专利名称：高山离子芥或其提取物用于制备防治肝脏疾病药物的用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及高山离子芥或其提取物的制备和用途，高山离子芥或其提取物在制备防治肝脏疾病药物中的应用。
背景技术：
中国是肝病大国。近年来，随着接种肝炎病毒预防性疫苗的普及，病毒性肝炎的发病率呈下降趋势，而非感染性肝病如药源性肝病、酒精性肝病、肝纤维化、脂肪肝等发病率日益上升，并呈现低龄化趋势，严重威胁着全民的健康，防治肝病成为一个长久的课题(齐俊英.疑难性肝病诊断的思考[J]·中西医结合肝病杂志，2009，1 Κ4) :193-194)。高山冰缘植物系指一系列分布在高山植被带以上，永久冰雪带以下，能适应冰雪严寒生境的寒旱生或寒冷中早生多年生轴根性杂类草以及垫状植物，植株矮小，高5 10cm，呈莲座状，垫状，植物体密被棉毛，根系发达(韩艳.高山离子芥铁转运蛋白基因编码序列的克隆及其抗氧化作用的分析[D].兰州兰州大学，2008)。这类植物常年生长在强烈的日辐射、低温、疾风等恶劣环境中，有着极强的生命力，并造就其独特的生理活性。药理研究表明高山冰缘植物具有抗氧化、护肝、抗缺氧、抗肿瘤(宁鹏，张寿，杨太东，等.藏雪莲水提取物对小白鼠抗氧化作用的研究[J].青海大学学报(自然科学版)，2009，27( :63-65 ； 陈艳军，高旭珍，康巍，等.高山红景天对大白鼠肝星状细胞增殖分化的影响[J].肝脏， 2007,12(3) :193-194;陈玉满，陈江，毛光明，等.高山红景天的耐缺氧作用实验研究[J]. 中国卫生检验杂志，2007，17(8) :1494-1496 ；Way TD, Lee JC, Kuo DH, et al. Inhibition of epidermal growth factorreceptor signaling by Saussurea involucrate, a rare traditional Chinese medicinal herb, in humanhormone-resistant prostate cancer PC-3 cells [J]· J Agric Food Chem，2010，58 (6) :3356-3365)等活性。高山离子芥(Chorispora Bungeana Fisch. And C. A. Mey.)是一种十字花科高山冰缘植物，生长于其它花类植物无法生长的冰缘地带，整个生命周期受到低温、强紫外辐射和低氧分压的影响。Wu(ffu YL, Lian LH, Jiang YZ, et al. Hepatoprotective effects of salidroside on fulminanthepatic failure induced by D-galactosamine and lipopolysaccharide in mice[J], J Pharm Pharmacol,2009,61(10) :1375-1382)等指出高山冰缘植物可通过抗氧化发挥护肝作用，而高山离子芥已被验证具有较强的抗氧化活性(Guo GX, Zhang MX, Chen Y, et al. Relation of several antioxidantenzymes to rapid freezing resistance in suspension cultured cells from alpine Chorispora bungeana[J]. Cryobiology，2006，52 (2) :241-250)，作为典型的高山冰缘植物，有可能在预防或缓解肝损伤方面有出色的表现。我们在此首次公开了高山离子芥或其提取物具有防治肝脏疾病作用。
发明内容
本发明提供了高山离子芥或其提取物作为肝脏疾病防治药物的用途，可用于药源性肝病、酒精性肝病、肝纤维化、脂肪肝等多种肝病的预防和治疗。本发明提供了一种包含高山离子芥或其提取物及常规药用载体的药物组合物，其特征是所述药物组合物是采用常规制剂工艺制备而成的口服或非口服途径方式给药的制剂。本发明提供了预防或治疗肝脏疾病的方法，包括向肝病患者给予高山离子芥或其提取物或前面所述药物组合物。本发明提供的高山离子芥或其提取物可以长期应用，具有明显的预防或改善肝损伤的功效，安全可靠。采用各种不同方法制备的高山离子芥提取物对本发明的用途没有影响。
具体实施例方式肝病是指发生在肝脏的病变，包括但不限于肝炎、药源性肝病、酒精性肝病、肝纤维化、脂肪肝、肝癌等，危害极大。药源性肝病(drug-induced liver disease, DILD)是指由药物或其代谢才产物引起的肝损伤，其表现可从无症状、非特异性的生化改变到急性肝炎、慢性肝炎、急性肝衰竭、胆汁淤积，甚至肝硬化、肝脏肿瘤、脂肪肝、肉芽肿等(付静，李志军.药物性肝病的发病机制及治疗新进展[J].天津医药，2009，37 ) :333-335)。酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD)是指由于过量摄入酒精导致的肝脏损害及其一系列病变，可分为轻型酒精性肝病、酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化等(徐正婕，陆伦根.酒精性肝病的流行病学和自然史[J].中国处方药，2010，1 32-34)。肝纤维化(hepatic fibrosis)是指肝细胞发生坏死及炎症刺激时，肝脏内纤维结缔组织异常增生的病理过程，轻者称为肝纤维化，重者进而使肝小叶结构改建，假小叶及结节形成，称为肝硬化(程君，杨云霞.黄芩苷对四氯化碳致亚急性肝纤维化小鼠的保护作用[J]·华西药学杂志，2010，25(1) :32-33)。脂肪肝(fatty liver disease, FLD)是指多种因素所致的肝脏脂肪代谢障碍，脂类物质的动态平衡失调，致使肝细胞内脂肪蓄积过多， 肝脏发生弥漫性脂肪浸润(脂肪变性)及一系列病理生理变化的一种临床病理综合征，按病理变化的进展可分为单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化、脂肪性肝硬化四个阶段(苌新明，负建蔚.脂肪性肝病防治的研究进展[J].世界华人消化杂志，2009，17 (35) 3573-3578)。本发明提供了高山离子芥或其提取物在制备肝脏疾病防治药物中的应用，包括但不局限于药源性肝病、酒精性肝病、肝纤维化、脂肪肝等肝脏疾病。高山离子芥植株可以于每年7 8月从海拔高度为3700 4000m的天山附近向阳砾石山坡上采集后，连同泥土一起在纸箱中运回实验室，途中喷水保持湿润。植株高约3 IOcm,被白色短柔毛，地下有粗的肉质根，根端有直立的根状茎，叶多数，基生，深裂到全裂， 叶片椭圆形，羽状(阿依吐尔汗，谭敦炎，李志军，等.高山离子芥营养器官的结构与环境的关系研究[J].新疆农业大学学报，1998，2K4) :273-277)。高山离子芥提取物可以通过以下方式制备(1)取新鲜高山离子芥全株，净选除杂质，使用粉碎机粉碎，置IOOOml圆底烧瓶中，加药材重量的4倍水浸泡约lh，热煎煮，提取三次，每次1. ，过滤(用80目尼纶布)， 合并滤液，3000rpm离心lOmin，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得高山离子芥水提物。(2)取新鲜高山离子芥全株，净选除杂质，烘干，使用粉碎机粉碎，置IOOOml圆底烧瓶中，加药材重量的4倍水浸泡约lh，热煎煮，提取三次，每次1. ，过滤(用80目尼纶布)，合并滤液，3000rpm离心lOmin，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得高山离子芥水提物。(3)取新鲜高山离子芥全株，净选除杂质，使用粉碎机粉碎，置IOOOml圆底烧瓶中，加药材4倍重量的60% 80% (ν/ν)乙醇浸泡约lh，回流提取3次，每次lh，过滤(用 80目尼纶布)，合并滤液，3000rpm离心lOmin，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得高山离子芥醇提物。(4)取新鲜高山离子芥全株，净选除杂质，烘干，使用粉碎机粉碎，置IOOOml圆底烧瓶中，加药材4倍重量的60% 80% (ν/ν)乙醇浸泡约lh，回流提取3次，每次lh，过滤 (用80目尼纶布)，合并滤液，3000rpm离心lOmin，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得高山离子芥醇提物。本发明所述的高山离子芥或其提取物可以根据临床需要，加入相应药用载体，以片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液、溶液、糖浆、注射剂、霜剂、软膏、凝胶剂、喷雾剂、口嚼剂或贴剂等制剂形式存在。本发明所述的高山离子芥或其提取物可根据临床需要，采用口服或非口服方式用药，优选口服给药方式。本发明所述的高山离子芥或其提取物制剂采用口服方式用药时，人用剂量优选 0.05-50g/人/日(相当于生药量)，其中更优选为0.5-25g/人/日(相当于生药量)，最优选为2. 5-5g/人/日(相当于生药量)。以下结合实验例对本发明进行说明，但本发明并不受限于该实施例。实施例1高山离子芥提取物的制备每年7 8月从海拔高度为3700 4000m的天山附近向阳砾石山坡上采集高山离子芥植株，连同泥土一起在纸箱中运回实验室，途中喷水保持湿润。取80g新鲜高山离子芥全株，净选除杂质，使用粉碎机粉碎，置IOOOml圆底烧瓶中，加药材重量的4倍水浸泡约 lh，热煎煮，提取三次，每次1. ，过滤(用80目尼纶布)，合并滤液，3000rpm离心lOmin， 取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得1. 7g高山离子芥水提物。实施例2高山离子芥提取物的制备每年7 8月从海拔高度为3700 4000m的天山附近向阳砾石山坡上采集高山离子芥植株，连同泥土一起在纸箱中运回实验室，途中喷水保持湿润。取80g新鲜高山离子芥全株，净选除杂质，烘干，使用粉碎机粉碎，置IOOOml圆底烧瓶中，加药材重量的4倍水浸泡约lh，热煎煮，提取三次，每次1. ，过滤(用80目尼纶布)，合并滤液，3000rpm离心 lOmin，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得6. 9g高山离子芥水提物。实施例3高山离子芥提取物的制备每年7 8月从海拔高度为3700 4000m的天山附近向阳砾石山坡上采集高山离子芥植株，连同泥土一起在纸箱中运回实验室，途中喷水保持湿润。取80g新鲜高山离子芥全株，净选除杂质，使用粉碎机粉碎，置IOOOml圆底烧瓶中，加药材4倍重量的60% 80% (ν/ν)乙醇浸泡约lh，回流提取3次，每次lh，过滤(用80目尼纶布)，合并滤液，3000rpm 离心lOmin，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得1. 9g高山离子芥醇提物。实施例4高山离子芥提取物的制备
每年7 8月从海拔高度为3700 4000m的天山附近向阳砾石山坡上采集高山离子芥植株，连同泥土一起在纸箱中运回实验室，途中喷水保持湿润。取80g新鲜高山离子芥全株，净选除杂质，烘干，使用粉碎机粉碎，置IOOOml圆底烧瓶中，加药材4倍重量的 60% 80% (ν/ν)乙醇浸泡约lh，回流提取3次，每次lh，过滤(用80目尼纶布)，合并滤液，3000rpm离心lOmin，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得7. 3g高山离子芥醇提物。实施例5高山离子芥提取物对肝纤维化的影响1材料与方法1.1实验动物SPF级昆明种小鼠，体重18 22g，雄性。购自北京维通利华实验动物技术有限公司(许可证号SCXK(京)2007-001)，饲养于北京联合大学应用文理保健食品功能检测中心实验动物房。1. 2 试齐[J四氯化碳北京化工厂，石蜡油=Sigma公司；ALT、AST试剂盒南京建成生物研究所；透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)肝纤维化ELISA试剂盒上海森雄科技实业有限公司。1. 3 仪器多功能酶标仪=Sigma公司；TGL 16M离心机湖南凯达科学仪器有限公司 ’涡旋混合器金坛市医疗器械厂。2 方法2. 1造模及给药小鼠适应性饲养7d后，随机分为模型组、正常组和高山离子芥提取物高、中、低剂量(5、2.5、1.258/1^，相当于生药量)组，每组10只。高山离子芥提取物组灌胃给予高山离子芥提取物，1次/d，连续40d，其他两组给予等量蒸馏水。模型组和给药组小鼠皮下注射10%四氯化碳石蜡油溶液(10ml/kg)，l次/周，连续40d。正常组小鼠则皮下注射等量石蜡油溶液。2. 2指标测定第40d，小鼠禁食12h后，眼眶取血，3000rpm离心lOmin，分离血清，检测血清中 ALT、AST、HA, LN 水平。2. 3数据处理实验数据表示为Λ，采用SPSS13. O软件，用单因素方差分析进行统计学处理，P <0. 05表示有统计学意义。3 结果3. 1高山离子芥提取物对肝纤维化小鼠肝功能的影响表1中数据显示，由四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠血清中ALT、AST明显升高，与正常组比较，有显著性差别，而高山离子芥提取物组血清中ALT和AST的水平明显下降，且有一定的量效关系，表明高山离子芥提取物能有效地缓解四氯化碳引起的药物性肝损伤。表1高山离子芥提取物对肝纤维化小鼠肝功能的影响( ± s )
权利要求
1.高山离子芥或其提取物用于制备防治肝脏疾病药物的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征是高山离子芥或其提取物用于制备预防或治疗药源性肝病的用途。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征是高山离子芥或其提取物用于制备预防或治疗酒精性肝病的用途。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征是高山离子芥或其提取物用于制备预防或治疗肝纤维化的用途。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征是高山离子芥或其提取物用于制备预防或治疗脂肪肝的用途。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征是所述的高山离子芥提取物是高山离子芥水提物。
7.根据权利要求1所述的用途，其特征是所述的高山离子芥提取物是高山离子芥醇提物。
8.根据权利要求6所述的用途，其特征是所述的高山离子芥水提物通过以下方式制备取高山离子芥全株或全株的一部分，使用粉碎机粉碎，加水浸泡，加热煎煮，提取3次， 过滤，合并滤液，离心，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得高山离子芥水提物。
9.根据权利要求7所述的用途，其特征是所述的高山离子芥醇提物通过以下方式制备取高山离子芥全株，使用粉碎机粉碎，加乙醇浸泡，回流提取3次，过滤，合并滤液，离心，取上清液浓缩，冷冻干燥成干浸膏即得高山离子芥醇提物。
10.一种药物组合物，其特征是所述药物组合物包含高山离子芥或高山离子芥提取物及常规药用载体，采用常规制剂工艺制备而成的口服或非口服途径方式给药的制剂。
全文摘要
本发明公开了高山离子芥或其提取物的制备方法和用途。经试验证明，本发明中的高山离子芥或其提取物，对药源性肝病、酒精性肝病、肝纤维化及脂肪肝等具有良好的预防和治疗作用，因此，可以按照常规制剂方法制成任何一种包括片剂、胶囊剂、口服液、冲剂等成药制剂，用于防治肝脏疾病。
文档编号A61K36/31GK102232986SQ201010151888
公开日2011年11月9日 申请日期2010年4月21日 优先权日2010年4月21日
发明者刘婷, 向云, 孙雅煊, 安黎哲, 张华 , 李雅博, 李雨瑶, 盛红梅, 陈书燕 申请人:中国科学院寒区旱区环境与工程研究所, 兰州大学