专利名称：木质素磺酸盐的用途及其药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及木质素磺酸盐的用途，还涉及含有木质素磺酸盐作为有效成分的药物 组合物。
背景技术：
自1981年艾滋病(AIDS)首次被发现至今，全球死于这种疾病的人已逾2500万。 艾滋病是感染人免疫缺陷病毒(HIV)引起的。2009年UNAIDS数据显示，截至到2008年， 全球HIV感染者已超过3340万，2008年全球新增感染者人数为270万。在世界范围内，性 传播是艾滋病主要的传播途径，性病的流行是艾滋病流行的潜在危险因素。虽然艾滋病疫 苗是预防和控制HIV最有效的方式，但到目前为止，人类仍然没有研制出能有效阻断艾滋 病传播的疫苗。目前预防HIV性传播的措施主要是宣传教育，普及艾滋病以及其它性传播 疾病的知识，推广安全套的使用，建立正确的性行为方式。实践证明使用安全套是有效的防 止HIV性传播的措施，但由于文化、宗教、习俗、经济和男性排斥等诸多因素，安全套的使用 率仍然很低；其次市场上主要是男用安全套，女性没有自主权。目前高效抗逆转录病毒疗法 (HAART)既鸡尾酒疗法作为艾滋病患者药物治疗的标准方案，大大改变了艾滋病毒治疗景 观。尽管各类抗HIV药物的出现显著延长了艾滋病患者的生命，但是还不能预防和完全治 愈艾滋病，易出现抗药株，且抗HIV药物价格很高和在治疗过程中具有严重的毒副作用。目前在世界范围内，女性感染人数稳定增长，已达到1570万，占总感染人数的 47%。在异性性行为中，女性感染HIV的机率是男性的2、倍，其中年轻女性已经成为 主要的感染人群。流行病学研究证明，女性生殖器官的生理结构决定了女性较男性对艾 滋病易感。为使女性具有自主使用预防功能的新技术来保护自己免受感染，杀微生物剂 (microbicide)的研究开发已被联合国艾滋病规划署(UNAIDQ和世界卫生组织(WHO)定 为全球优先发展的策略，也是国际社会在艾滋病预防方面投入仅次于艾滋病疫苗的领域。 研发有效、价格低廉、使用方便的抗病毒杀微生物剂对全球的HIV/STDs的预防具有重要意 义。统计学模拟表明，一个有效性达60%的杀微生物剂每年可在世界范围内减少一百多万 艾滋病新感染者。随着杀微生物剂研究得到日益重视，不同种类的抗HIV感染的药物或化合物都应 用于杀微生物剂的研究与开发。截止2009年10月，已进入临床评价的候选杀微生物剂共 有36种，其中正在进行临床评价的候选杀微生物剂共有21种。杀微生物剂阻断HIV感 染的机制主要为1)通过维持阴道PH值，增强阴道天然防疫功能；2)非专一裂解病毒表 壳或外壳；3)特异阻断病毒与宿主细胞结合，从而阻止病毒进入靶细胞；4)抑制病毒在细 胞内或细胞间的复制，使其不能形成成熟病毒颗粒。通过非专一性破坏病毒外壳，直接杀 灭HIV的活性物质主要是表面活性剂。其中最具代表性的是已完成临床试验的壬苯醇醚 (Nonoxynol-9,N-9)0研究表明N-9在破坏精子脂膜和病毒包膜的同时，由于其细胞毒性造成了阴道和子宫颈的粘膜层损伤，反而会相应增加艾滋病的传播及感染的危险(Shattock R等，Lancet，2004. 363:1002-1004)。另一类受到广泛关注的活性物质是阴离子多聚化合 物，其通过非专一性干扰作用，阻止病毒吸附到靶细胞上，从而阻断病毒进入靶细胞建立有 效感染。其中进入临床试验或已完成临床试验的产品有，PRO 2000 (萘磺酸聚合物)、CS/ UshercellTM (硫酸纤维素)和Carraguard (角叉菜胶)。PRO 2000为一种含有萘磺酸聚 合物的水溶性凝胶，除具有抗HIV活性外，同时也具有抗其它性传播疾病病原体的体外活 性(Karim 等，FUTURE MICROBIOLOGY 2010, 5 (4) 527-529)0 CS/UshercellTM (硫酸纤 维素)作为一种磺化聚阴离子化合物同样具有抗HIV等性传播疾病病原体的体外活性，但 其3期临床试验研究失败，原因是试验组的HIV感染率比安慰剂组的高(Van Damme L等， N Engl J Med 2008, 359:463-472)。Carraguard 主要成分是角叉菜胶，一种从由海藻 中提取的硫酸多糖。其同类产品早已应用于食品，其安全性较高(Howeet MK等，Current Pharmceutical Design,2005, 11:3731—3746)。侵入靶细胞是一个特异性的生物学过程，其需要病毒表面的包膜蛋白gpl20与细 胞受体CD4结合，诱导gpl20构象发生改变，继而与细胞表面的辅助受体CCR5或CXCR4结 合，使得原先被gpl20遮蔽的融合蛋白gp41发生构象变化，曝露出其疏水的N-末端融合肽 序列并插入宿主细胞膜，从而启动病毒毒膜与细胞膜的融合，最终导致病毒核心结构进入 细胞，建立感染。针对这一生物学过程，已有多种抑制剂被开发出来，例如针对辅助受体的 抑制剂Maraviroc与PSC-RANTES，另外针对融合过程的抑制剂T20 (已被美国FDA批准上 市，商品名恩夫韦定)与C52L多肽也是很有希望的杀微生物剂候选药物。发现新的具有抑制HIV感染作用的化合物或天然产物，对于开发有效预防HIV传 播的杀微生物剂具有重要意义。寻找创新性的先导化合物，继而开发出有效阻止HIV感染 的新型杀微生物剂或药物，是本发明的目的。木质素磺酸盐是亚硫酸盐法造纸木浆的副产品，为线性高分子化合物。其属于阴 离子表面活性剂，棕黄色粉末。具有良好的扩散性，易溶于水，可溶于不同pH值的水溶液 中。木质素磺酸盐在工业中具有广泛的应用，但鲜有在医药卫生领域的应用，尤其是作为抗 病毒药物的报道。
发明内容
本发明的第一个目的是提供木质素磺酸盐的应用，用于制备抑制HIV-I感染的药 物；
本发明的第二个目的是提供含有木质素磺酸盐作为有效成分的抑制HIV-I的药物组 合物，该药物组合物还含有常规药用载体。该药物组合物制成注射剂、片齐IJ、胶囊齐 、气雾齐 、栓齐 、膜齐 、滴丸剂、外用搽剂， 或控释或缓释剂型或纳米制剂。本发明与现有技术相比具有下列优点木质素磺酸盐在体外具有较强的抗Hiv-I 的活性，其作用机制主要是阻断HIV-I病毒与靶细胞结合，从而阻断其感染。同时对于CD4 依赖与非依赖型的HIV-I感染，木质素磺酸盐都有明显的抑制效果。另外，细胞融合实验结 果表明木质素磺酸盐具有抑制HIV-I病毒包膜蛋白介导的融合过程的作用。最后，细胞毒 性试验表明其在有效抗病毒浓度下对细胞基本无毒性。木质素磺酸盐来源丰富，生产成本低廉，可以作为一种新型潜在抗HIV-I药物及杀微生物剂得到应用。
附图1为木质素磺酸盐抑制Hiv-I对⑶4+ CCR5+ CXCR4+ GHOST X4/R5细胞感染的曲 线附图2为木质素磺酸盐抑制HIV-I对⑶4_ Caco-2细胞感染的曲线图； 附图3为木质素磺酸盐抑制HIV-I对⑶4_ C33A细胞感染的曲线图； 附图4显示了木质素磺酸盐抑制HIV-I感染GHOST X4/R5细胞、CD4_ Caco_2细胞、CD4_ C33A细胞的EC50值；
附图5为木质素磺酸盐对多种人细胞株产生毒性的曲线图； 附图6显示了木质素磺酸盐对多种人细胞株的半数毒性浓度TC5tl值； 附图7为木质素磺酸盐(LSA)、硫酸葡聚糖(Dextran sulfate)、齐多夫定(AZT)、奈韦 拉平(nevirapine)对HIV-I感染的时间抑制曲线附图8为木质素磺酸盐在不同浓度下抑制HIV-I病毒包膜蛋白介导的细胞融合的外观
附图9为木质素磺酸盐在不同浓度下抑制HIV-I病毒包膜蛋白介导的细胞融合的柱状 统计图。
具体实施例方式下面结合显示实验结果的附图来进一步阐述本发明。实验材料
1. 1木质素磺酸钠(lignin sulfonate sodium，LSA)，购自 SIGMA 公司；
其分子式如下
权利要求
1.木质素磺酸盐在制备抑制HIV-I感染的药物中的应用。
2.药物组合物，其中含有木质素磺酸盐作为有效成分，并含有常规药用载体。
3.如权利要求2所述的药物组合物，制成注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴 丸剂、外用搽剂，或控释或缓释剂型或纳米制剂。
全文摘要
本发明公开了木质素磺酸盐的用途及其药物组合物，其中木质素磺酸盐在体外具有较强的抗HIV-1的活性，其作用机制主要是阻断HIV-1病毒与靶细胞结合，从而阻断其感染。同时对于CD4依赖与非依赖型的HIV-1感染，木质素磺酸盐都有明显的抑制效果。另外，细胞融合实验结果表明木质素磺酸盐具有抑制HIV-1病毒包膜蛋白介导的融合过程的作用。最后，细胞毒性试验表明其在有效抗病毒浓度下对细胞基本无毒性。木质素磺酸盐来源丰富，生产成本低廉，可以作为一种新型潜在抗HIV-1药物及杀微生物剂得到应用。
文档编号A61P31/18GK102091091SQ20111000634
公开日2011年6月15日 申请日期2011年1月13日 优先权日2011年1月13日
发明者吴稚伟, 孙亦彬, 宋红勇, 楚鹰, 王芹, 蒋海燕, 邱敏 申请人:南京大学, 苏州维赛生物医药有限公司