专利名称：一种竹叶兰中的呋喃黄酮类化合物、制备方法及应用的制作方法
技术领域：
本发明属于植物化学研究领域，更具体的说，本发明涉及一种竹叶兰中分离得到的呋喃黄酮类新化合物，该化合物的制备方法以及其在抗癌药物中的应用。
背景技术：
竹叶兰属于兰科竹叶兰属植物，喜暖湿，耐瘠薄，喜光，不耐荫。竹叶兰最先被发现于尼泊尔，该属的植物目前有8种，分布很广泛，从尼泊尔、斯里兰卡、泰国、老挝、越南、柬埔寨到中国、日本、马来西亚都能够看到它的踪迹。在我国西双版纳，当地的傣族同胞把开着美丽花朵的竹叶兰叫做“农尚嗨”，是一种尽人皆知的良药。竹叶兰具有清热解毒，祛风除湿，散瘀止痛，消炎，利尿的作用，用于治疗黄疸，热淋，水肿，脚气水肿，疝气腹痛，风湿痹痛，胃痛，尿路感染，毒蛇咬伤，疮痈肿毒，跌打损伤等；最新研究还表明竹叶兰乙醇提取物 具有明显的抗肿瘤活性。竹叶兰中的主要活性成分有菲类化合物、联苄类化合物、萜类化合物、黄酮类化合物、留醇等。黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环(A-与B-环)通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮为人类饮食中含量最丰富的一类多酚化合物，广泛存于水果、蔬菜、谷物、根茎、树皮、花卉、茶叶和红葡萄酒中。除突出的抗氧化特性以外，类黄酮还具有预防动脉粥样硬化、抗炎、抗过敏、抗病毒特性、抗肿瘤等多种生物活性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从竹叶兰(Arundina graminifolia)中分离得到的新呋喃黄酮类化合物。本发明的另一个目的是提供一种从竹叶兰中从竹叶兰(Arundina graminifolia)中分离得到所述化合物的方法。本发明的进一步的目的是所述化合物的细胞毒活性及其在抗肿瘤药物中的应用。本发明的目的通过下述技术方案予以实现。除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为质量百分数。A.本发明所述化合物是从竹叶兰(Arundina graminifolia)中分离得到,具有下
述结构式
H07^y" 6[^Y°Me
°tV0t^3'
OH 〇该化合物的命名为
5-hydroxy-8-(2-hydroxyethyl)-3_methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4H-furo[2,3_h]chromen-4-one。B.本发明所述的竹叶兰中呋喃黄酮类化合物的制备方法采用以下步骤(I)竹叶兰样品粉碎，然后以95wt%的乙醇用超声提取，合并提取液；(2)提取液减压蒸干溶剂得到浸膏，浸膏用硅胶拌样，用硅胶柱层析初分，然后采用制备高效液相色谱进一步分离，即得到所需的化合物。本发明制备所述竹叶兰中呋喃黄酮类化合物的具体方案为①竹叶兰全株粉碎到20 30目，取粉碎后的样品用95wt%的乙醇用超声提取4次，超声提取时间为30 60min，合并每次的提取液，静置滤除沉淀物；
②对提取液采用减压方式将溶剂全部蒸干，得到浸膏；浸膏用甲醇溶解后，用80 100目的硅胶拌样，然后用100 200目硅胶柱层析分离，采用氯仿-丙酮梯度洗脱，氯仿-丙酮梯度洗脱依次分别为纯氯仿、20 1、9 1、8 2、3 2、1 1,20 I、纯丙酮，其中氯仿-丙酮的8 2洗脱部分用高效液相制备色谱分离，分离所得到的粗品再次用凝胶柱层析纯化，即得到所需的化合物纯品。C.本发明化合物通过核磁共振氢谱、碳谱、二维谱，以及红外光谱、紫外光谱、质谱等技术鉴定结构。D.本发明对所述的新化合物进行了细胞毒活性筛选，该化合物对人肝癌细胞(Bel-7402)有较好的活性，对人慢性粒细胞白血病细胞株(K562)细胞和胃癌细胞株(MKN-28)也有一定活性。本发明的有益效果是本发明化合物结构简单，人工合成容易实现，产业化前景好，该化合物对Bel-7402细胞具有较好的细胞毒活性，对K562细胞和MKN-28细胞也有一定活性，可作为抗肿瘤药物开发的先导性化合物。
图I为本发明化合物的核磁共振氢谱(1H NMR)。图2为本发明化合物的核磁共振碳谱(13C NMR)。图3为本发明化合物的主要HMBC相关。
具体实施例方式实施例I——化合物的分离制备竹叶兰样品取全株粉碎到20 30目，取粉碎后的样品3. 5kg，以95被％的乙醇用超声提取4次；每次加入提取液5L，超声时间30 60min。静置滤除沉淀物的提取液减压蒸干溶剂浓缩成浸膏，得浸膏136g。浸膏用甲醇溶解后，用80 100目的硅胶200g拌样，然后用100 200目硅胶柱I. 5kg装柱进行层析分离，采用氯仿-丙酮梯度洗脱，氯仿丙酮梯度洗脱依次分别为纯氯仿、20 1、9 1、8 2、3 2、1 1,20 I、纯丙酮。其中氯仿-丙酮(8 2)洗脱部分11. 5g用制备高效液相色谱进一步分离，以38%的甲醇为流动相，C18制备色谱柱(20 X 250mm, 5 ii m)半制备柱为固定相,紫外检测器检测,检测波长为254nm，每次进样200 y L，收集23. 5min的色谱峰，多次累加后蒸干。所得粗品再次用纯甲醇溶解，再以甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析进一步纯化，即可得该新化合物。
实施例2——化合物的结构鉴定所述的化合物为黄色胶状物；紫外光谱(溶剂为甲醇)，Aniax(log ￡)370(2. 90),257 (3. 22)，210 (3. 87) nm ；红外光谱(溴化钾压片)vmax3415, 2920，1665，1559，1451，1357，1223，1158，1006，766，683CHT1 ；HRESIMS 显示其准分子离子峰 m/z 405. 0958[M+Na] + (计算值405. 0950)，结合NMR谱确定其分子式为C21H18O7,不饱和度为13。化合物的1H和13C NMR谱(附图-I和附图-2，数据归属见表-I)显示本化合物为呋喃黄酮结构。通过主要HMBC相关(附图-3)可确定一个2-羟基乙基取代在呋喃环的2"位，两个甲氧基分别取代在苯环的3和4'位，一个酚羟基取代在苯环的5位；化合物的结构最终得到确认。通过SCIFINDER数据库检索和文献查询证实该化合物为新化合物。表I本发明化合物的1Hj3C NMR数据
权利要求
1.一种竹叶兰中的呋喃黄酮类化合物,其特征是从竹叶兰(Arundina graminifolia)中分离得到，结构式为
2.—种权利要求I所述的竹叶兰中的呋喃黄酮类化合物的制备方法，其特征是工艺步骤如下 (1)竹叶兰样品粉碎，然后以95wt%的乙醇用超声提取，合并提取液； (2)提取液减压蒸干溶剂得到浸膏，浸膏用硅胶拌样，用硅胶柱层析初分，然后采用制备高效液相色谱进一步分离，即得到所需的化合物。
3.按权利要求2所述的竹叶兰中的呋喃黄酮类化合物的制备方法，其特征是具体工艺步骤如下 ①竹叶兰全株粉碎到20 30目，取粉碎后的样品用95wt%的乙醇用超声提取4次，超声提取时间为30 60min，合并每次的提取液，静置滤除沉淀物； ②对提取液采用减压方式将溶剂全部蒸干，得到浸膏；浸膏用甲醇溶解后，用80 100目的硅胶拌样，然后用100 200目硅胶柱层析分离，采用氯仿-丙酮梯度洗脱，氯仿-丙酮梯度洗脱依次分别为纯氯仿、20 1、9 1、8 2、3 2、1 1,20 I、纯丙酮，其中氯仿-丙酮的8 2洗脱部分用高效液相制备色谱分离，分离所得到的粗品再次用凝胶柱层析纯化，即得到所需的化合物纯品。
4.一种权利要求I所述的竹叶兰中的呋喃黄酮类化合物在抗胃癌、人慢性粒细胞白血病和人肝癌药物中的应用。
全文摘要
一种竹叶兰中的呋喃黄酮类化合物、制备方法及应用。本发明属于植物化学研究领域，具体涉及一种竹叶兰中分离得到的呋喃黄酮类新化合物，该化合物的制备方法以及其在抗癌药物中的应用。本发明化合物制备方法是将竹叶兰样品粉碎，然后以95wt％的乙醇用超声提取，合并提取液；提取液减压蒸干溶剂得到浸膏，浸膏用硅胶拌样，用硅胶柱层析初分，然后采用制备高效液相色谱进一步分离，即得到所需的化合物。该化合物对人肝癌细胞(Bel-7402)有较好的活性，对人慢性粒细胞白血病细胞株(K562)细胞和胃癌细胞株(MKN-28)也有一定活性，可作为抗肿瘤药物开发的先导性化合物。
文档编号A61P1/00GK102675330SQ20121013101
公开日2012年9月19日 申请日期2012年4月30日 优先权日2012年4月30日
发明者其他发明人请求不公开姓名, 李银科, 杨丽英, 沈艳琼, 胡秋芬, 苏丽丹 申请人:云南民族大学