专利名称：糖肽合剂在制备肿瘤辅助治疗药物、保健食品中的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种糖肽合剂及其新用途，具体来说是从海洋鱼类中提取的海洋低聚肽与來源 于真菌或植物的生物活性多糖的联合制剂在制备肿瘤辅助治疗药物、保健食品中的用途。属 医药、食品保健领域。
背景技术：
最新的研究显示，我国59种恶性肿瘤发病率20年间升高约50% ! 2006年卫生部统计数 据显示恶性肿瘤目前已经成为中国城市和农村居民的第一杀手！目前化疗和放疗是除外科手 术以外，治疗实体肿瘤的最有效方法。但是化、放疗在治疗肿瘤的同时，也对正常的机体组 织细胞有一定的杀伤作用，特别是对增殖较快的组织细胞，如造血免疫组织细胞、消化道粘 膜上皮细胞、性腺组织细胞等。化疗对肿瘤组织和正常组织的作用主要包括影响核酸代谢， 直接破坏DNA的结构功能与复制，造成组织细胞mRNA的转录和翻译、纺锤丝聚合或解聚 功能的障碍，破坏生物膜，阻断细胞信号传导和增殖调控等。化疗除了对骨髓的抑制作用外， 消化道粘膜上皮也是较早受累的组织。因此放化疗患者常常出现恶心、呕吐、厌食和腹泻， 有时甚至出现便血，严重影响病人的摄食和吸收，加重营养不良的发生。
肿瘤病人在其本身癌细胞代谢异常增生消耗大量能源的情况下，放化疗导致的食欲不振、 恶心呕吐和组织消耗使本来就处于能量不足的机体更加速向严重营养不良发展，机体综合耐 受能力下降。IH常机体组织细胞包括肿瘤细胞修复时对营养物质的需求增加，同时由于消化 道摄入、吸收减少，病人的营养状况恶化，机体免疫力降低，产生与分解代谢相关的一系列 临床病理过程体重下降(由其是蛋白组织分解造成的瘦体重下降)、肌力下降、活动能力降 低、院内感染增加、伤口愈合和组织修复延迟等。这些病理过程反过來又严重影响了机体对 肿瘤药物的耐受性，成为严重影响肿瘤放化疗愚者生存率的重要因素。国外资料显示，在医 院接受放化疗的患者，至少有20% 40%是死于严重营养不良而不是肿瘤本身。由此可见， 肿瘤患者放化疗期间的营养支持十分必要。
氮平衡是接受化、放疗病人营养支持中需要重点考虑的内容。绝大多数接受化、放疗的
肿瘤病人都存在负氮平衡，持续性的负氮平衡会进一歩加重药物的副反应，降低机体免疫力，
这样造成恶性循环，严重影响肿瘤病人的生存率。动物实验也证明，机体蛋白质消耗可增加
化疗药物的毒性和致死性，增加饮食蛋白的动物比常规或低蛋白饮食的动物，化疗药物的副反应减少。然而国内外研究显示，很多化、放疗病人即使接受了高蛋白、高热量的饮食，在 治疗期间仍有明显的体重降低和营养不良，这往往与饮食中蛋白质的吸收利用率较低有关。 因而，探索更易消化吸收，生物利用率高的蛋白补充产品具有十分重要的现实意义！
肽与蛋白质都是氨基酸以酰胺键互相连接在一起形成的化合物，在结构上，肽处于氨基 酸和蛋白质的中间位置，但它具有氨基酸与蛋白质所不能替代的功能。长期以來，人们仅仅 把食物蛋白质当作一种营养丰富的成分，认为蛋白质只有水解成游离氨基酸后才能被吸收。 但是近年来的研究发现，蛋白质经消化道酶促水解后，主要以IO个以下氨基酸组成的寡肽形 式被吸收。大量研究证明，寡肽与氨基酸在小肠的吸收载体不同，寡肽的吸收效率更高，同 时寡肽的渗透压比氨基酸低。因此，蛋白质以多肽的形式被吸收，既避免了氨基酸之间的吸 收竞争，又能减少高渗透压对人体产生的不良影响，且吸收的寡肽能直接参与蛋白质的合成， 因此提高了机体对蛋白质的利用率，同时具有保护胃粘膜，抗溃疡形成的作用。在氨基酸运 输系统功能出现障碍的情况下，摄入寡肽也能够获得很好的吸收效果。
除作为优质氮源外，多年的研究已经证实，所有细胞都能合成多肽物质，这些肽类物质 参与机体复杂的生理活动，涉及到分子识别、信号转导、细胞分化及个体发育等很多领域， 具有免疫调节、抗菌、抗肿瘤、保护心血管、抗氧化、抗衰老等作用。机体免疫功能低下是 肿瘤得以发生发展的因素之一，肿瘤一旦发生后往往又反作用于机体免疫功能系统，致使免 疫功能紊乱或低下。因此，提高机体免疫功能对肿瘤治疗以及术后存活率都具有重要意义。 研究表明，大多数具有抗肿瘤活性的海洋活性蛋白和肽类可通过增强免疫细胞(如NK)的 活性和/或诱导细胞因子的分泌等不同方式来提高机体的免疫功能，是较好的生物反应调节 剂。
Takuma等从日本产虫下夷扇贝分离出具有强抑制肿瘤活性的糖蛋白，并用L5178Y淋巴细 胞作为靶细胞对抑瘤机制进行过探索，证明其抑瘤作用是通过激活巨噬细胞产生的。1996年 Kobayashi等研究发现海绵中的多肽(AGL-ll)能明显延长荷B16瘤小鼠的寿命，正常小鼠及 荷B16瘤小鼠体内试验显示AGL-11还能明显提高NK细胞的活性。国内研究发现，以每天20mg 南海长牡蛎的提取液，连续10d胃词荷HAC鼠肝癌的Balb/c小鼠，小鼠的各项免疫指标均明 显回升，包括T细胞数、T辅助细胞百分比、丝裂原诱发的淋巴细胞转化强度和NK细胞的杀 伤活性，瘤重显著减轻，小鼠存活期延长。冬青等也报道牡蛎水提取物能够提高正常鼠外周 血白细胞的总数、总T细胞百分比、T辅助细胞百分比，并使得T辅助细胞与T抑制细胞比值 明显增高，NK细胞活性增强。对有丝分裂原引起的T淋巴细胞增殖及B淋巴细胞增殖也有明 显的增强作用，提示了牡蛎提取物对整个免疫系统均有正向调节作用。此外，李鹏等发现僧 帽牡蛎天然活性多肽Bpo-l (高分子部分)可有效抑制人胃癌BGC-823细胞的增殖活动，细胞分裂指数下降。低分子量部分(5.3KD)对人肺腺癌A549生长有抑制作用，使用O.l mg/mL牡 蛎低分子量活性物质对A549生长抑制率为62.2%，细胞分裂指数下降28.95%。这说明牡蛎中 的抗癌活性成分多样，除了增强免疫抗癌的多糖和糖蛋白以外，还存在直接杀伤癌细胞的蛋 白组分。顾谦群等发现，栉孔扇贝糖蛋白能显著抑制S180实体瘤瘤重，并能提高小鼠腹腔巨 噬细胞的吞噬率和NK细胞的活性，增加小鼠免疫器官重量。进一歩的实验揭示梓孔扇贝糖蛋 白对肿瘤的抑制作用不是直接的细胞毒作用，而是通过增强荷瘤鼠的免疫功能而产生的。
生物活性多糖是指一类对人体具有某种特殊生物学功能的高分子碳水化合物聚合体。它 们广泛存在于自然界中的动物、植物、微生物和海洋生物等所有生物体内，资源丰富。近年 来，大量研究显示生物活性多糖具有抗肿瘤的作用，其主要的作用机制有以下几个方面(1) 增强和调节机体免疫功能。通过增强免疫器官、细胞和体液免疫功能，促进细胞因子释放， 活化补体等特异性和非特异性免疫功能等多途径、多层面发挥强大的机体整体免疫网络功能， 间接杀死肿瘤细胞而实现抗肿瘤作用；(2)抗氧化与抗自由基损伤。最近，越来越多的研究 表明活性氧类(ROS)在电离辐射引起的损伤中起到重要的调节作用。ROS造成DNA链断 裂，脂质过氧化和蛋白质修饰。电离辐射击中靶分子后，靶分子发生电离与继发产生自由基， 从而导致生物膜，DNA大分子、蛋白质以及一系列小分子的糖脂损伤，最终导致多种自由基 对细胞的功能和结构造成损伤，从而表现为各种病理症状。许多研究者认为，生物活性多糖 能够清除辐射产生的H+、 OH，、 &02等自由基，即消除辐射的间接作用以防止其对机体的损 伤；(3)抗突变与恢复细胞间通讯。突变是肿瘤发生的前提，研究显示生物活性多糖可以通 过提高肝脏中谷胱肝肽转移酶和细胞色素P-450酶活性、增强DNA切除修复等，发挥抑制 化学致突变物或辐射引起的致突变和致癌作用。此外生物活性多糖还可以通过改变细胞形态， 使癌细胞DNA缺损和恢复细胞间通讯来产生抗肿瘤作用；(4)诱导癌细胞分化与凋亡。生 物活性多糖可通过开放细胞膜通道和促进细胞内钙释放两条途径增加癌细胞内012+浓度，启 动癌细胞凋亡机制，并可以阻止SGC27卯人胃癌细胞内G0/G1期进入S期，发生Gl期阻 滞，升高癌细胞凋亡指数及诱导肿瘤细胞野生型P53水平的增加而抗癌，还可以通过影响肿 瘤基因、抑癌基因、细胞因子的表达或通过激活细胞凋亡中的关键蛋白酶Caspase-3来诱导癌 细胞分化和凋亡发挥抗肿瘤作用；(5)改变细胞膜流动性及细胞膜泵的活性。肿瘤的发生通 常伴随着细胞膜泵的活性增高，致使细胞正常代谢和生理功能发生紊乱失调，生物活性多糖 能明显抑制肿瘤细胞膜泵的活性，稳定细胞周围的正常生理环境而发挥抗肿瘤作用。(6)其 它，灵芝、枸杞、茯苓等生物活性多糖具有细胞毒性，可直接杀死肿瘤细胞。
20世纪80年代末，古巴、加拿大和美国学者就先后用鲨鱼骨多糖药物制剂在临床上用 于治疗晚期癌症，并取得了良好的效果。美国FDA已批准灰树花多糖作为治疗晚期乳腺癌和前列腺癌的有效制剂直接进入II期临床试验。将海藻多糖与5-氟尿嘧啶等配制成复方抗癌 制剂，临床应用结果显示，与单用5-氟尿嘧啶相比，复方制剂的抗癌效果显著增强，而毒性 明显降低。目前我国已正式批准上市、在临床上用于抗肿瘤的多糖类药品以菌藻类多糖为主, 品种有灵芝多糖、香菇多糖、猪苓多糖、人参多糖、海藻多糖等。还有一些生物活性多糖， 如银耳多糖、冬虫夏草多糖、猴菇菌多糖、昆布多糖、剌五加多糖等仍在进一歩研究之中。
由此看来，国内外对生物活性多糖的抗肿瘤作用研究已取得了令人瞩目的成就，许多抗 肿瘤生物活性多糖药品和保健食品已相继问世，经济效益十分显著。但目前对于海洋生物活 性肽与生物活性多糖联合应用在改善肿瘤放化疗患者营养状况和免疫功能方面的研究还很 少，如果通过开发药物、保健食品及食品达到改善肿瘤放化疗患者的营养状况和免疫功能， 改善肿瘤患者的生活质量之功效，既经济又实用，将对我国的卫生保健行业带来很大的前景。
发明内容
本发明的目的是提供一种糖肽合剂及其在制备改善肿瘤放化疗患者的营养状况和免疫功 能药物、保健食品或食品中的用途。
本发明提供的糖肽合剂，是由海洋低聚肽与生物活性多糖配比而成。
其中所述的海洋低聚肽是以海洋鱼类的鱼皮、鱼肉或鱼骨为主要原料，经酶法水解生产 的、能被三氯乙酸溶解、相对分子质量在1000以下的一组低分子量的寡肽混合物，包括海洋 胶原肽(来源于鱼皮)、海洋蛋白肽(来源于鱼肉)和海洋骨源肽(来源于鱼骨)，具有容易 吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点。
其中所述的生物活性多糖包括香菇多糖、灵芝多糖、猪苓多糖、人参多糖、枸杞多糖、 海藻多糖。
其中所述的药物、保健食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂、口服液。 其中所述的食品为淀粉制品、乳及乳制品、豆制品、烘焙制品。
具体实施方案
下面结合具体实施方案对本发明作进一歩的说明，这些实例应被理解为仅是举例说明，
而非以任何方式限制本发明的范围。
实施例1:海洋胶原肽和香菇多糖合剂改善荷瘤小鼠免疫功能的作用
健康清洁级雄性ICR小鼠60只，体重20.0土2.0g，由北京大学医学部实验动物中心提供，
清洁级动物房饲养，饲养环境温度25"C，湿度60。/。RH。小鼠适应性饲养3天后，制备S180
移植瘤模型，实验方法和疗效评价均按抗癌药物研究与实验技术指导原则进行。将荷瘤小鼠称重后随机分成5组，即生理盐水组、阳性对照组(5-氟尿嘧啶)、海洋胶原肽和香菇多糖合 剂(以下简称糖肽合剂)0.075、 0.15、 0.45g/kgbw组，每组12只小鼠。本实验所用糖肽合剂 中海洋胶原肽与香菇多糖的配比为20比1。各组小鼠分别用生理盐水和高、中、低浓度糖肽 合剂溶液灌胃，每Fi 1次，每次0.2ml/20g体重，阳性对照组以5-氟尿嘧啶(150mg/kg体重)， 连续14d，第15日处死动物，剥瘤、称重、计算抑瘤率抑瘤率(％)=(1-给药组平均瘤重/对 照组平均瘤重)X100M。固定实体瘤组织标本作石蜡切片，HE染色，光镜组织学观察。同时 制备各组小鼠脾细胞悬液，按照保健食品检验与评价技术规范的方法测定荷瘤小鼠T淋巴细 胞增殖能力和NK细胞活性。
实验结束时糖肽合剂各剂量组均对S180荷瘤小鼠的肿瘤生长产生了不同程度的抑制作 用，病理组织学检査显示糖肽合剂各剂量组荷瘤小鼠肿瘤组织中有异型细胞数量较生理盐水 组明显减少，且大部分细胞出现变性、坏死。糖肽合剂高、中剂量组脾T淋巴细胞增殖能力 明显高于生理盐水组，高剂量组NK细胞活性明显高于生理盐水组，差异均有显著性(P0.05)。
结果显示，本发明制剂具有抑制肿瘤生长和增强荷瘤小鼠免疫力的作用。
表1糖肽合剂对荷瘤小鼠肿瘤S180肉瘤生长的影响
组别
齐ll 量(mg/kg)
重(g) 抑瘤率(％)
生理盐水组
5-氟尿嘧啶组
糖肽合剂低剂量组
糖肽合剂中剂量组
糖肽合剂高剂量组
150 75 150 450
1.96±0.19 0.99±0.10* 1.47±0.18* 1.3410.18* 1.30±0.22*
52.6
28.3 31.9
38.4
;生理盐水组比较，差异有显著件(PO.05)
表2糖肽合剂对荷瘤小鼠脾T淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响
组别
剂量(mg/kg)
脾T淋巴细胞 增殖能力
NK细胞活性(。/。)
生理盐水组
5-氟尿嘧啶组
糖肽合剂低剂量组
糖肽合剂中剂量组
糖肽合剂高剂量组
150 75 150 450
0.36±0.09 0.51±0.08* 0.32±0.08 0.45±0.10* 0.48±0.09*
27.7±6.0 33.5±5.4* 25.3±5.3 28.1±5.8 33.2±5.1*
:与生理盐水组比较，差异有显著性(P<0.05)
实施例2:海洋胶原肽和香燕多糖合剂改善肿瘤放化疗患者营养状况的观察 于2006 2007年收集61例经临床及病理学确诊，且无放化疗禁忌症恶性肿瘤患者作为 研究对象，年龄30 66岁，其中男性32例，女29例。其中肺癌18例、胃癌20例、食管 癌15例、结肠癌8例。将患者按照体重及肿瘤类型分为治疗组(31例)和对照组(30例)，治疗组病例在放化疗疗程开始前一周服用海洋胶原肽和香菇多糖合剂(以下简称糖肽合剂， 其中海洋胶原肽与香菇多糖配比为20比1) 10g/次，2次/日，口服，2个疗程后统计疗效。 对照组病理只接受常规放化疗治疗。记录治疗前和治疗后患者的症状、体征、临床数据及病 人的精神状态、主观感觉等，以卡氏计分法评估患者的体力状况；记录治疗前后患者的体重 变化并测定治疗前后患者血清前白蛋白和白蛋白水平，以评估患者的营养状况。
治疗前两组病例体力状况、体重和血清前白蛋白及白蛋白水平没有明显差异，治疗后对 照组卡氏评分提高者9例，稳定者11例，下降者10例；治疗组卡氏评分提高者13例，稳定 者14例，下降者4例；经统计分析，两组之间卡氏评分的变化具有显著差异，表明糖肽合剂 具有改善患者体力状况的作用。治疗后治疗组平均体重及血清白蛋白水平明显高于对照组， 差异具有统计学意义。
上述结果显示，糖肽合剂具有改善肿瘤放化疗患者营养状况的作用。
表3 糖肽合剂对肿瘤放化疗患者体重及血清前白蛋白和白蛋白水平的影响
组.別体重(kg)前白蛋白(g/L)(g/L)
治疗前 治疗后治疗前 治疗后治疗前治疗后
对照组50.4±6.6 49.8±5.3213.9±15.4 188.6±13.034.8±0.733.4±1.2
糖肽合剂治疗组50.0±6.6 53.0±6.4*213.6±16.0 191.9±11.834.6±0.834.7±0.8*
*:与对照组比较，差异有显著性(PO.05)
8
权利要求
1、一种糖肽合剂产品，是由海洋低聚肽与生物活性多糖配比而成。
2、 权利要求1所述的糖肽合剂产品在制备改善肿瘤放化疗患者的营养状况和免疫功能药物、 保健食品或食品中的用途。
3、 如权利要求l，其中所述的海洋低聚肽是以海洋鱼类的鱼皮、鱼肉或鱼骨为主要原料，经 酶法水解生产的、能被三氯乙酸溶解、相对分子质量在1000以下的一组低分子量的寡肽混合 物，具有容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点。
4、 如权利要求l，其中所述的生物活性多糖包括香菇多糖、灵芝多糖、猪苓多糖、人参多糖、 枸杞多糖、海藻多糖。
5、 如权利要求2，其中所述的药物、保健食品为粉剂、颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂、口服液。
6、 如权利要求2，其中所述的食品为淀粉制品、乳及乳制品、豆制品、烘焙制品。
全文摘要
本发明涉及一种糖肽合剂产品及其在制备改善肿瘤放化疗患者的营养状况和免疫功能药物、保健食品或食品中的用途。糖肽合剂是由海洋低聚肽与生物活性多糖按照一定比例配比而成。其中的海洋低聚肽是以海洋鱼类的鱼皮、鱼肉或鱼骨为主要原料，经酶法水解生产的、能被三氯乙酸溶解、相对分子质量在1000以下的一组低分子量的寡肽混合物，具有容易吸收、吸收快、低粘度、水溶性好等特点。其中的生物活性多糖包括香菇多糖、灵芝多糖、猪苓多糖、人参多糖、枸杞多糖、海藻多糖。经动物实验和临床观察证实，海洋低聚肽和生物活性多糖配比而成的糖肽合剂具有改善荷瘤小鼠的免疫功能和改善肿瘤放化疗患者的营养状况的作用。
文档编号A61K9/20GK101544686SQ20081008940
公开日2009年9月30日 申请日期2008年3月28日 优先权日2008年3月28日
发明者勇 李, 王军波 申请人:李 勇;王军波