专利名称：咪唑-4-酮及咪唑-4-硫酮化合物的制作方法
技术领域：
本发明是涉及咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物及其在制备用于治疗大麻碱受体媒介的疾患的药物中的用途。
背景技术：
数世纪来自大麻植物(Cannabis sativa)分离的大麻碱类(Cannabinoids)已被认知作为治疗剂。例如，它们已被使用于止痛、肌肉松弛、食欲刺激及抗抽搐。近来的研究也显示了它们于治疗癌症以及减轻慢性发炎症(例如风湿病与多发性硬化症)症状的潜在的治疗效果。
大麻碱类的作用是通过至少两种大麻碱受体(CB1与CB2受体)所媒介，该两种受体属于G-蛋白-偶合受体(GPCR)超级家族。CB1受体压倒性地表达于脑中以媒介传达子(transmitter)释放的抑制，以及CB2受体主要地表达于免疫细胞以媒介免疫响应。参照Matsuda等，Nature(1990)346561以及Munro等，Nature(1993)36561。
相较于其它GPCR，CB1受体典型地被较高程度地表达。于中枢神经系统中，其高度表达于大脑皮质、海马回、基底神经节及小脑，但于下视丘及脊髓则具有相对低的程度。参照Howlett等，Pharmacol Rev(2002)54161。其功能影响许多神经病学上与心理学上的现象，例如情绪、食欲、呕吐调控、记忆、肌肉紧张性的空间协调与止痛。参照Goutopoulos等，Pharmacol Ther(2002)95103。除了中枢神经系统之外，CB1受体亦存在于数个周围器官，例如肠、心、肺、子宫、卵巢、睪丸以及扁桃体。参照Galiègue等，Eur J Biochem(1995)23254。
CB2受体为44％相同于CB1受体且于穿膜区域有68％相同性。参照Munro等，Nature(1993)36561。相较于CB1受体，CB2受体具有更为受限的分布，于肾及扁桃体具有高表达，且于肺、子宫、胰脏、骨髓及胸腺具有低表达。于免疫细胞中，B细胞表现CB2受体为高程度，依序为天然杀手细胞、单核球、多形性核中性球以及T淋巴球。参照Galiègue等，Eur J Biochem(1995)23254。CB2受体的活化已显示于相关于神经退化疾病(例如阿兹海默症)的发炎性模式中具有止痛效果，且于骨密度的维持与动脉硬化损伤的进展起作用。参照Malan等，Pain(2001)93239；Benito等，J Neurosci(2003)2311136；Ibrahim等，ProcNatl Acad Sci USA(2003)10010529；Idris等，Nat Med(2005)11774；以及Steffens等，Nature(2005)434782。
发明内容
本发明是基于意外的发现某些咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物有效于治疗大麻碱受体媒介的疾患。
于一方面中，本发明涉及式(I)化合物
式(I)中，两个
键之一者为单键且另一者双键；X为O或S；以及R1、R2、R3、R4、R5及R6的每一个独立地为氢、卤基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基或杂环烯基，或R3及R4与其所键结的碳原子共同为环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、芳基或杂芳基。
上述化合物的一个亚组包括其中X为O的化合物。在这些化合物中，R1可为芳基或杂芳基(例如苯基或噻吩基)；R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基；或R6可为芳基或杂芳基(例如卤基取代的苯基)。
该化合物的另一个亚组包括其中X为S的化合物。在这些化合物中，R1可为芳基或杂芳基(例如苯基或噻吩基)；R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基；或R6可为芳基或杂芳基(例如卤基取代的苯基)。
术语“烷基”意指含有1至20个碳原子(例如C1-C10)的直链或支链单价烃。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基以及叔丁基。术语“烯基”意指含有2至20个碳原子(例如C2-C10)以及一个或更多个双键的直链或支链单价烃。烯基的实例包括但不限于乙烯基、丙烯基以及烯丙基。术语“炔基”意指含有2至20个碳原子(例如C2-C10)以及一个或更多个叁键的直链或支链单价烃。炔基的实例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、1-与2-丁炔基以及1-甲基-2-丁炔基。
术语“环烷基”意指具有3至30个碳原子((例如C3-C12)的单价饱和烃环系。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基及环辛基。术语“环烯基”意指具有3至30个碳原子((例如C3-C12)以及一个或更多个双键的单价非芳族烃环系。环烯基的实例包括环戊烯基、环己烯基及环庚烯基。术语“杂环烷基”意指具有一个或多个杂原子(例如O、N、S或Se)的单价非芳族的5至8元单环、8至12元双环或11至14元叁环系。杂环烷基的实例包括但不限于哌嗪基、吡咯烷基、二氧杂环己基、吗啉基及四氢呋喃基。术语“杂环烯基”意指具有一个或多个杂原子(例如O、N、S或Se)以及一个或更多个双键的单价非芳族的5至8元单环、8至12元双环或11至14元叁环系。
术语“芳基”意指单价的6-碳单环、10-碳双环、14-碳叁环芳族环系。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基及蒽基。术语“杂芳基”意指具有一个或多个杂原子(例如O、N、S或Se)的单价芳族的5至8元单环、8至12元双环或11至14元叁环系。杂芳基的实例包括吡啶基、呋喃基、咪唑基、苯幷咪唑基、嘧啶基、噻吩基、喹啉基、吲哚基及噻唑基。
上述的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基及杂芳基包括经取代与未经取代两部分。于环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基及杂芳基上的可能的取代基包括但不限于C1-C10烷基(例如，三氟甲基)、C2-C10烯基、C2-C16炔基(例如，芳炔基)、C3-C20环烷基、C3-C20环烯基、C1-C20杂环烷基、C1-C20杂环烯基、C1-C10烷氧基、芳基、(例如，卤芳基或卤基取代的芳基)、芳氧基、杂芳基、杂芳氧基、胺基、C1-C10烷胺基、芳胺基、羟基、卤基、酮基(oxo)(O＝)、硫酮基(thioxo)(S＝)、硫基、硅烷基、C1-C10烷硫基、芳硫基、C1-C10烷基磺酰基、芳基磺酰基、酰胺基、胺基酰基、胺基硫酰基、脒基、巯基、酰胺基、硫脲基、氰硫基、磺酰胺撑基、胍基、脲基、氰基、硝基、酰基、硫酰基、酰氧基、氨基甲酰胺基、氨基甲酰基、羧基以及羧酸酯。另一方面，于烷基、烯基或炔基上的可能的取代基包括上述除了C1-C10烷基外的全部取代基。环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、芳基及杂芳基也可彼此稠合。
上述的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物包括化合物本身，以及合适的其盐、其溶剂化物与其前药。例如，盐可形成于阴离子与咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物的正电荷基团(例如胺基)之间。适合的阴离子包括氯化物、溴化物、碘化物、硫酸盐、硫酸氢盐、氨基磺酸盐、硝酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐、甲烷磺酸盐、三氟乙酸盐、谷氨酸盐、葡糖醛酸盐、戊二酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、琥珀酸盐、反丁烯二酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、水杨酸盐、乳酸盐、萘磺酸盐及乙酸盐。同样地，盐也可形成于阳离子与咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物的负电荷基团(例如羧酸根)之间。适合的阳离子包括钠离子、钾离子、镁离子、钙离子及例如四甲基铵离子的铵阳离子。咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物还包括那些含有四级氮原子的盐。前药的实例包括酯与其它医药可接受衍生物，其于给药至个体时，可提供活性咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物。
于另一方面中，本发明涉及一种用以治疗大麻碱受体媒介的疾患的方法。本方法包括给药有效量的一种或多种上述所示式(I)的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物至有需要的个体。大麻碱受体媒介的疾患的实例包括肝纤维化、掉发、肥胖、代谢综合症(例如，X综合症)、高脂血症、II型糖尿病、动脉硬化症、物质成瘾(例如，酒精成瘾或尼古丁成瘾)、忧郁症、动机缺乏综合症、学习或记忆障碍、出血性休克、缺血、肝硬化、神经性疼痛、呕吐、高眼压、支气管扩张、骨质疏松症、癌症(例如，前列腺癌、肺癌、乳癌或头颈癌)、神经退化性疾病(例如，阿兹海默症或帕金森氏症)或发炎性疾病。
也在本发明范围之中的为含有一种或多种用于治疗大麻碱受体媒介疾患的上述咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物的药物组合物，以及此治疗用途与用于制造用以治疗大麻碱受体媒介的疾患的药物的这些化合物的用途。
本发明的一个或多个实施方式的详细内容被说明于下文。由说明书和权利要求书，本发明的其它特征、目的及优势将显而易见。
具体实施例方式 示于下文者为本发明的示例性化合物
本发明的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物可通过已知的化学转化(包括保护基团方法学)而制备，例如叙述于下述文献及其后续版本R.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Greeneand P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，3rd Ed.，John Wileyand Sons(1999)；L.Fieser and M.Fieser，Fieser and Fieser’s Reagents forOrganic Synthesis，John Wiley and Sons(1994)；和L.Paquette，ed.，Encyclopediaof Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1995)。下文方案1至4显示用于合成本发明化合物的转化。
化合物6至22是根据显示于下文方案1的使用化合物6及其对应的硫酮21作为典型例的一般合成方法而制备。于LHMDS作为碱的存在下，用草酸二乙酯处理1-(4-氯苯基)-丙烷-1-酮(1a)获得锂盐2a，产率为80％，该锂盐依序地与在乙醇中的2，4-二氯苯肼盐酸盐结合，接着于回流条件下在乙酸中进行分子内环化而提供酯3a，两步骤产率为49％。由此所获得的化合物3a于标准条件下经历碱性水解而获得羧酸4a，产率为94％，然后该羧酸以草酰氯处理而活化羧基。所得的酸氯化物与2-甲基-2-甲基胺基-丙酰胺(5a)结合以提供粗制酰胺中间体。此中间体无需纯化而于甲醇钠的存在下进行分子内环化而提供所需产物6，两步骤产率为55％。用劳森试剂(Lawesson’s reagent)进一步处理化合物6而提供对应的硫酮21，产率为77％。
方案1
化合物23至30是根据显示于下文方案2的使用化合物23及其甲基化衍生物27作为典型例的一般合成方法而制备。羧酸4a首先以草酰氯处理且所得的酸氯化物与2-胺基-2-甲基-丙酰胺(5i)结合而提供粗制酰胺。此粗制酰胺中间体当用POCl3处理时进行分子内环化而提供所需产物23，两步骤产率为53％。进一步地，使用氢化钠作为碱，化合物23与甲基碘的烷基化而提供对应的甲基化产物27，产率为68％。
方案2
化合物33至42是根据显示于下文方案3的使用化合物34及其对应的硫酮40作为典型例的一般合成方法而制备。起始物31a至31g为容易地以Shia等人所报导的步骤(Journal of Medicinal Chemistry，2008，51，5397-5412)而制备。化合物31b与草酰氯反应以活化羧基且所得的酸氯化物与2-甲基-2-甲基胺基-丙酰胺(5a)结合以提供粗制酰胺中间体。此粗制中间体无需纯化而用甲醇钠处理进行分子内环化提供所需产物34，两步骤产率为51％。进一步地，用劳森试剂(Lawesson’s reagent)处理化合物34而提供对应的硫酮40，产率为73％。
方案3
化合物43及44是根据显示于下文方案4的一般合成方法而制备。起始物32是经由Shia等人所报导的合成方法(Journal of Medicinal Chemistry，2008，51，5397-5412)而制备。化合物32与草酰氯反应以活化羧基且所得的酸氯化物与2-甲基-2-甲基胺基-丙酰胺(5a)结合以提供粗制酰胺，其依序地，无需纯化而用甲醇钠处理而进行环化以提供所需化合物43，两步骤产率为70％。进一步地，于一大气压氢气下使用催化剂Pd-C的化合物43的转化而提供对应的饱和产物44，产率为62％。
方案4
本发明的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物也可通过类似于方案1至4所述的方式与由此项技术领域中技术人员所认知的必要修改而合成。
如此所合成的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物可通过快速柱色谱层析、高效液相色谱层析、结晶或任何其它合适的方法进一步地纯化。
本文所述及的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物可含有非芳族双键以及一个或多个不对称中心。因此，其可存在为外消旋物与外消旋的混合物、单一对映体、单独的非对映体、非对映体的混合物、以及顺式或反式异构形式。所有这些异构形式都包含于本发明。
也在本发明范围之中的是，(1)一种药物组合物，其含有有效量的至少一种本发明的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物以及药学可接受载体，以及(2)一种通过对有需要此治疗的个体给药有效量的这种咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物的治疗大麻碱受体媒介的疾患的方法。
如本文所使用的，术语“治疗”意指对具有大麻碱媒介的疾患、或具有该症状或易于罹患该疾患的症状的个体给药咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物，以治愈、医治、减轻、缓解、改变、医疗、缓和、改善或影响上述的疾患、症状或易于罹患该疾患的症状为目的。术语“有效量”意指于个体足以给与所欲的治疗效果的活性药剂的量。作为此项技术领域中技术人员所认知的，有效量可取决于给药途径、赋形剂使用以及与其它药剂同时使用的可能性而变化。
为实施本发明的方法，上述药物组合物可经口、非经肠、通过吸入喷雾、局部地、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或经由灌注器(implanted reservoir)而给药。如使用于本文的术语“非经肠”包括皮下、皮内、静脉内、肌肉内、关节内、动脉内、滑液内、胸骨内、鞘内、病灶内以及颅内注射或输注技术。
无菌注射组合物，例如无菌注射水溶液或油性悬浮液，可根据此项技术领域众所周知的技术，使用合适的分散剂或湿润剂(例如Tween 80)以及悬浮剂而配制。无菌注射制剂也可为于无毒性的非经肠的可接受稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如于1，3-丁二醇中的溶液。可接受的媒剂与溶剂中，可使用甘露醇、水、林格氏液(Ringer’s solution)与等压的氯化钠溶液。此外，无菌的、固定化油通常被用作溶剂或悬浮介质(例如，合成的甘油单酯或甘油二酯)。诸如油酸及其甘油酯衍生物之类的脂肪酸在制备注射剂中是有用的，其作为天然的药学上可接受油，例如橄榄油或蓖麻籽油，特别是其聚氧乙基化形式(polyoxyethylated version)。这些油溶液或悬浮液液可含有长链醇稀释剂或分散剂，或羧甲基纤维素或类似的分散剂。其它在制造药学上可接受的固态、液态或其它剂型中常用的表面活性剂(例如Tween或Spans)或其它类似的乳化剂或生物利用度增强剂也可被用于该配方。
用于经口给药的组合物可为任何经口可接受剂型，包括但不限于胶囊、锭剂、乳化物及水性悬浮物、分散物与溶液。于经口使用的锭剂的情况中，通常使用的载体包括乳糖与玉米淀粉。还可典型地添加润滑剂，例如硬脂酸镁。对于经口给药为胶囊形式，有用的稀释剂包括乳糖和干玉米淀粉。当经口给药水性悬浮液或乳化物时，活性成分可与乳化剂或悬浮剂结合而悬浮或溶解于油相中。如果需要，可添加某些甜味剂、矫味剂或着色剂。可根据药物制剂的技术领域中众所周知的技术而制备经鼻喷雾或吸入组合物。含有咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物的组合物也可以用于直肠给药的栓剂形式而给药。
药物组合物中的载体必须为“可接受的”意味与配方的活性成分相容(且较佳地为可稳定化该成分)且无损害于对欲治疗的个体。例如，可使用与咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物形成更为可溶的复合物的一个或多个增溶剂或更增溶剂作为药物载体以传递活性化合物。其它载体的实例包括胶体二氧化硅、硬脂酸镁、月桂基硫酸钠、以及D&C Yellow #10。
上述的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物可通过活体外分析以及其后的动物试验与临床试验，预先筛选其对于治疗上述疾病的药效。其它方法也为本发明技术领域中普通技术人员所明了。
无需进一步的详细叙述，认为上述说明已充分地揭露本发明。因而，下述实施例仅解释为示例，且不以任何方式为本发明其余部分的限制。本文所引用的所有文献都并入本文作为参考文献。
实施例
实施例14-(4-氯-苯基)-3-甲基-2，4-二酮基-丁酸乙基酯的锂盐(2a)的合成 于-78℃、氩气下，于锂化双-(三甲基硅烷基)酰胺(16.0mL，1.0M于THF，16mmol)的乙醚(45mL)的磁性搅拌溶液中，滴加1-(4-氯-苯基)-丙烷-1-酮(1a)(2.0g，11.86mmol)的乙醚(15mL)溶液。在此温度混合物搅拌45分钟后，滴加草酸二乙酯(2.0g，13.69mmol)。使反应混合物升温至室温并再搅拌16小时。通过过滤收集所形成的沉淀，以乙醚洗涤，且真空干燥后得到呈浅黄色固体的粗制锂盐2a(2.6g，80％)。
实施例24-(4-氯-苯基)-2，4-二酮基-丁酸乙基酯的锂盐(2b)的合成 以类似于实施例1所述方式由1-(4-氯-苯基)-乙酮(1b)(2.0g，12.93mmol)合成呈浅黄色固体的化合物2b(2.3g，68％)。
实施例33-(4-氯-芐酰基)-2-酮基-戊酸乙基酯的锂盐(2c)的合成 以类似于实施例1所述方式由1-(4-氯-苯基)-丁烷-1-酮(1c)(2.0g，10.95mmol)合成呈浅黄色固体的化合物2c(2.1g，66％)。
实施例44-(4-溴-苯基)-3-甲基-2，4-二酮基-丁酸乙基酯的锂盐(2d)的合成 以类似于实施例1所述方式由1-(4-溴-苯基)-丙烷-1-酮(1d)(2.0g，9.39mmol)合成浅呈黄色固体的化合物2d(2.2g，73％)。
实施例53-(4-溴-芐酰基)-2-酮基-戊酸乙基酯的锂盐(2e)的合成 以类似于实施例1所述方式由1-(4-溴-苯基)-丁烷-1-酮(1e)(2.0g，8.81mmol)合成呈浅黄色固体的化合物2e(1.9g，65％)。
实施例64-(4-甲氧基-苯基)-3-甲基-2，4-二酮基-丁酸乙基酯的锂盐(2f)的合成 以类似于实施例1所述方式由1-(4-甲氧基-苯基)-丙烷-1-酮(1f)(2.0g，12.19mmol)合成呈浅黄色固体的化合物2f(2.6g，79％)。
实施例74-(4-氟-苯基)-3-甲基-2，4-二酮基-丁酸乙基酯的锂盐(2g)的合成 以类似于实施例1所述方式由1-(4-氟-苯基)-丙烷-1-酮(1g)(2.0g，13.16mmol)合成呈浅黄色固体的化合物2g(2.4g，71％)。
实施例83-甲基-2，4-二酮基-4-(4-三氟甲基-苯基)-丁酸乙基的锂盐(2h)的合成 以类似于实施例1所述方式由1-(4-三氟甲基-苯基)-丙烷-1-酮(1h)(2.0g，9.90mmol)合成呈浅黄色固体的化合物2h(2.2g，72％)。
实施例95-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙基酯(3a)的合成 于室温，对锂盐2a(2.60g，9.47mmol)的乙醇(35mL)溶液，一次地添加2，4-二氯苯肼盐酸盐(2.2g，10.30mmol)。所得混合物于相同温度搅拌20小时。反应完成后，通过过滤收集沉淀，用乙醇与乙醚洗涤，且真空干燥而获得淡黄色固体。此粗制固体不纯化，溶解于乙酸(30mL)且加热回流24小时。反应混合物倒至冰水中且所得混合物以乙酸乙酯(2x30mL)萃取。合并萃取物以水、饱和碳酸氢钠水溶液及盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥、过滤以及浓缩。粗制残余物通过硅胶快速色谱层析以己烷/乙酸乙酯(9∶1)纯化而制得呈白色固体的酯3a(1.9g，两步骤产率为49％)。
实施例105-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙基酯(3b)的合成 以类似于实施例9所述的方式由2b(2.3g，8.83mmol)合成呈白色固体的化合物3b(1.7g，49％)。
实施例115-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-羧酸乙基酯(3c)的合成 以类似于实施例9所述的方式由2c(2.1g，7.28mmol)合成呈白色固体的化合物3c(1.1g，36％)。
实施例125-(4-溴-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙基酯(3d)的合成 以类似于实施例9所述的方式由2d(2.2g，6.89mmol)合成呈白色固体的化合物3d(1.5g，48％)。
实施例135-(4-溴-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-羧酸乙基酯(3e)的合成 以类似于实施例9所述的方式由2e(1.9g，5.70mmol)合成呈白色固体的化合物3e(1.0g，37％)。
实施例141-(2，4-二氯-苯基)-5-(4-甲氧基-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙基酯(3f)的合成 以类似于实施例9所述的方式由2f(2.6g，9.62mmol)合成呈白色固体的化合物3f(1.6g，41％)。
实施例151-(2，4-二氯-苯基)-5-(4-氟-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙基酯(3g)的合成 以类似于实施例9所述的方式由2g(2.4g，9.30mmol)合成呈白色固体的化合物3g(1.5g，41％)。
实施例161-(2，4-二氯-苯基)-5-(4-三氟甲基-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙基酯(3h)的合成 以类似于实施例9所述的方式由2h(2.2g，7.14mmol)合成呈白色固体的化合物3h(1.5g，47％)。
实施例175-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸(4a)的合成 对酯3a(1.0g，2.44mmol)的甲醇(25mL)溶液，一次地添加氢氧化钾(1.0g，17.86mmol)。所得混合物于60℃加热4小时。然后将反应混合物倒至冰水中，且通过添加10％盐酸将混合物的pH调整为酸性。通过过滤收集所形成的沉淀，用水洗涤，真空干燥而制得呈白色固体的羧酸4a(0.88g，94％)。
实施例185-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-1H-吡唑-3-羧酸(4b)的合成 以类似于实施例17所述的方式由3b(0.97g，2.45mmol)合成呈白色固体的化合物4b(0.84g，93％)。
实施例195-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-羧酸(4c)的合成 以类似于实施例17所述的方式由3c(1.02g，2.41mmol)合成呈白色固体的化合物4c(0.85g，89％)。
实施例205-(4-溴-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸(4d)的合成 以类似于实施例17所述的方式由3d(1.02g，2.25mmol)合成呈白色固体的化合物4d(0.81g，85％)。
实施例215-(4-溴-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-羧酸(4e)的合成 以类似于实施例17所述的方式由3e(0.94g，2.01mmol)合成呈白色固体的化合物4e(0.78g，88％)。
实施例221-(2，4-二氯-苯基)-5-(4-甲氧基-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸(4f)的合成 以类似于实施例17所述的方式由3f(1.01g，2.49mmol)合成呈白色固体的化合物4f(0.79g，84％)。
实施例231-(2，4-二氯-苯基)-5-(4-氟-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸(4g)的合成 以类似于实施例17所述的方式由3g(0.98g，2.49mmol)合成呈白色固体的化合物4g(0.84g，92％)。
实施例241-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-5-(4-三氟甲基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸(4h)的合成 以类似于实施例17所述的方式由3h(1.07g，2.41mmol)合成呈白色固体的化合物4h(0.88g，88％)。
实施例252-溴-2-甲基丙酰胺的合成 于0℃，向28％NH4OH(25mL，411.76mmol)的剧烈搅拌溶液中，依序地滴加H2O(25mL)及2-溴-2-甲基丙酰溴(10.0g，43.50mmol)。使反应混合物升温至室温且再搅拌2小时。通过过滤收集所形成的沉淀，以水洗涤，且于真空干燥以获得呈白色固体的2-溴-2-甲基丙酰胺(6.1g，84％)。
实施例262-甲基-2-甲基胺基-丙酰胺(5a)的合成 于室温，向2-溴-2-甲基-丙酰胺(9.12g，54.93mmol)与氧化银(I)(14.4g，102.9mmol)的THF(120mL)混合物中滴加甲基胺(60mL，2M于THF，120mmol)。所得混合物于室温搅拌15小时。过滤反应混合物，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱层析以乙酸乙酯/甲醇(4∶1)纯化制得5a(3.02g，47％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.31(s，3H)，1.32(s，3H)，1.29(s，3H). 实施例272-乙基胺基-2-甲基-丙酰胺(5b)的合成 以类似于实施例26所述的方式由2-溴-2-甲基-丙酰胺(2.03g，12.23mmol)合成呈米白色固体的化合物5b(0.81g，51％)。
实施例282-甲基-2-丙基胺基-丙酰胺(5c)的合成 以类似于实施例26所述的方式由2-溴-2-甲基-丙酰胺(1.04g，6.26mmol)合成呈米白色固体的化合物5c(0.41g，45％)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.21(br s，1H)，5.71(br s，1H)，2.46-2.44(m，2H)，1.44-1.42(m，2H)，1.29(s，6H)，0.91-0.89(m，3H)；ESMS m/z145.3(M+1). 实施例292-丁基胺基-2-甲基-丙酰胺(5d)的合成 以类似于实施例26所述的方式由2-溴-2-甲基-丙酰胺(0.98g，5.90mmol)合成呈米白色固体的化合物5d(0.37g，40％)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.15(br s，1H)，6.27(br s，1H)，2.43(t，2H)，1.37-1.26(m，10H)，0.83(d，3H)；ESMSm/z159.4(M+1). 实施例302-烯丙基胺基-2-甲基-丙酰胺(5e)的合成 以类似于实施例26所述的方式由2-溴-2-甲基-丙酰胺(1.10g，6.63mmol)合成呈米白色固体的化合物5e(0.39g，41％)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.13(br s，1H)，6.12(br s，1H)，5.86-5.82(m，1H)，5.17-5.14(m，1H)，5.03-5.01(m，1H)，3.12-3.10(m，2H)，1.28(d，6H)；ESMS m/z143.0(M+1). 实施例312-环丙基胺基-2-甲基-丙酰胺(5f)的合成 以类似于实施例26所述的方式由2-溴-2-甲基-丙酰胺(0.96g，5.78mmol)合成呈米白色固体的化合物5f(0.36g，44％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.88(br s，1H)，5.85(br s，1H)，2.05-2.10(m，1H)，1.34(s，6H)，0.45-0.41(m，2H)，0.34-0.30(m，2H)；ESMS m/z143.3(M+1). 实施例322-异丁基胺基-2-甲基-丙酰胺(5g)的合成 以类似于实施例26所述的方式由2-溴-2-甲基-丙酰胺(1.05g，6.32mmol)合成呈米白色固体的化合物5g(0.46g，46％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.15(br s，1H)，6.27(br s，1H)，2.14-2.11(m，2H)，1.56-1.59(m，1H)，1.24(s，6H)，0.85(d，6H)；ESMS m/z159.2(M+1). 实施例332-芐基胺基-2-甲基-丙酰胺(5h)的合成 以类似于实施例26所述的方式由2-溴-2-甲基-丙酰胺(1.04g，6.26mmol)合成呈米白色固体的化合物5h(0.50g，42％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.23(m，5H)，3.65(s，1H)，3.64(s，1H)，1.37(s，3H)，1.36(s，3H). 实施例342-胺基-2-甲基-丙酰胺盐酸盐(5i)的合成 向2-叔丁氧基羰基胺基-2-甲基-丙酸(0.99g，4.87mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中，一次地依序添加EDCI(1.4g，7.30mmol)与HOBt(1.0g，7.40mmol)。所得混合物于室温搅拌2小时后，以气泡打入NH3(g)10分钟。酰胺化反应完成后，将反应混合物倒至冰水中，且所得混合物以乙酸乙酯(2x50mL)萃取。合并萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，浓缩而制得粗制产物，其次，该粗制产物无需纯化，在室温与HCl(17mL，2M于乙醚)于二氯甲烷(7mL)进行水解反应15小时。过滤混合物以及固体残余物于真空干燥而制得呈白色固体的5i(0.41g，61％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.59(s，6H). 实施例351-胺基-环戊烷羧酰胺盐酸盐(5j)的合成 向1-胺基-环戊烷羧酸(1.03g，7.97mmol)的水(16mL)溶液中，一次地添加二碳酸二-叔丁酯(2.5g，11.46mmol)与氢氧化钠(0.65g，16.25mmol)。所得混合物于室温搅拌15小时。反应混合物以10％盐酸酸化后，以乙酸乙酯(2x50mL)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩而制得粗制的1-叔丁氧基羰基胺基-环戊烷羧酸。不纯化，于室温将所获得的粗制羧酸产物用EDCI(1.5g，7.82mmol)与HOBt(1.1g，8.14mmol)于二氯甲烷(25mL)中处理2小时后，将NH3(g)导入该溶液30分钟。酰胺化反应完成后，将反应混合物倒入冰水中，且用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩而制得粗制酰胺产物，该粗制产物于室温用HCl(14mL，2M于乙醚，28mmol)于二氯甲烷(7mL)中进行水解反应15小时。过滤反应混合物且固体残余物于真空干燥而获得5j(0.45g，三步骤为34％)。
实施例362-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(6)的合成 于0℃，向4a(1.0g，2.62mmol)的甲苯(30mL)溶液中依序地滴加DMF(0.2mL)及草酰氯(1.48g，11.66mmol)。使所得混合物升温至室温且搅拌1小时后，于0℃，缓慢地移转至5a(0.50g，4.30mmol)与三乙基胺(0.42g，4.16mmol)的THF(30mL)混合物。使混合物升温且于室温搅拌15小时，反应以水淬熄且以乙酸乙酯(2x30mL)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩而制得粗制残余物(1.22g)，其无需纯化，通过于60℃用甲醇钠(270mg，5.00mmol)的甲醇(30mL)处理4小时进行分子内环化。反应完成后，浓缩反应混合物且倒至冰水中，所得混合物以乙酸乙酯(2x30mL)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤以及浓缩。残余物以硅胶快速色谱层析以己烷/乙酸乙酯(1∶1)纯化而获得呈白色固体的所欲的产物6(0.67g，55％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.41(d，1H)，7.25(d，2H)，7.22(dd，1H)，7.12(d，1H)，7.01(d，2H)，3.42(s，3H)，2.35(s，3H)，1.37(s，6H)；ESMS m/z461.0(M+1). 实施例372-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1-乙基-5，5-二甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(7)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4a(251mg，0.66mmol)与5b(140mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物7(110mg，35％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(d，1H)，7.28(d，2H)，7.25(dd，1H)，7.14(d，1H)，7.04(d，2H)，3.90(q，2H)，2.37(s，3H)，1.41(s，6H)，1.27(t，3H)；ESMS m/z475.0(M+1). 实施例382-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-5，5-二甲基-1-丙基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(8)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4a(250mg，0.66mmol)与5c(150mg，1.04mmol)合成呈白色固体的化合物8(97mg，30％)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.45(d，1H)，7.28-7.23(m，3H)，7.11(d，1H)，7.05(d，2H)，3.76-3.73(m，2H)，2.37(s，3H)，1.72-1.68(m，2H)，1.41(s，6H)，0.81(t，3H)；ESMS m/z489.1(M+1). 实施例391-丁基-2-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-5，5-二甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(9)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4a(252mg，0.66mmol)与5d(161mg，1.01mmol)合成呈白色固体的化合物9(141mg，42％)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.44(d，1H)，7.29-7.24(m，3H)，7.13(d，1H)，7.05(d，2H)，3.80-3.78(m，2H)，2.39(s，3H)，1.69-1.64(m，2H)，1.40(s，6H)，1.26-1.22(m，2H)，0.81(t，3H)；ESMS m/z503.1(M+1). 实施例401-烯丙基-2-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-5，5-二甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(10)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4a(253mg，0.66mmol)与5e(148mg，1.05mmol)合成呈白色固体的化合物10(171mg，53％)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.41(d，1H)，7.27-7.23(m，3H)，7.13(d，1H)，7.04(d，2H)，5.93-5.88(m，1H)，5.13-5.07(m，2H)，4.54(d，1H)，2.37(s，3H)，1.40(s，6H)；ESMS m/z487.1(M+1). 实施例412-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1-环丙基-5，5-二甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(11)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4a(248mg，0.66mmol)与5f(148mg，1.05mmol)合成呈白色固体的化合物11(122mg，38％)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.42(d，1H)，7.28-7.26(m，3H)，7.21(d，1H)，7.07(d，2H)，2.91-2.89(m，1H)，2.29(s，3H)，1.49(s，6H)，0.88-0.86(m，2H)，0.76-0.73(m，2H)；ESMS m/z501.5(M+1). 实施例422-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1-异丁基-5，5-二甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(12)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4a(248mg，0.66mmol)与5g(160mg，1.01mmol)合成呈白色固体的化合物12(110mg，33％)。1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.46(d，1H)，7.29-7.24(m，3H)，7.11(d，1H)，7.06(d，2H)，3.78-3.75(m，2H)，2.34(s，3H)，2.03-2.01(m，1H)，1.44(s，6H)，0.85-0.82(d，6H)；ESMS m/z503.1(M+1). 实施例431-芐基-2-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-5，5-二甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(13)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4a(250mg，0.66mmol)与5h(189mg，0.99mmol)合成呈白色固体的化合物13(152mg，43％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(d，1H)，7.31(d，2H)，7.26(m，5H)，7.20(dd，1H)，7.04(d，2H)，7.01(d，1H)，5.29(s，2H)，2.45(s，3H)，1.31(s，6H)；ESMS m/z537.1(M+1). 实施例442-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(14)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4b(249mg，0.68mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物14(152mg，49％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，1H)，7.30-7.28(m，3H)，7.21(d，2H)，7.04(d，2H)，3.48(s，3H)，1.36(s，6H)；ESMS m/z447.0(M+1). 实施例452-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(15)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4c(252mg，0.63mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物15(160mg，53％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(d，1H)，7.31(d，2H)，7.28(dd，1H)，7.20(d，1H)，7.10(d，2H)，3.46(s，3H)，2.88(q，2H)，1.44(s，6H)，1.12(t，3H)；ESMS m/z475.0(M+1). 实施例462-[5-(4-溴-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(16)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4d(251mg，0.59mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物16(170mg，57％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.48～7.43(m，3H)，7.29(dd，1H)，7.19(d，1H)，7.01(d，2H)，3.49(s，3H)，2.41(s，3H)，1.43(s，6H)；ESMS m/z505.0(M+1). 实施例472-[5-(4-溴-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(17)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4e(250mg，0.57mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物17(160mg，54％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5 7.46～7.43(m，3H)，7.27(dd，1H)，7.20(d，1H)，7.01(d，2H)，3.44(s，3H)，2.84(q，2H)，1.41(s，6H)，1.09(t，3H))；ESMS m/z519.1(M+1). 实施例482-[1-(2，4-二氯-苯基)-5-(4-甲氧基-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(18)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4f(249mg，0.66mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物18(143mg，46％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47(d，1H)，7.25(dd，1H)，7.16(d，1H)，7.06(d，2H)，6.84(d，2H)，3.79(s，3H)，3.49(s，3H)，2.40(s，3H)，1.43(s，6H)；ESMS m/z457.1(M+1). 实施例492-[1-(2，4-二氯-苯基)-5-(4-氟-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(19)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4g(248mg，0.68mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物19(121mg，39％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.39(d，1H)，7.20(dd，1H)，7.13(d，1H)，7.06(dd，2H)，6.97(dd，2H)，3.43(s，3H)，2.33(s，3H)，1.36(s，6H)；ESMS m/z445.1(M+1). 实施例502-[1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-5-(4-三氟甲基苯基)-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(20)的合成 以类似于实施例36所述的方式由4h(251mg，0.60mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物20(176mg，60％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.59(d，2H)，7.46(d，1H)，7.28(m，3H)，7.22(d，1H)，3.49(s，3H)，2.42(s，3H)，1.42(s，6H)；ESMS m/z495.1(M+1). 实施例512-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-硫酮(21)的合成 向化合物6(98mg，0.22mmol)的甲苯(5mL)溶液，一次地添加劳森试剂(Lawesson’s reagent)(150mg，0.37mmol)。所得混合物于60℃加热4小时后，倒入冰水中。所得混合物以乙酸乙酯(2x30mL)萃取。合并的萃取物以水、饱和碳酸氢钠水溶液及盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤及浓缩。残余物通过硅胶快速色谱层析以己烷/乙酸乙酯(7∶3)纯化而制得所欲的呈黄色固体的硫酮21(78mg，77％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.48(d，1H)，7.32(d，2H)，7.28(dd，1H)，7.22(d，1H)，7.08(d，2H)，3.62(s，3H)，2.48(s，3H)，1.55(s，6H)；ESMS m/z477.0(M+1). 实施例522-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-硫酮(22)的合成 以类似于实施例51所述的方式由15(100mg，0.21mmol)合成呈黄色固体的化合物22(62mg，58％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(d，1H)，7.31(d，2H)，7.26(dd，1H)，7.21(d，1H)，7.09(d，2H)，3.58(s，3H)，2.91(q，2H)，1.51(s，6H)，1.09(t，3H)；ESMS m/z491.0(M+1). 实施例532-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-5，5-二甲基-3，5-二氢-咪唑-4-酮(23)的合成 于0℃，向4a(1.01g，2.62mmol)的甲苯(30mL)溶液中，依序地滴加DMF(0.2mL)及草酰氯(1.48g，11.66mmol)。使混合物升温至室温且搅拌2小时后，于0℃，缓慢地转移至5i(0.56g，4.07mmol)与三乙基胺(0.42g，4.20mmol)于THF(120mL)的混合物中。使混合物升温且于室温搅拌15小时后，添加水且所得混合物以乙酸乙酯(2x30mL)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤及浓缩。所获得的粗制酰胺(1.02g)用POCl3(1.25g，8.15mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液于80℃处理4小时。浓缩混合物且倒入冰水中。所得混合物以乙酸乙酯(2x50mL)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤及浓缩。残余物通过硅胶快速色谱层析以乙酸乙酯/己烷(7∶3)纯化而获得呈白色固体的23(0.62g，53％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(br s，1H)，7.32～7.27(m，4H)，7.05(d，2H)，7.00(br s，1H)，2.38(s，3H)，1.81(s，6H)；ESMSm/z447.0(M+1). 实施例542-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-5，5-二甲基-3，5-二氢-咪唑-4-酮(24)的合成 以类似于实施例53所述的方式由4c(1.0g，2.53mmol)与5i(0.56g，4.07mmol)合成呈白色固体的化合物24(0.58g，50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(d，1H)，7.30(d，2H)，7.30～7.27(m，2H)，7.07(d，2H)，7.00(br s，1H)，2.78(q，2H)，1.81(s，6H)，1.20(t，3H)；ESMS m/z461.0(M+1). 实施例552-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1，3-二氮杂-螺[4.4]壬-1-烯-4-酮(25)的合成 以类似于实施例53所述的方式由4a(251mg，0.66mmol)与5j(140mg，0.98mmol)合成呈白色固体的化合物25(140mg，45％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.40(d，1H)，7.32～7.26(m，3H)，7.12(s，1H)，7.02(d，2H)，2.49(m，2H)，2.36(s，3H)，2.17(m，2H)，1.86(m，4H)；ESMS m/z473.1(M+1). 实施例562-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-3，5-二氢-咪唑-4-酮(26)的合成 以类似于实施例53所述的方式由4c(1.0g，2.53mmol)与2-胺基乙酰胺盐酸盐(5k)(0.56g，4.56mmol)合成呈白色固体的化合物26(0.81g，73％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(d，1H)，7.31(d，2H)，7.30～7.27(m，2H)，7.07(d，2H)，4.35(d，2H)，2.77(q，2H)，1.20(t，3H)；ESMS m/z433.1(M+1). 实施例572-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-3，5，5-三甲基-3，5-二氢-咪唑-4-酮(27)的合成 于0℃，向氢化钠(14.4mg，0.66mole)的DMF(3mL)溶液中，一次地添加化合物23(100mg，0.22mmol)。使混合物升温至室温且搅拌30分钟，瓷实向其添加甲基碘(2g，14.08mmol)。混合物搅拌2小时后，添加水且所得混合物以乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤及浓缩。粗制残余物通过硅胶快速色谱层析以己烷/乙酸乙酯(1∶1)纯化而制得呈白色固体的产物27(70mg，0.15mmol，68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，1H)，7.30(d，2H)，7.26(dd，1H)，7.18(d，1H)，7.07(d，2H)，3.28(s，3H)，2.24(s，3H)，1.87(s，6H)；ESMS m/461.1(M+1). 实施例582-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-3，5，5-三甲基-3，5-二氢-咪唑-4-酮(28)的合成 以类似于实施例57所述的方式由化合物24(101mg，0.22mmol)与甲基碘(2g，14.08mmol)合成呈白色固体的化合物28(70mg，68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.42(br s，1H)，7.29(d，2H)，7.24(d，1H)，7.19(d，1H)，7.07(d，2H)，3.21(s，3H)，2.62(q，2H)，1.85(s，6H)，1.11(t，3H)；ESMS m/z475.1(M+1). 实施例592-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-3-甲基-3，5-二氢-咪唑-4-酮(29)的合成 于室温，向26(100mg，0.23mmol)的乙腈(8mL)溶液中依序地缓慢添加碳酸钾(150mg，1.09mole)与甲基碘(2g，14.08mmol)。混合物于60℃搅拌6小时。添加水且所得混合物以乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤及浓缩。粗制残余物通过硅胶快速色谱层析以己烷/乙酸乙酯(1∶1)而制得呈白色固体的化合物29(70mg，68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，1H)，7.30(d，2H)，7.25(dd，1H)，7.18(d，1H)，7.09(d，2H)，4.88(s，0.82H)，4.51(s，1.18H)，3.42(s，1.77H)，3.24(s，1.23H)，2.65(q，2H)，1.15(t，3H)；ESMS m/447.0(M+1). 实施例603-丁基-2-[5-(4-氯-苯基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-3，5-二氢-咪唑-4-酮(30)的合成 以类似于实施例59所述的方式由26(102mg，0.23mmol)与正丁基溴(500mg，3.65mmol)合成呈白色固体的化合物30(55mg，49％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.44(d，1H)，7.30(d，2H)，7.25(dd，1H)，7.17(d，1H)，7.09(d，2H)，4.83(s，0.82H)，4.45(s，1.18H)，3.80(s，1.18H)，3.67(s，0.82H)，2.65(q，2H)，1.69(br s，2H)，1.42～1.25(m，2H)，1.13(t，3H)，0.97～0.86(m，3H)；ESMS m/489.1(M+1). 实施例612-[5-(5-溴-噻吩-2-基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(33)的合成 以类似于实施例36所述的方式由31a(251mg，0.58mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物33(152mg，51％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.53(d，1H)，7.36(dd，1H)，7.26(d，1H)，6.96(d，1H)，6.67(d，1H)，3.45(s，3H)，2.49(s，3H)，1.42(s，6H)；ESMS m/z511.0(M+1). 实施例622-[5-(5-溴-噻吩-2-基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(34)的合成 以类似于实施例36所述的方式由31b(248mg，0.56mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物34(149mg，51％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(d，1H)，7.32(dd，1H)，7.25(d，1H)，6.91(d，1H)，6.62(d，1H)，3.40(s，3H)，2.90(q，2H)，1.37(s，6H)，1.14(t，3H)；ESMS m/z525.0(M+1). 实施例632-[1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-5-(5-戊-1-炔基-噻吩-2-基)-1H-唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(35)的合成 以类似于实施例36所述的方式由31c(251mg，0.60mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物35(151mg，50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.52(d，1H)，7.36(dd，1H)，7.27(d，1H)，6.97(d，1H)，6.73(d，1H)，3.46(m，5H)，2.52(m，5H)，1.42(s，6H)，1.00(t，3H)；ESMS m/z499.0(M+1). 实施例642-{1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-5-[5-(4-甲基-戊-1-炔基)-噻吩-2-基]-1H-吡唑-3-基}-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(36)的合成 以类似于实施例36所述的方式由31d(250mg，0.58mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物36(172mg，57％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.50(d，1H)，7.33(dd，1H)，7.26(d，1H)，6.96(d，1H)，6.70(d，1H)，3.43(s，3H)，2.47(s，3H)，2.26(d，2H)，1.85(m，1H)，1.39(s，6H)，0.97(d，6H)；ESMSm/z513.0(M+1). 实施例652-{1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-5-[5-(4-甲基-戊-1-炔基)-噻吩-2-基]-1H-吡唑-3-基}-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(37)的合成 以类似于实施例36所述的方式由31e(250mg，0.56mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物37(142mg，47％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.44(d，1H)，7.25(dd，1H)，7.20(d，1H)，6.90(d，1H)，6.65(d，1H)，3.37(s，3H)，2.90(q，2H)，2.23(d，2H)，1.82(m，1H)，1.35(s，6H)，1.12(t，3H)，0.94(d，6H)；ESMS m/z527.0(M+1). 实施例662-{1-(2，4-二氯-苯基)-5-[5-(3，3-二甲基-丁-1-炔基)-噻吩-2-基]-4-甲基-1H-吡唑-3-基}-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(38)的合成 以类似于实施例36所述的方式由31f(251mg，0.58mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物38(182mg，61％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47(d，1H)，7.31(dd，1H)，7.24(d，1H)，6.92(d，1H)，6.66(d，1H)，3.41(s，3H)，2.45(s，3H)，1.37(s，6H)，1.23(s，9H)；ESMS m/z513.0(M+1). 实施例672-{1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-5-[5-(4-苯基-丁-1-炔基)-噻吩-2-基]-1H-吡唑-3-基}-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(39)的合成 以类似于实施例36所述的方式由31g(251mg，0.50mmol)与5a(130mg，1.08mmol)合成呈白色固体的化合物39(145mg，49％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(d，1H)，7.41(m，4H)，7.20(m，3H)，6.93(d，1H)，6.67(d，1H)，3.45(s，3H)，2.88(t，2H)，2.67(m，4H)，1.56(s，6H)，1.14(t，3H)；ESMS m/z575.0(M+1). 实施例682-[5-(5-溴-噻吩-2-基)-1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-硫酮(40)的合成 以类似于实施例51所述的方式由34(90mg，0.17mmol)合成呈黄色固体的化合物40(68mg，73％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.49(d，1H)，7.33(m，2H)，6.94(d，1H)，6.66(d，1H)，3.55(s，3H)，2.98(q，2H)，1.50(s，6H)，1.17(t，3H)；ESMS m/z541.0(M+1). 实施例692-{1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-5-[5-(4-甲基-戊-1-炔基)-噻吩-2-y1]-1H-吡唑-3-基}-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-硫酮(41)的合成 以类似于实施例51所述的方式由36(110mg，0.21mmol)合成呈黄色固体的化合物41(72mg，62％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.52(d，1H)，7.36(dd，1H)，7.28(d，1H)，6.98(d，1H)，6.73(d，1H)，3.58(s，3H)，2.60(s，3H)，2.28(d，2H)，1.85(m，1H)，1.52(s，6H)，0.98(d，6H)；ESMS m/z529.1(M+1). 实施例702-{1-(2，4-二氯-苯基)-4-乙基-5-[5-(4-甲基-戊-1-炔基)-噻吩-2-y1]-1H-吡唑-3-基}-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-硫酮(42)的合成 以类似于实施例51所述的方式由37(93mg，0.18mmol)合成呈黄色固体的化合物42(60mg，63％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.50(d，1H)，7.32(m，2H)，6.97(d，1H)，6.72(d，1H)，3.77(s，3H)，3.02(q，2H)，2.28(d，2H)，1.87(m，1H)，1.53(s，6H)，1.19(t，3H)，0.99(d，6H)；ESMS m/z543.1(M+1). 实施例712-[1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-5-(5-戊-1-烯基-噻吩-2-基)-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(43)的合成 以类似于实施例36所述的方式由32(0.61g，1.42mmol)与5a(0.30g，2.58mmol)合成呈白色固体的化合物43(0.51g，70％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.48(d，1H)，7.31(dd，1H)，7.27(d，1H)，6.70(d，1H)，6.65(d，1H)，6.38(d，1H)，5.98(dd，1H)，3.43(s，3H)，2.47(s，3H)，2.11(m，2H)，1.46(m，2H)，1.38(s，6H)，0.90(t，3H)；ESMS m/z501.0(M+1). 实施例722-[1-(2，4-二氯-苯基)-4-甲基-5-(5-戊基-噻吩-2-基)-1H-吡唑-3-基]-1，5，5-三甲基-1，5-二氢-咪唑-4-酮(44)的合成 于1大气压H2下，将43(118mg，0.24mmol)与Pd-C(12mg)的甲醇(8mL)混合物于室温下搅拌2小时。过滤反应混合物且减压浓缩所得滤液而制得粗残余物，其通过硅胶快速色谱层析以己烷/乙酸乙酯(1∶1)纯化而获得呈白色固体的产物44(75mg，62％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.48(d，1H)，7.29(m，2H)，6.77(d，1H)，6.61(d，1H)，3.57(s，3H)，2.65(m，5H)，1.60(m，8H)，1.22(m，4H)，0.81(t，3H)；ESMS m/z503.0(M+1). 实施例73放射配基结合分析 由稳定表达CB1与CB2受体的HEK293细胞株获得人类CB1与CB2受体。简明地，收集表达CB1或CB2受体的细胞且进行超声波处理。经分解的细胞以43,000×g于4℃离心30分钟。所得小粒重新被悬浮于缓冲液(50mM Tris，5mMMgCl2，2.5mM EDTA，pH 7.4，10％蔗糖)且储存于-80℃。通过于Bio-RadLaboratories，Inc.(Hercules，CA)所提供的操作手册中所述的Bradford方法测定纯化的细胞膜的蛋白质浓度。
对于CB1与CB2受体的亲和性是通过如下述的活体外放射配基结合分析而测定。由上述CB1或CB2表达细胞株所制备的0.2～8μg细胞膜部分与含有0.75nM[3H]CP55,940(特异地结合至CB1与CB2受体的配基)与测试化合物的缓冲液(pH 7.4，50mM Tris-HCl，5mM MgCl2，1mM EDTA，与0.3％BSA)混合。于对照分析中，使用无放射活性的CP55,940(1μM)取代测试化合物。混合物于Multiscreen微孔盘(Millipore，Billerica，MA)于30℃培养1.5小时以使测试化合物或[3H]CP55,940结合至受体。结合反应是通过Manifold过滤来测定，其中细胞膜部分(含有CB1或CB2受体)保留于该过滤器上。然后以冰冷却的洗涤缓冲液(50mM Tris，pH 7.4，0.25％ BSA)洗涤过滤器4次以移除游离的[3H]CP55,940。通过Topcount(Perkin Elmer Inc.)测量结合于该过滤器的细胞膜部分的放射活性。计算IC50(抑制50％的[3H]CP55,940对受体的结合所需要测试化合物的浓度)。
于此分析中测试化合物6-30与33-44。意外地，对于分别地抑制[3H]CP55,940对CB1或CB2受体的结合，所有测试化合物具有介于1nM与10μM的IC50值。
实施例74DELFIA GTP-结合试剂盒分析 测试化合物于调控CB1受体的活性是使用PerkinElmer Inc.(Boston，MA)所提供的DELFIA GTP-结合试剂盒，通过下文所述方法而测定。DELFIA GTP-结合分析为根据G-蛋白偶合受体的活化后于G-蛋白次单元的GDP-GTP交换的时间解析荧光分析。应注意为通过CP55,940的CB1受体的刺激导致于G-蛋白的α-次单元的GDP为GTP所置换，造成GTP-Gα复合物，亦即，G-蛋白的活化型式。Eu-GTP是以Europium螯合物标识的不可水解的GTP，其被使用于侦测G-蛋白的激动剂依赖性活化。参照Peltonen等，Eur.J.Pharmacol.(1998)355275。
将衍生自表达人类CB1受体的HEK293细胞的细胞膜悬浮于分析缓冲液(50mM HEPES，pH 7.4，100mM NaCl，100μg/mL皂苷，5mM MgCl2，2μMGDP，0.5％ BSA)。膜的等分部分(aliquot)与测试化合物(各种浓度于0.1％DMSO)及CP55,940(20nM于分析缓冲液)一起添加至AcroPlate(Pall LifeSciences，Ann Arbor，MI)的各孔中。分析盘于30℃于暗处培养60分钟。然后添 加EU-GTP至各孔且于30℃于暗处再培养30分钟。用分析试剂盒中所提供的洗涤溶液洗涤该盘4次。通过Victor 2 multi-label reader所测定的荧光信号而侦测Eu-GTP的结合。通过浓度对应曲线使用非线性衰退(Prism；GraphPad，SanDiego，CA)而测定各测试化合物的EC50值(亦即抑制50％ CP55,940-刺激Eu-GTP结合)。
于此分析中测试化合物6-30与33-44。意外地，对于通过调控CP55,940-刺激CB1受体活性的抑制Eu-GTP结合，所有测试化合物具有介于1nM与10μM的EC50值。
其它具体例 本说明书所公开的所有特征可以任何组合被合并。本说明书所公开的各特征可以被作为相同、均等或类似目的的替代性特征所置换。因此，除非特别指明，所公开的各特征仅为均等或类似特征的一般性系列的示例。
由上述说明，于此项技术领域中的技术人员可容易地确知本发明的主要特征，且于不悖离本发明的精神与范畴之下，可作成本发明的各种变化与修改，以适合各种用途与条件。因此，其它具体实施方式
也包含在后文权利要求书的范畴内。
权利要求
1.一种化合物，如式(I)所示
其中
两个
键之一者为单键且另一者双键；
X为O或S；以及
R1、R2、R3、R4、R5及R6的每一个独立地为氢、卤基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基或杂环烯基，或R3及R4与其所键结的碳原子共同为环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、芳基或杂芳基。
2.根据权利要求1的化合物，其中，X为O。
3.根据权利要求2的化合物，其中，R6为芳基或杂芳基。
4.根据权利要求3的化合物，其中，R6为卤基取代的苯基。
5.根据权利要求4的化合物，其中，R1为芳基或杂芳基。
6.根据权利要求5的化合物，其中，R1为苯基或噻吩基。
7.根据权利要求6的化合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
8.根据权利要求2的化合物，其中，R1为芳基或杂芳基。
9.根据权利要求8的化合物，其中，R1为苯基或噻吩基。
10.根据权利要求9的化合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
11.根据权利要求2的化合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
12.根据权利要求1的化合物，其中，X为S。
13.根据权利要求12的化合物，其中，R6为芳基或杂芳基。
14.根据权利要求13的化合物，其中，R6为卤基取代的苯基。
15.根据权利要求14的化合物，其中，R1为芳基或杂芳基。
16.根据权利要求15的化合物，其中，R1为苯基或噻吩基。
17.根据权利要求16的化合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
18.根据权利要求12的化合物，其中，R1为芳基或杂芳基。
19.根据权利要求18的化合物，其中，R1为苯基或噻吩基。
20.根据权利要求19的化合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
21.根据权利要求12的化合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
22.一种使用具有下式(I)的化合物或其药物可接受的盐来制备用于治疗大麻碱受体媒介的疾患的药物的用途
其中
两个
键之一者为单键且另一者双键；
X为O或S；以及
R1、R2、R3、R4、R5及R6的每一个独立地为氢、卤基、烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基或杂环烯基，或R3及R4与其所键结的碳原子共同为环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、芳基或杂芳基。
23.根据权利要求22的用途，其中，R6为芳基或杂芳基。
24.根据权利要求23的用途法，其中，R6为卤基取代的芳基。
25.根据权利要求24的用途，其中，R1为芳基或杂芳基。
26.根据权利要求25的用途，其中，R1为苯基或噻吩基。
27.根据权利要求26的用途，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
28.根据权利要求22的用途，其中，R1为芳基或杂芳基。
29.根据权利要求28的用途，其中，R1为苯基或噻吩基。
30.根据权利要求29的用途，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
31.根据权利要求22的用途，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
32.根据权利要求22的用途，其中，所述大麻碱受体媒介的疾患为肝纤维化、肥胖、代谢综合症、高脂血症、II型糖尿病、动脉硬化症、物质成瘾、忧郁症、动机缺乏综合症、学习或记忆障碍、出血性休克、肝硬化、神经性疼痛、呕吐、高眼压、支气管扩张、骨质疏松症、癌症、神经退化性疾病或发炎性疾病。
33.根据权利要求32的用途，其中，所述大麻碱受体媒介的疾患为肥胖、代谢综合症、物质成瘾、神经性疼痛或发炎性疾病。
34.根据权利要求32的用途，其中，所述大麻碱受体媒介的疾患为癌症。
35.根据权利要求34的用途，其中，所述癌症为前列腺癌、肺癌、乳癌或头颈癌。
36.一种药物组合物，包括权利要求1的化合物与药学可接受载体。
37.根据权利要求36的组合物，其中，R6为芳基或杂芳基。
38.根据权利要求37的组合物，其中，R6为卤基取代的芳基。
39.根据权利要求38的组合物，其中，R1为芳基或杂芳基。
40.根据权利要求39的组合物，其中，R1为苯基或噻吩基。
41.根据权利要求40的组合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
42.根据权利要求36的组合物，其中，R1为芳基或杂芳基。
43.根据权利要求42的组合物，其中，R1为芳基或杂芳基。
44.根据权利要求43的组合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
45.根据权利要求36的组合物，其中，R2、R3、R4及R5的每一个独立地为氢或烷基。
全文摘要
本发明涉及式(I)的咪唑-4-酮或咪唑-4-硫酮化合物其中，X、R1、R2、R3、R4、R5及R6如说明书所定义。还公开了以这些化合物在制备用于治疗大麻碱受体媒介的疾患的药物中的用途。
文档编号A61P9/00GK101723937SQ20091000650
公开日2010年6月9日 申请日期2009年1月21日 优先权日2008年11月3日
发明者夏克山, 吴建煌, 叶灯光, 赵宇生 申请人:财团法人国家卫生研究院