经修饰的被胁迫酵母的提取物及相关组合物的美容用途的制作方法

专利名称：经修饰的被胁迫酵母的提取物及相关组合物的美容用途的制作方法
经修饰的被胁迫酵母的提取物及相关组合物的美容用途
相关申请
本申请要求2009年8月31日递交的美国临时专利申请系列号61/238，427的优先权，其内容在此以其全部通过引用而并入。发明领域
本发明一般性地涉及用于向皮肤或毛发表面施用的组合物，其包含被胁迫酵母的提取物的与金属络合的肽级分，以及涉及此类组合物用于向皮肤或毛发提供特定益处的用途。
发明背景
消费者持续地寻求改善他们的皮肤和毛发的外观。所关心的包括可见的衰老迹象，以及变色或过度色素沉着，发红和/或发炎；和在皮肤表面过度产生油和脂质。因此，仍然需要提供抗衰老、抗炎、抗-脂质和/或淡化效果的产品。
皮肤和毛发色素沉着是由表皮或毛发纤维中存在的黑色素的水平决定的。表皮中存在三种不同类型的黑色素=DH1-黑色素，其颜色是黑色的；DHICA-黑色素，其是褐色的； 以及褐黑素，其颜色是微红的。黑色素是在色素细胞(黑素细胞)内称作黑素体的专门的细胞器中合成的，合成过程是以酪氨酸酶在氨基酸酪氨酸上的作用开始的。黑色素合成是由数个细胞内因素(例如酪氨酸酶的活性、小眼球诱导的转录因子(MITF)的活性、激素(例如黑素细胞-刺激激素(MSH))的信号传导、氧化胁迫以及其它因素)调控的。
发炎还促成皮肤变色和对皮肤外观的其 它有害影响。Ruiz-Maldonado et al. (1997)Semin Cutan Med Surrg. 16(I) :36-43 ;Tomita et al. (1989)Dermatologica 179 Suppl1:49_53。例如，发炎的痤疮损伤可导致瘢痕(Holland et al. SeminCutan Med Surg. 2005 Jun ；24(2) :79-83);且已显示发炎的累积退变效应加剧人类皮肤内在的(按年代的)和外在的(光)衰老。Pillai，et al. (2005) Int J Cosmet Sc1. Feb ；27(1) 17-34 ； Bissett, et al. (1990)Photodermatol. Photoimmunol. Photomed. 7 153-8 ；Thornfeldt, CR(2008) J. Cosmet. Dermatol. 7 :78_82。关键的炎性介导因子肿瘤坏死因子-a (TNFa)被认为对于急性和慢性皮肤发炎均负有责任。
胶原合成和降解也在通常的皮肤关注中起作用。胶原I (皮肤中的胶原类型)的减少与失去皮肤的紧实和弹性相关并导致与衰老相关的皱纹形成。胶原是身体的主要结构蛋白并且给予皮肤力量，持久性，以及光滑、饱满的外观。它是由位于真皮中的专门的皮肤细胞成纤维细胞产生的，产生的过程涉及由早前胶原I向前胶原1、并最终向原胶原(形成胶原纤维的形式)的转化。胶原I在皮肤中被基质金属蛋白酶(MMP)降解。Gross J, et al. Biochem Biophys Res Commun 1974 ；61 :605_12。MMP 是相关的锋依赖性蛋白酶的家族， 包括金属蛋白酶(MMP-1, MMP-8和MMP-13)和明胶酶(MMP-2和MMP 9)。
透明质酸是在皮肤的美学外观中起作用的另一个皮肤组分。透明质酸是在皮肤中发现的粘多糖(GAG)，其作为细胞外基质的一部分(ECM)。然而随着年龄，GAG合成以及总体的 GAG 皮肤含量似乎下降。Smith et al. J.1nvest. Dermatol. , 1962, 39,第 347—350页；Fleischmajer et al. Biochim. Biophys. Acta, 1972, 279,第 265-275 页；Longas et al. Carbohydr. Res.，1987，159，第127-136页。相信GAG的这种减少促成皮肤的机械特性方面与年龄相关的变化，这包括例如，组织水合、以及饱满度和抵抗自由基的保护的变化。Carrino et al. , Arch Biochem Biophys. 2000 Jan I ；373 (I) :91-101 ;Vogel et al. , Z Gerontol. 1994 May-Jun ；27 (3) 182-5 ；Lanir et al. , J Biomech Eng. 1990 Feb ； 112 (I) :63-9) ；ffiest et al. J Dtsch Dermatol Ges. 2008 Mar ；6 (3) :176-80 ；Bert et al.Biorheology. 1998 May-Jun ；35 (3) :211_9。
皮肤中去角质酶的活性也在其美学上年轻的外观方面起作用。在角质层(皮肤的最外层)中，细胞与细胞的凝聚主要取决于已知为角化粒(corneodesmosome)的蛋白。在皮肤重构和更新的过程中，通过分解角化粒的天然蛋白酶的作用而使死细胞从皮肤表面脱落，因而帮助去角质。人类组织激肽释放酶(KLKs)是存在于角质层中的蛋白酶家族并且已知其直接参与角化粒更新。Kishibe Metal. J. Biol. Chem. 2006 ；282 :5834-5841。
过度产生脂质也影响皮肤以及毛发的外观。例如，过度 分泌皮脂与油性的皮肤、毛发和痤疮有关；皮下脂肪的过度累积可产生橘皮组织。橘皮组织是团块状的、不均匀类型的脂肪，其主要在臀部和大腿上累积并引起“橘皮”或“松软干酪”的样子。脂质代谢一部分是由过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)控制的，所述PPAR形成一组核转录因子。特别地， PPAR-gamma(PPAR- Y )被认为在有利于脂肪细胞的分化以及通过脂肪细胞进行能量储存的前馈通路中是关键的。
在不希望的皮肤或毛发的形成中起作用的许多生理学过程在真核微生物(例如酵母)中有相应物，并且酵母提取物已被用于美容应用中。例如，在对于热、UV辐射或其它胁迫的响应中，已知酵母产生促进细胞增殖或存活的因子。见例如美国专利号2，239，345。 含有此类因子的被胁迫的酵母裂解物已经被描述并被显示用于针对抵消某些胁迫对皮肤的作用的美容应用中。例如，经UV-胁迫的酵母裂解物已被用于美容应用中。见例如，美国专利号5，643，587 ;5，676，956和5，776，441。最近，经臭氧-胁迫的酵母裂解物被描述可用于保护皮肤细胞免受臭氧的有害影响。见例如Scholz等人的美国专利号6，461，857和 6，858，212 ；以及美国专利申请公开号2003/0198682和2006/0110815。然而，这些较早的例子没有认识到某些美容用途并且没有鉴别出细胞裂解物中的活性成分。
因此，仍然需要更好地确定的美容组合物，其有效地提供其它的皮肤益处，包括去角质、抗衰老、抗脂质、抗发炎和/或皮肤(或毛发)淡化效果。因此，本发明的目标在于提供组合物和方法，其用于减少黑色素合成、TNFa产生、PPAR信号传导、和/或金属蛋白酶活性；和/或用于增加胶原合成，透明质酸产生和/或KLKs活性。本发明的目标还在于通过使用所述组合物来改善皮肤和毛发的总体外观，以及根据需要淡化皮肤和毛发。
进行前面的讨论仅仅是为了提供对于本领域面临的问题的性质的更好的理解，而不应以任何方式被解释为承认现有技术，本文中引用的任何参考文献也不应被解释为承认所述参考文献构成本申请的“现有技术”。
发明概述
根据前述目标及其它目标，令人惊讶地发现了源自被胁迫的酵母并与金属离子络合的特定肽级分能够减少黑色素合成，TNFa产生，PPARs信号传导和/或胶原降解，和/或增加胶原合成，透明质酸产生，和/或KLK活性；并因此是对于改善皮肤和毛发的外观有益的试剂。还令人惊讶地发现了通过抑制向色素细胞内的钙流入而减少了黑色素合成，这为降低过度色素沉着提供了新的方法。
本发明的一个方面涉及用于化妆品组合物的经修饰的酵母肽级分。特别地，提供了包含经修饰的酵母肽级分的组合物，所述经修饰的酵母肽级分包含与金属离子(优选二价金属离子，例如锌离子)相络合的含有SEQ ID N0:1的肽。此类组合物用作抗脂质、抗炎、和/或皮肤淡化剂，以及用于增强去角质和/或处理和/或预防可见的皮肤衰老迹象。 在一些实施方案中，所述经修饰的肽级分的存在量足以减少下述的至少一项黑色素合成、 TNFa产生和/或PPARs信号传导。在一些针对衰老迹象的实施方案中，所述经修饰的肽级分的存在量足以降低金属蛋白酶活性；增加胶原合成；增加透明质酸产生，和/或增加KLK活性。
本发明的另一方面涉及组合物用于向人类皮肤提供至少一种益处的美容用途，所述组合物包含含有与金属相络合的包含SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分。此类益处包括
(a)处理和/或预防细纹或皱纹；
(b)减少毛孔大小；
(C)改善皮肤厚度，饱满度，和/或紧固度；
(d)改善皮肤柔韧度和/或柔软性；
(e)改善皮肤色调，光彩，和/或清澈性；
(f)改善皮肤质地和/或促进重新组织化(retexturization)；
(g)改善皮肤屏障修复和/或功能；
(h)改善皮肤轮廓的外观；
⑴恢复皮肤光泽和/或明亮度；
(j)补充皮肤中关键的营养物和/或组分；
(k)改善由更年期减退的皮肤外观；
⑴改善皮肤湿润和/或水合；
(m)增加和/或防止丧失皮肤弹性和/或弹力；
(η)改善前胶原和/或胶原合成；
(O)处理和/或预防皮肤松垂或萎缩；
(P)增强去角质和/或减少干燥；
(q)处理和/或预防皮肤过度色素沉着；
(r)处理 和/或预防发炎，例如发红、肿胀和/或浮肿；
(S)处理和/或预防过度的皮脂排出；以及
(t)处理和/或预防橘皮组织。
所述组合物可被施用于需要处理的皮肤，例如将受益于所述组合物的去角质、抗衰老、抗脂质、抗炎和/或皮肤(或毛发)淡化效果的皮肤。在一些实施方案中，在化妆品上可接受的载体中提供有效量的经修饰的酵母肽级分并将其表面施用至皮肤区域足够的时间以产生所希望的效果。优选的表面制剂包括水剂、霜剂、软膏、精华、凝胶或棒。在某些实施方案中，经修饰的酵母肽级分被用于淡化毛发。
本发明的另一个方面涉及钙流入抑制剂用于处理过度色素沉着的用途。钙流入抑制剂可通过阻碍钙进入到产生色素的细胞中而减少黑色素合成。优选的钙流入抑制剂包括包含含有与锌相络合的SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分；以及化合物2-氨乙基-二苯基硼酸盐。在一些实施方案中，在化妆品上可接受的载体中提供有效量的钙流入抑制剂并将其表面施用于过度色素沉着的皮肤区域，以淡化受影响的区域。在一些实施方案中，将所述抑制剂与至少一种其它的皮肤淡化剂相组合。在一些实施方案中，钙抑制剂用于淡化毛发。
通过参考下列对本发明的详细描述将更好地理解本发明的这些和其它方面。
发明详述
令人惊讶地发现了包含含有与金属相络合的SEQ ID NO 1的肽的经修饰的酵母肽级分能够通过抑制钙流入色素细胞中而减少黑色素合成。还令人惊讶地发现了经修饰的酵母肽级分能够减少TNFa产生、减少PPARs信号传导、降低金属蛋白酶活性、增加胶原合成、 增加透明质酸产生，和/或增加KLKs活性。
鉴于这些和其它的发现，料想包含含有与金属相络合的包含SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分的表面组合物可用于淡化皮肤(或毛发)、减少发炎、增强去角质和/ 或控制脂质过度产生，以及可用于对抗皮肤损伤和皮肤衰老的迹象，包括减少细纹和皱纹、 保持皮肤紧实度和饱满度、改善皮肤水合和弹力、恢复皮肤光泽和明亮度、以及抵抗其它相关的皮肤衰老迹象。还料想到其它抑制钙流入色素细胞中的化合物可用于淡化皮肤和/或毛发。
经修饰的酵母肽级分及其与金属相络合的肽
本发明的一个方面涉及被胁迫酵母的提取物的经修饰的肽级分。所述级分包含具有SEQ ID NO :1中所示的序列的肽，其中所述肽与金属离子相络合。“与金属离子相络合” 及相关的术语例如“金属络合物”、“与金属相络合的”、“与金属相络合的衍生物”、“含有金属离子的络合物”等，在本申请中指与周围的金属离子相连的中央肽的配位化合物。所述金属离子可以是任何能够与肽的一个或多个带负电的氨基酸残基形成络合物的金属阳离子， 这包括但不限于碱金属的离子、碱土金属的离子、过渡金属的离子、后过渡金属的离子、镧系元素的离子、锕系元素的离子、准金属的离子等，或其任意组合。通常，金属离子将是M+n 的形式，其中M为任何金属或准金属，而η是I至4 (通常为I或2)的整数。
如本申请中所使用的，“肽”指包括通过肽键连接在一起的两个或更多个氨基酸的任何组合物。肽的长度可以是约2至约200个氨基酸或更长，并通常相应于全长蛋白的片段，其中所述片段不包括天然全长蛋白的所有氨基酸。在一些实施方案中，所述肽的长度可以是至少约3个、至少约4个、至少约5个、至少约6个、至少约8个、至少约10个、至少约 15个、或至少约20个氨基酸。在一些实施方案中，所述肽的长度可以是不超过约200个、不超过约100个、不超过约50个、不超过约30个、或不超过约20个氨基酸。例如，在一些优选的实施方案中，所述肽包括少于约20个氨基酸、少于约15个氨基酸、少于约10个氨基酸或约6个氨基 酸，包括序列Phe-Val-Ala-Pro-Phe-Pro。
在一些实施方案中，序列Phe-Val-Ala-Pro-Phe-Pro中6个氨基酸的一个或多个可被保守取代。氨基酸的合适的保守取代是本领域技术人员已知的并且通常可不改变所产生的分子的生物学活性而制备。氨基酸取代通常是单个残基的，但是可以是多个残基(成簇的或沿着六聚体序列散布的)。氨基酸可被不同的天然产生的或非常规的氨基酸残基所替代。这样的取代可被归类为“保守的”，其中肽中所包含的氨基酸残基被关于极性、侧链官能和/或大小有相似特征的另一个氨基酸所替代。实例包括用Met、Leu或Tyr取代Phe ； 用Ile或Leu取代Val ;或者用Gly或Ser取代Ala。
还将被理解的是，所述肽可含有除通常被称为20个天然产生的氨基酸的20个氨基酸之外的氨基酸，给定的肽中的许多氨基酸(包括末端氨基酸)可以是经修饰的，所述修饰是通过天然的过程(例如糖基化及其它翻译后修饰)，或通过化学修饰技术，例如本领域中所熟知的那些。本发明的肽中可存在的已知修饰包括但不限于乙酰化作用、酰化作用、 ADP-核糖基化、酰胺化、支化、交联、环化、二硫键形成、脱甲基化、糖基化、羟基化、碘化、甲基化、氧化、磷酸化、异戊二烯化、外消旋化、硒化、硫酸化和遍在蛋白化。
在一些实施方案中，所述肽基本上由相应于SEQ ID NO :1的氨基酸序列组成。“基本上由..·组成”是指所述肽排除将实质上影响所述肽的下列能力的额外的序列和其它组成成分有效减少黑色素合成、TNFa产生、PPARs信号传导、和/或胶原降解；和/或增加胶原合成、透明质酸产生、和/或KLK活性。影响所述功能的能力可由本领域技术人员如下确定使用例如测定(如本申请中所描述的体外测定(见下文中的实施例1-7和13))或本领域已知用于测试黑色素合成、TNFa产生、PPARs表达或信号传导、胶原合成、胶原降解、透明质酸产生和/或KLK活性的其它测定。
本发明的经修饰的酵母肽级分可从某些酵母(例如酿酒酵母(Saccharomyces cerevesiae))直接获得。例如，酵母肽级分可从被胁迫酵母的提取物获得，其是通过在营养培养基上培养酵母(例如使用本领域技术人员已知的标准发酵过程)、使酵母经受胁迫、然后裂解细胞而制备的。使生长的细胞经受一种或多种胁迫，通常以亚致死的剂量。胁迫包括例如热、UV辐射、X-射线、过氧化氢、臭氧、污染物、化学损伤或其他不利条件。“被胁迫的酵母”是经历了暴露于一种或多种此类胁迫的酵母。“被胁迫酵母的提取物”是从酵母获得的裂解物，所述酵母在于某个时刻暴露于一种或多种胁迫的营养培养基上生长、且随后被杀死以提供包含酵母组分的组合物。“酵母提取物”是指从酵母获得的裂解物，所述酵母生长在营养培养基上并随后被杀死以提供包含酵母组分的组合物，所述酵母组分包括但不限于细胞的蛋白物质、细胞的核物质、细胞质物质、细胞原生质物质、细胞壁组分和/或营养培养液。术语“酵母”可包括单个的酵母细胞、多个酵母细胞和/或酵母细胞的培养物。
所使用的酵母可以是本领域技术人员已知的各种属的，其中确定的是包含SEQ ID N01的肽可由其获得。不愿被理论所限，所表示的是酵母通过产生细胞组分(包括蛋白) 而响应于胁迫(例如UV辐射)，如本申请中所教导的，所述细胞组分能够抵抗胁迫的有害影响且令人惊讶地发现其还为人类皮肤细胞提供不同的和额外的益处。此类蛋白的表达可响应于胁迫而被诱导或上调。被诱导或上调的蛋白包括被称为酵母“热激蛋白”(hsp)的蛋白，也被称为 “胁迫响应蛋白”。见例如美国专利号2，239，345。已知热激蛋白改善面对不利条件时的细胞增殖和/或细胞存活，例如，通过替换由胁迫而丧失的细胞功能，或通过作为分子伴侣来保护天然的结构，例如通过修饰蛋白折叠。
例如，响应于胁迫(例如UV暴露)而被诱导或上调的酵母蛋白可如下确定通过将被胁迫酵母的提取物中存在的蛋白与未经受相同胁迫的酵母提取物中存在的那些进行比较，使用例如比较二维聚丙烯酰胺凝胶电泳。见例如美国专利申请公开2006/0110815。 另一种方法涉及进行酵母基因微阵列以鉴别响应于胁迫而改变表达的酵母基因，例如以确定哪些基因响应于胁迫而被诱导、上调、关闭或下调。这种比较可表明响应于胁迫而被诱导或上调的若干酵母热激蛋白，可对所鉴别的蛋白进行分析以确定它们是否含有SEQ ID N0:1。可被分析的不同酵母包括但不限于节束酵母属(Arthroascus),短梗霉属 (Aureobasidium), Botryoascus,酒香酵母属(Brettanomyces),假丝酵母属(Candida),固囊酵母属(Citeromyces),棒孢酵母属(Clavispora),隐球酵母菌属(Cryptococcus),德巴利酵母属(Debaryomyces),德克酵母属(Dekkera),线黑粉酵母属(Filobasidium),季氏酵母属(Guilliermondella),汉逊酵母属(Hansenula), Haneseniaspora, Hormoascus, Klockera,克鲁维酵母属(Kluyveromyces),白冬抱酵母属(Leucosporidium),油脂酵母属(Lipomyces),马拉色菌(Malassezia)，梅奇酵母属(Metschnikowia),拿逊酵母属(Nadsonia),榛针孢酵母属(Nematospora),卵孢酵母属(Oosporidium),菅囊酵母属(Pachysolen),抱突酵母属(Pachytichospora),青霉属(Penicillium),毕赤酵母属(Pichia),普通变形杆菌(Prototheca),红冬孢酵母属(Rhodosporidium),红酵母属 (Rhodotorula),酵母属(Saccharomyces),类酵母属(Saccharomycodes),复膜抱酵母属 (Saccharomycopsis)，裂殖酵母属(Schizosaccharomyce)，许旺酵母属(Schwanniomyces), 掷抱酵母属(Sporobolomyces),原抱酵母属(Sporopachydermia),银耳属(Tremella)， Trichosporan,三角酵母属(Trigonopsis),有抱圆酵母属(Torulaspora),球拟酵母属(Torulopsis),拟威尔酵母属(Willlopsis),亚罗酵母属(Yarrowia),接合酵母属 (Zygosaccharomyces)等,可使用任何被发现产生包含SEQ ID NO :1的蛋白或肽的那些，以及它们的组合。在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的跨膜蛋白中也发现了 SEQ ID NO :1，其也可以存在于一种或多种其它物种的跨膜蛋白中，例如上文所列的一种或多种其它酵母物种。
在一些实施方案中，所使用的酵母来自酵母属(Saccharomyces)。在某些优选的实施方案中，所述酵母为酿酒酵母，也已知为面包酵母。另外，在一些实施方案中可排除某些类型的酵母。例如，在一些实施方案中，所使用的酵母不是葡萄酒酵母(例如如法国专利号FR 2904552和日本专利号JP 2003252743中所描述的)和/或不是近平滑假丝酵母 (Candida parapsilosis)(例如如韩国专利号KR 2005095167中所描述的)。
所选择的一种或多种酵母物种可在受控的温度下生长在营养培养基上，所述营养培养基也称为营养物培养基或生长培养基。通常所述培养基含有氨基酸、蛋白胨、低分子量肽片段和其它常见的生长培养基成分。优选的生长培养基是“酵母发酵培养基”，在 Handb·ook of Microbiological Media(由 CRC Press 出版)中对其进行了描述。培养酵母的方法是本领域技术人员已知的。例如，可在露天的发酵容器中培养酵母，或者通过使用密封的生物学发酵罐，例如可从New Brunswick Scientific, Edison, N. J获得。在某些时刻，使生长中的细胞经受一种或多种胁迫(通常是以亚致死的剂量)。胁迫包括例如热、UV 辐射、X-射线、过氧化氢、臭氧、污染物、化学损伤或其它不利条件。通常，以在酵母中引起响应的量使用胁迫(例如以诱导热激蛋白的产生)，但其对于酵母是亚致死的。亚致死是指至少约I %的酵母在暴露于所述胁迫后幸存。在一些实施方案中，至少约I %、至少约10%、 至少约25%、至少约50%或至少约80%的酵母在处理后幸存。
在一些优选的实施方案中，用UV光(更优选地在286nm处)胁迫存活的酵母细胞。 如上文所讨论的,细胞通过产生各种保护性物质而响应。可例如通过利用UV分光光度计测定256至258nm处的吸收而监控细胞的生物化学变化。UV暴露的程度可影响产生哪些蛋白 (包括热激蛋白)，以及它们的量。酵母可暴露于UV数分钟至数天，这取决于酵母的类型、 所使用的波长、通气速度、温度等。通常，暴露于UV光持续至多数天，直到完成了复杂的生物化学保护机制。
在一些实施方案中，酵母暴露于UV辐射波长的时间段允许最大量、接近最大量或可观部分的酵母产生在向人类皮肤或毛发提供益处(例如改善皮肤或毛发的外观)方面有效的细胞组分。在某些优选的实施方案中，酵母暴露于UV辐射波长的时间段允许最大量、 接近最大量、或可观部分的酵母产生有效抵抗不希望的皮肤状况的细胞组分，所述不希望的皮肤状况包括过度色素沉着、发炎、脂质过度产生和/或可见的衰老迹象。例如，酵母可暴露于UV辐射波长的时间段允许最大量、接近最大量、或可观部分的酵母产生细胞组分， 所述细胞组分能够减少下列的一种或多种黑色素合成、TNFa产生、PPAR信号传导和金属蛋白酶活性；和/或能够增加胶原合成、透明质酸产生和/或KLK活性。在某些优选的实施方案中，酵母暴露于UV辐射波长的时间段允许最大量、接近最大量或可观部分的酵母产生至少一种热激蛋白，更优选地，所述热激蛋白包括至少一个肽部分，所述肽部分能够减少下列的一种或多种黑色素合成、TNFa产生、PPAR信号传导和金属蛋白酶活性；和/或能够增加下列的一种或多种胶原合成、透明质酸产生、和KLK活性。在某些特别优选的实施方案中，酵母暴露于UV辐射波长的时间段允许最大量、接近最大量或可观部分的酵母产生包括包含 SEQ ID NO I (Phe-Val-Ala-Pro-Phe-Pro)的肽的热激蛋白。
然后，可裂解被胁迫的酵母以获得被胁迫酵母的提取物，例如，可通过用适当的蛋白水解酶分解细胞壁而使发酵停止。可通过本领域技术人员已知的各种方法来裂解酵母， 所述方法包括但不限于酶、高速搅拌、自体溶解、生长培养基的变化和/或PH的变化。被胁迫酵母的提取物通常含有可溶于水和不溶于水的组分。不溶于水的组分可被分离和移除以提供包含可溶于水的组分的被胁迫酵母的提取物。例如，可用离心机分离不可溶的细胞壁材料并收获细胞原生质。在一些实施方案中，酵母提取物是可溶于水的，或基本上可溶于水的。“可溶于水”通常是指O.1克的酵母组分溶解于I克的水中。
可通过本领域技术人员已知的任意数目的手段根据需要进一步纯化被胁迫酵母的提取物，所述手段包括但不限于色谱法、蒸汽蒸馏、溶剂提取、离心、倾析、过滤和/或碳处理。
在某些优选的实施方案中，使用离心、过滤和/或色谱系统对提取物进行分级以分离主要的肽级分。可纯化被胁迫酵母的提取物以富集小分子量的肽(在1000至3000Da 的范围内)，其中包含六聚肽Phe-Val-Ala-Pro-Phe-Pro的肽是主要的级分。可将所述肽与被胁迫酵母的提取物的其它组分基本上分离，并且所述肽优选包括的少于其所源自的全长蛋白。
在一些实施方案中，六聚肽本身是合成的，例如使用自动化的化学合成或重组手段，并且被重新加至酵母肽级分中，例如以人工地增加酵母肽级分中六聚肽的浓度。例如，可使用标准的化学肽合成而将相对短的分子合成为单一连续的肽。可使用固相合成， 其中序列的C-末端氨基酸连接至不可溶的支持物，随后顺次添加序列中剩余的氨基酸。 已描述了用于固相合成的技术，例如由Barany和Merrifield在Solid-Phase Peptide Synthesis ；pp. 3284；在 The Peptides Analysis, Synthesis, Biology. Vol. 2 SpecialMethods in Peptide Synthesis,部分A 中et al. (1963) J. Am. Chem. Soc., 85:2149 2156 中；以及在 Stewart et al. (1984) Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd ed. Pierce Chem. Co. , Rockford, 111 中。
也可使用重组表达系统来合成六聚肽。通常，这涉及产生编码所需肽的DNA序列、 将所述DNA置于在特定启动子控制之下的表达盒中、在宿主中表达所述肽、分离所表达的肽，以及如果需要的话，使所述肽复性。见例如美国专利号7，030，231。可通过任何合适的方法制备编码包含SEQ ID NO 1的肽的DNA，所述方法包括例如，克隆和限制适当的序列或通过例如下列方法直接化学合成Narang et al. (1979)Meth. Enzymol. 68 :90 99的憐酸三酯法；Brown et al. (1979)Meth. Enzymol. 68 109 151 的憐酸二酯法；Beaucage et al. (1981)Tetra. Lett. ,22 :1859 1862的二乙基亚磷酰胺法；和美国专利号4，458，066的固体支持物法。化学合成可产生单链的寡核苷酸，其可通过与互补序列杂交或通过使用单链作为模板以DNA聚合酶聚合而被转换为双链DNA。
备选地，序列可被克隆并使用适当的限制性酶切割适当的亚序列。然后，可将编码六聚肽的核酸序列连接到具有合适的相应限制性位点的载体中。可通过定点突变将适当的限制性位点加至编码肽的核酸上。所述序列可在各种宿主细胞中表达，所述宿主细胞包括酵母、E. coli，其它细菌宿主，和各种更高级的真核细胞，例如COS，CHO和HeLa细胞系，以及骨髓瘤细胞系。重组序列将被任选地连接至对于各个宿主适当的表达控制序列。本领域技术人员将认可，可对肽进行修饰而不减少其生物学活性。可进行一些修饰以促进分子的克隆或表达。此类修饰是本领域技术人员熟知的且包括例如，加至氨基末端的甲硫氨酸以提供起始位点，或置于任一末端的其它氨基酸(例如聚组氨酸)以产生方便地放置的限制性位点或终止密码子或纯化序列。
可通过熟知的方法将表达载体转移到所选择的宿主细胞中，例如对于大肠杆菌的氯化钙转化和用于哺乳动物细胞的磷酸钙处理或电穿孔。可通过对抗生素的抗性来选择经质粒转化的细胞，所述抗性是由表达载体上所含有的基因赋予的，例如amp, gpt, neo和 hyg基因。一旦表达，可根据本领域的标准程序纯化重组的肽，所述方法包括硫酸铵沉淀、 亲和柱、柱色谱法、凝胶电泳等。参见，一般性地R. Scopes, (1982)Protein Purification, Springer-Verlag, N. Y. ；Deutscher(199 0)Methods in Enzymology Vol. 182 Guide to ProteinPurification. , Academic Press, Inc. N. Y.。可纯化和 / 或浓缩所述妝以给出适于美容应用的形式。如本领域技术人员所知，可测试肽组合物以确定其对于美容用途的适用性，如上文中所讨论的。然后可将所合成的包含SEQ ID NO :1的肽加至经分离的酵母肽级分，如上文中所描述的。所述六聚肽以及包含所述肽作为主要级分的酵母肽级分也是商业上可得的,例如Peptamide 6(INCI名称六肽11)，其可从Arch Personal Care Products, L. P. , South Plainfield, NJ (www. archpersonal care, com)获得。
然后，可通过与一种或多种金属离子相络合而修饰酵母肽级分以给出经修饰的酵母肽级分。如本申请中所使用的，“经修饰的酵母肽级分”以及相关的术语，例如“经修饰的肽级分”在本申请中用于指含有一种或多种与金属相络合的肽(其为至少一种与金属离子相络合的肽)的酵母提取物肽级分。例如，可用含水金属盐溶液清洗所述酵母肽级分以在金属离子与所述级分中的一种或多种肽之间形成络合物。所述金属盐可包含但不限于，碱金属的盐、碱土金属的盐、过渡金属的盐、后过渡金属的盐、镧系元素的盐、锕系元素的盐、准金属的盐等，或其任意组合。在某些优选的实施方案中，所述金属盐为二价金属盐，例如下列的盐丐(Ca2+)、铜(Cu2+)、镁(Mg2+)、锰(Mn2+), M (Be2+)、锌(Zn2+)等；并且所述盐可包括硫酸盐、溴化物、氯化物、磷酸盐、醋酸盐等。一些特别优选的实施方案使用锌盐，例如溴化锌、氯化锌、磷酸锌、醋酸锌、硫酸锌等。例如，可用含水硫酸锌溶液(甚至更优选地饱和的含水硫酸锌溶液)清洗所述酵母肽级分，以与所述肽形成锌络合物，这包括与包含SEQ ID NO 1的肽形成的锌络合物。
在反应进程完成后，可通过离子交换柱色谱去除剩余的阴离子和游离金属离子 (如果有的话)。即，可使所形成的金属络合物流过离子交换柱以去除例如过量的未络合的离子。这可提供不含、基本上不含或甚至完全不含金属盐和游离金属离子的，与金属相络合的肽。所产生的组合物是酵母提取物的经修饰的肽级分，所述修饰是与所添加的金属的络合。包含SEQ ID NO :1的、与金属相络合的肽可构成约O. 001重量％至约5重量％，优选约 O. 01重量％至约3重量％，更优选约O.1重量％至约2重量％，或约O.1重量％，基于酵母提取物的这种经修饰的肽级分的总重量。经修饰的酵母肽级分的其它余下的组分可包括， 例如其它低分子量的肽、寡肽、糖和寡糖。基于本申请中的教导，从合适的酵母肽级分产生含有与金属相络合的包含SEQ ID NO:1的肽的经修饰的酵母肽级分的其它方法对于本领域技术人员而言将是显然的。
本发明的化妆品组合物一般包含一定量的经修饰的酵母肽级分，其包含与金属相络合的含有SEQ ID NO:1的肽，所述量有效向人类皮肤提供益处。在优选的实施方案中，所述组合物包含一定量的经修饰的肽级分，和/或一定量的与金属相络合的含有SEQ ID NO I的肽，所述量有效减少黑色素合成、TNFa产生、PPAR信号传导和/或金属蛋白酶活性；和 /或有效增加胶原合成、透明质酸产生和/或KLK活性。在某些优选的实施方案中，所述化妆品组合物包含的与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的量为约O. 001重量％至约5重量％，基于组合物的总重量；优选为约O. 01重量％至约3重量％，基于组合物的总重量；且更优选为约O.1重量％至约2重量％，或约I重量％，基于组合物的总重量。上述量是指经修饰的酵母肽级分的“有活性的量”，例如与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的量。术语“有活性的量”是指不存在稀释剂、溶剂、载体、填充剂等时，经修饰的肽级分和/或与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的量。本文中所描述的化妆品组合物可用作去角质剂， 抗衰老剂，抗脂质剂，抗炎剂，和/或皮肤(或毛发)淡化剂，例如，如下文所详述的。
经修饰的酵母肽级分和相关组合物的美容用途
本发明的另一方面涉及含有经修饰的酵母肽级分和/或其它钙流入抑制剂的组合物的美容用途，所述经修饰的酵母肽级分包含与金属相络合的含有SEQ ID N0:1的肽。 所述化妆品组合物令人惊讶地起作用以增加下列的一项或多项KLK活性、透明质酸产生和胶原合成；和/或减少下列的一项或多项金属胶原酶活性、PPAR信号传导、TNFa产生、 和黑色素合成，并相应地可用于去角质、抗衰老、抗脂质、抗炎和/或皮肤(或毛发)淡化产品中。
在一些实施方案中，提供了为人类皮肤提供至少一种益处的方法，其中所述方法包括向有需要的皮肤表面施用化妆品上可接受的载体中的、至少一种本申请中所描述的组合物。所述组合物将包含有效量的经修饰的酵母肽级分；与金属相络合的含有SEQ ID NO:1的肽 ；和/或其它钙流入抑制剂。向皮肤提供特定益处的“有效的量”或“有效量”是指当施用了足够的时间时，足以在皮肤的特定表现方面提供临床上可测量的改善的经修饰的级分、与金属相络合的肽或钙流入抑制剂的有活性的量。此类益处包括但不限于下列
(a)处理和/或预防细纹或皱纹；
(b)减少毛孔大小；
(c)改善皮肤厚度，饱满度，和/或紧固度；
(d)改善皮肤柔韧度和/或柔软性；
(e)改善皮肤色调，光彩，和/或清澈性；
(f)改善皮肤质地和/或促进重新组织化(retexturization)；
(g)改善皮肤屏障修复和/或功能；
(h)改善皮肤轮廓的外观；
⑴恢复皮肤光泽和/或明亮度；
(j)补充皮肤中关键的营养物和/或组分；
(k)改善由更年期减退的皮肤外观；
(I)改善皮肤湿润和/或水合；
(m)增加和/或防止丧失皮肤弹性和/或弹力；
(η)改善前胶原和/或胶原合成；
(O)处理和/或预防皮肤松垂或萎缩；
(P)增强去角质和/或减少干燥；
(q)处理和/或预防皮肤过度色素沉着；
(r)处理和/或预防发炎；
(s)处理和/或预防过度的皮脂排出；以及
⑴处理和/或预防橘皮组织。
本发明的组合物可被施用于需要处理的皮肤，例如遭受缺乏或丧失任意前述特质或状况的皮肤，或者将受益于所述组合物的去角质，抗衰老，抗脂质，抗炎和/或皮肤淡化效果的皮肤，例如如本申请中所描述的。例如，可在化妆品上可接受的载体中提供所述经修饰的肽级分和/或其它钙流入抑制剂，所述经修饰的肽级分包含与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽；将其表面施用于所希望的皮肤区域，并允许其以一定的量保持在所述区域上，所述量有效处理和/或预防不希望的皮肤特征或状况，和/或有效改善皮肤的美学外观。例如，可在数分钟内实现去角质益处，而其它的益处可要求在皮肤上更长的时间段。
“皮肤的状况”或“ 皮肤状况”在本文中与“皮肤病况”可互换地使用。如本申请中所使用的，“处理(treatment) ”以及相关的术语例如“处理(treat) ”或“处理(treating)” 是指清除、减少、缓解或逆转与被处理的皮肤状况相关的一个或多个不希望的特征，从而消费者察觉到关于所述状况的改善或其它处理益处。如本申请中所使用的，“预防 (prevention) ”以及相关的术语例如“预防(prevent) ”或“预防(preventing) ”是指给予尚未被所述状况影响的皮肤益处，其用于避免、延迟、防止或最小化与待预防的皮肤状况相关的一个或多个不希望的特征。此类预防性益处包括，例如延迟所述状况的产生，或者缩短与所述状况相关的一个或多个不希望的特征的持续时间、降低其严重性或强度(如果所述状况最终产生)。
过度色素沉着
在某些优选的实施方案中，本文中描述的化妆品组合物可被用于处理和/或预防皮肤和/或毛发的过度色素沉着，例如用于淡化皮肤或毛发。在一些特别优选的实施方案中，将包含有效量的经修饰的酵母肽级分肽的组合物表面施用至皮肤或毛发(例如过度色素沉着的皮肤或毛发区域)，其中所述经修饰的酵母肽级分肽包含与金属相络合的含有SEQ ID N0:1的肽。如本申请中所使用的且除非另外特别指明，“过度色素沉着”是指“黑素细胞-介导的过度色素沉着”，这表示着色完全、大部分、或至少基本上是由黑素细胞、合成黑色素的色素生产细胞的作用引起的。
过度色素沉着包括个体皮肤或毛发的任何着色，其比所述个体所希望的更深并且是由黑素细胞引起的。此类不希望的色素沉着也可被称为变色。过度色素沉着的皮肤区域包括离散的或斑驳的过度色素沉着区域。离散的过度色素沉着区域可以是颜色更深的显著、均匀区域并且可表现为皮肤上的棕色斑点或雀斑，这包括通常被称为色素斑点或“老年斑”的标记。斑驳的过度色素沉着的皮肤区域可以是暗的斑块，其在大小和形状方面比离散的色素沉着区域更大和更不规则。过度色素沉着的区域还包括晒黑的皮肤区域，例如由于 UV暴露而晒黑的皮肤。过度色素沉着的毛发包括比所希望的更深的任何毛发色度。
皮肤过度色素沉着可由任何数目的因素引起，这包括例如，遗传、UV或日光照射、 年龄、瘢痕或由于皮肤损伤引起的变色，所述损伤包括裂伤、烧伤、晒伤、痤疮，或其它皮肤病学状况等。例如，皮肤过度色素沉着的区域包括黑斑片。黑斑是涉及面部皮肤变色的常见皮肤病况，其在怀孕的妇女中特别普遍，被称为面部黄褐斑或黄褐斑。黑斑(或黄褐斑) 斑片可表现为脸上深棕色、不规则的斑片，特别是在上颊、鼻子、唇、上唇和前额上。所述斑片通常随时间逐渐产生且一般不痒或疼痛，但是可负面地影响个体的外观。皮肤过度色素沉着也指腋下的区域，例如与所希望的相比，已变得更暗或正在变得更暗的区域。
皮肤过度色素沉着可包括或不包括个体眼睛下面的区域，其比个体所需的更暗， 通常称为“眼下黑圈”或“黑眼圈”。黑眼圈通常是每只眼睛下方的圆形、均匀色素沉着区域， 其可由遗传、过敏、疲劳或其它原因引起。在一些实施方案中，处理过度色素沉着不包括处理眼睛下方面部皮肤的变色和/或袋状化。值得注意的是，眼睛下方过度色素沉着不是简单的黑素细胞-介导的色素沉着问题。见例如美国专利号5，643，587。病源包括循环机能不良，例如增加的血管渗透性引起皮肤表面之下的渗漏，发炎，和暴露于环境，并且所述问题一般对于已知的降低色素沉着的化合物或皮肤增白化合物响应不佳。的确，在那种情形下，用于减少眼睛下方变色的表面组合物包括高百分比的抗坏血酸磷酸盐，其本身是已知的皮肤淡化剂并因此可能促成了眼睛下方皮肤的淡化。下文的实施例14进一步证实了美国专利号5，643，587中所描述的被胁迫酵母的提取物在不存在抗坏血酸磷酸盐和不存在本发明的与金属相络合的肽时不起减少眼睛下方过度色素沉着的作用。
处理过度色素沉着或过度色素沉着的皮肤/毛发是指清除、减少、缓解或逆转与过度色素沉着相关的一个或多个不希望的特征，例如在受影响的区域中产生皮肤或毛发的可察觉的淡化。淡化过度色素沉着的皮肤区域可以是所希望的，特别是在下列方面减少老年斑 ，淡化晒黑，均匀或优化皮肤色调(例如在斑驳的过度色素沉着区域中)，处理黑斑和黄褐斑，雀斑，烧伤后的疤痕和损伤后的过度色素沉着。预防过度色素沉着或过度色素沉着的皮肤是指给予尚未被过度色素沉着影响的皮肤益处，其用于避免、延迟、防止或最小化与皮肤过度色素沉着相关的一个或多个不希望的特征，例如降低最终产生的过度色素沉着区域的暗度或大小。能够处理和/或预防过度色素沉着的皮肤的、包含与金属相络合的含有 SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分可被称作“皮肤淡化剂”。当用于淡化毛发时，它们可被称作“毛发淡化剂”。“淡化”和相关的术语是指使得不希望的暗色区域更淡的任何过程，并且包括下列概念漂白、降低色素沉着、增白和/或脱色。用于过度色素沉着应用的组合物将包含有效量的经修饰的酵母肽级分，和/或与金属相络合的含有SEQ ID N0:1的肽，以处理和/或预防过度色素沉着，例如用于淡化受影响的区域中的皮肤/毛发。
由存在于表皮或毛发纤维中的黑色素的水平和类型确定皮肤(包括唇)和毛发的色素沉着。例如，DH1-黑色素(最深的黑色素类型)的表皮水平越高，皮肤越深。如上文中所说明的，黑色素是在色素细胞(也称作色素产生细胞或黑素细胞)中称为黑素体的专门的细胞器中合成的，并且合成过程是以通过酪氨酸酶将氨基酸酪氨酸转化为多巴醌开始的。大多数其它皮肤淡化方法依赖施用于皮肤的酪氨酸酶抑制剂来减少黑色素合成。见例如韩国专利号KR 2005095167 ;和日本专利号JP 2003252743，和JP 61260009。然而，这些例案以及日本专利号JP 2002234828和JP 2001151631使用了从非胁迫的酵母获得的提取物，即所述提取物来自未曾暴露于一种或多种胁迫的酵母。不愿被理论所束缚，相信包含含有与金属相络合的包含SEQ ID NO :1的肽的经修饰的肽级分不依赖于酪氨酸抑制剂来减少黑色素合成，而是似乎具有不同的作用机制。的确，令人惊讶地发现了本发明的组合物通过抑制钙流入色素细胞中而减少黑色素合成。此外，令人惊讶地发现了包含其他钙流入抑制剂的组合物也可被用于抗过度色素沉着的美容应用中。见下文的实施例1。
因此，本发明的另一方面涉及包含钙流入抑制剂的组合物用于皮肤和/或毛发淡化的美容用途。如本申请中所使用的，“钙流入抑制剂”是指任意这样的化合物其减少、降低、阻碍或抑制钙进入色素细胞中。在本申请中，此术语与“钙通道抑制剂”可交换地使用。钙流入抑制剂将包括本领域中已知调控钙进入色素细胞的化合物，例如而不限于2氨乙基二苯基硼酸盐(2-APB)。例如，已知此化合物特异性地阻碍钙进入细胞中， 包括进入色素细胞中。其它已知的钙流入抑制剂包括而不限于氨基六氢芴，苄普地尔， 隹丐阻蛋白(Calcicludine), Calciseptine,氯化卡米达佐(Calmidazolium chloride), 硝苯地平，维拉帕米，FS2(黑曼巴)，加兰肽，普罗托平，四氢巴马汀，生长抑素-14， L-St印holidinealverine及其盐；以及锰和它的盐、镁和它的盐。见例如EP 1419764 ;国际专利申请公开号WO 2006048671 ;和美国专利申请公开号2009/0028826。包含钙流入抑制剂的化妆品组合物令人惊讶地起作用以减少黑色素合成，并因此可用于皮肤或毛发淡化产品中，例如用于处理和/或预防皮肤过度色素沉着，或用于漂白毛发。能够处理和/或预防过度色素沉着的皮肤的钙流入抑制剂也可被称作“皮肤淡化剂”。当用于淡化毛发时，它们也可被称作“毛发淡化剂”。在过度色素沉着应用中使用的组合物将包含有效量的一种或多种钙流入抑制剂，以处理和/或预防过度色素沉着，例如用于淡化受影响的区域中的皮肤/ 毛发。
在某些实施方案中 ，本发明的组合物包含经修饰的肽级分和/或其它钙流入抑制剂，所述经修饰的肽级分含有与金属相络合的包含SEQ ID NO :1的肽，当表面施用于皮肤 (或毛发)的给定区域时，所述经修饰的肽级分和/或其它钙流入抑制剂的量足以减少所述区域中的黑色素合成。如本申请中所使用的，“减少黑色素合成”和相关的表述是指减少在皮肤中生物合成的和/或沉积在毛发中的一种或多种不同类型的黑色素的量，特别是指减少黑素细胞-介导的过度色素沉着。不愿被理论所束缚，相信黑色素的减少是由抑制钙流入到色素细胞中而引起的，如上文所述。优选地，黑色素合成的减少引起接受处理的皮肤 (或毛发)的可察觉的淡化，虽然一些黑色素生物合成持续(以及一些钙流入持续)。例如， 在一些实施方案中，与不存在包含皮肤(或毛发)淡化剂的组合物时的黑色素合成相比，黑色素合成减少至少约10 %，至少约25 %，至少约50 %，至少约75 %，或至少约90 %。在一些实施方案中，与不存在包含皮肤(或毛发)淡化剂的组合物时的钙流入相比，钙流入减少至少约20 %，至少约40 %，至少约50 %，至少约80 %或至少约95 %。黑色素合成和/或钙流入的程度可通过适当的测定确定，例如本文中所描述的或本领域中已知的体外测定。例如， 下文的实施例1和13提供了用于确定钙流入抑制和总黑色素合成的测定的实验细节。
在一些实施方案中，用于处理和/或预防过度色素沉着(例如淡化皮肤(或毛发))的化妆品组合物还包含至少一种其它的皮肤淡化剂(或至少一种其它的毛发淡化剂)。例如，以有效处理和/或预防过度色素沉着的量包含含有与金属相络合的包含SEQ ID NO 1的肽的经修饰的肽、和/或其它钙流入抑制剂的化妆品组合物可进一步包含至少一种其它的皮肤淡化剂(或至少一种其它的毛发淡化剂)。在一些实施方案中可包括，例如酪氨酸抑制剂，这包括KR 2005095167、JP 2003252743和JP 61260009中所公开的任何酪氨酸抑制剂。任何可施用于皮肤(或毛发)以淡化皮肤(或毛发)的其它物质也可作为其它的皮肤(或毛发)淡化剂而与本文中所描述的组合物一起使用。皮肤淡化剂的实例包括但不限于对苯二酚、曲酸、甘草精华和/或其衍生物、抗坏血酸和/或其衍生物、熊果苷、熊果提取物、光果甘草及其衍生物、小球藻提取物、紫苏提取物、椰果提取物和/或其它脱色剂。 已公开了紫苏提取物作为增白剂，例如在美国专利号5，980，904和日本公开号07025742， 07187989，10265322,2001163759 和 2001181173 中。在日本专利号 2896815B2 中公开了椰果提取物作为增白剂。
其它的皮肤淡化剂包括紫铆(Butea frondosa)提取物，补血草(Naringi crenulata)提取物，乌厳(Stenoloma chusana)提取物，印度棟(Azadirachta indica)提取物，光果甘草(Glycyrrhiza glabra linn)提取物，海巴戟(Morinda citrifolia)提取物，番茄糖酯或它们的任意组合，以及抗坏血酸葡萄糖苷，维生素C，视黄醇和/或其衍生物，熊果苷，皱叶酸模提取物，乳蛋白(包括水解的乳蛋白)，N，N, S-三(羧甲基)半胱胺，齐墩果酸，紫苏油，胎盘提取物，saxifragia sarmentosa,桧酸,硫代二丙酸(TDPA), 当归(ligusticum chiangxiong hort.), asmunda japonica thunb.,紫缕(stellaria medica(L.)cyr.),垂盆草(sedum sarmentosum bunge),当归(ligusticum Iucidum Ait.)，冬青(ilex purpurea hassk)，印度醋栗(emblica，apigenin)，ascorbyl palmitol, carruba多酚，橙皮素，稲畑多酚，异甘草素，山奈酚_7新橙皮糖，L-含羞草氨酸，木犀草素， 可溶于油的甘草提取物P-T (40), oxa acid,异硫氰酸苯酯，cococin,水飞蓟素，T4CA,四氢姜黄素，unitrienol，熊果酸-齐墩果酸，UVA/URSI，或它们的任意组合。此外，料想到在一些实施方案中，用一种或多种此类其它皮肤(或毛发)淡化剂与本发明的组合物相组合可获得协同的改善。例如，在一些实施方案中，本发明涉及一种或多种本文中所描述的组合物与TDPA的协同作用，例如以对皮肤提供增强的皮肤淡化益处。
发炎
在某些优选的实施方案中，本文所描述的化妆品组合物可被用于处理和/或预防发炎，例如，用于减少与皮肤发炎相关的发红和/或浮肿。在一些特别优选的实施方案中， 将包含有效量的经修饰的酵母肽级分的组合物表面施用于皮肤(例如发炎的皮肤区域)， 所述酵母肽级分包含与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽。发炎通常是由个体对不希望的刺激的应答引起的，所述刺激为例如病原体、毒素、空气污染、损害细胞的物理损伤、外来体(例如碎片)、烧伤、化学刺激物、自体免疫反应等，并且可以是急性的或慢性的。在个体中产生炎性应答的刺激物可被称作“刺激剂”。发炎通常被表征为五个主要迹象发红，增加的热度，肿胀，疼痛，以及丧失功能。“发炎的皮肤”或“被炎症影响的皮肤区域”是指显示出一个或多个与发炎相关的迹象或特征的任何皮肤，所述迹象或特征为例如发红，肿胀或浮肿。炎性皮肤状况包括而不限于湿疹，水肿，职业性皮炎或接触性皮炎，银屑病，痤疮，荨麻疹(也已知为风疹)，红斑痤疮，或者其它响应于刺激物(例如毒葛)的疹或过敏性反应。 发炎的区域包括被此类状况影响的皮肤区域，例如痤疮损伤，疣，丘疹，斑块，和受刺激的区域，例如发红、肿胀和/或浮肿的区域，以及瘢痕，剥落，搔痒，灼热，刺痛，麻刺，和/或麻木的区域。
处理发炎或发炎的皮肤是指清除、减少、缓解或逆转与发炎相关的一个或多个不希望的特征，例如可察觉地减少受影响区域的发红，浮肿和/或肿胀，或者舒缓或镇静所述区域。预防发炎是指给予尚未发炎的皮肤益处，其用于避免、延迟、防止或最小化与发炎相关的一个或多个不希望的特征，例如减小在暴露于刺激物之后可产生的肿胀的程度。能够处理和/或预防发炎的皮肤的、包含与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分可被称作“抗炎剂”。用于抵抗发炎的组合物将包含有效量的经修饰的酵母肽级分和/或与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽，以处理和/或预防发炎，例如用于减少受影响区域的发红，肿胀和/或浮肿。在一些特定的实施方案中，本发明的方法和组合物针对的是抗击痤疮周期的所有阶段-在爆发之前、之中和之后，例如在痤疮损伤露出表面之前对其进行预防，减少露出表面的痤疮损伤的数目，在爆发的过程中加速愈合等。
发炎中所涉及的关键炎性介导剂是细胞因子肿瘤坏死因子-a (TNFa)，也已知为恶液质素或恶病质素。TNFa被认为促成急性皮肤发炎和慢性发炎。TNFa主要由巨嗜细胞以及其它类型的细胞产生，所述其它类型的细胞包括淋巴细胞、肥大细胞、内皮细胞和成纤维细胞，局部增加TNFa浓度带来发炎的主要迹象。不愿被理论所束缚，相信包含与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分可起作用以减少TNFa产生，从而减少一种或多种与发炎相关的不希望的特征，例如发红，浮肿和/或肿胀。见下文的实施例2。
在某些实施方案中，本发明的组合物包含经修饰的酵母肽级分和/或与金属相络合的包含SEQ ID NO :1的肽，当表面施用于给定的皮肤区域时，所包含的量足以减少所述区域中TNFa的产生。如本申请中所使用的，“减少TNFa产生”和相关的表述是指减少响应 于刺激物而产生的TNFa的量，例如，通过抑制响应于刺激物的TNFa的诱导。优选地，TNFa产生的减少引起受影响区域的发红，浮肿和/或肿胀的可察觉的减少，虽然某些TNFa产生持续。例如，在一些实施方案中，与不存在包含抗炎剂的组合物时的TNFa产生相比，TNFa产生减少至少约10%,至少约25%,至少约50%,至少约75%或至少约90%。可通过适当的测定来确定TNFa产生的程度，例如本申请中所描述的或本领域中已知的体外测定。例如， 下文的实施例2提供了用于确定TNFa产生的测定的实验细节。
在一些实施方案中，用于处理和/或预防发炎(例如减少发红或肿胀)的化妆品组合物还可包含至少一种其它的抗炎剂，例如抗痤疮剂。例如，包含有效处理和/或预防发炎的量的经修饰的酵母肽级分的化妆品组合物还可包含至少一种其它的抗炎剂，所述经修饰的酵母肽级分包含与金属相络合的含有SEQ ID N0:1的肽。抗炎剂可包括，例如，类固醇、氢化可的松、泼尼松、泼尼松龙、阿司匹林、阿司匹林衍生物、芦荟、柳树皮、甘菊，和它们的混合物；以及抗刺激剂，晚期糖化终产物(AGE)抑制剂，和免疫系统抑制剂。在一些实施方案中，本发明的组合物包括抗痤疮剂，例如水杨酸。一些此类实施方案还包括羟乙酸。然而，在一些其它的实施方案中，排除了其它的抗痤疮剂，例如水杨酸。此外，所料想的是在一些实施方案中，通过将一种或多种此类其它的抗炎剂与本发明的组合物相组合可获得协同的改善。
脂质过量产生
在某些优选的实施方案中，本文所描述的化妆品组合物可被用于处理和/或预防脂质过量产生，例如，用于减少过度皮脂排出和/或橘皮组织。在一些特别优选的实施方案中，将包含有效量的经修饰的酵母肽级分的组合物表面施用于皮肤(例如被脂质过量产生所影响的皮肤区域)，所述经修饰的酵母肽级分包含与金属相络合的含有SEQ ID N0:1的肽。“过量产生脂质”或“脂质过量产生”是指超过个体所需的油的任何产生或分泌，和/或皮下脂肪的产生或沉积。例如脂质过量产生包括皮脂的过量产生、分泌或累积，以及皮下脂肪的过度产生或累积，例如橘皮组织。
皮脂是含有脂肪、角蛋白和细胞物质的油性分泌物，其由皮脂腺产生，皮脂腺是邻近毛囊的微小管道。皮脂被分泌(从头皮)到皮肤和毛发上。过度的皮脂排出与油性皮肤和毛发相关，并可促成这样的状况，例如痤疮和油性头皮屑(皮脂性皮炎)。这种问题在青少年中特别常见，因为增加的性激素水平刺激皮脂过量产生。被脂质过量产生所影响的区域包括皮肤的油性区域，例如油性面部皮肤或头皮的区域，以及被与过度皮脂排出相关的皮肤状况(例如痤疮损伤)所影响的区域。
橘皮组织是成块的不均匀类型的皮下脂肪，其主要在许多妇女的臀部和大腿上累积。许多因素可引起橘皮组织，这包括遗传、肠的、循环的、淋巴的、激素的和生活方式的因素。橘皮组织被认为是不美观的，因为其给予了皮肤之下的组织“橘皮”或“松软干酪”的样子，并且抓捏皮肤可产生“气垫外观”，伴有脂肪层的凸出和凹陷。受到脂质过量产生影响的区域包括橘皮组织的区域，例如具有“橘皮”、“松软干酪”或“气垫”外观的皮肤区域。术语“处理橘皮组织”包括缓解橘皮组织的可见迹象。
处理脂质过量产生是指清除、减少、或缓解、或逆转与脂质过量产生相关的一个或多个不希望的特征。与皮脂的过量产生相关的不希望的特征，例如包括油性、发光的、有痤疮倾向的皮肤，油性头皮，油性毛发，有头皮屑倾向的毛发，或不希望的体味。与皮下脂肪过量产生相关的不希望的 特征，例如包括不美观的橘皮组织区域。处理益处包括，例如减少受影响的皮肤或毛发的油性外观，控制表面的油，平衡有油性倾向的皮肤中的皮脂，使毛孔可见地最小化，减少由于过量皮脂累积而产生的不希望的体味，或改善被橘皮组织沉积影响的区域的外观。预防脂质过量产生是指给予尚未被影响的皮肤益处，其用于避免、延迟、防止或最小化与脂质过量产生相关的一个或多个不希望的特征，例如减少在被处理的区域最终产生的油性的程度，痤疮的严重性，或橘皮组织的团块性。能够处理和/或预防脂质过量产生的、包含与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分可被称作“抗脂质剂”，其可作为例如抗油剂和/或抗橘皮组织剂。用于控制脂质过量产生的组合物将包含有效量的经修饰的酵母肽级分和/或与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽以处理和/ 或预防脂质过量产生，例如以减少痤疮和/或橘皮组织。
脂质代谢是由过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)部分地控制的，所述PPAR形成核转录因子的超家族。PPARs是配体依赖性细胞内蛋白，其通过在被适当的配体活化后结合核中特定的DNA序列而刺激特定基因的转录。特别地，PPAR-Y活性是通过小的亲脂性配体的结合而被控制的，所述配体主要是脂肪酸，其源自自身通常被PPAR-Y所控制的营养或代谢通路。的确，相信PPAR-Y是有利于脂肪细胞的分化和通过脂肪细胞进行能量存储的前馈通路的核心部分。不愿被理论所束缚，相信包含与金属相络合的含有SEQ ID NO I的肽的经修饰的酵母肽级分可起作用以减少PPAR信号传导，特别是PPAR-Y的信号传导， 从而减少脂质产生和作为抗油和/或抗橘皮组织的试剂起作用。例如，所述组合物可起作用以减少PPAR-Y的诱导，从而更少的PPAR-Y可用于发出信号使脂肪细胞分化和进行脂肪存储。见下文的实施例3。
此外，可注意到，其产生被本发明的某些组合物所减少的脂质区别于膜脂(例如在脂双层中发现的那些)。双层脂包括，例如角质层的双层中的脂质，或其它皮脂，例如胆固醇，胆固醇酯，游离脂肪酸和构成皮肤脂双层的神经酰胺。见例如美国专利申请公开号 2006/0110815。
在某些实施方案中，本发明的组合物包含经修饰的酵母肽级分和/或与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽，当表面施用于给定的皮肤区域时，所包含的量足以减少给定皮肤区域中的PPAR信号传导。如本申请中所使用的，“减少PPAR信号传导”和相关的表述是指减少一种或多种PPARs (特别是PPAR- Y)可向细胞发出信号的程度。
在一些实施方案中，用于处理和/或预防脂质过量产生(例如减少皮脂排出或橘皮组织)的化妆品组合物还可包含至少一种其它的抗脂质剂。例如，含有有效处理和/ 或预防脂质过量产生的量的经修饰的酵母肽级分的化妆品组合物可进一步包含至少一种其它的抗脂质试剂，其中所述经修饰的酵母肽级分包含与金属相络合的含有SEQ ID NO:1的肽。实例包括而不限于某些抗-痤疮试剂和其它PPAR抑制剂，例如来自泽泻(Alisma orientate)的提取物。见例如美国专利号7，410，658。此外，料想的是在一些实施方案中， 通过将一种或多种此类其它抗脂质剂与本发明的组合物相组合可获得协同的改善。
衰老的迹象
在某些优选的实施方案中，本文中所描述的化妆品组合物可被用于处理和/或预防皮肤衰老或其它皮肤损伤的迹象。皮肤衰老的迹象包括衰老的任何皮肤病学迹象，包括由内在的(按年代的)衰老引起的，或由外部的因素(例如在光衰老中)引起的迹象。所述组合物可被施用于已经显示出可见的衰老迹象的皮肤或很可能显示出此类迹象的皮肤， 例如由于年龄或日光照射。
皮肤衰老的早期迹象包括逐渐产生面部皱纹，无论是表面细纹还是更深的褶皱。 虽然皱纹形成和其它衰老迹象是皮肤内在的，此过程可通过外部因素而加速，例如过度暴露于太阳和其它损害性元素，过于活跃的面部表情肌，经常使用烟草产品，营养不良，或某些皮肤病况。发展为更深的褶皱的表面细纹、 由于重复的皮肤折叠而加深的面部皱纹以及伴随成熟而产生的深折是与衰老相关的可见的变化。
处理皮肤衰老的迹象是指清除、减少、缓解或逆转与皮肤衰老相关的一个或多个不希望的特征，例如通过减少皮肤紧实度或饱满度的丧失至可察觉的程度。例如，本发明的组合物和方法可被用于逆转或处理皮肤衰老迹象(一旦其显现)，例如在年龄超过25岁的个体中所常见的。预防皮肤衰老的迹象是指给予皮肤益处，其用于避免、延迟、防止或最小化与衰老相关的一个或多个不希望的特征，例如当皮肤最终衰老时通过减慢紧实度或饱满度的丧失。即，本发明的组合物和方法可被预防性地采用，例如用于防止尚未显现出皮肤衰老迹象的个体中的皮肤衰老迹象，这在年龄为25岁以下的个体中最常见。
能够处理和/或预防衰老迹象的、包含与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的酵母肽级分可被称作“抗衰老剂”。用作抗衰老剂的组合物将包含有效量的经修饰的酵母肽级分和/或与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽，以处理和/或预防衰老的迹象。一些特别优选的实施方案提供了用于表面施用的组合物，其包含有效量的与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽，以处理和/或预防衰老的迹象。处理和/或预防通常引起一个或多个不希望的特征的改善和/或被处理的皮肤的总体美学外观的改善。
不希望的特征和/或总体美学外观的改善可包括下列的一种或多种减少按年代的衰老、光衰老、激素性衰老，和/或光化学性衰老的皮肤病学迹象；预防和/或减少纹和/ 或皱纹的出现；减少面部的纹和皱纹的可注意性，减少脸颊、前额上的面部皱纹，减少眼睛之间的垂直皱纹、眼睛上方和嘴周围的平行皱纹、木偶纹、特别是深的皱纹或褶皱的可注意性；预防、减少和/或消除纹和/或皱纹的出现和/或深度；改善眶下纹和/或眼角纹的外观；减少鱼尾纹的出现；使皮肤(特别是衰老的皮肤)恢复年轻和/或恢复活力；减少皮肤脆弱性；防止皮肤萎缩；改善皮肤的色调、光彩和/或清澈性；防止、减少和/或缓解皮肤松垂；改善皮肤紧实度、饱满度、紧固度、丰满度和/或柔软性；改善皮肤质地和/或促进再组织化；改善皮肤屏障修复和/或功能；改善皮肤轮廓的外观；恢复皮肤光泽和/或明亮度； 使疲劳和/或胁迫的皮肤病学迹象最小化；抵抗环境的胁迫；补充皮肤中由于衰老和/或更年期而减少的成分，例如关键的营养物或其它皮肤组分；改善雌激素不平衡的影响；改善皮肤细胞之间的交流；增加细胞增殖和/或倍增；增加由于衰老和/或更年期而减少的皮肤细胞代谢；延迟细胞衰老；改善皮肤水分和/或水合；增加皮肤厚度；增加皮肤弹性和 /或弹力；改善前胶原和/或胶原合成；增强去角质；改善微循环；减少干燥；及其任意组·合。
在某些优选的实施方案中，本发明的组合物和方法针对的是处理和/或预防皮肤中的细纹或皱纹。在处理的情形中，将所述组合物施用于需要此类处理的皮肤，这是指具有皱纹和/或细纹的皮肤。细纹和/或皱纹可出现在皮肤的任何表面上，包括但不限于手、手臂、腿、颈、胸、和面部(包括前额)的皮肤。优选地，将所述组合物直接施用于细纹和/或皱纹。例如，用于处理细纹和皱纹的方法可包括向有需要的皮肤表面施用本文中所描述的组合物，例如直接表面施用于细纹和/或皱纹，施用的量和时间足以减少细纹和/或皱纹的严重性。可定性地评估所述组合物对于细纹和皱纹的出现的影响(例如通过目测)，或定量地评估(例如通过显微镜或计算机辅助测量皱纹的形态)(例如皱纹的数量、深度、长度、面积、体积和/或宽度/单位皮肤面积)。
术语“皱纹”或“皱纹形成”是指细小皱纹形成和/或粗皱纹形成。细小皱纹形成或细纹是指浅表的纹和皮肤表面上的皱纹。粗皱纹形成是指深的沟，特别是脸上和眼睛周围的深纹/皱纹，包括表情纹，例如眉间纹和皱纹，抬头纹和皱纹，鱼尾纹和皱纹，法令纹以及木偶纹和皱纹。抬头纹和皱纹是指前额的皮肤上的浅表纹和/或深沟。鱼尾纹和皱纹是指眼睛区域周围皮肤上的浅表纹和/或深沟。木偶纹和皱纹是指嘴周围皮肤上的浅表纹和 /或深沟。
在某些优选的实施方案中，本发明的组合物和方法针对的是改善皮肤的紧实度， 饱满度和/或紧固度。在某些优选的实施方案中，本发明的组合物和方法针对的是增加和/ 或预防皮肤弹性的丧失。皮肤的弹性是指皮肤的弹力和/或回弹性，这归因于皮肤在变形后重新获得其原始的形状和尺寸的能力。可通过拉伸或挤压皮肤而通过可引起变形的抓捏测试来评估皮肤的弹性。
丧失紧实度、皱纹形成及其它衰老的迹象一部分是由随着时间而失去皮肤胶原引起的。如本申请中所使用的，“胶原”与“胶原I”或“胶原类型I”可互换地使用，其为存在于皮肤中作为真皮基质组分的类型。胶原I由以紧密的三重螺旋缠绕在一起的三条蛋白链构成，其提供比铁更大的抗张强度。它是由成纤维细胞产生的，所述成纤维细胞是位于真皮中的专门化皮肤细胞。所述形成涉及由核糖体沿着粗糙内质网(RER)产生早前胶原I ;转化为前胶原I和在RER内形成三重螺旋结构；以及在细胞外最终形成原胶原，所述原胶原是聚集以产生胶原纤丝、然后产生胶原纤维的形式。胶原赋予皮肤紧实度、力量、持久性和年轻的光滑、饱满的外观。不愿被理论所束缚，相信包含与金属相络合的含有SEQ ID N0:1的肽的经修饰的酵母肽级分能够起作用以增加胶原产生并因此增加胶原皮肤的水平，从而延迟与皮肤衰老相关的一个或多个不希望的特征，例如通过保持皮肤的紧实度和饱满度。见下文的实施例4。
在某些实施方案中，本发明的组合物包含经修饰的酵母肽级分和/或与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽，当表面施用于给定的皮肤区域时，所包含的量足以增加所述区域中的胶原合成。如本申请中所使用的，“增加胶原合成”和相关的表述是指刺激、诱导或上调前胶原和/或胶原产生以增加皮肤区域中的胶原含量，优选将皮肤紧实度和/或饱满度改善至可察觉的程度。例如，在一些实施方案中，与不存在所述组合物时的胶原合成相比， 胶原合成增加至少约10%，至少约25%，至少约50%，至少约75%或至少约90%。皮肤中的胶原和/或胶原合成的程度可通过适当的测定确定，例如本文中所描述的或本领域中已知的体外测定。也可确定一种或多种胶原前体的水平作为皮肤胶原水平的指示，并且此类体外测定也是本领域中已知的。例如，下文的实施例4提供了用于测量人真皮成纤维细胞中前胶原I水平的测定的实验细节。
虽然胶原是由成纤维细胞产生的，其降解通常是由基质金属蛋白酶(MMPs)控制的。Gross J，et al. Biochem Biophys Res Commun 1974 ；61 :605_12。MMPs 是具有超过 25 个成员的相关的锌依赖性蛋白酶的家族，其中包括金属蛋白酶(MMP-1，MMP_8和MMP-13)和明胶酶(MMP-2和MMP-9)。MMP对胶原的降解与丧失皮肤的紧实度和弹性相关。例如，胶原降解导致胶原纤维的异常交联而产生刚性的、较不柔韧的结构。不愿被理论所束缚，相信包含与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分可作为金属蛋白酶抑制剂起作用，其减少金属蛋白酶活性并从而减少胶原的丧失和相关的皮肤衰老的不希望的特征。见下文的实施例5。
在某些实施方案中 ，本发明的组合物包含含有与金属相络合的含有SEQ ID N01的肽的经修饰的酵母肽级分，当表面施用于给定的皮肤区域时，其所包含的量足以减少所述区域中的金属蛋白酶活性。如本申请中所使用的，“减少金属蛋白酶活性”和相关的表述是指抑制、下调或减少金属蛋白酶超家族的一种或多种酶的活性。优选地，金属蛋白酶活性的减少以可察觉的程度减少皮肤中胶原的丧失，虽然一些金属蛋白酶活性持续。例如，在一些实施方案中，与不存在包含金属蛋白酶抑制剂的组合物时的金属蛋白酶活性相比，金属蛋白酶的活性减少至少约10%，至少约25%，至少约50%，至少约75%或至少约90 %。金属蛋白酶活性和/或抑制的程度可通过适当的测定确定，例如本文中所描述的或本领域中已知的体外测定。例如，下文中的实施例5提供了用于测量金属蛋白酶活性和抑制的测定的实验细节。
随着时间失去透明质酸也在皮肤衰老中起作用。透明质酸是在皮肤中发现的、 作为ECM的一部分的粘多糖(GAG)。GAGs是长的无支链的、重复二糖单元的聚合物，其主要由己糖胺、己糖、己糖醛酸部分，或其硫酸盐构成。GAGs结合皮肤中的蛋白质以形成蛋白聚糖，其有助于皮肤的生长、保存和修复。透明质酸特别被报道促成皮肤的水合、营养物交换，和保护皮肤抵抗自由基。Wiest et al. J Dtsch Dermatol Ges. 2008 Mar ；6 (3) 176-80 ；Bert et al. Biorheology. 1998May-Jun ;35 (3) :211_9。然而，还报道了当皮肤随着时间衰老时，GAG合成下降并且皮肤中总体的GAG含量减少。Smith et al.1n J.1nvest. Dermatol. ,1962,39,第 347-350 页；Fleischmajer et al. Biochim. Biophys. Acta,1972, 279，第 265-275 页；Longas et al. Carbohydr. Res.，1987，159，第 127-136 页。皮肤中 GAG 和透明质酸含量的这种减少被相信促成皮肤的机械特性方面与年龄相关的改变，特别是组织水合和弹力方面的改变。Carrino et al. ,Arch Biochem Biophys. 2000 Jan I ；373 (I) 91-101 ；Vogel et al. ,Z Gerontol.1994May-Jun ；27 (3) :182-5 ；Lanir et al. ,J Biomech Eng. 1990Feb ；112(1) :63-9)。不愿被理论所束缚，相信包含与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的酵母肽级分可起作用以增加透明质酸产生、从而减少与皮肤衰老相关的一个或多个不希望的特征，例如通过改善皮肤的水合和弹力。见下文的实施例6。
在某些优选的实施方案中，本发明的组合物和方法针对的是改善皮肤的水分和/ 或水合。例如，在某些实施方案中，本发明的组合物包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的酵母肽级分，当表面施用于给定的皮肤区域时，其所包含的量足以增加所述区域的透明质酸产生。如本申请中所使用的，“增加透明质酸产生”及相关的表述是指刺激、诱导或上调透明质酸合成以增加皮肤区域中的透明质酸含量，优选以可察觉的量改善皮肤水合和/或弹力。例如，在一些实施方案中，与不存在所述组合物时的透明质酸产生相比，透明质酸产生增加至少约10%，至少约25%，至少约50%，至少约75%或至少约 90%。皮肤中透明质酸和/或透明质酸产生的程度可通过适当的测定确定，例如本文所描述的或本领域中已知的体外测定。例如，下文的实施例6提供了用于测量人真皮成纤维细胞中透明质酸水平的测定的实验细节。
皮肤中的去角质酶，例如KLKs也参与皮肤衰老。KLKs是存在于人皮肤角质层中的蛋白酶家族，其通过分解促成细胞与细胞凝聚的蛋白而帮助对死皮细胞进行去角质。Kishibe M et al. 2006 “Kallikrein 8 Is Involved in Skin Desquamation in C ooperation with Other Kallikreins.，，J. Biol. Chem. 282 :5834-5841。在角质层中，细胞与细胞凝聚主要取决于已知为角化粒的蛋白。角化粒已知在皮肤重构和更新的过程中被KLK降解，这允许死细胞从皮肤表面蜕掉。对死细胞的去角质改善皮肤的美学外观，例如通过防止在皮肤表面上构建给予皮肤干燥、粗糙、暗沉的外观的死细胞。去角质可使皮肤感觉更光滑并看起来更清新，且还可提升其它皮肤活性物质的穿透性。然而，相信随着年龄，角化粒更新减缓，这允许了在皮肤表面上构建死细胞。不愿被理论所束缚，相信包含与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分能够起作用以增加KLKs活性，从而减少与皮肤衰老相关的一个或多个不希望的特征，例如减少干燥和/或改善皮肤光泽和/或明亮度。见下面的实施例7。上调KLK活性可增加脱落死皮肤的速度，并因此自然地增强皮肤去角质。
因此，在某些优选的实施方案中，本文中所描述的组合物可被用于增强去角质。在一些特别优选的实施方案中，可将包含有效量的经修饰的酵母肽级分和/或与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的组合物表面施用于皮肤，例如施用于需要去角质的皮肤区域。 需要去角质的皮肤区域包括将受益于增加去除在皮肤表面上构建的死细胞的速度的任何皮肤表面，例如，如可在年龄超过25岁的个体中所常见的，并且特别是干燥皮肤的区域。干燥皮肤的去角质可产生所述区域的更清新、更光滑的样子。需要去角质的皮肤区域也包括需要增加或提升表面递送的皮肤活性物质的穿透性的区域。需要去角质的皮肤区域还包括有痤疮倾向的区域，例如在那里去角质可在痤疮开始前帮助其停止，例如通过去除堵塞毛孔的污物和油以显露出更清新、更明亮的皮肤和/或没有闪光的光洁面。可受益于增强的去角质的区域包括但不限于，手、手臂、腿、颈、胸和面部(包括前额)的皮肤。特别地，关节和脚的皮肤倾向于累积死皮细胞，其在此类区域中导致粗糙、干燥、暗沉、有皱纹的，和/或褪色的皮肤。
在一些甚至更优选的实施方案中，将本文中所描述的组合物表面施用于肘部、膝盖、踝部、脚、脚底、跟部等的皮肤，这些区域可特别受益于增强的去角质。在一些优选的实施方案中，将本文中所描述的组合物表面施用于干燥皮肤的区域，这种区域通常也受益于增强的去角质。能够增强去角质的、包含与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分可被称作“去角质剂”。用作去角质剂的组合物将包含有效量的经修饰的酵母肽级分和/或与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽，以在表面施用于给定的皮肤区域时改善或增强所述区域中的去角质。
更特别地，在某些实施方案中，本发明的组合物包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分，当表面施用于给定的皮肤区域时，其所包含的量足以增加所述区域的KLKs活性。如本申请中所使用的，“增加KLK活性”及相关的表述是指刺激、诱导或上调KLKs家族的一种或多种蛋白酶的蛋白水解活性，以增加从皮肤区域去除死皮细胞。优选地，增加KLKs的活性使得以可察觉的程度增加从皮肤表面对死细胞的去角质速度，从而例如在皮肤光泽和/或明亮度方面观察到改善；和/或在皮肤色调，光彩，和/或清澈性方面观察到改善。例如，在一些实施方案中，与不存在所述组合物时的KLK蛋白酶活性相比，KLK活性增加至少约10%，至少约25%，至少约50%，至少约75%或至少约90%。 皮肤中的去角质和/或KLKs活性的程度可通过适当的测定确定，例如本文中所描述的或本领域中已知的体外测定。例如，下文的实施例7提供了用于测量重组人KLK5的活性的 测定的实验细节。
在一些实施方案中，用于增强去角质的方法还包括将包含去角质剂的组合物相对于皮肤表面摩擦。此类摩擦通常涉及将所述组合物相对于皮肤按压，并将其在皮肤上来回移动(优选重复移动，更优选以圆周运动重复移动)。“重复地”是指大约两次、大约三次、 大约五次、大约十次或更多次，例如以帮助蜕去通过所述组合物的蛋白水解增强特性而被疏松的死皮细胞。摩擦可以是轻柔的或有力的，这取决于例如被去角质的区域。去角质之后，通常冲洗(例如用冷水)皮肤区域，然后保湿以保护经去角质的皮肤表面。
在某些实施方案中，本发明的组合物包含含有与金属相络合的含有SEQ ID N01 的肽的经修饰的酵母肽级分，当表面施用于给定的皮肤区域时，其所包含的量足以在所述区域带来下列的两种或更多种增加KLK活性、增加透明质酸产生、增加胶原合成，和减少金属蛋白酶活性。不愿被理论所束缚，靶向不同的衰老过程的两种或更多种此类组合的作用，在处理和/或预防皮肤衰老迹象方面可具有协同的结果。
此外，本文所描述的组合物的皮肤-淡化，抗炎和/或抗脂质特性也可促成其抗衰老特性。例如，发炎被显示活化各种基质降解性金属蛋白酶，引起可促成皮肤衰老的异常基质降解。Pillai, et al. (2005) Int J Cosmet Sc1. Feb ；27 (I) :17_34。发炎还被显不通过引起活性氧(其损伤然后在真皮和表皮区室中累积的细胞蛋白、脂质和碳水化合物)的累积而加剧人类皮肤内在和外在的衰老。Pillai, et al. (2005) Int J Cosmet Sc1. Feb ； 27(1) :17-34 ；Bissett, et al. (1990)Photodermatol. Photoimmunol. Photomed. 7 :153-8; ThornfeIdt, CR(2008) J. Cosmet. Dermatol. 7 :78_82。发炎已知也促成皮肤变色，例如，在发炎后观察到了皮肤中的过度色素沉着。Ruiz-Maldonado et al. (1997) Semin Cutan Med Surg. 16(I) :36-43 ；Tomita et al. (1989)Dermatologica. 179 Suppl1:49-53) ；Holland et al. Semin Cutan Med Surg. 2005 Jun ；24(2) :79_83。皮肤变色，以及油性和 / 或橘皮组织的区域可进一步促成衰老的出现。同样，不愿被理论所束缚，在某些实施方案中，本文中所描述的组合物的组合作用可提供协同的皮肤益处，例如通过显示出两种或更多种下列调节活性减少黑色素合成、减少TNFa产生、减少PPAR信号传导、减少金属蛋白酶活性、增加胶原合成、增加透明质酸产生、以及增加KLK活性。
在一些实施方案中，用于处理和/或预防皮肤衰老迹象的化妆品组合物还可包含其它的去角质和/或抗衰老试剂。例如，以有效处理和/或预防皮肤衰老迹象的量包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分的化妆品组合物可进一步包含至少一种其它的去角质和/或抗衰老剂。所料想的是在一些实施方案中，可通过此类组合而获得协同的改善。
示例性的去角质剂包括但不限于α-轻基酸、β -轻基酸、oxaacids、oxadiacids 及它们的衍生物，例如它们的脂、酸酐和盐。合适的羟基酸包括，例如，羟基乙酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、2-羟基烃酸、扁桃酸、水杨酸和它们的衍生物，以及果酶，例如菠萝酶。 优选的其它去角质剂是羟基乙酸。
示例性的抗衰老剂包括而不限于例如，植物提取物(例如紫铆提取物)；硫代二丙酸(TDPA)及其酯；类视黄醇(例如全反式维甲酸，9-顺维甲酸，植烷酸及其它)；羟基酸 (包括α -羟基酸和β -羟基酸)，水杨酸和水杨酸盐；抗氧化剂，去角质剂(例如羟基乙酸， 3，6，9-三氧杂十一烷二酸等)，雌激素合成酶刺激化合物(例如咖啡因及衍生物)；能够抑制5α-还原酶活性的化合物(例如亚麻酸、亚油酸、非那雄胺以及它们的混合物)；屏障功能增强剂(例如神经酰胺、甘油酯、胆固醇及其酯、α-羟基 和ω-羟基脂肪酸及其酯等)；胶原酶抑制剂；以及弹性蛋白酶抑制剂；抗衰老植物提取物，角质溶解剂，剥离剂，角化细胞增殖增强剂和作为用于皮肤的其它胶原增强剂的皮肤丰盈剂。合适的皮肤丰盈剂的实例是棕榈酰寡肽。其它的皮肤丰盈剂包括其它的胶原和/或其它的粘多糖(GAG)增强剂。示例性的类视黄醇包括而不限于，维甲酸(例如全反式或13-顺式)及其衍生物，视黄醇(维生素A)及其酯，例如视黄醇棕榈酸酯，视黄醇乙酸酯和视黄醇丙酸酯，以及它们的盐。在一些实施方案中，本发明涉及一种或多种本文中所描述的组合物与TDPA的协同作用，例如用于向皮肤提供增强的抗衰老益处。抗衰老剂的其它实例在下文中提供。
基于本文中所提供的教导，本领域技术人员将认识到用于本文所描述的组合物的其它美容和/或药物应用，并且此类应用也被料想在本发明的范围之内。例如，本文中所描述的组合物也可用于个人护理产品中，例如皮肤护理产品或毛发护理产品，其中需要在应用所述产品后产生本文中所描述的皮肤益处。用于皮肤的个人护理产品包括，例如腋下除臭剂。料想的是，例如，本文中所描述的组合物可用于淡化腋下皮肤的腋下制剂中，例如其中腋下的区域已变得或正在变得比所需要的更深。
本发明提供了用于向皮肤提供益处的方法，其是通过以足以产生一种或多种本文所描述的益处的时间向皮肤的区域表面施用包含含有与金属相络合的含有SEQ ID N0:1的肽的经修饰的酵母肽级分，和/或其它钙流入抑制剂的组合物。通常，将每日一次、两次或三次向皮肤施用所述组合物，只要是为了达到所希望的结果(例如如本文中所描述的去角质、抗衰老、抗脂质、抗炎和/或皮肤(或毛发)淡化益处)所需的。这种处理方案可包括每日施用或隔天施用，施用至少约一周、至少约两周、至少约四周、至少约八周、至少约十二周或更长。例如，在一些针对抗痤疮的实施方案中，本发明的组合物可在早晨和/或傍晚施用，例如通过将产品轻柔地滑过面部，优选施用至清洁过的干燥皮肤。也料想到了慢性处理方案，例如关于目的在于防止一种或多种皮肤衰老迹象或其它不希望的皮肤特征(例如痤疮)的预防性处理。
本文所描述的化妆品组合物可用于去角质，抗衰老，抗脂质，抗橘皮组织，抗炎，和 /或皮肤(或毛发)淡化产品，优选地配制用于表面施用于皮肤(或毛发)，例如用化妆品上可接受的载体配制，如下文中所描述的。
经修饰的肽级分和相关组合物的美容制剂
本文中所描述的组合物可被配制为用于用于表面施用的各种皮肤或毛发护理产品。可以适于施用于皮肤(包括头皮)和/或毛发的各种产品形式配制所述组合物，例如水剂，霜剂，精华液，喷雾，气雾剂，饼，软膏，精华，凝胶，糊剂，贴剂，垫，笔，润发油，溶液，小毛巾，面膜，棒，泡沫，酏剂，慕斯，粉末，浴盐
所述组合物将包含有效量的经修饰的酵母肽级分，和/或与金属相络合的含有 SEQ ID N0:1的肽，和/或钙流入抑制剂，所述有效量的含义是足以赋予所配制的产品一种或多种所需特性或调节活性的量，例如作为皮肤(或毛发)淡化剂，抗炎剂，抗脂质剂，去角质剂，和/或抗衰老剂起作用。例如，所存在的经修饰的肽级分或与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的量可以是约O. 001重量％至约5重量基于组合物的总重量；优选地,为约O. 01重量％至约3重量％，基于组合物的总重量；并且更优选 地为约O.1重量％至约2 重量％，或约I重量％，基于组合物的总重量。
组合物可包括化妆品上可接受的载体。化妆品上可接受的载体是指用于适于用于与人类组织和/或人类毛发直接、安全接触的化妆品、药物或药品的任何媒介，并且可包括例如任何稀释剂、溶剂、载体、填充剂等。此类媒介可以采用任何本领域已知的适于向皮肤(或毛发)施用的形式，并且可包括水(例如去离子水)；植物油；矿物油；酯例如八棕榈酸酯，肉豆蘧酸异丙酯和棕榈酸异丙酯；醚例如二辛基醚和二甲基异山梨酯；醇例如乙醇和异丙醇；脂肪醇例如鲸蜡醇，鲸蜡硬脂醇，硬脂醇和联苯基醇；异链烷烃例如异辛烷，异十二烷和异十六烷；硅油例如环甲基硅油，二甲基硅油，二甲基硅油交联聚合物，聚硅氧烷， 以及它们的衍生物，优选经有机修饰的衍生物；烃油例如矿物油，凡士林油，异十二烷和聚异丁烯；多元醇例如丙二醇，甘油，丁二醇，戊二醇和己二醇；蜡例如蜂蜡和植物蜡；或前述的任意组合或混合物。基于本文中的教导，本领域技术人员将能够选择适当的媒介，和/或选择它们的量，使得可保持本发明的化妆品组合物的一种或多种所需的特性。
所述媒介可包括含水相，油相，醇相，硅相或其混合物。化妆品上可接受的载体也可包含乳剂。合适的乳剂的非限制性实例包括油包水乳剂、水包油乳剂、水包有机硅乳齐U、 有机硅包水乳剂、水包蜡乳剂、水包油包水三重乳剂，或者具有霜剂，凝胶或微型乳剂外观的类似物。乳剂可包括乳化剂，例如非离子的、阴离子的或两性的表面活性剂。
乳剂的油相优选具有一种或多种有机化合物，包括软化剂；保湿剂，例如丁二醇、 丙二醇、甲基葡糖醇聚醚-20和甘油；其它水分散的或可溶于水的组分，包括增稠剂例如硅酸镁铝或羟烃基纤维素；凝胶剂，例如高MW的聚丙烯酸，例如CARB0P0L 934 ;以及它们的混合物。所述乳剂可具有能够乳化组合物中存在的各种组分的一种或多种乳化剂。
适于在油相中使用的化合物包括而不限于，植物油；酯例如辛基棕榈酸酯，肉豆蘧酸异丙酯，和异丙基棕榈酸酯；醚例如二辛基醚；脂肪醇例如鲸蜡醇，硬脂醇和二十二醇； 异链烷烃例如异辛烷，异十二烷和异十六烷；硅油例如二甲基硅油，环形有机硅和聚硅氧烷；烃油例如矿物油，凡士林油，异十二烷和聚异丁烯；天然或合成的蜡等。含油的相可由单一的油或不同油的混合物构成。合适的疏水性烃油可以是饱和的或不饱和的、具有脂肪族特征、是直链的或支链的、或含有脂环的或芳香的环。烃油包括具有6-20个碳原子的那些，更优选地包含10-16个碳原子。代表性的烃包括癸烷，十二烷，十四烷，十三烷和C8_2(l异链烧烃。链烧族烃可从Exxon获得，商标为IS0PARS,以及可从Permethyl Corporation获得。此外，料想C8_2。链烧烃,例如由Permethyl Corporation制造的、具有商品名Permethyl 99ATM的C12异链烷烃(异十二烷)也是适合的。各种商业上可得的C16异链烷烃，例如异十六烷(具有商品名Permethylra)也是适合的。优选的挥发性烃的实例包括聚癸烷，例如异十二烧和异癸烧，这包括例如，Permethyl-99A(Presperse Inc.)和C7-C8至C12-C15异链烧烃，例如Isopar系列,可从Exxon Chemicals获得。代表性的烃溶剂是异十二烧。
油相可包含一种或多种蜡，这包括例如，稻麸蜡，巴西棕榈蜡，ouricurry蜡，小烛树腊，褐煤腊，甘鹿腊，地腊，聚乙烯腊,Fischer-Tropsch腊,蜂腊,微晶腊,有机娃腊,氟腊, 及其任意组合。
非限制性的乳 化剂包括乳化性蜡，乳化性多元醇，聚醚多元醇，聚醚，多元醇的单或二酯，单硬脂酸乙二醇，单硬脂酸甘油，二硬脂酸甘油，含有机硅的乳化剂，大豆固醇，脂肪醇例如鲸蜡醇，丙烯酸酯，脂肪酸例如硬脂酸，脂肪酸盐，及其混合物。一些优选的乳化剂包括大豆留醇，鲸蜡醇，硬脂酸，乳化蜡，丙烯酸酯，含有机硅的乳化剂，及其混合物。其它可与本文中所描述的组合物一起使用的特定乳化剂包括但不限于，下列的一种或多种例如，Cltl,烷基丙烯酸交联聚合物；二甲基硅油PEG-7异硬脂酸酯；丙烯酰胺共聚物；矿物油； 山梨酸酯；聚甘油-3-二异硬脂酸酯；山梨醇酐单硬脂酸酯；山梨醇酐三硬脂酸酯；倍半油酸山梨坦；山梨醇酐单油酸；甘油酯例如单硬脂酸甘油酯和单油酸甘油酯；聚氧乙烯酚，例如聚氧乙烯辛基苯酚和聚氧乙烯壬基苯酚；聚氧乙烯醚例如聚氧乙烯十六醚和聚氧乙烯硬脂醇醚；聚氧乙烯甘油酯；聚氧乙烯失水山梨醇酯；二甲基硅油共聚多元醇；聚甘油酯例如聚甘油基-3-二异硬脂酸酯；甘油月桂酸酯；硬脂醇聚醚_2，硬脂醇聚醚-10和硬脂醇聚醚-20。其它的乳化剂在 INCI Ingredient Dictionary and Handbook Ilth Edition 2006 中提供，其公开的内容在此通过引用而并入。这些乳化剂通常将以下列量存在于组合物中 约O. 001%至约10%按重量，特别是约O. 01%至约5%按重量的量，且更优选地约O. 1%至约3%按重量的量。基于本文中的教导，本领域技术人员将能够选择合适的乳化剂，或本文中所描述的任何其它材料，和/或选择它们的量，使得可保持本发明的化妆品组合物的一种或多种所需的特性。
油相可包含一种或多种挥发性的和/或非挥发性的硅油。挥发性的有机硅包括环状的和线性的挥发性二甲基硅氧烷有机硅。在一些实施方案中，挥发性的有机硅可包括环二甲基硅油，这包括四聚(M)、五聚(D5)和六聚(D6)环甲基硅油，或其混合物。可特别提及的是挥发性环甲基硅油-六甲基环三硅氧烷，八甲基-环四硅氧烷和十甲基-环五硅氧烧。适合的二甲基娃油可获得自Dow Corning名称为Dow Corning 200 Fluid并且具有的粘性范围为约0. 65至约600，000厘拖或更高。合适的非极性，挥发性液体硅油公开于美国专利号4，781，917中，在此以其全部通过引用而并入。其它的挥发性有机硅材料在Todd et al. , “Volatile Silicone Fluids for Cosmetics”，Cosmetics and Toiletries,91 : 27-32(1976)中描述，在此以其全部通过引用而并入。线性的挥发性有机硅在25°C时通常具有的粘性为少于约5厘拖，而环状有机硅在25°C时具有的粘性为少于约10厘拖。不同粘性的挥发性有机娃的实例包括Dow Corning 200, Dow Corning 244, Dow Corning245, Dow Corning 344 和 Dow Corning 345 (Dow Corning Corp.) ;SF_1204 和 SF-1202 有机娃流体(G. E. Silicones) ；GE 7207 和 7158 (General Electric Co.);以及 SWS-03314 (SWS Silicones Corp.)。线性、挥发性有机硅包括低分子量聚二甲基硅氧烷化合物，例如六甲基 _■娃氧烧，八甲基二娃氧烧，十甲基四娃氧烧，和十_■甲基五娃氧烧。
非挥发性的硅油将通常包括聚烷基硅氧烷，聚芳基硅氧烷，聚烷基芳基硅氧烷，或其混合物。聚二甲基硅氧烷是优选的非挥发性硅油。非挥发性硅油在25°C时将通常具有的粘性为约10至约60，000厘拖，优选为约10至约10，000厘拖，且更优选为约10至约50 0 厘拖；并且在大气压力下具有超过250°C的沸点。非限制性的实例包括二甲基聚硅氧烷(二甲基硅油)，苯基三甲基硅油和二苯基二甲基硅油。挥发性和非挥发性的硅油可任选地被各种官能团取代，例如烧基、芳基、胺基、乙稀基、轻基、齒烧基、烧基芳基和丙稀酸酷基团。
有机硅包水乳剂可被非离子性的表面活性剂(乳化剂)乳化，例如，聚二有机硅氧烷-聚氧乙烯嵌段共聚物，这包括美国专利号4，122，029中所描述的那些，其公开的内容在此通过引用而并入。这些乳化剂通常包含聚二有机硅氧烷主链，通常是聚二甲基硅氧烧，其具有包含-(EO)m-和/或-(PO)n-基团的的侧链，其中EO是乙烯氧基而PO是I, 2_丙烯氧基，所述侧链通常以氢或低级烷基(例如C^6，通常为(V3)加帽或终结。其它合适的有机硅包水乳化剂在美国专利号6，685，952中被公开，其所公开的内容在此通过引用而并入。商业上可得的有机娃包水乳化剂包括可获得自Dow Corning、商品名为3225C和 5225C FORMULATION AID的那些；可获得自General Electric的有机硅SF-1528 ;可获得自 Goldschmidt Chemical Corporation (Hopewell, VA)的 ABIL EM 90 和 EM 97 ;以及由 OSI Specialties (Danbury, CT)销售的 SILWET 乳化剂系列。
有机硅包水乳化剂的实例包括但不限于，二甲基硅油PEG 10/15交联聚合物，二甲基硅油共聚多元醇，十六烷基二甲基硅油共聚多元醇，PEG-15月桂基二甲基硅油交联聚合物，月桂基甲基硅油交联聚合物，环甲基硅油，二甲基硅油共聚多元醇，二甲基硅油共聚多元醇，辛酸/癸酸三甘油酯，聚甘油_4异硬脂酸酯，十六烷基二甲基硅油共聚多元醇，月桂酸己酯，二甲基硅油共聚多元醇，环五硅氧烷，以及这些中的两种或更多种的任意组合。 有机硅包水乳化剂的优选实例包括但不限于PEG/PPG-18/18 二甲基硅油(商品名5225C， Dow Corning)，PEG/PPG-19/19 二甲基硅油(商品名 BY25-337，Dow Corning)，十六烷基 PEG/PPG-10/1 二甲基娃油(商品名 Abil EM-90, Goldschmidt Chemical Corporation), PEG-12 二甲基硅油(商品名 SF 1288，General Electric)，月桂基 PEG/PPG-18/18 甲基硅油(商品名5200F0RMULATI0N AIDjDow Corning)，PEG-12 二甲基硅油交联聚合物(商品名 9010和9011有机硅弹性体混合物，Dow Corning)，PEG-1O 二甲基硅油交联聚合物(商品名 KSG-20，Shin-Etsu)，二甲基硅油 PEG-10/15 交联聚合物(商品名 KSG-210，Shin-Etsu)， 和二甲基硅油PEG-7异硬脂酸酯。有机硅包水乳化剂通常以下列的量存在于组合物中约 O. 001%至约10%按重量，特别是约O. 01%至约5%按重量的量，且更优选地，低于I %按重量。
乳剂的含水相可包括一种或多种其它的溶剂，这包括低级醇，例如乙醇、异丙醇等。挥发性溶剂也可以是化妆品上可接受的酯，例如丁基乙酸酯或乙酸乙酯；酮类，例如丙酮或乙基甲基酮等。
含油的相将通常构成约10%至约99%，优选约20%至约85%，更优选约30%至约70%按重量，基于乳剂的总重量，而含水相将通常构成约1%至约90%，优选约5%至约 70%，更优选约20%至约60%按重量的总乳剂。含水相将通常包含约25%至约100%，更通常约50%至约95%按重量的水。
所述组合物可包括脂质体。脂质体可包含其它添加剂或物质和/或可以是经修饰的以在施用后更特异性地到达或保留在位点。其它合适的递送媒介包括，例如niosomes，亚微乳，多聚密封剂(polymeric encapsulants),凝胶,霜剂,水剂,及其组合。
所述组合物可任选地包含对本领域技术人员而言显然的其它美容活性物质和赋形剂，这包括但不限于填充剂、乳化剂、表面活性剂、成膜剂、螯合剂(例如EDTA)、胶凝剂、 增稠剂、软化剂、保湿剂、湿润剂、维生素、矿物质、粘性和/或流变学修饰剂、防晒剂、类视黄醇、激素化合物、α-羟基酸、α-酮酸，抗-分支杆菌剂、抗真菌剂、抗微生物剂、抗病毒剂、镇痛剂、脂性化合物、抗 肿瘤药、免疫系统加强剂、抗过敏剂、Hl或Η2抗组胺药、麻醉剂、 防腐剂、杀虫剂、皮肤冷却化合物、皮肤保护剂、皮肤渗透增强剂、去角质剂、润滑剂、香料、 着色剂、脱色剂、防腐剂(例如DMDM乙内酰脲/碘丙炔醇丁基氨甲酸酯)、稳定剂、药剂、光稳定剂、中和剂(例如三羟乙基胺)，及其混合物。除了前述的之外，本发明的化妆品组合物可含有任何用于处理皮肤状况或病况的其它化合物。基于本文中的教导，本领域技术人员将能够选择任何这些或其它物质，和/或选择它们的量，使得可保持本发明的化妆品组合物的一种或多种所需的特性。
防腐剂可包括例如醇，乙二醇，苯甲酸酯，四元含氮化合物，异噻唑啉酮，醛释放剂，抗氧化剂，卤代化合物，及它们的组合。阐释性的醇包括，例如苯氧乙醇，异丙醇，和苄醇；阐释性的乙二醇包括，例如丙烯、丁烯和戊二醇；阐释性的苯甲酸酯(也已知为对羟苯甲酸)包括，例如甲基、丙基和丁基-苯甲酸酯；阐释性的四元含氮化合物包括，例如氯化苯甲烃铵和季铵盐15 ;阐释性的异噻唑啉酮包括，例如甲基异噻唑啉酮和甲基氯异塞唑啉酮；阐释性的醛释放剂包括，例如DMDM乙内酰脲，咪唑烷基脲，和尿素醛；阐释性的抗氧化剂包括，例如丁羟甲苯和生育酚，以及阐释性的卤代化合物包括，例如三氯生和双氯苯双胍己烷二葡萄糖酸酯。可用于本发明的目的的防腐剂的其它实例可在下列中找到例如 Steinberg,D. “Frequency of Use of Preservatives 2001，，Cosmet. Toilet. 117,41-44, (2002)和 “Preservative Encyclopedia” Cosmet. Toilet. 117,80-96(2002)。
着色剂可包括，例如有机和无机色素和珠光剂。合适的无机色素包括但不限于，氧化钛、二氧化钛、氧化错和氧化铺，以及氧化锌、氧化铁、氧化铬和铁蓝。合适的有机色素包括钡、锶、钙、和铝色淀以及炭黑。合适的珠光剂包括以氧化钛、氧化铁或天然色素涂覆的云母。
可加入各种填充剂和其它的组分。填充剂通常存在的量为约O重量％至约20重量％，基于组合物的总重量，优选为约0.1重量％至约10重量％。合适的填充剂包括但不限于二氧化硅、经处理的二氧化硅、滑石、硬脂酸锌、云母、高岭土、尼龙粉末例如Orgasol 、 聚乙烯粉末、Teflon 、淀粉、氮化硼、共聚物微球例如Expancel (Nobel Industries), PoIytrap (Dow Corning)和有机娃树脂微珠(来自 Toshiba 的 Tospearl )等。
在一些优选的实施方案中，所述组合物包括至少一种其它皮肤(或毛发)淡化剂， 至少一种其它抗炎剂，至少一种其它抗脂质剂；至少一种其它去角质剂，和/或至少一种其它抗衰老剂。其它的常规添加剂包括维生素衍生物例如抗坏血酸基单棕榈酸酯；增稠剂例如羟基烷基纤维素；胶凝剂；和结构剂例如膨润土，蒙脱石，硅酸镁铝和硅酸锂镁。在本发明的一些实施方案中，本发明的表面组合物也可包括下列的一种或多种软化剂、光学漫射剂、防晒剂和抗氧化剂。这些添加剂也可作为抗衰老剂起作用。基于本申请中的教导，本领域技术人员将能够选择合适的软化剂、光学漫射剂、防晒剂和/或抗氧化剂，或任何其它材料，和/或能够选择它们的量，使得可保持本发明的化妆品组合物的一种或多种所需的特性。
软化剂提供增强皮肤柔软 性和减少细纹和粗皱纹出现的功能性益处。实例包括肉豆蘧酸异丙酯、凡士林油、羊毛脂酸异丙酯、有机硅(例如甲基硅油，二甲基硅油)、油、矿物油、脂肪酸酯、十六烷基己酸乙酯、C12_15烃基安息香酸酯、异硬脂酸异丙酯、二异丙基二聚二亚油酸酯，或其任意混合物。软化剂可优选地以下列量存在约0. lwt%至约50wt%组合物的总重量。
光学漫射剂是改变皮肤的表面视光学的粒子，其产生对例如纹和皱纹的视觉模糊和柔化。可用于本发明的光学漫射剂的实例包括但不限于氮化硼、云母、尼龙、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚氨酯粉末、絹云母、二氧化硅、有机硅粉末、滑石、特氟隆、二氧化钛、氧化锌、或其任意混合物。当存在的时候，光学漫射剂可以下列量存在约0. 01重量％至约20 重量％的组合物的总重量。
还可包括用于保护皮肤免受破坏性紫外线的防晒剂。优选的防晒剂是具有宽范围的UVB和UVA保护的那些，例如奥克立宁，阿伏苯宗(帕索1789)，甲氧桂皮酸辛酯，水杨酸辛酯，氧苯酮，homosylate,苯甲酮,茨酮衍生物,氧化锌和二氧化钛。当存在时,防晒剂可构成约O. 01重量％至约70重量％的组合物。
抗氧化剂的功能特别是从皮肤上清除自由基以保护皮肤免受环境侵袭。可用于当前的组合物中的抗氧化剂的实例包括具有酚羟基官能的化合物，例如抗坏血酸及其衍生物 /酯；α -羟基酸；β -胡萝卜素；儿茶酸；姜黄素；阿魏酸衍生物(例如阿魏酸乙酯和阿魏酸钠)；没食子酸衍生物(例如没食子酸丙酯)；番茄红素；还原酸；迷迭香酸；丹宁酸；四氢姜黄素；生育酚及其衍生物(例如醋酸生育酚)；尿酸；或其任意混合物。其它合适的抗氧化剂是具有一个或多个巯基官能(-SH)的那些，其以还原或非还原的形式，例如谷胱甘肽，硫辛酸，硫代羟基乙酸，和其它含巯基化合物。抗氧化剂可以是无机的，例如重亚硫酸盐、偏亚硫酸氢盐、亚硫酸盐、或其它含硫的无机盐和酸。本发明的组合物可包含优选下列量的抗氧化剂约O. 001重量％至约10重量％，且更优选地约O. 01重量％至约5重量％， 的组合物的总重量。实施例
实施例1.通过抑制钙流入而减少黑色素合成
就抑制钙流入到产生色素的细胞中的能力在体外测试包含与锌络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分。按照制造商的指导，使用Fluo-4 NW钙测定试剂盒 (Invitrogen),设计了实验来测量B16黑素瘤细胞中的细胞内I丐。使B16小鼠黑素瘤细胞系(ATCC，cat. # :CRL-6475)生长在96-孔组织培养经处理的皿中的生长培养基中。在钙处理之前，从B16细胞培养物中移除生长培养基并将100 μ L的染料加载溶液快速加入96-孔板的每个孔中。将板在37°C孵育30分钟，然后在室温下再孵育30分钟。移除染料缓冲液并用IX PBS清洗板一次，并且用含有钙及测试化合物的测定缓冲液(根据制造商的指导形成)进行替换。所使用的测试化合物为100 μ M的2-ΑΡΒ (已知的钙流入抑制剂)，和包含不同浓度的与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分，这包括O. 1%的与锌相络合的肽。将媒介(不含测试化合物的测定缓冲液)用作对照。
使用酶标仪，分别在485nm/530nm的激发/发射波长处测量荧光。将酶标仪设置为每30秒读取荧光，读取5分钟的时间段。在5分钟结束时，通过向测定缓冲液中加入毒胡萝卜素(以给出每个孔中IuM的终浓度)而刺激钙离子流入。使用不含毒胡萝卜素的测定缓冲液作为阴性对照。将荧光酶标仪设置为每30秒进行荧光测量，测量30分钟的时间段，同样分别在485nm/530nm的激发/发射波长处进行测量。将荧光单位相对于时间(以分钟计)作图以给出钙流入图。使用钙流入峰的曲线下面积来比较2APB或经 修饰的肽级分相对于对照的效果。
观察到的是ΙΟΟμΜ 2-ΑΡΒ处理以86%抑制了钙进入细胞中。此外，出人意料地观察到用包含O. 1%与锌相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的肽级分处理Β16色素细胞也抑制了钙进入细胞，并且以约45 %进行了所述抑制。
然后，在Β16细胞中检测了 2-ΑΡΒ和具有与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的肽级分对于黑色素合成的作用。使Β16小鼠黑素瘤细胞系(ATCC，cat. # :CRL-6475)生长在96-孔组织培养经处理的皿(Falcon)中并用测试化合物进行处理以确定其调节色素形成(黑色素合成)的能力。具体地，将细胞暴露于ΙΟΟμΜ 2-ΑΡΒ或包含不同浓度的与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分，这包括I %和O.1 %的与锌相络合的肽，进行七(7)天。处理阶段之后，使用Packard酶标仪在540nm处定量所合成的黑色素的水平。
定量了所合成的黑色素的量之后，使用MTT转化法确定细胞存活性。MTT转化法测量通过NAD (P) H-依赖性微粒体脱氢酶而使MTT染料从黄色的、可溶于水的四唑盐至蓝紫色不可溶甲瓒沉淀物的还原，所述酶仅在存活的细胞中起作用。因此，蓝色的强度指示细胞的存活。对黑色素合成进行定量后，使培养物暴露于浓度为lmg/ml的MTT染料溶液三小时。 用试剂醇(95%乙醇5%异丙醇)溶解甲瓒材料并在定轨摇床上摇动15分钟。通过使用 Packard酶标仪在570nm处测量所提取的甲瓒而测定活细胞对MTT染料的摄取和转化。
在对细胞存活进行归一化之后，计算总的色素沉着，并表示为对照的活性百分比。 令人惊讶地观察到2-APB以77%抑制黑色素合成；而O. 1%和I %的与锌相络合的的肽相对于对照分别显示出27%和52%的抑制效果(P < O. 05)。结果表示包含含有与金属相络合的包含SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分和/或其它钙流入抑制剂的组合物可被用于减少过度色素沉着，例如，当表面施用于过度色素沉着的皮肤时。
实施例2.通过经修饰的酵母肽级分减少TNFa的产生
就减少TNFa产生的能力在体外测试包含与锌相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的酵母肽级分，TNFa的产生已知参与发炎。在37°C和5% CO2下、在6孔板内的生长培养基中培养人表皮角化细胞48小时。用ImL含有10ng/mL佛波醇肉豆蘧基乙酸酯(PMA) 的生长培养基处理细胞以刺激肿瘤坏死因子a (TNFa)。还用包含不同浓度的与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分共处理细胞，其中包括O. 1%和1%与锌相络合的肽。
于37°C孵育6小时之后，收集培养基并使用ELISA试剂盒(Quantikine Human TNF- a /TNFSFIA, R&D系统)来分析TNFa的水平。所观察到的是用包含O.1 %和I %与锌相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的肽级分进行处理，分别以25%和46%抑制了 PMA 对TNFa的诱导(P < O. 05)。结果表示表面施用包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO I的肽的经修饰的酵母肽级分的组合物可减少发炎并引起与炎性皮肤状况相关的症状的改盡口 ο
实施例3.通过经修饰的酵母肽级分减少PPAR-Y的表达
就减少PPAR- Y表达的能力在体外测试包含与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分，已知PPAR-Y的表达参与脂质产生和储存。使用荧光素酶报道分子测定系统监测PPAR-Y基因表达。此测定系统涉及与荧光素酶编码区相连的PPAR-Y启动子序列。荧光素酶活性的水平指示来自PPAR-Y启动子的基因表达活性。通过将三个拷贝的PPAR元件[(ACO) 3]插入pGL3载体中而构建PPAR-Y报道分子。然后将所述构建体转染到CV-1细胞中。
以DMEM培养基中6 0%的密度将CV-1细胞铺板在24-孔板中，所述DMEM培养基中补充了 10%的胎牛血清(脱脂的)。达到85%汇合后，使用含有LipofectAMINE和Plus Reagent的转染混合物转染细胞。转染混合物含有PPAR-Y报道分子(AC03_tk)构建体(IOOng/孔)，以及PPAR- Y质粒(IOOng/孔)以及参考质粒pRL-NULL (IOng/孔)。起初将质粒构建体与20μ1 Plus Reagent在室温下混合15分钟,所述Plus Reagent在750 μ I血清和无抗生素的培养基中被稀释；然后与30 μ ILipofectAMINE Reagent再混合15分钟,所述LipofectAMINE Reagent在5ml相同的培养基中被稀释。将最终的转染复合物(1. 5ml/ 孔)加入CV-1细胞的单层中。孵育3小时之后，用普通的培养基替换所述培养基并在含有 5. 0% CO2的37°C湿润培养箱中孵育过夜。
用包含不同浓度的与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分处理经转染的细胞，这包括包含O. 004%与锌相络合的肽的组合物。作为阳性对照，用ΙΟμΜ 的环格列酮处理细胞；作为阴性对照，用不含任何被胁迫酵母的提取物的媒介处理细胞。将经处理的细胞再培养24小时，用磷酸盐缓冲盐水清洗一次，并通过在室温下轻柔振荡30分钟而在100 μ I细胞裂解缓冲液中进行裂解。在_80°C孵育3小时后，通过刮擦而收集细胞裂解物。一式三份进行所有的实验并包括了适当的阳性或阴性对照。
按照制造商所描述的，使用双重-荧光素酶报道分子测定系统(Promega)来确定荧光素酶活性。这一系统含有两种底物，其用于依次确定两种荧光素酶的活性。通过将裂解物的等份(10 μ I)与荧光素酶测定试剂II相混合而起始代表报道基因活性的萤火荧光素酶活性。然后通过向样品板加入Stop&Glo试剂而淬灭萤火荧光并同时激活海肾荧光。计算每个样品中萤火荧光信号与海肾荧光信号的比率，并将来自经提取物处理的孔与来自经媒介处理的孔的信号比记录为诱导(> I)或抑制(< I)的倍数。
在一式三份的测试中，发现加入包含0.004%与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的肽级分以30%减少报道基因的表达(P < 0. 05)，这表示PPAR-Y表达减少 30%。所述结果表示表面施用包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分的组合物可控制脂质产生，例如减少皮脂过量产生和/或橘皮组织。
实施例4.通过经修饰的酵母肽级分增加胶原合成`
就增加胶原(特别是真皮基质组分前胶原I，已知其在衰老的皮肤中减少)合成的能力在体外测试包含与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分。在 96-孔组织培养板中、在200 μ I生长培养基(DMEM，5% FBS, I % L-Glut和I %抗生素)中培养人真皮成纤维细胞(Cascade Biologies)并于37°C孵育24小时。用包含不同浓度的与锌相络合的含有SEQ ID NO:1的肽的经修饰的酵母肽级分(在生长培养基中被稀释)处理细胞，这包括含有在生长培养基中被稀释的0.1 %与锌相络合的肽的级分，并且在37°C 下孵育72小时。此时间段之后，如本申请中所讨论的，收集经调节的培养基并测定前胶原 I (胶原I的前体形式)的水平。
按照制造商的指导，使用购自Takara Bio USA，WI，USA的固相夹心ELISA免疫测定(前胶原类型-1C-肽EIA试剂盒)来测量前胶原I。包含0.1 %与锌相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的酵母肽级分以20. 5%刺激前胶原I。所述结果表示表面施用包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分的组合物可增加胶原合成并因此增加皮肤中的胶原水平，从而防止和/或改善不希望的皮肤衰老迹象。
实施例5.通过经修饰的酵母肽级分减少胶原酶活性
就减少金属蛋白酶活性的能力在体外测试包含与锌相络合的含有SEQ ID N0:1的肽的经修饰的酵母肽级分。具体地，使用了由分子探针制造的Enzcheck明胶酶/胶原酶测定试剂盒(E-12055)。此测定使用以分子探针BODIPY FL染料标记的DQ明胶底物，使得缀合物的荧光被淬灭。在消化了胶原底物之后，显露了荧光。此测定中所使用的胶原酶是从溶组织梭菌中纯化的金属蛋白酶。
将包含不同浓度的与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分 (包括I %与锌相络合的肽)应用于此测定以确定其抑制金属蛋白酶消化DQ明胶底物的能力。来自反应混合物的灭光发射的减少表不抑制。在黑暗中在室温下将反应鮮育一小时。 使用荧光酶标仪分别在485nm/530nm的激发/发射波长处进行读取。
观察到的是包含1%与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的肽级分以 20%减少金属蛋白酶活性。所述结果表不表面施用包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的酵母肽级分的组合物可减少金属蛋白酶活性，从而减少胶原的丧失和相关的皮肤衰老的不希望的特征，例如通过减少皮肤紧实度和饱满度的丧失。
实施例6.通过经修饰的酵母肽级分增加透明质酸
就增加透明质酸产生的能力(特别是在真皮成纤维细胞中)而在体外测试包含与锌相络合的含有SEQ ID NO:1的肽的经修饰的酵母肽级分。将人真皮成纤维细胞(Cascade Biologies)在96-孔组织培养板中、在200 μ I生长培养基(DMEM,5% FBS, I % L-Glut和 1%抗生素)中培养，并于37°C孵育24小时。用包含不同浓度的与锌相络合的含有SEQ ID N01的肽(在生长培养基中被稀释)的经修饰的酵母肽级分处理细胞，其中包括含有 0.01%与锌相络合的肽(在生长培养基中被稀释)的级分，并于37°C孵育24小时。此时间段之后，收集经调节的培养基并按照生产商的指导，使用购自Corgenix, Inc. , CO, USA的测定试剂盒测定透明质酸的水平。
观察到的是包含O. 01%与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的肽级分以100%刺激透明质酸合成。所述结果表示表面施用包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO 1的肽的经修饰的酵母肽级分的组合物可增加透明质酸产生，从而减少与皮肤衰老相关的一个或多个不希望的特征，例如通过改善皮肤的水合和弹力。
实施例7.通过经修饰的酵母肽级分增加激肽释放酶活性
就增加KLK家族成员(特别是重组的人(rh)KLK5)的酶活性的能力在体外测试包含与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分。将包含不同浓度的与锌相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分(包括0.1%，0.01%和0.001% 的与锌相络合的肽)与重组人KLK5(R&D系统；Cat No. 1108-SE)预孵育。预处理之后， 通过测量合成的底物的肽键裂解速度而评估KLK5活性。所述底物与经淬灭的荧光基团 (Boc-V-P-R-AMC Fluorogenic Peptide Substrate, R&D系统，Cat No. ES011)相缀合,从而在临近的肽键裂解之后显露出荧光，当在340nm的波长处激发时，其在612nm的波长处产生可测量的发射。荧光读数的增加指示增加的rhKLK5活性。
观察到的是，包含O. 1%，0. 01%和O. 001%的与锌相络合的含有SEQID NO:1的肽的经修饰的肽级分分别以23 %、27 %和31 %刺激KLK5活性，令人惊讶地给出倒置的剂量应答。结果表示，表面施用包含含有与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母 肽级分的组合物可增加KLKs活性，从而增强去角质并减少与皮肤衰老相关的一个或多个不希望的特征，例如通过改善皮肤的光泽和/或明亮度。
实施例8 皮肤淡化和/或抗衰老精华制剂
下面提供了用于表面施用于皮肤的示例性化妆品组合物，其包含含有与锌相络合的包含SEQ ID NO :1的肽的经修饰的酵母肽级分。以可用于抗衰老和/或皮肤淡化应用中的精华的形式提供所述组合物。
权利要求
1.用于处理过度色素沉着的方法，所述方法包括向过度色素沉着的皮肤区域表面施用包含化妆品上可接受的载体中的有效量的钙流入抑制剂的组合物，其中所存在的所述钙流入抑制剂的量足以减少所述过度色素沉着的皮肤区域中的黑色素合成。
2.根据权利要求1的方法，其中所述钙流入抑制剂是包含与金属相络合的含有SEQIDNO 1的肽的经修饰的酵母肽级分。
3.根据权利要求1的方法，其中所述钙流入抑制剂选自2-氨乙基二苯基硼酸盐、氨基六氢荷，节普地尔，I丐阻蛋白，Calciseptine,氯化卡米达佐,硝苯地平,维拉帕米,FS2 (黑曼巴)，加兰肽，普罗托平，四氢巴马汀，生长抑素-14, L-Stepholidinealverine ;猛；镁；以及它们的盐。
4.根据权利要求1的方法，其中所述钙流入抑制剂与至少一种选自硫代二丙酸(TDPA)或其酯衍生物的其它皮肤淡化剂相组合。
5.用于淡化皮肤或毛发的方法，所述方法包括向所述皮肤或毛发表面施用包含化妆品上可接受的载体中的有效量的钙流入抑制剂的组合物，其中施用的时间足以淡化所述皮肤或毛发。
6.向人类皮肤提供益处的方法，所述方法包括向有需要的皮肤表面施用包含有效量的经修饰的酵母肽级分的组合物，所述经修饰的酵母肽级分包含化妆品上可接受的载体中的与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽。
7.根据权利要求6的方法，其中所述金属为二价金属离子，优选锌离子。
8.根据权利要求6的方法，其中所存在的经修饰的酵母肽级分的量足以减少下列的至少一种黑色素合成、TNFa产生、PPAR信号传导和金属蛋白酶活性；和/或足以增加下列的至少一种KLKs活性、透明质酸产生和胶原合成。
9.根据权利要求6的方法，其中所述皮肤益处选自 (a)处理或预防皮肤衰老的迹象； (b)处理和/或预防细纹或皱纹； (C)减少毛孔大小； (d)改善皮肤厚度，饱满度，和/或紧固度； (e)改善皮肤柔韧度和/或柔软性； (f)改善皮肤色调，光彩，和/或清澈性； (g)改善皮肤质地和/或促进重新组织化； (h)改善皮肤屏障修复和/或功能； (i)改善皮肤轮廓的外观； (J)恢复皮肤光泽和/或明亮度； (k)补充皮肤中关键的营养物和/或组分； (I)改善由更年期减退的皮肤外观； (m)改善皮肤湿润和/或水合； (n)增加和/或防止丧失皮肤弹性和/或弹力； (0)改善前胶原和/或胶原合成； (P)处理和/或预防皮肤松垂或萎缩； (q)增强去角质和/或减少干燥；(r)处理和/或预防皮肤过度色素沉着； (S)处理和/或预防发炎； (t)处理和/或预防过度的皮脂排出；以及 (U)处理和/或预防橘皮组织。
10.根据权利要求9的方法，其中所述皮肤过度色素沉着包括老年斑、斑驳的区域、离散的过度色素沉着的区域、被晒黑的区域、腋下区域或黑斑片。
11.根据权利要求9的方法，其中所述发炎包括痤疮损伤、丘疹或受刺激的区域。
12.用于淡化皮肤或毛发的方法，所述方法包括向所述皮肤或毛发表面施用包含有效量的经修饰的酵母肽级分的组合物，其中所述经修饰的酵母肽级分包含化妆品上可接受的载体中的、与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽，其中施用的时间足以淡化所述皮肤或毛发。
13.表面组合物，其包含 0.001重量％至5重量％的经修饰的酵母肽级分，所述经修饰的酵母肽级分包含化妆品上可接受的载体中的与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽； 其中所述表面组合物是以水剂，霜剂，精华，软膏，凝胶或棒的形式。
14.处理皮肤脂质过量产生的方法，所述方法包括向受脂质过量产生影响的皮肤区域表面施用包含有效量的经修饰的酵母肽级分的组合物，所述经修饰的酵母肽级分包含化妆品上可接受的载体中的与金属相络合的含有SEQ ID NO :1的肽，其中施用的时间足以减少所述脂质过量产生。
15.用于增强去角质的方法，所述方法包括 向有需要的皮肤区域表面施用包含有效量的经修饰的酵母肽级分的组合物，所述经修饰的酵母肽级分包含化妆品上可接受的载体中的与金属相络合的含有SEQ ID NO:l的肽；以及 相对于所述皮肤摩擦所述组合物。
全文摘要
公开了包含被胁迫的酵母提取物的与金属相络合的肽级分和/或钙流入抑制剂的化妆品组合物，以及使用此类组合物来赋予皮肤去角质，抗衰老，抗脂质，抗炎，和/或淡化益处，和/或赋予毛发淡化益处的方法。相信这些组合物具有针对皮肤衰老，发炎，脂质合成和黑色素产生中所显现出的至少一种生物化学通路的调节活性。
文档编号A61K8/18GK103037886SQ201080038485
公开日2013年4月10日 申请日期2010年8月4日 优先权日2009年8月31日
发明者U·桑塔纳姆, C·D·基鲁, D·马齐施, 洪奇, H·H·沙欣 申请人:雅芳产品公司