVSP和dp/dtmax，提高心肌活动能力，对心脏具有正性调节作用；同时可增加心输出量和心搏出量，降低总外周阻力；可明显增加心肌耗氧量，这与药物增加冠脉血流，增加心室作功，对心脏的正性调节有关。采用Born氏比浊法，观察华佗再造丸对家兔血小板聚集的影响。结果表明连续7日给家兔灌胃给药，华佗再造丸明显降低二磷酸腺苷(M)P)、花生四烯酸OU)及胶原诱导的家兔血小板聚集率(P<0.01~0.001)。提示华挖再造丸具有抑制血小板聚集的作用。华佗再造丸对大鼠体外血栓形成及血液粘度的影响。结果显示，连续7日给大鼠灌胃给药，华佗再造丸明显缩短血栓长度(P〈0.05-0.001)、减轻血栓湿重及千重(P<0.05~0.001);明显降低切变率60S-1、5S^下的全血粘度(P<0.05~0.01)。表明华挖再造丸具有抑制血栓形成及降低血液粘度的作用。总之，多项药理试验表明，华佗再造丸在心血管领域，具有多项药理作用，在制备防治心肌缺血、心肌缺血再灌注损伤、心肌梗死等缺血性心脏病药物治疗方面具有临床应用价值。本发明的实验进一步表明，相同配方的华佗再造丸的其他剂型具有相近似的疗效。本发明的实验进一步表明，华佗再造丸可以与三七、丹参、山楂等药物制成复方制剂或4关合应用。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步说明。[实施例1]华佗再造丸对大鼠心肌缺血再灌注所致心肌梗死的影响。试验材料动物Wistar种大鼠56只，II级，雄性，体重240260g。药物华佗再造丸，实验用其提取物，黑褐色稠膏，每克稠膏约相当于0.63g生药，批号060320,由广州奇星药业有限公司提供，药效学给药剂量以生药量计算(g生药/kg)。合心爽片，30mg/片，批号0501017，天津田边制药有限公司生产。通心络胶嚢，0.38g/粒，1.4g生药/g粉，批号060109,石家庄以呤药业股份有限/>司生产。试验方法动物分为7组假手术组(穿线后不结扎，给予等量生理盐水)，模型组(给予等量生理盐水)，合心爽10mg/kg组，通心络1.2g生药/kg组，华佗再造丸7、3.5、1.75g生药/kg组。药物以生理盐水配至所需浓度，给药途径为十二指肠，给药体积为4.8ml,其中华佗再造丸由于原提取浸膏药物浓度较低，7.Og/kg组给药体积为9.6ml/kg(未经稀释)。动物以戊巴比妥钠腹腔麻醉(45mg/kg)，仰位固定，切开气管，插入气管插管，接呼吸机行人工呼吸(32次/分，呼吸比值1:3);开胸，断3—4肋，打开心包膜，暴露心脏，于冠状动脉左前降支根部穿线(O号缝合线)，备结扎用，开腹，分离十二指肠，备给药用；穿线后稳定10分钟结扎，给入受试药物后关腹；40分钟后剪断结扎线，实现再灌注，#逢合胸壁，动物恢复自主呼吸。再灌注120分钟后结束试验，腹主动脉取血，测定血清SOD活性、MDA含量；心脏结扎线以下横切5片，N-BT染色(染色后色斑不明显者淘汰)，采用多媒体彩色病理图文分析系统，以固定象距测量总心肌面积及梗死心肌面积，观察心肌梗死程度；结果进行统计学处理(t检验)。试验结果1.对心肌梗死程度的影响。结果见表l。表1.华佗再造丸对心肌梗死程度的影响(X土SD)分组剂量生线n心月几总面积mm2梗死心肌面积腿2梗死区重量g梗死区占心室％梗死区占心脏y。模型8323.21±19.1798.63±14.650.244±0.04030.5±3.626.0±3.1合心爽组l(kg8324.41±21.1073.52±9.34**0.175±0.029"22.6±3.2**19.6±2.7**通心络组1.2g8323.91±23."66.40±14.01**0.155土0.033"20.5±4.2**17-3±3.5**华佑再造丸8328.25±15.4079.73±13.94*O.l"士O.038"24.2±3.9**20.8±3.3**华杭再造九3.5g8332.65±24.1275.83±12.23**0.174±0.027"22.8±3.1**19.5±2.7**华乾再造九7g8319.39±12.1159.42±12.88**0.143土0.036"18.7±4.4**15.8±3.7**注*、**与模型组比较，P<0.05、P<0.01.试验结果证实，模型组梗死区占心室及心脏百分比分别为30.5及26.0%;合心爽10mg/kg组及通心络1.2g/kg组心肌梗死程度减轻，梗死面积减小，梗死区重量减轻，梗死区占心室及心脏百分比降低，与模型组比较有显著性差异(P<0.01);华佗再造丸7、3.5、1.75g生药/kg组，心肌梗死程度有明显减轻，梗死面积减小，梗死区重量减轻，梗死区占心室及心脏百分比降低，与模型组比较有显著性差异(P〈0.05~P<0.01)。2.对血清SOD活性、MDA含量的影响试验观察到，模型组血清SOD活性降低，MDA含量升高，与假手术组比较有显著性差异(P<0.05~P<0.01);合心爽及通心络组SOD活性升高，MDA含量降低，与模型组比较有显著性差异(P〈0.05);华佗再造丸1.75、3.5g/kg组SOD活性升高，MDA含量降低，7g/kg组SOD活性升高，与模型組比较有显著性差异(P<0.05)。结果见表2.。表2.华佗再造丸对血清S0D活性、MDA含量的影响分组剂量/kgnSOD(NU/ml)MDA(nmol/ml)假手术组8238.2±9.95.28±0.75模型8203.4±12.0##6.53±1.61#合心爽组10mg8216.8±12.3*5.41±0.30*通心络1.2g生药8214.6±8.3*5.33±0.80*华佗再造丸1.75g生药8215.9±9.4*5.00±0.70*华佗再造丸3.5g生药8215.8±9.1*5.29±0.78*华佗再造丸7g生药8214.9±10.2*6.18±1.19注#、##与〗艮手术组比專交，P<0.05、P復01.*与模型组比较，P<0.05.结论心肌缺血后再灌注损伤，临床常发生于冠脉搭桥术后及溶栓术治疗心梗后。研究证实，心肌缺血一定时间造成心肌损伤后，可引起心脏功能的抑制，再灌注不仅无益于心脏功能的恢复，反而加重已有的心肌损伤，从而导致心肌梗死的发生或进一步加重。心肌缺血再灌注机制一般认为与心肌能量代谢障碍、氧自由基的大量产生、细胞内钙离子超载及血管内皮细胞分泌的一系列内皮因子等因素有关。SOD是机体氧化及抗氧化平衡的重要因素，MDA则反映机体内脂质过氧化程度，SOD活性降低，MDA含量增高，间接反映了氧自由基的形成及对心肌损伤的参与，前者反应机体清除氧自由基的能力，后者则反应机体细胞受自由基攻击的严重程度。本试验以大鼠心肌缺血再灌注损伤模型观察药物作用，试验观察到，心肌缺血再灌注损伤导致心肌梗死发生，N-BT染色后心梗斑块明显，占心室及心脏总面积的30.5%及26.0%;华佗再造丸7、3.5、1.75g生药/kg组心肌梗死程度有明显减轻，梗死面积减小，梗死区重量减轻，梗死区占心室及心脏百分比降低，血清S0D活性，MDA含量降低，与才莫型组比较有显著性差异(P<0.05~P<0.01)试验结果表明，华佗再造丸对心肌缺血所致心肌梗死有明确的保护作用，可能的机制之一为增加机体清除氧自由基的能力。[实施例2]华佗再造丸对麻醉犬心肌缺血、心肌梗死及相关冠脉血流量、心肌耗氧量和血液生化指标的影响。实验材料1.实验动物健康成年犬36只，雌雄兼用，体重13.50±2.19kg。2.实验药物华佗再造丸，同实施例l;合心爽(盐酸地尔硫卓片)，30mg/片，天津田边制药有限公司生产(批号0501017);通心络胶嚢，0.38g/粒，1.4g生药/g粉，批号060109,石家庄以岭药业股份有限公司生产；0.9%氯化钠注射液，北京双鹤药业股份有限公司生产(批号n^n"41、实验共分六组(l)空白对照组，生理盐水3ml/kg,n-6;("P日性对照药合心爽组，5mg/kg,n=6;(3)中药对照药通心络胶嚢0.24g生药/kg剂量组，n=6;(4)华佗再造丸0.5g生药/kg剂量组，n=6;(5)华佗再造丸1.0g生药/kg剂量组，n=6;(6)华佗再造丸2.0g生药/kg剂量组，n=6。上述实验药物，均在实验前用生理盐水配制成等体积(3ml/kg)，经十二指肠给药。实验方法动物经戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉，气管插管，连接SC-3型电动呼吸机(上海)；左侧第四肋间开胸，暴露心脏，剪开心包，做心包床；分离冠状动脉左旋支，放置SAGE-300型超声多普勒血流计(美国CBI公司)才果头(Cuff-E，cD=2.4mm,20MHz)，测定心脏冠脉血流量(CABF);分离冠状动脉前降支中段，穿线以备结扎，造成急性实验性心肌缺血模型；缝置多点固定式心外膜电极(30个标测点)，描记心外膜电图(EECG)[1]，结果记录于MP-100多导生理记录仪(美国BIOPAC)。结扎冠脉15分钟，进行记录，作为给药前对照值，经十二指肠给予实验药物或生理盐水，于药后15、30、45、60、90、120、180分钟记录EECG,以S-T,爻升高大于2mv为判断标准，计算心肌缺血程度(S-ST:S-T段升高总mv数)及心肌缺血范围(N-ST:S-T段升高总点数)。经颈外静脉插管至冠状静脉窦，并行颈总动脉插管，于缺血前、缺血15分钟(药前)、药后15、30、60、120、180分钟取动、静脉血，血氧分析仪(OMNIS2,Roche,德国)分别测定冠状静脉窦血氧含量(V02)及动脉血氧含量(A02),并通过冠脉血流量(CABF)计算心肌耗氧量(MOC):M0C=(A02-V02)xCABF/100。RA-1000型全自动生化分析仪(美国TECHNICON)测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氬酶(LDH);放免法测定血浆内皮素(ET)、血栓素(TXB2)和6-酮-前列环素Fla(6-Keto-PGFla)(GC-911-y记数仪，中国科技大学实业总公司)。药后180分钟记录完毕，立即取下心脏，NS液沖洗，称重，心脏结扎线下，平行于冠状沟均匀地将心室部分切成5片，置于硝基四氮唑兰(N-BT)染液中，常温染色15分钟。HPIAS-1000型医学图象分析系统(北京)。测量每片心肌双侧的梗死区(N-BT非染色区)与非梗死区(N-BT染色区)，计算每片心肌的面积，心室总面积和梗死区总面积。计算梗死区占心室及占全心脏的百分比。实验结果进行统计学处理，以t检验判断其显著性。实验结果(一).对犬心肌缺血(心外膜电图标测)的影响1.对犬心^I几缺血程度(S-ST)的影响结果表明，经十二指肠给药，华佗再造丸1.0和2.0g生药/kg剂量组均有明显减轻心肌缺血程度(i:-ST)的作用，其中2.0g/kg组药后60分钟药物发挥明显作用，并持续至药后180分钟。药后120分钟—180分钟，动物i:-ST由药前514.00±118.40mV降至410.67±160.34mV及375.83±168.75mV，分别下降了22.20%及28.31%，与药前及与对照组比较均差异非常显著(P〈0.05)。2.对犬心肌缺血范围(N-ST)的影响结果表明，对照组给入生理盐水后，心肌缺血范围(N-ST)无明显改变。华佗再造丸三个剂量组有不同程度的减小心肌缺血范围(N-ST)的作用，其中2.Og/kg剂量组药后90、120分钟，N-ST分别由药前29.67±0.82个标测点，降至27.83±1.94和26.67±3.39个标测点，与对照组相比有明显差异(P〈0.05-0.01)。以上结果表明，华佗再造丸对实验性急性犬心肌缺血有明显的改善作用，可显著减轻心肌缺血程度(S-ST)、缩小心肌缺血范围(N-ST)。(二).对犬急性心M^死范围(N-BT染色法测定)的影响表3.各给药组对犬急性心月几梗死范围的影响(n=6，X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>结果见表3，以定量组织学N-BT染色法显示心肌梗死范围，生理盐水对照组动物心月几梗死区分别占心脏及心室的9.99±5.11%和21.26±7.10%;华佗再造丸三个剂量组可减少动物心月几梗死区面积，与对照组比较均有显著性差异(P〈0.05或P〈0.01)，其中2.Og/kg组心肌梗死区面积分别占心脏及心室的4.08±2.49%、9.42±6.08%,分别较生理盐水对照组降低59.16%和55.69%(均P<0.05)。(三).对实验性心肌缺血犬冠脉血流量的影响结果表明，结扎麻醉犬冠状动脉形成心力几缺血后，冠脉血流量有短时间代偿性增加，增加幅度10%左右。合心爽组药后有显著增加缺血心脏冠脉血流量的作用；华佗再造丸三个剂量组药后均有增加缺血心脏冠脉血流量的趋势，与生理盐水组比较，无明显差异(均P〉0.05)。(四).对实验性心肌缺血犬动、静脉血氧含量及心肌耗氧量的影响结果表明，对照组生理盐水给药前后动脉、冠状静脉窦血氧含量及心肌耗氧量均无显著变化；合心爽药后15-60分钟时可明显升高静脉窦血氧含量；降低120分钟时心肌耗氧量。华佗再造丸1.Og/kg和2.Og/kg剂量组给药后冠状静脉窦血氧含量有升高趋势，但与对照组相比无明显差异。LOg/kg动物心肌耗氧量15-120分钟均明显下降，其中120分钟时与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。(五).对实验性心肌缺血犬血液生化学指标的影响1.对犬血清肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响结果表明，心肌缺血前血清CK、LDH含量分别为240.06±75.76u/L和53.70±27.03u/L(n=36),结扎冠脉形成急性心肌缺血后，血中CK、LDH含量明显升高,分别为333.69±153.57u/L和68.95±38.25u/L。与缺血前比较CK含量增加了39.00%,LDH含量增加了28.39%;CK、LDH释放随着冠脉结扎时间的延长进一步增加，生理盐水组药后30、60、120、180分钟与药前相比较，CK分别增加68.22°/"123.37%、248.54%、344.07%;LDH分别增加9.12%、35.79°/。、65.72°/。及96.08%;合心爽能明显抑制心肌缺血、心肌梗死引起的CK、LDH活性升高，与对照组生理盐水比较有显著性差异(P<0.05)。华佗再造丸1.Qg/kg也可明显抑制120-180分钟时LDH释放(P<0.01);2.Og/kg可明显抑制120分钟时CK释放(P<0.05)，同时可明显抑制120-180分钟时LDH释》文(P<0.05)。2.对犬血浆内皮素(ET)、血栓素(TXB》及6-酮-前列环素(6-Keto-PGFia)活性的影响结果表明，持续结扎犬冠状动脉过程中，生理盐水对照组动物血浆6-酮-前列环素(6-Keto-PGF,a)及6-酮-前列环素/血栓素B2比值明显下降，血浆内皮素释放明显增加。华佗再造丸组对心肌缺血、心肌梗死引起的血浆内皮素(ET)活性有明显抑制作用，可明显抑制血栓素B2的释放，同时可明显升高6-酮-前列环素(6-Keto-PGFta)及6-酮-前列环素/血栓素B2的比值。结论本实验采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度，定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗死范围，同时测定冠脉血流量、心肌耗氧量及血清CK、LDH和血浆ET、TXB2、6-Keto-PGF^活性的变化，研究了华佗再造丸消化道给药对实验性犬急性心肌缺血、心肌梗死及相关指标的影响。实验结果证实，华佗再造丸具有明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗死的作用，减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度(S-ST)，减小通过N-BT染色所显示的梗死区。由不同病因造成局部冠状动脉狭窄或冠状动脉闭塞形成心肌缺血或心肌梗死时，其它冠状动脉分支代偿性扩张和开放，可使心肌缺血或心肌梗死得到緩解。当心肌发生大面积缺血和广泛性梗死，这种代偿能力有限，造成心肌坏死和不可逆损伤，发生生命危险。实验显示华佗再造丸对心肌缺血和心肌梗死时的冠脉血流量无明显增加作用，可能与模型动物心肌损伤过于严重，冠脉扩张代偿机制不足所致。CK广泛存在于细胞质膜中，尤以心肌细胞为多，当心肌细胞损伤时CK溢出，使其在血液中活性升高，血清CK活性越高，反映心肌损伤程度越重。本实验以CK的释放为指标表明，结扎冠状动脉左前降支中段，造成麻醉犬急性心肌损伤的模型是成功的。本实验观察到华佗再造丸可明显抑制实验性急性心肌缺血犬心肌损伤时的CK溢出，降低血清CK活性，保护心肌细胞膜。LDH在心肌梗死时从组织细胞内大量释放于体液中，测定冠状静脉窦血中LDH活性，也可反映心肌损伤的程度。实验证明华佗再造丸可部分抑制犬实验性心肌损伤时血清CK、LDH的溢出，降低血清CK、LDH的活性。现代医学研究认为，血痴证的形成与血液成分、血液状态和血管壁因素即血管内皮细胞的损伤等病理变化密切相关。当结扎犬冠状动脉时，由于机械刺激，持续、严重的缺血、缺氧，均可致血管壁内皮细胞受损，内皮损伤可激活血小板并相互聚集粘附于血管局部，并激活凝血酶系统，促进纤维蛋白形成和内皮素的大量释放，引起血管痉挛，血液凝固性增加，粘稠度增高，易于形成血栓，而致血流緩慢，形成或加重心肌缺血，甚或发生心肌梗死。因此，内皮素是重要的致瘀因素之一，而抑制内皮素的释放是抗心肌缺血药物的重要评判指标。本试验显示华佗再造丸具有明显的抑制内皮素释放的作用，这有利于血管的扩张。前歹'J环素(prostacyclin,PGI2)、血^全素A2(thromboxaneA2，TXA2)均为内皮细胞分泌的血管活性物质，其中PGL为舒血管物质，TXA2为缩血管物质。本实验通过测定PGl2的终末代谢产物6-酮-前列环素Fla(6-keto-PGFla)及TXA,的代谢产物TXB2等活性物质，观察持续结扎犬冠状动脉形成心肌缺血和心肌梗死过程中的变化以及观察药物对其影响。结果表明，华佗再造丸对心肌缺血、心肌梗死引起的血浆内皮素(ET)活性升高有明显抑制作用，同时可提高血浆6-酮-前列环素(6-Keto-PGF,a)的水平。本实验所用的阳性对照药合心爽为钾拮抗剂，有很好的扩冠、增加冠脉流量、降低心肌耗氧量、阻止急性心肌缺血状态下心肌CPK,LDH,ET，从而减轻和延緩了缺血所引起的心肌损伤过程。上述实验结果表明，华佗再造丸具有明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗死的作用，明显减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度(S-ST);减小由心外膜电图标测的心肌缺血范围(N-ST);缩小经N-BT染色所显示的梗死区；对心肌缺血及心肌梗死引起的血清乳酸脱氢酶(LDH)的释放、肌酸激酶(CK)活性升高及血浆内皮素(ET)的活性有明显抑制作用，同时升高心肌缺血时血浆6-酮-前列环素Fla(6-Keto-PGFJ和6-Keto-PGF,a/TXB2的比值。华佗再造丸对犬心脏血流动力学及心肌耗氧量的影响。实验材料1.药物华佗再造丸，同实施例l;合心爽(盐酸地尔硫卓片)，30mg/片，天津田边制药有限公司生产(批号0501017);通心络胶嚢，0.38g/粒，1.化生药/g;盼，批号060109,石家庄以岭药业股<分有限7>司生产；0.9%氯化钠注射液，北京双鹤药业股份有限公司生产(批号0603141)。2.动物健康成年杂种犬36只，体重15.22±2.59kg,雌雄兼用。实验方法实验动物用戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉，气管插管，连接电动人工呼吸机(SC-3型，上海)。施左侧第四肋间开胸术，暴露心脏，剪开心包，做心包束，分离冠状动脉左旋支，放置SAGE-300型超声多普勒血流计(美国TRITON公司)探头(Cuff-E,F=2.4mm,20MHz),测定心脏冠月永血流量(CABF);分离主动脉根部，放置电磁流量计(MF-1100型，日本光电)探头，测量心输出量。心输出量(CO);左心室尖部插管，连接压力换能器(MPU-O.5A),经载波放大器(AP-601G)测定左室内压(LVSP),再经微分器(ED-601G)计算左室内压上升最大速率(dp/dtmax);颈外静脉插管至冠状静脉窦，颈动脉插管，药前、药后15、30、60、120、180分钟取动、静脉血，血氧分析仪(OMNIS2，Roche,德国)分别测定冠状静脉窦血氧含量(V02)及动脉血氧含量(A02),并通过冠脉血流量(CABF)计算心肌耗氧量(MOC):MOC=(A02-V02)xCABF/100。股动脉插管测定动脉血压(BP),以肢体导联观测标准II导心电图(ECG-II)计算心率(HR)及相关心电图参数。公式计算其它血流动力学指标心搏出量(SO)、左室作功(LVW)、耗氧指数(MOCI)、冠脉阻力(CAVR)、总外周阻力(PVR)及氧利用率(MURO)等。将上述各项指标同步记录于MP-IOO型多导生理记录仪(美国BIOPAC公司)。施腹部手术，分离十二指肠，插管，以备给予所试药物。实验共分6组(l)空白对照组，生理盐水3ml/kg,n=6;U)阳性对照药合心爽组，5mg/kg,n=6;(3)中药对照药通心络胶嚢O.24g生药/kg剂量组,n=6;(4)华佗再造丸0.5g生药/kg剂量组，n=6;(5)华佗再造丸1.Og生药/kg剂量组，n=6;(6)华佗再造丸2.Og生药/kg剂量组，n=6。手术完毕，待所观察指标稳定后，记录药前值，十二肠给入所试药物。并于药后15、30、45、60、90、120、180分钟进行记录。将各项7见测指标及推导参数进行统计学处理，以不同观察时间的实测值进行给药前后自身比较，其变化百分率进行组间比较，以t4企验判断其显著性。实验结果l.对犬动脉血压(SP、DP)、心率(HR)及心电图的影响结果表明，合心爽药后有明显降低血压和减慢心率的作用；华佗再造丸三个剂量组药后股动脉收缩压(SP)、舒张压(DP)均无明显改变；各剂量组对心率无明显影响。华佗再造丸各剂量组药后动物标准II心电图PR间期、QRS间期、QT间期及T波等参数均无明显改化。2.对犬冠脉血流量(CABF)及冠脉阻力(CAVR)的影响结果表明，生理盐水给药前后冠脉血流量、冠脉阻力均无明显变化。4丐拮抗剂合心爽可明显增加冠脉血流量和降低冠脉阻力；通心络在60分钟时也可明显增加冠脉血流量；华佗再造丸三个剂量组均有明显的增加冠脉血流量的作用，其中2.0g/kg剂量组在45-60分钟是对冠脉血流量增加最为明显，增加幅度在20%左右，与对照组相比有明显差异(P<0.05)。这说明本品可以扩张正常状态下的冠l^血管，增加心月几供血能力。与此同时，本品2.Og/kg剂量组可明显降低冠脉阻力，其中30-60分钟时间段内与药前相比有明显差异(P<0.05)。3.对左室收缩力(LVCMT)、左室作功(LVW)的影响结果表明，合心爽可在45-60分钟抑制心室的做功。本品对心月几收缩力无明显地影响，2.Og/kg剂量组具有增加心脏左室作功，提高心肌活动能力的作用。4.对犬左室内压(LVSP)、左室内压最大上升速率(dp/dt,)的影响结果表明，LVSP和dp/dt,都是评价心肌收缩性的重要指标，华佗再造丸2.0g/kg剂量组药后30分钟有明显增加LVSP和dp/dUx的作用，说明本品具有对心脏的正性调节作用。5.对犬心输出量(CO)、心搏出量(SO)的影响结果表明，合心爽能明显增加心输出量和心搏出量，通心络对心输出量及心搏出量也有明显增加作用。华佗再造丸O.5g/kg和2g/kg剂量组均可增加心输出量和心搏出量(P<0.05-0.01),与合心爽相比起效相对较慢，但作用持续时间较长。6.对总外周阻力(PVR)的影响结果表明，合心爽可以降低动物的总外周阻力，与对照组相比有明显差异。华佗再造丸2g/kg在30-90分钟时对总外周阻力有明显的降低作用，与对照组相比有明显差异(P復05)。7.对犬动脉血氧含量(A0》、静脉血氧含量(V02)的影响结果表明，各给药组对动物动脉血氧含量无明显影响，合心爽组动物冠状静脉窦血氧含量15-60分钟时均明显增加，与生理盐水对照组比较均有明显差异(P〈0.05)。华佗再造丸l.0g/kg剂量组30-120分钟冠状静脉窦血氧含量也明显增加，与生理盐水对照组比较有明显差异(P<0.05)。8.对犬心肌耗氧量(MOC)、耗氧指数(MOCI)及氧利用率(MURO)的影响结果表明，阳性对照药合心爽经十二指肠给药后，心肌耗氧量、耗氧指凝:和氧利用率均明显降低。华佗再造丸2.Og/kg剂量组的心^L耗氧量升高，与对照组相比有显著的差异(P<0.05)，这可能与药物增加冠脉血流，增加心室作功，对心脏的正性调节有关。本品l.0g/kg可降低30-120分钟时对心脏的氧利用率，30分钟与对照组相比有显著的差异(P<0.05),而对心肌的耗氧指数无明显地影响。实施例2表明，华佗再造丸对心肌缺血和心肌梗死时的冠脉血流量无明显增加作用，可能与模型动物心肌损伤过于严重，冠脉扩张代偿机制不足所致,但可降低缺血心脏的耗氧量。而本试验表明本品可以增加正常心脏的冠脉血流，增加心室作功，增加心肌耗氧量，对心脏的正性调节有关。上述结果表明，华佗再造丸对不同状态心脏血流供应和心肌耗氧量作用不同，降低缺血心脏的耗氧量更有潜在临床价值。结论本实验观察了华佗再造丸对正常麻醉犬心脏血流动力学、心肌耗氧量的影响，实验结果显示华佗再造丸对动脉血压、心率、标准II心电图PR间期、QRS间期、QT间期及T波等参数均无明显影响；可明显扩张冠脉，增加冠脉血流量，增加心肌供血能力；可增加心脏左室作功，增加LVSP和dp/dtmax，提高心肌活动能力，对心脏具有正性调节作用；同时可增加心输出量和心4專出量，降低总外周阻力；可明显增加心肌耗氧量，这与药物增加冠脉血流，增加心室作功，对心脏的正性调节有关。[实施例4]华佗再造丸对家兔血小板聚集的影响。本试验采用Born氏比浊法，观察华佗再造丸对家兔血小板聚集的影响。结果表明连续7日给家兔灌胃给药，华佗再造丸明显降低二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)及股原诱导的家兔血小板聚集率(P〈0.01~0.001)。提示华佗再造丸具有抑制血小板聚集的作用。结果表明连续7日给家兔灌胃给药，华佗再造丸明显降低二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)及胶原诱导的家兔血小板聚集率(P<0.01~0.001)。提示华佗再造丸具有抑制血小板聚集的作用。[实施例5]华佗再造丸对大鼠体外血栓形成及血液粘度的影响。华佗再造丸对大鼠体外血栓形成及血液粘度的影响。结果显示，连续7日给大鼠灌胃给药，华佗再造丸明显缩短血栓长度(P〈0.05~0.001)、减轻血栓湿重及干重(P〈0.05~0.001);明显降低切变率60S-1、5S-1下的全血粘度(P<0.05~0.01)。表明华佗再造丸具有抑制血栓形成及降低血液粘度的作用。总之，本发明通过多种动物种类、多种试验表明，华佗再造丸作为一种中风恢复期和后遗症的治疗药，具有制备预防、治疗心肌缺血、心肌梗死等缺血性心脏病的药物方面的新用途。权利要求1、华佗再造丸在制备防治缺血性心脏病药物方面的用途。2、根据权利要求1所述的华佗再造丸在制备防治缺血性心脏病药物方面的用途，其特征在于制备防治心肌JA血的药物方面的用途。3、根据权利要求1所述的华佗再造丸在制备防治缺血性心脏病药物方面的用途，其特征在于防治心肌缺血再灌注损伤的药物方面的作用。4、根据权利要求1所述的华佗再造丸在制备防治缺血性心脏病药物方面的用途，其特征在于心肌梗死的药物方面的作用。5、根据权利要求1所述的华佗再造丸在制备防治缺血性心脏病药物方面的用途，其特征在于华佗再造丸采用相同配方的其他剂型代替。6、根据权利要求1所述的华佗再造丸在制备防治缺血性心脏病药物方面的用途，其特征在于华佗再造丸与其他药物共同制成复方制剂。全文摘要华佗再造丸在制备防治缺血性心脏病药物方面的用途，华佗再造丸也可采用相同配方的其他剂型代替，也可以与其他药物一起共同制成复方制剂。文档编号A61P9/10GK101229197SQ20081002580公开日2008年7月30日申请日期2008年1月15日优先权日2008年1月15日发明者刘声波,徐文流,邓祝玲,颜美婷,黄夏敏申请人:广州奇星药业有限公司