专利名称：五加生化胶囊的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种五加生化胶囊的质量控制方法。
背景技术：
五加生化胶囊是一种用于经期及人流术后，产后气虚血瘀所至阴道流 血，血色紫暗或有血块，小腹疼痛按之不减，腰背酸痛、自汗、心悸气短、舌淡、兼见瘀点、脉 沉弱等的中药。该药由刺五加浸膏、川芎、当归、甘草、干姜、桃仁六味药材组成。在收载于 部颁标准WS3-262 (Z-43) -2001 (Z)的质量控制方法中，缺少对刺五加浸膏中有无紫丁香苷 和甘草中有无甘草苷的鉴别，缺少对紫丁香苷、甘草苷以及川芎、当归中含有阿魏酸的含量 测定，这样就不足以控制成品质量的准确性和保证药品的有效性，使每批次生产的药品含 量保持一致。
发明内容
本发明的目的在于克服上述缺点，提供一种五加生化胶囊的质量控制 方法，它能对五加生化胶囊的多种有效成分进行鉴别和对其含量进行测定，保证了质量控 制的准确性和有效性。本发明五加生化胶囊的质量控制方法是这样实现的它包括现有的 对有无川芎、当归的鉴别，其方法是取本品内容物2g，加乙醚10ml，浸渍过液，滤过，滤液蒸 干，残渣加氯仿Iml使溶解，作为供试品溶液，另取川芎、当归对照药材各lg，分别同法制成 对照药材溶液，再取阿魏酸对照品，加氯仿制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，照 薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述四种溶液各2 μ 1，分别点于 同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿一冰醋酸(6 5 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 新制的三氯化铁溶液和铁氰化钾溶液(1 1)的混合溶液，供试品色谱中，在与对 照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明的方法是1、对刺五加浸膏 中有无紫丁香苷和异嗪皮啶的鉴别，取本品五加生化胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超 声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取紫丁香苷对 照品，加甲醇制成每Iml含0. Smg的溶液，作为对照品溶液，再取异嗪皮啶对照品，加甲醇制 成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，按照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录 VIB)试验，吸取供试品溶液10μ 1，对照品溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯 仿-甲醇-水(8 1 0. 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供 试品色谱中，在与异嗪皮啶对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，再喷以10% 硫酸乙醇液，在105°C加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与紫丁香苷对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的斑点。2、对甘草中有无甘草苷的鉴别，在含量测定项下记录的高效液相 色谱图中，供试品中甘草苷峰的保留时间应与对照品峰保留时间一致。3、按照高效液相色 谱法的双波长法对五加生化胶囊成品中的有效成分紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷进 行含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈(A)-2%冰醋酸(B)为流动相进行 梯度洗脱 Wmin(6% A) — 15min(6% A) — 18min(12% A) ^ 35min(12% A) — 40min(50% A) -45min(6% A) — 50min (6% A)]，流速为1. Oml/min，柱温为30°C，检测波长阿魏酸、异 嗪皮啶为3Mnm，紫丁香苷、甘草苷为276nm，理论板数按异嗪皮啶峰计算应不低于6000，分 别精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥12小时的紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草 苷对照品适量，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每Iml分别含0. 26,0. 012,0. 03,0. 07mg的 混合溶液，即得对照品溶液，取装量差异项下的本品五加生化胶囊内容物，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称 定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻、静置、滤过、取续滤液，作为供试品溶液，分别精密吸 取对照品混合溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得按照五加生化胶 囊成品计算，每粒含刺五加浸膏、川芎、当归、甘草以紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷的 总量计，不少于设定值为合格。4、按照五加生化胶囊成品计算，每粒含刺五加浸膏、川芎、当 归、甘草以紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷的总量计，设定值为l.ang。5、上述质量控制 方法可用于五加生化药的其它剂型的质量控制。本发明五加生化胶囊的质量控制方法改进 修订和补充了原有五加生化胶囊的质量标准，增加了紫丁香苷、甘草苷的鉴别和紫丁香苷、 阿魏酸、甘草苷的含量测定。它采用薄层色谱法鉴别紫丁香苷、异嗪皮啶，采用高效液相色 谱法鉴别甘草苷，采用高效液相色谱法的双波长法测定紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草 苷的含量，可一次测定四种成分，实现了高效快速对多种有效成分的测定，具有简便快速的 优点，该方法能提高质量控制的准确性和有效性，有利于提高对五加生化胶囊成品的质量 进行有效控制。
具体实施例方式
它包括现有的对有无川芎、当归的鉴别，其方法是取本品内容物2g，加乙醚10ml， 浸渍过液，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿Iml使溶解，作为供试品溶液，另取川芎、当归对照 药材各lg，分别同法制成对照药材溶液，再取阿魏酸对照品，加氯仿制成每Iml含0. 5mg的 溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述 四种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿一冰醋酸㈩5 1)为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以新制的三氯化铁溶液和铁氰化钾溶液(1 1)的混合溶 液，供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的质量控制方法是1、对刺五加浸膏中有无紫丁香苷和异嗪皮啶的鉴别， 取本品五加生化胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣 加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取紫丁香苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. Smg的 溶液，作为对照品溶液，再取异嗪皮啶对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照 品溶液，按照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μ 1，对 照品溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(8 1 0.1)为展开 剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与异嗪皮啶对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，再喷以10%硫酸乙醇液，在105°C加热至斑点清 晰，供试品色谱中，在与紫丁香苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2、对甘草中有无甘草苷的鉴别，在含量测定项下记录的高效液相色谱图中，供试 品中甘草苷峰的保留时间应与对照品峰保留时间一致。
3、按照高效液相色谱法的双波长法对五加生化胶囊成品中的有效成分紫丁香 苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷进行含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈 (A)-2%冰醋酸(B)为流动相进行梯度洗脱[Omin(6% A) — 15min(6% A) — 18min(12% A) — 35min (12% A) — 40min (50% A) — 45min (6% A) — 50min (6% A)],流速为 1. Oml/min, 柱温为30°C，检测波长阿魏酸、异嗪皮啶为3Mnm，紫丁香苷、甘草苷为276nm，理论板数按 异嗪皮啶峰计算应不低于6000，分别精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥12小时的紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷对照品适量，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每Iml分 别含0. 26,0. 012,0. 03,0. 07mg的混合溶液，即得对照品溶液，取装量差异项下的本品五加 生化胶囊内容物，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定 重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻、静置、滤过、取续 滤液，作为供试品溶液，分别精密吸取对照品混合溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色 谱仪，测定，即得按照五加生化胶囊成品计算，每粒含刺五加浸膏、川芎、当归、甘草以紫丁 香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷的总量计，不少于设定值为合格。
4、按照五加生化胶囊成品计算，每粒含刺五加浸膏、川芎、当归、甘草以紫丁香苷、 阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷的总量计，设定值为1. 2mgo
5、上述质量控制方法可用于五加生化药的其它剂型的质量控制。
上述步骤并不需要按照先后顺序进行，而且同时还可以进行常规检测，如性状的 观察，该五加生化胶囊为胶囊剂，内容物为棕黄色的粉末、味微苦，该成品还应符合中国药 典2005年版一部附录ID胶囊剂项下有关的各项规定，符合以上条件的五加生化胶囊成品 为合格。
五加生化胶囊十批样品测定结果
单位mg/粒
权利要求
1.一种五加生化胶囊的质量控制方法，它包括现有的对有无川芎、当归的鉴别，其方法 是取本品内容物2g，加乙醚10ml，浸渍过液，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿Iml使溶解，作为 供试品溶液，另取川芎、当归对照药材各lg，分别同法制成对照药材溶液，再取阿魏酸对照 品，加氯仿制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年 版一部附录VIB)试验，吸取上述四种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯 仿一冰醋酸(6 5 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新制的三氯化铁溶液和 铁氰化钾溶液(1 1)的混合溶液，供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点，本发明的特征在于对刺五加浸膏中有无紫丁香苷和异嗪皮啶的鉴 别，取本品五加生化胶囊内容物2g，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干， 残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取紫丁香苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. Smg 的溶液，作为对照品溶液，再取异嗪皮啶对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对 照品溶液，按照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10 μ 1， 对照品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(8 1 0.1)为展 开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与异嗪皮啶对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，再喷以10%硫酸乙醇液，在105°C加热至斑点 清晰，供试品色谱中，在与紫丁香苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.权利要求1所述的一种五加生化胶囊的质量控制方法，其特征在于对甘草中有无 甘草苷的鉴别，在含量测定项下记录的高效液相色谱图中，供试品中甘草苷峰的保留时间 应与对照品峰保留时间一致。
3.权利要求1所述的一种五加生化胶囊的质量控制方法，其特征在于按照高效液相 色谱法的双波长法对五加生化胶囊成品中的有效成分紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷 进行含量测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈(A)-2%冰醋酸(B)为流动相进 行梯度洗脱[Omin (6 % A) — 15min (6 % A) — 18min (12 % A) — 35min (12 % A) — 40min (50 % A) -45min(6% A) — 50min (6% A)]，流速为1. Oml/min，柱温为30°C，检测波长阿魏酸、异 嗪皮啶为3Mnm，紫丁香苷、甘草苷为276nm，理论板数按异嗪皮啶峰计算应不低于6000，分 别精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥12小时的紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草 苷对照品适量，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每Iml分别含0. 26,0. 012,0. 03,0. 07mg的 混合溶液，即得对照品溶液，取装量差异项下的本品五加生化胶囊内容物，研细，取2g，精密 称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称 定重量，加甲醇补足减失的重量，摇勻、静置、滤过、取续滤液，作为供试品溶液，分别精密吸 取对照品混合溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得按照五加生化胶 囊成品计算，每粒含刺五加浸膏、川芎、当归、甘草以紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷的 总量计，不少于设定值为合格。
4.权利要求3所述的一种五加生化胶囊的质量控制方法，其特征在于按照五加生化 胶囊成品计算，每粒含刺五加浸膏、川芎、当归、甘草以紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷 的总量计，设定值为l.ang。
5.权利要求1、2、3、4所述的一种五加生化胶囊的质量控制方法，其特征在于上述质 量控制方法可用于五加生化药的其它剂型的质量控制。
全文摘要
本发明涉及一种五加生化胶囊的质量控制方法。本发明五加生化胶囊的质量控制方法改进修订和补充了原有五加生化胶囊的质量标准，增加了紫丁香苷、甘草苷的鉴别和紫丁香苷、阿魏酸、甘草苷的含量测定。它采用薄层色谱法鉴别紫丁香苷、异嗪皮啶，采用高效液相色谱法鉴别甘草苷，采用高效液相色谱法的双波长法测定紫丁香苷、阿魏酸、异嗪皮啶、甘草苷的含量，可一次测定四种成分，实现了高效快速对多种有效成分的测定，具有简便快速的优点，该方法能提高质量控制的准确性和有效性，有利于提高对五加生化胶囊成品的质量进行有效控制，使每批次生产的药品含量能够保持一致。
文档编号A61K36/9068GK102028923SQ200910073000
公开日2011年4月27日 申请日期2009年9月25日 优先权日2009年9月25日
发明者李龙, 杨景红, 褚弘斌, 蹇小兵, 韩振远 申请人:多多药业有限公司