专利名称：一种天然植物花椒提取物的应用方法
技术领域：
本发明涉及一种皮肤抗过敏、止痒有效活性成分，该活性成分为天然植物花 椒提取物，尤其是涉及一种天然植物花椒提取物的应用方法。
背景技术：
近年的流行病学调査显示，过敏性疾病具有逐年增加的趋势，特别是由环境原 因引起的过敏反应及抗遗传性过敏性皮肤炎的增加趋势尤为显著，已成为不可忽视 的社会现象。其问题的出现不仅由于过敏源的逐年增加、大气污染、食品和化妆品 的添加物的滥用，而且也由于近年来人们饮食习惯的变化。过敏性疾病的治疗方法 通常以消除过敏源为本，进而根据临床症状的程度、起因及发病机制进行选择性药 物治疗。常见的过敏症一般为I型过敏反应，如过敏性鼻炎、支气管哮喘及荨麻疹 等疾病，由肥大细胞脱颗粒释放组胺等化学递质介导，刺激血管扩张，增大血管通 透性，促进支气管平滑肌收縮，提高末端神经感应等过度生物体应激反应。因此， 对I型过敏性疾病的治疗，临床上主要使用抗组胺剂及对肥大细胞脱颗粒具有抑制 活性的抗过敏药物。
皮肤瘙痒经常伴随过敏症状产生。介导瘙痒的受体位于真皮与表皮连接处的无 髓C纤维游离神经末梢上，通过神经突触连接二级神经元，然后通过脊髓丘脑束 到达丘脑的板层核，最后到达大脑皮质，产生瘙痒感觉。近年来的研究证实多种化
学介质如组胺等能引起实验性瘙痒，这些介质通过与无髓c纤维游离神经末梢上
的特异性受体结合而产生痒感神经冲动。参与瘙痒的递质多而复杂，但也一些共同 的递质如组胺、白介素等。其中组胺源性瘙痒是目前研究最清楚的瘙痒传导途径。
抗组胺药是目前临床治疗瘙痒和过敏的首选药。但是，目前合成的抗组胺药在 临床使用中多数出现瞌睡、口渴、胃肠消化系统受损等副作用，长期服用也存在一 定的临床安全性问题。
临床应用的抗过敏制剂局限于暂时性的缓解，而不能从根本上改善过敏性体质。从身体健康及生活习惯角度出发， 一种有效且安全的用于止痒和抗过敏的医药 品、保健食品或化妆品为人们所期待。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可以作 为食物调料剂，毒性较低，并能在较低的浓度下抑制组胺的释放，能很好的祛 除皮肤瘙痒，达到抗敏作用天然植物花椒提取物的应用方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现 一种天然植物花椒提取物的 应用方法，其特征在于，该应用方法是将天然植物花椒提取物应用于抑制组胺 释放的药物、化妆品或保健食品中，提供抗过敏、止痒效果。所述的花椒提取
物添加浓度范围为0.001% 100% (w/w)。
所述的天然植物花椒提取物包括采用溶剂萃取、水蒸汽蒸馏法或二氧化碳 超临界萃取得到的粗花椒提取物，以及萃取后采用精制方法得到的精制花椒提 取物及其单体。
所述的溶剂萃取是将天然植物花椒粉碎后置于提取溶剂中，花椒与提取溶
剂的质量比为2/1-1/40，在20-10(TC下，提取0.1-336h，过滤，浓縮，得花椒
提取物。
所述的提取溶剂为水、有机溶剂或者有机溶剂水溶液。 所述的有机溶剂为l-5个碳的醇、乙酸乙酯、二丙二醇或者石油醚中的一 种或几种。
所述的有机溶剂水溶液中有机溶剂为1-5个碳的醇或二丙二醇中的一种或 几种。
所述的l-5个碳的醇包括乙醇、甲醇、甘油、丙二醇、1,3-丁二醇。 所述的二氧化碳超临界萃取是将天然植物花椒粉碎后置于二氧化碳超临 界萃取装置的提取釜中，采用食品级二氧化碳萃取压力在15-45MPa，萃取温度 30-55°C， 二氧化碳流量8-25kg/h进行超临界萃取，萃取时间0.5_4h，然后分 离釜调整分离压力3—10MPa，分离温度为30-50°C，分离出流浸膏，得花椒提 取物。
所述的水蒸汽蒸馏法是将天然植物花椒粉碎后置于铺纱布的箅子，把箅子放入连接冷凝器的不锈钢蒸锅中，通入压力为0.12MPa 0.15MPa水蒸汽，蒸 馏时间为0.5-4h，然后收集冷凝器中水层上的液体，得花椒提取物。
本发明提供的天然植物花椒提取物，可以多种口服剂型投放市场，用于改 善过敏和皮肤瘙痒。当然，花椒提取物也可以与常用的赋形剂等医药用载体结 合并制剂化。必要时也可以添加一些防腐剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂等制 剂添加物。
可以根据市场需要及消费者的心理要求改换剂型，例如使用片剂、颗粒剂、 胶囊剂等剂型。
比较适宜的赋形剂， 一般考虑有乳糖、白糖、D-甘露醇、淀粉、结晶纤维 素等。润滑剂一般应采用硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石粉等。溶剂通常使用精制 水、乙醇、丙二醇等。防腐剂一般采用氯丁醇、节醇、二羟基乙酸等。抗氧化 剂通常以亚硫酸盐、抗坏血酸等比较适宜。
本发明提供的花椒提取物，也可以原型、水溶液稀释后作为皮肤外用剂使 用。当然也可以通过与医药用载体结合制成一定的制剂，如气雾剂、液体制剂、 提取物、混悬剂、乳剂、软膏剂、半流体制剂、擦剂、洗剂等剂型提供化妆品、 医药品市场的消费。
本发明在传统医学的基础上，结合药理学和药效学等现代科学，建立一种评估 天然植物提取物的抗组胺释放模型，并在此基础上对药物进行药理药效学测定。组 胺是一种经典的致痒介质，主要储存于体内肥大细胞和碱性粒细胞中，任何刺激肥 大细胞的因素，如变应性、物理性、精神性等因素均可使肥大细胞脱颗粒释放出组 胺，导致瘙痒。因此具有稳定肥大细胞，减少组胺释放作用的物质可用于治疗由组 胺所致的瘙痒症和过敏反应。
除特殊说明外，本发明涉及的试剂和原料均市售可得。
与现有技术相比，本发明的最大效果在于本发明的花椒提取物应用于药
物、化妆品及保健食品国内外文献都没有单味花椒提取物可以抑制组胺的释放 而达到皮肤抗敏、止痒作用的报道，本发明花椒提取物可以制成中药制剂，用 来抑制肥大细胞和碱性粒细胞中的组胺释放，从而起到皮肤抗过敏的效果。且 其为天然植物提取物，副作用小。
具体实施例方式
下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。 下述各实施例中的原药提取溶剂树脂洗脱剂的比例均为重量比。 实施例1
取花椒100g，提取溶剂A为纯水，配置洗脱剂B:去离子水，C: 70%甲 醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂HPD100，原药提取溶剂树脂洗脱 剂B:洗脱剂C4: 10: 3: 9: 12。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在30'C提取72h，浓縮到约为lmg/ml生药浓 度的药液，经HPDIOO吸附后，用B洗脱后洗脱剂弃去，收集洗脱剂C洗脱 段。浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例2
取花椒100g，提取溶剂A为纯水，配置洗脱剂B:去离子水，C: 70%甲 醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂HPDIOO，原药提取溶剂树脂洗脱 剂B:洗脱剂C4: 10: 3: 12: 9。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在5(TC提取5h，浓縮到约为lmg/ml生药浓度 的药液，经HPD100吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C洗脱段。 浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例3
取花椒100g，提取溶剂A为纯水，配置洗脱剂B:去离子水，C: 70%乙 醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂HPDIOO，原药提取溶剂树脂洗脱 剂B:洗脱剂C-1: 8: 2: 9: 12。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在80。C提取三次，每次2h，浓縮到约为lmg/ml 生药浓度的药液，经HPD100吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂 C洗脱段。浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例4
取花椒100g，提取溶剂A为纯水，配置洗脱剂B:去离子水，C: 70%乙 醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂HPDIOO，原药提取溶剂树脂洗脱 剂B:洗脱剂C4: 8: 2: 12: 8。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在7(TC提取两次，每次3h，浓縮到约为lmg/ml生药浓度的药液，经HPD100吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂 C洗脱段。浓縮至浸膏，得花椒提取物。 实施例5
取花椒100g，提取溶剂A为乙醇，配置洗脱剂B:去离子水，C: 50%甲 醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂D101，原药提取溶剂树脂洗脱剂 B:洗脱剂C-1: 10: 3: 12: 9。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在3(TC提取48h，浓縮到约为lmg/ml生药浓 度的药液，经D101吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C洗脱段。 浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例6
取花椒100g，提取溶剂A为甲醇，配置洗脱剂B:去离子水，C: 50%甲 醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂D101，原药提取溶剂树脂洗脱剂 B:洗脱剂C4: 10: 2: 12: 8。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在5(TC提取12h，浓縮到约为lmg/ml生药浓 度的药液，经D101吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C洗脱段。 浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例7
取花椒100g，提取溶剂A为乙酸乙酯，配置洗脱剂B:去离子水，C: 50% 乙醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂D101，原药提取溶剂树脂洗脱 剂B:洗脱剂C-1: 8: 3: 12: 12。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在8(TC提取三次，每次2h，浓縮到约为lmg/ml 生药浓度的药液，经D101吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C 洗脱段。浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例8
取花椒100g，提取溶剂A为石油醚，配置洗脱剂B:去离子水，C: 50% 乙醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂D101，原药提取溶剂树脂洗脱 剂B:洗脱剂C4: 10: 3: 12: 9。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在7(TC提取两次，每次3h，浓縮到约为lmg/ml 生药浓度的药液，经D101吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C洗脱段。浓縮至浸膏，得花椒提取物。 实施例9
取花椒100g，配置提取溶剂A为85%甲醇水溶液(V/V)，配置洗脱剂B: 去离子水，C: 30%乙醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂HZ891，原药提 取溶剂树脂洗脱剂B:洗脱剂C4: 20: 3: 12: 9。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在3(TC提取24h，浓縮到约为lmg/ml生药浓 度的药液，经HZ891吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C洗脱 段。浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例10
取花椒100g，配置提取溶剂A为30%乙醇水溶液(V/V)，配置洗脱剂B: 去离子水，C: 30%乙醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂HZ891，原药提 取溶剂树脂洗脱剂B:洗脱剂C4: 10: 3: 9: 9。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在5(TC提取8h，浓縮到约为lmg/ml生药浓度 的药液，经HZ891吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C洗脱段。 浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例11
取花椒100g，提取溶剂A为75%甲醇水溶液(V/V)，配置洗脱剂B:去 离子水，C: 30%甲醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂HZ891，原药提取 溶剂树脂洗脱剂B:洗脱剂C4: 10: 3: 9: 12。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在8(TC提取两次，每次2h，浓縮到约为lmg/ml 生药浓度的药液，经HZ891吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C 洗脱段。浓縮至浸膏，得花椒提取物。
实施例12
取花椒100g，提取溶剂A为50%乙醇水溶液(V/V)，配置洗脱剂B:去 离子水，C: 30%甲醇水溶液(V/V)，选择非极性树脂HZ891，原药提取 溶剂树脂洗脱剂B:洗脱剂C-1: 10: 3: 9: 12。
将花椒粉碎后以提取溶剂A在70'C提取两次，每次3h，浓縮到约为lmg/ml 生药浓度的药液，经HZ891吸附后，用B洗脱后洗脱剂B弃去，收集洗脱剂C 洗脱段。浓縮至浸膏，得花椒提取物。效果实施例1 花椒提取物抑制组胺释放实验 花椒提取物由实施例4制备，测定组胺释放方法如下
1. 肥大细胞分离纯化
采用Anna Nemeth等的方法略加改进，正常SD大鼠放血脱颈椎处死，腹 腔注射预冷的PBS(含l%FCS)15ml，轻轻按摩腹部2 min，吸取腹腔灌洗液并 置入细胞培养皿中，于37t:， 5。/。C02细胞培养箱静置30 min，等待巨噬细胞 附壁后轻轻吸取细胞悬液离心(4°C， 1500 r/min) 10 min，调节细胞悬液约 0.5 ml。 7ml P陽F10(Percoll-HamF10)在4°C ， 3000 r / min离心20 min形成梯度， 将浓縮的细胞悬液轻轻铺入梯度之上4。C， 2000r/min离心20min分离细胞， 收集界面下l/3细胞，用PBS洗涤2次(1000 r/min，离心10min)后重悬， 锥虫蓝染色检测细胞活力，甲苯胺蓝染色检测细胞纯度，得纯度大于95%的肥 大细胞。调节细胞密度约106/ml，置于含10%FCS的DMEM培养基中待用。
2. 药物处理
将肥大细胞调整为约含RPMCs 5乂104个/组，加入不同浓度的花椒提取溶 剂，置入37 。C ， 5% C02孵箱中孵育20分钟，取出后立即加入 compound48/80(0.5ug/ml)，置入37。C， 5。/。C02孵箱中孵育10分钟，取出立即 放入冰水浴中5 min终止反应，模型对照组以PBS取代药物，正常对照组为 未加入药物和compound48/80处理组。
3. 样品准备
将各管以4'C， 6000r/min离心10分钟，吸取上清液测定释放到胞外的组 胺量A;沉淀用PBS重悬，IO(TC煮沸10min裂解细胞，测定残留在细胞内的 组胺量A。
4. 组胺的测定
上述各样品加入高氯酸(0.4mol/L)，离心(4°C， 6000 r/min) 10分钟取 上清。采用Shore等荧光测定改良法进行测定取1.6ml上清夜置于已经加入 1.5gNaCl的具塞试管中，再加入4.0ml正丁醇和0.2ml 2.5NNaOH，立即混匀， 置康氏震荡器震荡5分钟，静置分层后取出3.6ml正丁醇相到已经加入1.2ml 0.1NHCL和2.0ml正庚烷的10ml具塞试管中，震荡5分钟，弃有机相，取1.0 mlHCL相到试管中，用三蒸水稀释一倍，力卩0.5ml0.4NNaOH碱化，混匀并迅速加入0.1% OPT甲醇液O.lml，立即混匀并在21-22。C反应10分钟，力Q 0.5ml 0.5NHCL酸化终止縮合反应，并使荧光物质稳定。
每个数据均为3个平行复管的平均数。根据测得的荧光强度，分别按下式 计算各组细胞的组胺释放率(P释放)和组胺释放抑制率(P抑制)。
P释放=(上清液组胺量A-自发分泌组胺量)/(上清液组胺量A+细胞内组 胺量B)X100X;
P抑制=(1-药物组组胺释放量/模型组组胺释放量)X 100% 。
其中自发分泌组胺量=正常细胞上清液中的组胺量。
各组实验数据以均数土标准差(土S)表示，应用方差分析，将每个实验组与 对照组进行比较，P<0. 05为差异有显著性意义，P<0. 01为差异有非常显著
性意义。
由抗组胺释放模型测得实例4制备花椒提取物组胺释放量效关系如表1: 表1-实施例4花椒提取物组胺释放率
正常药物花椒提取物
对照刺激200ug/ml 励ug/ml50ug/ml25ug/ml12.5ug/ml
组胺释放率 (%)3.0864.7221.11 37.8042.4545.8462.97
由表1可知，由实施例4制备的花椒提取物在浓度12.5ug/ml-200ug/ml时
具有抑制组胺释放的作用，在200ug/ml时，组胺释放率仅为21.11%。以上数 据P0.05，具有显著性意义。
效果实施例2 花椒提取物抑制组胺释放实验
花椒提取物由实施例12制备，除了加入的药物换成了实施例12制备的， 其余测定步骤同效果实施例1。
由抗组胺释放模型测得实例12制备花椒提取物抑制组胺释放量效关系如
表2:
表2-实施例12花椒提取物组胺释放率正常药物花椒提取物
对照刺激200ug/ml 100ug/ml50ug/ml25ug/ml12.5ug/ml
组胺释放率 (%)3.0865.2619.76 35.4543.7752.3660.08
由表2可知，由实施例12制备的花椒提取物在浓度12.5ug/ml-200ug/ml
时具有抑制组胺释放的作用，在200ug/ml时，组胺释放率为19.76%。 效果实施例3 花椒提取物抑制组胺释放实验
花椒提取物由实施例20制备，除了加入的药物换成了实施例20制备的， 其余测定步骤同效果实施例1。
由抗组胺释放模型测得实例20制备花椒提取物抑制组胺释放量效关系如
表3:
表3-实施例20花椒提取物组胺释放率
正常药物花椒提取物
对照刺激200ug/ml 100ug/ml50ug/ml25ug/ml12.5ug/ml
组胺释放率 (%)3.0865.9223.46 40.4448.2756.6262.25
由表3可知，由实施例20制备的花椒提取物在浓度12.5ug/ml-200ug/ml 时具有抑制组胺释放的作用，在200ug/ml时，组胺释放率为23.46%。
实施例13
将天然植物花椒粉碎后置于水中，花椒与水的质量比为2/1，在100'C下， 提取O.lh，过滤，将滤液浓縮得到生药浓度为lmg/ml的溶液，该溶液经非极 性树脂HPD100吸附后，采用体积浓度为30%的乙醇水溶液为洗脱剂进行洗脱， 浓縮至浸膏，得到花椒提取物。
实施例14
将天然植物花椒粉碎后置于有机溶剂乙醇中，花椒与有机溶剂乙醇的质量 比为1/40，在2(TC下，提取72h，过滤，将滤液浓縮得到生药浓度为lmg/ml 的溶液，该溶液经非极性树脂HZ891吸附后，采用体积浓度为50%的乙醇水溶 液为洗脱剂进行洗脱，浓縮至浸膏，得到花椒提取物。
实施例15将天然植物花椒粉碎后置于乙醇水溶液中，乙醇的体积浓度为10%，花椒
与乙醇水溶液的质量比为1/6，在30。C下，提取20h，过滤，将滤液浓縮得到 生药浓度为lmg/ml的溶液，该溶液经非极性树脂HZ891吸附后，采用体积浓 度为30%的甲醇水溶液为洗脱剂进行洗脱，浓縮至浸膏，得到花椒提取物。 实施例16
将天然植物花椒粉碎后置于甲醇水溶液中，甲醇的体积浓度为95%，花椒 与甲醇水溶液的质量比为1/8，在90'C下，提取60h，过滤，将滤液浓縮得到 生药浓度为lmg/ml的溶液，该溶液经非极性树脂D101吸附后，采用体积浓度 为95%的甲醇水溶液为洗脱剂进行洗脱，浓縮至浸膏，得到花椒提取物。
实施例17
将天然植物花椒粉碎后置于甲醇水溶液中，甲醇的体积浓度为85%，花椒 与甲醇水溶液的质量比为1/20，在9(TC下，提取60h，过滤，得到花椒提取物。 实施例18
将天然植物花椒粉碎后置于乙醇水溶液中，乙醇的体积浓度为1%，花椒 与乙醇水溶液的质量比为1/30，在5(TC下，提取36h，过滤，浓縮，得花椒提 取物。
实施例19
将天然植物花椒粉碎后置于二氧化碳超临界萃取装置的提取釜中，采用食 品级二氧化碳萃取压力在15MPa，萃取温度30'C， 二氧化碳流量25kg/h进行 超临界萃取，萃取时间4h，然后分离釜调整分离压力3MPa，分离温度为50°C， 分离出流浸膏，得花椒提取物。
实施例20
将天然植物花椒粉碎后置于二氧化碳超临界萃取装置的提取釜中，采用食 品级二氧化碳萃取压力在45MPa，萃取温度55'C， 二氧化碳流量8kg/h进行超 临界萃取，萃取时间0.5h，然后分离釜调整分离压力10MPa，分离温度为30 °C，分离出流浸膏，将流浸膏用体积浓度为75%的乙醇调整到生药浓度为 lmg/ml的溶液，该溶液经非极性树脂HZ891吸附后，采用体积浓度为50%的 乙醇水溶液为洗脱剂进行洗脱，浓縮至浸膏，得到花椒提取物。
实施例21将天然植物花椒粉碎后置于铺纱布的箅子，把箅子放入连接冷凝器的不锈
钢蒸锅中，通入压力为0.12MPa水蒸汽，蒸馏时间为4h，然后收集冷凝器中水 层上的液体，得花椒提取物。 实施例22
所述的水蒸汽蒸馏法是将天然植物花椒粉碎后置于铺纱布的箅子，把箅子 放入连接冷凝器的不锈钢蒸锅中，通入压力为0.15MPa水蒸汽，蒸馏时间为 0.5h，然后收集冷凝器中水层上的液体，得花椒提取物。
实施例23
将天然植物花椒粉碎后置于乙醇水溶液中，乙醇的体积浓度为95%，花椒 与乙醇水溶液的质量比为1/30，在7(TC下，提取10h，过滤，浓缩，干燥，溶 于少量乙醇，拌入4倍量80-160目硅胶，干燥，以石油醚、二氯甲烷、甲醇回 流洗脱，收集石油醚、二氯甲烷洗脱部分，浓縮，干燥，得花椒提取物，其中 含有甲氧基白屈菜红碱、去甲基白屈菜红碱、L-N-乙酰基番茄枝碱、茵芋碱、 青花椒碱。
实施例24
将天然植物花椒粉碎后置于乙醇水溶液中，乙醇的体积浓度为95%，花椒 与乙醇水溶液的质量比为1/30,在2(TC下，提取336h，过滤，浓縮至浸膏， 拌入4倍量80-100目硅胶，依次用30-60'C石油醚、氯仿、甲醇提取，收集氯 仿洗脱部分，浓縮，干燥，得花椒提取物，其中含有香柑内酯、伞形花内酯。
实施例25
将天然植物花椒粉碎后置于甘油水溶液中，甘油的体积浓度为10%，花椒 与甘油水溶液的质量比为1/40，在10(TC下，提取lh，过滤，浓縮，得花椒提 取物。
实施例26
将天然植物花椒粉碎后置于丙二醇水溶液中，丙二醇的体积浓度为1%， 花椒与丙二醇水溶液的质量比为1/20，在95。C下，提取2h，过滤，浓縮，得
花椒提取物。 实施例27
将天然植物花椒粉碎后置于1， 3 — 丁二醇水溶液中，1， 3 — 丁二醇的体积浓度为30%，花椒与1， 3 — 丁二醇水溶液的质量比为1/10，在90。C下，提取 3h，过滤，浓縮，得花椒提取物。 实施例28
将天然植物花椒粉碎后置于二丙二醇水溶液中，二丙二醇的体积浓度为 15%，花椒与二丙二醇水溶液的质量比为1/40，在85。C下，提取6h,过滤，浓 縮，得花椒提取物。
实施例29
将天然植物花椒粉碎后置于1， 3 — 丁二醇中，花椒与1， 3 — 丁二醇的质 量比为1/10，在卯。C下，提取3h，过滤，得花椒提取物。 实施例30
将天然植物花椒粉碎后置于丙二醇中，花椒与丙二醇的质量比为1/5，在 9(TC下，提取3h，过滤，得花椒提取物。 实施例31
将天然植物花椒粉碎后置于甘油中，花椒与甘油的质量比为1/10，在90 'C下，提取3h，过滤，得花椒提取物。 实施例32
将天然植物花椒粉碎后置于二丙二醇中，花椒与二丙二醇的质量比为1/10， 在7(TC下，提取10h，过滤，得花椒提取物。 实施例33
将天然植物花椒粉碎后置于二丙二醇、丙二醇、甘油、1， 3 — 丁二醇体积 比为1: h 1: l的混合液中，花椒与混合液的质量比为1/10，在7(TC下，提 取10h，过滤，得花椒提取物。
实施例34
将天然植物花椒粉碎后置于二丙二醇、丙二醇、甘油、1， 3 — 丁二醇、水 体积比为1: 1: 1: 1: 1的混合液中，花椒与混合液的质量比为1/10，在70
r下，提取10h，过滤，得花椒提取物。 实施例35
将100g天然植物花椒粉碎后置于水中，花椒与水的质量比为1/10，在70 。C下，提取10h，过滤，浓縮为浸膏，把浸膏加入1000g体积浓度为70%的乙醇水溶液中，沉淀，过滤，浓縮，得花椒提取物。 实施例36
将100g天然植物花椒粉碎后置于体积浓度为70。^的乙醇水溶液中，花椒
与乙醇水溶液的质量比为1/10，在70。C下，提取10h，过滤，浓縮为浸膏，把 浸膏加入1000g水中，沉淀，过滤，浓縮，得花椒提取物。
采用上述实施例方法得到的提取物应用于抑制组胺释放的药物、化妆品或 保健食品中，从而达到皮肤止痒，抗过敏作用，提取物包括溶剂萃取、二氧化 碳超临界萃取、萃取后精制的花椒提取物或者花椒提取物单体，花椒提取物单 体包括甲氧基白屈菜红碱、去甲基白屈菜红碱、L-N-乙酰基番茄枝碱、茵芋碱、 青花椒碱、香柑内酯、伞形花内酯等等。
权利要求
1.一种天然植物花椒提取物的应用方法，其特征在于，该应用方法是将天然植物花椒提取物应用于抑制组胺释放的药物、化妆品及保健食品中，提供抗过敏，止痒效果，所述的花椒提取物添加浓度范围为0.001％～100％(W/W)。
2. 根据权利要求1所述的一种天然植物花椒提取物的应用方法，其特征在于，所述的天然植物花椒提取物包括采用溶剂萃取、水蒸汽蒸馏法或二氧化碳超临界萃取得到的粗花椒提取物，以及萃取后采用精制方法得到的精制花椒 提取物及其单体。
3. 根据权利要求2所述的一种天然植物花椒提取物的应用方法，其特征 在于，所述的溶剂萃取是将天然植物花椒粉碎后置于提取溶剂中，花椒与提取 溶剂的质量比为2/1-1/40，在20-100。C下，提取0.1-336h，过滤，浓縮，得花椒提取物。
4. 根据权利要求3所述的一种天然植物花椒提取物的应用方法，其特征 在于，所述的提取溶剂为水、有机溶剂或者有机溶剂水溶液。
5. 根据权利要求4所述的一种天然植物花椒提取物的应用方法，其特征 在于，所述的有机溶剂为l-5个碳的醇、乙酸乙酯、二丙二醇或者石油醚中的 一种或几种。
6. 根据权利要求4所述的一种天然植物花椒提取物的应用方法，其特征 在于，所述的有机溶剂水溶液中有机溶剂为1-5个碳的醇或二丙二醇中的一种 或几种。
7. 根据权利要求5或6所述的一种天然植物花椒提取物的应用方法，其 特征在于，所述的l-5个碳的醇包括乙醇、甲醇、甘油、丙二醇、1,3-丁二醇。
8. 根据权利要求1所述的一种天然植物花椒提取物的应用方法，其特征 在于，所述的药物、化妆品及保健食品分别为药物、化妆品及保健食品可接收 的形式。
全文摘要
本发明涉及一种天然植物花椒提取物的应用方法，该应用方法是将天然植物花椒提取物应用于抑制组胺释放的药物、化妆品及保健食品中。本发明采用抑制肥大细胞释放组胺的试验模型，确认天然植物花椒提取物的抗过敏与止痒效果。
文档编号A61K36/185GK101612243SQ200910055788
公开日2009年12月30日 申请日期2009年7月31日 优先权日2009年7月31日
发明者李成亮 申请人:上海汝莱芾生物科技有限公司;上海莱博生物科技有限公司;上海莱格生物科技有限公司;上海莱浦森生物科技有限公司;上海蔻漫生物科技有限公司