专利名称：一种抗蛇毒口服液的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种抗蛇毒口服液的制备方法，具体指以蛾眉双蝴蝶为主要原料生产抗蛇毒口服液的方法。
背景技术：
蛾嵋双蝴蝶属龙胆科双蝴蝶属，拉丁名cor da turn (Marq. ) H. 为多年生常绿缠绕草本植物，是一种较常用的中草药，主要分布于湖南、湖北、重庆、四川、贵州、云南等地区。中医记载其性寒、味甘辛，具有润肺止血、清热利尿、解毒、消肿等功能。
我国民间已有利用蛾眉双蝴蝶作为抗蛇毒药物的做法，主要做法为水煎后口服或嚼碎后敷伤口，有一定疗效，但不尽如人意。因此，以蛾眉双蝴蝶为主要原料开发疗效好的抗蛇毒药物可以提升蛾眉双蝴蝶的经济价值，合理利用资源、造福人类。发明内容
为开发利用蛾眉双蝴蝶资源、造福人类，提升蛾眉双蝴蝶的抗蛇毒效果，本发明人经过大量试验，终于发明出一种以蛾眉双蝴蝶为主要原料生产抗蛇毒口服液的方法，运用该方法生产的抗蛇毒口服液治疗蛇毒，疗效好、治愈率高。
本发明包括以下几个步骤(O蛾眉双蝴蝶原料药材的处理，包括对原料药材进行真空干燥、粉碎和酶解。将原料药材真空干燥至含水率为5% — 8%，干燥温度50 -80°c,再粉碎至20 — 40目，然后加入干药材2 — 5倍量的酶解液在40 - 550C的温度下酶解3 — 8小时(100克干药材加入200 — 500毫升酶解液)。酶解液制备方法为将酶活为15000 - 40000单位的I 一 5克纤维素酶溶于500ml蒸馏水中即得(酶活单位遵从1961年国际酶学会议规定，是指在特定条件下， 在I分钟内能转化I微摩尔底物的酶量，或是转化底物中I微摩尔的有关基团的酶量)。
(2)蛾眉双蝴蝶有效成分的提取。将上述酶解液和药材升温至80 - 95°C，提取 20 - 60分钟，过滤并收集滤液；在滤渣中继续加入干药材2 — 5倍的饮用水(100克干药材加入200 - 500毫升饮用水)，升温至80 - 95°C，提取20 — 60分钟，过滤并收集滤液；合并两次得到的滤液，弃去药渣。两次提取过程中均辅助超声波，利用超声波的空化效应以提高蛾眉双蝴蝶有效成分的提取率。
将得到的滤液减压蒸馏至干药材的I 一 2倍(100克干药材减压蒸馏至100 — 200 毫升)，加入滤液等体积且浓度为60 - 99. 7%的乙醇，静置5 - 20h，过滤、弃去滤渣并收集滤液。将收集到的滤液减压蒸馏至无醇味，再往滤液中加入该滤液体积2 - 3倍的无水乙醇，静置5 - 20h，过滤、弃去滤渣并收集滤液，将滤液浓缩至干药材重量的1/4 - 1/6 (滤液的单位为毫升，干药材重量的单位为克)，过滤后备用。
(3)抗蛇毒口服液的制备。将得到的滤液冷却后放入冰箱静置60 - 90h后，过滤， 收集滤液备用。将细菌滤器灭菌后，在无菌区内用细菌滤器对滤液过滤、灌装后即得抗蛇毒口服液。
利用本发明得到的抗蛇毒口服液，经功能试验证实，对于银环蛇(咬伤后3小时内用药)等神经毒为主的蛇毒，五步蛇、眼镜蛇等血液循环毒和混合毒蛇伤都有非常好的疗效，其效果优于传统的水煎后口服、嚼碎后敷伤口等入药方式。该方法还便于进行产业化、 规模化和标准化生产，市场前景广阔。
本发明的特点是利用纤维素酶破坏植物细胞壁和超声波的空化效应，增强蛾眉双蝴蝶水溶性成分的提取，使提取的抗蛇毒有效成分含量提高；后期采用细菌滤器灭菌的方法避免了常规的高温、高压灭菌对抗蛇毒有效成分的破坏，最大限度的保留了口服液中的抗蛇毒有效成分，使得本发明得到的抗蛇毒口服液疗效优于一般的蛾眉双蝴蝶入药方式。
具体实施方式
以下对抗蛇毒口服液的具体制备方法进行详细说明。
实施例I :(I)蛾眉双蝴蝶原料药材的处理，包括对原料药材进行真空干燥、粉碎和酶解。将原料药材真空干燥至含水率为5. 8 %，干燥温度55 °C，再粉碎至25目，然后加入干药材2. 5倍量的酶解液在45°C的温度下酶解4小时。酶解液制备方法为将酶活为20000单位的2克纤维素酶溶于500ml蒸馏水中即得。
(2)蛾眉双蝴蝶有效成分的提取。将上述酶解液和药材升温至85°C，提取30分钟， 过滤并收集滤液；在滤渣中继续加入干药材2. 2倍的饮用水，升温至87 V，提取25分钟，过滤并收集滤液；合并两次得到的滤液，弃去药渣。两次提取过程中均辅助超声波。
将得到的滤液减压蒸馏至干药材的I. 2倍，加入滤液等体积且浓度为75%的乙醇，静置8h，过滤、弃去滤渣并收集滤液。将收集到的滤液减压蒸馏至无醇味，再往滤液中加入该滤液体积2. 2倍的无水乙醇，静置6h，过滤、弃去滤渣并收集滤液，将滤液浓缩至干药材重量的1/4，过滤后备用。
(3)抗蛇毒口服液的制备。将得到的滤液冷却后放入冰箱静置65h后，过滤，收集滤液备用。将细菌滤器灭菌后，在无菌区内用细菌滤器对滤液过滤、灌装后得抗蛇毒口服液。
实施例2(O蛾眉双蝴蝶原料药材的处理，包括对原料药材进行真空干燥、粉碎和酶解。将原料药材真空干燥至含水率为7. 4%，干燥温度75°C，再粉碎至30目，然后加入干药材4倍量的酶解液在50°C的温度下酶解6小时。酶解液制备方法为将酶活为30000单位的4克纤维素酶溶于500ml蒸馏水中即得。
(2)蛾眉双蝴蝶有效成分的提取。将上述酶解液和药材升温至90°C，提取50分钟， 过滤并收集滤液；在滤渣中继续加入干药材4倍的饮用水，升温至92°C，提取45分钟，过滤并收集滤液；合并两次得到的滤液，弃去药渣。两次提取过程中均辅助超声波。
将得到的滤液减压蒸馏至干药材的I. 7倍，加入滤液等体积且浓度为95%的乙醇，静置15h，过滤、弃去滤渣并收集滤液。将收集到的滤液减压蒸馏至无醇味，再往滤液中加入该滤液体积2. 7倍的无水乙醇，静置16h，过滤、弃去滤渣并收集滤液，将滤液浓缩至干药材重量的1/5，过滤后备用。
(3)抗蛇毒口服液的制备。将得到的滤液冷却后放入冰箱静置85h后，过滤，收集滤液备用。将细菌滤器灭菌后，在无菌区内用细菌滤器对滤液过滤、灌装后得抗蛇毒口服液。
权利要求
1.一种以蛾眉双蝴蝶为主要原料制备抗蛇毒口服液的方法，其特征在于包含以下几个步骤(1)蛾眉双蝴蝶原料药材的处理，包括对原料药材进行真空干燥、粉碎和酶解。将原料药材真空干燥至含水率为5% — 8%，干燥温度50 - 80°C，再粉碎至20 — 40目，然后加入干药材2 - 5倍量的酶解液在40 - 55°C的温度下酶解3 — 8小时。酶解液制备方法为 将酶活为15000 - 40000单位的I 一 5克纤维素酶溶于500ml蒸馏水中即得。(2)蛾眉双蝴蝶有效成分的提取。将上述酶解液和药材升温至80- 95°C，提取20 -60分钟，过滤并收集滤液；在滤渣中继续加入干药材2 — 5倍的饮用水，升温至80 - 95°C, 提取20 - 60分钟，过滤并收集滤液；合并两次得到的滤液，弃去药渣。两次提取过程均辅助超声波。将得到的滤液减压蒸馏至干药材的I 一 2倍，加入滤液等体积且浓度为60 - 99. 7%的乙醇，静置5 - 20h，过滤、弃去滤渣并收集滤液。将收集到的滤液减压蒸馏至无醇味，再往滤液中加入该滤液体积2 — 3倍的无水乙醇，静置·5 - 20h，过滤、弃去滤渣并收集滤液，将滤液浓缩至干药材重量的1/4 - 1/6，过滤后备用。(3)抗蛇毒口服液的制备。将得到的滤液冷却后放入冰箱静置60- 90h后，过滤，收集滤液备用。将细菌滤器灭菌后，在无菌区内用细菌滤器对滤液过滤、灌装后即得抗蛇毒口服液。
全文摘要
本发明公开了一种以峨眉双蝴蝶为主要原料制备抗蛇毒口服液的方法，该方法包括(1)峨眉双蝴蝶原料药材的处理，对原料药材进行真空干燥、粉碎和酶解；(2)峨眉双蝴蝶有效成分的提取，以水为溶剂进行两次超声提取，合并滤液后醇沉以除去杂质；(3)抗蛇毒口服液的制备，冷冻过滤后在无菌区内用细菌滤器过滤并灌装。利用本发明得到的抗蛇毒口服液，对于银环蛇等神经毒为主的蛇毒，五步蛇、眼镜蛇等血液循环毒和混合毒蛇伤都有非常好的疗效，其效果优于传统的水煎后口服、嚼碎后敷伤口等入药方式。该方法便于进行产业化、规模化和标准化生产，市场前景广阔。
文档编号A61K36/51GK102908383SQ20121044944
公开日2013年2月6日 申请日期2012年11月12日 优先权日2012年11月12日
发明者田宏现, 彭司英 申请人:吉首大学