专利名称：灯盏细辛提取物在制备具有抗氧化作用的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种灯盏细辛提取物在制备具有抗氧化作用的药物中的应用，属于制药技术领域。
背景技术：
自由基是人体生命活动中多种生化反应的中间代谢产物。细胞在正常的代谢过程中，或者受到高能辐射，以及高压氧、药物、香烟烟雾和光化学空气污染等作用，都会产生活性氧自由基。自由基是客观存在的，对人类来说，无论是体内的还是体外的，自由基都在不断地被制造出来。与自由基有关的疾病发病率也呈加速上升的趋势。随着对自由基研究的日渐深入，清除自由基，以减少自由基对人体的危害的方法也逐渐被揭示出来。研究表明，自由基从产生到衰亡的过程就是电子转移的过程。在生命体系中，电子的转移是一种最基本的运动，而氧的得电子能力很强，因此，生物体内许多化学反应都与氧有关。研究发现损害人体健康的自由基几乎都与那些活性较强的含氧物质有关，与这些物质相结合的自由基叫做活性氧自由基。活性氧自由基对人体的损害实际上是一种氧化过程。因此，要降低自由基的损害，就要从抗氧化做起。降低自由基危害的途径有两条一是，利用内源性自由基清除系统清除体内多余自由基；二是发掘外源性抗氧化剂——自由基清除剂，阻断自由基对人体的入侵。大量研究已经证实，人体内本身就具有清除多余自由基的能力，这主要是靠内源性自由基清除系统，它包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶等一些酶和维生素C、维生素E、还原性谷胱甘肽、胡萝卜素和硒等一些抗氧化剂。这些物质就深藏于我们体内，只要保持它们的量和活力它们就会发挥清除多余自由基的能力，使我们体内的自由基保持平衡。要降低自由基对人体的危害，除了依靠体内自由基清除系统外，还要寻找和发掘外源性自由基清除剂，让它们在自由基进入人体之前就先与自由基结合，以阻断外界自由基的攻击，使人体免受伤害。灯盏细辛作为云南省特有的天然药物资源，具有清除自由基、抗氧化的作用([1] 陈小夏.灯盏花素对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用[J].中药药理与临床，2001， 32(6) 18 ；[2]王征.灯盏花对急性脑梗死病人血浆中SOD、ET的影响[J].江西中医药， 2001,32(6) :18。)但目前对于灯盏细辛的抗氧化作用研究，主要集中于对药材本身或其中的黄酮类成分，尤其是灯盏乙素的抗氧化活性研究，对灯盏细辛中其它类成分涉及较少。本发明为了弥补其不足，除对灯盏乙素进行研究之外，还对灯盏细辛中其它类成分(吡喃酮类及咖啡酰类成分)也做了系统的抗氧化作用研究。
发明内容
因此，本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种灯盏细辛提取物在制备具有抗氧化作用的药物中的应用。
针对上述目的，本发明的技术方案如下
一方面，本发明提供一种灯盏细辛提取物在制备具有抗氧化作用的药物中的应用，所述提取物中含有重量百分比为61-99%的咖啡酰类物质、1-20%的吡喃酮类物质和 0-38%的黄酮类物质。
优选地，所述提取物由重量百分比为65%的咖啡酰类物质、5%的吡喃酮类物质和 30%的黄酮类物质组成。
优选地，所述咖啡酰类物质为飞蓬酯乙、3，5- 二咖啡酰基奎宁酸、4，5- 二咖啡酰基奎宁酸和1，5_ 二咖啡酰基奎宁酸中的一种或任意几种的组合物，所述吡喃酮类物质为焦袂康酸，所述黄酮类物质为灯盏乙素。
另一方面，本发明提供一种具有抗氧化作用的组合物，所述组合物含有灯盏细辛的活性成分物质，所述活性成分物质含有重量百分比为61-99%的咖啡酰类物质、1-20%的吡喃酮类物质和0-38%的黄酮类物质。
优选地，所述提取物由重量百分比为65 %的咖啡酰类物质、5 %的吡喃酮类物质和 30%的黄酮类物质组成。
优选地，所述咖啡酰类物质为飞蓬酯乙、3，5- 二咖啡酰基奎宁酸、4，5- 二咖啡酰基奎宁酸和1，5_ 二咖啡酰基奎宁酸中的一种或任意几种的组合物，所述吡喃酮类物质为焦袂康酸，所述黄酮类物质为灯盏乙素。
再一方面，本发明提供一种组合物在制备具有抗氧化作用的药物中的应用，所述药物含有上述本发明的组合物以及药学上可接受的药用载体或赋形剂。
优选地，所述药物为口服制剂或注射剂或外用制剂。
本发明明确了灯盏细辛中除灯盏乙素外，其他吡喃酮类化合物(焦袂康酸)及咖啡酰类化合物(飞蓬酯乙、3，5-二咖啡酰基奎宁酸、4，5-二咖啡酰基奎宁酸、1，5-二咖啡酰基奎宁酸)也具有抗氧化活性，由上述化合物组成的组合物也具有抗氧化活性，并且活性更强。
具体实施方式
实施例1
灯盏细辛提取物，其含有由飞蓬酯乙、3，5- 二咖啡酰基奎宁酸、4，5- 二咖啡酰基奎宁酸和1，5_ 二咖啡酰基奎宁酸组成的组合物。
实施例2
灯盏细辛提取物，其含有重量百分比含量为99%的由实施例1制得的咖啡酰类物质和1 %的吡喃酮类物质(焦袂康酸)。
实施例3
灯盏细辛提取物，其含有重量百分比含量为61%的由实施例1制得的咖啡酰类物质、的吡喃酮类物质(焦袂康酸)和38%的黄酮类物质(灯盏乙素)。
实施例4
灯盏细辛提取物，其含有重量百分比含量为61%的由实施例1制得的咖啡酰类物质、20%的吡喃酮类物质(焦袂康酸)和19%的黄酮类物质(灯盏乙素)。
实施例5灯盏细辛提取物，其含有重量百分比含量为65%的由实施例1制得的咖啡酰类物质、5%的吡喃酮类物质(焦袂康酸)和30%的黄酮类物质(灯盏乙素)。实施例6将实施例5的灯盏细辛提取物添加乳糖、淀粉、硬脂酸镁等药用载体及赋形剂，制成具有抗氧化作用的药物口服制剂。实施例7将实施例5的灯盏细辛提取物添加甘露醇、碳酸氢钠、盐酸、氯化钠等药用载体及赋形剂，制成具有抗氧化作用的药物冻干粉针剂。实施例8将实施例5的灯盏细辛提取物添加液状石蜡、硬脂酸、十六十八醇、甘油等药用载体及赋形剂，制成具有抗氧化作用的药物外用制剂。具体试验实施例1 材料1. 1实验动物昆明种小鼠，雌雄兼用，体重25士4g，由中国科学院上海实验动物中心提供，动物合格证号沪动合证字152号。1. 2主要试剂四乙氧基丙烷(TEP，Sigma公司)；硫代巴比妥酸(上海试剂二厂)；三氯乙酸(中国医药(集团)上海化学试剂公司)。1. 3试液的配制及仪器TBA溶液取0. 67g硫代巴比妥酸加IOOmL水在50°C水浴加热助溶5 10分钟； TCA溶液取三氯乙酸30g加水150mL配制而成。1. 4 仪器752C紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)；DK-8B电热恒温水槽(上海精宏实验设备有限公司)；LXJ-II离心机(上海第三医疗仪器厂)。1. 5受试药物供试验用的样品共11个，以A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K编号。Α:飞蓬酯乙；B 3,5- 二咖啡酰基奎宁酸；C 4, 5- 二咖啡酰基奎宁酸；D 1,5- 二咖啡酰基奎宁酸；E 焦袂康酸；F:灯盏乙素；G 实施例1所得灯盏细辛提取物；H 实施例2所得灯盏细辛提取物；I 实施例3所得灯盏细辛提取物；J 实施例4所得灯盏细辛提取物；K 实施例5所得灯盏细辛提取物。
样品配制方法均用2%的亚硫酸钠溶液溶解，临用时新鲜配制。
2 方法
2. 1正常小鼠组织勻浆体外过氧化脂质生成的测定设空白对照组(n = 32)和试药组(灯盏细辛提取物A K) (10 μ g/mL、30 μ g/mLU00 μ g/mL组)，每组动物数为10 12。按常规方法从小鼠中制取正常小鼠肝组织，用冷生理盐水制成10%组织勻浆。勻浆在冰浴条件下进行，每管加300 μ L，再加不同浓度药液，混勻，置37°C水浴温孵30分钟。取出后加10%三氯乙酸(TCA) 2. 5mL和0. 67%硫代巴比妥酸(TBA) lmL，置沸水浴中30分钟，流水冷却至室温，加入正丁醇4. OmL振荡混勻后于3000rpm离心10分钟，取上清液于535nm 比色测定。以标准的四乙氧基丙烷计算含量，以nmol/g组织湿重表示。
2.2数据处理实验数据用E±^D表示，Student t test进行显著性检验。
3 结果
观察A K对体外肝组织勻浆脂质过氧化生成的影响空白对照组丙二醛(MDA) 含量为81 士21nmol/g组织湿重，试药组预先与组织勻浆孵育(试管终浓度为10 μ g/mL、 30yg/mL和100yg/mL)均能明显抑制正常组织勻浆在体外脂质过氧化导致的丙二醛 (MDA)含量增加，从而抑制过氧化脂质生成。试验数据见表1。
表1灯盏细辛提取物A K对大鼠肝勻浆丙二醛(MDA)含量的影响
权利要求
1.灯盏细辛提取物在制备具有抗氧化作用的药物中的应用，所述提取物含有重量百分比为61-99%的咖啡酰类物质、1-20%的吡喃酮类物质和0-38%的黄酮类物质。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述提取物由重量百分比为65%的咖啡酰类物质、5 %的吡喃酮类物质和30 %的黄酮类物质组成。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述咖啡酰类物质为飞蓬酯乙、3， 5- 二咖啡酰基奎宁酸、4，5- 二咖啡酰基奎宁酸和1，5_ 二咖啡酰基奎宁酸中的一种或任意几种的组合物，所述吡喃酮类物质为焦袂康酸，所述黄酮类物质为灯盏乙素。
4.一种具有抗氧化作用的组合物，其特征在于，所述组合物含有灯盏细辛提取物，所述提取物中含有重量百分比为61-99%的咖啡酰类物质、1-20%的吡喃酮类物质和0-38%的黄酮类物质。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述提取物由重量百分比为65%的咖啡酰类物质、5%的吡喃酮类物质和30%的黄酮类物质组成。
6.根据权利要求4或5所述的组合物，其特征在于，所述咖啡酰类物质为飞蓬酯乙、3， 5- 二咖啡酰基奎宁酸、4，5- 二咖啡酰基奎宁酸和1，5_ 二咖啡酰基奎宁酸中的一种或任意几种的组合物，所述吡喃酮类物质为焦袂康酸，所述黄酮类物质为灯盏乙素。
7.根据权利要求4至6中任一项所述的组合物在制备具有抗氧化作用的药物中的应用，其特征在于，所述药物含有权利要求4至6任一项所述的组合物以及药学上可接受的药用载体或赋形剂。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物为口服制剂或注射剂或外用制剂。
全文摘要
本发明涉及一种灯盏细辛提取物在制备具有抗氧化作用的药物中的应用，所述提取物含有重量百分比为61-99％的咖啡酰类物质、1-20％的吡喃酮类物质和0-38％的黄酮类物质，还提供了一种具有抗氧化作用的组合物，其特征在于，所述组合物含有灯盏细辛提取物，所述提取物中含有重量百分比为61-99％的咖啡酰类物质、1-20％的吡喃酮类物质和0-38％的黄酮类物质。本发明明确了灯盏细辛中除灯盏乙素外，其他吡喃酮类化合物(焦袂康酸)及咖啡酰类化合物(飞蓬酯乙、3，5-二咖啡酰基奎宁酸、4，5-二咖啡酰基奎宁酸、1，5-二咖啡酰基奎宁酸)也具有抗氧化活性，其组合物也具有抗氧化活性，并且活性更强。
文档编号A61P39/06GK102488734SQ20111044846
公开日2012年6月13日 申请日期2011年12月28日 优先权日2011年12月28日
发明者史晓晨, 孙汉董, 张秋玲, 胡志祥, 龙祥 申请人:云南施普瑞生物工程有限公司