红细胞保存容器的制造方法
【专利摘要】本发明提供的红细胞保存容器（10）的特征在于，具备容器主体部（11）和被覆部（12），所述容器主体部（11）由包含聚烯烃类聚合物、聚酰胺类聚合物、聚氨酯类聚合物、聚苯乙烯类聚合物、聚丁二烯类聚合物、聚酯类聚合物、氟系聚合物、聚碳酸酯类聚合物、聚丙烯酸类聚合物、聚砜类聚合物之中的至少1种以上的树脂组合物构成，所述被覆部（12）形成于上述容器主体部（11）的内表面侧，由类金刚石碳构成。
【专利说明】红细胞保存容器
【技术领域】
[0001]本发明涉及用于保存红细胞浓缩液的红细胞保存容器。
【背景技术】
[0002]作为构成红细胞保存容器的代表性材料，有含有DEHP (邻苯二甲酸二乙基己酯)等增塑剂的软质聚氯乙烯(以下称为软质PVC)。尽管软质PVC使用后的废弃处理等被看作是问题，但现在仍占据红细胞保存容器用材料的主流。其最大的理由在于，在保存红细胞成分时，软质PVC中所含的DEHP侵入到红细胞成分中，由此，具有抑制红细胞的形态变化、溶血现象的作用，而不含有DEHP的其他聚合物例如聚乙烯、聚丙烯则不能期待这种效果。然而，在废弃处理软质PVC时生成的二噁英(dioxin)等今后也是大的技术课题，红细胞保存容器向非软质PVC化的需求逐渐增大。
[0003]另外，近年来在欧洲开始的REACH (化学物质的注册、评价、批准、限制的制度)中，DEHP根据量的不同而存在引发内分泌紊乱(生殖毒性)等的危险，因此，被列举为高危物质之一。也因为这样，红细胞保存容器向非软质PVC化的需求进一步增大。
[0004]提出了各种方案作为红细胞保存容器的非软质PVC材料，例如在专利文献I中记载了下述内容:非PVC塑料与柠檬酸酯的塑料组合物具有抑制红细胞溶血现象的作用。而且还记载了由含有橡胶状聚烯烃共聚物而形成的中央嵌段和聚苯乙烯的末端嵌段构成的聚烯烃共聚物、聚丙烯等作为非PVC塑料。
[0005]专利文献1:日本特表平3-502298号公报
【发明内容】
[0006]然而，对于专利文献I中记载的塑料组合物，实际情况是在抑制溶血作用中没有达到足以令人满意的程度，缺乏红细胞的保存性。
[0007]本发明是鉴于上述情况完成的，其课题在于，提供一种红细胞保存容器，其由不含有增塑剂的非软质PVC材料构成，红细胞的保存性优异，容器的废弃物处理变得容易。
[0008]为了解决上述课题，本发明所涉及的红细胞保存容器的特征在于，具备容器主体部和被覆部，所述容器主体部由包含聚烯烃类聚合物、聚酰胺类聚合物、聚氨酯类聚合物、聚苯乙烯类聚合物、聚丁二烯类聚合物、聚酯类聚合物、氟系聚合物、聚碳酸酯类聚合物、聚丙烯酸类聚合物、聚砜类聚合物之中的至少I种以上的树脂组合物构成，所述被覆部在上述容器主体部的内表面侧形成，由类金刚石碳(Diamond-like carbon)构成。
[0009]通过上述构成，在由不含有DEHP等增塑剂的树脂组合物构成的容器主体部的内表面侧形成由类金刚石碳构成的被覆部，由此，在容器的内部保存红细胞浓缩液时，抑制红细胞吸附，抑制红细胞的形态变化和溶血现象。认为这是由于通过在容器主体部的内表面侧具备由类金刚石碳构成的被覆层，而导致内表面的表面张力减少。另外，容器主体部和被覆部由非软质PVC材料构成，由此在对容器废弃物处理时不会生成二噁英等。
[0010]本发明所涉及的红细胞保存容器优选在保存红细胞时，在容器内部填充红细胞保存液。
[0011]通过上述构成，填充红细胞保存液，由此进一步抑制红细胞的形态变化、溶血现象。
[0012]本发明所涉及的红细胞保存容器优选:在容器内部除填充上述红细胞保存液外，还进一步填充防溶血剂和表面活性剂；上述表面活性剂的HLB值为13以上，且上述表面活性剂的分子结构中亲水部的氧乙烯基(oxyethylene group)的数量为20以上；上述表面活性剂的分子结构中的亲水部由聚氧乙烯山梨糖醇酐(polyoxyethylene sorbitan)形成；上述防溶血剂为维生素E ;上述红细胞保存液是含有甘露醇、葡萄糖、腺嘌呤以及氯化钠的混合溶液。
[0013]通过上述构成，使用规定的表面活性剂、防溶血剂、红细胞保存液，由此进一步抑制红细胞的形态变化、溶血现象。
[0014]根据本发明，能够提供由不含有增塑剂的非软质PVC材料构成、红细胞的保存性优异、容器的废弃物处理变得容易的红细胞保存容器。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1是表示使用本实施方式的红细胞保存容器的血液袋系统的构成的模式图。
[0016]图2的(a)是图1中记载的红细胞保存容器的X-X线剖视图，(b)是表示(a)的其他方式的局部剖视图。
[0017]图3是表示使用本实 施方式的红细胞保存容器的血液袋系统的其他方式的模式图。
[0018]图4是表示各种红细胞保存容器中的溶血量推移的图表。
【具体实施方式】
[0019]对于本发明中的红细胞保存容器的实施方式，参照附图进行详细说明。
[0020]如图1、图2的(a)、(b)所示，红细胞保存容器10具备容器主体部11、和在其内表面侧形成的被覆部12。另外，红细胞保存容器10可以具备与容器内部连通且用于排出所保存的红细胞(红细胞浓缩液)等的排出口 108、用于与其他容器(袋)等连接的管IOlcUOld等。应予说明，虽然没有图示，但在提高了红细胞保存容器10的刚性的情况下，可以具备具有疏水性过滤器的通气孔。
[0021](容器主体部)
[0022]容器主体部11由包含聚烯烃类聚合物、聚酰胺类聚合物、聚氨酯类聚合物、聚苯乙烯类聚合物、聚丁二烯类聚合物、聚酯类聚合物、氟系聚合物、聚碳酸酯类聚合物、聚丙烯酸类聚合物、聚砜类聚合物之中的至少I种以上的树脂组合物构成。另外，容器主体部11不限定于由上述树脂组合物形成的单层体，也可以为由彼此不同的上述树脂组合物形成的多个层构成的、未图示的多层体。这样，通过由PVC (聚氯乙烯)以外的树脂组合物构成容器主体部11，无需担心在红细胞保存容器10的废弃物处理时生成二噁英等。
[0023]在此，作为聚烯烃类聚合物，为PE (聚乙烯)、PP (聚丙烯)、COP (环烯烃聚合物)、CCP (环烯烃共聚物)、EVA (乙烯-乙酸乙烯酯共聚物)等。作为聚酰胺类聚合物，为尼龙等PA (聚酰胺)。作为聚氨酯类聚合物，为PU (聚氨酯)等。作为聚苯乙烯类聚合物，为PSt(聚苯乙烯)、PESt (乙烯-苯乙烯共聚物)等。作为聚丁二烯类聚合物，为PB (聚丁二烯)、ABS (丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物)、SEBS (嵌段(聚苯乙烯-乙烯丁烯共聚物-聚苯乙烯))，作为聚酯类聚合物，为PET (聚对苯二甲酸乙二醇酯)、PBT (聚对苯二甲酸丁二醇酯)、PEN (聚萘二甲酸乙二醇酯)等。作为氟系聚合物，为PTFE (聚四氟乙烯)、ETFE (乙烯-四氟乙烯共聚物)等。作为聚碳酸酯类聚合物，为PC (聚碳酸酯)等。作为聚丙烯酸类聚合物，为PMMA (聚甲基丙烯酸甲酯)、PMA (聚丙烯酸甲酯)、PAN (聚丙烯腈)等。作为聚砜类聚合物，为PS (聚砜)、PES (聚醚砜)等。
[0024](被覆部)
[0025]被覆部12由具有红细胞吸附抑制作用的类金刚石碳构成。这样，通过具备由类金刚石碳构成的被覆部12，即使不使用属于高危物质的DEHP，也能够使红细胞保存容器10的红细胞保存性提高。
[0026]对于红细胞保存容器10，不对该容器的形状特别限定，但优选袋状或者瓶状。容器的容量优选100~600mL。容器的厚度(容器主体部11与被覆部12的合计厚度)优选为
0.05~1.0mm，进一步优选为0.08~0.8mm。此时，被覆部12的厚度为0.005~5 μ m，优选为0.005~2 μ m,进一步优选为0.01~I μ m。被覆部12的厚度不足0.005 μ m时，红细胞的吸附抑制作用不充分，因此，红细胞保存性易于降低。另外，被覆部12的厚度超过5 μ m时，被覆部12变得过硬，在制作容器时容易产生裂纹等，由于该裂纹等而导致红细胞易于吸附，从而红细胞保存性易于降低。
[0027]红细胞保存容器10采用以下所示的以往公知的方法制作。
[0028]首先，经由T模 或者圆形模(circular die)将构成容器主体部11的上述树脂组合物挤出，对于所得扁平状片材、管状片材、型坯等(parison)，适当运用热压成型、吹塑、拉伸、裁切、熔接(热封)等方法，制作袋状或者瓶状的容器主体部11。
[0029]接着，在该容器主体部11的内表面侧利用CVD (化学蒸镀法)、优选利用等离子体CVD制作被覆部12。也可以利用PVD (物理蒸镀法)来代替CVD制作被覆部12。
[0030]等离子体CVD中，在未图示的减压腔内设置容器主体部11，并且在减压腔内导入含有被覆部12的原料物质(碳)的原料气体。接着，为了促进原料气体的化学反应，对腔内施加高频等而使原料气体形成等离子体状态。其结果是，由于化学反应而产生的原料物质(碳)的自由基蒸镀在容器主体部11的内表面，形成被覆部12。
[0031]在等离子体CVD中，优选使用减压度为0.05~5.0OTorr (6.5~650Pa)、高频为IOOkHz~1000MHz的条件。另外，作为原料气体，优选使用脂肪族烃气体、芳香族烃气体、含氧烃气体、含氮烃气体等单独气体、或者2种以上的混合气体。另外，也可以将原料气体用稀有气体稀释后使用。而且，优选被覆部12的厚度为0.005~5μπι。调节蒸镀时间以形成
该厚度。
[0032]图2的(a)是通过熔接而由扁平状片材制作容器主体部11后、在其内表面侧形成被覆部12的例子。另外，图2的(b)是通过吹塑而由管状片材或者型坯制作容器主体部11后、在其内表面侧形成被覆部12的例子。
[0033]红细胞保存容器10优选:在保存红细胞(红细胞浓缩液)时，在容器内部填充红细胞保存液、或者红细胞浓缩液用添加剂(以下根据需要地称为添加剂)，该添加剂是在红细胞保存液中添加防溶血剂和表面活性剂而得到的。由此，在收纳于红细胞保存容器10内部的红细胞浓缩液中添加红细胞保存液或者添加剂。而且，红细胞保存液或者添加剂的添加量相对于IOOmL红细胞浓缩液为40~60mL，即相对于IOOmL采血量为20~30mL。应予说明，以下将在红细胞浓缩液中添加红细胞保存液或者添加剂而得的溶液称为红细胞制剂。
[0034](红细胞保存液)
[0035]红细胞保存液使用为了长期保存红细胞浓缩液而使用的以往公知的保存液。作为红细胞保存液，可以举出ACD液、CPD液、MAP液、SAGM液、OPTISOL (注册商标)(AS-5)、ADSOL (AS-1)、Nutricel (AS-3)、PAGG-S、SAGP-maltose 等。特别优选 MAP 液、SAGM 液或者PAGG-S。在此，MAP液是含有甘露醇、葡萄糖、腺嘌呤、磷酸盐、柠檬酸盐以及氯化钠的混合溶液。另外，SAGM液是含有甘露醇、葡萄糖、腺嘌呤以及氯化钠的混合溶液。而且，PAGG-S是含有山梨糖醇、葡萄糖、腺嘌呤、鸟嘌呤核苷、磷酸盐以及氯化钠的混合溶液。
[0036]应予说明，红细胞保存液的添加量相对于IOOmL红细胞浓缩液为40~60mL，即相对于IOOmL采血量为20~30mL。在添加量不足下限值时，变得难以抑制红细胞膜的破坏。另外，在添加量超过上限值时，没有观察到对红细胞膜破坏的抑制明显提高，并且易于导致成本升高。
[0037](防溶血剂)
[0038]防溶血剂用于通过抗氧化作用和与红细胞膜的脂质的亲和作用等来防止红细胞膜破坏，具体而言，优选维生素E、或者选自7-十四碳烯、8-十八碳烯、9-二十碳烯以及三十碳六烯(squalene)中的不饱和链式烃化合物。另外，维生素E有α -生育酚、β -生育酚、Y -生育酚、δ -生育酚等生育酚(tocopherol)类、α -生育三烯酚、β -生育三烯酚、Y -生育三烯酚、δ-生育三烯酚等生育三烯酚(tocotrienol)类等，优选α-生育酚。另外，维生素E也可以是这些生育酚或者生育三烯酚的酯化合物，优选乙酸酯化合物，具体而言，优选生育酚乙酸酯。
[0039]防溶血剂优选在红细胞制剂中的浓度为25~lOOppm，因此优选在与表面活性剂一起被添加时，添加剂中防溶血剂的浓度为75~300ppm。在浓度不足75ppm时，变得难以抑制红细胞膜破坏。具体而言，溶血抑制率易于降低，换言之，血浆中游离Hb量变得易于增大。另外，在浓度超过300ppm时，没有观察到抑制红细胞膜破坏的效果明显提高，并且易于导致成本升高。
[0040](表面活性剂)
[0041]表面活性剂具有促进防溶血剂在红细胞保存液中均匀分散、和促进利用防溶血剂实现的红细胞膜的被覆的作用，并且即使单独使用也能够抑制红细胞膜破坏。因此，表面活性剂的HLB值为13以上，优选为13~20，且表面活性剂的分子结构中亲水部的氧乙烯基的数量(E0数)为20以上，优选为20~40。另外，表面活性剂优选其分子结构的亲水部由聚氧乙烯(polyoxyethylene) (PEO)形成的第I方式、或者由聚氧乙烯山梨糖醇酐(ΡΕ0山梨糖醇酐)形成的第2方式。
[0042]在HLB值不足13时，表面活性剂不会分散在添加剂中，因此，无法抑制红细胞膜破坏。另外，在EO数不足20时，表面活性剂的亲水部的分子量低，因此，无法抑制红细胞膜破坏。另外，在HLB值超过20时、或者EO数超过40时，没有观察到对红细胞膜破坏的抑制明显提高，并且易于导致成本升高。应予说明，HLB值是采用Griffin法测定、由HLB值=(20X亲水部式量的总和)/ (表面活性剂的分子量)计算出的。[0043]作为第I方式的表面活性剂，例如可以举出聚氧乙烯油基醚(EMULGEN (注册商标)430)、聚氧乙烯月桂基醚(EMULGEN130K)等。
[0044]作为第2方式的表面活性剂，例如可以举出聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯(Tween(注册商标)80)、聚氧乙烯山梨糖醇酐单硬脂酸酯(TWeen60)、聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯(Tween20)等。
[0045]表面活性剂优选在红细胞制剂中的浓度为100~300ppm，因此，优选在与防溶血剂一起添加时，添加剂中表面活性剂的浓度为300~900ppm。在浓度不足300ppm时，变得难以抑制红细胞膜破坏。具体而言，溶血抑制率易于降低，换言之，血浆中游离Hb量变得易于增大。另外，在浓度超过900ppm时，变得难以抑制红细胞膜破坏，并且易于导致成本升闻。
[0046]接着，对于使用本发明的红细胞保存容器的血液袋系统进行说明。如图3所示，红细胞保存容器10相当于血液袋系统IOOA的血液保存袋105。
[0047]血液袋系统IOOA具备:采血袋103，其填充经由在前端具有采血针102的采血管IOla而从供血者(献血者)采来的血液；血液处理过滤器110，其从经由管IOlb而自采血袋103运送来的血液(全血)中分离出规定的血液成分(白细胞和血小板)；血液保存袋105，其经由管IOlc回收通过血液处理过滤器110从而除去了规定血液成分的血液；血液保存袋106，其经由管101d、101e以及分支管104运送在上述血液保存袋105内离心分离得到的上层血液成分(血浆)；以及药液填充袋107，其填充有上述红细胞保存液或者添加剂，红细胞保存液或者添加剂从药液填充袋107经由管IOlfUOld以及分支管104而被运送到血液保存袋105中，添加到在血液保存袋105内离心分离得到的下层血液成分(红细胞浓缩液)中。
[0048]应予说明，采血袋103、血液保存袋105、106以及药液填充袋107为例如100~600mL左右的容量。
[0049]另外，在采血袋103、血液保存袋105、106以及药液填充袋107的上部侧形成有排出口 108。另外，在采血袋103、血液保存袋105、106以及药液填充袋107上粘贴有用于显示其填充的血液成分的标签109。另外，在管IOlb~IOlf上根据需要地设置有未图示的流路密封构件。所谓流路密封构件，是以隔断(密封)管内流路的状态设置、通过断裂而使流路开放的构件。并且，在采血袋103内通常填充有抗凝血剂。另外，作为抗凝血剂，可以使用ACD液、CPD液等。
[0050]另外，对于各结构的配置与血液袋系统100A不同的血液袋系统进行说明。如图3所示，红细胞保存容器10相当于血液袋系统100B的血液保存袋105。
[0051]血液袋系统100B具备::采血袋103，其填充经由在前端具有采血针102的采血管IOla而从供血者(献血者)采来的血液；血液保存袋106，其经由管IOlbUOld以及分支管104运送在采血袋103内离心分离得到的上层血液成分(血浆)；血液处理过滤器110，其从经由管101b、101c、IOle而自采血袋103运送来的下层血液成分(红细胞浓缩液)中分离出规定的血液成分(白细胞和血小板)；血液保存袋105，其经由管IOlg回收通过血液处理过滤器110从而除去了规定的血液成分的红细胞浓缩液；以及药液填充袋107，其填充有上述红细胞保存液或者添加剂，红细胞保存液或者添加剂从药液填充袋107经由管101f、101e、血液处理过滤器110、管IOlg而被运送到血液保存袋105中，添加到血液保存袋105内的红细胞浓缩液中。应予说明，除上述事项以外，与血液袋系统100A相同。[0052]实施例
[0053](实施例1)
[0054]将形成有由0.02 μ m的类金刚石碳构成的被覆部的袋状聚对苯二甲酸乙二醇酯制容器(容量:250mL，三菱重工制)用作红细胞保存容器。而且，将20mL红细胞保存液(SAGM液)和40mL红细胞浓缩液混和而制成红细胞制剂，将该红细胞制剂在红细胞保存容器内保持4 C的冋时保存5周。对于保存如、保存2周后、保存4周后以及保存5周后的红细胞制剂，采用以下LCV法测定作为红细胞保存性的评价标准的溶血量(血浆中游离Hb量)。将其结果示于图4 (PET-DLC (D)0
[0055](LCV 法)
[0056]血浆中游离Hb (血红蛋白)量通过以下步骤测定。
[0057](I)使20mg无色结晶紫(Leuco Crystal Violet)在75mL丙酮中溶解后,加入20mL乙酸、25mL RO水并搅拌混合，将其用作显色试剂。
[0058](2)在ImL的30质量％的过氧化氢水中加入30mL RO水并混合，将其用作显色底物液。
[0059] (3)红细胞制剂的保存完成后，对红细胞制剂离心并采集上清液，将其作为血浆中游离血红蛋白量的测定样品。另外，同时也用RO水稀释血红蛋白标准液(Alfresa Pharma制Hemokon-Ν)而制备2~300mg / dL浓度的标准曲线制作用血红蛋白标准液(标准曲线试样)。
[0060](4)在试管中加入6mL显色试剂、25 μ L测定样品以及标准曲线试样并充分搅拌。
[0061](5)进一步加入ImL显色底物液并搅拌后，在37°C的水流式恒温槽中孵育(incubate) 20 分钟。
[0062](6)孵育完成后，利用分光光度计(U-3010，日立制作所制)测定590nm的吸光度，根据同时测定的标准曲线试样的值计算出血红蛋白浓度，将其作为血浆中游离血红蛋白量。
[0063](实施例2)
[0064]在IOOmL SAGM液中同时添加60mg表面活性剂(Tween80，HLB值:15，E0数:20)和15mg防溶血剂(维生素E:生育酚乙酸酯)，制成添加剂。将20mL该添加剂和40mL红细胞浓缩液混和而制成红细胞制剂。此时红细胞制剂中防溶血剂的浓度为50ppm，表面活性剂的浓度为200ppm。将该红细胞制剂在与实施例1同样的红细胞保存容器内保持4°C的同时保存5周。与实施例1同样地测定溶血量，将其结果示于图4 (PET-DLC (2))。
[0065](比较例I)
[0066]比较例I将袋状聚烯烃制容器(川澄化学工业株式会社制，级别:P0-80)用作红细胞保存容器，除此之外，与实施例1相同。与实施例1同样地测定溶血量，将其结果示于图 4 (PO)。
[0067](比较例2)
[0068]比较例2将未形成被覆部的袋状聚对苯二甲酸乙二醇酯制容器(东洋制罐制)用作红细胞保存容器，除此之外，与实施例1相同。与实施例1同样地测定溶血量，将其结果示于图 4 (PET-non)。
[0069](比较例3)[0070]比较例3将形成有由0.02 μ m的二氧化硅构成的被覆部的袋状聚对苯二甲酸乙二醇酯制容器(东洋制罐制)用作红细胞保存容器，除此之外，与实施例1相同。与实施例1同样地测定溶血量，将其结果示于图4 (PET-二氧化硅)。
[0071]如图4所示，满足本发明的必要条件的实施例1和实施例2 (PET-DLC (I)和PET-DLC (2))与不满足本发明的必要条件的比较例I (PO)、比较例2 (PET-non)以及比较例3 (PET- 二氧化硅)相比，保存5周后的溶血量少，红细胞保存性良好。
[0072]附图标记说明
[0073]10 红细胞保存容器
[0074]11 容器主体部
[0075]12 被覆部
[0076]100AU00B 血液袋系统
[0077]103 采血袋
[0078]105 血液保存袋
[0079]106 血液保存袋
[0080]107 药液填充袋
[0081]110 血液处理过滤器
【权利要求】
1.一种红细胞保存容器，其特征在于，具备: 容器主体部，由包含聚烯烃类聚合物、聚酰胺类聚合物、聚氨酯类聚合物、聚苯乙烯类聚合物、聚丁二烯类聚合物、聚酯类聚合物、氟系聚合物、聚碳酸酯类聚合物、聚丙烯酸类聚合物、聚砜类聚合物之中的至少I种以上的树脂组合物构成， 被覆部，形成于所述容器主体部的内表面侧，由类金刚石碳构成。
2.根据权利要求1所述的红细胞保存容器，其特征在于，在保存红细胞时，在容器内部填充红细胞保存液。
3.根据权利要求2所述的红细胞保存容器，其特征在于，在容器内部除填充所述红细胞保存液外，还进一步填充防溶血剂和表面活性剂。
4.根据权利要求3所述的红细胞保存容器，其特征在于，所述表面活性剂的HLB值为13以上，且所述表面活性剂的分子结构中亲水部的氧乙烯基的数量为20以上。
5.根据权利要求4所述的红细胞保存容器，其特征在于，所述表面活性剂的分子结构中的亲水部由聚氧乙烯山梨糖醇酐形成。
6.根据权利要求3所述的红细胞保存容器，其特征在于，所述防溶血剂是维生素E。
7.根据权利要求2~6中任一项所述的红细胞保存容器，其特征在于，所述红细胞保存液是含有甘露醇、葡萄糖、腺嘌呤以及氯化钠的混合溶液。
【文档编号】A61J3/00GK103717194SQ201280037501
【公开日】2014年4月9日 申请日期:2012年7月27日 优先权日:2011年7月28日
【发明者】武田典彦, 小山美雪 申请人:泰尔茂株式会社