专利名称：工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及柠檬苦素制备技术领域，更具体地，涉及柠檬苦素单体制备技术领域， 特别是指工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺。
背景技术：
前期研究和文献表明，桔核中含有大量具有抗肿瘤活性的柠檬苦素类化合物，是一 类抗癌变的天然活性物质。然而，至今尚未见从榨取果汁等生产后的废淹中的桔核为原 料，利用工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺报道。国内外文献中，报道相关的研究都 处于实验室阶段，采用了制备型高效液相色谱和闪蒸层析等复杂技术，成本高昂，不利 于工业推广应用。中国专利CN1293055公开了一种"从柑桔类种子中提取药物活性物质 的工艺"，其主要技术特征是采用提取、结晶等方式综合利用柑桔类种子，但存在问题 是纯度较难符合国际标准。
发明内容
本发明的主要目的就是针对以上存在的问题与不足，提供一种工业层析法制备柠檬 苦素单体的工艺，该工艺充分利用废弃桔核釆用工业层析法提取高纯度柠檬苦素，提高
了综合利用率，成本低、易于操作和控制，溶剂反复利用，减少了污染，适合工业化大生产。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下 一种工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特点是，包括步骤
a. 将经过洗涤、干燥的桔核进行榨油处理后，用醇类有机溶剂于30-9(TC的温度下 提取10-20小时，再过滤分离得到滤液；
b. 对所述滤液进行减压浓缩将所述醇类有机溶剂回收，再经氯代烃萃取多次，合并 氯代烃层，浓缩至浸膏；
c. 选择醚类溶剂于30-50。C温度下对所述浸膏回流提取进行脱脂，过滤得到滤渣并洗涤至所述滤渣无脂肪酸； d.在所述滤渣中加入醇类溶剂进行重结晶得到含有多种柠檬苦素类化合物的粗晶 体，通过工业色i普柱进行层析后，结晶并干燥得到柠檬苦素化合物晶体。
较佳地，在所述步骤a中，所述榨油处理为机械榨油处理。
较佳地，在所述步骤a中，所述醇类有机溶剂是乙醇。
较佳地，在所述步骤b中，所述氯代烃是氯仿。
较佳地，在所述步骤c中，所述醚类溶剂是石油醚。
较佳地，在所述步骤d中，所述醇类溶剂是曱醇。
较佳地，在所述步骤d中，所述层析所用的洗脱体系为氯仿丙酮体系。
更佳地，所述氯仿丙酮体系中所述氯仿与所述丙酮的比例为10 15: 1。较佳地，在所述步骤d中，所述结晶和所述干燥是通过采用ZF干燥器来完成的。
在本发明中，首先通过榨油技术，除去桔核中的大部分脂肪酸类成分，接着使用醇 类有机溶剂提取，滤液经过减压浓缩将醇类溶剂回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多
种柠檬苦素类化合物的浓缩液；再通过氯代烃类溶剂萃取；通过醚类溶剂回流提取脱脂 至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物，再加入醇类溶剂进行结晶， 得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析柱，专利设备ZF干燥器(专利 号200620089220.7，专利名称ZF型混合反应干燥机)可完成结晶、干燥、粉碎的过 程，生产步骤简化，直接得到符合要求的高纯度柠檬苦素。
因此，本发明充分利用桔核中的各种有效成分，实现从榨取果汁等生产后的废渣中 的桔核中大规模制备具有抗肿瘤活性的柠檬苦素高纯度单体的工艺，具有工艺规范，流 程合理，步骤简单易于操作和控制，产品系列化的优势；通过工业层析柱技术，能够充 分提取各种活性物质并且将其分离，可以得到柠檬苦素，其综合利用率高、产品纯度得 到提高，产品的附加值高等特点；因为提高了综合利用率，相比其它工艺，综合成本下 降，溶剂反复利用，减少了污染，适合工业化大生产。
图1是本发明的 一具体实施例的工艺流程图。
具体实施例方式
4为更好的理解本发明的内容，下面结合具体实施例作进一步说明。 实施例l
将经过洗涤、干燥的桔核通过冷榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提 取罐中并使用70。/。乙醇于60。C的温度下搅拌进行20小时提取操作，经过滤器分离得到滤 液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类 化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏。通过石油 醚(生产厂家四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格60 - 90 ), 30。C回流提取3小时， 脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加入甲醇加热溶解， 静置l小时，过滤除去杂质后，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析 柱(生产厂家温州市金榜轻工机械有限公司，规格cf)300 x 1500咖、上下封头、耐20 公斤压力)，以三氯曱烷丙酮=10: l为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后， 成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家上海鑫马生物科技有限公司，规格20L)结晶、 干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为>98%。
实施例2
将经过洗涤、干燥的桔核通过冷榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提 取罐中并使用90%乙醇于3(TC的温度下搅拌进行15小时提取操作，经过滤器分离得到滤 液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类 化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏。通过石油 醚(生产厂家四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格60 - 90 ), 40。C回流提取3小时， 脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加入曱醇加热溶解， 静置1小时，过滤除去杂质后，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析 柱(生产厂家温州市金榜轻工机械有限公司，规格(J)300 x 1500mm、上下封头、耐20 公斤压力)，以三氯曱烷丙酮=15: l为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后， 成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家上海鑫马生物科技有限公司，规格20L)结晶、 干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为>98%。
实施例3
将经过洗涤、干燥的桔核通过机械榨油技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功 能提取罐中并使用80%乙醇于50。C的温度下搅拌进行10小时提取操作，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦
素类化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏。通过 石油醚(生产厂家四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格60~卯)，35。C回流提取3 小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加入曱醇加 热溶解，静置l小时，过滤除去杂质后，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过 工业层析柱(生产厂家温州市金榜轻工机械有限公司，规格cf)300 x 1500mm、上下封 头、耐20公斤压力)，以三氯曱烷丙酮=12: l为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压 浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家上海鑫马生物科技有限公司，规格20L) 结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为>98%。
实施例4
将经过洗涤、干燥的桔核通过热榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提 取罐中并使用80。/。曱醇卯。C回流提取三次，第一次7倍量提取4小时，第二次6倍量提取3 小时，第三次5倍量提取3小时，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将曱醇 回收至无醇味后，浸膏通过石油醚(生产厂家四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格 60-9O) , 35。C回流提取3小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种糖香类和多种柠檬 苦素类化合物的提取物；再加纯水通过二氯曱烷萃取多次，合并二氯甲烷层浓缩成浸膏； 浸膏通过7(TC无水曱醇至完全溶解，将曱醇溶液置于5X:的水箱内至大量晶体析出，收集 晶体，干燥得到90。/。左右的柠檬苦素粗晶；粗晶通过工业层析柱(生产厂家温州市金 榜轻工机械有限公司，规格(J)3O0xi5OO隨、上下封头、耐20公斤压力)，以三氯曱烷 丙酮=15: l为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生 产厂家上海鑫马生物科技有限公司，规格20L)结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高 纯度柠檬苦素，其纯度为>99%。
实施例5
将经过洗涤、干燥的桔核通过热榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提 取罐中并使用80。/。甲醇5(TC回流提取三次，第一次7倍量提取5小时，第二次6倍量提取4 小时，第三次4倍量提取1小时，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇 回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取 提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏；通过98。/。正己烷40。C回流提取3小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加入甲醇加热溶解，静置l
小时，过滤除去杂质后，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析柱(生 产厂家温州市金榜轻工机械有限公司，规格d)300 x 1500咖、上下封头、耐20公斤压 力)，以三氯曱烷丙酮=15: l为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏 状，经ZF干燥器(生产厂家上海鑫马生物科技有限公司，规格20L)结晶、干燥、 粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为>98%。
实施例6
将经过洗涤、干燥的桔核通过热榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提 取罐中并使用80。/。曱醇50。C下搅拌进行20小时提取，经过滤器分离得到滤液；上述滤液 经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类化合物的浓缩 液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏；上述浸膏通过石油醚(生 产厂家四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格60~90) , 50。C回流提取3小时，脱脂 至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；上述提取物通过70。C无水 曱醇至完全溶解，将甲醇溶液置于5t:的冰箱内至大量晶体析出，收集晶体，干燥得到90% 左右的柠檬苦素粗晶；粗晶通过工业层析柱(生产厂家温州市金榜轻工机械有限公司， 规格4) 300 x 1500咖、上下封头、耐20公斤压力)，以三氯甲烷丙酮=10: l为洗脱剂， 分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家上海盡马生物 科技有限公司，规格20L)结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度 为> 99%。
综上所述，本发明的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺充分利用废弃桔核采用工 业层析法提取高纯度柠檬苦素，提高了综合利用率，成本低、易于操作和控制，溶剂反 复利用，减少了污染，适合工业化大生产。
需要说明的是，在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一 篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，以上所述的是本发明的具体实施例及所 运用的技术原理，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明 作各种改动或修改而不背离本发明的精神与范围，这些等价形式同样落在本发明的范围 内。
权利要求
1.一种工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，包括步骤a.将经过洗涤、干燥的桔核进行榨油处理后，用醇类有机溶剂于30-90℃的温度下提取10-20小时，再过滤分离得到滤液；b.对所述滤液进行减压浓缩将所述醇类有机溶剂回收，再经氯代烃萃取多次，合并氯代烃层，浓缩至浸膏；c.选择醚类溶剂于30-50℃温度下对所述浸膏回流提取进行脱脂，过滤得到滤渣并洗涤至所述滤渣无脂肪酸；d.在所述滤渣中加入醇类溶剂进行重结晶得到含有多种柠檬苦素类化合物的粗晶体，通过工业色谱柱进行层析后，结晶并干燥得到柠檬苦素化合物晶体。
2. 根据权利要求l所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步 骤a中，所述榨油处理为机械榨油处理。
3. 根据权利要求l所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步 骤a中，所述醇类有机溶剂是乙醇。
4. 根据权利要求l所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步 骤b中，所述氯代烃是氯仿。
5. 根据权利要求l所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步 骤c中，所述醚类溶剂是石油醚。
6. 根据权利要求l所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步 骤d中，所述醇类溶剂是甲醇。
7. 根据权利要求l所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步 骤d中，所述层析所用的洗脱体系为氯仿丙酮体系。
8. 根据权利要求7所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，所述氯仿 丙酮体系中所述氯仿与所述丙酮的比例为10-15: 1。
9. 根据权利要求l所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步 骤d中，所述结晶和所述千燥是通过采用ZF干燥器来完成的。
全文摘要
本发明提供了一种工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，包括步骤将经过洗涤、干燥的桔核进行榨油处理后，用醇类有机溶剂提取，再过滤分离得到滤液；对滤液进行减压浓缩将醇类有机溶剂回收，再经氯代烃萃取，浓缩至浸膏；选择醚类溶剂对浸膏回流提取进行脱脂，过滤得到滤渣并洗涤至滤渣无脂肪酸；在滤渣中加入醇类溶剂进行重结晶得到含有多种柠檬苦素类化合物的粗晶体，通过工业色谱柱进行层析后，结晶并干燥得到柠檬苦素化合物晶体，本发明充分利用废弃桔核采用工业层析法提取高纯度柠檬苦素，提高了综合利用率，成本低、易于操作和控制，溶剂反复利用，减少了污染，适合工业化大生产。
文档编号A61K36/185GK101580513SQ20081003731
公开日2009年11月18日 申请日期2008年5月13日 优先权日2008年5月13日
发明者军 何, 唐述兵, 新 陈 申请人:上海鑫马生物科技有限公司