心脏病症的治疗的制作方法

文档序号:906029阅读:539来源:国知局
专利名称:心脏病症的治疗的制作方法
技术领域
本发明涉及化合物(通常是胰高血糖素-GLP-I双重激动剂(dual agonist)化合物)作为变力剂用于治疗心功能障碍(cardiac dysfunction)的用途。
背景技术
正性变力剂(positive inotropic agent)用于改善血液动力学参数,并因而在患有心肌梗死、心力衰竭或心源性休克的患者中减轻症状以及保护终末器官。心脏需要大量的化学能以支持收缩和舒张工作。因此,通过提高心脏工作,变力剂还增加心脏的能量需求。然而,衰竭或患病的心脏通常是能量短缺的(Ingwall, JS和Weiss, RG. CircRes. 2004 ;95 :135-145),因此使用变力剂可导致能量耗竭以及最终提高死亡率(Hamad,E等人 American Journal of Cardiovascular Drugs. 2007 ;7 :235-248 ;ffhite, CM. J ClinPharmacol. 1999;39 :442-447)。前胰高血糖素原(pr印roglucagon)是158个氨基酸的前体多肽,其在组织中经差异化加工形成多种结构上相关的胰高血糖素原衍生的肽,包括胰高血糖素(Glu)、胰高血糖素样肽-I (GLP-I)、胰高血糖素样肽-2 (GLP-2)和胃泌酸调节素(oxyntomodulin,0ΧΜ)。这些分子参与广泛的生理功能,包括葡萄糖稳态、胰岛素分泌、胃排空和肠生长,以及食物摄入的调节。GLP-I的主要生物活性片段是作为30个氨基酸的、C末端酰胺化的肽而产生的,其对应于前胰高血糖素原的第98至127位氨基酸。GLP-I是在肠上皮内分泌L-细胞中通过差异化加工胰高血糖素原而产生的,其是通常由肠的神经内分泌细胞响应于食物而分泌的激素。它甚至在患有长期的2型糖尿病的对象中提高β细胞释放胰岛素。GLP-I治疗比胰岛素治疗有优势,这是因为GLP-I刺激内源性胰岛素分泌,这在血糖水平降低时关闭。通过提高胰岛素的释放和和合成、抑制胰高血糖素的释放以及降低胃排空,GLP-I促进血糖正常。已在正常和缺血后大鼠的心脏(Zhao,T等人 J Pharmacol Exp Ther. 2006 ;317 :1106-1113)、分离的小鼠心脏(Ban, K等人Circulation. 2008 ;117 :2340-2350)以及在患有扩张型心肌病的意识清醒的狗中发现 GLP-I (Hoist,JJ. Physiol Rev. 2007 ;87 =1409-1439)以胰岛素依赖的方式提高心肌的葡萄糖摄取(Nikolaidis, LA等人Am J Physiol HeartCirc Physiol. 2005 ;289 :H2401_H2408 ;Nikolaidis, LA 等人 Circulation. 2004 ;110 955-961)。胰高血糖素是29个氨基酸的肽,其对应于前胰高血糖素原的第53至81位氨基酸,并具有如下序列His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (化合物 I)。膜高血糖素通过与肝细胞上的胰高血糖素受体结合、引起肝通过糖原分解而释放以糖原形式储存的葡萄糖,从而帮助维持血液中的葡萄糖水平。随着这些储备的耗尽,胰高血糖素刺激肝通过糖异生合成额外的葡萄糖。该葡萄糖被释放到血流中,防止低血糖的发生。
胰高血糖素具有周知的对心脏的变力作用(Buse,MG等人J Biol Chem. 1973 ;248 :697-706 ;Farah, A和Tuttle,R. J Pharmacol Exp Ther. 1960;129 :49-55 ;Levey,GS和Epstein, SE. Circ Res. 1969 ;24 :151-156 ;Mayer, SE 等人 Circ Res. 1970 ;26 :225-233)。胃泌酸调节素(OXM)是37个氨基酸的肽,其包含胰高血糖素之完整的29个氨基酸序列以及8肽的羧基末端延伸(前胰高血糖素原的第82至89位氨基酸,序列为Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala (化合物 2),称为“插入妝 I (intervening peptide I) ” 或“IP-1” ;因此,人胃泌酸调节素的完整序列是 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala)(化合物3)。OXM响应于食物摄入并且与膳食卡路里含量成比例地释放到血液中。已显示OXM在人中抑制食欲并且抑制食物摄取(Cohen等人,Journal of Endocrinology and Metabolism,88,4696-4701,2003 ;W0 2003/022304)。除了这些与GLP-I类似的厌食作用之外,OXM—定是还通过另一种机制影响体重,因为用胃泌酸调节素处理的大鼠表现出比配对饲喂(pair-fed)之大鼠更少的体重增长(Bloom,Endocrinology 2004,145,2687)。 OXM活化胰高血糖素受体和GLP-I受体,对胰高血糖素受体的效力比对GLP-I受体的效力高出两倍,但是比天然胰高血糖素和GLP-I针对其各自受体的效力要低。胰高血糖素还能活化这两种受体,只是对胰高血糖素受体的偏好性比对GLP-I受体的要高。另一方面,GLP-I不能活化胰高血糖素受体。还不清楚胃泌酸调节素的作用机制。特别地,不清楚该激素的作用是否仅通过胰高血糖素受体和GLP-I受体而介导,还是通过一种或更多种尚未鉴定出的受体来介导。胃泌酸调节素在鳗鱼中的类似物似乎对鳗鱼心脏具有变力作用(Uesaka等人,JExperimental Biol. 2001 ;204,3019-3026),并且还报道了小鼠中胃泌酸调节素的变力作用(Sowden 等人 Am J Phys Regul Integr Comp Physiol. 2007 ;292 R962-R970)

发明内容
本发明人发现,某些化合物可用作变力剂(更具体地,正性变力剂),但与已知的变力剂(例如,多巴酚丁胺、去甲肾上腺素和胰高血糖素)相比,其对心脏的能量状态具有显著更低的作用。因此,这些化合物比已知的变力剂更适合用作治疗剂。不希望受任何特定理论的约束,这些化合物的可用特性可能是由于它们能够活化胰高血糖素受体和GLP-I受体两者。因此,可用于本发明方法中的化合物将被称为“胰高血糖素-GLP-I双重激动剂”,或简称为“双重激动剂”。因此,本发明提供了胰高血糖素-GLP-I双重激动剂作为正性变力剂在治疗心脏病或心功能障碍中的用途。本发明还提供了在治疗心脏病或心功能障碍中用作正性变力剂的胰高血糖素-GLP-I双重激动剂。本发明还提供了用于制备治疗心脏病或心功能障碍之药物的胰高血糖素-GLP-I双重激动剂,其中施用所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂用作正性变力剂。本发明还提供了胰高血糖素-GLP-I双重激动剂在制备用于治疗心脏病或心功能障碍之药物中的用途,其中施用所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂用作正性变力剂。
本发明还提供了胰高血糖素-GLP-I激动剂在制备能够改善心脏收缩性而不伴随心率增加之药物中的用途。本发明还提供了治疗对象中心脏病或心功能障碍的方法,其包括向所述对象施用作为正性变力剂的胰高血糖素-GLP-I双重激动剂。胰高血糖素-GLP-I双重激动剂是本领域中公知的。胃泌酸调节素是天然双重激动剂的一个实例。胃泌酸调节素的类似物描述于W02008/071972 和 W02007/100535 中。另一些双重激动剂描述于W02008/101017中。与OXM相比,那些化合物中的大多数在长度上与胰高血糖素更相似(约29个氨基酸长),所以可被认为是胰高血糖素的类似物。然而,另一些更长。该文件中描述的任一双重激动剂均可适用于本文所述的用途。另一些双重激动剂描述于W02009/155257和W02009/155258中,并且也可适用于本发明的方·法。还有另一些双重激动剂描述于W02008/152403、PCT/GB2008/004132、PCT/GB2008/00412U PCT/GB2008/004157, PCT/GB2008/004130 和欧洲专利申请 no. 09251780. 4
中,并且也可适用于本发明的方法。所述双重激动剂可以是具有下式的化合物R1-X-Z1-Z2-R2或其可药用盐或衍生物,其中=R1是氢、Ch烷基(例如甲基)、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;X具有式I :Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-X17-X18-Ala-X20-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29其中Xl 是 His、D-His、(脱氛基)His、轻基-His、乙酸基-His、闻-His、α,α-二甲基咪唑乙酸(DMIA)、N-甲基His、α -甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser、Aib 或 D-Ser ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;XlO 是 Tyr 或 Trp ;X12 是 Lys、Arg、His、Ala、Leu、Dpu、Dpr> Orn、瓜氨酸或鸟氨酸;X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X16 是 Ser、Thr、Lys、Arg、His、Glu、Asp、Ala、Gly、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X17 是 Arg、Lys、His、Glu、Gin、Ala、Leu、Dpu、Dpr、Orn、Cys、高半胱氨酸或乙酰基
苯丙氨酸;X18 是 Arg、Lys、His、Tyr、Ala、Ser、Leu、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X20 是 Gin、Lys、Arg、His、Glu、Asp、Ala、Cys> Orn 或瓜氨酸;X21是Asp、Glu、Gin、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val、Ile 或 Leu ;
X24 是 Gin、Lys、Arg、Glu、Asp、Ser、Ala、Leu、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙
氨酸;X27 是 Met、Lys、Arg、Glu、Leu、Nle、Cys 或不存在;X28 是 Asn、Lys、Arg、Glu、Asp、Ser、Ala、Leu、Cys、瓜氨酸、Orn,或不存在;X29 是 Thr、Lys、Arg、Glu、Ser、Ala、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸、乙酰基苯丙氨酸或不存在;R2 是 NH2 或 OH ;Z1不存在或具有以下序列GlyProSerSerGlyAlaProProProSer ;·GlyProSerSerGlyAlaProProProSerCys ;LysArgAsnArgAsnAsnIleAla ;或LysArgAsnArg ;Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser> Thr> Tyr> Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu、Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列;其中,如果Z1存在,则X27、X28和X29也存在;并且如果Z1 不存在,则该化合物在 XI、X2、X3、X10、X12、X15、X16、X17、X18、X20、X21、X23、X24、X27、X28和X29的一个或更多个位置处相对于人胰高血糖素具有替换或缺失;其中所述化合物具有比人胰高血糖素更高的GLP-I受体选择性。当存在时,Z2可以独立地是或者包含一个或更多个氨基酸残基。例如,Z2可以是Y -Glu (也称为isoGlu)、Glu、β -Ala或ε -Lys残基,或者4_氛基丁酸基、8_氛基羊酸基或8-氨基-3,6- 二氧杂辛酰基部分。所述化合物可具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐,其中R1是氢、Ch烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2;X是具有式II的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Arg-Ala-Arg-Ala-Asp-Asp-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Lys-Glu-Ala (化合物 4)或者,如果不同于式I的话,在以下位置的至多4处不同于式II 第2位残基选自Aib、D-Ser ;第16 位残基选自Lys、Asp、Glu ;第18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ;第20 位残基选自Gln、His、Lys、Arg、Glu ;第21位残基是Glu ;第24 位残基选自Gln、Leu、Glu、Lys、Arg、Asp ;第27位残基选自Met、Cys、Arg、Glu、Leu或者不存在;第28 位残基选自Asn、Ser、Arg、Lys、Ala、Leu、Glu、Asp 或者不存在;以及第29位残基选自ThiN Glu、Lys或者不存在;
并且Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbuλ Dpr和Orn之氨基酸单元的序列。在一些实施方案中,如果不同于式II的话,X可在以下位置中的至多4处不同于式II 第2位残基选自Aib、D-Ser ;第18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ;第20 位残基选自:Gln、His、Lys、Arg、Glu ;第24 位残基选自Gln、Leu、Glu、Lys、Arg ;第27 位残基选自Met、Cys、Arg、Glu、Leu ;
·
第28 位残基选自Asn、Ser、Arg、Lys、Ala、Leu ;以及第29 位残基选自Thr、Glu、Lys0在另一些实施方案中,X包含残基27-Lys和28-Ser。在这样的情形中,如果不同于式II的话,X还可在以下位置的一个或两个处不同于式II 第2位残基选自Aib、D-Ser ;第18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ;第20 位残基选自:Gln、His、Lys、Arg、Glu ;第24 位残基选自Gln、Leu、Glu、Lys、Arg ;以及第29 位残基选自Thr、Glu、Lys0在上述任意实施方案中,第16和20位的残基可以能够形成盐桥。合适的残基对实例包括16-Asp, 20-Lys ;16-Glu, 20-Lys ;16-Asp, 20-Arg ;16-Glu, 20-Arg ;16-Lys, 20-Asp ;16-Arg, 20-Asp ;16-Lys, 20-Glu ;和16-Arg,20-Glu。与上述定义保持一致的同时,可期望X包含一个或更多个以下残基组16-Arg ;16-Arg, 20-Asp ;16-Arg, 20-Asp, 24-Ala ;16-Arg,20-Asp,27-Lys,28-Ser ;16-Arg, 20-Asp, 29-Ala ;16-Arg, 27-Lys, 28-Ser ;16-Arg,27-Lys,28-Ser,29-Ala ;24_Ala 27_Lysj 28_Ser ;24_Ala,27_Lys,28_Ser,29_Ala ;24-Ala ;
27-Lys ;28-Ser ;20-Glu,28-Ser,29-Thr ;24-Glu,28-Ser,29-Thr ;27-Glu, 28-Arg ;2-D-Ser,28-Ser,29-Thr ;或20-His,28-Ser,29-Thr。例如,X可具有以下序列 HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLKSA ;(化合物 5)HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLKEA ;(化合物 6)HSQGTFTSDYSKYLDRARAEDFVAffLKST ;(化合物 7)HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVEffLKST ;(化合物 8) HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLERA ;(化合物 9)H-DSer-QGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLKST ;(化合物 10)HSQGTFTSDYSKYLDRARAHDFVAffLKST ;或(化合物 11)HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAWLKST。(化合物 1 式II所定义的肽可在肽序列X内带有一个或更多个分子内桥。每个此类桥可在X的两个氨基酸残基的侧链之间适当地形成,所述两个氨基酸残基通常被X线性序列中三个氨基酸所分隔(即,在氨基酸A和氨基酸A+4之间)。更特别地,所述桥可以在残基对12与16、16与20、17与21、20与24或者24与28的侧链之间形成。所述两个侧链可以通过离子相互作用或通过共价键彼此连接。因此,这些残基对可包含电荷相反的侧链从而通过离子相互作用形成盐桥。例如,其中一个残基可以是Glu或Asp,而另一残基可以是Lys或Arg。Lys与Glu以及Lys与Asp的配对还可以能够反应形成内酰胺环。同样地,Tyr与Glu或者Tyr与Asp能够形成内酯环。特别地,第16和20位的残基可以能够形成分子内桥。这些位置处合适的残基对实例包括16-Asp, 20-Lys ;16-Glu,20-Lys ;16-Asp, 20-Arg ;16-Glu, 20-Arg ;16-Lys, 20-Asp ;16-Arg, 20-Asp ;16-Lys,20-Glu ;和16-Arg,20-Glu。所述化合物可具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐,其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2;
X是具有式III的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Leu-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-IIe-Glu-Trp-Leu-Glu-Ser-Ala (化合物 13)或者,如果不同于式III的话,则在以下位置的至多4处不同于式III 第2位残基选自Aib、D-Ser ;
第16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly、Asp ;第17位残基选自Lys、Leu ;第18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ;第20 位残基选自Gln、His、Arg、Glu、Asp ;第21位残基是Glu ;第23位残基选自Val、Leu ;第24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg、Asp ;第27位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Leu或者不存在;第28位残基选自Asn、Arg、Lys、Glu、Ala、Leu、Asp或者不存在;以及第29位残基选自ThiNGlu、Lys或者不存在;并且Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbuλ Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列。在一些实施方案中,如果不同于式III的话,则X在以下位置的至多4处不同于式III 第2位残基选自Aib、D-Ser;第16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly ;第17位残基选自Lys、Leu ;第18 位残基选自:Lys、His、Ala、Ser、Tyr ;第23位残基选自Val、Leu ;第27 位残基选自:Met、Cys、Lys、Arg、Leu ;第28 位残基选自Asn、Arg、Lys、Glu、Ala、Leu ;以及第29 位残基选自Thr、Glu、Lys ;在一些实施方案中,如果不同于式III的话,则X在以下位置的至多4处不同于式III 第2位残基选自Aib、D-Ser;第16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly ;第17位残基选自Lys、Leu ;第18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ;以及第23位残基选自Val、Leu。在一些实施方案中,如果不同于式III的话,则X在以下位置的至多4处不同于式
III第2位残基选自Aib、D-Ser;第23位残基选自Val、Leu ;第27 位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Leu ;
第28 位残基选自Asn、Arg、Lys、Glu、Ala、Leu ;以及第29 位残基选自Thr、Glu、Lys。与上述定义保持一致的同时,可期望X包含一个或更多个以下残基组20-Lys, 24-Glu ;20_Lys, 24_Glu,29_Ala ;20_Lys,23_Ile,24_Glu ; 27-Glu,28-Ser,29-Ala ;29-Ala ;20-Gln ;23-Val ;24-Gln ;29-Thr ;27-Met,28-Asn,29-Thr ;20-Gln,23-Val,24-Gln ;20-Glu,24-Lys ;或28-Argo例如,X可具有以下序列HSQGTFTSDYSLYLDSRRAQDFIEffLESA ;(化合物 14)HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFVEffLESA ;(化合物 1δ)HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFIQffLESA ;(化合物 16)HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFIEffLEST ;(化合物 1了)HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFIEffLMNT ;(化合物 I8)HSQGTFTSDYSLYLDSRRAQDFVQffLESA ;(化合物 19)HSQGTFTSDYSLYLDSRRAEDFIKffLESA ;或(化合物 2O)HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFIEWLERA。(化合物 2D式III所定义的肽可在肽序列X内带有一个或更多个分子内桥。每个此类桥可在X的两个氨基酸残基的侧链之间适当地形成,所述两个氨基酸残基通常被X线性序列中三个氨基酸所分隔(即,在氨基酸A和氨基酸Α+4之间)。更特别地,所述桥可以在残基对16与20、17与21、20与24或者24与28的侧链之间形成。所述两个侧链可以通过离子相互作用或通过共价键彼此连接。因此,这些残基对可包含电荷相反的侧链从而通过离子相互作用形成盐桥。例如,其中一个残基可以是Glu或Asp,而另一残基可以是Lys或Arg。Lys与Glu以及Lys与Asp的配对还可以能够反应形成内酰胺环。同样地,Tyr与Glu或者Tyr与Asp能够形成内酯环。特别地,第20和24位的残基可以能够形成分子内桥。这些位置处合适的残基对实例包括20-Asp,24-Lys ;20-Glu,24-Lys ;20-Asp,24-Arg ;20-Glu, 24-Arg ;
20-Lys,24-Asp ;20-Arg, 24-Asp ;20_Lys,24_Glu ;和20-Arg,24-Glu。不希望受任何特定理论的约束,认为这样的分子内桥稳定分子的α螺旋结构并因此提高对GLP-I受体以及还可能地对胰高血糖素受体的效力和/或选择性。所述化合物可具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐,其中 R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2;X是具有式IV的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-IIe-Glu-Trp-Leu-Leu-Ser-Ala (化合物 22)或者,如果不同于式IV的话,则在以下位置的至多4处不同于式IV 第2位残基选自D-Ser、Aib ;第16 位残基选自:Ser、Asp、Lys、Arg ;第18位残基是Ala ;第20 位残基选自:Gln、Arg、Glu、Asp ;第21位残基是Glu ;第23位残基是Val ;第24 位残基选自Gln、Asp、Lys、Arg、Ala ;第27位残基选自Met、Cys > Lys或不存在;第28位残基选自Asn、Arg、Lys、Ala、Glu、Asp或不存在;以及第29位残基选自Thr、Arg或不存在;并且Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys>Arg、Dbu> Dpr和Orn之氨基酸单元的序列。在一些实施方案中,如果不同于式IV的话,在X在以下位置的至多4处不同于式
IV第2位残基选自D-Ser、Aib ;第16 位残基选自Ser、Asp、Lys ;第20 位残基选自Gln、Arg、Glu ;第27位残基选自Met、Cys> Lys ;以及第28 位残基选自Asn、Arg、Ala。在这些实施方案的一些中,如果不同于式IV的话,则X可在以下位置的至多3处不同于式IV:第2位残基选自D-Ser、Aib ;第16位残基选自Ser、Asp、Lys ;以及第20 位残基选自Gin、Arg、Glu。在一些替代性的实施方案中,如果不同于式IV的话,则X可在以下位置的至多4处不同于式IV:
第2位残基选自D_Ser、Aib ;第16 位残基选自Ser、Asp、Lys ;第18位残基是Ala ;以及第20 位残基选自Gin、Arg、Glu。在另一些替代性的实施方案中,如果不同于式IV的话,则X可在以下位置的至多4处不同于式IV 第23位残基是Val ;第24 位残基选自Gln、Asp、Lys、Arg、Ala ;第27位残基选自Met、Cys、Lys ;以及·第28 位残基选自Asn、Arg、Ala。在上述实施方案的任一个中,第16和20位的残基可以能够形成盐桥。合适的残基对的实例包括16-Asp,20-Lys ;16-Glu, 20-Lys ;16-Asp,20~Arg ;16-Glu,20-Arg ;16-Lys,20-Asp ;16-Arg, 20-Asp ;16-Lys,20-Glu ;16-Arg,20-Glu。此外或作为替代地,第20和24位的残基可以能够形成盐桥。合适的残基对的实例包括20-Asp,24-Lys ;20-Glu,24-Lys ;20-Asp,24-Arg ;20-Glu,24-Arg ;20-Lys,24-Asp ;20-Arg,24-Asp ;20-Lys,24-Glu ;20-Arg,24-Glu。与上述定义保持一致的同时,可期望X包含一个或更多个以下残基组20-Lys,24-Glu ;20_Lys, 23_Ile,24_Glu ;16-Glu,20-Lys,24-Glu ;16-Glu,20-Lys ;16_Glu,20_Lys,29_Ala ;16-Glu,20-Lys,23-Ile,24-Glu ;16-Glu,20-Lys,23-Ile,24-Glu,29-Ala ;16-Glu,20-Lys,24-Glu,29-Ala ;
20_Lys,23_Ile,24_Glu,29_Ala ;27_Leu,28_Ser,29_Ala ;29-Ala ;16-Ser ;20-Gln ;23-Val ;24-Gln ;16-Ser,20-Gln ;
16-Asp,20-Arg,24-Asp ;16-Lys,20-Glu ;24-Arg ;或28-Argo例如,X可具有以下序列HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFIEffLLSA ;(化合物 23)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVEffLLSA ;(化合物 24) HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIQffLLSA ;(化合物 25)HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFIEffLLSA ;(化合物 26)HSQGTFTSDYSKYLDDRRARDFIDffLLSA ;(化合物 2 、HSQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFIKffLLSA ;(化合物 28)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIRffLLSA ;(化合物 29)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIEffLLRA ;(化合物 30)HSQGTFTSDYSKYLDSRRAKDFIEffLLSA ;(化合物 3DHSQGTFTSDYSKYLDERAAKDFIEffLLSA ;(化合物 32)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIDffLLSA ;(化合物 33)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIEffLLAA ;或(化合物 34)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIEWLLSA。(化合物 35)式IV所定义的肽可在肽序列X内带有一个或更多个分子内桥。每个此类桥可在X的两个氨基酸残基的侧链之间适当地形成,所述两个氨基酸残基通常被X线性序列中三个氨基酸所分隔(即,在氨基酸A和氨基酸A+4之间)。更特别地,所述桥可以在残基对12与16、16与20、17与21、20与24或者24与28的侧链之间形成。所述两个侧链可以通过离子相互作用或通过共价键彼此连接。因此,这些残基对可包含电荷相反的侧链从而通过离子相互作用形成盐桥。例如,其中一个残基可以是Glu或Asp,而另一残基可以是Lys或Arg。Lys与Glu以及Lys与Asp的配对还可以能够反应形成内酰胺环。同样地,Tyr与Glu或者Tyr与Asp能够形成内酯环。特别地,第16和20位和/或第20和24位的残基可以能够形成分子内桥。这些位置处合适的残基对实例包括16-Asp,20-Lys ;16-Glu,20-Lys ;16-Asp, 20-Arg ;
16-Glu, 20-Arg ;16-Lys,20-Asp ;16-Arg, 20-Asp ;16-Lys,20-Glu ;16-Arg, 20-Glu ;和 / 或20-Asp, 24-Lys ;20_Glu,24_Lys ;20-Asp, 24-Arg ;·20-Glu,24-Arg ;20-Lys, 24-Asp ;20-Arg, 24-Asp ;20_Lys, 24_Glu ;20-Arg,24-Glu。不希望受任何特定理论的约束,认为这样的分子内桥稳定分子的α螺旋结构并因此提高对GLP-I受体以及还可能地对胰高血糖素受体的效力和/或选择性。所述化合物可具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐,其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2 ;X是具有式V的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Lys-AIa-Ala-His-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Leu-Arg-Ala (化合物 36)或者,如果不同于式V的话,则在以下位置的至多4处不同于式V :第2位残基选自Aib、D-Ser ;第12 位残基选自Leu、Arg、Dpu、Dpr、Orn ;第16 位残基选自:Arg、His、Lys、Glu、Asp ;第17 位残基选自Arg、Leu、Dpu、Dpr、Orn ;第18 位残基选自Arg> Lys> His、Ser、Tyr ;第20 位残基选自Gln、Lys> Arg、Glu、Asp ;第21位残基是Glu;第24 位残基选自:Gln、Leu、Ala、Lys、Arg、Asp ;第27位残基选自Met、Cys> Lys、Arg、Glu或不存在;第28 位残基选自Asn、Ser> Lys、Glu、Ala、Leu、Asp 或不存在;以及第29位残基选自Thr、Glu、Lys或不存在;并且Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser> Thr> Tyr> Cys、Glu、Lys>Arg、Dbu、Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列。在这一方面的某些实施方案中,如果不同于式V的话,则X在以下位置的至多4处不同于式V:第2位残基选自Aib、D-Ser ;
第16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu ;第17位残基选自Arg、Leu ;第18 位残基选自Arg、Lys、His、Ser、Tyr ;第20 位残基选自Gln、Lys、Arg、Glu ;第24 位残基选自G ln、Leu、Ala、Lys、Arg ;第27 位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Glu ;第28 位残基选自Asn、Ser、Lys、Glu、Ala、Leu ;以及第29 位残基选自Thr、Glu、Lys0在这一方面的某些实施方案中,如果不同于式V的话,则X在以下位置的至多4处不同于式V:第2位残基选自Aib、D-Ser ;第16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly ;第24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg ;第27 位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Glu ;第28 位残基选自Asn、Ser、Lys、Glu、Ala、Leu ;以及第29 位残基选自Thr、Glu、Lys0与上述涉及式V的定义保持一致的同时,可期望X包含一个或更多个以下残基组或者其组合17-Lys, 18—Ala ;17-Leu, 18—Ala ;17_Lys,18_Ala,20_His ;17_Leu,18_Ala,20_His ;17_Lys,18_Ala,24_Glu ;17_Leu,18_Ala,24_Glu ;17-Lys,18—Ala,27-Leu ;17_Leu,18_Ala,27_Leu ;17_Lys,18_Ala,29_Ala ;17_Leu 18_Ala,29_Ala ;17_Lys j18_Ala,27_Leu,29_Ala ;17_Leu 18_Ala,27_Leu,29_Ala ;17—Lys,18—Ala,27—Leu,28—Arg,29—Ala ;17_Leu,18_Ala,27_Leu,28_Arg,29_Ala ;24-Glu, 28-Arg ;24-Glu,28-Arg,27-Leu ;24_Glu,28_Arg,27_Leu,29_Ala ;27-Leu,28-Arg,29-Ala ;29-Ala ;20-Arg,24-Arg,27-Lys,28-Leu ;17-Arg ;
18-Arg ;20-Gln ;24-Gln ;27-Met, 28-Asn,29-Thr ;或24-Lys例如,X可具有以下序列HSQGTFTSDYSKYLDSKAARDFVRffLKLA ;(化合物 3了)HSQGTFTSDYSKYLDSRAAHDFVEffLLRA ;(化合物 38)·
HSQGTFTSDYSKYLDSKRAHDFVEffLLRA ;(化合物 39)HSQGTFTSDYSKYLDSKAAQDFVEffLLRA ;(化合物 40)HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVQffLLRA ;(化合物 41)HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLMNT ;(化合物 42)HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVKffLLRA ;(化合物 43)H-DSer-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA ;(化合物 44)H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA ;(化合物 4δ)HSQGTFTSDYSKYLDSKAAKDFVEffLLRA ;(化合物 46)HSQGTFTSDYSKYLDKKAAHDFVEffLLRA 或(化合物 4了)HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEWLLRA。(化合物 48)在一个替代性的方面中,所述化合物可具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐,其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2;X是具有式VI的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Lys-AIa-Ala-His-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Leu-Arg-Ala (化合物 49)或者,如果不同于式VI的话,则在以下位置的至多5处不同于式VI 第2位残基选自Aib、D-Ser ;第16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu ;第17 位残基选自Arg、Leu、Dpu、Dpr、Orn ;第20 位残基选自Gln、Lys、Arg、Glu、Asp ;第21位残基是Glu;第24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg、Asp ;第27位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Glu或不存在;第28 位残基选自Asn、Ser、Lys、Glu、Ala、Leu、Asp 或不存在;以及第29位残基选自Thr、Glu、Lys或不存在;并且Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser、Thr> Tyr> Cys、Glu、Lys>Arg、Dbu、Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列。在这一方面的某些实施方案中,如果不同于式VI的话,则X在以下位置的至多4处不同于式VI
第2位残基选自Aib、D-Ser ;第16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly ;第17位残基选自Arg、Leu ;第18 位残基选自Arg> Lys> His> Ser> Tyr ;第20 位残基选自Gln、Lys、Arg、Glu ;第24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg ;第27 位残基选自Met、Cys> Lys、Arg、Glu ;第28 位残基选自Asn、Ser、Lys、Glu、Ala、Leu ;以及 第29 位残基选自Thr、Glu、Lys。与上述涉及式VI的定义保持一致的同时,可期望X包含上文第一方面中描述的任何残基组或者一个或更多个以下残基组20-Gln, 24-Gln, 27-Met,28-Asn,29-Thr ;或17-Leu,20-Gln,24-Gln,28-Asn,29_Thr。X可具有以下序列HSQGTFTSDYSKYLDSKAAQDFVQffLMNT 或(化合物 50)HSQGTFTSDYSKYLDSLAAQDFVQWLLNT。(化合物 51)式V和VI所定义的肽可在肽序列X内带有一个或更多个分子内桥。每个此类桥可在X的两个氨基酸残基的侧链之间适当地形成,所述两个氨基酸残基通常被X线性序列中三个氨基酸所分隔(即,在氨基酸A和氨基酸A+4之间)。更特别地,所述桥可以在残基对12与16、16与20、17与21、20与24或者24与28的侧链之间形成。所述两个侧链可以通过离子相互作用或通过共价键彼此连接。因此,这些残基对可包含电荷相反的侧链从而通过离子相互作用形成盐桥。例如,其中一个残基可以是Glu或Asp,而另一残基可以是Lys或Arg。Lys与Glu以及Lys与Asp的配对还可以能够反应形成内酰胺环。同样地,Tyr与Glu或者Tyr与Asp能够形成内酯环。特别地,第16和20位的残基可以能够形成分子内桥。这些位置处合适的残基对实例包括16-Asp,20~Lys ;16-Glu,20-Lys ;16-Asp,20-Arg ;16-Glu,20-Arg ;16-Lys,20-Asp ;16-Arg,20-Asp ;16-Lys,20-Glu ;和16—Arg,20—Glu。不希望受任何特定理论的约束,认为这样的分子内桥稳定分子的α螺旋结构并因此提高对GLP-I受体以及还可能地对胰高血糖素受体的效力和/或选择性。不希望受任何特定理论的约束,天然胰高血糖素的第17和18位的精氨酸残基似乎提供针对胰高血糖素受体的显著选择性。第18位的疏水残基(例如,Ala)也可提高对GLP-I受体和胰高血糖素受体的效力。其还相对于天然胰高血糖素而言提高酶稳定性。
不希望受任何特定理论的约束,天然胰高血糖素的第27、28和29位的残基似乎提供针对胰高血糖素受体的显著选择性。替换天然胰高血糖素序列这些位置中的一个、两个或全部三个可提高对GLP-I受体的效力和/或选择性,可能不显著降低对胰高血糖素受体的效力。具体实例包括第27位的Leu或Lys、第28位的Arg或Ser以及第29位的Ala。替换第27位的天然Met残基(例如,用Leu、Lys、Arg或Glu替换)还降低氧化潜力,从而提高化合物的化学稳定性。替换第28位的天然Asn残基(例如,以Glu、Ser、Arg、Lys、Ala或Leu替换)还降低在酸性溶液中脱酰胺的潜力,从而提高化合物的化学稳定性。还可以通过引入可能形成两亲性螺旋结构的残基来提高对GLP-I受体的效力和/或选择性,可能不显著损失对胰高血糖素受体的效力。这可通过在第16、20、24和28位中的一处或更多处引入带电残基来实现。因此,第16和20位的残基可以都是带电的,第16、20和28位的残基可以都是带电的。当第16和20位的残基能够形成分子内桥时(例如,当 它们是带相反电荷的氨基酸(例如,第16位为Arg,第20位为Asp或Glu ;或者,第16位为Glu,第20位为His或Lys)时),可特别期望第16和20位残基为带电残基。替换第20和24位的一个或两个天然Gln残基还降低在酸性溶液中脱酰胺的潜力,从而提高化合物的化学稳定性。例如,所述化合物可以在第20位具有Asp或His以及在第24位具有Ala,任选地,还在第28位具有Ser、Glu或Arg。所述化合物可具有式R1-X-Z1-Z2-R2或其可药用盐或衍生物,其中R1是H、CV4烷基(例如甲基)、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;其中X具有式VII:Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-X17-X18-Ala-X20-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29其中Xl 是 His、D-His、(脱氛基)His、轻基-His、乙酸基-His、闻-His、α , α-二甲基咪唑乙酸(DMIA)、N-甲基His、α -甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser、D-Ser、Ala、D-Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser、氛基异丁酸(Aib)或 N-甲基Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;XlO 是 Tyr 或 Trp ;X12 是 Lys、瓜氨酸、Orn 或 Arg ;X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X17是Arg、Gin、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X18是Arg、Ala、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸;X21是Gin、Glu、Asp、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 lie;X24是Ala、Gin、Glu、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;
乂27是1^、1^11或肌6;X28 是 Asn、Arg、瓜氨酸、Orn> Lys 或 Asp ;X29是Thr、Gly、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;R2 是 NH2 或 OH;Z1不存在或具有以下序列GlyProSerSerGlyAlaProProProSer ;GlyProSerSerGlyAlaProProProSerCys ; LysArgAsnArgAsnAsnIleAla ;或LysArgAsnArg ;Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gin、Asp、Glu、Lys、Arg、His、Met、Har> Dbu> Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列;其中,如果Z1 不存在,则所述化合物在 XI、X2、X3、X10、X12、X15、X16、X17、X18、X20、X21、X23、X24、X27、X28和X29位的一处或更多处具有相对于人胰高血糖素的替换或
缺失;其中所述化合物具有比人胰高血糖素更高的GLP-I受体选择性和/或其中所述化合物表现出天然GLP-I对GLP-I受体之活性的至少20%。此外,在某些实施方案中,X可在第 1、2、3、5、7、10、11、13、14、17、18、19、21、24、27、28和29位通过I 3个氨基酸修饰而与式VII不同。具有式VII之序列的化合物描述于W02008/101017中。X 可具有式 VII. 2:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 52)其中X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X17是Arg、Cys、Orn、高半胱氨酸乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 3:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 53)其中 X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;
X21是Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 4:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 54)其中X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X24是Gin、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;
X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 5:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 55)其中X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X21是Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X24是Gin、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;
X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 6:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr(化合物 56)其中X21是Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 7:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 57)其中X24是Gin、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 8:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (化合物 58)其中X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸。X 可具有式 VII. 9:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 59)其中X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 19:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-X30 (化合物 60)其中X30是任何合适的氨基酸。X 可具有式 VIL 20:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29 (化合物 61)
其中X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸;X24 是 Gln 或 Glu ;X28 是 Asn、Asp 或 Lys ;X29 是 Thr 或 Gly。X 可具有式 VII. 21:His-X2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (化合物 62)·其中X2 是 D-Ser、Ala、Gly、N-甲基 Ser 或氨基异丁酸。X 可具有式 VII. 22:His-X2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (化合物 63)其中X2是氨基异丁酸。X 可具有式 VII. 23:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Cys-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 64)其中第17位的Cys是聚乙二醇化的;X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 24:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Cys-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 65)其中第21位的Cys是聚乙二醇化的;X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 25:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Cys-Trp-Leu-X27-Asn-Thr (化合物 66)其中第24位的Cys是聚乙二醇化的;X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 30:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser (化合物 67)其中
X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 31:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala (化合物68)其中X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 32:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg (化合物 69) 其中X27 是 Met、Leu 或 Nle。X 可具有式 VII. 33:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29 (化合物 70)其中X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸;X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ;X24 是 Gln 或 Glu ;X28是Asn、Lys或酸性氨基酸;X29是Thr、Gly或酸性氨基酸。X 可具有式 VIL 36:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser.(化合物 71)X 可具有式 VII. 37:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Cys-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (化合物 72)其中2- 丁内酯通过Cys的巯基连至第24位。X 可具有式 VIL 38:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Cys-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (化合物 73)其中羧甲基通过Cys的巯基连至第24位。X 可具有式 VIL 39:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Arg-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser.(化合物 74)X 可具有式 VII. 40:
His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-Thr (化合物 75)其中X15 是 Glu 或 Asp;X28 是 Glu 或 Asp。X 可具有式 VIL 41:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-Glu-Arg-Arg-Ala-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-Thr (化合物 76)
其中X15 是 Glu 或 Asp;X28 是 Glu 或 Asp ;并且在第12和16位的侧链之间存在内酰胺环。X 可具有式 VII. 42:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-Glu-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-Thr (化合物 77)其中X15 是 Glu 或 Asp;X28 是 Glu 或 Asp ;并且在第16和20位的侧链之间存在内酰胺环。X 可具有式 VII. 43:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-Ser-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-X28-Thr (化合物 78)其中X15 是 Glu 或 Asp;X28 是 Glu 或 Asp ;并且在第20和24位的侧链之间存在内酰胺环。X 可具有式 VII. 44:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-X29 (化合物 79)其中X15 是 Glu 或 Asp;X29 是 Glu 或 Thr。在上文的式中,Zl和Z2通常不存在。所述化合物的C末端可以是酰胺化的(R2 =NH2)。X 可具有式 VII. 45:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-XI5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29 (化合物 80)其中X12 是 Lys 或 Glu ;
X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸;X16是Ser、Gin、Glu、Lys、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 GlruGlu 或 Lys ;父24是6111、1^8或6111;X28是Asn、Lys或酸性氨基酸;X29是Thr、Gly或酸性氨基酸。X 可具有式 VII. 46:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-A rg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (化合物 81)其中X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ;X24 是 Gln 或 Glu。X 可具有式 VII. 47:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr.(化合物 82)X 可具有式 VII. 48:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Asn-Thr.(化合物 83)X 可具有式 VII. 49:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Asn-Thr.(化合物 84)X 可具有式 VII. 50:His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-AIa-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (化合物 85)X 可具有式 VII. 51:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29 (化合物 86)其中X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸;X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸;X21是Asp、Glu、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X24 是 Gln 或 Glu;X28是Asn、Lys或酸性氨基酸;X29是Thr、Gly或酸性氨基酸。X 可具有式 VII. 52:His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-AIa-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg.(化合物 87)
X 可具有式 VII. 53:His-Ser-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29 (化合物 88)其中X3 是 Glu、Orn 或 Nle ;X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸;X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ;X24 是 Gln 或 Glu ;·X28是Asn、Lys或酸性氨基酸;X29是Thr或酸性氨基酸。X 可具有式 VII. 54:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-X17-X18-Ala-Lys-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (化合物 89)其中X17 是 Arg 或 Gln;X18 是 Arg 或 Ala ;X21 是 Asp 或 Glu;X23 是 Val 或 lie;X24 是 Gln 或 Ala。X 可具有式 VII. 56:Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29 (化合物 90)其中Xl 是 His、D-HiS、(脱氣某)HiS、轻某-His、乙酿某-His、iwt -His、DMIA、N~ 甲某His、a-甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser> D-Ser> Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser> Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸、高磺基丙氨酸;X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸;X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 lie;X24是Ala、Gin、Glu、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle ;X28 是 AsruLys 或 Asp ;X29是Thr、Gly、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸。X 可具有式 VII. 57:Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-X15-Glu-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29 (化合物 91)其中Xl 是 His、D-Hi S、(脱氣基)Hi S、轻基-Hi S、乙酸基 _Hi S、闻 _Hi S、DMIA、N-甲基His、α -甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser> D-Ser、Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser> Aib 或 N-甲基 Ala ;
X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸;X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 lie;X24是Ala、Gin、Glu、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;乂27是1^、1^11或肌6;X28 是 AsruLys 或 Asp ;X29是Thr、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;并且其中在第12和16位的侧链之间存在内酰胺桥。X 可具有式 VII. 58:Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-Glu-Arg-Arg-Ala-Lys-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29 (化合物 92)其中Xl 是 His、D-HiS、(脱氣基)HiS、轻基-HiS、乙酸基 _HiS、闻 _HiS、DMIA、N-甲基His、α -甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser> D-Ser、Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser> Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 lie;X24是Ala、Gin、Glu、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;父27是1^、1^11或肌6;X28 是 Asn、Lys 或 Asp ;X29是Thr、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;并且其中在第16和20位的侧链之间存在内酰胺桥。X 可具有式 VII. 59:Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-X16-Arg-Arg-Ala-Lys-X21-Phe-X23-Glu-Trp-Leu-X27-X28-X29 (化合物 93)其中Xl 是 His、D-HiS、(脱氣基)HiS、轻基-HiS、乙酸基 _HiS、闻 _HiS、DMIA、N-甲基His、α -甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser> D-Ser、Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser> Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;
X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 lie;
乂27是1^、1^11或肌6;X28 是 AsruLys 或 Asp ;X29是Thr、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;并且其中在第20和24位的侧链之间存在内酰胺桥。X 可具有式 VII. 60:Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-X23-Glu-Trp-Leu-X27-Lys-X29(化合物 94)其中Xl 是 His、D-HiS、(脱氣基)HiS、轻基-HiS、乙酸基 _HiS、闻 _HiS、DMIA、N-甲基His、α-甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser> D-Ser、Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser> Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸;X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 lie;乂27是1^、1^11或肌6;X29是Thr、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;并且其中在第24和28位的侧链之间存在内酰胺桥。X-Z1 可具有式 VII. 61 :Xl-X2-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Xl8-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-Asn-X29-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-Cys (化合物 95)其中Xl 是 His、D-HiS、(脱氣基)HiS、轻基-HiS、乙酸基 _HiS、闻 _HiS、DMIA、N-甲基His、α-甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser> D-Ser、Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser> Aib、N-甲基 Ala 或 D-Ala ;X18 是 Ala 或 Arg;X24 是 Ala、Gln 或 Cys-PEG ;X29 是 Thr_C0NH2、Cys-PEG 或 Gly ;第40位是Cys-PEG或不存在;前提是第30至40位(Z2)仅当第29位是Gly时才存在。X-Z1 可具有式 VII. 62 :Xl-X2-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Gln-Xl8-Ala-Lys-Glu-Phe-IIe-X24-Trp-Leu-Met-Asn-X29-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-Cys (化合物 96)其中Xl 是 His、D-His、(脱氣基)His、轻基-His、乙酸基 _His、闻 _His、DMIA、N-甲基His、α -甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser> D-Ser、Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser> Aib、N-甲基 Ala 或 D-Ala ;X18 是 Ala 或 Arg;X24 是 Ala、Gln 或 Cys-PEG ;X29 是 Thr_C0NH2、Cys-PEG 或 Gly ;·第40位是Cys-PEG或不存在;前提是第30至40位(Z2)仅当第29位是Gly时才存在。X 可具有式 VII. 63:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-Asp-Thr (化合物 97)其中X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ;X21是Asp、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X24是Gin、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。X-Z1 可具有式 VII. 64 :His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5_X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Pro-Pro-Pro-Ser (化合物 98)其中X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸;X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ;X24 是 Gln 或 Glu ;X28 是 AsruLys 或 Asp。X 可具有式 VII. 66:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-X29 (化合物 99)其中X28 是 Asp 或 Asn ;X29 是 Thr 或 Gly ;并且其中在第和16位的侧链之间存在内酰胺环。X 可具有式 VII. 67:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-X29 (化合物 100)其中X28 是 Asp 或 Asn;X29 是 Thr 或 Gly ;并且其中在第16和20位的侧链之间存在内酰胺环。X 可具有式 VII. 68:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-X28-X29 (化合物 101)其中 X28 是 Asp 或 Asn ;X29 是 Thr 或 Gly ;并且其中在第20和24位的侧链之间存在内酰胺环。X 可具有式 VII. 69:His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-X29 (化合物 102)其中X29 是 Thr 或 Gly ;并且其中在第24和28位的侧链之间存在内酰胺环。可用于本发明方法的另一些具体化合物显示于图3 :表2和表3中


图I :载剂、胰高血糖素和胰高血糖素-GLPl双重激动剂(化合物12)对如下项的
作用-A :胰岛素抗性(insulin-resistant, IR) JCR :LA大鼠心脏中的心率;B :IR心脏中
的心输出量;C :IR心脏中心功率(cardiac power)。值表示为平均值+SEM。*P < O. 05*P<0. 01(与基线相比)。图2 :灌注浓度渐增的载剂(η = 4)、胰高血糖素(η = 6)和胰高血糖素-GLPl双重激动剂(化合物12) (η = 5)之后,胰岛素抗性(IR)JCR :LA大鼠心脏中的能量状态。A 腺苷一磷酸(AMP)浓度。B :腺苷二磷酸(ADP)浓度。C :腺苷三磷酸(ATP)浓度。D =ATP/AMP比值。E:ATP/ADP比值。值表示为平均值+SEM。* P < O. 05 ; 〃 P < O. 01 (与载剂相比)。图3 :显示可用于本发明之化合物的序列的表(表2)。图4 :由针对每种化合物的各数据计算出的搏出功(strokework),输注了化合物I或胰高血糖素-GLP-I双重激动剂。以nmol/kg/min给出剂量,并示于每幅图的上部。将搏出功最大提高40 %设定为终点,其后停止输注。图5 :由针对每种化合物的各数据计算出心率,输注了化合物I或胰高血糖素-GLP-I双重激动剂。以nmol/kg/min给出剂量,并示于每幅图的上部。将搏出功最大提高40% (图4)设定为终点,其后停止输注。图6 :显示可用于本发明之化合物的序列的表(表3)。发明详述
在通篇说明书中,对于天然氨基酸,使用常规的单字母和三字母编码,对于其它氨基酸,使用普遍接受的三字母编码(例如AibU-氨基异丁酸)、0rn (鸟氨酸)、Dbu (2,4- 二氨基丁酸)和Dpr (2,3- 二氨基丙酸)、Cit (瓜氨酸)、INal (I-萘基丙氨酸)、Hph (高苯丙氨酸)、Hse (高丝氨酸)和Orn (鸟氨酸))。在本发明的上下文中,C1-6烷基和C1-4烷基包括甲基、乙基、I-丙基和2_丙基。在本发明的上下文中,表述“正性变力”是指提高心肌收缩的力度和速度的药剂,即改善心肌收缩性。术语“天然胰高血糖素”是指具有以下序列的天然人胰高血糖素Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-OHo
术语“胃泌酸调节素”和“0ΧΜ”是指具有以下序列的天然人胃泌酸调节素H-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile_Ala_0Ho在本发明化合物的某些实施方案中,其中氨基酸残基X3是3-(杂环基)丙氨酰基[即源自3-(杂环基)-取代之丙氨酸的氨基酸残基],则X3可选自3-(2-呋喃基)丙氨酰基、3-(4-噻唑基)丙氨酰基、3-(3-批唳基)丙氨酰基、3-(4-批唳基)丙氨酰基、3_(1_批唑基)丙氨酸基、3-(2-噻吩基)丙氨酸基、3-(3-噻吩基)丙氨酸基和3-(1,2,4-噻唑-I-基)丙氨酰基。肽序列X为了消除疑问,在上述定义中,一般来说,X的序列仅在指明允许改变的那些位置不同于所述式。可认为本文所述的序列X中的氨基酸在N末端至C末端的常规方向上从I至29连续编号。参照X中的“位置”应当据此进行解释,如同应当参照天然人胰高血糖素和其它分子中的位置一样。在本文所提供的任意式中,X3位的残基可作为替代地选自乙酰氨基甲基-半胱氨酸、乙酰基二氨基丁酸、氨基甲酰基二氨基丙酸、甲基谷氨酰胺和甲硫氨酸亚砜。上述某些式允许X27、X28和/或X29位的残基不存在。通常,如果X28不存在的话,则X29也不存在。如果X27不存在的话,则X28和X28也都不存在。换句话说,如果X29存在的话,则X28不会不存在,以及如果X28或X29之一存在的话,则X27不会不存在。当Z1不存在时,可认为肽序列X是胰高血糖素的类似物。在这样的实施方案中,肽序列X在29个位置中的一处或更多处(例如,在29个位置中的最少2处,例如在29个位置中的最少3、4、5、6处)不同于天然人胰高血糖素的序列。在某些实施方案中,当X仅在一个位置不同于人胰高血糖素时,该位置可以是X12、X17 或 X18。X12位的残基可以是Ala或Arg。X17位的残基可以是Glu或Lys。X18位的残基可以是His、Ser、Ala或Tyr。因此,肽X可具有以下序列HSQGTFTSDYSAYLDSRRAQDFVQffLMNT ;(化合物 10
HSQGTFTSDYSRYLDSRRAQDFVQffLMNT ;(化合物 104)HSQGTFTSDYSKYLDSERAQDFVQffLMNT ;(化合物 IO6)HSQGTFTSDYSKYLDSKRAQDFVQffLMNT ;(化合物 107)HSQGTFTSDYSKYLDSRHAQDFVQffLMNT ;(化合物 108)HSQGTFTSDYSKYLDSRSAQDFVQffLMNT ;(化合物 IO9)HSQGTFTSDYSKYLDSRAAQDFVQffLMNT ;或(化合物 110)HSQGTFTSDYSKYLDSRYAQDFVQWLMNT.(化合物 111)与人胰高血糖素具有2或3处不同的序列包括 HSQGTFTSDYSRYLDSRRAKDFVQffLLNT ;(化合物 112) HSQGTFTSDYSRYLDSRRAQDFVQffLLNT ;(化合物 113)HSQGTFTSDYSRYLDSRRAQDFVQffLLNK ;(化合物 114)HSQGTFTSDYSKYLDSALAQDFVQffLLNT ;(化合物 11δ)HSQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQffLMNT ;(化合物 116)HSQGTFTSDYSKYLDK O RRAE O DFVQffLMNT ;(化合物 117)HSQGTFTSDYSRYLDERRAQDFVQffLMNT ;(化合物 118)HSQGTFTSDYSK O YLDE O RRAQDFVQffLMNT ;(化合物 119)HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFIEffLMNT ;和(化合物 12O)HSQGTFTSDYSKYLDSKAAQDFVQffLMNT ;(化合物 I2DHSQGTFTSDYSKYLDSLAAQDFVQWLLNT。(化合物 I22)无论Z1存在或不存在,均可期望肽序列X在29个位置中的最多10处(例如,最多7、8、9或10个位置处)不同于人胰高血糖素。Z1Z1可具有以下序列GlyProSerSerGlyAlaProProProSer,代表天然 Exendin-4 的 C-末端 10 个氨基酸;GlyProSerSerGlyAlaProProProSerCys,代表天然 Exendin-4 的 C-末端 10 个氨基酸加上额外的C-末端Cys残基;LysArgAsnArgAsnAsnIleAla,代表天然胃泌酸调节素的C-末端8个氨基酸;或者LysArgAsnArg0Z-所述化合物可包含I 20个氨基酸的C-末端肽序列,例如用以稳定胰高血糖素类似物肽的构象和/或二级结构,和/或用以使胰高血糖素类似物肽更耐受酶水解,例如如W099/46283中所描述地。当存在时,Z2代表I 20个氨基酸残基(例如,I 15个,更优选地I 10个,尤其是I 7个氨基酸残基,例如1、2、3、4、5、6或7个氨基酸残基,例如6个氨基酸序列)的肽序列。肽序列Z2中的每个氨基酸残基可独立地选自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu (2, 4 二氨基丁酸)、Dpr (2, 3- 二氨基丙酸)和Orn (鸟氨酸)。优选地,所述氨基酸残基选自Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu> Dpr和Orn,更优选地可仅仅选自Glu、Lys和Cys,尤其是Lys。上述氨基酸可具有D-或L-构型,但优选具有L-构型。特别优选的Z2序列是4、5、6或7个连续赖氨酸残基的序列(即,1^83、1^84、1^85、1^86或Lys7),特别是5或6个连续赖氨酸残基的序列。Z的另一些示例性序列见于W001/04156,其内容通过引用并入本文。或者,序列Z2的C-末端残基可以是Cys残基。这可有助于修饰所述化合物,例如缀合至下文所述的亲脂取代基或聚合物部分。在这样的实施方案中,序列Z2可以例如仅一个氨基酸长(即,Z2 = Cys)或者可以为2、3、4、5、6或更多个氨基酸长。因此,其它氨基酸充当肽X与末端Cys残基之间的间隔物。在这样的实施方案中,Z1可以不存在。在一些实施方案中,肽序列Z2具有与人OXM之IP-I部分的相应序列(其具有序列 Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala)不高于 25% 的氛基酸序列同一性。给定肽或多肽序列相对于另一多肽序列(例如IP-1)的“氨基酸序列同一性百分比(% )”如下计算当两者相互比对时,给定肽序列中与另一多肽之对应序列中的对应氨基酸残基相同的氨基酸残基的百分比(必要时引入缺口(gap)用于最佳比对)。可利用WU-BLAST-2 (Altschul 等人,Methods in Enzymology, 266 :460-480 (1996))确定同一性百分值。WU-BLAST-2使用若干检索参数,其中多数被设定为缺省值。可调整参数设定为以下值重叠跨度(overlap span) = I,重叠分数(overlap fraction) = O. 125,单词阈值(wordthreshold) (T) = 11。通过用WU-BLAST-2确定匹配的相同残基数目、除以参照序列(省略·了通过WU-BLAST-2向参照序列中引入缺口以使比对得分最大化)的残基总数、再乘以100来确定氨基酸序列同一性百分值。因此,当Z2与IP-I的8个氨基酸最佳比对时,不超过两个氨基酸与IP-I的对应氨基酸相同。氨基酸修饰在适用于本发明的任意化合物中的一个或更多个氨基酸侧链可以与亲脂取代基缀合。所述亲脂取代基可与氨基酸侧链中的原子共价键合,或者可通过间隔物(spacer)与氨基酸侧链缀合。所述氨基酸可以是肽X的一部分,或者是肽Z1或Z2的一部分。所述间隔物(当存在时)用于提供所述化合物的其余部分与所述亲脂取代基之间的间隔。不希望受理论的约束,认为亲脂取代基与血流中的白蛋白结合,从而保护本发明化合物不被酶降解,这可提高所述化合物的半衰期。因此,依此方式修饰的化合物可特别适于长期治疗。亲脂取代基可与氨基酸侧链相连,或者通过酯、磺酰酯、硫酯、酰胺或磺酰胺与间隔物相连。因此,应当理解,所述亲脂取代基优选地包括形成酯、磺酰酯、硫酯、酰胺或磺酰胺之一部分的酰基、磺酰基、N原子、O原子或S原子。优选地,亲脂取代基中的酰基与氨基酸侧链或间隔物形成酰胺或酯的一部分。所述亲脂取代基可包含具有4至30个碳原子的烃链。优选地,其具有至少8或12个C原子,优选地具有24个C原子或更少,或者20个C原子或更少。所述烃链可以是线性的或带支链的,并且可以是饱和或非饱和的。应当理解,所述烃链优选地被形成连接至所述氨基酸侧链或间隔物之一部分的部分(例如,酰基、磺酰基、N原子、O原子或S原子)所取代。最优选地,所述烃链被酰基所取代,因此,所述烃链可以是烷酰基(例如,棕榈酰基、己酰基、月桂酰基、肉豆蘧酰基或硬脂酰基)的一部分。在某些实施方案中,所述亲脂取代基可包含具有10至24个C原子(例如,10至22个C原子,例如10至20个C原子)的烃链。优选地,其具有至少11个C原子,优选地其具有18个C原子或更少。例如,所述烃链可含有12、13、14、15、16、17或18个碳原子。所述烃链可以是线性的或带支链的,并且可以是饱和或不饱和的。从上述讨论中应当理解,所述烃链优选地被形成连接至所述氨基酸侧链或间隔物之一部分的部分(例如,酰基、磺酰基、N原子、O原子或S原子)所取代。最优选地,所述烃链被酰基所取代,因此所述烃链可以是烧酰基(例如,十二烧酰基、2- 丁基辛酰基、十四烧酰基、十六烧酰基、十七烧酰基、十八烧酰基或二十烷酰基)的一部分。因此,所述亲脂取代基可具有以下所示的式
A林A可以是例如酰基、磺酰基、NH、N-烷基、O原子或S原子,优选酰基。η是3至29的整数,优选至少为7或至少为11,以及优选为23或更小,更优选为19或更小。还可进一步取代烃链。例如,还可以用至多3个选自順2、OH和COOH的取代基对其进行取代。如果进一步取代烃链的话,优选仅用一个取代基进一步取代。作为替代或另外地,烃链可包括环烷或杂环烷,例如以下所示
\ /^\
^—Η Ν-λ
v_y Λ优选地,环烷或杂环烷是六元环。最优选地,其为哌啶。或者,亲脂取代基可基于环戊烷并菲骨架,其可以是部分或完全不饱和或饱和的。可用Me或OH取代骨架中的各个碳原子。例如,所述亲脂取代基可以是胆酰基、脱氧胆酰基或石胆酰基(Iithocholyl)。如上所述,可利用间隔物将亲脂取代基缀合至氨基酸侧链。所述间隔物(当存在时)被连接至亲脂取代基以及氨基酸侧链。可独立地通过酯、磺酰酯、硫酯、酰胺或磺酰胺将所述间隔物连接至亲脂取代基和氨基酸侧链。因此,其可包含独立地选自酰基、磺酰基、N原子、O原子或S原子的两个部分。所述间隔物可具有下式其中B和D各自独立地选自酰基、磺酰基、NH、N-烷基、O原子或S原子,优选地选自酰基和NH。优选地,η是I至10(优选I至5)的整数。所述间隔物还可被一个或更多个选自以下的取代基取代(^_6烷基、氨基-Cu烷基、羟基-CV6烷基和羧基η烷基。或者,所述间隔物可具有两个或更多个上式的重复单元。对于每个重复单元,各自独立地选择B、D和η。邻近的重复单元可通过其各自的B和D部分而彼此共价连接。例如,邻近重复单元的B和D部分可一起形成酯、磺酰酯、硫酯、酰胺或磺酰胺。所述间隔物每端的游离B和D单元与上文所述的氨基酸侧链和亲脂取代基相连。优选地,所述间隔物具有5个或更少、4个或更少或者3个或更少的重复单元。最优选地,所述间隔物具有两个重复单元,或者是单个单元。所述间隔物(或者所述间隔物的一个或更多个重复单元,如果其具有重复单元的话)可以是例如天然或非天然的氨基酸。应当理解,对于具有功能化侧链的氨基酸来说,B和/或D可以是氨基酸侧链内的一部分。所述间隔物可以是任何天然或非天然的氨基酸。例如,所述间隔物(或者所述间隔物的一个或更多个重复单元,如果其具有重复单元的话)可以是 Gly、Pro、Ala、Val、Leu、lie、Met、Cys、Phe、Tyr> Trp、His、Lys、Arg、Gin、Asn、Glu、Y -Glu、ε -Lys、Asp、Ser、Thr、Gaba、Aib、β _Ala(即,3_氨基丙酰基)、4_氨基丁酰基、5_氨基戍酰基、6-氨基己酰基、7-氨基庚酰基、8-氨基辛酰基、9-氨基壬酰基、10-氨基癸酰基或8-氨基-3,6-二氧杂辛酰基。在某些实施方案中,所述间隔物是Glu、Y-Glu, ε-Lys、β -Ala (即,3-氨基丙酸基)、4_氨基丁酸基、8-氨基羊酸基或8-氨基-3,6- 二氧杂羊酸基残基。例如,所述间隔物可以是选自Y-Glu、Gaba、β-Ala和Gly的单个氨基酸。所述亲脂取代基可与所述化合物中任何氨基酸侧链缀合。优选地,所述氨基酸侧链包括羧基、羟基、巯基、酰胺或胺基团,用于与所述间隔物或亲脂取代基形成酯、磺酰酯、硫酯、酰胺或磺酰胺。例如,所述亲脂取代基可缀合至Asn、Asp、Glu、Gin、His、Lys、Arg、Ser> Thr、Tyr、Trp> Cys 或 Dbu、Dpr 或 Orn 残基的侧链,例如 Glu、Lys、Ser、Cys、Dbu> Dpr或Orn残基的侧链。例如,其可以是Lys、Glu或Cys残基的侧链。当两个或更多个侧链带有亲脂取代基时,它们可以独立地选自这些残基。优选地,所述亲脂取代基与Lys缀合。然而,在本文所提供的式中显示为Lys的任何氨基酸均可被Dbu、Dpr或Orn替换,从而在此处添加亲脂取代基。亲脂取代基和间隔物的实例如下式所示
权利要求
1.治疗对象中心脏病或心功能障碍的方法,所述心脏病或心功能障碍例如充血性心力衰竭、收缩功能障碍、舒张功能障碍、心肌梗死、缺血性心脏病、糖尿病性心肌病或其组合,所述方法包括向所述对象施用作为正性变力剂的胰高血糖素-GLP-I双重激动剂。
2.根据权利要求I的方法,其中所述对象用所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂治疗一段时间,所述时间大于12小时,大于24小时,大于36小时,大于48小时,大于3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天,大于2周,大于3周,大于4周,大于I个月、2个月、3个月、4个月或大于5个月。
3.根据权利要求I或2的方法,其中治疗所述对象一段时间,所述时间为 I周至6周、2周至6周、3周至6周、4周至6周、5周至6周、I周至5周、2周至5周、3周至5周、4周至5周;1周至4周、2周至4周、3周至4周;1周至3周、2周至3周; I周至6个月、I周至5个月、I周至4个月、I周至3个月、I周至2个月、I周至I个月; 2周至6个月、2周至5个月、2周至4个月、2周至3个月、2周至2个月、2周至I个月; 3周至6个月、3周至5个月、3周至4个月、3周至3个月、3周至2个月、3周至I个月; 4周至6个月、4周至5个月、4周至4个月、4周至3个月、4周至2个月、4周至I个月; I个月至6个月、2个月至6个月、3个月至6个月、4个月至6个月、5个月至6个月; I个月至5个月、2个月至5个月、3个月至5个月、4个月至5个月; I个月至3个月、2个月至3个月或I个月至2个月。
4.根据前述权利要求中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂通过静脉内、皮下或透皮途径施用。
5.根据前述权利要求中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂与用于治疗心力衰竭、糖尿病、肥胖、心肌梗死、低脂血症或高血压的药剂组合施用。
6.根据前述权利要求中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂是具有下式的化合物R1-X-Z1-Z2-R2 或者其可药用盐或衍生物, 其中=R1是氢、CV4烷基(例如甲基)、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基; X具有式I :Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-X17-X18-Ala-X20-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29 其中 Xl是His、D_His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、α,α-二甲基咪唑乙酸(DMIA)、N-甲基His、α -甲基His或咪唑乙酸;X2 是 Ser、Aib 或 D-Ser ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;XlO 是 Tyr 或 Trp ;X12 是 Lys、Arg、His、Ala、Leu、Dpu> Dpr> Orn、瓜氨酸或鸟氨酸; X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X16 是 Ser、Thr> Lys、Arg、His、Glu、Asp、Ala、Gly、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X17 是 Arg、Lys、His、Glu、Gin、Ala、Leu、Dpu、Dpr、Orn、Cys、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; X18是Arg、Lys、His、Tyr> Ala、Ser、Leu、Cys> Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; X20 是 Gin、Lys、Arg、His、Glu、Asp、Ala、Cys> Orn 或瓜氨酸; X21是Asp、Glu、Gin、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val、Ile 或 Leu ;X24 是 Gin、Lys、Arg、Glu、Asp、Ser、Ala、Leu、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; X27 是 Met、Lys、Arg、Glu、Leu、Nle、Cys 或不存在; X28 是 Asn、Lys、Arg、Glu、Asp、Ser> Ala、Leu、Cys、瓜氨酸、Orn,或不存在; X29是Thr、Lys、Arg、Glu、Ser、Ala、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸、乙酰基苯丙氨酸或不存在; R2 是 NH2 或 OH ; Z1不存在或具有以下序列Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser ;Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Cys ;Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala ;或Lys Arg Asn Arg ; Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr> Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu>Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列; 其中,如果Z1存在的话,则X27、X28和X29也存在;以及 如果 Z1 不存在的话,则该化合物在 XI、X2、X3、ΧΙΟ、X12、X15、X16、X17、X18、X20、X21、X23、X24、X27、X28和X29的一个或更多个位置相对于人胰高血糖素具有替换或缺失; 其中所述化合物具有比人胰高血糖素更高的GLP-I受体选择性。
7.根据权利要求I至6中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂具有式 R1-X-Z2-R2, 或其可药用盐, 其中 R1是氢、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2 ; X是具有式IV的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-AIa-Lys-Asp-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Leu-Ser-Ala 或者,如果不同于式IV的话,则在以下位置的至多4处不同于式IV 第2位残基选自D_Ser、Aib ; 第 16 位残基选自Ser、Asp、Lys、Arg ;第18位残基是:Ala ; 第 20 位残基选自Gln、Arg、Glu、Asp ; 第21位残基是Glu ; 第23位残基是Val ; 第 24 位残基选自Gln、Asp、Lys、Arg、Ala ; 第27位残基选自Met、Cys、Lys或不存在; 第28位残基选自Asn、Arg、Lys、Ala、Glu、Asp或不存在;以及 第29位残基选自Thr、Arg或不存在; 并且Z2不存在或者是具有I 20个选自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu、Dpr和Orn之氨基酸单元的序列。
8.根据权利要求7的方法,其中如果不同于式IV的话,则X在以下位置的至多4处不同于式IV 第2位残基选自D_Ser、Aib ; 第16位残基选自Ser、Asp、Lys ; 第20位残基选自Gln、Arg、Glu ; 第27位残基选自Met、Cys、Lys ;以及 第28位残基选自Asn、Arg、Ala。
9.根据权利要求7或权利要求8的方法,其中如果不同于式IV的话,则X在以下位置的至多3处不同于式IV: 第2位残基选自D_Ser、Aib ; 第16位残基选自Ser、Asp、Lys ;以及 第20位残基选自Gln、Arg、Glu。
10.根据权利要求7至9中任一项的方法,其中如果不同于式IV的话,则X在以下位置的至多4处不同于式IV: 第2位残基选自D_Ser、Aib ; 第16位残基选自Ser、Asp、Lys ; 第18位残基是Ala;以及 第20位残基选自Gln、Arg、Glu。
11.根据权利要求7至10中任一项的方法,其中如果不同于式IV的话,则X在以下位置的至多4处不同于式IV: 第23位残基是Val ; 第 24 位残基选自Gln、Asp、Lys、Arg、Ala ; 第27位残基选自Met、Cys、Lys ;以及 第28位残基选自Asn、Arg、Ala。
12.根据权利要求7至11中任一项的方法,其中在所述肽序列X内形成一个或更多个分子内桥。
13.根据权利要求12的方法,其中所述或每个桥在X的两个氨基酸残基的侧链之间形成,所述两个氨基酸残基被X线性序列中的三个氨基酸所分隔。
14.根据权利要求12或权利要求13的方法,其中第16和20位的残基形成盐桥。
15.根据权利要求14的方法,其中所述第16和20位的残基选自16-Asp,20-Lys ;16-Glu,20-Lys ;16-Asp,20-Arg ;16-Glu,20-Arg ;16-Lys,20-Asp ;16-Arg,20-Asp ;16-Lys,20-Glu ;16-Arg,20-Glu。
16.根据权利要求12或权利要求13的方法,其中第20和24位的残基形成盐桥。
17.根据权利要求16的方法,其中所述第20和24位的残基选自20-Asp,24-Lys ;20-Glu,24-Lys ;20-Asp,24-Arg ;20-Glu,24-Arg ;20-Lys,24-Asp ;20-Arg,24-Asp ;20-Lys,24-Glu ;20-Arg,24-Glu。
18.根据权利要求7至17中任一项的方法,其中X包含一个或更多个以下残基组20-Lys,24-Glu ;20-Lys,23-Ile,24-Glu ;16-Glu,20-Lys ;16_Glu,20_Lys,29_Ala ;16-Glu,20-Lys,23-Ile,24-Glu ;16-Glu,20-Lys,23-Ile,24-Glu,29-Ala ;16-Glu,20-Lys,24-Glu,29-Ala ;20-Lys,23-Ile,24-Glu,29-Ala ;27_Leu,28_Ser,29_Ala ;29-Ala ;16-Ser ;20-Gln ;23-Val;24-Gln;16-Ser,20-Gln ;16-Asp,20-Arg,24-Asp ;16-Lys,20-Glu ;24-Arg ;or28-Argo
19.根据权利要求7至18中任一项的方法,其中X具有以下序列 HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIEWLLSA.;HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFIEffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVEffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIQffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFIEffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDDRRARDFIDffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFIKffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIRffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIEffLLRA ;HSQGTFTSDYSKYLDSRRAKDFIEffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDERAAKDFIEffLLSA ;HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIDffLLSA ;或HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFIEWLLAA。
20.根据权利要求6的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐, 其中 R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2 ; X是具有式II的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Arg-Ala-Arg-AIa-Asp-Asp-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Lys-Glu-Ala 或者,如果不同于式I的话,则X在以下位置的至多4处不同于式II 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第16位残基选自Lys、Asp、Glu ; 第 18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ; 第 20 位残基选自:Gln、His、Lys、Arg、Glu ; 第21位残基是Glu ; 第 24 位残基选自Gln、Leu、Glu、Lys、Arg、Asp ; 第27位残基选自Met、Cys. Arg. Glu、Leu或者不存在; 第28位残基选自Asn、Ser、Arg、Lys、Ala、Leu、Glu、Asp或者不存在;以及 第29位残基选自ThiN Glu、Lys或者不存在; 并且Z2不存在或者是具有I 20个选自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbuλ Dpr和Orn之氨基酸单元的序列。
21.根据权利要求20的方法,其中如果不同于式II的话,则X在以下位置的至多4处不同于式II 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ; 第 20 位残基选自:Gln、His、Lys、Arg、Glu ;第 24 位残基选自Gln、Leu、Glu、Lys、Arg ; 第 27 位残基选自Met、Cys、Arg、Glu、Leu ; 第 28 位残基选自Asn、Serλ Arg、Lys、Ala、Leu ;以及 第29位残基选自:Thr、Glu、Lys。
22.根据权利要求20的方法,其中X包含残基27-Lys和28-Ser。
23.根据权利要求22的方法,其中如果不同于式II的话,则X还在以下位置的一处或两处不同于式II 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ; 第 20 位残基选自:Gln、His、Lys、Arg、Glu ; 第24位残基选自Gln、Leu、Glu、Lys、Arg ;以及 第29位残基选自Thr、Glu、Lys。
24.根据权利要求20至23中任一项的方法,其中在所述肽序列X内形成一个或更多个分子内桥。
25.根据权利要求24的方法,其中所述或每个桥在X的两个氨基酸残基的侧链之间形成,所述两个氨基酸残基被X线性序列中的三个氨基酸所分隔。
26.根据权利要求24或权利要求25的方法,其中第16和20位的残基形成盐桥。
27.根据权利要求26的方法,其中所述盐桥在以下一个残基对之间形成16-Asp,20-Lys ;16-Glu,20-Lys ;16-Asp,20-Arg ;16-Glu,20-Arg ;16-Lys,20-Asp ;16-Arg,20-Asp ;16-Lys,20-Glu ;和16-Arg,20-Glu。
28.根据权利要求20至27中任一项的方法,其中X包含一个或更多个以下残基组16-Arg ;16_Ar9,20-Asp ;16-Arg,20-Asp,24-Ala ;16-Arg,20-Asp,27-Lys,28-Ser ;16-Arg,20-Asp,29-Ala ;16-Arg,27-Lys,28-Ser ;16-Arg,27-Lys,28-Ser,29-Ala ;24_Ala 27_Lys 28_Ser ;24_Ala,27_Lysj28_Ser,29_Ala ;24-Ala ;27-Lys;28-Ser;20-Glu,28-Ser,29-Thr ;24-Glu,28-Ser,29-Thr ;27-Glu,28-Arg ;2-D-Ser, 28-Ser, 29-Thr ;或20-His,28-Ser,29-Thr。
29.根据权利要求20至28中任一项的方法,其中X具有以下序列 HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLKSA ;HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLKEA ;HSQGTFTSDYSKYLDRARAEDFVAffLKST ;HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVEffLKST ;HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLERA ;H-DSer-QGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLKST ;HSQGTFTSDYSKYLDRARAHDFVAffLKST ;或HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAffLKST。
30.根据权利要求I至6中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐, 其中 R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2 ; X是具有式III的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Leu-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-AIa-Lys-Asp-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Glu-Ser-Ala 或者,如果不同于式III的话,则X在以下位置的至多4处不同于式III 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly、Asp ; 第17位残基选自Lys、Leu ; 第 18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser、Tyr ; 第 20 位残基选自:Gln、His、Arg、Glu、Asp ; 第21位残基是Glu ; 第23位残基选自Val、Leu ; 第 24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg、Asp ; 第27位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Leu或者不存在; 第28位残基选自Asn、Arg、Lys、Glu、Ala、Leu、Asp或者不存在;以及 第29位残基选自ThiN Glu、Lys或者不存在; 并且Z2不存在或者是具有I 20个选自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbuλ Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列。
31.根据权利要求30的方法,其中如果不同于式III的话,则X在以下位置的至多4处不同于式III: 第2位残基选自Aib、D-Ser ;第 16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly ; 第17位残基选自Lys、Leu ; 第 18 位残基选自Lys、His、Ala、Ser> Tyr ; 第23位残基选自Val、Leu ; 第 27 位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Leu ; 第 28 位残基选自Asn、Arg、Lys> Glu、Ala、Leu ;以及 第29位残基选自Thr、Glu、Lys。
32.根据权利要求30或权利要求31的方法,其中如果不同于式III的话,则X在以下位置的至多4处不同于式III 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly ; 第17位残基选自Lys、Leu ; 第18位残基选自Lys、His、Ala、Ser> Tyr ;以及 第23位残基选自Val、Leu。
33.根据权利要求30至32中任一项的方法,其中如果不同于式III的话,则X在以下位置的至多4处不同于式III 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第23位残基选自Val、Leu。
第 27 位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Leu ; 第 28 位残基选自Asn、Arg、Lys> Glu、Ala、Leu ;以及 第29位残基选自Thr、Glu、Lys。
34.根据权利要求30至33中任一项的方法,其中X包含一个或更多个以下残基组 20-Lys,24-Glu ;20-Lys,24-Glu,29-Ala ;20-Lys,23-Ile,24-Glu ;27-Glu,28-Ser,29-Ala ;29-Ala ;20-Gln ;23-Val;24-Gln;29-Thr ;27-Met,28-Asn,29-Thr;20-Gln,23-Val,24-Gln ;20-Glu, 24-Lys ;或28-Argo
35.根据权利要求30至34中任一项的方法,其中所述肽序列X内形成一个或更多个分子内桥。
36.根据权利要求35的方法,其中所述或每个桥在X的两个氨基酸残基的侧链之间形成,所述两个氨基酸残基被X线性序列中的三个氨基酸所分隔。
37.根据权利要求35或权利要求36的方法,其中在残基对16与20、17与21、20与24或者24与28的侧链之间形成所述桥。
38.根据权利要求37的方法,其中第20和24位的残基形成分子内桥。
39.根据权利要求38的方法,其中第20和24位的残基选自20-Asp,24-Lys ;20-Glu,24-Lys ;20-Asp,24-Arg ;20-Glu,24-Arg ;20-Lys,24-Asp ;20-Arg,24-Asp ;20-Lys,24-Glu ;和20-Arg,24-Glu。
40.根据权利要求30至39中任一项的方法,其中X具有以下序列 HSQGTFTSDYSLYLDSRRAQDFIEffLESA ;HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFVEffLESA ;HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFIQffLESA ;HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFIEffLEST ;HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFIEffLMNT ;HSQGTFTSDYSLYLDSRRAQDFVQffLESA ;HSQGTFTSDYSLYLDSRRAEDFIKffLESA ;或HSQGTFTSDYSLYLDSRRAKDFIEWLERA。
41.根据权利要求I至6中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐, 其中 R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2 ; X是具有式V的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-AIa-His-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Leu-Arg-Ala 或者,如果不同于式V的话,则X在以下位置的至多4处不同于式V 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 12 位残基选自Leu、Arg、Dpu、Dpr、Orn ; 第 16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Asp ; 第 17 位残基选自Arg、Leu、Dpu、Dpr、Orn ; 第 18 位残基选自Arg、Lys、His、Ser、Tyr ; 第 20 位残基选自:Gln、Lys、Arg、Glu、Asp ; 第21位残基是Glu ; 第 24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg、Asp ; 第27位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Glu或不存在;第28位残基选自Asn、Ser、Lys、Glu、Ala、Leu、Asp或不存在;以及 第29位残基选自ThiN Glu、Lys或不存在; 并且Z2不存在或者是具有I 20个选自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbuλ Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列。
42.根据权利要求41的方法,其中如果不同于式V的话,则X在以下位置的至多4处不同于式V 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu ; 第17位残基选自Arg、Leu ; 第 18 位残基选自Arg、Lys、His、Ser、Tyr ; 第 20 位残基选自:Gln、Lys、Arg、Glu ; 第 24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg ; 第 27 位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Glu ; 第 28 位残基选自Asn、Serλ Lys、Glu、Ala、Leu ;以及 第29位残基选自:Thr、Glu、Lys。
43.根据权利要求41或权利要求42的方法,其中如果不同于式V的话,则X在以下位置的至多4处不同于式V: 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly ; 第 24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg ; 第 27 位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Glu ; 第 28 位残基选自Asn、Serλ Lys、Glu、Ala、Leu ;以及 第29位残基选自:Thr、Glu、Lys。
44.根据权利要求41至43中任一项的方法,其中X包含一个或更多个以下残基组及其组合.17-Lys,18-Ala ;.17-Leu,18-Ala ;. 17-Lys,18-Ala,20-His ;.17-Leu,18-Ala,20-His ;.17-Lys,18-Ala,24-Glu ;. 17-Leu,18-Ala,24-Glu ;. 17-Lys,18-Ala,27-Leu ;. 17—Leu 18—Ala 27—Leu ;.17_Lys j18_Ala,29_Ala ;. 17-Leu,18_Ala,29_Ala ;. 17_Lys j18_Ala,27_Leu,29_Ala ;. 17_Leu 18_Ala,27_Leu,29_Ala ;. 17-Lys,18-Ala,27-Leu,28-Arg,29-Ala ;. 17-Leu,18-Ala,27-Leu,28-Arg,29-Ala ;24-Glu,28-Arg ;24-Glu,28-Arg,27-Leu ;24_Glu,28_Arg,27_Leu,29_Ala ;27-Leu,28-Arg,29-Ala ;29_Ala ;20-Arg,24-Arg,27-Lys,28-Leu ;17-Arg;18-Arg;20-Gln ;24-Gln ;27-Met,28-Asn,29-Thr ;或24-Lyso
45.根据权利要求41至45中任一项的方法,其中X具有以下序列 HSQGTFTSDYSKYLDSKAARDFVRffLKLA ;HSQGTFTSDYSKYLDSRAAHDFVEffLLRA ;·HSQGTFTSDYSKYLDSKRAHDFVEffLLRA ;HSQGTFTSDYSKYLDSKAAQDFVEffLLRA ;HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVQffLLRA ;HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVKffLLRA ;H-DSer-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA ;H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA ;HSQGTFTSDYSKYLDSKAAKDFVEffLLRA ;HSQGTFTSDYSKYLDKKAAHDFVEffLLRA 或HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA。
46.根据权利要求I至6中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂具有式R1-X-Z2-R2或其可药用盐, 其中 R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基;R2 是 OH 或 NH2 ; X是具有式VI的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-AIa-His-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Leu-Arg-Ala 或者,如果不同于式VI的话,则X在以下位置的至多5处不同于式VI 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu ; 第 17 位残基选自Arg、Leu、Dpu、Dpr、Orn ; 第 20 位残基选自:Gln、Lys、Arg、Glu、Asp ; 第21位残基是Glu ;第 24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg、Asp ; 第27位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Glu或不存在; 第28位残基选自Asn、Ser、Lys、Glu、Ala、Leu、Asp或不存在;以及 第29位残基选自ThiN Glu、Lys或不存在; 并且Z2不存在或者是具有I 20个选自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbuλ Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列。
47.根据权利要求46的方法,其中如果不同于式VI的话,则X在以下位置的至多4处不同于式VI 第2位残基选自Aib、D-Ser ; 第 16 位残基选自Arg、His、Lys、Glu、Gly ; 第17位残基选自Arg、Leu ; 第 18 位残基选自Arg、Lys、His、Ser、Tyr ; 第 20 位残基选自:Gln、Lys、Arg、Glu ; 第 24 位残基选自Gln、Leu、Ala、Lys、Arg ; 第 27 位残基选自Met、Cys、Lys、Arg、Glu ; 第 28 位残基选自Asn、Serλ Lys、Glu、Ala、Leu ;以及 第29位残基选自:Thr、Glu、Lys。
48.根据权利要求46或权利要求47的方法,其中X包含以下任意残基组17-Lys,18-Ala ;17-Leu,18-Ala ;17-Lys,18-Ala,20-His ;17-Leu,18-Ala,20-His ;17-Lys,18-Ala,24-Glu ;17-Leu,18-Ala,24-Glu ;17-Lys,18-Ala,27-Leu ;17—Leu 18—Ala 27—Leu ;17_Lys j18_Ala,29_Ala ;17-Leu,18_Ala,29_Ala ;17_Lys j18_Ala,27_Leu,29_Ala ;17_Leu 18_Ala,27_Leu,29_Ala ;17-Lys,18-Ala,27-Leu,28-Arg,29-Ala ;17-Leu,18-Ala,27-Leu,28-Arg,29-Ala ;24-Glu,28-Arg ;24-Glu,28-Arg,27-Leu ;24_Glu,28_Arg,27_Leu,29_Ala ;27-Leu,28-Arg,29-Ala ;29_Ala ;20-Arg,24-Arg,27-Lys,28-Leu ;17-Arg ;18-Arg ;20-Gln ;24-Gln ;27-Met,28-Asn,29-Thr ;24-Lys ;或20-Gln,24-Gln,27-Met,28-Asn,29-Thr ;或17-Leu,20-Gln,24-Gln,28-Asn,29-Thr。
49.根据权利要求46至48中任一项的方法,其中X具有以下序列 HSQGTFTSDYSKYLDSKAAQDFVQffLMNT 或 HSQGTFTSDYSKYLDSLAAQDFVQffLLNT。
50.根据权利要求41至49中任一项的方法,其中所述肽X具有一个或更多个分子内桥。
51.根据权利要求50的方法,其中所述或每个桥在X的两个氨基酸残基的侧链之间形成,所述两个氨基酸残基被X线性序列中的三个氨基酸所分隔。
52.根据权利要求50或权利要求51的方法,其中所述桥在残基对12与16、16与20、17与21、20与24或者24与28的侧链之间形成。
53.根据权利要求52的方法,其中第16和20位的残基选自16-Glu,20-Lys ;16-Asp,20-Arg ;16-Glu,20-Arg ;16-Lys,20-Asp ;16-Arg,20-Asp ;16-Lys,20-Glu ;和16-Arg,20-Glu。
54.根据权利要求I至6中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂具有式R1-X-Z1-Z2-R2或者其可药用盐或衍生物, 其中 R1是H、C1^4烷基(例如甲基)、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基; 其中X具有式VII Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X10-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-X17-X18-Ala-X20-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29 其中 Xl是His、D_His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、α,α-二甲基咪唑乙酸(DMIA)、N-甲基His、α -甲基His或咪唑乙酸; X2 是 Ser、D-Ser、Ala、D-Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser、氨基异丁酸(Aib)或 N-甲基 Ala; X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ;XlO 是 Tyr 或 Trp ; X12是Lys、瓜氨酸、Orn或Arg ; X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X17是Arg、Gin、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; X18是Arg、Ala、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸; X21是Gin、Glu、Asp、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 Ile ; X24是Ala、Gin、Glu、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle ; X28 是 Asn、Arg、瓜氨酸、Orn> Lys 或 Asp ; X29是Thr、Gly、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;R2 是 NH2 或 OH ; Z1不存在或具有以下序列Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser ;Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Cys ;Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala ;或Lys Arg Asn Arg ; Z2 不存在或者是具有 I 20 个选自 Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gin、Asp、Glu、Lys>Arg、His、Met、Har> Dbu> Dpr和Orn之氨基酸单元的肽序列; 其中,如果Z1不存在的话,则所述化合物在XI、X2、X3、X10、X12、X15、X16、X17、X18、X20、X21、X23、X24、X27、X28和X29的一个或更多个位置处具有相对于人胰高血糖素的替换或缺失; 其中所述化合物具有比人胰高血糖素更高的GLP-I受体选择性和/或其中所述化合物表现出天然GLP-I对GLP-I受体之活性的至少20%。
55.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X在选自1、2、3、5、7、10、11、13、14、17、18、19、21、24、27、28和29的位置处通过I至3个氨基酸修饰而与式VII不同。
56.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.2 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr 其中 X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X17是Arg、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
57.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.3 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr其中 X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X21是Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
58.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.4 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr 其中 X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X24是Gin、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
59.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.5 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-Asn-Thr其中 X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X21是Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; X24是Gin、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
60.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.6 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-X21-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr 其中 X21是Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
61.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.7 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-Asn-Thr 其中 X24是Gin、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
62.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.8 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-AIa-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr 其中 X16是Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸。
63.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.9 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr 其中X27 是 Met、Leu 或 Nle。
64.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.19 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-X30 其中 X30是任何合适的氨基酸。
65.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.20 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29 其中 X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸;X24 是 Gln 或 Glu ;X28 是 Asn、Asp 或 Lys ;X29 是 Thr 或 Gly。
66.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.21 His-X2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr 其中 X2是D-Ser、Ala、Gly、N-甲基Ser或氨基异丁酸。
67.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.22 His-X2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr 其中 X2是氨基异丁酸。
68.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.23 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Cys-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr 其中 第17位的Cys是聚乙二醇化的;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
69.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.24 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-AIa-Gln-Cys-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr其中 第21位的Cys是聚乙二醇化的;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
70.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.25 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-AIa-Gln-Asp-Phe-Val-Cys-Trp-Leu-X27-Asn-Thr其中 第24位的Cys是聚乙二醇化的;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
71.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.30 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser其中X27 是 Met、Leu 或 Nle。
72.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.31 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn_IIe-Ala其中X27 是 Met、Leu 或 Nle。
73.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.32 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-X27-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg 其中X27 是 Met、Leu 或 Nle。
74.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.33 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29其中 X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸; X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ;X24 是 Gln 或 Glu ; X28是Asn、Lys或酸性氨基酸; X29是Thr、Gly或酸性氨基酸。
75.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.36 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-PTO-Ser0
76.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.37 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-AIa-Gln-Asp-Phe-Val-Cys-Trp-Leu-Met-Asn-Thr其中2- 丁内酯通过Cys的巯基连至第24位。
77.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.38 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-AIa-Gln-Asp-Phe-Val-Cys-Trp-Leu-Met-Asn-Thr其中羧甲基通过Cys的巯基连至第24位。
78.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.39 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Arg-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-PTO-Ser0
79.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.40 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-X15-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-Thr其中X15 是 Glu 或 Asp ;X28 是 Glu 或 Asp。
80.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.41 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-Glu-Arg-Arg-Ala-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-Thr其中X15 是 Glu 或 Asp ; X28是Glu或Asp ;并且 在第12和16位的侧链之间存在内酰胺环。
81.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.42 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-Glu-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-Thr其中X15 是 Glu 或 Asp ; X28是Glu或Asp ;并且 在第16和20位的侧链之间存在内酰胺环。
82.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.43 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-Ser-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-X28-Thr其中X15 是 Glu 或 Asp ; X28是Glu或Asp ;并且 在第20和24位的侧链之间存在内酰胺环。
83.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.44 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-X29 其中X15 是 Glu 或 Asp ;X29 是 Glu 或 Thr。
84.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.45 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-X15-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29 其中X12 是 Lys 或 Glu ; X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸; X16是Ser、Gin、Glu、Lys、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸;父20是6111、6111 或 Lys ;X24 是 Gin、Lys 或 Glu ; X28是Asn、Lys或酸性氨基酸; X29是Thr、Gly或酸性氨基酸。
85.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.46 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-Asn-Thr 其中 X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;·X20 是 Gln 或 Lys ; X24 是 Gln 或 Glu。
86.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.47 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-AIa-Lys-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thrο
87.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.48 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-AIa-Lys-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Asn-Thrο
88.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.49 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-AIa-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Asn-Thrο
89.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.50 His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-AIa-Lys-Glu-Phe-IIe-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Glyο
90.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.51 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29其中 X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸; X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸; X21是Asp、Glu、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X24 是 Gln 或 Glu ; X28是Asn、Lys或酸性氨基酸; X29是Thr、Gly或酸性氨基酸。
91.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.52 His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-AIa-Lys-Glu-Phe-IIe-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Argο
92.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.53 His-Ser-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-X29其中X3 是 Glu、Orn 或 Nle ; X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸; X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ;X24 是 Gln 或 Glu ; X28是Asn、Lys或酸性氨基酸; X29是Thr或酸性氨基酸。
93.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.54 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-X17-X18-AIa-Lys-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-Met-Asn-Thr其中X17 是 Arg 或 Gln ;X18 是 Arg 或 Ala ;X21 是 Asp 或 Glu ;X23 是 Val 或 Ile ;X24 是 Gln 或 Ala。
94.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.56 X1-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29其中 Xl 是 His、D-His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、DMIA、N-甲基 His、α -甲基His或咪唑乙酸; X2 是 Ser、D-Ser> Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser、Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ; X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸、高磺基丙氨酸; X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸; X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 Ile ; X24是Ala、Gin、Glu、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle ;X28 是 Asn、Lys 或 Asp ;X29是Thr、Gly、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸。
95.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.57 Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-Glu-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29 其中 Xl 是 His、D-His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、DMIA、N-甲基 His、α -甲基His或咪唑乙酸; X2 是 Ser> D-Ser、Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser> Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ; X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸; X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 Ile ; X24是Ala、Gin、Glu、Cys、Orn、高半胱氨酸·或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle ;X28 是 Asn、Lys 或 Asp ; X29是Thr、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; 并且其中在第12和16位的侧链之间存在内酰胺桥。
96.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.58 Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-Glu-Arg-Arg-Ala-Lys-X21-Phe-X23-X24-Trp-Leu-X27-X28-X29 其中 Xl 是 His、D-His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、DMIA、N-甲基 His、α -甲基His或咪唑乙酸; X2 是 Ser、D-Ser> Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser、Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ; X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 Ile ; X24是Ala、Gin、Glu、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle ;X28 是 Asn、Lys 或 Asp ; X29是Thr、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; 并且其中在第16和20位的侧链之间存在内酰胺桥。
97.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.59 Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-X16-Arg-Arg-Ala-Lys-X21-Phe-X23-Glu-Trp-Leu-X27-X28-X29 其中 Xl 是 His、D-His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、DMIA、N-甲基 His、α -甲基His或咪唑乙酸; X2 是 Ser、D_Ser、Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser、Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ; X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 Ile ;X27 是 Met、Leu 或 Nle ;X28 是 Asn、Lys 或 Asp ; X29是Thr、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; 并且其中在第20和24位的侧链之间存在内酰胺桥。
98.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.60 Xl-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-XI5-X16-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-X23-Glu-Trp-Leu-X27-Lys-X29 其中 Xl 是 His、D-His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、DMIA、N-甲基 His、α -甲基His或咪唑乙酸; X2 是 Ser、D-Ser> Ala、D_Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser、Aib 或 N-甲基 Ala ;X3 是 Gin、Glu、Orn 或 Nle ; X15是Asp、Glu、磺基丙氨酸、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸; X20 是 Gin、Lys、Arg、Orn 或瓜氨酸; X21是Gin、Glu、Asp、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X23 是 Val 或 Ile ;X27 是 Met、Leu 或 Nle ; X29是Thr、Gly、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; 并且其中在第24和28位的侧链之间存在内酰胺桥。
99.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.63 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-X16-Arg-Arg-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-Asp-Thr 其中 X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ; X21是Asp、Lys、Cys、Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸; X24是Gin、Lys> Cys> Orn、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸;X27 是 Met、Leu 或 Nle。
100.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.66 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-X29其中X28 是 Asp 或 Asn ;X29 是 Thr 或 Gly ; 并且其中第12和16位的侧链之间存在内酰胺环。
101.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.67 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-X28-X29 其中X28 是 Asp 或 Asn ;X29 是 Thr 或 Gly ; 并且其中在第16和20位的侧链之间存在内酰胺环。
102.根据权利要求1至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.68 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-X28-X29 其中X28 是 Asp 或 Asn ;X29 是 Thr 或 Gly ; 并且其中在第20和24位的侧链之间存在内酰胺环。
103.根据权利要求1至6或54中任一项的方法,其中X具有式VII.69 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-X29 其中X29 是 Thr 或 Gly ; 并且其中在第24和28位的侧链之间存在内酰胺环。
104.根据权利要求1至6或54中任一项的方法,其中X具有图3:表2中所列出的序列。
105.根据权利要求1至6或54中任一项的方法,其中X-Zl具有式VII.61 Xl-X2-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Arg-X18-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-Asn-X29-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-Cys 其中 Xl 是 His、D-His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、DMIA、N-甲基 His、α -甲基His或咪唑乙酸; X2 是 Ser、D-Ser> Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser、Aib、N-甲基 Ala 或 D-Ala ;X18 是 Ala 或 Arg ;X24 是 Ala、Gln 或 Cys-PEG ;X29 是 Thr-C0NH2、Cys-PEG 或 Gly ; 第40位是Cys-PEG或不存在; 前提是第30至40位(Z2)仅当第29位是Gly时才存在。
106.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X-Zl具有式VII.62 Xl-X2-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Glu-Gln-X18-Ala-Lys-Glu-Phe-IIe-X24-Trp-Leu-Met-Asn-X29-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-Cys其中 Xl 是 His、D-His、(脱氨基)His、羟基-His、乙酰基-His、高-His、DMIA、N-甲基 His、α -甲基His或咪唑乙酸; X2 是 Ser、D-Ser> Ala、Val、Gly、N-甲基 Ser、Aib、N-甲基 Ala 或 D-Ala ;X18 是 Ala 或 Arg ;X24 是 Ala、Gln 或 Cys-PEG ;X29 是 Thr-C0NH2、Cys-PEG 或 Gly ; 第40位是Cys-PEG或不存在; 前提是第30至40位(Z2)仅当第29位是Gly时才存在。
107.根据权利要求I至6或54中任一项的方法,其中X-Zl具有式VII.64 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xl5-X16~Arg-Arg-Ala-X20-Asp-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Met-X28-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Pro-Pro-Pro-Ser 其中 X15是Asp、Glu、高谷氨酸、磺基丙氨酸或高磺基丙氨酸; X16是Ser、Glu、Gin、高谷氨酸或高磺基丙氨酸;X20 是 Gln 或 Lys ;X24 是 Gln 或 Glu ;X28 是 Asn、Lys 或 Asp。
108.根据权利要求I至107中任一项的方法,其中所述肽序列X在最少2个位置处例如在29个位置中的至少3、4、5、6个位置处不同于天然人胰高血糖素之序列。
109.根据权利要求I至6中任一项的方法,其中X仅在X12、X17或X18位不同于人胰闻血糖素。
110.根据权利要求109的方法,其中X12位的残基是Ala或Arg。
111.根据权利要求109的方法,其中X17位的残基是Glu或Lys。
112.根据权利要求109的方法,其中X18位的残基是His、Ser、Ala或Tyr。
113.根据权利要求109的方法,其中X具有以下序列 HSQGTFTSDYSAYLDSRRAQDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSRYLDSRRAQDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDSERAQDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDSKRAQDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDSRHAQDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDSRSAQDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDSRAAQDFVQffLMNT ;或HSQGTFTSDYSKYLDSRYAQDFVQffLMNT。
114.根据权利要求108的方法,其中X具有以下序列 HSQGTFTSDYSRYLDSRRAKDFVQffLLNT ;HSQGTFTSDYSRYLDSRRAQDFVQffLLNT ; HSQGTFTSDYSRYLDSRRAQDFVQffLLNK ;HSQGTFTSDYSKYLDSALAQDFVQffLLNT ;HSQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDKO RRAE O DFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSRYLDERRAQDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSKO YLDE O RRAQDFVQffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFIEffLMNT ;HSQGTFTSDYSKYLDSKAAQDFVQffLMNT ;或HSQGTFTSDYSKYLDSLAAQDFVQffLMNT。
115.根据权利要求I至108中任一项的方法,其中X在最多10个位置处例如在最多7、8、9或10个位置处不同于人胰高血糖素。
116.根据权利要求6至115中任一项的方法,其中Z2代表I 15、I 10或I 7个氨基酸残基例如1、2、3、4、5、6或7个氨基酸残基例如6个氨基酸残基的肽序列。
117.根据权利要求116的方法,其中Z2中氨基酸残基各自独立地选自GliuLys和Cys。
118.根据权利要求117的方法,其中Z2选自Lys3、Lys4、Lys5、Lys6或Lys7。
119.根据权利要求6至115中任一项的方法,其中Z2不存在。
120.根据权利要求6至104或108至119中任一项的方法,其中Z1不存在。
121.根据权利要求6至120中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂的C末端是酰胺化的。
122.根据权利要求6至121中任一项的方法,其中X3位的残基作为替代地选自乙酰氨基甲基-半胱氨酸、鲸蜡基二氨基丁酸、氨基甲酰基二氨基丙酸、甲基谷氨酰胺和甲硫氨酸亚砜。
123.根据权利要求6至122中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I激动剂的一个或更多个氨基酸侧链与亲脂取代基缀合。
124.根据权利要求123的方法,其中所述亲脂取代基与所述氨基酸侧链中的原子直接共价键合。
125.根据权利要求123或权利要求124的方法,其中第16、17、20、24、27、28位的一个或更多个残基或者Z2的残基之一的侧链与亲脂取代基缀合。
126.根据权利要求125的方法,其中第16、17、20和28位中至少一个与亲脂取代基缀口 ο
127.根据权利要求122至126中任一项的方法,其中Z1不存在并且Z2仅由一个氨基酸残基X30组成。
128.根据权利要求127的方法,其中X30是Cys或Lys。
129.根据权利要求127或权利要求128的方法,其中X30与亲脂取代基缀合。
130.根据权利要求123至129中任一项的方法,其中仅一个侧链与亲脂取代基缀合。
131.根据权利要求130的方法,其中所述一个侧链在第16、17、18、20、24、27、28或30位,例如在第16、17或20位,例如在第17位。
132.根据权利要求123至129中任一项的方法,其中只有两个侧链与亲脂取代基缀合。
133.根据权利要求132的方法,其中每个取代基在第16、17、18、20、24、27、28或30位中的一个位置,例如在第16、17或20位中的一个位置。
134.根据权利要求123至133中任一项的方法,其中每个亲脂取代基包含与氨基酸侧链通过间隔物缀合的亲脂部分。
135.根据权利要求134的方法,其中亲脂部分与间隔物的组合选自十二烷酰基-Y -Glu、十六烧酸基-Y -Glu、十六烧酸基-Glu、十六烧酸基-[3-氨基丙酸基]、十六烧酸基-[8-氨基羊酸基]、十六烧酸基_ ε -Lys、2_ 丁基羊酸基_ Y -Glu、十八烧酸基_ Y -Glu和十六烧酰基-[4-氨基丁酰基]。
136.根据权利要求6至135中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂的一个或更多个氨基酸侧链与聚合物部分缀合。
137.根据权利要求136的方法,其中所述聚合物部分是水溶性的(两亲性的或亲水性的)、无毒的且药学上惰性的。
138.根据权利要求136或权利要求137的方法,其中所述聚合物部分选自聚乙二醇(PEG)、PEG的均聚物或共聚物、单甲基取代的PEG聚合物(mPEG)或聚氧乙烯甘油(POG)以及聚氨基酸。
139.根据权利要求138的方法,其中所述聚氨基酸选自聚赖氨酸、聚天冬氨酸和聚谷氨酸。
140.根据权利要求136至139中任一项的方法,其中所述聚合物部分是直链。
141.根据权利要求136至139中任一项的方法,其中所述聚合物部分是带支链的。
142.根据权利要求136至139中任一项的方法,其中所述聚合物部分具有500 40,OOODa,500 5,000Da、500 10,OOODa、1000 5000Da、10,000 20,OOODa 或20,000 40,OOODa的分子量。
143.根据权利要求136至142中任一项的方法,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂包含两个或更多个聚合物部分。
144.根据权利要求143的方法,其中所有聚合物部分的总分子量为500 40,OOODa、500 5,000Da、500 10,OOODa、1000 5000Da、10,000 20,OOODa 或 20,000 40,OOODa0
145.根据权利要求136至144中任一项的方法,其中所述聚合物部分与氨基酸侧链的氨基、羧基或巯基共价偶联。
146.根据权利要求145的方法,其中所述聚合物部分与Cys残基的巯基、Lys残基的ε氨基或者Asp或Glu残基的羧基共价偶联。
147.根据权利要求136至146中任一项的方法,其中所述聚合物部分与第16、17、20、21、24或29位中一个或更多个位置处的残基侧链或者与所述肽的C末端偶联。
148.根据权利要求147的方法,其中所述聚合物部分在第16、17、21和24位中的一个或更多个位置偶联。
149.胰高血糖素-GLP-I双重激动剂作为变力剂在治疗心脏病或心功能障碍中的用途。
150.胰高血糖素-GLP-I双重激动剂在制备用于治疗心脏病或心功能障碍之药物中的用途,其中施用所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂用作变力剂。
151.胰高血糖素-GLP-I双重激动剂在制备能够改善心脏收缩性而不伴随心率增加之药物中的用途。
152.胰高血糖素-GLP-I双重激动剂,其在治疗心脏病或心功能障碍中用作变力剂。
153.胰高血糖素-GLP-I双重激动剂,其用于制备治疗心脏病或心功能障碍的药物,其中施用所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂用作变力剂。
154.胰高血糖素-GLP-I双重激动剂,其用于权利要求149至153中任一项的用途,其中所述胰高血糖素-GLP-I双重激动剂如权利要求6至148中的任一项所限定。
全文摘要
本发明涉及心功能障碍的治疗。特别地,被认为是胰高血糖素-GLP-1双重激动剂化合物的某些化合物施加正性变力作用,同时维持心脏的能量平衡,并因此可优于已知的变力剂(例如多巴酚丁胺、去甲肾上腺素和胰高血糖素)。
文档编号A61P9/04GK102892425SQ201180012769
公开日2013年1月23日 申请日期2011年1月20日 优先权日2010年1月20日
发明者约根·索贝格·彼得森, 安妮·路易斯·舍尔比, 马里耶·斯科夫高, 亨利克·迪尤隆德·彼得森, 莱娜·阿克塞尔森, 迪特·里贝尔, 埃迪·迈尔, 里·舒尔茨·汉森, 克尔德·福斯格劳, 比亚内·杜·拉森 申请人:西兰制药公司
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