专利名称：甲鱼肽在制药中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及甲鱼肽的用途，尤其是涉及在对辐射危害有保护功能的药物领域中的用途。
背景技术：
申请号201010103157. 9专利文献中公开了甲鱼小分子多肽的制备方法；《中国食品学报》2008，02:徐怀德等“甲鱼蛋白酶解产物体外ACE抑制和抗氧化活性研究”公开了体外实验证实甲鱼蛋白酶解物ACE抑制和抗氧化活性的作用；现有技术和专利中均未述及甲鱼低聚肽关于辅助抑制肿瘤细胞生长或转移应用的报导，也没有关于分子量在1000以下的甲鱼低聚肽在对辐射危害有保护功能方面的报道。
发明内容
本发明的目的是提供甲鱼肽的新用途，即在制药中的新应用；本发明的另一目的是提供一种能对辐射危害有保护功能，有较高的营养价值，吸收率高，不妨害人体身体健康的药物或保健食品。本发明甲鱼肽是以甲鱼为主要原料，分子量分布在lOOOODalton以内的小分子肽，其中140-1000分子量范围占50%以上。本发明还涉及甲鱼肽在作为制备对辐射危害有保护功能的药中的应用。涉及分子量分布在lOOOODalton以内的甲鱼肽在作为制备对辐射危害有保护功能的药中的应用。涉及分子量分布在2000DaltOn以内的甲鱼肽在作为制备对辐射危害有保护功能的药中的应用。涉及分子量分布在140 lOOODalton范围以内的甲鱼肽在作为制备对辐射危害有保护功能的药中的应用。涉及分子量分布在300 700DaltOn范围以内的甲鱼肽在作为制备对辐射危害有保护功能的药中的应用。本发明的甲鱼肽是鳖科动物鳖Trionyx sinensis Wiegmann的全体为原料制备的。为了更好地理解本发明的实质，下面将用分子量在140 lOOOODalton的甲鱼肽的药理实验及结果来说明其在制药领域的新用途。分子量小于lOOOODalton的甲鱼肽在对辐射危害有辅助保护功能的功效研究。 1.材料与方法
1. 1样品来源及处理受试药为甲鱼肽口服液干粉，Ig甲鱼肽/干粉，由江中药业股份有限公司提供，人临床服用量为4g甲鱼肽/d，100mL/d。1. 2实验动物及环境清洁级健康昆明种小鼠，雄性，体重18_22g，江西中医学院实验动物中心提供，许可证号SCXK(赣)2006 — 0001。动物饲养于江西中医学院动物室，环境许可证SYXK (赣)2004-0001,饲养环境温度21 23°C，相对湿度50 60%。1.3实验方法
1.3.1动物分组根据体重随机分为5组，每组12只。设立空白对照组，模型对照组， 甲鱼肽口服液低、中、高剂量组。1. 3. 2剂量设计甲鱼肽口服液每人每日推荐摄入量为4. 0g/60kg体重。由此推算出小鼠每日摄入量为低剂量组，0. 333g生药/kg体重；中剂量组，0. 667g生药/kg体重； 高剂量组，1. 334g生药/kg体重，分别相当于人每日摄入量的5、10和20倍。将样品以蒸馏水配制成相应浓度(0. 333g干粉/20mL、0. 667g干粉/20mL、l. 334g干粉/20mL)的灌胃液进行实验。1. 3. 3甲鱼肽口服液对辐射引起白细胞减少的影响取小鼠60只，按体重随机分成5组，空白对照组、模型对照组，甲鱼肽口服液低、中、高剂量组，每组12只。实验前各组小鼠眼眶取血20 μ L，血液分析仪计算每只小鼠白细胞数目。空白组和模型组灌胃蒸馏水， 甲鱼肽口服液各组动物灌胃给予相应试液0.2mL/10g体重，每日1次，连续30天。除空白对照组外，所有动物于第16天进行6tlCo照射，辐照剂量为5Gy。各组小鼠于辐照后第3天、 第14天眼眶取血20 μ L，血液分析仪计算每只小鼠白细胞数目。1. 3. 4甲鱼肽口服液对辐射引起骨髓有核细胞数减少和骨髓细胞DNA含量降低的影响取小鼠60只，按体重随机分成5组，空白对照组、模型对照组，甲鱼肽口服液低、中、 高剂量组，每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水，甲鱼肽口服液各组动物灌胃给予相应试液0.2mL/10g体重，每日1次，连续30天。除空白对照组外，所有动物均于第27天进行 60Co照射，辐照剂量为5Gy。各组小鼠于辐照后第3天脱颈椎处死动物，剥离出股骨，用ImL 注射器(6. 5号针头)吸取一定体积的Hank’ s液，冲出股骨中的全部骨髓细胞，然后让细胞悬液通过4号针头的注射器，让细胞在悬液中充分分散，镜下计数每mL骨髓细胞悬液中的有核细胞数。另取骨髓细胞液用紫外分光光度计于260nm处测定，计算DNA含量。1. 3. 5 甲鱼肽口服液对辐射引起血清和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性下降的影响取小鼠60只，按体重随机分成5组，空白对照组、模型对照组，甲鱼肽口服液低、中、 高剂量组，每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水，甲鱼肽口服液各组动物灌胃给予相应试液0.2mL/10g体重，每日1次，连续30天。除空白对照组外，所有动物均于第23天进行 6tlCo照射，辐照剂量为7Gy。各组小鼠于辐照后第7天取血分离血清，尔后脱颈椎处死动物， 取肝脏，SOD试剂盒检测各组小鼠红细胞及肝组织SOD活性。1. 3. 6 甲鱼肽口服液对辐射小鼠免疫功能的影响取小鼠60只，按体重随机分成5组，空白对照组、模型对照组，甲鱼肽口服液低、中、高剂量组，每组12只。空白组和模型组灌胃蒸馏水，甲鱼肽口服液各组动物灌胃给予相应试液0. 2mL/10g体重，每日1次，连续30天。除空白对照组外，所有动物均于第15天进行6tlCo照射，辐照剂量为2Gy。各组小鼠于辐照后第15天进行血清溶血素的测定，血清溶血素的测定采用血凝法，计算抗体体积数。1.4统计方法实验数据以 -±s表示，采用单因素方差分析，比较空白组、模型对照组、甲鱼肽组之间的差异，p<0. 05
判断为差异具有显著性。2 结果2.1甲鱼肽口服液对辐射引起白细胞减少的影响
试验结果见表1。与空白对照组比较，模型对照组在辐照后第3、14天WBC值明显下降， 提示造模成功。甲鱼肽口服液中、高剂量组小鼠在辐照后第3天WBC值较辐照前减少，但与模型对照组比较，其WBC值明显升高，提示甲鱼肽口服液预防给药有抑制辐射引起的WBC减少的作用。与模型对照组相比，甲鱼肽口服液中、高剂量组小鼠在辐照后第14天对小鼠WBC 值明显升高且有统计学意义，低剂量组小鼠WBC值有升高的趋势，但无统计学意义，提示甲鱼肽口服液给药有对抗辐射引起的WBC减少的作用。 表1甲鱼肽口服液对辐射引起白细胞减少的影响(^ts )
权利要求
1.甲鱼肽在制备对辐射危害有保护功能的药中的应用。
2.根据权利要求1所述的甲鱼肽，其特征在于甲鱼肽分子量分布在lOOOODalton以内。
3.根据权利要求2所述的甲鱼肽，其特征在于甲鱼肽分子量分布在2000DaltOn以内。
4.根据权利要求3所述的甲鱼肽，其特征在于甲鱼肽分子量分布在140 IOOODalton范围以内。
5.根据权利要求4所述的甲鱼肽，其特征在于甲鱼肽分子量分布在300 700DaltOn 范围以内。
全文摘要
本发明的目的在于提供一种甲鱼肽的新用途，即在制药中的新应用；本发明的另一目的是提供一种能对辐射危害有保护功能，有较高的营养价值，吸收率高，不妨害人体身体健康的药物或保健食品，本发明甲鱼低聚肽是以甲鱼为主要原料，分子量分布在10000Dalton以内的小分子肽，其中140-1000分子量范围占50%以上。
文档编号A61P39/00GK102319420SQ20111023629
公开日2012年1月18日 申请日期2011年8月18日 优先权日2011年8月18日
发明者刘根云, 卢建中, 易敏之, 钟虹光, 马莉 申请人:江中药业股份有限公司