专利名称：：抗凝血剂抗体的制作方法
技术领域：
：本发明涉及医药领域，尤其是抗凝血剂治疗的领域。现有技术抗凝血剂为预防血液凝固的物质；即，抗凝血剂可以使血液停止凝固。抗凝血剂广泛用作治疗人血栓性疾病的药物，例如在易感者中预防原发性及继发性深静脉血栓形成、肺栓塞、心肌梗塞及中风。ー类重要的ロ服抗凝血剂通过拮抗维生素K的作用而起作用，例如包括华法林在内的香豆素类。第二类化合物通过辅因子间接抑制凝血，例如抗凝血酶III或肝素辅因子II。此包括数种低分子量的肝素产物，其通过抗凝血酶III主要催化抑制Xa因子(以及针对凝血酶的程度较小)(贝米肝素(bemiparin)、舍托肝素(certoparin)、达替肝素(dalteparin)、依诺肝素(enoxaparin)、那ノ出肝#(nadroparin)、帕肝素(parnaparin)、瑞肝素(reviparin)、亭扎肝素(tinzaparin),小链寡糖(磺达肝素(fondaparinux)、艾卓肝素(idraparinux))通过抗凝血酶III仅抑制Xa因子。类肝素(达那肝素(danaparoid)、舒洛地特(sulodexide)、硫酸皮肤素(dermatansulfate))通过两种辅因子起作用，且抑制Xa因子及凝血酶两者。第三类则为凝血的直接抑制剂。直接Xa因子抑制剂包括阿哌沙班(apixaban)、伊度沙班(edoxaban)、奥米沙班(otamixaban)、利伐沙班(rivaroxaban),且直接凝血酶抑制剂包括ニ价水蛭素(比伐卢定(bivalirudin)、来匹卢定(Iepirudin)Ji西卢定(desirudin))以及单价化合物阿加曲班(argatroban)及达比加群(dabigatran)。由于血液凝固为停止出血的生物机制，因此抗凝血剂治疗的副作用是可能发生不期望的出血事件。因此需要提供一种能够阻止所述抗凝血剂相关的出血事件发生的解毒剂(antidote)(Zikria及AnselI，CurrentOpinioninHematology2009,16(5):347-356)。一种实现此目标的方法为在给药抗凝血剂后中和患者体内所存在的抗凝血剂化合物活性。目前可使用的抗凝血剂解毒剂为鱼精蛋白(用于中和肝素)及维生素K(用于中和类似华法林的维生素K拮抗剤)。对于罹患严重创伤及严重出血且接受低分子量肝素治疗的患者而言，新鮮冷冻血浆及重组因子VIIa也可作为非特异性解毒剂使用(LauritzenB.等人，Blood，2005，607A-608A)。也有报导指出鱼精蛋白片段(美国专利第6，624，141号)及小合成肽(美国专利第6，200，955号)作为肝素或低分子量肝素解毒剤；且凝血酶突变蛋白(美国专利第6，060，300号)可用作凝血酶抑制剂的解毒齐U。已有报导指出凝血酶原中间体及衍生物可用作水蛭素及合成凝血酶抑制剂解毒剤(美国专利第5，817，309号及第6，086，871号)。对于Xa因子直接抑制剂而言，已有报导指出失活Xa因子类似物可用作解毒剂(W02009042962)。此外，重组VIIa因子已经用于逆转抗凝血酶III依赖性Xa因子之间接抑制剂(例如磺达肝素及艾卓肝素)的效应(BijsterveldNR等人，Circulation,2002，106:2550-2554;BijsterveldNR等人，BritishJ.ofHaematology,2004(124):653-658)。有关抗凝血剂逆转的方法的综述提供于Schulman及Bijsterveld,TransfusionMedicineReviews2007:21(I)，37-48中。对于抗凝血剂疗法提供改良的解毒剂存在需求，且具体地，为针对类似达比加群的直接凝血酶抑制剂提供解毒剤，该特异性解毒剂至今尚无人公开。发明概述在ー个方面中，本发明涉及一种能够中和抗凝血剂的活性的抗体分子。在另一方面中，该抗体分子针对抗凝血剂具有结合特异性。在另一方面中，该抗凝血剂为ー种直接凝血酶抑制剂、Xa因子抑制剂或维生素K拮抗剂。在另一方面中，该抗凝血剂为达比加群(dabigatran)、阿加曲班(argatroban)、美拉加群(melagatran)、希美加群(ximelagatran)、水蛭素(hirudin)、比伐卢定(bivalirudin)、来匹卢定(Iepirudin)、地西卢定(desirudin)、阿哌沙班(apixaban)、奥米沙班(otamixaban)、利伐沙班(rivaroxaban)、去纤维蛋白多核苷酸(defibrotide)、雷马曲班(ramatroban)、抗凝血酶III或Drotrecogina。在另ー实施方案中，该抗凝血剂为通式(I)的ニ取代的ニ环杂环，及其互变异构体、立体异构体及盐R3-A-Het-B-Ar-E,(I)其中A表示连接至该Het基的苯并、批唳并或噻吩并部分的羰基或磺酰基，B表示亚こ基，其中连接至该Ar基的亚甲基可经氧或硫原子或经-NR1-基置換，其中R1表不氢原子或(V4-烧基，E表示RbNH-C(=NH)-基，其中Rb表不氣原子、轻基、C1^-烧氧基擬基、环己基氧基擬基、苯基-C1J-烧氧基擬基、苯甲酰基、对-Cu-烷基-苯甲酰基或吡啶甲酰基，同时上述Cm-烷氧基羰基的2-位的こ氧基可再经Cu-烧基横酸基或2-(C^3-烧氧基)-こ基取代，Ar表示任选经氯原子或经甲基、こ基或甲氧基取代的1，4-亚苯基，或其表示2，5-亚噻吩基，Het表示I-(Cu-烷基)-2，5_亚苯并咪唑基、I-环丙基-2，5_亚苯并咪唑基、2，5-亚苯并噻唑基、I-(C1^3-烷基)_2，5-亚吲哚基、I-(C1^3-烷基)_2，5-亚咪唑并[4，5_b]吡啶基、3-((V3-烷基)-2，7-亚咪唑并[1，2-a]吡啶基或1-沁_3-烷基)-2，5-亚噻吩并[2，3-d]咪唑基，及Ra表示R2NR3-基，其中R2为Cy-烷基，其可经羧基、CV6-烷氧基羰基、苄氧基羰基、C1^3-烷基磺酰基氨基羰基或IH-四唑-5-基取代，C2_4_烧基,其经轻基、节氧基、羧基烧基氨基、CV3-烧氧基擬基烧基氨基、N-((V3-烧基)-羧基-(V3-烧基氨基或N-(C^3-烧基)"C^3-烧氧基擬基-Cu-烧基氨基取代，同时在上述基团中，与氮原子相邻的a-位的碳原子不可被取代，R3表示C3_7_环烷基、炔丙基(其中不饱和部分不可直接连接至该R2NR3基的氮原子)、任选经氟或氯原子或经甲基或甲氧基取代的苯基、任选经甲基取代的吡唑基、哒唑基(pyridazolyl)或卩比唳基,或R2及R3与在其之间的氮原子一起表示5-至7-元亚环烧亚胺基(cycloalkyleneimino),其任选经羧基或C^4-烧氧基羰基取代,其可再与苯环稠合。在另ー实施方案中，该抗凝血剂为选自以下的化合物，及其互变异构体、立体异构体及盐(a)2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并噻唑_5_甲酸-N-苯基-N-(2_羧こ基)-酰胺，(b)2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并噻唑_5_基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺，(c)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺，(d)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(3-轻基擬基丙基)-酸胺，(e)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-(2_批啶基)-N-(羟基羰基甲基)-酰胺，(f)I-甲基-2-[2_(2-甲脒基噻吩-5-基)こ基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(g)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2_批啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(h)I-甲基-2-[2-(4-甲脒基苯基)こ基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺，(i)l-甲基-2-[2-(4_甲脒基苯基)こ基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺，(j)I-甲基-2-[2-(4_甲脒基苯基)こ基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[2-(1H-四唑-5-基)こ基]-酰胺，(k)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[2-(1H-四唑-5-基)こ基]-酰胺，(1)1-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(m)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-(3-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(n)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(o)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[(N-羟基羰基こ基-N-甲基)-2-氨基こ基]-酰胺，(p)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(3_氟苯基)-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺，(q)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-(4_氟苯基)-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺，(r)I-甲基-2-[N_(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(s)I-甲基-2-[N_(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(t)I-甲基-2-[N_(4-甲脒基苯基)氨基甲基]-吲哚-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-甲氧基羰基こ基)-酰胺，(u)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)氨基甲基]-噻吩并[2.3-d]咪唑_5_基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(v)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺，(w)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2_批啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(X)I-甲基-2-[N_(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺，(y)l-甲基-2-[N-[4_(N-正己基氧基羰基脒基)苯基]-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-こ氧基羰基こ基)-酰胺。在另一方面中，本发明涉及针对达比加群、达比加群酯和/或达比加群的0-酰基葡糖苷酸的抗体分子。在另一方面中，该抗体分子为多克隆抗体、单克隆抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、抗体的片段，尤其为Fab、Fab'或F(ab')2片段、单链抗体，尤其为单链可变片段(scFv)、域抗体、纳米抗体、双价抗体(diabody)或DARPin。在另一方面中，本发明涉及ー种如上所述的抗体分子，其用于医药中。在另一方面中，本发明涉及ー种如上所述的抗体分子，其用于治疗或预防抗凝血剂疗法所产生的副作用。在另一方面中，该副作用为出血事件。在另一方面中，本发明涉及一种治疗或预防抗凝血剂疗法所产生的副作用的方法，该方法包括将有效量的如上所述抗体分子给药至有此需要的患者。在另一方面中，本发明涉及包含所述抗体分子以及容器和标签的试剂盒。图I:利用凝血酶凝血时间测试法，观察到凝血时间会随着达比加群浓度增加而增长。200nM的浓度会造成凝血时间比基线增加约5倍，且该浓度用于第一组及第二组实验中。最后ー组实验中采用500nM的浓度(超治疗浓度)。图2:四种针对达比加群的不同抗体(A至D)均可使人血浆中达比加群所延长的凝血时间中和。人血浆中的基线凝血时间为10.9秒，当使200nM达比加群与血浆预先培养时，凝血时间延长至51秒。将各抗体添加至经200nM达比加群预先培养的血浆中，并再培养5分钟。随后，通过添加凝血酶，开始凝血酶凝血时间。各抗体会以不同程度逆转达比加群的凝血时间。浓度最高的溶液会造成抗凝血活性的最大逆转。图3:将浓度递增的多克隆抗体(抗体D)添加至已与200nM达比加群预先培养的人血浆中，測量其作用。基线凝血时间为11秒，添加达比加群延长凝血时间至63.7秒。随后，测试递增浓度的抗体对逆转达比加群所延长凝血酶凝血时间的作用。最低浓度将凝血酶凝血时间降低至43.9秒。较高的浓度将凝血酶凝血时间完全降至基线水平，并造成达比加群的抗凝血作用的完全中和。添加非特异性兔多克隆抗体(方块)对逆转达比加群的抗凝血作用无影响。图4:将浓度递增的多克隆抗体(抗体D)添加至已与500nM达比加群预先培养的人血浆中，測量其影响。基线凝血时间为10.9秒，添加该较高浓度达比加群时，延长凝血时间至111.7秒(増加约10倍)。抗体的1:2稀释液或原液逆转达比加群所延长凝血酶凝血时间的效应与浓度具有相关性。最高浓度也会使凝血酶凝血时间完全逆转至基线水平，且甚至使超治疗浓度的达比加群的抗凝血作用完全中和。图5:杭-达比加群抗体分子重链可变区的序列。图6:杭-达比加群抗体分子轻链可变区的序列。图7:小鼠单克隆抗体(克隆22)逆转人血浆及人全血中达比加群的抗凝血作用。将浓度递增的小鼠单克隆抗体添加至已与30nM达比加群预先培养的人血浆或全血中。通过添加I.5至2U/ml的凝血酶开始该测试，并测量凝血时间。将存在及不存在该化合物下的凝血时间差异定义为100%达比加群活性。该抗体以剂量依赖性方式抑制达比加群-介导的凝血时间延长。图8:自克隆22抗体产生的小鼠Fab逆转人血浆中达比加群的抗凝血作用。将浓度递增的小鼠Fab添加至已与7nM达比加群预先培养的人血浆中。也测试完整抗体，作为阳性对照组。通过添加0.4U/ml的凝血酶开始该测试，并测量凝血时间。将达比加群介导的凝血时间增加的完全阻断定义为100%抑制。该Fab以剂量依赖性方式抑制人血浆中达比加群所诱发的凝血时间延长。图9:小鼠单克隆抗体(克隆22)逆转人血浆中的达比加群酰基葡糖苷酸的抗凝血作用。将浓度递增的小鼠抗体添加至已与7nM达比加群酰基葡糖苷酸或达比加群预先培养的人血浆中。通过添加0.4U/ml的凝血酶开始该测试，并测量凝血时间。将该化合物介导的凝血时间增加的完全阻断定义为100%抑制。该抗体以剂量依赖性方式抑制人血浆中达比加群酰基葡糖苷酸所诱发的凝血时间延长。图10:人源化Fab(Fab18/15)逆转人血浆中达比加群的抗凝血作用。将浓度递增的Fab18/15添加至已与7nM达比加群预先培养的人血浆中。通过添加0.4U/ml的凝血酶开始该测试，并测量凝血时间。将达比加群介导的凝血时间增加的完全阻断定义为100%抑制。该Fab以剂量依赖方式抑制人血浆中达比加群所诱发的凝血时间延长。图11:在接受达比加群的大鼠中通过在t=0时推注给药等摩尔的Fab而持续输注时的体外全血凝血酶凝血时间(3.OU/mL凝血酶)。带有实心圆圈的线表示无药物的载体治疗。带有实心方块的线表示无Fab时达比加群的抗凝血活性。带有实心三角的线表示给药Fab后的抗凝血活性。数据表示为平均值土SE,姆治疗组动物数n=4。图12:在接受达比加群的大鼠中通过在t=0时推注给药等摩尔的Fab而持续输注时的体外全血aPTT。实心圆圈表示无药物的载体治疗。带有实心方块的线表示无Fab时达比加群的抗凝血活性。带有实心三角的线表示给药Fab后的抗凝血活性。数据表示为平均值土SE，每治疗组动物数n=4。图13:在接受达比加群的大鼠中通过在t=0时推注给药剂量递增的Fab而持续输注时的体外全血凝血酶凝血时间(3.OU/mL凝血酶)。带有实心圆圈的线表示无药物的载体治疗。带有实心方块的线表示无Fab时达比加群的抗凝血活性。带有实心三角的实线表示等摩尔给药Fab后的抗凝血活性,带有实心三角的虚线表示给药等摩尔剂量的50%的Fab后的抗凝血活性。数据表示为平均值土SE,姆治疗组动物数n=4。图14:在接受达比加群的大鼠中通过在t=0时推注给药剂量递增的Fab而持续输注时的体外全血aPTT。实心圆圈线表示无药物的载体治疗。带有实心方块的线表示无Fab时达比加群的抗凝血活性。带有实心三角的实线表示等摩尔给药Fab后的抗凝血活性,带有实心三角的虚线表示给药等摩尔剂量的50%的Fab后的抗凝血活性。数据表示为平均值土SE，每治疗组动物数n=4。发明详述在ー个方面中，本发明涉及一种能够中和抗凝血剂的活性的抗体分子。抗体(也称为免疫球蛋白，缩写为Ig)为发现于脊椎动物血液或其他体液的Y球蛋白，且可通过免疫系统用以识别及中和外来物体，例如细菌及病毒。所述抗体通常为由各具有两个大重链及两个小轻链的基本结构单元所组成，以形成(例如)具有I个单元的单体、具有2个单元的ニ聚体或具有5个单元的五聚体。抗体可通过非共价键相互作用而结合至称为抗原的其他分子或结构。此结合是特异性的，也就是抗体会以高亲和力方式仅结合至特定结构。被抗体所识别的抗原的独特部分称为抗原表位或抗原决定基。结合至该抗原表位的抗体部分有时称为互补位，其位于该抗体的所谓的可变域或可变区(Fv)中。该可变域包括三个被骨架区(FR)隔开的所谓的互补决定区(CDR)。在本发明上下文中，所提及的⑶R是根据Chothia的定义(Chothia及Lesk,J.Mol.Biol.1987，196:901917)以及Kabat(E.A.Kabat,T.T.Wu、H.Bilofsky、M.Reid-Miller,S.H.Perry,SequenceofProteinsofImmunologicalInterest,NationalInstitutesofHealth,Bethesda(1983))。本领域已经进ー步开发出抗体，且使所述抗体成为医学及技术中具有多功能的エ具。因此，在本发明上下文中，术语“抗体分子”或“抗体”(本文作为同义词使用)并不只包括自然界中所发现的抗体(该抗体包括例如两条轻链及两条重链，或仅包括两条重链(如在骆驼物种中))，也包括所有包含至少ー个具有抗原结合特异性的互补位及具有与免疫球蛋白可变域类似结构的分子。因此，本发明的抗体分子可为多克隆抗体、单克隆抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、抗体的片段，尤其为Fv、Fab、Fab'或F(ab')2片段、单链抗体，尤其为单链可变片段(scFv)、小模块免疫药物(SMIP)、域抗体、纳米抗体、双价抗体。多克隆抗体是指具有不同氨基酸序列的抗体分子的集合，且可通过本领域公知的方法，从接受抗原免疫的脊椎动物的血液中获得。单克隆抗体(mAb或moAb)为氨基酸序列相同的单ー特异性抗体，单克隆抗体可通过杂交瘤技术,从被称为杂交瘤的杂交细胞株制备产生的，该称为杂交瘤的杂交细胞是指可产生特异性抗体的B细胞与骨髄瘤(B细胞癌)细胞融合的克隆(KohlerG、MilsteinC，Continuousculturesoffusedcellssecretingantibodyofpredefinedspecificity.Nature1975；256:495-7)。或者，单克隆抗体可通过在宿主细胞中的重组表达法制备(NorderhaugL、OlafsenT、MichaelsenTE、SandlieI.(1997年5月)，“Versatilevectorsfortransientandstableexpressionofrecombinantantibodymoleculesinmammaliancells”，JImmunolMethods204(1):77-87;參见下文)。对人的应用而言，往往需要降低源自其他物种(如小鼠)的抗体的免疫原性。这可通过构建嵌合抗体，或通过称为“人源化”的方法来实现。在本文中，“嵌合抗体”应理解成将包含衍生自一种物种(例如小鼠)的序列部分(例如可变域)融合至衍生自不同物种(例如人)的序列部分(例如恒定域)的抗体。“人源化抗体”为ー种包括源自非人物种可变域的抗体，其中某些氨基酸发生突变，使该可变域整体序列更类似接近于人可变域的序列。抗体的嵌合化及人源化的方法也是本领域公知的(BillettaR、LobuglioAF,“Chimericantibodies”IntRevImmunol.1993;10(2-3):165-76；RiechmannL、ClarkM、WaldmannH>WinterG(1988),“Reshapinghumanantibodiesfortherapy”，Nature:332:323)。此外，已经开发基于衍生自人基因组序列的产生抗体的技术，例如通过噬菌体展不技术或使用转基因动物(W090/05144；D.Marks>H.R.Hoogenboom>T.P.Bonnert>J.McCafferty>A.D.Griffiths及G.Winter(1991),“By-passingimmunisation.HumanantibodiesfromV-genelibrariesdisplayedonphage.，’J.Mol.Biol.，222，581-597；Knappik等人，J.Mol.Biol.296:57-86,2000；S.Carmen及L.Jermutus,“Concep·tsinantibodyphagedisplay”，BriefingsinFunctionalGenomicsandProteomics20021(2):189-203；LonbergN、HuszarD,“Humanantibodiesfromtransgenicmice，，，IntRevImmunol.1995；13(I):65-93；BriiggemannM、TaussigMJ,“Productionofhumanantibodyrepertoiresintransgenicmice，，,CurrOpinBiotechnol.1997年8月，8(4)455-8)。所述抗体为本发明上下文中的“人抗体”。本发明的抗体分子也包括保持抗原结合特性的免疫球蛋白片段，如Fab、Fab'或F(ab')2片段。通过免疫球蛋白的断裂(例如通过蛋白消化)或通过重组表达所述片段可获得所述片段。例如通过常规技术，例如使用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶(W094/29348)或内切蛋白酶Lys-C(Kleemann等人，Anal.Chem.80,2001-2009,2008)可实现免疫球蛋白消化作用。以木瓜蛋白酶或Lys-C消化抗体通常会产生两个相同的称为Fab片段的抗原结合片段(每一片段具有単一的抗原结合位点)及残留的Fe片段。经胃蛋白酶处理则会产生F(ab/)2。通过宿主细胞中重组表达制备Fab分子的方法详细说明于下文中。已开发出多种技术以将免疫球蛋白可变域或衍生自所述可变域的分子置于不同的分子背景内。根据本发明，这些也应视为“抗体分子”。一般而言，这些抗体分子在尺寸上小于免疫球蛋白，且包括单ー氨基酸链或由数条氨基酸链组成。例如单链可变片段(scFv)为免疫球蛋白重链及轻链的可变区的融合体，利用短接头(通常为丝氨酸(S)及甘氨酸(G))连在一起(W088/01649；W091/17271;Huston等人，InternationalReviewsofImmunology,第10卷，1993，195-217)。“单域抗体”或“纳米抗体”在单一的Ig样域中具有抗原结合位点(W094/04678；W003/050531；ffard等人，Nature.1989年10月12日；341(6242):544-6;Revets等人，ExpertOpinBiolTher.5(1):111-24,2005)。可将ー或多个具有针对相同或不同抗原的结合特异性单域抗体连在一起。双价抗体为由两条氨基酸链组成的ニ价抗体分子，其包含两个可变域(W094/13804;Holliger等人，ProcNatlAcadSciUSA.1993年7月15日；90(14):6444-8)。抗体样分子的其他实例为免疫球蛋白超家族抗体(IgSF;Srinivasan及Roeske,CurrentProteinPept.Sci.2005,6(2):185-96)。有ー种不同概念产生所谓的小模块免疫药物(SMIP)，其包括连接至单链铰链的Fv域及缺乏恒定域CHl的效应子结构域(W002/056910)。在另一方面中，本发明的抗体分子甚至可能与免疫球蛋白可变域仅具有远距结构相关性，或根本没有所述相关性，只要其具有相当于免疫球蛋白可变域的特定的结合特异性及亲和カ即可。所述非免疫球蛋白“抗体模拟物”(有时称为“支架蛋白”)可能基于A蛋白、载脂蛋白、纤维结合蛋白域、锚蛋白通用序列重复域及硫氧还蛋白的基因(Skerra，CurrentOpinioninBiotechnology2007,18(4):295-304)。本发明上下文中的优选实施方案为经设计的锚蛋白重复蛋白(DARPin's；Steiner等人，JMolBiol.2008年8月24日；382(5):1211-27；StumppMT、AmstutzP,CurrOpinDrugDiscovDevel.2007年3月；10(2):153-9)。可将抗体分子融合(成为融合蛋白)或另外连接(通过共价键或非共价键)至对该抗体分子的特性具有所需影响的其他分子实体。例如可能需要改善抗体分子的药代动力学性质、例如体液(如血液)中的稳定性，特别是在单链抗体或域抗体的情况下。已在此方面开发诸多技术，尤其为延长所述抗体分子在循环中的半衰期，如聚こニ醇化(W098/25971；W098/48837；W02004081026);将抗体分子融合或共价连接至对血清蛋白(如白蛋白)具有亲和カ的另ー抗体分子(W02004041865;W02004003019);或使抗体分子表达为具有全部或部分血清蛋白(如白蛋白或转铁蛋白)的融合蛋白(W001/79258)。在另一方面中，抗体分子对抗凝血剂具有结合特异性。“结合特异性”指抗体分子对该抗凝血剂的结合亲和カ显著高于对结构上无关的分子的结合亲和力。亲和カ为抗体分子上的単一抗原结合位点与単一抗原表位之间的相互作用。其以缔合常数KA=kass/kdiss或解尚常数KD=kdiss/kass表不。在本发明的一方面中，如通过表面等离子共振分析法(MalmqvistM.,“Surfaceplasmonresonanceiordetectionandmeasurementoiantibody-antigenaffinityandkinetics.”，CurrOpinImmunol.1993Apr;5(2):282-6)所测定，该抗体与抗凝血剂的结合亲和性的Kd值范围为0.IpM至IOOiiM,优选为IpM至IOOiiM,优选为IpM至IiiM。也可使用动态排除分析(KinExA)技术，测量抗体亲和性(Dariing,R.J.及BraultP_A.,“KineticexclusionassaytechnologyCnaracterizationofMolecularInteractions.”，ASSAYandDrugDevelopmentTechnologies.2004年12月，2(6)647-657)。可通过称为亲和性成熟的方法来增强抗体分子的结合亲和性(Marks等人，1992，Biotechnology10:779-783;Barbas,等人，1994，Proc.Nat.Acad.Sci,USA91:3809-3813；Shier等人，1995，Gene169:147-155)。因此，本发明也包括亲和性成熟的抗体。在本发明另一方面中，该抗体分子能够中和抗凝血剂的活性。即，在与该抗体分子结合之后，该抗凝血剂即无法发挥其抗凝血活性，或此活性程度已显著下降。优选地，当针对所讨论的抗凝血剂采用适当的活性分析，特别是采用对凝血酶敏感的凝血分析，如蛇静脉酶(ecarin)凝血时间或凝血酶凝血时间测定时(H.Bounameaux、MarbetGA、LammleB,等人，“Monitoringofheparintreatment.Comparisonofthrombintime,activtedpartialthromboplastintime,andplasmaheparinconcentration,andanalysisofthebehaviourofantithrombinIII，，，AmericanJournalofClinicalPathology198074(1):68-72)，抗体结合后的抗凝血活性会下降至少2倍、5倍、10倍或100倍。为了制备本发明的抗体分子，本领域技术人员可自多种本领域公知的方法中选择(Norderhaug等人，JTmmunoIMethods1997,204(I)77-87；Kipriyanow及LeGall,MolecularBiotechnology26:39-60,2004；Shukla等人，2007，J.ChromatographyB,848(1):28-39)。抗凝血剂为本领域公知的，如上文所述。在本发明另一方面中，该抗凝血剂为直接凝血酶抑制剂、Xa因子抑制剂或维生素K拮抗剂。维生素K拮抗剂的实施例为包括华法林在内的香豆素类。Xa因子的间接主要抑制剂的实例为通过抗凝血酶III的活化产生作用的肝素类物质，其包括数种低分子量的肝素产物(贝米肝素(bemiparin)、舍托肝素(certoparin)、达替肝素(dalteparin)、依诺肝素(enoxaparin)、那屈肝素(nadroparin)、帕肝素(parnaparin)、瑞肝素(reviparin)、亭扎肝素(tinzaparin))、某些寡糖(磺达肝素(fondaparinux)、艾卓肝素(idraparinux))、类肝素(达那肝素(danaparoid)、舒洛地特(sulodexide)、硫酸皮肤素(dermatansulfate)),及直接Xa因子抑制剂(阿哌沙班(apixaban)、奥米沙班(otamixaban)、利伐沙班(rivaroxaban))。凝血酶抑制剂的实施例包括ニ价水蛭素(比伐卢定(bivalirudin)、来匹卢定(Iepirudin)、地西卢定(desirudin))、及单价化合物阿加曲班(argatroban)及达比加群(dabigatran)。因此，在另一方面中，该抗凝血剂为达比加群、阿加曲班、美拉加群、希美加群、水蛭素、比伐卢定、来匹卢定、地西卢定、阿哌沙班、伊度沙班、奥米沙班、利伐沙班、去纤维蛋白多核苷酸、雷马曲班、抗凝血酶III或Drotrecogina。在另ー实施方案中，该抗凝血剂为通式(I)的ニ取代的ニ环杂环，及其互变异构体、立体异构体及盐R3-A-Het-B-Ar-E,(I)其中A表示连接至该Het基的苯并、卩比唳并或噻吩并部分的羰基或磺酰基，B表示亚こ基，其中连接至该Ar基的亚甲基可经氧或硫原子或经-NR1-基置換，其中R1表不氢原子或C^4-烧基，E表示RbNH-C(=NH)-基，其中Rb表不氣原子、轻基、C1^-烧氧基擬基、环己基氧基擬基、苯基-C1J-烧氧基擬基、苯甲酰基、对-Cu-烷基-苯甲酰基或吡啶甲酰基，同时上述Cm-烷氧基羰基的2-位的こ氧基可再经Cu-烧基横酸基或2-(C^3-烧氧基)-こ基取代，Ar表示任选经氯原子或经甲基、こ基或甲氧基取代的1，4-亚苯基，或其表示2，5-亚噻吩基，Het表示I-((^3-烷基)-2，5_亚苯并咪唑基、I-环丙基-2，5_亚苯并咪唑基、2，5-亚苯并噻唑基、I-(C1^3-烷基)_2，5-亚吲哚基、I-(C1^3-烷基)_2，5-亚咪唑并[4，5_b]吡啶基、3-((V3-烷基)-2，7-亚咪唑并[1，2-a]吡啶基或1-沁_3-烷基)-2，5-亚噻吩并[2，3-d]咪唑基，及Ra表示R2NR3-基，其中R2为Cy-烷基，其可经羧基、CV6-烷氧基羰基、苄氧基羰基、C1^3-烷基磺酰基氨基羰基或IH-四唑-5-基取代，C2_4_烧基,其经轻基、节氧基、羧基烧基氨基、CV3-烧氧基擬基烧基氨基、N-((V3-烧基)-羧基-(V3-烧基氨基或N-(C^3-烧基)"C^3-烧氧基擬基-Cu-烧基氨基取代，同时在上述基团中，与氮原子相邻的a-位的碳原子不可被取代，R3表示C3_7_环烷基、炔丙基(其中不饱和部分不可直接连接至该R2NR3基的氮原子)、任选经氟或氯原子或经甲基或甲氧基取代的苯基、任选经甲基取代的吡唑基、哒唑基或吡啶基，或R2及R3与在其之间的氮原子一起表示5-至7-元亚环烷亚胺基，其任选经羧基或(V4-烷氧基羰基取代，其可再与苯环稠合。式(I)化合物、其制备及其用作抗凝血剂的用途公开于W098/37075中。在另ー实施方案中，该抗凝血剂为选自以下的化合物，及其互变异构体、立体异构体及盐(a)2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并噻唑-5-甲酸-N-苯基-N-(2_羧こ基)-酰胺、(b)2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并噻唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺、(C)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺、(d)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(3-轻基擬基丙基)-酸胺、(e)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-(2_批啶基)-N-(羟基羰基甲基)-酰胺、(f)I-甲基-2-[2_(2-甲脒基噻吩-5-基)こ基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(g)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-批啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(h)I-甲基-2-[2-(4-甲脒基苯基)こ基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺、(i)l-甲基-2-[2-(4_甲脒基苯基)こ基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺、(j)I-甲基-2-[2-(4_甲脒基苯基)こ基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[2-(1H-四唑-5-基)こ基]-酰胺、(k)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[2-(1H-四唑-5-基)こ基]-酰胺、(1)1-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(m)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-(3-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(n)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(0)1-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[(N-羟基羰基こ基-N-甲基)-2-氨基こ基]-酰胺、(p)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(3-氟苯基)-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺、(q)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑_5_基-甲酸-N-(4_氟苯基)-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺、(r)l-甲基-2-[N_(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(S)l-甲基-2-[N_(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(t)l-甲基-2-[N_(4-甲脒基苯基)氨基甲基]-吲哚-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-甲氧基羰基こ基)-酰胺、(u)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)氨基甲基]-噻吩并[2.3-d]咪唑_5_基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(V)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基こ基)-酸胺、(w)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2_批啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(X)l-甲基-2-[N_(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基こ基)-酰胺、(y)l-甲基-2-[N-[4_(N-正己基氧基羰基脒基)苯基]-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-こ氧基羰基こ基)-酰胺。本发明上下文中优选的抗凝血剂为达比加群(CAS211914-51-1，N-[2-(4-甲脒基苯基氨基甲基)-I-甲基-IH-苯并咪唑-5-基羰基]-N-(2-吡啶基)-@-丙氨酸)，其具有化学式(II)权利要求1.一种抗体分子，其能够中和抗凝血剂的活性。2.权利要求I的抗体分子，其中该抗体分子针对所述抗凝血剂具有结合特异性。3.权利要求I或2的抗体分子，其中所述抗凝血剂为直接凝血酶抑制剂、Xa因子抑制剂或维生素K拮抗剂。4.前述权利要求中任一项的抗体分子，其中所述抗凝血剂为达比加群、阿加曲班、美拉加群、希美加群、水蛭素、比伐卢定、来匹卢定、地西卢定、阿哌沙班、奥米沙班、利伐沙班、去纤维蛋白多核苷酸、雷马曲班、抗凝血酶III或Drotrecogin-a。5.前述权利要求中任一项的抗体分子，其中所述抗凝血剂为具有通式(I)的二取代的二环杂环，或其互变异构体、立体异构体及盐R3-A-Het-B-Ar-E,(I)其中A表示连接至该Het基的苯并、吡啶并或噻吩并部分的羰基或磺酰基，B表示亚乙基，其中连接至该Ar基的亚甲基可经氧或硫原子或经-NR1-基置换，其中R1表不氢原子或CV4-烧基，E表示RbNH-C(=NH)-基，其中Rb表不氧原子、轻基、C^9-烧氧基擬基、环己基氧基擬基、苯基-(V3-烧氧基擬基、苯甲酰基、对-Cu-烷基-苯甲酰基或吡啶甲酰基，同时上述C^9-烷氧基羰基的2-位的乙氧基可再经C1--烧基横酸基或2-(C1--烧氧基)-乙基取代，Ar表示任选经氯原子或经甲基、乙基或甲氧基取代的1，4-亚苯基，或其表示2，5-亚噻吩基，Het表示I-(Cu-烷基)-2，5-亚苯并咪唑基、I-环丙基-2，5-亚苯并咪唑基、2，5-亚苯并噻唑基、I-((V3-烷基)-2，5-亚吲哚基、I-(C1^3-烷基)_2，5-亚咪唑并[4，5-b]吡啶基、3-((V3-烷基)-2，7-亚咪唑并[I,2-a]吡啶基或I-(Cp3-烷基)-2，5-亚噻吩并[2,3-d]咪唑基，及Ra表示R2NR3-基，其中R2为CV4-烷基，其可经羧基、CV6-烷氧基羰基、苄氧基羰基、CV3-烷基磺酰基氨基羰基或IH-四唑-5-基取代，C2-4~烧基，其可经轻基、节氧基、羧基-C1--烧基氨基、CV3-烧氧基擬基烧基氨基、N-((V3-烧基)-羧基-(V3-烧基氨基或N-(C^3-烧基)-C1--烧氧基擬基烧基氨基取代，同时在上述基团中，与氮原子相邻的a-位的碳原子不可被取代，R3表示C3_7_环烷基、炔丙基、任选经氟或氯原子或经甲基或甲氧基取代的苯基、任选经甲基取代的吡唑基、哒唑基或吡啶基，所述炔丙基中的不饱和部分不可直接连接至该R2NR3基的氮原子，或R2及R3与在其之间的氮原子一起表示5-至7-元亚环烷亚胺基，其任选经羧基或CV4-烷氧基羰基取代，其可再与苯环稠合。6.权利要求5的抗体分子，其中所述抗凝血剂为选自以下的化合物(a)2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并噻唑-5-甲酸-N-苯基-N-(2-羧乙基)-酰胺、(b)2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并噻唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基乙基)-酸胺，(c)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基乙基)-酸胺，(d)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(3-轻基擬基丙基)-酸胺，(e)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(羟基羰基甲基)-酰胺，(f)l-甲基-2-[2-(2-甲脒基噻吩-5-基)乙基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-批啶基)-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(g)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-轻基擬基乙基)-酸胺，(h)l-甲基-2-[2-(4-甲脒基苯基)乙基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-轻基擬基乙基)-酸胺，(i)l-甲基-2-[2-(4-甲脒基苯基)乙基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(j)I-甲基-2-[2-(4-甲脒基苯基)乙基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-酰胺，(k)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-酰胺，(1)1-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(m)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(3-吡啶基)-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(n)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-N-甲基-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(0)1-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-[(N-羟基羰基乙基-N-甲基)-2-氨基乙基]-酰胺，(P)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(3-氟苯基)-N-(2-轻基擬基乙基)-酸胺，(q)l-甲基-2-[N_(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(4-氟苯基)-N-(2-轻基擬基乙基)-酸胺，(r)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(s)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(t)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)氨基甲基]-吲哚-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-甲氧基羰基乙基)-酰胺，(U)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)氨基甲基]-噻吩并[2.3-d]咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(V)I-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-苯基-N-(2-轻基擬基乙基)-酸胺，(w)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-轻基擬基乙基)-酸胺，(x)l-甲基-2-[N-(4-甲脒基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-羟基羰基乙基)-酰胺，(y)l-甲基-2-[N-[4-(N-正己基氧基羰基脒基)苯基]-氨基甲基]-苯并咪唑-5-基-甲酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-乙氧基羰基乙基)_酰胺，其互变异构体、立体异构体及盐。7.权利要求2的抗体分子，其中所述抗凝血剂为达比加群。8.权利要求7的抗体分子，其能够中和达比加群及达比加群的1-0-酰基葡糖苷酸的活性。9.权利要求5至8中任一项的抗体分子，其包含具有选自SEQIDNO:I及SEQIDNO:2的CDR1，选自SEQIDNO:3,SEQIDNO:4,SEQIDNO:5,SEQIDNO:6,SEQIDN0:7及SEQIDN0:8的CDR2，以及选自SEQIDNO:9及SEQIDNO:10的CDR3的重链可变域，以及具有选自SEQIDNO:IUSEQIDNO:12及SEQIDNO:13的CDRl，SEQIDNO:14的CDR2及SEQIDNO:15的CDR3的轻链可变域。10.权利要求9的抗体分子，其包含具有SEQIDNO:I的CDR1，选自SEQIDN0:6、SEQIDN0:7及SEQIDNO:8的CDR2、SEQIDNO:10的CDR3的重链可变域，及具有SEQIDNO:13的CDRl，SEQIDNO:14的CDR2，SEQIDNO:15的CDR3的轻链可变域。11.权利要求9或10的抗体分子，其包含选自SEQIDN0:16、18、20、22、24及26的重链可变域，及选自SEQIDN0:17、19、21、23、25及27的轻链可变域。12.权利要求11的抗体分子，其包含SEQIDNO:16的重链可变域，及SEQIDNO:17的轻链可变域；或SEQIDNO:18的重链可变域，及SEQIDNO:19的轻链可变域；或SEQIDNO:20的重链可变域，及SEQIDNO:21的轻链可变域；或SEQIDNO:22的重链可变域，及SEQIDNO:23的轻链可变域；或SEQIDNO:24的重链可变域，及SEQIDN0:25的轻链可变域；或SEQIDNO:24的重链可变域，及SEQIDNO:27的轻链可变域；或SEQIDNO:26的重链可变域，及SEQIDN0:27的轻链可变域。13.前述权利要求中任一项的抗体分子，其为多克隆抗体、单克隆抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、抗体的片段，尤其为Fab、Fab'或F(ab')2片段、单链抗体，尤其为单链可变片段(scFv)、小模块免疫药物(SMIP)、域抗体、纳米抗体、双价抗体或经设计的锚蛋白重复蛋白(DARPin)。14.权利要求13的抗体分子，其为scFv，其中该重链可变域及轻链可变域通过选自SEQIDNO:28、SEQIDNO:29、SEQIDNO:30及SEQIDNO:31的连接肽连接。15.权利要求14的抗体分子，其包含SEQIDN0:32或SEQIDN0:33。16.权利要求13的抗体分子，其具有包含SEQIDN0:34或SEQIDNO:40的重链及包含SEQIDNO:35的轻链，或其具有包含SEQIDNO:42的重链及包含SEQIDNO:43的轻链。17.权利要求13的抗体，其为具有包含SEQIDNO:36,SEQIDN0:38或SEQIDNO:41的Fd片段，及包含SEQIDN0:37或SEQIDNO:39的轻链的Fab分子。18.前述权利要求中任一项的抗体分子，其用于医药中。19.前述权利要求中任一项的抗体分子，其用于治疗或预防抗凝血剂疗法的副作用，和/或用于逆转抗凝血剂的过量。20.权利要求19的抗体分子，其中所述副作用为出血事件。21.治疗或预防抗凝血剂疗法的副作用或抗凝血疗法过量事件的方法，该方法包括向有此需要的患者给药有效量的前述权利要求中任一项的抗体分子。22.制备前述权利要求中任一项的抗体分子的方法，其包括(a)提供宿主细胞，其包含一或多个编码与表达调控序列功能相关的抗体分子的核酸，(b)培养该宿主细胞,及(C)自该细胞培养物回收该抗体分子。23.试剂盒，其包括权利要求I至20中任一项的抗体，或其药物组合物。24.试剂盒，其包括(a)权利要求I至20中任一项的抗体或其药物组合物；(b)容器,和(C)标签。25.试剂盒，其包括权利要求7至20中任一项的抗体，以及达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐。26.权利要求25的试剂盒，其中达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐的形式为固体、液体或凝胶的形式。27.权利要求25的试剂盒，其中所述达比加群酯的药学上可接受的盐为甲磺酸盐。28.权利要求25或27的试剂盒，其中达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐每剂量单位的规格为75mg至300mg,以每天一次或每天两次给药。29.试剂盒，其包括(a)权利要求7至20中任一项的抗体或其药物组合物，(b)达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐的药物组合物，(C)容器,和(d)标签。30.权利要求29的试剂盒，其中达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐的形式为固体、液体或凝胶的形式。31.权利要求29的试剂盒，其中所述达比加群酯的药学上可接受的盐为甲磺酸盐。32.权利要求29或31的试剂盒，其中达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐每剂量单位的规格为75mg至300mg,以每天一次或每天两次给药。33.试剂盒，其包括(a)第一药物组合物，其包含达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐；(b)第二药物组合物，其包含权利要求7至20中任一项的抗体；(c)指示将所述第一和第二药物组合物分别给药于患者的说明书，其中所述第一和第二药物组合物包含于分别的容器中，且将所述第二药物组合物给药于需要中和或部分中和达比加群或达比加群的1-0-酰基葡糖苷酸的患者。34.一种在正在接受达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐治疗的患者中，中和或部分中和达比加群或达比加群的1-0-酰基葡糖苷酸的方法，该方法包括给药权利要求7至20中任一项的抗体或其药物组合物。35.一种在患者中中和或部分中和达比加群或达比加群的1-0-酰基葡糖苷酸的方法，该方法包括(a)确认患者正在接受达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐治疗，且确认该患者服用的量；(b)在进行凝固或凝血试验或分析之前，用权利要求7至20中任一项的抗体中和达比加群或其1-0-酰基葡糖苷酸，其中达比加群或达比加群的1-0-酰基葡糖苷酸将干扰该试验结果或分析结果的精确读数；(c)使用来自患者的样品进行该凝固或凝血试验或分析，以确定达比加群或达比加群的1-0-酰基葡糖苷酸不存在的情况下血块形成的水平；和(d)调节达比加群、达比加群酯、达比加群的前药或其药学上可接受的盐给药患者的量，以在患者中达到血块形成和分解之间的适当平衡。36.权利要求34或35的方法，其中抗体与达比加群或达比加群的1-0-酰基葡糖苷酸的摩尔比介于0.I至100之间。37.权利要求36的方法，其中抗体与达比加群或达比加群的1-0-酰基葡糖苷酸的摩尔比介于0.I至10之间。38.权利要求35的方法，其中该试验结果或分析结果的精确读数为纤维蛋白原水平、活化蛋白C抵抗或相关测试的精确读数。全文摘要本发明涉及对抗抗凝血剂、特别是对抗达比加群的抗体分子，以及所述抗体分子作为此类抗凝血剂的解毒剂的用途。文档编号A61K39/00GK102711813SQ201180006616公开日2012年10月3日申请日期2011年1月20日优先权日2010年1月20日发明者A.沃特曼,J.E.帕克,J.范里,K.卡纳达,N.豪尔,S.辛,T.利曾伯格,U.孔兹申请人:贝林格尔.英格海姆国际有限公司