天然药物组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种天然药物组合物及其制备方法，该天然药物组合物由五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚按2-4:3-5:3-8:5-8的比例组成，该组合物对癌症化疗相关性腹泻有疗效。
【专利说明】天然药物组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种天然药物组合物，更具体地涉及一种由五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚组成的天然药物组合物，该天然药物组合物的制备方法以及该天然药物组合物在用于制备减少癌症化疗相关性腹泻药物中的用途。
【背景技术】
[0002]恶性肿瘤是当前危害人类生存，健康的主要疾病之一，其治疗手段包括手术、化疗、放疗、中医药治疗，而化疗治疗肿瘤的效果尤为突出。化疗药即细胞毒抗肿瘤药物，单用或联合用均会引起患者腹泻等毒副反应，肿瘤化疗后腹泻又叫化疗相关性腹泻。近年来随着化疗药物如5-氟尿嘧啶、紫杉烷类、羟基喜树碱、伊立替康、希罗达等的面世及推广应用，化疗相关性腹泻的发生率逐年提高，而且若不进行积极治疗，易导致患者脱水、营养不良、血清电解质紊乱、酸碱平衡失调等，不仅对机体的康复带来极大的不利，也给周期性化疗带来一定的困难，因此对化疗相关性腹泻的有效治疗已成为肿瘤患者整体治疗的重要组成部分。
[0003]化疗相关性腹泻就其临床表现来看，当属中医学“泄泻”范畴，中医药对于泄泻的研究，令人瞩目，但是目前尚无对抗癌症化疗具有减轻腹泻的中成药。因此，研发一种高效低毒、价格低廉，易于推广的可用于减轻癌症化疗相关性腹泻的天然中药成为临床亟待解决的问题。
[0004]五味子，俗称山花椒、秤砣子、药五味子、面藤、五梅子等，能收敛固涩；益气生津。主治:久湾不止。丁香为桃金娘科蒲桃属植物丁香Eugenia caryophyllata Thunb的花蕾和果实。能暖胃，温肾。用于治疗呃逆、吐泻，主治痢疾。本发明人经过大量的各配方比例的研究和实验，最后获得了本发明的最佳药物比例组合物，是创新性的组合物，并证明了其对癌症化疗相关性腹泻有极好的疗效并能同时起到抑制肿瘤的效果，由此完成了本发明。
[0005]
【发明内容】
[0006]本发明提供的一种天然药物组合物，由五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚以重量计按2-4:3-5:3-8:5-8的比例组成。
[0007]上述天然药物组合物，其中五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚的用量比例是4:5:8:8。
[0008]其中，五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物可通过本领域技术人员公知的常规方法进行提纯获得，采用常规方法获得的这些成分或采用商业购得的成分组成的本发明的天然药物均能获得相同的疗效。
[0009]优选地，上述天然药物组合物中五味子丁香水煎浓缩提取物的制备方法是:
按照配伍比例为1-4: I取五味子、丁香，蒸馏水浸泡，加热煎煮，过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩，超滤膜过滤，减压干燥，即得。[0010]上述天然药物组合物中五味子多糖的制备方法是:
取五味子干燥果实，粉碎过筛，用无水乙醇索氏回流脱脂，干燥，加水90°C浸提后过滤，提取液减压浓缩，95%乙醇醇析，离心收集沉淀，沉淀分别用丙酮、乙醚和无水乙醇洗涤，冻干得五味子多糖。
[0011]上述天然药物组合物中丁香乙醇提取物制备方法是:
取丁香，干燥，粉碎，过筛，乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15分钟，分离上清液，蒸馏去除乙醇及杂质，加乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得。
[0012]上述天然药物组合物中丁香酚制备方法是:
丁香粉碎，95 %的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5 %的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH=5，乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，即得。
[0013]本发明还提供了该天然药物组合物的优选的制备方法，包括:
(I)五味子丁香水煎浓缩提取物的制备
按照配伍比例为1-4: I取五味子、丁香，蒸馏水浸泡，加热煎煮，过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩，超滤膜过滤，减压干燥，即得。
[0014](2)五味子多糖的制备
取五味子干燥果实，粉碎过筛，用无水乙醇索氏回流脱脂，干燥，加水90°C浸提后过滤，提取液减压浓缩，95%乙醇醇析，离心收集`沉淀，沉淀分别用丙酮、乙醚和无水乙醇洗涤，冻干得五味子多糖。
[0015](3) 丁香乙醇提取物制备
取丁香，干燥，粉碎，过筛，乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15分钟，分离上清液，蒸馏去除乙醇及杂质，加乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得。
[0016](4) 丁香酚制备
丁香粉碎，95 %的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5 %的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH=5，乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，即得。
[0017](5)按比例选取五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚，均匀混合，即得。
[0018]上述天然药物组合物的制备方法，还包括:将步骤(5)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物IOOmg或200mg规格的胶囊或片剂。
[0019]本发明天然药物组合物在抗化疗相关性腹泻的有益效果如下:
1、本发明天然药物组合物，在伊立替康导致小鼠腹泻模型的研究表明:对于伊立替康所致小鼠的腹泻反应有明显的对抗作用。
[0020]2、本发明人独创地将五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚进行组合，并通过大量实验确定这些组分之间的用量配比，使该组合物发挥了很好的协同作用，获得意外的效果。经过我们反复实验研究，本发明的天然药物组合物各组分之间的比例在2-4:3-5:3-8:5-8时产生了出乎意料的协同作用，增效明显，尤其在各组分的用量比例是4:5:8:8时尤其明显，这是本发明人付出大量创造性劳动而获得的，本领域普通技术人员仅仅通过公开的内容无法简单获得这种配比范围以及最佳用量比例。
[0021]3、该天然药物组合物五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚各组分均可通过常规手段获得，五味子多糖还可通过商业购得，这样的组合物本身具有获得方便、成本较低的效果。这也是发明人通过大量创造性劳动方获得的兼具极佳疗效和较高工业实用性的产品。
【具体实施方式】
[0022]下面通过实施例和试验例进一步阐述本发明天然药物组合物的制备，以及其在抗化疗相关性腹泻的有益效果。
[0023]实施方案
第一步:各种提取物的制备
(I)五味子丁香水煎浓缩提取物的制备
按照配伍比例为1-4: I取五味子、丁香，蒸馏水浸泡，加热煎煮，过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩，超滤膜过滤，减压干燥，即得。
[0024](2)五味子多糖的制备
取五味子干燥果实，粉碎过筛，用无水乙醇索氏回流脱脂，干燥，加水90°C浸提后过滤，提取液减压浓缩，95%乙醇醇析，离心收集沉淀，沉淀分别用丙酮、乙醚和无水乙醇洗涤，冻干得五味子多糖。
[0025](3) 丁香乙醇提取物制备
取丁香，干燥，粉碎，过筛，用7-10倍乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15分钟，分离上清液，蒸馏去除乙醇及杂质，加乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得。
[0026](4) 丁香酚制备
丁香粉碎，95 %的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5 %的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH=5，乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，即得。
[0027]第二步:制剂的制备
(I)本发明天然药物组合物胶囊制剂的制备
分别称取上述步骤制备的五味子丁香水煎浓缩提取物16mg、五味子多糖20mg、丁香乙醇提取物32mg与丁香酹32mg,同时称取淀粉395mg、硬脂酸镁5mg,均匀混合,填充成胶囊剂。
[0028](2)本发明天然药物组合物片剂的制备
分别称取上述步骤制备的五味子丁香水煎浓缩提取物16mg、五味子多糖20mg、丁香乙醇提取物32mg与丁香酹32mg,同时称取淀粉295mg、乳糖IOOmg,均匀混合,用湿法制粒、干燥，整粒后与5mg硬脂酸镁混合，压成片剂。
[0029]药效及药理学资料:
在下述试验例子中组合物为:五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚的用量比例为4:5:8:8。发明人对上述各成分用量比例在2-4:3-5:3-8:5-8之间时的多种配比组合获得的组合物进行了与上相同的实验，均发现在这种用量范围内的天然药物组合物能获得很好的协同作用，对癌症化疗相关性腹泻能起到较好的效果。以下是优选的实施方式获得的药效学资料:
试验例:天然药物组合物治疗化疗相关性腹泻作用的药效学研究
1、试验材料
(I)五味子，丁香，购于药材市场。
[0030]( 2 )小鼠，雄性，实验前自由进食饮水。
[0031]2、试验方法:
将小鼠随机分为5组，每组5只，A组为模型组，B组为五味子丁香水煎浓缩提取物IOg.kg—1 (相当于含生药量)，C组为五味子多糖10g.kg-1 (相当于含生药量)，D组丁香乙醇提取物与丁香酚按8:8比例混合10g.kg—Y相当于含生药量)，E组为本发明的天然药物组合物IOg.kg-1 (相当于含生药量)，伊立替康腹腔注射给药(75mg/kg)，每天I次,连续4天,复制化疗相关性腹泻模型。B、C、D、E组连续用相应提取物灌胃8天，将小鼠置于代谢笼，笼底铺白色滤纸以观察大便情况，并且观察小鼠肛周情况及鼠尾粪便污染情况，结合棉签刺激肛门排便，每日观察记录2次。腹泻程度标准评分如下:0分:大便正常或没有；1分:轻度腹泻，大便可见轻微湿软；2分:中度腹泻，大便较湿且不成型。并且有轻度肛周着色；3分，重度腹泻，水样便并伴有重度肛周着色。
[0032]3、实验结果
与模型组比较，本发明的天然药物组合物组腹泻发生率明显减轻。结果见表1.表1本发明组合物对小鼠化疗相关性腹泻发生率及评分影响·
【权利要求】
1.一种减少癌症化疗相关性腹泻的天然药物组合物，其特征在于该组合物由五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚以重量计按2-4:3-5:3-8:5-8的比例组成， 其中五味子丁香水煎浓缩提取物的制备方法是: 按照配伍比例为1-4: 1取五味子、丁香，蒸馏水浸泡，加热煎煮，过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩，超滤膜过滤，减压干燥，即得； 其中五味子多糖的制备方法是: 取五味子干燥果实，粉碎过筛，用无水乙醇索氏回流脱脂，干燥，加水90°C浸提后过滤，提取液减压浓缩，95%乙醇醇析，离心收集沉淀，沉淀分别用丙酮、乙醚和无水乙醇洗涤，冻干即得； 其中丁香乙醇提取物的制备方法是: 取丁香，干燥，粉碎，过筛，乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15分钟，分离上清液，蒸馏去除乙醇及杂质，加乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得； 其中丁香酚的制备方法是: 丁香粉碎，95 %的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5 %的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH=5，乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，即得。
2.如权利要求1所述的天然药物组合物，其中五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚的用量比例是4:5:8:8。
3.如权利要求1或2所述的天然药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括: (1)五味子丁香水煎浓缩提取物的制备 按照配伍比例为1-4: I取五味子、丁香，蒸馏水浸泡，加热煎煮，过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩，超滤膜过滤，减压干燥，即得； (2)五味子多糖的制备 取五味子干燥果实，粉碎过筛，用无水乙醇索氏回流脱脂，干燥，加水90°C浸提后过滤，提取液减压浓缩，95 %乙醇醇析，离心收集沉淀，沉淀分别用丙酮、乙醚和无水乙醇洗涤，冻干即得； (3)丁香乙醇提取物的制备 取丁香，干燥，粉碎，过筛，乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15分钟，分离上清液，蒸馏去除乙醇及杂质，加乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得； (4)丁香酚的制备 丁香粉碎，95 %的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5 %的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH=5，乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，即得； (5)按比例选取五味子丁香水煎浓缩提取物、五味子多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚均匀混合，即得。
4.如权利要求3所述的天然药物组合物的制备方法，还包括:将步骤(5)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物IOOmg或200mg规格的胶囊或片剂。
5.如权利要求1-2任一项所述的天然药物组合物在制备减少癌症化疗相关性腹泻药物中的用途。
【文档编号】A61K9/48GK103655720SQ201310679097
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年12月14日 优先权日:2013年12月14日
【发明者】张宗升 申请人:张宗升