专利名称：包含电磁辐射的酵母的治疗神经变性疾病或病症的组合物、方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于治疗神经变性疾病或病症(neurodegenerative diseases or disorders)的组合物，此类组合物的用途以及用于产生此类组合物的方法。背景神经变性疾病或病症是其中脑和脊髓的细胞损失的状态。脑和脊髓由执行不同功能的神经元构成。此类功能可以是控制运动，处理感觉的信息或做出决定。脑和脊髓的细胞不容易再生，所以过度损伤可能是不可逆的。神经变性疾病由神经元或它们的髓鞘的恶化导致，经过一段时间，其将导致机能障碍或不同类型的疾病或病症。凋亡是这样的现象，在神经系统发育过程中，其开始在神经组织中出现，阻止损伤组织伤害器官中的完整细胞。在凋亡过程中，细胞发生一系列的形态变化，其包括细胞皱缩、染色质凝聚、DNA片段化等。凋亡控制的机能障碍导致过度的细胞死亡，例如在帕金森病(Parkinson' s disease)禾口阿尔茨海默病(Alzheimer' s disease)中。神经变性疾病或病症的初始治疗依赖于具体疾病或病症的诊断和进展。目前本领域已知很少用于存在的广泛范围的神经变性疾病或病症的疗法。对于帕金森病，用L-二羟基-苯基-丙氨酸(L-多巴；左旋多巴(levodopa))治疗能够短时间抑制症状，但是然后导致症状的加速。也努力开发将认知功能稳定在初始诊断时存在的水平的用于阿尔茨海默病的疗法。其它神经变性疾病或病症，诸如肌萎缩性侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)或 2 型糖尿病(Diabetes Mellitus type 2)相关的病况类似。然而，这些疗法常常具有有限的效果、昂贵并且可与严重的副作用相关。它们也不是预防性的。因此，存在允许改善治疗或预防神经变性疾病或病症的新方法和组合物的需要。概述因此，本发明意欲缓和、减轻或消除一种或多种上述缺陷，并且提供对所提及的类型的改善的治疗，特别是其中使用的组合物。为此目的，在第一方面，提供包含酵母细胞的组合物，所述酵母细胞用30GHz至 300GHz范围内的电磁波处理，或生长自用30GHz至300GHz范围内的电磁波处理的酵母细胞，所述组合物用于治疗或预防神经变性疾病或病症。本发明组合物的一个优点是其允许对神经变性疾病或病症的改善的和成本有效性的治疗。在第二方面，提供用于制备根据第一方面所述的组合物的方法。所述方法包括以下步骤制备生长培养基，灭菌或巴氏灭菌所述生长培养基，在所述生长培养基中生长酵母细胞和用电磁波处理所述酵母细胞，其中所述电磁波的范围为30GHz至300GHz。本发明更多的有益特征及其实施方案在所附的权利要求书和详细描述中定义。附图简述参照附图，从下述对本发明的示例性实施方案的描述，本发明的这些和其它方面、特征和优点将是明显的，在所述附图中图IA是显示未处理的酵母细胞的生长曲线的图，图IB是显示根据一个实施方案的处理的细胞的生长曲线的图；图2公开了实验仪器的插图。图2A是侧视图，图2B是正视图；图3是显示用于测试本发明的小鼠的纹状体中DA含量的图；图4是这样的图，其分别显示不同时间的行动、站起(rearing)和总活动的均值和 SD值;图5是分别显示行动、站起和总活动的均值和SD值的图；和图6-15是显示研究的不同结果的图。详细描述由于M. B. Golant等的开创性工作，在20世纪60年代中期由俄国起源，开始了在非传统领域，如医学、生物学和生物技术中使用低强度电磁毫米波的趋势。毫米波是具有极高频率的电磁波，所以称为EHF-波。频率范围在约30GHz至约300GHz。这些波被水和其它含水介质大量吸收，对生物生物体具有多种效果。组织中EHF辐射的穿透深度仅是毫米的部分。同时，使用活生物体进行的直接实验表明EHF对活体表面的影响也影响位于远离暴露于辐射位点的组织。数个实验研究表明在细胞和模式系统中低强度毫米波对化学、生物化学和代谢过程的影响。例如，已经显示毫米波加速Na+-离子的主动运输，影响脂膜的传导性，刺激细胞中ATP的合成。EHF范围的波被认为是生物体自身调节系统用于恢复受干扰的功能和维持稳态的主要工具。在俄国，已经有多于2 000 000名患者通过EHF疗法治疗，并且已经显示其有效抵抗例如胃肠道的疾病和症状。此外，因为EHF疗法减少应激且缓解疼痛，EHF疗法可用作药物和其它类型辐射治疗的补充。EHF波被细胞膜相关的长效蛋白结构形成的谐振电路促进。这种促进的发生以获自于细胞代谢的能量为代价。细胞膜是包含蛋白的脂双层。其也是极化的，这意味着在膜的外表面和内表面之间存在电势。正常细胞功能的各种偏差总是伴随出现细胞膜中的电不对称性。声波沿膜的传播导致通过泊松因子(Poisson factor)测量的膜厚度的周期性变化。膜厚度变化的空间周期等于声波的波长。在极化电介质膜中厚度的此类变化伴随电场的变化，其与声波具有同样的时间和空间周期。细胞膜中的这些波因此被称为声-电波。活生物体在它们的膜中本身产生EHF信号。然而，在具有对称电分布和正常功能的细胞中，没有理由产生特定谐振频率。但是如果这些信号发生，它们能够通过生物体的细胞团发送，扩展外部辐射的效应。EHF辐射被生物体自身用于恢复。这种恢复通过精确的控制论系统特别地进行组织，该系统管理恢复过程和生物体稳态的维持。生物体的所有细胞、 器官和系统的信息系统参与这种系统的功能，并且生物体所有成分的恢复过程被反映所发生的干扰的特性的自身信号控制。细胞中的谐振波也来自于外部EHF辐射。因而外部EHF辐射能够被转化成谐振波，细胞自身产生的内部EHF波，用于恢复的目的。细胞自身能够在没有外部EHF刺激时完成电对称性的复原。然而，如果细胞被以任何方式压制，天然复原可能缓慢或从不发生。在这些情况下，EHF辐射能够用于加速复原。这是通过EHF辐射治疗的原因，但是在外部技术装置的帮助下不可能产生精确的信号组，人们可以诱导内部EHF信号。例如，人由多达IO13 个细胞组成，每个具有产生个体信号系统的潜能，使其再生将是不可能的。然而，如果用外部信号处理细胞，生物体的细胞、器官和功能的信息系统将这些信号转化成协调的内部EHF 声-电波，所述波对应于这些细胞本身恢复的天然机制。由于此类转化，外部EHF辐射有助于生物体恢复必需信号的形成。膜中电对称性的复原导致产生声-电波的机制终止。因此，细胞膜中出现的暂时蛋白亚结构在功能正常化之后逐渐消失。细胞中有多于上千种不同类型的蛋白分子的谐振频率波段与EHF波段重叠。此类分子的两极振荡导致EHF波，其以取自细胞代谢的能量为代价。已经显示在电分布大的膜区所述蛋白形成集成物。因而，位于膜表面的蛋白能够提供振幅振荡，产生声-电波。另外，由于所述波不能通过自由空间传播，其中振荡相互同相的集成物作为天线栅格工作，发送信号至相邻细胞。因此，EHF辐射在活生物体中触发的机制似乎基于协调 EHF振荡刺激导致的细胞间和细胞内恢复过程的同步化，S卩，EHF辐射的效应增加了多细胞系统中的阻抗。在例如人体中的血液和淋巴系统中循环的细胞能够进一步传播EHF波，因为它们不停地与邻居交换EHF振荡。已经令人吃惊地发现，包含酵母细胞的组合物有效用于治疗或预防神经变性疾病或病症，所述酵母细胞用范围在30GHz至300GHz的电磁波处理，或所述酵母细胞生长自用范围在30GHz至300GHz的电磁波处理的酵母细胞(因此称为处理的酵母细胞或处理的酵母)。所述组合物的一个优点是其允许对神经变性疾病或病症的改善的和成本有效性的治疗。电磁波可用本领域已知的任何电子或光装置递送。电磁波可具有低于lmW/cm2，如约0. lmff/cm2的功率密度。在一个实施方案中，振荡频率在约35至约65GHz的范围内。电磁波可用本领域已知的任何电子或光装置递送。电磁波可具有低于lmW/cm2，如约0. lmff/cm2的功率密度。在一个实施方案中，振荡频率选自由下列各项组成的组40GHz，41GHz，42GHz， 43GHz，44GHz，45GHz，46GHz，47GHz，48GHz，49GHz，50GHz，5IGHz，52GHz，53GHz，54GHz 或 55GHz。电磁波可用本领域已知的任何电子或光装置递送。电磁波可具有低于lmW/cm2， 如约0. lmff/cm2的功率密度。在一个实施方案中，振荡频率为42194士 10MHz，并在围绕这种频率的IOOMHz波段内线性调制。电磁波可用本领域已知的任何电子或光装置递送。电磁波可具有低于lmW/cm2，如约0. lmff/cm2的功率密度。在一个实施方案中，振荡频率为 53534士 10MHz，并在围绕这种频率的50MHz波段内线性调制。电磁波可用本领域已知的任何电子或光装置递送。电磁波可具有低于lmW/cm2，如约0. lmff/cm2的功率密度。在一个实施方案中，所述酵母细胞是酵母属(Sacharomyces)的，如选自包括卡尔 (白(Sacharomyces carlsbergesis) SIMf^^ (Sacharomyces cerevisiae)的会且。
这样的一个优点是此类酵母可以容易地低成本获得。神经变性疾病或病症通常由神经细胞或多或少选择性地进行性损失导致。随着疾病进展，神经细胞的进行性损失可能加速。根据可塑性原理，每个神经细胞在给予正确的条件下都具有自我修复的能力。此类条件可以是身体的或生活方式的因素。例如，本领域熟知体育锻炼可帮助延缓神经变性疾病或病症的进展。通常，体育锻炼已经显示在刺激神经组织中的营养因子(所谓的神经营养因子) 中具有重要作用。一种此类因子是脑源性神经营养因子(BDNF)。已经显示体育锻炼增加 BDNF的水平。根据本发明人的一个非限制性理论，假定处理的酵母细胞结合体育锻炼诱导进一步增加BDNF水平的超-刺激。然后，增加水平的BDNF作为神经组织复原和修复动员的基础。由于结合体育锻炼和酵母化合物的增加的可塑性，据假定其提供协同作用，降低神经变性病况的进展。已经显示BDNF的水平特异性影响许多神经变性病况(如帕金森病，阿尔茨海默病和ALS)的进展。2型糖尿病的神经变性效应也被BDNF的不平衡影响。 在一个实施方案中，所述神经变性疾病或病症是帕金森病。在一个实施方案中，所述神经变性疾病或病症是阿尔茨海默病。在一个实施方案中，所述神经变性疾病或病症是肌萎缩性侧索硬化(ALS)。在一个实施方案中，所述神经变性疾病或病症是2型糖尿病。在一个实施方案中，所述治疗是口服治疗，例如以麦芽饮料或以包含处理的酵母的任何类型饮料的形式。另外，处理的酵母可以任何适当的形式分发给受试者。受试者可以是任意哺乳动物，如例如人。因而EHF能量以通过EHF辐射外部刺激的处理的酵母的形式转移到受治疗的受试者中。一方面，所述组合物可通过包括下述步骤的方法获得制备生长培养基；灭菌或巴氏灭菌所述生长培养基；在所述生长培养基中生长酵母细胞；和用电磁波处理所述酵母，其中所述电磁波的范围为30GHz至300GHz。在一个实施方案中，电磁波的范围在约35至约65GHz的范围内如40GHz，41GHz， 42GHz，42. 2GHz，43GHz，44GHz，45GHz，46GHz，47GHz，48GHz，49GHz，50GHz,5IGHz,52GHz， 53GHz，54GHz或55GHz。在一个实施方案中，振荡频率为42194士 10MHz，并且在围绕这种频率的IOOMHz波段内线性调制。在一个实施方案中，振荡频率是53534士 10MHz，并且在围绕这种频率的50MHz波段内线性调制。电磁波可用本领域已知的任何电子或光装置(如基于 IMPATT 二极管振荡器的YAV-I治疗装置)递送。电磁波可具有低于lmW/cm2，如0. 004mff/ cm2和0. 2mff/cm2之间，例如约0. lmff/cm2的功率密度。EHF治疗的效果显示于
图1中。图IA是未处理细胞的生长曲线。N/N。(Y轴)是培养物中细胞数目N与起始数目 Ntl的比率，t(以小时为单位，X轴)是培养-发育时间。图IB是处理的细胞的生长曲线。 细胞产生的振荡的频率可通过细胞信息结构的相应重排同步化，其导致单个细胞分裂周期持续时间中的差别被实际上消除，产生生长曲线上的“阶梯”。从图IB中明显的是每个分裂周期之后，细胞数目同步加倍，从而细胞数目对时间的相关性表示为阶梯曲线。表1是用辐射频率42. 2GHz在不同功率密度水平(P，mff/cm2)同步所有细胞的细胞分裂所需最小时间(tymin)的概况。表 权利要求
1.包含酵母细胞的组合物，所述酵母细胞用30GHz-300GHz范围内的电磁波处理，或生长自用30GHz-300GHz范围内的电磁波处理的酵母细胞，所述组合物用于治疗或预防神经变性疾病或病症。
2.根据权利要求1的组合物，其中所述电磁波在约35GHz至约65GHz的范围内。
3.根据权利要求1或2的组合物，其中所述电磁波选自由下列各项组成的组40GHz， 4IGHz，42GHz，42. 2GHz，43GHz，44GHz，45GHz，46GHz，47GHz，48GHz，49GHz，50GHz，5IGHz， 52GHz，53GHz，54GHz 或 55GHz。
4.根据权利要求1至3中任一项的组合物，其中所述电磁波具有低于lmW/cm2的功率也/又。
5.根据权利要求4的组合物，其中所述电磁波具有0.004mff/cm2-0. 2mff/cm2的功率密度。
6.根据权利要求1至5中任一项的组合物，其中所述电磁波以平均频率的0%-约 0.5%范围内的频率调制。
7.根据权利要求1至6中任一项的组合物，其中所述处理时间为20分钟-130分钟。
8.根据权利要求1至7中任一项的组合物，其中所述酵母细胞是酵母属 (Sacharomyces)的。
9.根据权利要求8的组合物，其中所述酵母细胞选自由卡尔斯伯酵母(Sacharomyces carlsbergesis)或酉良酒酵母(Sacharomyces cerevisiae)组成的组。
10.根据权利要求1至9中任一项的组合物，其中所述神经变性疾病或病症是帕金森病。
11.根据权利要求1至9中任一项的组合物，其中所述神经变性疾病或病症是阿尔茨海默病或肌萎缩性侧索硬化(ALS)。
12.根据权利要求1至9中任一项的组合物，其中所述神经变性疾病或病症是2型糖尿病。
13.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中所述治疗是口服治疗。
14.制备根据前述权利要求中任一项的组合物的方法，所述方法包括下列步骤 制备生长培养基；灭菌或巴氏灭菌所述生长培养基； 在所述生长培养基中生长酵母细胞；和用电磁波处理所述酵母细胞，其中所述电磁波在30GHz-300GHz的范围内。
15.根据权利要求14的方法，其中所述电磁波在约35GHz至约65GHz的范围内，如 40GHz，41GHz，42GHz，42. 2GHZ，43GHz，44GHz，45GHz，46GHz，47GHz，48GHz，49GHz，50GHz， 5IGHz，52GHz，53GHz，54GHz 或 55GHz。
16.根据权利要求14或15的方法，其中所述电磁波具有低于lmW/cm2的功率密度。
17.根据权利要求16的方法，其中所述电磁波具有0.004mff/cm2-0. 2mff/cm2的功率密度。
18.根据权利要求14至17中任一项的方法，其中所述电磁波以平均频率的0%-约 0.5%范围内的频率调制。
19.根据权利要求14至18中任一项的方法，其中所述处理的时间为20分钟-130分钟。
20.根据权利要求14至19中任一项的方法，还包括在所述生长培养基中生长所述处理的酵母细胞的步骤。
21.根据权利要求14至20中任一项的方法，其中所述生长培养基是麦芽汁。
全文摘要
本发明提供了包含酵母细胞的组合物，所述酵母细胞用30GHz-300GHz范围内的电磁波处理，或生长自用30GHz-300GHz范围内的电磁波处理的酵母细胞。所述组合物可以用于治疗神经变性疾病或病症。本发明还提供了与该组合物相关的方法。
文档编号A61K36/06GK102481368SQ201080037559
公开日2012年5月30日 申请日期2010年8月26日 优先权日2009年8月26日
发明者卢德米拉·巴拉基廖娃, 塔季扬娜·布洛姆奎斯特, 安德斯·弗雷泽里克森, 彼得·埃克, 德米特里·穆德里克, 特雷沃·阿彻, 玛丽亚·西比利娃, 纳塔利娅·戈兰特, 肯特·特恩奎斯特 申请人:密美德有限公司