专利名称：一种提取燕麦β-葡聚糖的方法
技术领域：
本发明属于植物提取物领域，特别涉及一种提取燕麦β -葡聚糖的方法。
背景技术：
燕麦葡聚糖是由燕麦麸皮中提取，提取后产品附加值大增。燕麦葡聚糖 是以β_1，3-，β-1，4-糖苷键连接起来的粘性多聚葡聚糖，其主要集中于燕麦麸皮的糊粉 层。燕麦葡聚糖具有多种功能，可以降低血脂、控制血糖、增强免疫力，以及防治便秘、 改善肠道微环境等，广泛应用于医药和保健食品领域。目前，制备燕麦β -葡聚糖一般都通过溶剂提取或者采用温和碱提取法。这些方 法都需要引入有机溶剂，成本高，去除不易，而且生产温度较高，对节能环保不利。
发明内容
因此，本发明要解决的技术问题就是针对现有的提取燕麦β -葡聚糖的方法使用 有机溶剂、操作温度高，不节能环保的不足，提供一种新的提取燕麦葡聚糖的方法，其 既节能又环保。因此，本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是一种提取燕麦葡聚糖 的方法，包括如下步骤1)将燕麦麸皮去除表面的淀粉和浮尘；2)将燕麦麸皮在40 50°C加入水，调节pH7 8，搅拌1 5小时；3)分离后收集滤液，冷却至10 30°C，调整pH为4. 5 5. 0，搅拌后静置0. 5 3小时；4)离心分离得滤液，加入低温α -淀粉酶，在35 45°C下，pH值5. 5 6. 5，处理 1 2小时，采用硅藻土板框过滤，得到澄清液体；5)用截留分子量为50000 IOOOOODa的超滤膜过滤，得到燕麦β -葡聚糖溶液。其中，步骤1)较佳的通过淀粉筛分机除去燕麦麸皮表面的淀粉和浮尘。步骤1) 所述燕麦麸皮的粒径优选20 60目。步骤2)所述的燕麦麸皮与水的重量比优选1 20 1 30。步骤3)所述的分离后收集滤液，分离方法优选100目滤布过滤。所述的静置 0. 5 3小时，优选静置1小时。静置后有蛋白质沉淀析出。步骤4)离心分离的速度为2500 lOOOOrpm，优选5000rpm。低温α -淀粉酶反 应的温度在35 45°C，较佳的是40°C。pH5. 5 6. 5，优选6pH。低温α-淀粉酶的用量 优选50 150U/g燕麦麸皮，更优选100U/g燕麦麸皮。低温α -淀粉酶是一种反应温度 在25 45°C的淀粉酶。而一般的淀粉酶在25 45°C温度下催化效率及其低下。同时在 生产过程中，如温度超过60°C，淀粉的物理性质发生明显变化，使溶液十分粘稠，处理困难； 而且高温容易导致燕麦葡聚糖分解，使提取率降低。所以，采用低温α-淀粉酶不仅使 生产过程更加容易，降低设备能耗，还提高了燕麦β “葡聚糖的提取率。
步骤5)得到燕麦0 -葡聚糖溶液可以进一步冷冻干燥，或者配制到0. 2 浓 度进行使用。本发明还提供上述方法提取的燕麦0 -葡聚糖。本发明还提供燕麦葡聚糖在改善面部泛红和减少细纹的应用，可用于制备改 善面部泛红和减少细纹的药物或化妆品。本发明所用的原料或试剂除特别说明之外，均市售可得。相比于现有技术，本发明的有益效果如下本发明的燕麦葡聚糖的生产工艺 中，未使用有机溶剂，而且操作温度不高于50°C，节能环保，安全性高。本发明还发现了燕麦 3-葡聚糖在改善面部泛红和减少细纹的应用。
以下结合
本发明的特征和有益效果。图1是涂用燕麦0 -葡聚糖前后面部泛红的改善状况图。图2是涂用燕麦0 -葡聚糖前后面部细纹的改善状况图。
具体实施例方式下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。下列实施例中未注 明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。所述的百分比 若无特别说明，是指质量百分比。实施例1选择粒径20目的燕麦麸皮。通过淀粉筛分机(新乡市三禾振动设备有限公司) 采用60目的筛网，除去燕麦麸皮表面的淀粉颗粒或粉末以及浮尘。燕麦麸皮在50°C下加水 搅拌，燕麦麸皮与水的重量比为1 20，调节pH8，搅拌1小时。5000rpm离心分离后收集滤 液，冷却至301，调整？11为4.5，搅拌后静置1小时。5000rpm离心分离得滤液，加入低温 a -淀粉酶(购自Sigma公司，A-3176，Type VI-B型，酶活力24000U/g)，用量为0. 42g低 温a-淀粉酶/100g燕麦麸皮。在40°C下，pH值6，处理1小时，采用硅藻土板框过滤，得 到澄清液体。采用截留分子量为lOOOOODa的超滤膜过滤，收集截留液，得到燕麦葡聚 糖溶液，冷冻干燥。提取率85%，纯度88%。用水配制成(wt)燕麦葡聚糖浓度的 溶液。实施例2选择粒径60目的燕麦麸皮。通过淀粉筛分机采用80目的筛网，除去燕麦麸皮表 面的淀粉颗粒或粉末以及浮尘。燕麦麸皮在40°C下加水搅拌，燕麦麸皮与水的重量比为 1 30，调节pH7，搅拌5小时。100目滤布过滤，收集滤液，冷却至10°C，调整pH为5. 5， 搅拌后静置3小时。5000rpm离心分离得滤液，加入低温a -淀粉酶(酶活力24000U/g)， 用量为1.25g低温a-淀粉酶/100g燕麦麸皮。在451下，？11值6.5，处理2小时，采用硅 藻土板框过滤，得到澄清液体。采用截留分子量为50000Da的超滤膜过滤，收集截留液，得 到燕麦葡聚糖溶液，冷冻干燥。提取率78%，纯度95%。用水配制成0.2% (wt)燕麦
葡聚糖浓度的溶液。实施例3
选择粒径40目的燕麦麸皮。通过淀粉筛分机采用60目的筛网，除去燕麦麸皮表 面的淀粉颗粒或粉末以及浮尘。燕麦麸皮在45°C下加水搅拌，燕麦麸皮与水的重量比为 1 25，调节pH7. 5，搅拌2小时。lOOOOrpm离心分离后收集滤液，冷却至20°C，调整pH为 5. 0，搅拌后静置0. 5小时。5000rpm离心分离得滤液，加入低温a -淀粉酶(酶活力24000U/ g)，用量为0.85g低温a-淀粉酶/100g燕麦麸皮。在35°C下，pH值5. 5，处理1. 5小时， 采用硅藻土板框过滤，得到澄清液体。采用截留分子量为80000Da的超滤膜过滤，收集截留 液，得到燕麦葡聚糖溶液，冷冻干燥。提取率82%，纯度93%。用水配制成0.5% (wt) 燕麦葡聚糖浓度的溶液。采用硫酸-苯酚法检测燕麦葡聚糖浓度。硫酸-苯酚法如下苯酚-硫酸试剂可与游离的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应，显色后在 490nm处有最大吸收值，吸收值与糖含量呈线性关系。仪器与用具紫外可见分光光度计；分析天平。试药与试液0 -葡聚糖标准溶液精密称取0 -葡聚糖标准品10mg，双蒸水定容至100ml (若 配置过程中较难溶解，可先加少量水，70°C水浴助溶，冷却至室温后，定溶)。冰箱储存备用。苯酚溶液(5% )取苯酚5g，加水使溶解成100ml，摇勻，即得。标准曲线的制备取6组具塞试管，每组三个平行。分别精密量取0. 2,0. 4,0. 6、 0. 8、1.0、1.2ml 葡聚糖标准溶液(0. 10mg/ml)加入各组试管中，补加双蒸水至2. 0ml ；另 取3支试管加入蒸馏水2. 0ml做空白。分别精密加入5%苯酚溶液1. 0ml，摇勻，迅速精密 加入浓硫酸5. 0ml，摇勻后放置至室温，以空白液为对照调零，在490nm处测定吸光值。以 3 -葡聚糖的量为横坐标，吸光值A为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程Y = aX+b(Y为为吸光度(abs)，X为3 -葡聚糖的加入量(P g))，相 关系数r彡0. 99。待测样品溶液的制备精密称取待测样品lg定容于100ml容量瓶中，摇勻后精密 量取1. 0ml加入平行试管中，补双蒸水至2. 0ml，精密加入5%苯酚1ml，摇勻后精密加入浓 硫酸5. 0ml，冷却至室温，在490nm下测定其吸光值A。每个待测溶液做三组平行。含量计算将待测样品的吸光度带入标准曲线回归方程中，计算出待测样品中的 葡聚糖含量。葡聚糖浓度=(x/100)%，其中，X为代入标准曲线求出的待测样品葡聚
糖的量(Ug)o下面通过试验例来进一步说明本发明的有益效果。效果实施例1取实施例1制备的浓度的燕麦葡聚糖浓度的溶液。给予5位面部泛红 (Baumann皮肤分型为敏感性皮肤，已发生面部皮肤泛红现象)的女性和5位面部有皱纹的 女性使用。每次取0. 5ml均勻涂满面部，每天早晚洗脸后使用，不涂其他东西。连续使用30天。使用30天后的结果见图1和图2。5位原来面部泛红的女性的面部的均得到不同 程度的消退，其中2人基本恢复正常。2人消退了 60 70%。一人消退40%。5位原来面 部有皱纹的女性面部的皱纹都有减少。特别是细纹和干纹所有人都明显减少。可见燕麦 3-葡聚糖具有明显改善面部泛红和减少细纹的作用。
权利要求
一种提取燕麦β-葡聚糖的方法，其特征在于，包括如下步骤1)将燕麦麸皮去除表面的淀粉和浮尘；2)将燕麦麸皮在40～50℃加入水，调节pH7～8，搅拌1～5小时；3)分离后收集滤液，冷却至10～30℃，调整pH为4.5～5.0，搅拌后静置0.5～3小时；4)离心分离得滤液，加入低温α-淀粉酶，在35～45℃下，pH值5.5～6.5，处理1～2小时，采用硅藻土板框过滤，得到澄清液体；5)用截留分子量为50000～100000Da的超滤膜过滤，得到燕麦β-葡聚糖溶液。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述燕麦麸皮的粒径优选20 60目。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的燕麦麸皮与水的重量比为 1 20 1 30。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)所述的静置1小时。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)所述的离心分离的速度为5000rpm。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)所述的低温α-淀粉酶反应温度 40°C，ρΗ6。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)所述的低温α-淀粉酶的用量是 50 150U/g燕麦麸皮。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的低温α-淀粉酶的用量是100U/g燕麦麸皮。
9.如权利要求1 8任一项所述的方法提取的燕麦β-葡聚糖。
10.燕麦β-葡聚糖在改善面部泛红和减少细纹的应用。
全文摘要
本发明公开了一种提取燕麦β-葡聚糖的方法，包括如下步骤1)将燕麦麸皮去除表面的淀粉和浮尘；2)将燕麦麸皮在40～50℃加入水，调节pH7～8，搅拌1～5小时；3)分离后收集滤液，冷却至10～30℃，调整pH为4.5～5.0，搅拌后静置0.5～3小时；4)离心分离得滤液，加入低温α-淀粉酶，在35～45℃下，pH值5.5～6.5，处理1～2小时，采用硅藻土板框过滤，得到澄清液体；5)用截留分子量为50000～100000Da的超滤膜过滤，得到燕麦β-葡聚糖溶液。本发明的燕麦β-葡聚糖，生产工艺中未使用有机溶剂，而且操作温度不高于50℃，节能环保，安全性高。本发明还发现了燕麦β-葡聚糖在改善面部泛红和减少细纹的应用。
文档编号A61K31/716GK101798357SQ20091019948
公开日2010年8月11日 申请日期2009年11月27日 优先权日2009年11月27日
发明者孙常磊, 廖立平, 李成亮, 翟春涛 申请人:上海莱博生物科技有限公司