专利名称：一种黄芩提取物鼻用温敏型原位凝胶及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种黄芩提取物鼻用温敏型原位凝胶。
背景技术：
黄芩(RadixScutellariae)是唇形科植物黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi (Lamiaceae)的干燥根，在我国分布极广，黑龙江、吉林、辽宁、河南、河北、山东、四川、云南、山西、陕西、甘肃和内蒙古等省均为产地。功能与主治清热燥湿，泻火解毒，止血， 安胎。用于湿热、暑热胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安。黄芩具有抗炎抗变态反应、抗微生物作用、解热作用、降压、利尿作用， 对血脂及血糖的作用，利胆、解痉作用，镇静作用等。目前黄芩提取物的制备方法较多，如专利申请号200610014770. 7，发明名称双黄连滴丸及其制备方法，该方法公开了黄芩提取物的制备方法。也有提取高纯度的黄芩中活性成分黄芩苷的文献报道。目前还有黄芩苷磷脂复合物的报道，如黄芩苷磷脂复合物经鼻给药脑内递药特性的研究，成都中医药大学，2009-04-01。黄芩中成分复杂，黄芩苷仅是其中的活性成分之一，当黄芩苷的含量较低时，由于其中多种成分包括杂质存在，制备成制剂(如磷脂复合物)较困难；而采用黄芩苷纯品制剂，它是理化性质明确的化合物，制剂容易，但黄芩中成分黄芩苷的含量为不得少于 9.0%《中国药典》2010年版，提取分离黄芩苷纯品成本高，不便于大生产用药，不能满足制剂的需求。原位凝胶(in situ gel)或称在体凝胶、环境敏感凝胶，是随着药用高分子材料学的发展而产生的新颖剂型，是指以溶液状态给药后立即在用药部位发生胶凝，从而形成非化学交联的半固体制剂。原位凝胶具有凝胶制剂高度亲水性的三维网络结构及良好的组织相容性，同时，独特的溶液一凝胶转变性质使其兼有制备简单、使用方便、与用药部位尤其是豁膜组织亲和力强、滞留时间长等优点。近年来，原位凝胶给药系统已经引起了各国学者的广泛关注，成为药剂学领域的研究热点之一。温敏型原位凝胶，贮藏条件和用药部位的温度差异可以使某些高分子溶液发生溶液凝胶的转变，形成凝胶。这些聚合物在结构上均包含一定比例的疏水和亲水嵌段，其热敏型的胶凝行为与不同性质的嵌段间、以及嵌段与溶剂间的相互作用有关。利用对热敏感的聚合物，可以研制成黏膜给药的制剂，如口腔，鼻腔， 阴道，直肠等部位的给药。亚微乳是一种乳滴粒径在100 IOOOm之间的乳剂，早在1961年，瑞典人已经用大豆油和蛋黄磷脂制成脂肪乳剂，但早期的亚微乳中不加入药物，仅作为脂肪乳剂用于高能量的胃肠外营养，为人体提供能量。近年来，亚微乳作为一种载药体系日益受到重视，人们将药物溶解于油相中制成亚微乳，不仅将其用于静脉给药，而且将这种载药体系用于眼部给药，或其它局部用药。乳剂一般分为0/W型和W/0型乳剂，由于黄芩提取物磷脂复合物具有较强的亲脂性，其在油中的溶解度远大于水中(是其在水中溶解度的40多倍)，因此拟选择制成0/W型乳剂。同时黄芩苷制备成磷脂复合物以后，其在水及油中的溶解性能比黄芩苷及物理混合物均有明显的改善，因而认为其既改善了黄芩苷的亲水性，又改善了亲脂性，且亲脂性改善程度更大。制成0/W型亚微乳后药物呈现微小乳滴分散在水中，改善了其分散性能，而外相的水与鼻粘液也具有较强的亲和性，从而使亚微乳产生极好的吸收效果。
发明内容
本发明的技术方案是提供了一种黄芩提取物鼻用温敏型原位凝胶。本发明还提供了该黄芩提取物鼻用温敏型原位凝胶的制备方法和用途。本发明提供了一种黄芩提取物鼻用温敏型原位凝胶，它由黄芩提取物磷脂复合物制备而成。其中，所述的黄芩提取物中含有黄芩苷的重量百分含量为85%以上。其中，所述的黄芩提取物的制备包括如下步骤取黄芩药材，加水煎煮提取，滤液浓缩成清膏，加盐酸调节PH值至1. 0 2. 0，70-80°C保温lh，静置，滤过，沉淀物加水搅勻， 用40%氢氧化钠溶液调节pH值至7. 0，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至1. 0 2. 0，60-70°C保温0. 5-1小时，静置，滤过，沉淀用水洗或乙醇洗至pH值至7. 0，减压干燥，即得黄芩提取物。其中，所述的黄芩提取物磷脂复合物它是由下述重量配比的黄芩提取物与大豆卵磷脂为原料制备而成黄芩提取物1-3份、大豆卵磷脂1-4份。进一步优选地，所述的黄芩提取物磷脂复合物它是由下述重量配比的黄芩提取物与大豆卵磷脂为原料制备而成黄芩提取物1份、大豆卵磷脂2份。其中，所述的黄芩提取物磷脂复合物的制备方法，包括如下步骤a、取下述重量配比的原料黄芩提取物1-3份、大豆卵磷脂1-4份；b、加入脱水无水乙醇，黄芩提取物药物浓度为2. 5-7. 5g/ml，在20_70°C恒温水浴中60-240转/min磁力搅拌1_4小时，减压回收溶剂，真空干燥，即得黄芩提取物磷脂复合物。进一步地，它包括如下步骤a、取下述重量配比的原料黄芩提取物1份、大豆卵磷脂1-3份；b、加入脱水无水乙醇，黄芩提取物药物浓度为5. Omg/ml，在55°C恒温水浴中120 转/min磁力搅拌2小时，减压回收溶剂，真空干燥，即得黄芩提取物磷脂复合物。本发明鼻用温敏型原位凝胶，是由下述重量配比的原料药制备而成泊洛沙姆407 16% %、泊洛沙姆 188 0% -12%, PEG6000 0% _2%、甘露醇 5%、苯扎氯胺0. 02%、三乙醇胺0. 1%。本发明还提供了所述的鼻用温敏型原位凝胶在制备治疗脑缺血的药物中的用途。本发明还提供了所述的鼻用温敏型原位凝胶在制备用于鼻腔给药的治疗脑缺血的药物中的用途。本发明提供了一种黄芩提取物亚微乳，它是由下述百分含量的原料药及辅料制备而成黄芩提取物磷脂复合物1 10g，卵磷脂0. 6%，辅助乳化剂F-68为0. 3%，0. 油酸钠为PH调节剂和稳定剂，10 20%油相，2. 5%甘油。
本发明还提供了一种制备所述的黄芩提取物亚微乳的方法，将黄芩提取物磷脂复合物加入到大豆油中、立即剪切分散，溶解后加入卵磷脂等油溶性成分，得油相；甘油、等水溶性成分溶于水中，得水相；将油相和水相加热到一定温度后，油相缓慢加入到水相中，高剪切乳化分散制备初乳；初乳迅速冷却至室温，再经两步高压乳勻机均质数次(700bar的压力)，热压灭菌，即得亚微乳。由于血脑屏障的存在，传统的口服及静脉给药，药物很难到达脑内，对于缺血性脑损伤的治疗效果不佳，为此寻找一种新型的给药途径成为了黄芩提取物磷脂复合物治疗缺血性脑损伤的必然，根据药效试验证明，本发明药物药效明确、可控性强，安全稳定，黄芩磷脂复合物更适合于鼻腔给药，药效明确，且药效明显优于黄芩苷纯品，制备方法简便，便于大生产，以鼻用温敏型原位凝胶和亚微乳两种制剂形式，能更好的发挥黄芩提取物的药效。
图1黄芩提取物磷脂复合物制备工艺流程2黄芩提取物磷脂复合物温敏凝胶制备工艺流程3剪切时间考察，其中，①剪切:3min②剪切6min③剪切9min④剪切iaiiin⑤ 剪切15min图4剪切时间考察，其中，①13000rpm剪切②16000rpm剪切③16000rpm剪切 ④22000rpm剪切图5HE染色后光镜观察鼻黏膜形态(X 200)，其中，A.空白(生理盐水)组；B.药物组
具体实施例方式实施例1本发明黄芩提取物制备取黄芩药材，加水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，加入盐酸适量调节pH值至1. 0 2. 0，70°C保温，静置，滤过，沉淀加适量水搅勻，用40 %氢氧化钠溶液调节PH值至7. 0，加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调节pH值至1. 0 2. 0，70°C保温30分钟，静置，滤过，沉淀用47. 5%乙醇洗至pH值6. 0 7. 0，挥尽乙醇，减压干燥，即得。通过此方法制备得到的黄芩提取物中黄芩苷含量为82 % 88 % %之间。(根据中国药典2010版一部黄芩药材项下方法测定)实施例2本发明黄芩提取物磷脂复合物的制备称取一定量的黄芩提取物和PC含量为80的大豆卵磷脂(重量比为1 2，w/w)， 加入无水乙醇，黄芩提取物药物浓度为5. Omg/ml，在55°C恒温水浴中120转/min磁力搅拌 2小时，减压回收溶剂，真空干燥，即得黄芩提取物磷脂复合物。实施例3黄芩提取物磷脂复合物制备工艺实验制备工艺流程见图11单因素考察1. 1反应溶剂的选择以大豆卵磷脂PC含量为80、反应温度为50°C，磁力搅拌速度为120转/min，磁力搅拌时间为池、反应浓度为5mg/ml、黄芩提取物与磷脂投料重量比为1 2制备磷脂复合物，分别考察四氢呋喃、无水乙醇、石油醚(30 60)无水乙醇(7 3)、脱水无水乙醇作为反应溶剂对复合反应的影响，以磷脂复合物结合率为评价指标，考察反应溶剂对于黄芩提取物磷脂复合物的制备的影响。表1不同反应溶剂的考察
不同反应溶剂磷脂复合物(g)坩埚(g)溶解物+±tf埚 (g)溶解量(g)复合率 (%)平均复合率 (%)1.013533.026434.0190.992693.8135无水乙醇1.02437.023638.02481.001293.320393.77681.013238.396439. 390.993694.1966]_· 0450.132451.15491.022594.9519脱水无水乙醇1.023657.031658.03851.006995.105595.10371.017636.125637.12711.001595.25351.008950.132951.12820.995395.9560四氢呋喃1.014933.021434.02130.999995.566195.57611.013835.013236.01080.997695.2062石油醚(30 1.006946.130246.89440.764227.688960)无水乙醇1.005857.013257.76770.754525.044726.1147=7:31.03235.124635.90070.776125.6105实验结果表明以四氢呋喃和脱水无水乙醇为反应溶剂时，平均复合率均较高， 说明脱水无水乙醇和四氢呋喃均能为反应提供较好的质子体系，无水乙醇为反应溶剂时其次，可能是由于无水乙醇中存在少量水有关，石油醚(30 60)无水乙醇=7 3为反应溶剂时最低，表明石油醚和无水乙醇的混合溶剂不能提供较好的质子体系。综合反应溶剂的安全性和复合率考虑，选用脱水无水乙醇为反应溶剂。1.2不同PC含量的考察以脱水无水乙醇作为反应溶剂，分别以大豆卵磷脂中PC (磷脂酰胆碱)含量为60、 70、80、90时，反应浓度为5mg/ml、反应温度为50°C，磁力搅拌速度为120转/min，磁力搅拌时间为池，黄芩提取物与磷脂投料重量比为1 2制备磷脂复合物，以磷脂复合物结合率为评价指标，考察不同PC含量对于黄芩提取物磷脂复合物的制备影响。实验结果见表2。表2不同PC含量的考察
撤含量合斷)St) ^s麟)；复合率
1.026325.389826.33130. 941575.2119601.054055.364756.33120. 966575.094975.10381.053828.365829.33180. 96675.00471.003229.653530.60350. 9584.0909701.040060.454461.44210. 987784.913584.51391.005052.132053.08520. 953284.53731.003251.386552.37430.987895.3947800.968030.398331.35190.953695.537295.57031.002152.130253.11820. 98895.7789 结果表明随着大豆卵磷脂PC含量的增高，反应复合率随之增高，PC含量为80时，复合反应完全，大豆磷脂PC含量不同对复合反应影响重大，因此，选择PC含量为80的大豆磷脂作为实验反应原料。1. 3反应药物浓度以脱水无水乙醇作为反应溶剂，分别以反应药物浓度为2. 5,5. 0,7. 5、10mg/ml 时，大豆卵磷脂PC含量为80、反应温度为50°C，磁力搅拌速度为120转/min，搅拌时间为池、黄芩提取物与磷脂投料重量比为1 2制备磷脂复合物，以磷脂复合物结合率为评价指标，考察反应药物浓度对于黄芩提取物磷脂复合物的制备的影响。结果见表3。表3不同浓度的考察
权利要求
1.一种黄芩提取物鼻用温敏型原位凝胶，其特征在于它是以黄芩提取物为活性成分，制备成黄芩提取物磷脂复合物，再加入温敏型原位凝胶辅料制备而成，活性成分与辅料的重量百分比为黄芩提取物磷脂复合物0. 2-1. 5%、泊洛沙姆40716% 、泊洛沙姆1880% -12%, PEG6000 0% -2%、甘露醇5%、苯扎氯胺0.02%、三乙醇胺0. 1%，余量为水。
2.根据权利要求1所述的鼻用温敏型原位凝胶，其特征在于所述的黄芩提取物磷脂复合物是由下述重量配比的黄芩提取物与大豆卵磷脂为原料制备而成黄芩提取物1-3份、大豆卵磷脂或蛋黄磷脂1-4份。
3.根据权利要求2所述的鼻用温敏型原位凝胶，其特征在于所述的黄芩提取物磷脂复合物是由下述重量配比的黄芩提取物与大豆卵磷脂为原料制备而成黄芩提取物1份、大豆卵磷脂或蛋黄磷脂2份。
4.根据权利要求2或3所述的鼻用温敏型原位凝胶，其特征在于所述的黄芩提取物中含有黄芩苷的重量百分含量为82 88%。
5.根据权利要求4所述的鼻用温敏型原位凝胶，其特征在于所述的黄芩提取物是由下述方法制备而成a、取黄芩药材，加水煎煮提取，滤液浓缩成清膏，加盐酸调节PH值至1.0 2. 0， 60-80°C保温lh，静置，滤过，得沉淀物；b、沉淀物加水搅勻，用20%-40%氢氧化钠调节pH至7，加入与氢氧化钠等量的乙醇， 使含醇量为10-47. 5%，搅勻，静置12小时，滤过，得滤液；c、滤液用盐酸调节pH至1 2，60 80°C保温1小时，冷却至室温，静置，滤过，得沉淀；d、沉淀用10-47.5%乙醇洗涤至pH至6 7，将沉淀减压干燥，即得黄芩提取物。
6.根据权利要求1所述的鼻用温敏型原位凝胶，其特征在于所述的黄芩提取物磷脂复合物的制备方法，包括如下步骤a、取下述重量配比的原料黄芩提取物1-3份、大豆卵磷脂1-4份；b、加入脱水无水乙醇，黄芩提取物药物浓度为2.5-7. 5mg/ml，在20-70°C恒温水浴中 60-240转/min磁力搅拌1_4小时，减压回收溶剂，真空干燥，即得黄芩提取物磷脂复合物。
7.根据权利要求6所述的鼻用温敏型原位凝胶，其特征在于所述的黄芩提取物磷脂复合物的制备方法，包括如下步骤a、取下述重量配比的原料黄芩提取物1份、大豆卵磷脂1-3份；b、加入脱水无水乙醇，黄芩提取物药物浓度为5.Omg/ml，在55°C恒温水浴中120转/ min磁力搅拌2小时，减压回收溶剂，真空干燥，即得黄芩提取物磷脂复合物。
8.权利要求1所述的鼻用温敏型原位凝胶的制备方法，其特征在于，它包括如下步骤a、制备0.1 % ν/ν三乙醇胺TEA溶液的配制精密量取1. Oml三乙醇胺，加入IOOOml去离子水中，充分搅拌使混勻，备用；b、空白凝胶的制备取P407、P188、PEG6000加入0.1% TEA溶液，冰浴4°C磁力搅拌下使其分散均勻，放入4°C冰箱冷藏Mh以上，使凝胶充分溶胀，得到澄明溶液；c、含药凝胶的制备先将黄芩提取物磷脂复合物溶于0.1% TEA溶液中，再加入b步骤制备的澄明溶液中。
9.一种黄芩提取物亚微乳，它是由下述百分含量的原料药及辅料制备而成黄芩提取物1.33%、大豆磷脂2. 67%、中链甘油三酯17%、大豆油8%、油酸0. 1 %、大豆卵磷脂S-751.5%、泊洛沙姆1881%、甘油1%，余量为水。
10.一种制备权利要求9所述的黄芩提取物亚微乳的方法，其特征在于a、称取黄芩提取物、大豆卵磷脂，制备成黄芩提取物磷脂复合物；b、将反应溶剂于60°C减压回收溶剂，至有物质析出时，暂停回收，加入中链甘油三酯、 大豆油、油酸，继续减压回收溶剂至无醇味，即得油相；将甘油、泊洛沙姆、乙二胺四乙酸钠水相成分溶于预热的蒸馏水中，即得水相；将两相均加热到60°C后，将水相加入油相中，使混勻；c、将初乳保持在60°C的条件下，以19000转/min的剪切速度，高速剪切IOmin；冷却至室温后，于高压均质机上进行高压均质，高压均质压力为400bar，次数为9次，低压均质压力为50bar，次数为3次，完后收集得黄芩提取物磷脂复合物亚微乳溶液，加入0. lmol/L的氢氧化钠溶液调节PH值至5，滤过。
全文摘要
本发明提供了一种黄芩提取物鼻用温敏型原位凝胶。本发明还提供了该黄芩提取物鼻用温敏型原位凝胶的制备方法和用途。本发明还提供该黄芩提取物制备的磷脂复合物亚微乳。本发明药物药效明确、可控性强，安全稳定，黄芩磷脂复合物适合于鼻腔给药，药效明确，且药效明显优于黄芩苷纯品，制备方法简便，便于大生产，以鼻用温敏型原位凝胶和亚微乳两种制剂形式，能更好的发挥黄芩提取物的药效。
文档编号A61K36/539GK102349944SQ201110146139
公开日2012年2月15日 申请日期2011年6月1日 优先权日2010年6月1日
发明者史亚军, 吴品江, 杨小容, 杨胜, 林彦君, 王达宾, 许润春 申请人:四川大千药业有限公司