连钱草的水提取物的制备方法及应用的制作方法

文档序号:1246363阅读:266来源:国知局

专利名称::连钱草的水提取物的制备方法及应用的制作方法
技术领域
:本发明属于医药领域,具体涉及一种中药提取物、其制备方法及应用。
背景技术
:连钱草为唇形科活血丹属植物活血丹Glechomalongituba(Nakai)Kupr.为多年生匍甸草本植物,干燥地上部分,晒干或鲜用。连钱草在江苏民间用于利尿排石,又称"江苏金钱草",有利湿通淋、清热解毒、散瘀消肿之功效。临床上主要用于利小便,治疗膀胱结石、肾结石、输尿管结石、肾炎水肿、湿热黄疸、胆囊炎、胆石症、腮腺炎、烧伤等,现已被《中华人民共和国药典》所收载。文献对连钱草茎叶挥发油类成分报道较多,主要为含氧单萜和单萜烯类成分;对其非挥发性成分报道较少,有熊果酸、棕榈酸、琥珀酸、咖啡酸、阿魏酸、胆碱、维生素C、及水苏糖等。药理研究表明,连钱草水煎剂具有显著的利尿作用,并有利胆、溶解结石作用,抑菌试验表明其对金黄色葡萄球菌极度敏感,对痢疾杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌中度敏感。连钱草为利尿排石中成药排石颗粒的主药之一。目前没有任何文献报道有关连钱草提取物具有抗凝或溶栓的生物活性。
发明内容本发明的目的在于提供一种连钱草的提取物、其制备方法,及它在制备抗凝或溶栓药物中的应用。为解决上述技术问题,本发明提供如下两个技术方案。1)本发明所述的连钱草提取物的制备方法,其步骤包括,将干燥连钱草用乙醇加热回流提取,过滤,滤液弃掉后的剩余药渣,加水加热回流提取,再过滤,滤液浓縮至膏状物,即为所述提取物。所述的制备方法中,提取所用乙醇的浓度为75%_95%,加入的量为10-12倍,并且乙醇加热回流提取2-4次,每次1-1.5h;提取所用的水的量为12-14倍,水提时加热回流提取2-4次,每次1-1.5h。2)本发明所述的连钱草提取物的另一个制备方法,其步骤包括,将干燥连钱草用水加热回流提取,过滤,滤液浓縮至膏状物,即为所述提取物。所述的制备方法中,提取所用的水的量为12-14倍,水提时加热回流提取2-4次,每次l-2h。本发明所述的连钱草提取物,即为上述两种制备方法中任一方法所制备的提取物。本发明经过长期的摸索研究,确认连钱草抗凝或溶栓的有效部位,并提取分离得到本发明的连钱草提取物,用以制备抗凝或溶栓的药物。本发明解决了长期以来存在的药物发挥作用较慢,质量较难控制等中药使用局限。本发明人对连钱草提取物经过大量的药效学试验研究表明,本发明提取物具有药效作用强,安全范围大,以及质量可控等优点。具体实施例方式实施例1连钱草提取工艺干燥连钱草400g,加入5.6L水加热回流提取2h,过滤,滤渣中加入4.8L水再加热回流提取lh,过滤,合并滤液,滤液浓縮至膏状物,即为所述提取物。冷冻干燥抽真空,得连钱草提取物的冻干粉。实施例2连钱草提取工艺干燥连钱草400g,加入5.6L水加热回流提取1.5h,过滤,滤渣中加入5.6L水再加热回流提取1.5h,过滤,合并滤液,滤液浓縮至膏状物,即为所述提取物。冷冻干燥抽真空,得连钱草提取物的冻干粉。实施例3连钱草提取工艺干燥连钱草400g,加入4.8L的75%乙醇加热回流提取1.5h,过滤,弃掉滤液,滤渣中加入4L的75%乙醇,加热回流提取1.5h,过滤,弃掉滤液,滤渣中加入5.6L纯水加热回流提取2次,合并滤液后浓縮至膏状物,即为所述提取物。冷冻干燥抽真空,得连钱草提取物的冻干粉。实施例4连钱草提取工艺干燥连钱草400g,加入4.8L的85%乙醇加热回流提取1.5h,过滤,弃掉滤液,滤渣中加入4L的85%乙醇,加热回流提取1.5h,过滤,弃掉滤液,滤渣中加入4.8L纯水加热回流提取2次,合并滤液后浓縮至膏状物,即为所述提取物。冷冻干燥抽真空,得连钱草提取物的冻干粉。实施例5连钱草提取工艺干燥连钱草400g,加入4.8L的95%乙醇加热回流提取1.5h,过滤,弃掉滤液,滤渣中加入4L的95%乙醇,加热回流提取1.5h,过滤,弃掉滤液,滤渣中加入5.2L纯水加热回流提取2次,合并滤液后浓縮至膏状物,即为所述提取物。冷冻干燥抽真空,得连钱草提取物的冻干粉。实施例6连钱草提取物对复钙时间的影响1.分组设4个对照组,即水蛭低剂量组、水蛭高剂量组、元胡低剂量组、元胡高剂量组,两个实验组,即连钱草低剂量组、连钱草高剂量组。所有的低剂量组均为10mg/ml,所有的高剂量组均为30mg/ml。(水蛭、元胡均为水提物)2.药品0.1M草酸钠,O.025MCaCl2溶液。3.方法大鼠断头取血,制成大鼠草酸钠血浆(血液抗凝剂=9:l,抗凝剂为0.1M草酸钠),经1500r/min,离心5min,取上清液与样品各0.lml,37。C培养3min,再加上0.025MCaCl2溶液0.2ml,记录凝固时间,对照液用0.15MNaClTris-HCl缓冲液(PH=7.3)。4.结果:由表1可以看出,通过复钙时间的测定,本发明的低剂量提取物与水蛭组相比有显著性差异,高剂量提取物与水蛭组相比有极显著性差异。同样,与元胡组相比,无论是低剂量还是高剂量,均具有极显著性差异。这说明本发明提取物有很好的抗凝活性。表1各提取物对复钙时间的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>与水蛭组相比,#p<0.05,##p<0.01与元胡组相比,**p<0.01实施例7提取物的体外溶栓作用1.动物家兔2.药品受试药提取物3.方法家兔耳缘静脉采血,制成草酸钠血浆,然后依次加入纤维蛋白原、CaCl2(55.5g/L)和凝血酶(1X105u/L),加入量为lml血中加入20微升蛋白原、10微升CaCl2、20微升凝血酶,快速混匀后用一次性塑料注射器将血液快速注入内径为3毫米的聚乙烯管中,放入37度水浴20min,将血栓取出,切成1.5厘米小段,分别称其质量然后放入待试样品的试管中,放入37度水浴中,4h后将其剩余血栓段取出分别称其重量,计算血栓单位质量,各质量浓度药物重复8次,血栓单位质量=药物作用4h后血栓质量/血栓长度。4.结果:由表2可以看出,通过对体外血栓的溶解试验显示,本发明的提取物与赋形剂组或尿激酶组相比,均有极显著性差异。这说明本发明提取物有很好的溶栓活性。表2连钱草提取物对体外血栓的溶解作用<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>与赋形剂组比,##p<0.01与尿激酶组比,**p<0.01实施例8提取物的体外抗凝作用和体内溶栓作用每组于造模前4小时及造模前15分钟各给药一次,耳缘静脉注射麻醉,分离两侧颈总动脉,长度约4cm。动脉下置小片塑料薄膜,用于保护血管周围组织,将吸有20微升的FeC13溶液的小纸片敷于颈总动脉上,敷纸片30分钟后去除纸片,再过90分钟后,测下列指标1.取血lml,测凝血时间。2.定量取3ml血,自然凝固,测体外全血凝固重量。3.剪下主动脉血栓位置血管,吸干残血称重。由表3可以看出,通过对凝血时间、全血凝固重量、颈动脉血栓重量的试验显示,相比,中剂量组均有显著性差异,高剂量组有极显著性差异。这说明本发明提取物有很好的抗凝活性。表3连钱草提取物对凝血时间、全血凝固重量的影响组别n凝血时间全血凝固重量模型组869.4±12.9141.9±25脉络舒通组8216.8±19.1107.6±16连钱草低剂量组8163.8±13,广95.6±26**连钱草中剂量组8253.8±36.2*科90.9±14***连钱草高剂量组8306.4±46.7,73.1±13##**与模型组比,**p<0.01与脉络舒通组比,#p<0.05,##p<0.01。权利要求连钱草或连钱草提取物在制备抗凝或溶栓药物中的应用。2.权利要求1所述连钱草提取物的制备方法,其步骤包括以下两种技术方案A.将干燥连钱草用乙醇加热回流提取,过滤,滤液弃掉后的剩余药渣,加水加热回流提取,再过滤,滤液浓縮至膏状物,即为所述提取物。B.将干燥连钱草用水加热回流提取,过滤,滤液浓縮至膏状物,即为所述提取物。3.如权利要求2所述的制备方法,其中A方案提取所用乙醇的浓度为75-95%,加入的量为10-12倍。4.如权利要求2或3所述的制备方法,其中A方案乙醇加热回流提取2-4次,每次1-1.5h。5.如权利要求2所述的制备方法,其中B方案水的加入量为12-14倍。6.如权利要求2或5所述的制备方法,其中B方案水加热回流提取2-4次,每次l-2h。全文摘要本发明属于医药领域,具体涉及一种连钱草或连钱草提取物的应用,以及连钱草提取物的制备方法。经过大量试验研究发现,连钱草或连钱草提取物具有抗凝和溶栓的功效。另外,发明人还提供了所述连钱草提取物的两种制备方法A.将干燥连钱草用乙醇加热回流提取,过滤,滤液弃掉后的剩余药渣,加水加热回流提取,再过滤,滤液浓缩至膏状物,即为所述提取物;B.将干燥连钱草用水加热回流提取,过滤,滤液浓缩至膏状物,即为所述提取物。本发明制备工艺简单易行,制备的提取物具有药效作用强,安全范围大,以及质量可控等优点。文档编号A61K36/53GK101711791SQ200810167179公开日2010年5月26日申请日期2008年10月8日优先权日2008年10月8日发明者李欣,赵志全申请人:鲁南制药集团股份有限公司
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1