采用具有低岩藻糖化的抗her2抗体的新治疗性疗法

采用具有低岩藻糖化的抗her2抗体的新治疗性疗法
【专利摘要】本发明涉及使用抗癌抗体的癌症疗法领域。提供具有改善的糖基化特征、尤其岩藻糖化减少的抗HER2抗体的医学用途，所述抗体显示增强的功效。
【专利说明】采用具有低岩藻糖化的抗HER2抗体的新治疗性疗法 发明领域
[0001] 本发明涉及具有改善的糖基化特征的抗J1ER2抗体的新医学用途。所述抗HER2抗 体在采用常见治疗性抗体和化疗药的疗法已经失败或较不有效的情况下显示治疗功效，因 而允许成功地治疗新患者组和尤其能用常规抗J1ER2抗体疗法成功治疗的患者。特别地，本 发明提供新的抗转移治疗以及用于先期治疗患者的新治疗，所述先期治疗患者包括罹患转 移性癌症的深度先期治疗患者，其中尽管采用现有疗法，癌或转移灶复发。另外，本发明涉 及具有改善的糖基化特征的抗J1ER2抗体在治疗仅显示低过表达HER2的HER2阳性疾病、尤 其具有如通过免疫组织化学（IHC)所确定的1+或2+HER2表达的HER2阳性癌症中的新医 学用途。
[0002] 发明背景
[0003] 抗体是医学和研究领域中广泛使用的药剂。在医学中，它们应用于许多不同的领 域，尤其作为治疗和预防多种疾病、尤其肿瘤性疾病如癌症中的治疗药。但是，通过抗体疗 法获得的癌症患者的治疗结果高度可变。明显百分比的使用抗癌抗体的疗法不显示或仅显 示疾病轻微减轻并且有时限于特定患者组。
[0004] 建立的示例性抗癌抗体是针对人表皮生长因子受体2 (HER2)的抗体。认为人表皮 生长因子受体2(HER2)蛋白是针对过表达HER-2/neu基因的癌的抗体疗法的独特和可用 靶。HER2在几种癌中过表达，包括但不限于乳腺癌、结肠癌、晚期食管腺癌、胃腺癌或食管胃 结合部腺癌。例如J1ER2在20%至30%人乳腺癌中过表达并且与患有淋巴结阳性和淋巴结 阴性疾病的女性中的不良临床预后相关。HER2的过表达也已经与更多的侵入性肿瘤相关。 为了治疗J1ER2阳性肿瘤，尤其如乳腺癌，使用抗HER2抗体是一种确立的治疗形式。重组人 源化抗-HER2单克隆抗体曲妥珠单抗(赫赛幻在1998年在美国经批准用于临床用途并 且经批准用于治疗乳腺癌，包括转移性乳腺癌和转移性胃癌。使用曲妥珠单抗作为单一疗 法和联合疗法。曲妥珠单抗在CH0细胞（仓鼠细胞）中表达并且因此高度岩藻糖化。为单 一药剂（单一疗法）给予的抗体的响应率是15-26%。
[0005] 另一种抗HER2抗体是抗体培妥珠单抗（也称作重组人单克隆抗体2C4 ; OMNITARG?)，其代表称作ffiR二聚化抑制剂（HDI)的新一类抗体中的第一种，并且 发挥作用以抑制J1ER2与其他HER受体（如EGFR/HER1、HER3和HER4)形成活性异二聚体的 能力并且无论J1ER2表达水平如何均有活性。已经展示培妥珠单抗对肿瘤细胞中HER2/HER3 异二聚体形成的阻断抑制关键细胞信号传导过程，这导致减少的肿瘤增生和存活。培妥珠 单抗已经作为单一药剂在临床接受测试。在一项I期研究中，患有已经在标准疗法期间或 之后进展的不可治愈性局部晚期复发性或转移性实体瘤的患者将用每3周静脉内给予的 培妥珠单抗治疗。在可评估缓解的20位患者中有3位患者实现肿瘤消退。2位患者已经证 实部分缓解。21位患者中有6位患者观察到持续超过2. 5个月的病情稳定。这些结果突显 实现甚至病情部分缓解或稳定的难题。十分经常地，仅在疾病最终进展之前观察到有益作 用如肿瘤消退或病情稳定持续数月。
[0006] 非岩藻糖化的抗体已经显示具有增强的抗体依赖的细胞介导细胞毒性（ADCC)并 且因此为开发完胜生物改良（biobetter)抗体提供机会。证据表明不存在来自初级N-乙酰 葡糖胺的岩藻糖，导致IgGl抗体针对Fc Y Rllla受体的结合亲和力增加，随之而来的是天 然杀伤（NK)细胞介导的ADCC功效增加。这在使用非岩藻糖化糖型的研究中证实，其中所述 非岩藻糖化糖型在额外缺损岩藻糖残基的突变CH0细胞、尤其其中已经敲除a (1-6)岩藻 糖基转移酶酶的CH0细胞中产生。非岩藻糖化IgGl糖型对FcyRI或补体C1组分的亲和力 据报道不受影响；据报道对FcyRlla和FcyRllb的亲和力的小幅增加，但是由于维持活化 /抑制比，得出结论：它在功能上将没有显著意义。对非岩藻糖化IgG-Fc观察到的增强ADCC 部分地因增加的亲和力克服正常血清IgG对Fc YRIIIa的竞争所致。非岩藻糖化的曲妥珠 单抗也展示改善的ADCC。FcyRllla受体具有多态性并且已经显示FcyRIIIa-158V(缬氨 酸）形式比FCYRIIIa-158F(苯丙氨酸）形式具有更高的IgGl亲和力。在体外展示，与 通过纯合FcyRIIIa-158F或杂合FcyRIIIa-158V/FcyRIIIa-158F细胞相比，岩藻糖化 的IgGl抗体在通过携带纯合FcyRIIIa-158V的细胞介导ADCC时更高效。因此，预计取决 于表达的FcyRIIIa的多态性形式，ADCC功效方面的相似差异可能在体内适用。现有技术 例如US 2006/0182741中提出非岩藻糖化抗体用于治疗相应的弱响应患者亚群的用途，其 中弱响应患者是F/F纯合或V/F杂合。非岩藻糖化抗体和岩藻糖含量减少的抗体还在EP 1 500 400和W0 2008/028686中描述。非岩藻糖化抗HER2抗体的体外结果在Suzuki等 人，Clinical Cancer Research 2007 ; 13:1875-1882 ;Juntilla 等人，Cancer Research 2010 ;70:4481-4489 和 Zhang 等人，mAbs 3:3, 289-298, 2011 中描述。在这些论文中，将具 有减少的岩藻糖化的抗ffiR2抗体与比较抗体曲妥珠单抗(赫赛汁?),其中曲妥珠单因其 在CH0细胞中产生而在Fc区内具有高度岩藻糖化。结果显示具有减少的岩藻糖含量的抗 HER2抗体显示优越的ADCC活性。但是，尚未展示这些结果在临床应用这些抗体方面的治疗 性意义。
[0007] 伴随抗HER2抗体如曲妥珠单抗的常见问题是它们仅对过表达HER2的肿瘤有活 性。因此，仅小群体的患者适于相应的治疗。临床曲妥珠单抗试验显示，具有0至1+程度 HER2表达（通过IHC确定）的患者总是无法从该药物获益并且仅一些具有程度2+表达的 患者的确从该药物获益。更多具有程度3+表达的患者获益。然而，甚至在具有程度3+的 患者组中，存在大量无反应个体或低反应个体。发现虽然曲妥珠单抗对HER2受体显示巨大 亲和力并且可以施用高剂量（归因于其低毒性），但是至少70%的HER2+患者不响应于治 疗。对于至少80%这些患者，尤其具有F/F和F/V受体同种异型的那些患者，甚至报道无抗 肿瘤活性或仅降低的对抗肿瘤活性。实际上，耐药性总是形成并且病情进展。在许多情况 下，尽管如此，至病情进展时间仅延迟数月。
[0008] 罹患下述HER2阳性癌症的患者经常具有有限的治疗选择，其中用常规抗HER2抗 体如曲妥珠单抗治疗已经失败或其中即便进行抗J1ER2抗体治疗，病情仍进展。如果患者已 经接受可能也不阻止病情进展的先期或同时化疗治疗，情况尤其如此。这类先期或同时化 疗治疗经常在其中抗HER2抗体如曲妥珠单抗失效的患者组中遇到，原因是将曲妥珠单抗 在转移性乳腺癌中作为单一疗法给予以治疗已经接收至少两个化疗方案（并且因此先期 治疗）的患者，并且在其他适应症中作为联合疗法与化疗药如紫杉醇或多西紫杉醇一起给 予。如果即便用化疗药和/或抗J1ER2抗体多次治疗，病情仍进展，则患者的存活预后低。因 此，还必须牢记患者的总体健康状态随降治疗次数增加和病情进展而下降。深度先期治疗 患者经常具有不良体能状态（ECOG)并因此排除其他激进疗法如进一步化疗。如果原发癌 转移并且尽管治疗仍持续转移，则存活预后特别低。
[0009] 转移或转移性疾病是疾病从一个器官或部分扩散到另一个不相邻的器官或部分。 在组织中的单个细胞进行性地遗传受损以产生拥有恶性表型的癌干细胞后，癌出现。这些 癌干细胞能够进行失控的异常有丝分裂，后者起到增加这个位置处癌细胞总数的作用。当 起源侧之处的癌细胞区域临床上变得可检测时，将它称作原发肿瘤。一些癌细胞还获得透 过并且浸润周围正常组织和局部区域的能力，形成新肿瘤。组织内部相邻侧之处新形成的 "子代"肿瘤称作局部转移。一些癌细胞获得透过淋巴管壁和/或血管壁的能力，此后它们 能够通过血流循环（循环型肿瘤细胞）至身体内其他部位和组织。这个过程称作淋巴性或 血源性扩散。在肿瘤细胞开始在另一个部位处停留后，它们再穿透血管或壁并继续增殖，最 终形成另一个临床上可检测的肿瘤。这个新肿瘤称作转移性（或继发性）肿瘤。转移是恶 性肿瘤的一个标志。其他赘生物中的大部分肿瘤可以转移，虽然程度不同。当肿瘤细胞转 移时，新肿瘤称作继发性或转移性肿瘤，并且其细胞类似于原始肿瘤中的那些。这例如意指 如果乳腺癌转移至肺，则继发肿瘤由异常乳腺细胞组成，而不由异常肺细胞组成。
[0010] 转移性肿瘤在癌症晚期十分常见。转移的扩散可以借助血液或淋巴管或通过两条 途径发生。如果转移通过淋巴性扩散发生，则侵入淋巴系统后随之而来的是肿瘤细胞输送 至局部淋巴结并最终抵达身体的其他部分。这是癌转移的最常见途径。癌细胞可以扩散至 原发肿瘤附近的淋巴结（局部淋巴结）。这称作结受累、阳性结或局部疾病。当进行手术 以探查或摘除肿瘤时，常见医学实践是通过活组织检查法至少对肿瘤附近的淋巴结检验。 局限化扩散至原发肿瘤附近的局部淋巴结正常情况下不计为转移，不过这是预后更差的体 征。通过淋巴管运输是癌初始散播的最常见途径。
[0011] 转移发生的最常见位置是肺、肝、脑和骨。但是，在皮肤也发现转移灶并且经常出 现在特定的癌类型如乳腺癌中。皮肤的转移灶（或皮肤转移灶-这些术语在此作为同义 词使用）指源自内部癌的癌细胞在皮肤中生长。在大多数情况下，皮肤转移灶在初始诊断 原发性内部恶性肿瘤（例如乳腺癌或肺癌）后及晚期在病程中形成。当癌细胞从原发肿瘤 脱离并且通过血液循环或淋巴系统前往皮肤时，皮肤转移出现。大部分恶性肿瘤可以产生 皮肤转移，但是一些或更多肿瘤比其余肿瘤更有可能产生皮肤转移。女性中最常见的皮肤 转移源是乳腺（69% )、结肠（9% )、黑色素瘤（5% )、卵巢（4% )和肺（4% )。大部分皮肤 转移灶出现在原发肿瘤附近的身体区域内。它们可以分解并破溃，并因此突破皮肤。溃疡 性肿瘤可以通常以两种方式形成。它可以作为原发肿瘤的部分形成或作为继发肿瘤即作为 转移灶形成。如上文描述，如果肿瘤扩散至血液和淋巴系统，则它可以穿行到皮肤并形成溃 疡性肿瘤。这是罕见并且通常仅发生在癌症晚期。对于一些人而言，溃疡性肿瘤是其癌症 的最令人不安方面并且如果其他可见到溃疡性肿瘤，例如在面部或腹部上，则它可能大大 影响患者如何自我感知。另外，溃疡性肿瘤还可能难闻。在乳腺癌中，最常见的皮肤转移部 位是胸部和腹部。为了治疗皮肤转移灶，需要治疗基础性原发肿瘤。但是，在皮肤转移已经 发生的大多数情况下，原发性癌症广泛扩散并且可能无法治疗。在这种情况下，仅可能给予 姑息护理。
[0012] 具有转移灶的患者的治疗和存活通常由癌是否为局部的或已经扩散到其他位置 决定。如果癌症扩散至其他组织和器官，则它可能减少患者存活可能性。治疗的选择通常取 决于原发癌的类型、转移灶的大小和位置、患者的年龄和总体健康和先前所用治疗的类型。 如上文描述，死亡率在具有皮肤转移灶、尤其晚期溃疡性皮肤转移灶的患者中特别高。皮肤 转移灶的出现标志转移性疾病广泛扩散，造成患者预后不良。
[0013] 临床肿瘤医生一致认为，癌症治疗失败并不必然地由通常利用手术处理的原发肿 瘤生长引起，反而由转移性扩散至不同器官中引起。因此，有效的治疗转移灶，包括阻止转 移灶、抑制转移灶增长并防止转移灶进一步扩散。已知通过不同抗癌药物消退原发肿瘤不 总是显示抗转移活性本身。相反，已经观察到响应于几种抗癌药物的转移增强。另外，化疗 药以及治疗性抗体显示不同程度的抗转移活性，所述抗转移活性还取决于转移的位置。
[0014] 已知用抗HER2抗体治疗可有助于治疗原发肿瘤以及转移。然而，现有技术中已知 的抗HER2抗体如曲妥珠单抗对不同类型的转移灶显示相当趋异的功效。例如Sawaki等人 (Tumori, 20:40-43, 2004:Efficacy and safety of trastuzumab as a single agent and heavily pre-treated patients with HER-2/NEU-〇ver expressing metastatic breast cancer)分析了不同类型的转移灶怎样响应于曲妥珠单抗疗法。患者经证实过表达HER2基 因产物。作为该临床研究的结局，Sawaki描述11. 5%的患者对曲妥珠单抗治疗具有完全响 应，11. 5%具有部分响应，11. 5%无变化并且65%的患者显示进展性病情。至病情进展时 间是3. 1个月（中位数）并且中位数响应持续时间是6. 4个月。所分析的患者由常规化疗 先期治疗并且对所述疗法抵抗。大多数患者已经接受多个化疗方案，因此，所分析的研究群 体通常具有非常不良的预后。如上文讨论，患者接受越不成功的治疗，其预后越差。Sawaki 得出结论：曲妥珠单抗作为单一药剂在患有ffiR2过表达的转移性乳腺癌的女性中有效，其 中所述转移性乳腺癌已经在化疗后进展，即便如此，Sawaki得出结论：这种效果视为缺少 足够功效。另外，Sawaki报道：观察到的缓解率还因转移部位而严重差异。Sawaki得出结 论：研究中获得的结果表明曲妥珠单抗作为对抗内脏转移灶、尤其肝转移灶和肺转移灶及 脑转移灶的单一药剂无效。伴随皮肤转移见到50%的缓解率，伴随淋巴结见到43%的缓解 率，伴随骨转移灶见到10%的缓解率，但未见涉及肺转移灶和肝转移灶的缓解。然而，考虑 总体缓解率低，这凸显曲妥珠单抗在大量患者和尤其具有特定转移灶如肺转移灶或肝转移 灶的患者中无效。
[0015] Rossi 等人（Anticancer research 24:317-320 (2004))报道了一个病例，其中可 以用曲妥珠单抗有效治疗在罹患转移性乳腺癌的深度先期治疗患者中出现的骨髓转移灶。 患者实现血细胞计数完全恢复，但是因肺转移灶进展而最终死亡。Rossi报道了诊断转移性 乳腺癌后的中位数存活时间是18至24个月，但指出，这个存活时间根据疾病的转移部位广 泛地变动。相对于仅患有骨病的那些患者（18至个30月），患有内脏疾病的患者的中位数 存活时间传统上较短（6至13个月）。
[0016] Gori 等人（The Oncologist 2007 ; 12:766-773:Central nervous system metastases in HER-2-positive metastatic breast cancer patients treated with tr astuzumab: incidence, survival, and risk factors)描述了一项观察性研究，所述研究旨 在评价HER-2阳性转移性乳腺癌患者中CNS转移发生率以确定具有CNS转移灶的患者的结 局并鉴定复发风险因子。Gori报道，内脏转移灶是复发时的优势部位并且这与CNS转移灶 的显著更高风险相关。这凸显高效治疗内脏转移灶的重要性。
[0017] 鉴于上文，明了迫切要对HER2阳性肿瘤性疾病、尤其转移性HER2阳性癌症的改进 治疗。另外，高度需要为其中尽管先前用抗J1ER2抗体和/或化疗药治疗过但病情进展的患 者提供有效治疗方案，并且尤其需要深度先期治疗患者为提供治疗选项。特别地，高度需要 为治疗HER2阳性转移灶、尤其皮肤转移灶、淋巴结转移灶和内脏转移灶如肺转移灶和肝转 移灶提供高效选项。另外，需要提供针对如通过IHC所确定仅显示低度或中度HER2表达、 尤其HER2 1+或HER2 2+的HER2阳性癌症的改善治疗。
[0018] 发明简述
[0019] 在其Fc区中具有减少的（包括不存在）岩藻糖化的本发明抗HER2抗体在本文中 报道的临床试验中展示出值得注意和出乎意料的用于治疗患有J1ER2阳性肿瘤性疾病、尤 其癌症的患者的治疗功效。本文所述的抗HER2抗体在治疗上有效对抗原发癌和转移灶。 还显示它们在治疗上有效对抗耐受或抵抗常规癌症疗法的原发癌和转移灶。另外，在其Fc 区中具有减少的（包括不存在）岩藻糖化的本发明抗ffiR2抗体对仅显示低或中等HER2表 达（例如如通过IHC所确定的1+或2+)的HER2阳性癌症展示良好治疗功效。特别地，所 述抗HER2抗体有效对抗耐受或抵抗常规癌症疗法的转移灶和原发肿瘤。特别地，本发明的 岩藻糖减少的抗J1ER2抗体显示对抗原发癌和转移灶的高治疗功效，其中所述原发癌和转 移灶耐受或变得耐受用具有高度岩藻糖化的常规抗HER2抗体治疗和/或耐受或变得耐受 用一种或多种化疗药治疗。基于本文中报道的研究结果，本发明提供允许治疗特定患者组 的新医学治疗方案，其中所述患者组不能或不再可以用常规疗法、尤其常规抗HER2抗体疗 法（包括了包含常规抗J1ER2抗体的联合疗法）治疗。特别地，本发明为深度先期治疗患者 提供成功治疗方案，即，已经接受多个线先期抗癌症治疗的患者，然而其中这类先期治疗失 败并且其中所述患者具有广泛扩散的转移灶。本申请中呈献的数据显示遵循本发明的教导 内容，可以成功地治疗这类患者，即便本发明的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体作为单一疗法施 用也是如此。成功治疗了许多不同的转移灶，包括溃疡性皮肤转移灶、淋巴结转移灶和内脏 转移灶，尤其肺转移灶和肝转移灶。展示的强烈抗转移功效是一项重要的临床成功，因为治 疗具有转移灶的深度先期治疗患者的这种特定患者亚组是特别困难的并且因此，这个患者 组具有非常差的存活预后。本发明为所述患者提供成功的新治疗，甚至在单一疗法环境下。 另外，如本文中呈献的数据所展示，甚至当施用低剂量本发明的抗HER2抗体时，也实现治 疗性成功。另外，非常快速地见到治疗效果，因而显示本发明的抗HER2抗体在这位患者组 中显著的治疗功效。例如，在其中化疗药和常规抗HER2抗体先期多次治疗失败并且病情进 展的罹患转移性乳腺癌和巨大溃疡性皮肤转移灶的深度先期治疗患者中，溃疡性皮肤转移 灶在第一次施用本发明的抗HER2抗体（单一疗法）后8日已经开始愈合并且可能最终完 全修复。另外，还在其中用化疗药和常规抗癌抗体先期治疗失败并且病情进展的转移性结 肠癌和具有肺转移灶和肝转移灶的深度先期治疗患者中，当本发明的岩藻糖减少的抗J1ER2 抗体在单一疗法环境下施用时，观察到靶损害的显著缩减（44% )。
[0020] 另外，本文中呈献的数据还表明，本文所述的岩藻糖减少的抗HER2抗体可以有利 地用于治疗显示1+或2+低度HER2过表达（如通过免疫组织化学所确定）的HER2阳性癌 症和尤其转移性癌，再次地，还在其中用许多其他抗癌药治疗失败的先期治疗患者中。另 夕卜，在进行的临床研究中，显示本发明的抗J1ER2抗体耐受良好并且与常规抗体疗法相比， 观察到的副作用减少。考虑到深度先期治疗患者的健康状况（这经常排除激进疗法如进一 步化疗），这是一个重要优点。
[0021] 另外，本申请中呈献的数据显示在迄今不可能用高岩藻糖抗HER2抗体如例如曲 妥珠单抗成功治疗的患者（例如具有内脏转移灶如肝转移灶和肺转移灶的患者）中的治疗 效果。
[0022] 基于以上研究结果，本发明在第一方面提供在CH2结构域中具有50%，优选地 40%或更少、30%或更少、20%或更少、优选地15%或更少和最优选地10%至0%岩藻糖量 的抗HER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）用于治疗患有HER2阳性癌症的人类患者，其 中癌是转移性癌症。
[0023] 在第二方面，本发明提供在CH2结构域中具有50 %或更少、优选地40 %或更少、优 选地30%或更少、20%或更少、更优选地15%或更少、最优选地10%至0%岩藻糖量的抗 HER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）用于治疗患有HER2阳性肿瘤性疾病、尤其癌症的 患者，其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗过：
[0024] a)至少一种化疗药；
[0025] b)至少一种在CH2结构域中具有60 %或更多、尤其70 %或更多岩藻糖量的抗 HER2抗体（高岩藻糖抗HER2抗体），或至少一种未糖基化的抗HER2抗体；
[0026] c)任选地放疗法；和
[0027] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0028] 其中先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行。所述 癌可以是转移性癌和/或具有如通过免疫组织化学（IHC)所确定的程度2+或更少如程度 1+的HER2过表达的癌。
[0029] 在第三方面，本发明提供在CH2结构域中具有50%或更少、优选地40%或更少、 30%或更少、20%或更少、优选地15%或更少、最优选地10%至0%或10%至3%岩藻糖量 的抗HER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）用于治疗患有HER2阳性肿瘤性疾病、尤其 HER2阳性癌症的患者，其中HER2阳性癌症具有程度2+或更低、优选地程度1+的HER2过表 达，如通过免疫组织化学（IHC)所确定。岩藻糖减少的抗HER2抗体特别可用于治疗转移性 癌症。另外，基于以上研究结果，本发明提供在CH2结构域中具有50%或更少、优选地40% 或更少、30 %或更少、20 %或更少、优选地15 %或更少、最优选地10%至0%或10%至3%岩 藻糖量的抗J1ER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）用于治疗患有HER2阳性转移性癌症 的人类患者，其中J1ER2阳性癌症具有程度2+或更低、优选地程度1+的HER2过表达，如通 过免疫组织化学（IHC)所确定。
[0030] 如上文讨论，本文所述的岩藻糖减少的抗HER2抗体特别地有效对抗转移灶。另 夕卜，它们特别地有效用于治疗先期治疗过和另外深度先期治疗过的患者并且尤其在具有转 移灶、尤其内脏转移灶、淋巴结转移灶和溃疡性皮肤转移灶的患者中特别有效。甚至当施用 岩藻糖减少的抗J1ER2抗体作为单一疗法时，也见到治疗效果。因此，本发明提供经证明高 度有效的本发明岩藻糖减少的抗J1ER2抗体和新的有效治疗方案。甚至根据当去岩藻糖化 时展示ADCC活性增加的现有体外数据，改善本发明的低岩藻糖化抗HER2抗体的治疗功效 的程度和因其所致的治疗选项是出乎意料的。特别地，可能有效治疗具有通常不能用常规 高岩藻糖化抗ffiR2抗体治疗的转移灶的患者是令人惊讶的，因为这不单纯是改善已经存 在的治疗效果，而是代表无效治疗药（高岩藻糖抗J1ER2抗体）转变成高度有效的治疗药 (岩藻糖减少的抗J1ER2抗体）。如本文所述，本文所述的岩藻糖减少的抗HER2抗体甚至在 低剂量高度有效并且能够治疗转移灶如溃疡性皮肤转移灶、内脏转移灶如肺转移灶和/或 肝转移灶和淋巴结转移灶。另外，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体还对仅具有程度2+或更低和 甚至程度1+的J1ER2低过表达（如通过免疫组织化学所确定）的HER2阳性癌症有效。甚 至当岩藻糖减少的抗体作为单一疗法施用时，也非常快速地观察到实现的治疗效果。因此， 本发明对现存癌症疗法作出重要贡献。
[0031] 如从上文和后续发明公开明了，可以组合本发明的不同方面。例如，如实施例中显 示，本发明的抗J1ER2抗体可以用治疗耐受或抵抗常规癌症疗法的转移瘤和原发肿瘤。可能 成功治疗罹患转移性癌症并且尤其现存多个转移灶的这类先期治疗过和还深度先期治疗 的患者是本发明作出的一项重要贡献。另外，一个优点是本发明的抗J1ER2抗体对具有程度 2+或更低的HER2低过表达的HER2阳性癌症有效。因此，为前述患者提供治疗选项，即使他 们患有这类低J1ER2表达的癌症。
[0032] 在第四方面，本发明涉及一种治疗患有HER2阳性肿瘤性疾病的患者的方法，包括 向所述患者以足够治疗该肿瘤性疾病的量施用在CH2结构域中具有50%或更少、优选地 30%或更少、更优选地15%至0%岩藻糖量的抗册1?2抗体（岩藻糖减少的抗册1?2抗体）。 本发明其他方面的特征和实施方案也同样适用于本发明的治疗方法。特别地，J1ER2阳性肿 瘤性疾病可以是如本文所述的转移性癌症，和/或患者可以已经接受如本文所述的一个或 多个先期癌症疗法，和/或J1ER2阳性肿瘤性疾病可以是如本文所述的具有程度2+或更低、 优选地程度1+的HER2表达的HER2阳性癌症，如通过免疫组织化学（IHC)所确定。
[0033] 本发明的其他目的、特征、优势和方面将因以下说明书和所附权利要求书而对本 领域技术人员变得明了。然而，应当理解以下说明书、所附权利要求书和表示本申请的优选 实施方案的具体实施例仅以说明方式给出。在所公开发明的精神和范围内的多种改变和修 改将因阅读以下内容而对本领域技术人员变得容易地明了。
[0034] 定义
[0035] 如本文所用，以下表达通常意在优选地具有如下文所述的含义，例外在于另外指 明其中使用它们的上下文的程度。
[0036] 如本文所用，表述"包含"，除了其字面含义外还包括并且特别地指表述"基本上 由……组成"和"由……组成"。因而，表述"包含"指其中"包含"具体所列出元素的主题物 不包含其他要素的实施方案，以及其中"包含"具体所列出元素的主题物可以和/或实际上 的确涵盖其他要素的实施方案。同样，表述"具有"应理解为表述"包含"，还包括并且特别 地指表述"基本上由……组成"和"由……组成"。
[0037] 术语"抗体"特别指包含由二硫键连接的至少两条重链和两条轻链的蛋白质。每 条重链由重链可变区（VH)和重链恒定区（CH)组成。每条轻链由轻链可变区（VL)和轻链 恒定区（CL)组成。重链恒定区包含三个恒定域或在IgM型或IgE型抗体的情况下四个重 链恒定域（CHI、CH2、CH3和CH4)，其中第一恒定域CH1与可变区毗邻并且可以通过铰链区 与第二恒定域CH2连接。轻链恒定区仅由一个恒定域组成。可变区可以进一步再划分为超 变区，名为互补性决定区（CDR)，其间插有更保守的区域，名为框架区（FR)，其中每种可变 区包含3个⑶R和4个FR。重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。抗体 的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子（包括免疫系统的各种细胞（例如，效应 细胞）和经典补体系统的第一组分（Clq))结合。抗体可以例如是人源化抗体、人抗体或嵌 合抗体。抗体能够诱导ADCC。
[0038] 特别地，抗体可以具有任何同种型，如IgA、IgD、IgE、IgG或IgM，包括任何亚类如 IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl或IgA2。优选地，抗体是IgG抗体，更优选地是IgGl抗体或 IgG2抗体,尤其是IgGl抗体。重链恒定区可以具有任何类型，如Y-、5-、a-、或e 型重链。另外，轻链恒定区也可以具有任何类型，如k形或A型轻链。优选地，抗体的轻 链是k-链。优选地，抗体是全长抗体，在IgG抗体的情况下，所述全长抗体包含两条全长 重链和两条全长轻链。
[0039] 抗体的"抗原结合部分"通常指抗体中保留与抗原特异性结合的能力的全长或一 个或多个片段。已经显示抗体的抗原结合功能可以由全长抗体的片段执行。抗体的结合 片段的例子包括Fab片段，一种由\域、VH域、(^域和CH1域组成的单价片段；F(ab) 2片段， 一种包含由二硫键在铰链区连接的两个Fab片段的双价片段，其中每种片段与相同抗原结 合；由V H域和CH1域组成的Fd片段；由抗体单臂的 '域和VH域组成的Fv片段；由VH域组 成的(^片段（￥31(1等人，1989似1：1^341:544-546) ;和分离的互补性决定区（0)1?)。抗体 的"Fab部分"特别指抗体的包含重链可变区和轻链可变区（VH和VL)和第一重链恒定区和 轻链恒定区（CH1和CL)的部分。在抗体不包含全部这些区域的情况下，则术语"Fab部分" 仅指存在于抗体中的VH、VL、CH1和CL的那些区域。优选地，"Fab部分"指与通过木瓜蛋 白酶消化天然抗体所获得的片段相对应的那个抗体部分，所述抗体部分含有抗体的抗原结 合活性。特别地，抗体的Fab部分涵盖抗原结合位点或其抗原结合能力。优选地，Fab部分 至少包含抗体的VH区。
[0040] 抗体的"Fc部分"特别指包含重链恒定区2、3和如适用-4 (CH2、CH3和CH4)的抗 体部分。在抗体不包含全部这些区域的情况下，则术语"Fc部分"仅指存在于抗体中的CH2、 CH3和CH4的那些区域。优选地，Fc部分至少包含抗体的CH2区。优选地，"Fc部分"指与 通过木瓜蛋白酶消化天然抗体所获得的片段相对应的那个抗体部分，所述抗体部分不含有 抗体的抗原结合活性。特别地，抗体的Fc部分能够与Fc受体结合并且因此例如包含Fc受 体结合作用位点或Fc受体结合能力。"Fc部分"能够诱导ADCC。
[0041] 为了指示重链和轻链、特别是其可变区的氨基酸位置，本文中使用Kabat编号体 系（Kabat, E. A.等人，（1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest,第 5 版，NIH出版编号91-3242)。根据所述体系，重链可变区包含从位置0至位置113的氨基酸 位置，包括位置35A、35B、52A至52C、82A至82C和100A至100K。根据Kabat编号法，重链 可变区的⑶R位于位置31至35B (⑶R1)、50至65(⑶R2)和95至102(⑶R3)处。剩余的氨 基酸位置形成框架区FR1至FR4。轻链可变区包含位置0至109,包括位置27A至27F、95A 至 95F 和 106A。CDR 位于位置 24 至 34 (CDR1)、50 至 56 (CDR2)和 89 至 97 (CDR3)处。取决 于特定抗体基因的初始形成，全部这些位置并非一定存在于给定的重链可变区或轻链可变 区中。在本文中提到重链或轻链可变区中的氨基酸位置情况下，除非另外说明，否则它指根 据Kabat编号法的位置。
[0042] 根据本发明，术语"嵌合抗体"特别指一种抗体，其中恒定区从人抗体或人抗体共 有序列衍生，并且其中至少一个可变区和优选地两个可变区均衍生自非人类抗体，例如衍 生自啮齿类抗体如小鼠抗体。
[0043] 根据本发明，术语"人源化抗体"特别指一种抗体，其中至少一个CDR衍生自非人 类抗体，并且其中该恒定区和可变区的至少一个框架区从人抗体或人抗体共有序列衍生。 优选地，重链可变区的全部CDR或更优选地，重链可变区和轻链可变区的全部⑶R均从非 人类抗体衍生。另外，优选地，重链可变区的全部框架区或更优选地，重链可变区和轻链可 变区的全部框架区均从人抗体或人抗体共有序列衍生。CDR优选地从相同的非人类抗体衍 生。一个可变区的前3个或全部框架区优选地衍生自相同的人抗体或人抗体共有序列，然 而，重链可变区的框架区不必衍生自与轻链可变区的框架区相同的人抗体或人抗体共有序 列。在特别优选的实施方案中，人源化抗体能够与从中衍生一个或多个CDR的非人类抗体 相同的抗原、尤其相同的表位结合。优选地，从非人类抗体衍生的人源化抗体的CDR与人类 抗体的CDR相同。另外，从人抗体或人抗体共有序列衍生的人源化抗体的框架区可以与人 抗体或人抗体共有序列的框架区相同。在另一个实施方案中，人源化抗体的框架区与从中 衍生它们的人抗体或人抗体共有序列的框架区相比，可以具有一个或多个氨基酸置换。置 换的氨基酸残基优选地由从中衍生一个或多个CDR的非人类抗体的相应氨基酸残基（尤其 根据Kabat编号法在相同位置的那些相应氨基酸残基）替换。特别地，人源化抗体的可变 区（重链可变区和/或轻链可变区）的框架区优选地包含不多于30个氨基酸置换，优选地 不多于25个、不多于20个、不多于15个、不多于12个、不多于10个或不多于8个氨基酸 置换。在优选的实施方案中，人源化抗体的重链可变区的全部框架区总体上与从中衍生它 们的人抗体或人抗体共有序列的重链可变区的框架区共有至少70%、优选地至少75%、至 少80%、至少85%或至少90%同源性或同一'丨生。另外，人源化抗体的轻链可变区的全部框 架区总体上优选地与从中衍生它们的人抗体或人抗体共有序列的轻链可变区的框架区共 有至少70 %、优选地至少75 %、至少80 %、至少85 %或至少90 %同源性或同一性。人源化 抗体的恒定区可以衍生自任何人抗体或人抗体共有序列。特别地，重链恒定区可以具有任 何类型，如Y-、S-、a-、y-或e型重链。人源化抗体因此可以具有任何同种型，如IgA、 1 80、18￡、186或1811，包括任何亚类如1 861、1862、1863、1864、1841或1 842。优选地，人源 化抗体是IgGl抗体或IgG2抗体，更优选地IgGl抗体。另外，轻链恒定区也可以具有任何 类型，如k形或A型轻链。优选地，人源化抗体的轻链是K-链。优选使用人源化抗HER2 抗体作为岩藻糖减少的抗HER2抗体。
[0044] 如本文所用，术语"人抗体"意在包括具有其中框架和CDR区均从人源序列衍生的 可变区的抗体。另外，如果该抗体含有恒定区，则恒定区也衍生自这类人序列，例如，人种系 序列、或者突变形式的人种系序列或含有从人框架序列分析导出的共有框架序列的抗体， 例如，如Knappik等人，（2000. J Mol Biol 296,57-86)中所述。本发明的人抗体可以包括 不由人序列编码的氨基酸残基（例如，通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞 突变引入的突变）。然而，如本文所用，术语"人抗体"不意在包括其中已经将从另一个哺乳 动物物种（如小鼠）的种系衍生的CDR序列移植到人框架序列上的抗体。特别地，人抗体 可以是展示单一结合特异性的人单克隆抗体，其具有其中框架区和CDR区均从人序列衍生 的可变区。优选地，它是重组的并是通过重组手段制备、表达、产生或分离。这类重组人抗 体具有其中框架区和CDR区从人种系免疫球蛋白序列衍生的可变区。然而，在某些实施方 案中，此类重组人抗体可以经历体外诱变并且因此重组抗体的V H和 '区的氨基酸序列是这 些序列，其中尽管衍生自人种系VH和 '序列并且与之相关，所述序列可能在体内人抗体种 系库内部不天然存在。
[0045] 另外，本发明的抗体可以已经经历框架或Fc工程化。这类工程化抗体包括其中已 经对VH和/或' 内部的框架残基修饰例如以改善抗体特性的那些。一般，进行这种框架修 饰以降低抗体的免疫原性。例如，一种方案是将一个或多个框架残基"回复突变"成相应的 种系序列。更具体地，已经历过体细胞突变的抗体可以含有与衍生该抗体的种系序列不同 的框架残基。可以通过将抗体框架序列与衍生该抗体的种系序列比较而鉴定这类残基。为 了使框架区序列恢复其种系构型，可以例如通过位点定向诱变或PCR介导的诱变，将体细 胞突变"回复突变"成种系序列。也可以根据本发明使用这类"回复突变的"抗体。除了在 框架区或CDR区内部作出修饰之外或作为替代，本发明的抗体还可以经工程化以在Fc区内 部包含修饰，一般旨在改变抗体的一种或多种功能特征，如血清半寿期、补体固定、Fc受体 结合和/或抗原依赖性细胞的细胞毒性。例如，可以通过以下方式改变Fc区：将至少一个 氨基酸残基替换为一个不同氨基酸残基以改变抗体的效应子功能。例如，可以将一个或多 个氨基酸替换为不同的氨基酸残基，从而抗体具有改变的效应子配体亲和力，但是保留亲 本抗体的抗原结合能力。改变亲和力的效应子配体可以是例如Fc受体或补体的C1组分。 在一个实施方案中，修饰所述抗体的Fc区以增加该抗体介导依赖抗体的细胞毒性（ADCC) 的能力和/或以通过修饰一个或多个氨基酸而减少抗体对Fcy受体的亲和力。这种方法 例如在 W0 00/42072 中进一步描述。另外，人 IgGl 上 FcyRI、FcyRII、FcyRIII和 FcRn 的结合位点已经定位，并且已经描述了具有改进的结合作用的变体（见Shields，R.L.等 人，2001J. Biol. Chen. 276:6591-6604)。
[0046] 如果靶氨基酸序列在其整个长度范围内与参考氨基酸序列的相应部分共有至少 75 %、更优选地至少80 %、至少85 %、至少90 %、至少93 %、至少95 %或至少97 %的同源性 或同一性，则靶氨基酸序列"衍生自"或"对应"于参考氨基酸序列。例如，如果人源化抗体的 框架区衍生自或对应于特定人抗体的可变区，则人源化抗体的框架区的氨基酸在其整个长 度范围内与人抗体的相应框架区共有至少75 %、更优选地至少80 %、至少85 %、至少90 %、 至少93%、至少95%或至少97%的同源性或同一性。"相应部分"或"相应框架区"意指例 如靶抗体的重链可变区（FRH1)的框架区1对应于参考抗体的重链可变区的框架区1。例如 对于FRH2、FRH3、FRH4、FRL1、FRL2、FRL3和FRL4,也是如此。在具体的实施方案中，"衍生 自"或"对应"于参考氨基酸序列的靶氨基酸序列与参考氨基酸序列的相应部分100%相同 或尤其在其整个长度范围内100 %相同根据本发明优选地在参考序列的整个长度范围内或 在参考序列的相应部分的整个长度范围内确定氨基酸序列或核苷酸序列的"同源性"或"同 一性"，其中所述整个长度对应于确定同源性或同一性的序列。
[0047] "特异性结合"优选地意指与结合于另一种靶相比，某药剂如抗体更强烈地结合于 对其特异的靶如表位。如果某药剂与第一靶以比第二靶的解离常数低的解离常数（Kd)结 合，则与第二靶相比，它更强烈地与第一靶结合。优选地，与该药剂特异性结合的靶的解离 常数比与该药剂不特异性结合的靶的解离常数低100倍、200倍、500倍或超过1000倍。 [0048] 如本文所用的术语"曲妥珠单抗"特别指抗体曲妥珠单抗，其具有如药物 赫赛幻'⑧（Roche)中所用的曲妥珠单抗抗体的氨基酸序列。只要上下文不另外指出，则 抗体曲妥珠单抗还在其Fc部分中具有与如药物赫赛汀（Roche)中所用的曲妥珠单抗抗体 相同或相似的高岩藻糖糖基化模式，其中岩藻糖化是至少60%、尤其至少70%。指出不同 糖基化模式的上下文例如是提及"Fuc-曲妥珠单抗"。术语Fuc-曲妥珠单抗特别指结合 与曲妥珠单抗相同的表位并且具有下述氨基酸序列的抗体，其中所述氨基酸序列与如药物 赫赛幻~? (Roche)中所用的曲妥珠单抗抗体的那些氨基酸序列至少85%、优选地至少 90%、更优选地至少95%相同，然而其中与药物赫赛幻*?中所用的曲妥珠单抗抗体相比， Fuc-曲妥珠单抗在其Fc部分中具有更低量的岩藻糖，并且尤其在Fc部分中具有50%或更 少、30 %或更少、优选地20 %或更少、更优选地15 %或更少和最优选的10 %至0 %的岩藻糖 化。
[0049] 本发明的术语"HER2"或"HER2/neu"特别指人表皮生长因子受体2,也称作ErbB-2 或CD340。HER2是包含胞外配体结合结构域、跨膜结构域和胞内激酶结构域的受体酪氨酸 激酶。一旦结合其配体，则HER2与其他ErbB受体形成同型二聚体或异二聚体并且其激酶 功能激活，导致胞内结构域的几个酪氨酸自我磷酸化。抗HER2抗体是能够特异性结合HER2 的抗体。另外，抗J1ER2抗体通常能够抑制HER2阳性人癌细胞增殖。
[0050] 如本文所用，术语"抗体"、尤其"抗HER2抗体"，特别指一群抗体或一种包含抗体 的组合物,尤其适于药物施用的一群抗J1ER2抗体或一种包含抗HER2抗体的组合物。该组抗 体或包含抗体的该组合物中的全部或基本上全部抗体均特别具有相同的氨基酸序列。抗体 如an抗HER2抗体的糖基化特征特别指该群体或组合物中抗体的平均糖基化。例如，根据 本发明，在Fc部分并且因此抗体CH2结构域中的岩藻糖（百分）量特别指抗体群或抗体组 合物中与包含岩藻糖残基的抗体的CH2结构域中相应糖基化位点连接的全部糖链的百分 t匕。所述糖链包括与下述糖基化位点连接的糖链，所述糖基化位点对应于根据IgG型抗体 的重链的1^^ &丨编号的氨基酸位置297(例如3￡〇10勵:9中的氨基酸位置301)。4811297 处的N联糖基化在哺乳动物IgG中以及在其他抗体同种型的同源区中保守。优选地，仅考 虑通过a 1，6-键与GlcNAc残基在糖链还原性末端结合的岩藻糖残基。如果提到一个具体 抗体种类（例如抗HER2抗体）的CH2结构域中岩藻糖的量，则仅考虑与抗体群或组合物中 所述具体抗体种类的抗体分子的CH2结构域并且因此其Fc部分连接的糖链用于确定岩藻 糖的百分量。不考虑在抗体的Fab部分中的糖链，如果存在的话。同样，抗体的对分N-乙 酰葡糖胺（bisGlcNAc)的（百分）量特别指抗体群中与包含对分GlcNAc残基的抗体Fc部 分连接的全部糖链的百分比。对分GlcNAc指与复杂型N-聚糖中的中心甘露糖残基连接的 GlcNAc残基。另外，组合物中抗体的半乳糖的（百分比）量特别指抗体群中与包含至少一 个半乳糖残基的抗体Fc部分连接的全部糖链的百分比。
[0051] 根据本发明，术语"糖基化位点"特别指可以由天然糖基化酶、尤其糖基转移酶、优 选地天然存在的哺乳动物或人糖基转移酶特异性识别并糖基化的氨基酸序列。特别地，术 语"糖基化位点"指N-糖基化位点，包含与或将与糖类的天冬酰胺残基。特别地，糖基化位 点是具有氨基酸序列Asn-Xaa-Ser/Thr/Cys的N-糖基化位点，其中Xaa是任何氨基酸残 基。优选地，Xaa不是Pro。
[0052] 术语"缀合物"特别地意指如此连接在一起从而在缀合物中保留来自每种化合物 的至少某些特性的两种或更多种化合物。连接可以通过共价键或非共价键实现。优选地， 缀合物的化合物经共价键连接。缀合物的不同化合物可以通过这些化合物的原子之间一个 或多个共价键彼此直接结合。可选地，所述化合物可以经接头分子彼此结合，其中接头与化 合物的原子共价连接。如果缀合物由多于两个化合物组成，则这些化合物可以例如以一种 链构象连接，一个化合物与下一个化合物连接，或几个化合物各自可以与一个中央化合物 连接。
[0053] 术语"患者"特别指人。
[0054] 可以用本文所述的岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗的术语本发明的"HER2阳性癌 症"特别指表达ffiR2/neu的原发性癌症或肿瘤。HER2阳性癌症包括但不限于乳腺癌、胃 癌、癌、结肠癌、移行细胞癌、膀胱癌、尿路上皮肿瘤、子宫癌、晚期食管腺癌、胃腺癌或食管 胃结合部腺癌、卵巢癌、肺癌、肺腺癌、支气管癌、子宫内膜癌、肾癌、胰腺癌、甲状腺癌、结直 肠癌、前列腺癌、脑癌、宫颈癌、肠癌、肝癌、唾液腺癌和恶性横纹肌样瘤和尤其前述癌的转 移形式。优选地，用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体待治疗的HER2阳性癌症选自乳腺癌、结肠癌 和膀胱癌、尤其转移性乳腺癌及转移性结肠癌。最优选地，HER2阳性癌症是乳腺癌，尤其转 移性乳腺癌。优选地，J1ER2阳性癌症过表达HER2和/或显示HER2基因扩增。因此，HER2 阳性癌症尤其是包含过表达HER2的肿瘤细胞和/或转移性细胞的癌症。优选地至少5%、 更优选地至少10%、至少25%或至少50%的癌细胞过表达HER2和/或显示HER2基因扩 增。HER2阳性癌症特别指如通过免疫组织化学所确定，具有至少程度1+(HER2 1+)、优选地 至少程度2+(HER2 2+)、更优选地程度3+(HER2 3+)的HER2过表达的癌。在某些实施方案 中，HER2阳性癌症是具有如通过免疫组织化学所确定的程度2+或更低、优选地程度1+或 更低的J1ER2表达的癌。如通过实施例显示，本文所述的岩藻糖减少的抗HER2抗体有效治 疗仅显示中度至低度J1ER2过表达的相应癌症。在这个方面，免疫组织化学指固定的肿瘤样 品的免疫组织化学染色和对染色的分析。J1ER2表达水平0(HER2 0)指在少于10%的肿瘤 细胞中无染色或胞膜染色，尤其少于20,000HER2/细胞。HER2 1+指在多于10%的肿瘤细 胞中胞膜微弱染色，其中细胞膜仅部分着染，尤其约100, 000JER2/细胞。HER2 2+指在多于 10%的肿瘤细胞中整个胞膜微弱至中度着染，尤其约500, 000HER2/细胞。HER2 3+指在多 于10%的肿瘤细胞中完整胞膜强烈着染，尤其约2, 000, 000HER2/细胞。优选地使用包含 癌细胞的组织学样品、尤其福尔马林固定石蜡包埋的癌组织样品，确定J1ER2表达。用于确 定HER2过表达的免疫组织化学测定法优选地包括（i)使包含癌细胞的样品与针对HER2的 第一抗体接触，随后（ii)使样品与针对第一抗体并与可视化剂（如催化具有可视终产物的 反应的酶，例如辣根过氧化物酶）偶联的第二抗体接触。合适的J1ER2免疫组织化学试剂盒 是 HercepTest(Dako Denmark A/S)和 Pathway HER2(Ventana Medical Systems, Inc. ) 〇 HER2阳性肿瘤性疾病还包括如通过荧光原位杂交（FISH)或生色原原位杂交（CISH)确定， 对HER2基因扩增呈阳性的癌。根据FISH测定法如果肿瘤细胞中HER2基因的拷贝数是染色 体17的拷贝数的至少2倍或如果肿瘤细胞包含至少4个拷贝的HER2基因，则癌症对HER2 基因重复呈阳性。根据CISH测定法如果至少50%的肿瘤细胞中存在每个细胞核至少5个 拷贝的J1ER2基因，则癌对HER2基因重复呈阳性。
[0055] "转移"或"转移灶"是意指癌细胞从其原始位点扩散至身体的另一个部分。如上 文在发明背景所述，转移的形成是一个非常复杂的过程并且正常情况下涉及癌细胞从原发 肿瘤脱离，进入身体循环并沉降下来以在身体中其他地方的正常组织内部生长。关于细节， 参考在此还适用的相应公开。如本文所述，根据优选实施方案，用岩藻糖减少的抗HER2抗 体治疗的J1ER2阳性癌症是转移癌，本文还称作转移性癌症。转移灶可以是远端转移灶。转 移灶尤其是如上文对HER2阳性癌症所述那样的HER2阳性；参考在此也适用的以上公开。 可以用如本文所述的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体成功治疗的转移灶的具体类型是皮肤转移 灶、淋巴结转移灶和内脏转移灶。"皮肤转移"或"皮肤转移灶"，这些术语作为同义词使用， 指源自内部癌的癌细胞在皮肤中生长。皮肤转移灶的形成和特征在发明背景中详述，参考 在此也适用的相应发明公开。特别地，皮肤转移灶可以是溃疡性皮肤转移灶。"内脏转移" 或"内脏转移灶"特别指在内脏（身体的内部器官）、尤其那些在胸腔内部的器官如心脏或 肺或腹内的器官如肝、胰或肠中的转移灶。特别地，术语"内脏转移"指肺和/或肝中的转 移灶。
[0056] 根据本发明，术语"失败的治疗"或"治疗失败"或相关术语特别地指导致病情进 展的癌症治疗。病情进展特别指（i)现存肿瘤的进一步生长，尤其生长至少25% ;(ii) - 个或多个现存类型新转移灶的生长或形成；（iii) 一个或多个不同类型的其他转移灶的形 成；（iii)其他损害的形成和/或（iv) -个或多个损害的尺寸增加。肿瘤的进一步生长特 别指肿瘤体积增加至少25%。损害的尺寸增加特别指损害尺寸增加至少25%。
[0057] 根据本发明，术语"成功的治疗"或"治疗成功"或相关术语特别指导致病情稳定、 病情部分缓解和/或完全缓解的J1ER2阳性癌症或转移灶治疗。成功的治疗优选地包括以 下一种或多种情况：（i)抑制肿瘤生长；（ii)缩减肿瘤尺寸；（iii)防止相同类型和/或不 同类型的其他转移灶；（iv)减少转移灶的数目；(v)防止其他损害；(vi)减少损害数目； (vii)缩减一个或多个损害的尺寸；和/或（viii)减少疼痛。缩减肿瘤尺寸特别指肿瘤体 积减少至少25%，包括其中肿瘤体积减少25%至50%的缓解、其中肿瘤体积减少超过50% 的部分缓解和其中肿瘤体积减少100%的完全缓解。缩减损害的尺寸指损害尺寸减少至少 25%，包括其中损害尺寸缩减25%至50%的缩减、其中损害尺寸缩减超过50%的部分缩减 和其中损害尺寸缩减100%的完全缩减。损害特别指由原发肿瘤和/或由一个或多个转移 灶引起的损害。损害的具体例子是皮肤溃疡、尤其皮肤转移引起的皮肤溃疡。成功的治疗 尤其还包括导致无进展存活期增加和/或寿命增加、尤其至少1个月、至少2个月、优选地 至少3个月、至少4个月、至少6个月、至少9个月或至少1年、甚至更优选地至少1. 5年、 至少2年、至少3年、至少4年或至少5年无进展存活期或剩余寿命的治疗。"稳定的疾病" 和因此疾病稳定化尤其包括（i)肿瘤和/或转移灶体积变动小于25%和（ii)转移灶数目 无变化。优选地确定成功的治疗持续如下观察期：至少1个月、更优选地至少2个月、至少 3个月、至少4个月、至少6个月、至少9个月或至少1年、甚至更优选地至少1. 5年、至少2 年、至少3年、至少4年或至少5年。
[0058] 基于执业者的医学判断确立治疗失败以及成功治疗，所述医学判断由来自通常本 领域已知用于评估患者治疗的临床数据和实验室数据的结果确认。这类数据可以例如从临 床检查、细胞学技术和组织学技术，内窥镜和腹腔镜检查术、超声法、CT、PET和MRI扫描、胸 部X光片和乳房X线照片术获得。另外，RECIST标准可以用来确定肿瘤应答。
[0059] 根据本发明，术语"手术"特别指手术摘除（切除或切除术）包含全部或部分肿瘤、 尤其原发肿瘤如乳腺肿瘤和/或一个或多个转移灶的组织。
[0060] "辅助疗法"特别指术后治疗癌症。
[0061] "新辅助疗法"特别指术前治疗癌症。
[0062] "姑息疗法"特别指专门给予以解决病情控制而不期明显减少癌症的癌症疗法。姑 息护理旨在改善与不可治愈性癌症相关的症状。姑息护理的主要目的是改善患者剩余生命 的品质。疼痛是与癌症相关的常见症状之一。大约75%的末期癌症患者具有疼痛。疼痛 是一种主观症状并且因此它不能利用技术手段度量。大部分癌症患者体验到因压迫邻近神 经、骨或软组织的肿瘤块所致或因直接神经损伤（神经性疼痛）所致的疼痛。疼痛可以因 肋部、肌肉和内部结构如腹部（与阻塞相关的绞痛型疼痛）中受累的神经而出现。许多患 者还体验到直接因随访检验、治疗（手术、放疗和化疗）和诊断性手术（即，活组织检查） 所致的多种类型疼痛。治疗上有用的姑息疗法能够减少疼痛。
[0063] 术语"放疗法"，也称作放射疗法，特别意指电离辐射控制或杀伤恶性细胞的医学 用途。放疗法可以与手术联合使用，作为辅助疗法和/或新辅助疗法使用或在不手术的情 况下使用，例如以防止术后肿瘤复发或移除原发肿瘤或转移灶。
[0064] 术语"药物组合物"和相似术语特别地指适于向人类施用的组合物，即，含有药学 上可接受的组分的组合物。优选地，药物组合物包含活性化合物或其盐或前药，连同载体、 稀释剂或药物赋形剂如缓冲液、防腐剂和张力调节剂。
[0065] 术语"抗体组合物"和"包含抗体的组合物"在本文中互换地使用。抗体组合物可 以是流体或固体组合物，并且还包括冻干或复水的抗体组合物。优选地使用流体组合物，更 优选地含水组合物。它优选地还包含溶剂如水、用于调节并维持pH值的缓冲剂，和任选地 用于稳定抗体或防止抗体降解的其他剂。抗体组合物优选地包含合理量的抗体，尤其至少 lfmol、优选地至少lpmol、至少lnmol或至少1 y mol抗体。包含特定抗体的组合物可以另 外包含其他抗体。但是，优选地，包含特定抗体的组合物不包含除特定抗体之外的其他抗 体。特别地，抗体组合物中至少75%、优选地至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、 至少97%、至少98%或至少99%、最优选地约100%的抗体针对或结合至相同的抗原或表 位。因此，如本文所用的抗体优选地指一种抗体，其基本上不含具有不同抗原特异性的其他 抗体。抗体组合物优选地是药物组合物。
[0066] 发明详述
[0067] 采用本发明教导内容所实现的显著治疗结果和提供的新治疗选项在提及它们的 发明概述中简要描述。基于实施例中所示的数据，本发明为治疗J1ER2阳性肿瘤性疾病、尤 其HER2阳性癌症提供不同的新治疗选项，所述的治疗新选项也可以组合。
[0068] 在第一方面，本发明提供在CH2结构域中具有50%或更少、40%或更少、30%或更 少、20%或更少、优选地15%或更少或10%至0%岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减少的 抗HER2抗体），用于治疗患有转移性HER2阳性肿瘤性疾病、尤其转移性癌症的患者。因此， 本发明提供在CH2结构域中具有50 %、优选地40 %或更少、30 %或更少、20 %或更少、优选 地15%或更少和最优选地10%至0%岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗 体），用于治疗患有J1ER2阳性癌症的人类患者，其中癌是转移性癌症。
[0069] 另外，基于实施例中所示的数据，本发明在第二方面提供在CH2结构域中具有 50%或更少、40%或更少、30%或更少、20%或更少、优选地15%或更少或者10%至0%岩 藻糖量的抗J1ER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）用于治疗患有HER2阳性肿瘤性疾病、 尤其癌症的患者，其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗 过：
[0070] a)至少一种化疗药；
[0071] b)至少一种在CH2结构域中具有60%、尤其70%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体 (高岩藻糖抗J1ER2抗体），或至少一种未糖基化的抗HER2抗体；
[0072] c)任选地放疗法；和
[0073] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0074] 其中先期治疗a)、b)、c)和d)以任何顺序依次或同时进行。所述新治疗性教导的 优点在上文描述并且在下文描述。
[0075] 在第三方面，基于实施例中所示的数据，本发明提供在CH2结构域中具有50%或 更少、40%或更少、30%或更少、20%或更少、优选地15%或更少、10%至0%或10%至3% 岩藻糖量的抗J1ER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）用于治疗患有HER2阳性肿瘤性疾 病、尤其转移性癌症的患者，其中J1ER2阳性肿瘤性疾病具有程度2+或更低、优选地程度1+ 的HER2过表达，如通过免疫组织化学（IHC)所确定。特别地，本发明提供在CH2结构域中 具有50%或更少、优选地40%或更少、30%或更少、20%或更少、优选地15%或更少和最优 选地10%至0%或10%至3%岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）用于 治疗患有J1ER2阳性癌症的人类患者，其中所述癌是具有程度2+或更低、优选地程度1+的 HER2过表达的转移性癌症，如通过免疫组织化学（IHC)所确定。
[0076] 另外，公开了这样的疗法，其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，所述患 者已经用以下治疗
[0077] a)至少一种化疗药和/或
[0078] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多、优选地70%或更多岩藻糖量的抗 HER2抗体（高岩藻糖抗HER2抗体），或至少一种未糖基化的抗HER2抗体；
[0079] c)任选地放疗法；和
[0080] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0081] 其中所述先期治疗以任何顺序依次或同时进行。将各种疗法的优选实施方案随 后描述并且在中提到它的权利要求中描述。如实施例中所示，本文所述的岩藻糖减少的抗 HER2抗体展示出高治疗功效，尤其针对许多转移灶，并且另外，允许成功治疗先期治疗患者 和另外深度先期治疗的患者，其中尽管接受先期抗癌症治疗，但癌进展。另外，本发明的不 同方面可以组合。例如，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体显示改善的抗转移活性并且可以有利地 用于治疗先前抗体治疗和/或化疗治疗无效的转移灶。特别地，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体 可以用于治疗皮肤转移灶如溃疡性皮肤转移灶和内脏转移灶如肺转移灶和/或肝转移灶 以及淋巴结转移灶。另外，随显示如通过IHC所确定的低HER2过表达（1+和2+)的HER2 阳性癌症见到治疗效果，并且因此，岩藻糖减少的抗HER2抗体可以用于治疗罹患仅显示1+ 或2+的HER2过表达的HER2阳性癌症的患者。另外，在单一疗法环境下并且还以低剂量见 到治疗功效。因此，本发明提供了还如上文进一步详细描述的重要的新治疗选项。
[0082] 本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体
[0083] 本文所述的岩澡糖减少的抗HER2抗体具有出乎意料_的治疗功效并且允许治疗 不能或不可用常规疗法治疗的患者和患者亚组。可以用本发明的岩藻糖减少的抗J1ER2抗 体成功治疗甚至耐受已建立的抗癌药如高岩藻糖抗J1ER2抗体和/或化疗药治疗的转移灶 和肿瘤。另外，本文所述的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体有效治疗仅显示低或中度HER2表达 (例如程度1+或2+，如通过IHC所确定）的HER2阳性癌症。甚至岩藻糖减少的抗HER2抗 体作为单一疗法施用和甚至以低剂量施用仍见到治疗效果。
[0084] 本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体一个重要特征是抗体的Fc部分中改善的糖基 化模式。岩藻糖减少的抗ffiR2抗体优选地是在重链第二恒定域（CH2)中具有一个糖基化 位点的IgG抗体、更优选IgGl抗体。这个糖基化位点尤其在根据Kabat编号法与重链的第 297氨基酸位置相对应的氨基酸位置处并且具有氨基酸序列基序Asn Xaa Ser/Thr，其中 Xaa可以是除脯氨酸之外的任何氨基酸。Asn297处的N联糖基化在哺乳动物IgG中以及在 其他抗体同种型的同源区中保守。归因于可以在可变区中存在的任选额外氨基酸，这个保 守的糖基化位点在SEQ ID N0:9的第301氨基酸位置处。特别地，在至少80%、优选地至少 85 %、至少90 %或至少95 %、更优选地至少98 %在组合物中所包含的岩藻糖减少的抗HER2 抗体中，至少一个CH2结构域，优选地两个CH2结构域的糖基化位点携带糖结构。在Fc区 内的这个糖基化位点处确定如本文所述的岩藻糖化的量。在某些实施方案中，岩藻糖减少 的抗HER2抗体在可变域、CH1域和CL域的任一者中不包含其他糖基化位点和/或不携带 糖结构。
[0085] 岩藻糖减少的抗HER2抗体在CH2结构域中糖基化位点处具有50%或更少、40%或 更少、30 %或更少或甚至20 %或更少、更优选地15 %或更少、最优选地10 %或更少的岩藻 糖量或是非岩藻糖化的并且因此不包含任何岩藻糖。在具体的实施方案中，岩藻糖减少的 抗HER2抗体包含至少2%、至少3%和优选地至少5%的至少残留量的岩藻糖。术语"岩藻 糖量"特别指在包含岩藻糖减少的抗J1ER2抗体的组合物中，与岩藻糖减少的抗HER2抗体连 接的全部糖链中携带一个岩藻糖单位的糖链的相对量。
[0086] 可以通过多种手段获得如本文所用的具有减少量的岩藻糖化的抗HER2抗体，包 括不携带任何岩藻糖的抗体。例如，可以在具有改变的糖基化装置的宿主细胞中表达抗 HER2抗体。已经在本领域描述了具有改变的糖基化装置的细胞并且可以使用它们作为宿主 细胞以产生如本文所述的在其Fc区中岩藻糖化减少的重组抗HER2抗体。例如，Hang等人的 EP 1，176, 195描述了编码岩藻糖基转移酶的FUT8基因在功能上遭破坏的细胞系，从而在 这种细胞系中表达的抗体显示过低岩藻糖化。因此，在一个实施方案中，通过在显示过低岩 藻糖化模式的细胞系（例如，存在编码岩藻糖基转移酶的FUT8基因表达缺陷的哺乳动物细 胞系）中重组表达，产生在本发明组合物中所包含的抗体。W0 03/035835描述了一种变异 CH0细胞系（Lecl3细胞），所述细胞系具有降低的将岩藻糖连接至Asn(297)联糖的能力， 这也导致在这种宿主细胞中表达的抗体过低岩藻糖化（还见Shields, R.L.等人，2002J. Biol. Chem. 277:26733-26740)。在本发明组合物中所包含的抗体可以在酵母或丝状真菌中 产生，其中所述酵母或丝状真菌针对哺乳动物样糖基化模式进行工程化并能够产生缺少岩 藻糖作为糖基化模式的抗体（参见例如EP 1297172 B1)。
[0087] 优选地，在具有减少的岩藻糖化能力或甚至无岩藻糖化能力的人细胞系中通过重 组表达获得岩藻糖减少的抗J1ER2抗体。可以例如通过减少岩藻糖化必需的酶（例如FUT8 或GMD)的表达或通过消除相应基因功能（例如通过基因敲除），实现相应的岩藻糖化能力 减少或岩藻糖化能力不存在。优选地在人细胞系、优选地人血细胞系、尤其人髓样白血病细 胞系中重组产生岩藻糖减少的抗HER2抗体。用于产生岩藻糖减少的抗HER2抗体的细胞系 优选地具有减少的岩藻糖化活性或不存在岩藻糖化活性，和/或在导致抗体的岩藻糖化减 少或甚至不存在的条件下产生岩藻糖减少的抗J1ER2抗体。如本文所述，可以通过操纵岩 藻糖化必需的酶（例如FUT8或GMD)的表达或活性，实现岩藻糖化活性减少或不存。在W0 2008/028686 A2中描述了可以用于产生岩藻糖减少的抗HER2抗体、尤其Fuc-曲妥珠单抗 的优选人细胞系以及合适的产生方法，所述专利申请通过引用的方式并入本文。
[0088] 另外，岩藻糖减少的抗HER2抗体的岩藻糖化水平可以在它们由细胞系产生后减 少,例如通过用岩藻糖苷酶体外处理。
[0089] 如本文所述，岩藻糖减少的抗HER2抗体优选地具有一种糖基化谱并且通过在人 细胞系、优选地人髓样白血病细胞系中的表达获得。人糖基化谱优选地特征在于：至少 70%、优选地至少80%、至少85%或更优选地至少90%与岩藻糖减少的抗HER2抗体的Fc 部分连接的糖链是复杂型聚糖结构，优选地是双天线状复杂型聚糖结构。具有人糖基化谱 的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体特别不包含可检出量的N-羟乙酰神经氨酸（NeuGc)和/或 Gal a 1，3-Gal结构。在非人类细胞系如啮齿类细胞系中产生的抗体中存在相应的糖基化结 构。另外，它优选地包含可检出量的a 1，6-偶联的N-乙酰基神经氨酸（NeuAc)。
[0090] 在优选的实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗体包含下述量的对分N-乙酰葡糖 胺（bisGlcNAc)，所述量高于高岩藻糖抗HER2抗体的对分GlcNAc的量。它可以在与CH2结 构域连接的糖链中包含至少2%、优选地至少5%、至少8%或更优选地至少10%量的对分 G1 cNAc。对分G1 cNAc的量优选地在5 %至50 %、优选地7 %至40 %、更优选地8 %至25 %和 更优选地10%至25%范围内。术语"对分GlcNAc量"特别指在包含岩藻糖减少的抗HER2抗 体的组合物中，与岩藻糖减少的抗HER2抗体连接的全部糖链中携带一个对分N-乙酰葡糖 胺单位的糖链的相对量。发现在Fc糖基化时减少核心岩藻糖的量并同时增加对分GlcNAc 的量提供了显示溶瘤作用强烈增加、强烈抗转移性功效并且进一步允许高效治疗广谱患者 的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体。
[0091] 另外，岩藻糖减少的抗HER2抗体优选地包含至少50%、优选地至少55 %、至少 60 %或至少65 %的半乳糖量。半乳糖的量优选地在50 %至95 %、更优选地55 %至90 %、最 优选地60 %至80%范围内。术语"半乳糖量"特别指在包含岩藻糖减少的抗HER2抗体的 组合物中，与岩藻糖减少的抗ffiR2抗体连接的全部糖链中半乳糖化糖链的相对量，所述半 乳糖化糖链是包含至少一个半乳糖单位的糖链。在某些实施方案中，岩藻糖减少的抗ffiR2 抗体包含至少10%、优选地至少15%、更优选地至少18%或至少20%相对量的携带两个半 乳糖单位的糖链。携带两个半乳糖单位的糖链的相对量尤其在10%至50%、优选地15%至 40%、更优选地18%至30%范围内。
[0092] 对分GlcNAc的量和/或半乳糖的量优选地分别仅指在与岩藻糖减少的抗HER2抗 体的CH2结构域连接并且因此在抗体Fc部分内部的糖链中对分GlcNAc的量和半乳糖的 量。如上文所述的包含对分GlcNAc和半乳糖的糖基化还是人糖基化模式的特征并且可以 通过在如上文所述的人细胞系中表达抗HER2抗体来获得。
[0093] 岩藻糖减少的抗HER2抗体优选地是IgG抗体，更优选地是IgGl抗体。它具有特 异性结合其祀表位的能力和与Fey受体结合、尤其与Fey受体Ilia结合的能力。岩藻糖 减少的抗J1ER2抗体能够诱导ingan抗体依赖的细胞毒性（ADCC)反应。岩藻糖减少的抗 J1ER2抗体能够比高岩藻糖抗HER2抗体诱导更强烈的ADCC。特别地，岩藻糖减少的抗HER2 抗体在诱导ADCC方面比高岩藻糖抗HER2抗体至少2倍、至少3倍、至少5倍、至少7倍、 至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍或至少50倍更有力，如体外ADCC测定法中、 尤其下文在如实施例15中所述的ADCC测定法中所确定。如其中所示，当Fuc -曲妥珠单 抗（本发明）与Fuc+抗体（现有技术）比较时，观察到高达10-140倍ADCC抗肿瘤活性 改善。诱导ADCC方面效力更高优选地指与高岩藻糖抗HER2抗体相比，诱导与高岩藻糖抗 HER2抗体的95%最大溶解作用相同水平的ADCC (如相同比率的溶解靶细胞）、优选相同的 特异性溶解所需的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体的浓度低X倍。例如，如果岩藻糖减少的抗 J1ER2抗体按照比高岩藻糖抗HER2抗体低5倍的浓度诱导相同水平的ADCC，则岩藻糖减少 的抗HER2抗体诱导ADCC方面比高岩藻糖抗HER2抗体更有力5倍。如通过实施例显示，当 使用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体时，与相应的高岩藻糖抗HER2抗体相比，对于相同的ADCC 反应，需要10至140倍较低的抗体浓度。可选地，诱导ADCC方面效力更高可以指岩藻糖减 少的抗HER2抗体按照与高岩藻糖抗HER2抗体相同的浓度、优选地10ng/ml诱导X倍更高 水平的ADCC (如更高比率溶解的靶细胞）。例如，如果岩藻糖减少的抗HER2抗体在相同的 抗体浓度诱导比高岩藻糖抗J1ER2抗体高5倍的ADCC水平，则岩藻糖减少的抗HER2抗体诱 导ADCC方面比高岩藻糖抗HER2抗体更有力5倍。诱导ADCC方面X倍更高效力尤其可以 指用具有FcyRIIIa-158F/F同种异型的供体的效应细胞、或用具有FcyRIIIa-158V/V同 种异型的供体的效应细胞或用具有FcyRIIIa-158F/V同种异型的供体的效应细胞诱导的 ADCC。优选地，将诱导ADCC方面的X倍更高效力作为针对每个不同FcyRIIla同种异型所 诱导的ADCC的平均数测定。如通过实施例显示，本发明的岩藻糖减少的抗体与相应高岩藻 糖抗HER2抗体相比，通常显示更高的ADCC，一种在以低HER2过表达为特征的癌细胞上甚至 更突出的作用。因此，这种抗J1ER2抗体可以在全部ADCC受体同种异型时有效介导ADCC，并 且另外，随HER2表达较低（1+，如通过IHC所确定）的肿瘤见到这种作用。
[0094] 岩藻糖减少的抗HER2抗体包含重链可变区（VH)和CH2结构域，更优选地VH域、 CH1域、CH2和CH3域。另外，岩藻糖减少的抗HER2抗体优选地包含轻链可变区（VL)，优选 地VL结构域和VH结构域。岩藻糖减少的抗HER2抗体可以包含两条重链和两条轻链。它 优选地是重组单克隆抗体如人抗体、人源化抗体或嵌合抗体并且优选地是人源化抗体。
[0095] 岩藻糖减少的抗HER2抗体介导ADCC并且根据优选的实施方案能够与HER2/neu 的胞外部分、尤其与ffiR2/neuIV域特异性结合并具有至少一种、优选地至少两种、更优选 地以下全部活性：（i)它能够阻断配体与HER2结合，（ii)它能够阻断HER2/neu的激活，尤 其阻断HER2/neu的激酶活性和/或（iii)它能够减少细胞表面处HER2/neu的量，尤其通 过诱导HER2/neu内化至细胞中。优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体具有全部前述特征。 优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体与抗体曲妥珠单抗显示交叉特异性并且尤其结合与抗 体曲妥珠单抗相同的表位。优选地，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体在结合作用和Fv介导的抗 肿瘤特性方面与曲妥珠单抗等同，然而，显示增加的ADCC介导的抗肿瘤特性，原因在于改 善的糖基化。在优选的实施方案中，岩藻糖减少的抗ffiR2抗体包含与曲妥珠单抗相同的重 链和优选地还包含与之相同的轻链CDR序列。特别地，岩藻糖减少的抗HER2抗体的重链的 完整氨基酸序列和优选地另外其轻链的完整氨基酸序列与曲妥珠单抗的相应氨基酸序列 至少85%相同、至少90%相同、至少95%相同或至少97%相同。优选地，岩藻糖减少的抗 HER2抗体的氨基酸序列衍生自曲妥珠单抗的相应氨基酸序列。
[0096] 在某些实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗体包含一个重链可变区，所述重链可 变区包含互补决定区（CDR)CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3,其中CDR-H1具有SEQ ID NO: 1的氨 基酸序列和/或⑶R-H2具有SEQ ID N0:2的氨基酸序列和/或⑶R-H3具有SEQ ID N0:3 的氨基酸序列。优选地，岩藻糖减少的抗ffiR2抗体的重链可变区包含全部这三个CDR序列 并且尤其包含SEQ ID NO: 7的氨基酸序列。在优选的实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗 体包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含互补决定区（⑶R)⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3， 其中CDR-L1具有SEQ ID N0:4的氨基酸序列和/或CDR-L2具有SEQ ID N0:5的氨基酸序 列和/或⑶R-L3具有SEQ ID勵:6的氨基酸序列。优选地，岩藻糖减少的抗册1?2抗体的 轻链可变区包含全部这三个⑶R序列并且尤其包含SEQ ID N0:8的氨基酸序列。另外，在 某些实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗体包含重链可变区和/或轻链可变区，其中所述 重链可变区包含与SEQ ID NO: 7的氨基酸序列至少85%相同、至少90%相同或至少95%相 同的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID N0:8的氨基酸序列至少85%相同、至少 90 %相同或至少95 %相同的氨基酸序列。优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体的重链包含 SEQ ID NO:9的氨基酸序列或与其至少85%相同、至少90%相同或至少95%相同的氨基酸 序列。另外，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体的轻链优选地包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列或 与其至少85%相同、至少90%相同或至少95%相同的氨基酸序列。如上文描述，岩藻糖减 少的抗J1ER2抗体优选地在结合作用和Fv介导的抗肿瘤特性方面与曲妥珠单抗等同。
[0097] 在某些优选的实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗体包含一个重链可变区，所述 重链可变区包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列或与其至少80%、优选地至少90%相同的氨基 酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID N0:1的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:2的氨基酸序列 并且⑶R3具有SEQ ID N0:3的氨基酸序列。优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体额外地包 含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID N0:8的氨基酸序列或与其至少80%、优选 地至少90%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID N0:4的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:5的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:6的氨基酸序列。
[0098] 根据一个实施方案，岩藻糖减少的抗HER2抗体介导ADCC并且能够与HER2特异性 结合及阻断HER2/neu的二聚化、尤其HER2/neu与表皮生长因子受体家族其他成员如HER1、 HER3和HER4的异二聚化。优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体与抗体培妥珠单抗显示交叉 特异性并且尤其结合与抗体培妥珠单抗相同的表位。在优选的实施方案中，岩藻糖减少的 抗HER2抗体包含与培妥珠单抗相同的重链和优选地还包含与之相同的轻链CDR序列。特 别地，岩藻糖减少的抗HER2抗体的重链的完整氨基酸序列和优选地另外其轻链的完整氨 基酸序列与培妥珠单抗的相应氨基酸序列至少80%相同、优选地至少90%相同、至少95% 相同或至少97 %相同。优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体的氨基酸序列衍生自培妥珠单抗 的相应氨基酸序列，并且岩藻糖减少的抗J1ER2抗体在结合作用和Fv介导的抗肿瘤特性方 面与培妥珠单抗等同，然而，显示增加的ADCC介导的抗肿瘤特性，原因在于本文所述的改 善糖基化。
[0099] 在一个实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗体是缀合物，所述缀合物包含与其它 药剂如治疗活性物质缀合的抗体。其它药剂优选地可用于治疗和/或监测癌症。例如，其 它药剂可以选自放射性核素、化疗药、抗体，尤其物种和/或特异性与岩藻糖减少的抗ffiR2 抗体不同的那些抗体、酶、相互作用结构域、可检测标记物、毒素、溶细胞组分、免疫调节剂、 免疫效应物、MHC I类或II类抗原、放射性同位素和脂质体。如果含有，其它药剂可以共价 地、尤其通过融合或化学偶联，或非共价地与抗体连接。具体优选的其它药剂是放射性核素 或能够杀伤癌细胞的细胞毒药物，如化疗药，尤其本文其他地方所述的那些。可以作为其它 药剂缀合的化疗药的具体例子包括烷基化剂如顺钼、抗代谢药、植物生物碱和类萜、长春碱 类生物碱、鬼白毒素、紫杉烷如紫杉酚、拓扑异构酶抑制剂如依立替康和拓扑替康或者抗肿 瘤药如多柔比星。岩藻糖减少的抗HER2抗体可以与本文所述的任何化疗药和/或抗体缀 合。根据一个实施方案，岩藻糖减少的抗ffiR2抗体不与作为治疗活性物质的其它药剂缀 合。根据一个实施方案（其还在实施例中使用），岩藻糖减少的抗HER2抗体不与其它药剂 缀合。
[0100] 用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗
[0101] 如实施例中所示的临床数据中展示，本发明的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体尤其显 示高度抗转移活性并且因此允许治疗可以用或不能用相应高岩藻糖抗J1ER2抗体治疗的转 移灶。岩藻糖减少的抗HER2抗体在本文特别定义的患者中显示出乎意料高的治疗功效，甚 至当作为单一治疗药使用时也是如此。除了成功治疗包括转移性癌症在内的癌之外，本发 明的抗J1ER2抗体还允许治疗（如通过IHC所确定）具有程度1+或2+的HER2表达的HER2 阳性癌症和/或治疗如本文所述的先期治疗患者，包括深度先期治疗患者。特别地，在治疗 转移灶、尤其如在治疗溃疡性皮肤转移灶、淋巴结转移灶和内脏转移灶如肺转移灶和肝转 移灶方面见到明显效果。还在深度先期治疗患者中见到这些效果，其中采用抗癌药如化疗 药的先期治疗和/或抗体疗法、尤其采用抗J1ER2抗体的抗体疗法失败。因此，岩藻糖减少 的抗HER2抗体可以作为单一疗法用于治疗，甚至用于深度先期治疗患者中。使用岩藻糖减 少的抗HER2抗体作为单一疗法具有以下优点：可以实现治疗效果，同时可以预期仅少量副 作用。当治疗患有晚期转移癌的患者时，其中尽管先前用多线化疗化疗和/或抗体疗法治 疗但病情进展，这是个优点，原因在于这个患者组经常处于不良健康状况并且因此从进一 步激进疗法排除。
[0102] 但是，本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体也可以用于联合疗法中，其中用一种或 多种抗癌症治疗药如化疗药或其他抗癌抗体额外治疗癌症以进一步改善患者的治疗益处。 由于本发明的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体在低剂量并且尤其在比常规高岩藻糖抗HER2抗体 更低的剂量有效，所以这类联合疗法再次提供新的和有用的治疗选项，尤其对于深度先期 治疗患者而言。在某些实施方案中，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体与一种或多种抗癌药如化疗 药和/或一种或多种与岩藻糖减少的抗J1ER2抗体不同的其他抗体组合使用。这里，可以使 用为高岩藻糖抗ffiR2抗体、尤其曲妥珠单抗所建立的联合疗法。治疗也可以与放疗法组 合。
[0103] 可以与岩藻糖减少的抗HER2抗体组合使用的抗癌药可以选自任何化疗药、尤其 已知有效治疗ffiR2阳性癌症的化疗药。特别优选采用与曲妥珠单抗(赫赛彡丁?)-起使用 的抗癌药的组合。组合配偶物可以选自紫杉烷如紫杉醇（紫杉酚）、多西紫杉醇（泰索帝） 和SB-T-1214 ;环磷酰胺；拉帕替尼；卡培他滨；阿糖胞苷；长春瑞滨；贝伐珠单抗；吉西他 滨；美坦辛；蒽环类如佐柔比星、多柔比星、表柔比星、伊达比星、戊柔比星（valrubicin) 和米托蒽醌；芳香酶抑制剂如氨鲁米特、睾内酯（Teslac)、阿那曲唑（Arimidex)、来曲唑 (弗隆（Femara))、依西美坦（Aromasin)、伏氯唑（Rivizor)、福美坦（Lentaron)、法倔唑 (Afema)、4_羟雄甾烯二酮、1，4, 6-雄甾三烯-3, 17-二酮（ATD)和4-雄甾烯-3, 6, 17-三 酮（6-0X0);拓扑异构酶抑制剂如依立替康、拓扑替康、喜树碱（camptothecin)、片螺素 D(lamellarin D)、依托泊苷（VP-16)、替尼泊苷、多柔比星、佐柔比星、米托蒽醌、安卩丫陡、 椭圆玫瑰树碱、金精三羧酸和HU-331 ;基于钼的化疗药如顺-二氯二氨合钼（II)(顺钼）、 顺-二氨（1，1-环丁烷基二羧酸根合）钼（II)(卡钼）和[(1R，2R)-环己烷-1，2-二胺](乙 二酸根合_〇, 〇'）钼（II)(奥沙利钼）、和抗代谢物、尤其抗叶酸如甲氨蝶呤、培美曲塞、雷 替曲塞和普拉曲沙、嘧啶类似物如氟尿嘧啶、吉西他滨、氟尿苷、5-氟尿嘧啶和替加氟-尿 嘧啶以及嘌呤类似物、选择性雌激素受体调节物和雌激素受体下调物。如果作为联合疗法 使用，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体优选地与紫杉烷如紫杉醇（紫杉酚（Taxol))、多西紫杉醇 (Taxotere(泰索帝））组合使用。如果岩藻糖减少的抗HER2抗体对应于曲妥珠单抗，例如 具有与曲妥珠单抗相同的CDR序列，尤其与之相同的总体序列，则特别是这样。这里，当联 合疗法中使用高岩藻糖抗J1ER2抗体，例如曲妥珠单抗时，基本上相同的组合方案和施用方 案可以如现有技术中那样使用。基于已建立曲妥珠单抗疗法的岩藻糖减少的抗HER2抗体 的合适组合包括但不限于采用以下的联合疗法：
[0104] (i)作为包含多柔比星、环磷酰胺以及紫杉醇或多西紫杉醇的治疗方案的部分；
[0105] (ii)多西紫杉醇和卡钼；
[0106] (iii)紫杉醇；
[0107] (iv)顺钼、卡培他滨（capecetabine)或5-氟尿啼陡。
[0108] 岩藻糖减少的抗HER2抗体可以在蒽环类疗法后使用。
[0109] 另外，治疗性抗体可以作为岩藻糖减少的抗HER2抗体的组合配偶物使用。它可 以是可用于癌症疗法中的任何抗体，所述抗体与岩藻糖减少的抗J1ER2抗体不同。特别地， 其他抗体由行政机构批准用于癌症治疗，如美国食品药品管理局（FDA)、欧洲药品管理局 (EMA，先前的EMEA)和Bundesinstitut fiir Arzneimittel und Medizinprodukte(BfArM)。 可以与岩藻糖减少的抗ffiR2抗体一起用于联合治疗的其他抗体的例子是抗HER2抗体如培 妥珠单抗（如果岩藻糖减少的抗ffiR2抗体与曲妥珠单抗显示交叉特异性并且优选地是岩 藻糖减少的曲妥珠单抗抗体，贝 1J这是特别可行的）、抗EGFR抗体如西妥昔单抗（Erbitux)、 帕木单抗（Vectibix)和尼妥珠单抗（Theraloc);抗VEGF抗体如贝伐珠单抗（Avastin);抗 ⑶52抗体如阿伦珠单抗（Campath);抗⑶30抗体如贝伦妥单抗（Adcetris);抗⑶33抗体 如吉妥珠单抗（Mylotarg);和抗CD20抗体如利妥昔单抗（Rituxan，Mabthera)、托西莫单抗 (Bexxar)和替伊莫单抗（Zevalin)。
[0110] 本文中呈献的数据表明用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗是成功的并且/或者使 用可比较的剂量方案时，比用高岩藻糖抗HER2抗体治疗更有效。如本文中呈献的数据所 示，用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体治疗成功，而用另一种抗体治疗、尤其用高岩藻糖抗HER2 抗体如曲妥珠单抗治疗失败。这种治疗成功随原发癌以及在治疗（如通过IHC所确定）具 有程度2+或1+的HER2表达的转移灶和癌症中见到。当使用可比较的剂量方案时或甚至 当使用较低剂量时，见到这种效果。
[0111] 本申请中呈献的数据显示，对于Fcy受体Ilia的氨基酸位置158中的缬氨酸纯 合（FCYRIIIa-158V/V)的患者，用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗是成功的并且对于所述 患者，还可以比用相应的高岩藻糖抗HER2抗体治疗更高效。另外，呈献的数据显示，对于 Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合（Fc YRIIIa-158F/F)的患者和Fc Y受 体（Ilia)的氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸杂合（FcYRIIIa-158V/F)的患者，用 岩藻糖减少的抗J1ER2抗体治疗是成功的并且对于所述患者，比用相应的高岩藻糖抗HER2 抗体治疗更高效。另外，数据显示，用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体治疗可以成功地用于治疗 具有每种Fc Y受体Ilia同种异型、尤其具有全部F同种异型（F/F和F/V)的患者和/或 对于所述患者，比用相应的高岩藻糖抗J1ER2抗体治疗更高效。因而，本发明在以下方面作 出明显贡献：为罹患转移癌的患者、尤其深度先期治疗患者提供改善的疗法，因为根据本发 明的治疗可用于通常具有低存活机会和有限治疗选项的所述患者组的全部成员。
[0112] 另外，本文中教导的岩藻糖减少的抗HER2抗体不仅对显示强烈HER2过表达（例 如3+，如通过IHC所确定-参见例如用具有大约1*10 6个分子/细胞的SK-BR-3所举的例 子）的癌细胞显示增强的ADCC反应，还对显示较低HER2表达（例如1+或2+，如通过IHC 所确定_参见例如用具有大约3. 5*104个分子/细胞的MCF-7细胞所举的例子）的癌细胞 显示增强的ADCC反应。因此，更多患者将得益于本文所述的新治疗并且尤其罹患呈1+或 2+的HER2阳性癌症（包括转移性癌症）以及尤其具有F/F或F/V同种异型的患者将得益。
[0113] 本文提供的岩藻糖减少的抗HER2抗体优选地用于治疗HER2阳性原发肿瘤、HER2 阳性复发肿瘤和/或这类肿瘤的J1ER2阳性转移灶，并且尤其可用于术前、手术期间或术后 治疗并用于防止或治疗转移灶。如通过本发明展示，用本文所述的岩藻糖减少的抗J1ER2抗 体治疗特别可用于治疗（包括预防）转移灶如皮肤转移灶、尤其溃疡性皮肤转移灶、淋巴结 转移灶和内脏转移灶如肺转移灶和肝转移灶。如通过本文提供的数据显示，用如本文所述 的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体治疗可以成功地用于治疗由HER2阳性肿瘤或转移引起的损 害，尤其用于治疗皮肤损害如皮肤溃疡或淋巴结损害。另外，观察到用本文所述的岩藻糖减 少的抗HER2抗体治疗可以用于治疗疼痛并且因此，可以作为姑息疗法用于患有不可治愈 性癌症的患者。
[0114] 岩藻糖减少的抗HER2抗体尤其作为辅助疗法用于治疗患者。在某些实施方案中， 岩藻糖减少的抗J1ER2抗体作为新辅助疗法或在组合的新辅助-辅助疗法中用于治疗患者。 另外，岩藻糖减少的抗ffiR2抗体作为姑息疗法用于治疗患者。
[0115] 如通过实施例显示，用如本文中教导的岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗在治疗上 是成功的并且尤其可以产生肿瘤或转移灶缓解或疾病稳定化。特别地，在分析的深度先期 治疗患者中，至少观察到疾病稳定化和部分缓解，这在基本上没有治疗选项或仅具有有限 治疗选项的深度先期治疗患者的患者组中是重要成功。特别地，例子显示用本文所述的岩 藻糖减少的抗J1ER2抗体治疗可以导致肿瘤生长抑制、肿瘤尺寸缩减；防止进一步的转移灶 (类型相同或不同）和/或缩减转移的数目或尺寸。特别地，观察到由原发肿瘤和/或转移 灶引起的损害明显减少，尤其就皮肤转移而言，所述转移灶包括溃疡性皮肤转移灶、淋巴结 转移灶和内脏转移灶，包括肺转移灶和肝转移灶。还观察到纵隔腺病的减少。归因于用本 发明治疗获得的治疗效果，可以实现无进展存活期和/或患者寿命增加。
[0116] 如通过实施例显示，本文中教导的岩藻糖减少的抗HER2抗体高度有效，并且因 此，迅速见到治疗反应。这在罹患转移性癌症的患者组中以及在其中多种现有疗法已经失 败的深度先期治疗患者的患者组中是重要优点。如通过实施例显示，本文中教导的岩藻糖 减少的抗J1ER2抗体也可以用于治疗其中多种有疗法已经失败的罹患转移性癌症的患者 组。优选地至少在第二次施用岩藻糖减少的抗HER2抗体后、优选地已经在第一次施用岩藻 糖减少的抗J1ER2抗体后获得了用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗的治疗效果、尤其至少获 得部分缓解。如通过实施例显示，在用本发明的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体第一次治疗后 观察到溃疡性皮肤转移灶的明显减少。在某些实施方案中，在第一次施用岩藻糖减少的抗 HER2抗体后8周或更短、优选地7周或更短、6周或更短、5周或更短、4周或更短、3周或更 短或2周或更短、更优选地1周或更短，获得治疗效果。
[0117] 先期治疗
[0118] 发明人发现，本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体甚至在多种现有抗癌症疗法、尤 其用化疗药和/或其他抗癌抗体、尤其高岩藻糖抗J1ER2抗体先期治疗失败的患者中显示 高治疗功效和临床成功。观察到的效果令人瞩目，因为病情已经进展越多并且尤其如果转 移已经进展，则癌症疗法更易失败。在多次治疗后，癌细胞高度突变并因而更容易地逃避治 疗。另外，肿瘤负荷，即，患者中肿瘤细胞的数目，随病情进展而增加。在肿瘤细胞数目更高 时，对一些肿瘤细胞的杀伤可能被剩余肿瘤细胞的增殖超过。转移灶的形成同样如此。因 此，岩藻糖减少的抗ffiR2抗体的在深度先期治疗患者中和尤其在转移灶广泛扩散的患者 中所显示的治疗效果是令人印象深刻和出乎意料的并且还为新的患者组提供新的治疗选 项。
[0119] 考虑到这些研究结果，本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体适于治疗HER2阳性肿 瘤性疾病、尤其在已经接受所述J1ER2阳性肿瘤性疾病的一种或多种先期治疗的患者中的 HER2阳性癌症。根据一个实施方案，所述HER2阳性肿瘤性疾病、尤其所述HER2阳性癌症正 在转移。肿瘤性疾病的先期治疗包括用一种或多种化疗药治疗、放射治疗（放疗法）、用与 岩藻糖减少的抗HER2抗体不同的一种或多种治疗性抗体治疗、尤其用一种或多种高岩藻 糖抗体治疗，其中所述高岩藻糖抗体优选地在它们的功效方面对应于岩藻糖减少的抗J1ER2 抗体（例如岩藻糖减少的抗J1ER2抗体在结合作用和Fv介导的抗肿瘤特性方面与曲妥珠单 抗等同）、和两种或更多种这些治疗的组合。特别地，至少一个采用高岩藻糖抗J1ER2抗体如 曲妥珠单抗的先期治疗作为单一疗法或联合疗法进行。
[0120] 另外，在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，HER2阳性肿瘤性疾病可能已经通 过手术治疗。特别地，患者的先期治疗涉及癌症手术，优选地手术摘除原发肿瘤和/或转移 灶的至少一部分。
[0121] 在优选的实施方案中，在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，患者接受2种或 更多种、优选地3种或更多种、更优选地4种或更多种、5种或更多种、6种或更多种、7种或 更多种或8种或更多种先期抗癌症治疗。先期治疗优选地包括采用高岩藻糖抗HER2抗体 (如尤其曲妥珠单抗）作为单一疗法或与其他疗法如一种或多种化疗药和/或放疗法和/ 或一种或多种其他抗体组合的至少一次治疗，其中所述其他抗体针对与J1ER2不同的抗原。 用高岩藻糖抗J1ER2抗体先期治疗可能还已经涉及使用与另一药剂、尤其如化疗药（如美坦 辛）缀合的高岩藻糖抗ffiR2抗体如曲妥珠单抗。在一个实施方案中，先期治疗中使用的高 岩藻糖抗ffiR2抗体不与另一药剂缀合。根据一个实施方案，在先期治疗中使用无糖基化的 抗HER2抗体。
[0122] 在具体的实施方案中，在用本文所述的岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，患者 已经用至少2种、优选地至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种、至少8种至少 9种或至少10种不同抗癌药如化疗药和/或治疗性抗体治疗过。
[0123] -种或多种、尤其全部先期治疗已经失败并且在先期治疗后，HER2阳性癌症复发 或进展。
[0124] 在先期治疗中使用的高岩藻糖抗HER2抗体
[0125] 在本发明的优选方面和实施方案中，在用高岩藻糖抗HER2抗体治疗患者失败后， 使用岩藻糖减少的抗HER2抗体。上文已经描述关于高岩藻糖抗HER2抗体及其具体实施方 案的细节。优选地，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体和高岩藻糖抗HER2基于相同的抗体并且因 此尤其结合相同的抗原，并且包含相同的CDR区，但是在它们的Fc区内糖基化方面、尤其在 它们的岩藻糖量方面彼此不同。岩藻糖减少的抗J1ER2抗体具有比高岩藻糖抗HER2抗体更 低的岩藻糖量并能够介导更强烈的ADCC反应。另外，它优选地具有如上文所述的更高的对 分 GlcNAc 量。
[0126] 高岩藻糖抗HER2抗体优选地在其CH2结构域中具有65%或更多、70%或更多或 75 %或更多的岩藻糖量。在标准细胞系如CH0细胞或SP2/0细胞中产生抗体时，获得相应 的高岩藻糖抗体。例如，在CH0细胞中产生的抗体曲妥珠单抗(赫赛.彡丁?)是与CH2结构域 连接的糖链中具有多于70%岩藻糖的高岩藻糖抗HER2抗体。在优选的实施方案中，岩藻糖 减少的抗J1ER2抗体的CH2结构域中的岩藻糖量比高岩藻糖抗HER2抗体的CH2结构域中的 岩藻糖量低至少20个百分点、优选地至少30百分点、更优选地至少40个百分点、至少50 个百分点或至少60个百分点、或甚至至少70个百分点。例如，如果高岩藻糖抗HER2抗体 具有70%岩藻糖含量并且岩藻糖减少的抗HER2抗体具有60个百分点更低的岩藻糖含量， 则它具有10%岩藻糖含量。根据一个实施方案，岩藻糖减少的抗HER2抗体是非岩藻糖化的 并且不包含岩藻糖。
[0127] 在其他实施方案中，在先期治疗患者中使用的高岩藻糖抗HER2抗体在CH2结构域 中具有10%或更少、7%或更少或5%或更少、更优选地3%或更少的对分GlcNAc量或不包 含对分GlcNAc。岩藻糖减少的抗HER2抗体的对分GlcNAc量优选地比高岩藻糖抗HER2抗 体的对分GlcNAc量高至少5个百分点、更优选地至少7个百分点、最优选地至少10个百分 点。另外，高岩藻糖抗J1ER2抗体可以在CH2结构域中包含70 %或更少、60 %或更少或55% 或更少、尤其50 %或更少的半乳糖量。岩藻糖减少的抗HER2抗体的半乳糖量优选地比高岩 藻糖抗HER2抗体的半乳糖量高至少10个百分点、更优选地至少15个百分点或至少20个 百分点、最优选地至少25个百分点。
[0128] 高岩藻糖抗HER2抗体优选地具有与岩藻糖减少的抗HER2抗体相同的抗体类型， 并且尤其是IgG抗体、优选地IgGl抗体。优选地，高岩藻糖抗HER2抗体能够特异性结合与 岩藻糖减少的抗HER2抗体相同的表位和/或与岩藻糖减少的抗HER2抗体显不交叉特异 性。在某些实施方案中，高岩藻糖抗HER2抗体具有至少80 %、至少90 %或至少95 %、更优 选地100 %与岩藻糖减少的抗HER2抗体的相应氨基酸序列相同的重链和/或轻链氨基酸序 列。特别地，重链⑶R和/或轻链⑶R的氨基酸序列与岩藻糖减少的抗J1ER2抗体的⑶R的 相应氨基酸序列相同。在优选的实施方案中，在先期治疗中使用的高岩藻糖抗J1ER2抗体是 抗体曲妥珠单抗（赫赛汀）或与抗体曲妥珠单抗显示交叉特异性。
[0129] 根据一个实施方案，在先期治疗中使用的高岩藻糖抗HER2抗体能够阻断HER2/ neu的配体结合和/或二聚化、尤其HER2/neu与表皮生长因子受体家族其他成员如HER1、 HER3和HER4的异二聚化。在某些实施方案中，高岩藻糖抗HER2抗体是抗体培妥珠单抗 (Omnitarg)或与抗体培妥珠单抗显示交叉特异性。
[0130] 根据一个实施方案，在先期治疗中使用的高岩藻糖抗HER2抗体与HER2的表位特 异性结合，所述表位与岩藻糖减少的抗ffiR2抗体的表位不同。在这个实施方案中，岩藻糖 减少的抗HER2抗体和高岩藻糖抗HER2抗体具有不同的CDR序列。根据一个实施方案，它 们在其作用模式方面具有至少一个差异。
[0131] 高岩藻糖抗HER2抗体可以是完整抗体或抗体的片段或衍生物。如上文描述，一个 实施方案，在先期治疗中使用的高岩藻糖抗HER2抗体可以与又一种治疗药缀合。合适的治 疗药的例子是放射性核素和化疗药，尤其如本文所述的化疗药，例如美坦辛。根据一个实施 方案，高岩藻糖抗J1ER2抗体是非缀合物。采用高岩藻糖抗HER2抗体先期治疗可以是单一 疗法或与一种或多种化疗药和/或一种或多种其他抗体和/或放疗法一起的联合疗法。合 适的化疗药和其他抗体是本文其他地方所述的那些。
[0132] 如实施例中所示，根据本发明使用的岩藻糖减少的抗HER2抗体比在先期治疗中 和另外在其中高岩藻糖抗体不显示任何作用的有效治疗环境下使用的高岩藻糖抗J1ER2抗 体具有更高治疗功效。本文中他处描述了治疗效果和可治疗患者组的细节。还观察到甚至 当岩藻糖减少的抗J1ER2抗体以相同剂量、但以低于高岩藻糖抗HER2抗体的频率施用时和/ 或当岩藻糖减少的抗J1ER2抗体以相同频率施用、但以低于高岩藻糖抗HER2抗体的剂量施 用时，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体的治疗功效仍然高于相应的高岩藻糖抗HER2抗体。因此， 有利地，当使用本发明的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体时，剂量可以降低并且治疗周期可以延 长。
[0133] 在其他实施方案中，在用未糖基化的抗HER2抗体治疗患者失败后，使用岩藻糖减 少的抗HER2抗体。在Fc部分不具有任何糖基化的抗体显示降低的Fc受体结合作用并且 因此，不能够介导强烈的ADCC活性。本文相对于高岩藻糖抗HER2抗体所述的特征和实施 方案同样适用于非糖基化的抗J1ER2抗体。特别地，非糖基化的抗HER2抗体涵盖不包含CH2 结构域的抗体片段，特别是不包含Fc区的抗体片段。
[0134] 在先期治疗中使用的针对其他抗原的抗体
[0135] 与岩藻糖减少的抗HER2抗体不同的其他治疗性抗体还包括针对其他抗原和/ 或不特异性结合J1ER2的抗体。可能已经在先期治疗中使用的这些其他抗体优选地特异 性结合存在于肿瘤细胞上和优选地不存在于非肿瘤细胞上或以较低量或在抗体不可及的 位点处存在于非肿瘤细胞上的抗原。优选地，其他抗体由行政机构批准用于癌症治疗， 如美国食品药品管理局（FDA)、欧洲药品管理局（EMA，先前的EMEA)和Bundesinstitut fiir Arzneimittel und Medizinprodukte(BfArM)。其他抗体的优选例子是抗 EGFR 抗体 如西妥昔单抗（Erbitux)、帕木单抗（Vectibix)和尼妥珠单抗（Theraloc);抗VEGF抗体 如贝伐珠单抗（Avastin);抗CD52抗体如阿伦珠单抗（Campath);抗CD30抗体如贝伦妥 单抗（Adcetris);抗CD33抗体如吉妥珠单抗（Mylotarg);和抗CD20抗体如利妥昔单抗 (1?；[1：1?311，]\^131：116以)、托西莫单抗（1361131')和替伊莫单抗（26￥31；[11)。
[0136] 其他抗体可以是完整抗体或抗体的片段或衍生物。在一个实施方案中，其他抗体 与又一种治疗药缀合。这类治疗药的例子是放射性核素和化疗药，尤其如本文所述的化疗 药。根据一个实施方案，在先期治疗中使用的其他抗体不是缀合物。
[0137] 在先期治疗中使用的化疗药
[0138] 在某些实施方案中，先期治疗包括采用化疗药或采用两种或更多种化疗药组合的 一种或多种治疗，任选地与一种或多种与岩藻糖减少的抗HER2抗体不同治疗性抗体组合。 化疗剂可以是任何化疗药并且可以选自环磷酰胺；拉帕替尼；卡培他滨；阿糖胞苷；长春瑞 滨；贝伐珠单抗；吉西他滨；美坦辛；蒽环类如佐柔比星、多柔比星、表柔比星、伊达比星、戊 柔比星和米托蒽醌；紫杉烧如紫杉醇（Taxol)、多西紫杉醇（Taxotere)和SB-T-1214 ;芳 香酶抑制剂如氨鲁米特、睾内酯（Teslac)、阿那曲唑（Arimidex)、来曲唑（Femara)、依西 美坦（Aromasin)、伏氯唑（Rivizor)、福美坦（Lentaron)、法倔唑（Afema)、4_轻雄甾烯二 酮、1，4, 6-雄留三烯-3, 17-二酮（ATD)和4-雄留烯-3, 6, 17-三酮（6-0X0);拓扑异构 酶抑制剂如依立替康、拓扑替康、喜树碱、片螺素D、依托泊苷（VP-16)、替尼泊苷、多柔比 星、佐柔比星、米托蒽醌、安吖啶、椭圆玫瑰树碱、金精三羧酸和HU-331 ;基于钼的化疗药如 顺-二氯二氨合钼（II)(顺钼）、顺-二氨（1，1-环丁烷基二羧酸根合）钼（II)(卡钼）和 [(1R，2R)_环己烷-1，2-二胺](乙二酸根合-0,0'）钼（11)(奥沙利钼）；和抗代谢物、尤 其抗叶酸如甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞和普拉曲沙、啼啶类似物如氟尿嘧陡、吉西他滨、 氟尿苷、5_氟尿嘧啶和替加氟-尿嘧啶以及嘌呤类似物。特别地，先期治疗包括采用紫杉烷 的一种或多种治疗。
[0139] 先期治疗方案
[0140] 下文中给出患者接受的示例性先期治疗，此后岩藻糖减少的抗HER2抗体用来治 疗HER2阳性癌症，并且先期治疗涉及至少1种、优选地至少2种或至少3种以下治疗：
[0141] -至少一次采用曲妥珠单抗(赫赛汗?)作为单一疗法和/或曲妥珠单抗（赫赛 汀）联合一种化疗药、尤其联合紫杉烷如多西紫杉醇和长春瑞滨的治疗；和/或
[0142] _至少一次曲妥珠单抗单一疗法和至少一次、优选地至少两次涉及曲妥珠单抗的 联合疗法；和/或
[0143] -至少一次采用至少一种紫杉烷的治疗、优选地采用一种、两种或更多种不同紫杉 烷、尤其采用紫杉醇和多西紫杉醇作为单一疗法或联合疗法的至少两次独立治疗；和/或
[0144] -至少一次采用基于钼的化疗药如顺钼的治疗，优选地联合一种化疗药如吉西他 滨；和/或
[0145] -至少一次放疗法，优选地作为辅助疗法；和/或
[0146] -至少1次、优选地至少2次、至少3次或至少4次采用化疗药或不同化疗药组合 如多柔比星和环磷酰胺组合、拉帕替尼和卡培他滨组合、伊达比星和依托泊苷及阿糖胞苷 组合以及贝伐珠单抗和长春瑞滨和卡培他滨组合的治疗；和/或
[0147] -至少1次、优选地至少2次或至少3次采用不同化疗药组合如叶酸和氟尿嘧啶及 奥沙利钼组合（F0LF0X)、叶酸和氟尿嘧啶及依立替康（F0LFIRI)组合和替加氟-尿嘧啶及 亚叶酸钙组合的治疗；和/或
[0148] -至少1次、优选地至少2次或至少3次采用与岩藻糖减少的抗HER2抗体不同的 治疗性抗体、尤其采用抗EGFR抗体如帕木单抗或西妥昔单抗和/或采用抗VEGF抗体如贝 伐珠单抗的治疗，任选地联合一种或多种化疗药。
[0149] 以上先期治疗可能已经作为辅助疗法和/或新辅助疗法使用并且癌症的先期治 疗可以在本文中并且优选地包括手术。在优选的实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗体用 于治疗在按照任何顺序进行1种或多种、优选地2种或更多种、3种或更多种、4种或更多 种、5种或更多种、6种或更多种、7种或更多种或8种或更多种以上治疗后的患者中的癌症。 特别地，先期治疗涉及使用高岩藻糖抗ffiR2抗体如曲妥珠单抗(赫赛幻*?)。
[0150] HER2阳性肿瘤性疾病和待治疗的患者
[0151] 通过岩藻糖减少的抗HER2抗体待治疗的HER2阳性肿瘤性疾病优选地是如上文详 述的HER2阳性癌症。其中，还描述了 HER2阳性癌症的优选类型并且参考以上公开内容以 避免重复。如其中所述那样，HER2阳性癌症尤其可以选自乳腺癌、结直肠癌、结肠癌、膀胱 癌、卵巢癌、胃癌、食道癌症、肺癌如非小细胞肺癌（NSCLC)、支气管癌和唾液腺癌症如腮腺 癌。在优选的某些实施方案中，癌症是转移性癌症。J1ER2阳性癌症可以包括任何类型的转 移，如皮肤转移灶、淋巴结转移灶、内脏转移灶如肺转移灶、肝转移灶和/或脑转移灶。在某 些实施方案中，癌是如通过IHC所确定，具有程度2+或1+的HER2表达的癌症并且任选地 可以是具有这些特征的转移性癌症。上文描述了因本发明而变得可能的优点和具体治疗方 案，参考以上公开内容。
[0152] 在某些实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗体用于治疗其中原发性癌或肿瘤已 经形成一个或多个转移灶的转移性癌症。一个或多个转移灶尤其存在于与形成原发癌或肿 瘤的组织不同的组织中。
[0153] 在优选的实施方案中，待治疗的患者罹患HER2阳性乳腺癌、尤其转移化乳腺癌。 乳腺癌包括原位导管癌、浸润性导管癌、小叶状癌原位、浸润性小叶癌、髓样癌、乳头Paget 病和转移性乳腺癌。这种ffiR2阳性乳腺癌的一个具体例子是浸润性乳腺导管癌，尤其伴发 淋巴结受累。在一个实施方案中，待治疗的患者具有转移性乳腺癌并且具有皮肤转移灶和 /或淋巴结转移灶。特别地，待治疗的患者可以在原发肿瘤和/或一个或多个转移灶的部 位具有损害。特别地，患者可以具有皮肤损害如皮肤溃疡，尤其具有至少2cm、优选地至少 3cm、至少4cm、至少5cm或至少6cm的直径的皮肤溃瘍。患者还可能患有淋巴结转移灶引起 的纵隔腺病。特别地，在待治疗的患者中，移除原发肿瘤和/或转移的至少一部分，例如通 过手术和/或放疗法，并且其中例如存在转移灶和/或复发性肿瘤。
[0154] 在某些实施方案中，待治疗的患者具有呈雌激素受体阴性（ER-)和/或孕酮受体 阴性（PgR_)的J1ER2阳性肿瘤和/或HER2阳性转移灶。雌激素受体阴性指其中在癌细胞上 不能检出雌激素受体的癌症。孕酮受体阴性指其中在癌细胞上不能检出孕酮受体的癌症。
[0155] HER2阳性癌症可以在用根据本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前耐受一 种或多种抗癌药如化疗药和/或治疗性抗体、尤其一种或多种本文所述的化疗药和/或一 种或多种本文所述的抗体、优选地至少一种或更多种本文所述的高岩藻糖抗J1ER2抗体如 曲妥珠单抗（赫赛汀）和/或培妥珠单抗（Omnitarg)或可以在用这些药物治疗后已经进 展。另外，HER2阳性肿瘤性疾病耐受放疗法或在放疗法后已经进展。
[0156] 待治疗的患者可以是患有HER2阳性癌症的任何人类患者。优选地，患者是深度先 期治疗的癌症患者，尤其在用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体治疗之前经历过1种或多种、优选 地2种或更多种、3种或更多种、4种或更多种、5种或更多种或6种或更多种癌症疗法的患 者。上文描述了表征待治疗患者的相应先期治疗,参考以上公开内容。
[0157] 本发明人尤其发现，本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体为患有HER2阳性癌症的 患者提供改善的治疗，无论Fcy受体Ilia的同种异型是什么，其中所述HER2阳性癌症耐 受一种或多种癌症疗法或在一种或多种癌症疗法后已经进展。如体外测定法中展示并且在 临床环境下证实，本发明的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体具有增加的ADCC活性，尤其采用从具 有FcyRIIIa-158F/F或F/V同种异型的供体获得的效应细胞时。采用这些效应细胞，高岩 藻糖抗HER2抗体在ADCC测定法中不太有效。然而，本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体还 在具有下述癌的患者中显示改善的治疗，其中所述癌耐受对具有FcYRIIIa-158V/V同种 异型的患者常用的高岩藻糖抗J1ER2抗体。该患者可以因此具有任何的Fcy受体Ilia同 种异型并且将得益于本文所述的新治疗。特别地，患者可以对Fcy受体Ilia的氨基酸位 置158中的缬氨酸纯合（Fc YRIIIa-158V/V)，或患者可以对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置 158中的苯丙氨酸纯合收^111&-158?作)，或患者可以对？(^受体（111 &)的氨基酸位 置158中的缬氨酸和苯丙氨酸杂合（FCYRIIIa-158V/F)。因此，可以治疗全部FcvIIIa 同种异型，包括F/F和F/V同种异型，并且还可以治疗具有低HER2过表达（如HER2 1+和 HER2 2+)的患者。
[0158] 使用本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体的临床研究还显示，用所述抗体治疗造 成非常少的不良反应。特别地，研究中未观察到临床心脏毒性作用。与之相反，市售的高岩 藻糖抗HER2抗体赫赛幻^已知具有心脏毒性副作用。因此，在具体的实施方案中，本发明 的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体比如药物赫赛幻中使用的曲妥珠单抗造成更少的不良反 应，优选地具有更低的心脏毒性。
[0159] 在优选的实施方案中，岩藻糖减少的抗HER2抗体用于下述患者的癌症治疗，所述 患者具有充血性心力衰竭、症候性心功能不全、冠状动脉心脏病、失控的心率失常、心绞痛、 心脏瓣膜功能不全、张力允进（hypertonia)、心肌梗死、休息时呼吸困难或这些疾病中一种 或多种疾病的风险。优选地，可以用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体治疗具有55%或更少、尤其 50%或更少或45%或更少左心室射血分数的患者。在具体的实施方案中，与一种或多种 蒽环类如佐柔比星、多柔比星、表柔比星、伊达比星、戊柔比星（valrubicin)和米托蒽醌组 合，岩藻糖减少的抗ffiR2抗体适于治疗这些患者。
[0160] 另外，临床研究还显示本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体由患者良好耐受并且 比赫赛汀引起更少的不良反应，尤其无不良胃肠道反应如腹泻、恶心和呕吐。因此，优选地 岩藻糖减少的抗J1ER2抗体用于治疗其不良胃肠道反应为临界的患者。
[0161] 包含岩藻糖减少的抗HER2抗体的组合物和剂量
[0162] 岩藻糖减少的抗HER2抗体尤其包含于治疗性组合物中。它优选地是适于静脉内 注射的组合物，例如包含抗体的水溶液剂，或这样的组合物，其可以用来制备适于静脉内注 射的组合物，例如冻干的抗体组合物。包含岩藻糖减少的抗J1ER2抗体的组合物可以另外包 含一种或多种选自溶剂、稀释剂和赋形剂的其他组分。组合物的组分优选地均是药学上可 接受的。组合物可以是固态或液态组合物，尤其-优选地含水-溶液剂、乳剂或混悬剂或冻 干粉末。
[0163] 组合物优选地以lmg/ml至100mg/ml、更优选地5mg/ml至50mg/ml、10mg/ml至 30mg/ml或15mg/ml至25mg/ml，尤其约20mg/ml的浓度包含岩藻糖减少的抗HER2抗体。
[0164] 岩藻糖减少的抗HER2抗体可以通过任何合适的施用途径、优选地通过静脉内注 射施用至患者。在优选的实施方案中，将岩藻糖减少的抗HER2抗体以0. 5至15mg、l至 l〇mg、优选地2至8mg、更优选地3至6mg或3至5mg、最优选地约4mg或约6mg/kg患者体 重或更少的剂量施用。这里，发现岩藻糖减少的抗J1ER2抗体可以按照比高岩藻糖抗HER2 抗体更低的剂量施用并且甚至当作为单一疗法给予时也激发治疗效果。因此，有利地可以 使用更低剂量。可选地，归因于减少的不良副作用谱，岩藻糖减少的抗ffiR2抗体也可以按 更高的剂量施用，例如按〇? 2至30mg、优选地2至25mg、更优选地4至20mg或6至18mg、 最优选地8至15mg、尤其约12mg/kg患者体重的剂量。在某些实施方案中，岩藻糖减少的 抗HER2抗体按每次施用10mg至1250mg、优选地50mg至lOOOmg、更优选地lOOmg至800mg、 200mg至750mg或240至600mg的剂量施用。400至2000mg、优选地500至1500mg、更优选 地600至lOOOrng的更高剂量也是可能的。优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体以1周至2 个月、优选地2周至6周、更优选地3周至4周的时间间隔、尤其每隔2周或3周施用。尤 其为优化上文描述的剂量用于每三周施用。归因于抗J1ER2抗体的高功效，可以在不必要增 加剂量的情况下延长施用间隔时间，例如从3周至4周。根据一个实施方案，治疗包括向患 者以初始剂量1至l〇mg、优选地2至8mg、更优选地3至6mg施用岩藻糖减少的抗HER2抗 体并且向患者以相同于或低于初始剂量的量施用多次后续剂量的岩藻糖减少的抗HER2抗 体，其中初始剂量和后续剂量在时间上彼此分隔至少1周、至少2周、至少3周、优选地至少 4周。
[0165] 通过注射（包括输注）施用抗体可能在患者身体内造成不良反应，尤其输注相关 反应（IRR)。当施用岩藻糖减少的抗HER2抗体时，相应的效应也可能出现。为了减少相应 的输注相关反应，岩藻糖减少的抗-HER2抗体治疗可以与用于治疗或预防这类输注相关反 应的手段组合。
[0166] 根据本发明的一个实施方案，通过岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗与采用具有镇 痛和/或退热特性的药剂的前驱用药（pre-medication)组合，实现IRR的预防或减少。所 述药剂可以具有以下一个或多个特征：它是非阿片类镇痛药，它是非水杨酸酯镇痛药，它是 苯胺镇痛药/苯胺衍生物，它是乙酰苯胺衍生物，它是氨基酚衍生物，它是乙酰氨基酚，它 是环加氧酶抑制剂和/或它是前列腺素抑制剂。优选地使用N-(4-羟苯基）乙酰胺（扑热 息痛（paracetamol)或对乙酰氨基酚）作为镇痛药和/或退热药。优选地静脉内或口服施 用该药剂。
[0167] 本发明人发现这种前驱用药出乎意料地显著地减少与施用岩藻糖减少的抗HER2 抗体相关的IRR。因此在本发明的一个方面，使用这种前驱用药以防止或治疗施用岩藻糖减 少的抗J1ER2抗体引起的IRR。示例性输注相关反应是发热、水肿如血管性水肿、关节痛和发 抖。
[0168] 具有镇痛和/或退热特性的药剂优选地以250mg至1500mg、至少500mg、优选地至 少700mg、至少800mg、至少900mg、更优选地lOOOrng的剂量施用。它优选地在施用岩藻糖减 少的抗HER2抗体之前施用，优选地以一个单剂量或以两个或更多个、优选地两个分立剂量 施用。
[0169] 在优选的实施方案中，将该药剂在施用岩藻糖减少的抗HER2抗体之前5分钟至6 小时、优选地10分钟至4小时、15分钟至3小时或20分钟至2小时、更优选地30分钟至 90分钟、尤其1小时施用、尤其作为单剂量施用。
[0170] 在某些优选的实施方案中，将该药剂以两个剂量施用，其中第一剂量在施用岩藻 糖减少的抗J1ER2抗体之前8小时至48小时、优选地12小时至36小时或16小时至24小 时、尤其在晚间（即，施用前约12小时）施用。将第二剂量在施用岩藻糖减少的抗HER2抗 体之前5分钟至6小时、优选地10分钟至4小时、15分钟至3小时或20分钟至2小时、更 优选地30分钟至90分钟、尤其1小时施用。在一个具体的优选实施方案中，将药剂的第一 剂量在施用抗体之前的晚间施用并且将药剂的第二剂量在施用抗体之前1小时施用。优选 地，两种剂量均是l〇〇〇mg药剂。这种施用方案的具体的优选药剂是N-(4-羟苯基）乙酰胺。
[0171] 在其他实施方案中，当出现针对施用岩藻糖减少的抗HER2抗体的输注相关反应 时施用该药剂。
[0172] 具有镇痛和/或退热特性的药剂可以与一种或多种类固醇、优选地糖皮质激素 类，如皮质醇、醋酸可的松、氯泼尼醇（cloprenol)、泼尼松、泼尼松龙、地夫可特、氟可龙、曲 安西龙、倍他米松或地塞米松、尤其甲泼尼龙组合施用。将类固醇优选地在施用岩藻糖减 少的抗HER2抗体之前5分钟至4小时、更优选地15分钟至1小时、最优选地约30分钟施 用。将类固醇优选地以25至500mg、更优选地50至250mg或100至150mg的剂量、尤其以 约125mg的剂量施用。
[0173] 在本发明的一个具体的优选实施方案中，用抗HER2抗体治疗患者与N-(4_羟苯 基）乙酰胺和甲泼尼龙前驱用药如下组合以有效地减少或防止IRR :
[0174] a)在施用抗体之前晚间lOOOrng N-(4_羟苯基）乙酰胺的第一剂量，
[0175] b)在施用抗体之前1小时lOOOrng N-(4_羟苯基）乙酰胺的第二剂量，和
[0176] c)在施用抗体之前30分钟125mg甲泼尼龙的一个剂量。
[0177] 在这个方案中，将岩藻糖减少的抗HER2抗体以上文描述的剂量施用；参考以上公 开内容。
[0178] 在某些实施方案中，不施用类固醇，优选地不施用类固醇和抗组胺药。特别地，仅 用具有镇痛和/或退热特性的药剂治疗或预防输注相关反应。
[0179] 在另一个方面，本发明提供一种具有镇痛和/或退热特性的药剂用于治疗或预防 施用抗HER2抗体引起的输注相关反应。抗HER2抗体优选地是如本文定义的岩藻糖减少的 抗HER2抗体。本发明其他方面的特征和实施方案因此适用于本发明的这个方面。
[0180] 治疗方法
[0181] 在又一个方面，本发明涉及一种治疗患有HER2阳性肿瘤性疾病的患者的方法，包 括向所述患者以足够治疗该肿瘤性疾病的量施用在CH2结构域中具有50%或更少、优选地 30%或更少、更优选地15%至0%岩藻糖量的抗册1?2抗体（岩藻糖减少的抗册1?2抗体）。
[0182] 在某些实施方案中，本发明提供一种治疗患有HER2阳性癌症的人类患者的方法， 其中癌症是转移性癌症，所述方法包括施用在CH2结构域中具有50%或更少、优选地30% 或更少、更优选地15%至0%岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）。
[0183] 如上文描述，本发明提供一种在用高岩藻糖抗HER2抗体或未糖基化的抗HER2抗 体治疗后治疗患有J1ER2阳性肿瘤性疾病、尤其HER2阳性癌症的患者的方法，所述方法包括 向所述患者以足够治疗该肿瘤性疾病的量施用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体。特别地，岩藻糖 减少的抗HER2抗体在CH2结构域中具有50 %或更少的岩藻糖量并且高岩藻糖抗HER2抗体 在CH2结构域中具有60%或更多的岩藻糖量。在优选的实施方案中，在用岩藻糖减少的抗 HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗过：
[0184] a)至少一种化疗药；
[0185] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体），或至少一种未糖基化的抗HER2抗体；
[0186] c)任选地放疗法；和
[0187] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0188]其中先期治疗a)、b)、c)和d)以任何顺序依次或同时进行。
[0189] 在某些实施方案中，本发明涉及一种治疗患有HER2阳性癌症的人类患者的方法， 其中HER2阳性癌症具有程度2+或更低、优选地程度1+的HER2过表达，如通过免疫组织化 学（IHC)所确定，所述方法包括施用在CH2结构域中具有50%或更少、优选地30%或更少、 更优选地15%至0%岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）。
[0190] 上文和下文描述的全部实施方案和特征均还同样适用于本发明的治疗方法。
[0191] 本发明的具体实施方案
[0192] 下文将描述本发明的具体实施方案和特别优选的实施方案：
[0193] 治疗转移性癌症的具体实施方案
[0194] 在所述第一方面的第一具体实施方案中，本发明涉及一种用于治疗患有转移性 HER2阳性癌症、优选地乳腺癌或结肠癌的患者的岩藻糖减少的抗HER2抗体，其中岩藻糖减 少的抗J1ER2抗体
[0195] (i)在CH2结构域中具有20%或更少的岩藻糖量、至少8%的对分型GlcNAc量和 至少65 %的半乳糖量；
[0196] (ii)包含一个重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列或与 其至少80%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID NO: 1的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:2的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:3的氨基酸序列；
[0197] (iii)包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID N0:8的氨基酸序列或与 其至少80%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID N0:4的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:5的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:6的氨基酸序列；
[0198] 并且其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗过：
[0199] a)至少一种、至少两种和优选地至少三种不同化疗药；和/或
[0200] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体），其中其重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列与岩藻糖减少的抗HER2抗 体，优选地曲妥珠单抗(赫赛幻的那些氨基酸序列至少80%、优选地至少90%相同；
[0201] c)任选地放疗法；和
[0202] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0203]其中先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行。优选 地，在这个第一实施方案中先期治疗包括以下一种或多种
[0204] ⑴至少一次采用高岩藻糖抗HER2抗体曲妥珠单抗(赫赛汁?)治疗作为单一疗 法的治疗和/或至少一次采用一种化疗药、优选地采用紫杉烷如多西紫杉醇和长春瑞滨的 联合治疗，尤其至少一次采用高岩藻糖抗ffiR2抗体曲妥珠单抗(赫赛幻的单一疗法和 额外地至少一次、优选地至少两次采用高岩藻糖抗HER2抗体曲妥珠单抗（赫赛汀）的联合 治疗；
[0205] (ii)至少一次采用至少一种紫杉烷的治疗，优选地采用一种、两种或更多种不同 紫杉烷、优选地采用紫杉醇和多西紫杉醇的至少两次独立治疗；
[0206] (iii)至少一次采用基于钼的化疗药如顺钼的治疗，优选地与化疗药如吉西他滨 组合；
[0207] (iv)放疗法，优选地作为辅助疗法；
[0208] (V)至少一次、优选地至少2次、至少3次或至少4次采用化疗药或不同化疗药组 合如多柔比星和环磷酰胺组合、拉帕替尼和卡培他滨组合、伊达比星和依托泊苷及阿糖胞 苷组合以及贝伐珠单抗和长春瑞滨和卡培他滨组合的治疗；
[0209] 和 / 或
[0210] (vi)手术摘除原发肿瘤和/或一个或多个转移灶的至少部分。
[0211] 特别地，在这个第一实施方案中，先期治疗患者包括治疗（i)至（vi)的至少2种、 优选地至少3种、至少4种、至少5种或全部6种。优选地，先期治疗包括至少治疗（i)、（v) 和（vi)。
[0212] 在第二具体实施方案中，本发明涉及一种用于治疗患有转移性HER2阳性癌症的 患者的岩藻糖减少的抗J1ER2抗体，其中岩藻糖减少的抗HER2抗体
[0213] ⑴在CH2结构域中具有20%或更少的岩藻糖量、至少8%的对分型GlcNAc量和 至少65 %的半乳糖量，具有不可检出的NeuGc，具有不可检出的Gal a 2, 6-偶联的NeuAc，并 且优选地，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体在人细胞系中重组地产生；
[0214] (ii)包含一个重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列或与 其至少80%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID NO: 1的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:2的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:3的氨基酸序列；
[0215] (iii)包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID N0:8的氨基酸序列或与 其至少80%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID N0:4的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:5的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:6的氨基酸序列；
[0216] (iv)能够诱导比曲妥珠单抗(赫赛汀?)更强的ADCC;
[0217] 并且其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗过：
[0218] a)至少两种、优选地至少三种不同的化疗药；和
[0219] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体），其中其重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列与岩藻糖减少的抗HER2抗 体，优选地曲妥珠单抗(赫赛幻的那些氨基酸序列至少80 %、优选地90 %相同；
[0220] c)任选地放疗法；和
[0221] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0222] 其中先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行并且其 中岩藻糖减少的抗J1ER2抗体用于治疗选自以下的转移灶：皮肤转移灶、尤其溃疡性皮肤转 移灶、淋巴结转移灶和内脏转移灶、尤其肺或肝转移。优选的先期治疗是在上文结合第一具 体实施方案一起描述，将它相应的发明公开中提及。
[0223] 在第一或第二具体实施方案中的治疗的患者可以具有以下特征：
[0224] ⑴患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的缬氨酸纯合（Fc YRIIIa_158V/ V);或
[0225] (ii)患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合 (Fc YRIIIa-158F/F)或患者对Fc Y受体（Ilia)的氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸 杂合（FcyRIIIa-158V/F)。
[0226] 特别地，第一和第二具体实施方案的岩藻糖减少的抗HER2抗体可以用于治疗患 者，无论他们的FcyRIIla同种异型是什么。在第一和第二具体实施方案中，HER2阳性癌症 和/或转移可以具有程度2+或更低、优选地1+或更低的HER2过表达，如通过免疫组织化学 所确定。优选地，J1ER2阳性癌症和/或转移对HER2基因扩增呈阳性，如通过FISH或CISH 所确定。根据一个方面，在第一或第二具体实施方案中待治疗的患者对Fc Y受体Ilia的 氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合（FcYRIIIa-158F/F)或该患者对Fcy受体（Ilia)的 氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸杂合$(^1?1113-158￥/^)，并且另外任选地，册1?2 阳性癌症和/或转移具有程度2+或更低，优选地1+或更低的HER2过表达，如通过免疫组 织化学所确定。
[0227] 上文描述了合适的和优选的岩藻糖减少的抗HER2抗体剂量以及适用和优选的前 驱用药方案；参考也适用于第一和第二具体实施方案的以上公开内容。根据第一和第二具 体实施方案的岩藻糖减少的抗ffiR2抗体可以用作单一疗法或用作联合疗法。上文描述了 实施方案并且参考相应的发明公开。
[0228] 如上文所述，本发明涉及一种治疗患有HER2阳性癌症的人类患者的方法，其中癌 是转移性癌症，所述方法包括施用在CH2结构域中具有50%或更少、优选地30%或更少、更 优选地15%至0%岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减少的抗HER2抗体）。
[0229] 上文或下文描述的全部实施方案和特征也同样地适用于本发明的治疗方法。
[0230] 如上文所述，在某个方面，本发明涉及一种用于治疗患有HER2阳性癌症的人类患 者的在〇12结构域中具有50%或更少的岩藻糖量的抗册1?2抗体（岩藻糖减少的抗册1?2抗 体），其中癌是转移性癌症。
[0231] 优选地，抗HER2抗体用于治疗转移灶，其中转移灶包括皮肤转移灶、尤其溃疡性 皮肤转移灶、内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶及淋巴结转移灶中的一种或多种。 根据一个实施方案，患者具有一个或多个内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶。优 选地，HER2阳性癌症具有以下一个或多个特征：（i)它是乳腺癌，优选地是转移化乳腺癌； (ii) 它是浸润性乳腺导管癌，优选地伴发淋巴结受累；（iii)它与淋巴结转移灶和/或皮 肤转移灶相关，尤其与淋巴结转移灶引起的纵隔腺病和/或皮肤转移灶引起的皮肤溃疡相 关；（iv)它与内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶相关；(v)它选自由结肠癌、唾液 腺癌症如腮腺癌、肺癌如非小细胞肺癌和支气管癌。根据一个实施方案，HER2阳性转移灶具 有以下一个或多个特征：（i)雌激素受体阴性（ER-)和/或孕酮受体阴性（PgR_) ;(ii)至 少程度1+、优选地程度2+或程度3+的HER2过表达，如通过免疫组织化学所确定；（iii)程 度2+或更低、优选地程度1+或更低的HER2过表达，如通过免疫组织化学所确定；（v)它们 对HER2基因扩增呈阳性，如通过荧光原位杂交（FISH)或生色原原位杂交（CISH)所确定。
[0232] 根据一个实施方案，抗HER2抗体用于（i)治疗原发肿瘤；（ii)治疗复发肿瘤； (iii) 抑制肿瘤生长；（iv)治疗转移灶，包括皮肤转移灶、尤其溃疡性皮肤转移灶、淋巴结 转移灶、内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶；和/或（v)治疗由转移灶引起的损害、 尤其皮肤损害或淋巴结损害、更具体地皮肤溃疡。优选地，用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体治 疗导致以下一种或多种情况：（i)防止其他转移灶；（ii)减少由一个或多个转移灶引起的 损害，尤其皮肤溃疡；（iii)减少转移灶的数目。根据一个实施方案，在用岩藻糖减少的抗 HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗：a)至少一种化疗药；和/或b)至少一种在 〇12结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗册1?2抗体（高岩藻糖抗册1?2抗体），或至少一 种未糖基化的抗J1ER2抗体；c)任选地放疗法；和d)任选地至少一种其他治疗性抗体；其中 先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行。根据一个实施方案， 肿瘤性疾病在先期治疗后复发或进展。如实施例中所示，本发明的抗J1ER2抗体在成功治疗 其中先期治疗失败或其中癌复发或其他转移灶形成的先期治疗患者，包括深度先期治疗患 者方面特别有效。
[0233] 根据一种实施方案，在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，患者已经用至少2 种、优选地至少3种、至少4种或至少5种不同抗癌药，尤其化疗药以单一疗法或联合疗法 治疗过。优选地，先期治疗包括1种或多种、优选地至少2种、至少3种、至少4种或至少5 种、最优选地全部以下治疗：（i)至少一次采用曲妥珠单抗(赫赛幻乍为单一疗法的治 疗；（ii)至少一次采用曲妥珠单抗(赫赛幻联合一种化疗药，优选地联合紫杉烷如多 西紫杉醇和长春瑞滨的治疗；（iii)至少一次采用紫杉烷的治疗，优选地采用不同紫杉烷、 优选地采用紫杉醇和多西紫杉醇的至少两次分立治疗；（iv)至少一次基于钼的化疗药如 顺钼，优选地联合一种化疗药如吉西他滨的治疗；(v)放疗法，优选地作为辅助疗法；(vi) 至少一次采用不同化疗药组合如多柔比星和环磷酰胺组合、拉帕替尼和卡培他滨组合、伊 达比星和依托泊苷和阿糖胞苷组合以及贝伐珠单抗和长春瑞滨和卡培他滨组合的治疗。根 据一个实施方案，患者的先期治疗涉及癌症手术，优选地手术摘除原发肿瘤和/或转移灶。 根据一个优选实施方案，J1ER2阳性癌症耐受用至少一种化疗药治疗或在所述治疗后已经进 展和/或耐受用高岩藻糖曲妥珠单抗(赫赛〗丁?)和/或高岩藻糖培妥珠单抗（Omnitarg) 治疗或在所述治疗后已经进展。根据一个实施方案，用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗用于 辅助治疗，用于新辅助治疗、用于新辅助_辅助治疗或用于姑息治疗。优选地，将岩藻糖减 少的抗J1ER2抗体反复地施用至患者并且至少在第二次施用岩藻糖减少的抗HER2抗体后、 优选地已经在第一次施用岩藻糖减少的抗HER2抗体后获得治疗效果。优选地，治疗效果包 括减少皮肤损害，尤其溃疡性皮肤损害、减少纵隔腺病和/或减少内脏转移灶、尤其肺转移 灶和/或肝转移灶。
[0234] 优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体在CH2结构域中具有20 %或更少、15 %或更少、 10%或更少、5%或更少或0%，尤其2%至20%、3%至15%或5%至10%的岩藻糖量。优 选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体具有在CH2结构域中一个或多个、优选地全部以下糖基化 特征：（i)至少8%的对分型GlcNAc量；（ii)至少65%的半乳糖量；（iii)任选地无可检出 NeuGc ; (iv)任选地无可检出Gal a 1，3-Gal ; (v)任选地可检测的a 2, 6-偶联NeuAc。优选 地，岩藻糖减少的抗HER2抗体具有一个或多个、优选地至少两个、更优选地全部以下特征： (i)它包含一个重链可变区，所述重链可变区包含具有SEQ ID N0:1的氨基酸序列的⑶R1、 具有SEQ ID N0:2的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID N0:3的氨基酸序列的CDR3 ; (ii) 它包含一个重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列或与其至少80% 相同的氨基酸序列；（iii)它包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含具有SEQ ID N0:4 的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO: 5的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO: 6的氨基 酸序列的CDR3 ; (iv)它包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:8的氨基酸 序列或与其至少80%相同的氨基酸序列；(v)它与抗体曲妥珠单抗显示交叉特异性；(vi) 它包含与抗体曲妥珠单抗的氨基酸序列至少90%相同的重链和轻链氨基酸序列；(vii)它 在结合作用和Fv介导的抗肿瘤反应方面与抗体曲妥珠单抗等同；(viii)它在人细胞系中 重组产生。优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体能够诱导比相应的高岩藻糖抗HER2抗体诱 导更强烈的ADCC，所述相应的高岩藻糖抗HER2抗体优选地是曲妥珠单抗(赫赛幻~?)。
[0235] 根据一个实施方案，高岩藻糖抗HER2抗体（其优选地是曲妥珠单抗(赫赛汁?) )在CH2结构域中具有70%或更多、尤其80%或更多的岩藻糖量。优选地，在先期治疗中 使用的高岩藻糖抗J1ER2抗体具有一个或多个、优选地至少3个以下特征：（i)它是IgG抗 体；（ii)它与岩藻糖减少的抗HER2抗体显示交叉特异性；（iii)它能够特异性结合与岩藻 糖减少的抗J1ER2抗体相同的表位；（iv)其重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列与岩藻 糖减少的抗J1ER2抗体的那些氨基酸序列至少80%、至少90%或至少95%、更优选地100% 相同；(v)它是抗体曲妥珠单抗(赫赛汀?); (vi)它能够与HER2特异性结合，其中高岩藻 糖抗HER2抗体的表位与藻糖减少的抗HER2抗体的表位不同；和/或（vii)它是抗体培妥 珠单抗（Omnitarg)。
[0236] 根据一个实施方案，用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗是单一疗法。可选地，用岩 藻糖减少的抗J1ER2抗体治疗是联合疗法，尤其联合（i)至少一种化疗药；和/或（ii)至少 一种与岩藻糖减少的抗HER2抗体不同的其他治疗性抗体；和/或（iv)癌症手术和/或放 疗法。
[0237] 如上文所述的，用岩藻糖减少的抗HER2抗体待治疗的患者可以已经接受现有癌 症疗法。根据一个实施方案，现有疗法涉及至少一种化疗药。这里，在患者的先期治疗中 使用的至少一种化疗药可以选自环磷酰胺；拉帕替尼；卡培他滨；阿糖胞苷；长春瑞滨； 贝伐珠单抗；吉西他滨；美坦辛；蒽环类如佐柔比星、多柔比星、表柔比星、伊达比星、戊柔 比星和米托蒽醌；紫杉烧如紫杉醇（Taxol)、多西紫杉醇（Taxotere)和SB-T-1214 ;芳香 酶抑制剂如氨鲁米特、睾内酯（Teslac)、阿那曲唑（Arimidex)、来曲唑（Femara)、依西美 坦（Aromasin)、伏氯唑（Rivizor)、福美坦（Lentaron)、法倔唑（Afema)、4_ 轻雄甾烯二 酮、1，4, 6-雄留三烯-3, 17-二酮（ATD)和4-雄留烯-3, 6, 17-三酮（6-0X0);拓扑异构 酶抑制剂如依立替康、拓扑替康、喜树碱、片螺素D、依托泊苷（VP-16)、替尼泊苷、多柔比 星、佐柔比星、米托蒽醌、安吖啶、椭圆玫瑰树碱、金精三羧酸和HU-331 ;基于钼的化疗药如 顺-二氯二氨合钼（II)(顺钼）、顺-二氨（1，1-环丁烷基二羧酸根合）钼（II)(卡钼）和 [(1R，2R)_环己烷-1，2-二胺](乙二酸根合-0,0'）钼（II)(奥沙利钼）；和抗代谢物、尤 其抗叶酸如甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞和普拉曲沙、嘧啶类似物如氟尿嘧啶、吉西他滨、 氟尿苷、5_氟尿嘧啶和替加氟-尿嘧啶以及嘌呤类似物。
[0238] 优选地，患者的先期治疗涉及使用至少一种治疗性抗体，所述治疗性抗体与岩藻 糖减少的抗ffiR2抗体不同并且尤其选自在其作用模式方面与岩藻糖减少的抗HER2抗体 不同的抗HER2抗体、尤其培妥珠单抗、抗EGFR抗体如西妥昔单抗（Erbitux)、帕木单抗 (Vectibix)和尼妥珠单抗（Theraloc);抗VEGF抗体如贝伐珠单抗（Avastin);抗⑶52抗体 如阿伦珠单抗（Campath);抗CD30抗体如贝伦妥单抗（Adcetris);抗CD33抗体如吉妥珠单 抗（Mylotarg);和抗⑶20抗体如利妥昔单抗（Rituxan，Mabthera)、托西莫单抗（Bexxar) 和替伊莫单抗（Zevalin)。
[0239] 根据一个实施方案，用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗是采用至少一种不同抗癌 药的联合疗法，其中所述抗癌药选自（i)化疗药，其中化疗药优选地是紫杉烷，和（ii)抗癌 症治疗性抗体，其中治疗性抗体优选地是在其作用模式方面与岩藻糖减少的抗HER2抗体 不同的抗J1ER2抗体如培妥珠单抗（如果岩藻糖减少的抗HER2抗体对应于曲妥珠单抗）、 抗EGFR抗体如西妥昔单抗（爱必妥（Erbitux))和/或抗VEGF抗体如贝伐珠单抗（阿瓦 斯汀）。
[0240] 优选地，将岩藻糖减少的抗HER2抗体按照每周、每两周、每三周或每四周或更低 频率以1至l〇mg/kg患者体重的量、优选地每三周或更低频率以2至8mg/kg患者体重的量 施用。优选地，当岩藻糖减少的抗HER2抗体以相同剂量、但以低于高岩藻糖抗HER2抗体的 频率施用时或者当岩藻糖减少的抗J1ER2抗体以相同频率施用、但以低于高岩藻糖抗HER2 抗体的剂量施用时，岩藻糖减少的抗J1ER2抗体具有高于高岩藻糖抗HER2抗体的治疗功效。
[0241] 如本文所述，改善的治疗功效允许治疗不能用现有抗HER2抗体治疗或可能用现 有抗HER2抗体治疗较低效的不同患者。因此，存在不同选项：（i)患者对Fcy受体Ilia的 氨基酸位置158中的缬氨酸纯合（FCYRIIIa-158V/V) ;(ii)患者对Fcy受体Ilia的氨基 酸位置158中的苯丙氨酸纯合（FcYRIIIa-158F/F)或患者对Fcy受体（Ilia)的氨基酸 位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸杂合（Fc YRIIIa-158V/F) ; (iii)岩藻糖减少的抗HER2抗 体用于治疗患者，无论他们的FcyRIIIa同种异型是什么；或（iv)患者对Fcy受体Ilia 的氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合（FcYRIIIa-158F/F)或患者对Fcy受体（Ilia)的 氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸杂合（Fc YRIIIa-158V/F)并且其中HER2阳性癌症 和/或转移具有程度2+或更低，优选地1+或更低的HER2过表达，如通过免疫组织化学所 确定，并且其中优选地，HER2阳性癌症和/或转移对HER2基因扩增呈阳性，如通过FISH或 CISH所确定。
[0242] 在某些实施方案中，用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗与用具有镇痛和/或退热特 性的药剂、尤其用N-(4-羟苯基）乙酰胺对患者作前驱用药组合。
[0243] 优选地，前驱用药包括至少两个分立剂量的具有镇痛和/或退热特性的药剂，其 中第一剂量在施用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体之前8小时至48小时给予并且第二剂量在施 用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体之前5分钟至6小时给予。优选地，每个剂量含有250mg和 1500mg、尤其lOOOmg具有镇痛和/或退热特性的药剂。优选地，前驱用药还包括施用类固 醇，优选地糖皮质激素，尤其甲泼尼龙。优选地，类固醇在施用抗体之前5分钟至4小时、 尤其30分钟施用。优选地，前驱用药包括以下步骤或由其组成：a)在施用抗体之前晚间 lOOOmg N-(4-羟苯基）乙酰胺的第一剂量，b)在施用岩藻糖减少的抗HER2抗体之前1小 时1000mgN-(4-羟苯基）乙酰胺的第二剂量；和c)在施用岩藻糖减少的抗HER2抗体之前 30分钟125mg甲泼尼龙的一个剂量。
[0244] 在某些实施方案中，根据如上文所述的前驱用药，本发明提供镇痛药和/或退热 药以治疗或预防由施用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体引起的输注相关反应。
[0245] 治疗先期治疗患者的具体实施方案
[0246] 在下文中，列出根据第二方面的本发明具体实施方案，其涉及治疗已经接受现有 癌症疗法的患者。上文所述的全部特征和实施方案还适用于以下实施方案并且可以与之组 合。
[0247] 1. -种在CH2结构域中具有50%或更少岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减少的 抗HER2抗体），用于治疗患有HER2阳性肿瘤性疾病、尤其HER2阳性癌症的患者，其中在用 岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前所述患者已经用以下治疗过
[0248] a)至少一种化疗药；和
[0249] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体），或至少一种未糖基化的抗HER2抗体；
[0250] c)任选地放疗法；
[0251] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0252]其中先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行。
[0253] 2.根据实施方案1的抗HER2抗体，其中肿瘤性疾病在先期治疗后复发或进展。
[0254] 3.根据实施方案1或2的抗HER2抗体，其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗 之前，患者已经用至少2种、优选地至少3种、至少4种或至少5种不同化疗药以单一疗法 或联合疗法治疗过。
[0255] 4.根据实施方案1至3中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中先期治疗包括一种 或多种，优选地至少2种、至少3种、至少4种或至少5种或以下全部疗法：
[0256] ⑴至少一次采用曲妥珠单抗(赫赛汀⑧)作为单一疗法治疗；
[0257] (ii)至少一次采用曲妥珠单抗（赫赛汀）联合一种化疗药、优选地联合紫杉烷如 多西紫杉醇和长春瑞滨治疗；
[0258] (iii)至少一次采用一种紫杉烷治疗，优选地采用不同紫杉烷、优选地采用紫杉醇 和多西紫杉醇的至少两次独立治疗；
[0259] (iv)至少一次采用基于钼的化疗药如顺钼的治疗，优选地联合一种化疗药如吉西 他滨；
[0260] (V)放疗法，优选地作为辅助疗法；
[0261] (vi)至少一次采用不同化疗药组合如多柔比星和环磷酰胺组合、拉帕替尼和卡培 他滨组合、伊达比星和依托泊苷及阿糖胞苷组合以及贝伐珠单抗和长春瑞滨及卡培他滨组 合的治疗。
[0262] 5.根据实施方案1至4中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中患者的先期治疗涉 及癌症手术，优选地手术摘除原发肿瘤和/或转移灶。
[0263] 6.根据实施方案1至5中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中HER2阳性癌症是 转移性癌症。
[0264] 7.根据实施方案6的抗HER2抗体，其中转移灶包括皮肤转移灶、内脏转移灶、尤其 肺转移灶和/或肝转移灶及淋巴结转移灶中的一种或多种。
[0265] 8.根据实施方案7的抗HER2抗体，其中患者具有一个或多个溃疡性皮肤转移灶。
[0266] 9.根据实施方案1至8中任一个实施方案的抗HER2抗体，用于治疗具有以下一个 或多个特征的J1ER2阳性癌症：
[0267] ⑴它是乳腺癌，优选地转移化乳腺癌；
[0268](ii)它是浸润性乳腺导管癌，优选地伴发淋巴结受累；
[0269] (iii)它与淋巴结转移灶和/或皮肤转移灶相关，尤其与淋巴结转移灶引起的纵 隔腺病和/或皮肤转移灶引起的皮肤溃疡相关；
[0270] (iv)它与内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶相关。
[0271] 10.根据实施方案1至9中任一个实施方案的抗HER2抗体，用于治疗具有以下一 个或多个特征的J1ER2阳性肿瘤和/或转移灶：
[0272] ⑴雌激素受体阴性（ER-)和/或孕酮受体阴性（PgR_);
[0273] (ii)至少程度1+、优选地程度2+或程度3+的HER2过表达，如通过免疫组织化学 所确定；
[0274] (iii)程度2+或更低、优选地程度1+或更低的HER2过表达，如通过免疫组织化学 所确定；
[0275] (v)它对HER2基因扩增呈阳性，如通过荧光原位杂交（FISH)或生色原原位杂交 (CISH)确定。
[0276] 11.根据实施方案1至10中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中HER2阳性癌症 抵抗用至少一种化疗药治疗或在所述治疗后已经进展和/或抵抗用高岩藻糖曲妥珠单抗 (赫赛汀）和/或高岩藻糖培妥珠单抗（Omnitarg)治疗或在所述治疗后已经进展。
[0277] 12.根据实施方案1至11中任一个实施方案的抗HER2抗体，用于
[0278] (i)治疗原发肿瘤；
[0279] (ii)治疗复发性肿瘤；
[0280] (iii)抑制肿瘤生长；
[0281] (iv)治疗转移灶，包括皮肤转移灶、尤其溃疡性皮肤转移灶、淋巴结转移灶、内脏 转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶；和/或
[0282] (V)治疗由肿瘤或转移灶引起的损害、尤其皮肤损害或淋巴结损害、更具体地皮肤 溃瘍。
[0283] 13.根据实施方案1至12中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中用岩藻糖减少的 抗HER2抗体治疗导致以下一种或多种情况：
[0284] (i)抑制肿瘤生长；
[0285] (ii)缩减肿瘤尺寸；
[0286] (iii)阻止其他转移灶；
[0287] (iv)减少由原发肿瘤和/或一个或多个转移灶引起的损害，尤其皮肤溃疡；
[0288] (V)减少转移灶数目；
[0289] (vii)无进展存活期增加；和/或
[0290] (viii)寿命增加。
[0291] 14.根据实施方案1至13中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中用岩藻糖减少的 抗HER2抗体治疗用于辅助治疗、用于新辅助治疗、用于新辅助-辅助治疗或用于姑息治疗。
[0292] 15.根据实施方案1至14中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中将岩藻糖减少的 抗HER2抗体反复地施用至患者并且其中至少在第二次施用岩藻糖减少的抗HER2抗体后、 优选地已经在第一次施用岩藻糖减少的抗HER2抗体后获得治疗效果。
[0293] 16.根据实施方案15的抗HER2抗体，其中治疗效果包括减少皮肤病灶、尤其溃疡 性皮肤病灶、减少纵隔腺病和/或减少内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶。
[0294] 17.根据实施方案1至16中任一个实施方案的抗HER2抗体，其在CH2结构域中具 有20%或更少、15%或更少、10%或更少、5%或更少或0%，优选地2%至20%、3%至15% 或5 %至10%的岩藻糖量。
[0295] 18.根据实施方案1至17中任一个实施方案的抗HER2抗体，其在CH2结构域中具 有一个或多个、优选地全部以下糖基化特征：
[0296] ⑴至少8%的对分型GlcNAc量；
[0297] (ii)至少65 %的半乳糖量；
[0298] (iii)任选地无可检出NeuGc ;
[0299] (iv)任选地无可检出 Gal a 1，3-Gal ;
[0300] (v)任选地可检测的a 2, 6-偶联NeuAc。
[0301] 19.根据实施方案1至18中任一个实施方案的抗HER2抗体，其具有一个或多个、 优选地至少两个、更优选地全部以下特征：
[0302] (i)它包含一个重链可变区，所述重链可变区包含具有SEQ ID NO: 1的氨基酸序 列的〇?1、具有3￡0 10勵:2的氨基酸序列的〇)1?2和具有3￡0 10勵:3的氨基酸序列的 CDR3 ;
[0303] (ii)它包含一个重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列或 与其至少80 %相同的氨基酸序列；
[0304] (iii)它包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含具有SEQ ID N0:4的氨基酸序 列的〇?1、具有3￡0 10勵:5的氨基酸序列的〇)1?2和具有3￡0 10勵:6的氨基酸序列的 CDR3 ;
[0305] (iv)它包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQIDN0:8的氨基酸序列或 与其至少80 %相同的氨基酸序列；
[0306] (V)它与抗体曲妥珠单抗显示交叉特异性；
[0307] (vi)它包含与抗体曲妥珠单抗的氨基酸序列至少90%相同的重链和轻链氨基酸 序列；
[0308] (vii)它在结合作用和Fv介导的抗肿瘤反应方面等同于抗体曲妥珠单抗；
[0309] (ix)它在人细胞系中重组产生。
[0310] 20.根据实施方案1至19中任一个实施方案的抗HER2抗体，能够比相应的高岩藻 糖抗HER2抗体诱导更强烈的ADCC。
[0311] 21.根据实施方案1至20中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中高岩藻糖抗HER2 抗体在CH2结构域中具有70%或更多的岩藻糖量。
[0312] 22.根据实施方案1和21中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中在先期治疗中使 用的高岩藻糖抗J1ER2抗体具有一个或多个、优选地至少三个以下特征：
[0313] ⑴它是IgG抗体；
[0314] (ii)它与岩藻糖减少的抗HER2抗体显示交叉特异性；
[0315] (iii)它能够特异性结合与岩藻糖减少的抗HER2抗体相同的表位；
[0316] (iv)其重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列与岩藻糖减少的抗HER2抗体的那 些氨基酸序列至少80%、至少90%或至少95%、更优选地100%相同；
[0317] (V)它是抗体曲妥珠单抗(赫赛幻~?);
[0318] (vi)它能够与HER2特异性结合，其中高岩藻糖抗HER2抗体的表位与岩藻糖减少 的抗HER2抗体的表位不同；和/或
[0319] (vii)它是抗体培妥珠单抗（Omnitarg)。
[0320] 23.根据实施方案1至22中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中用岩藻糖减少的 抗HER2抗体治疗是单一疗法。
[0321] 24.根据实施方案1至23中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中用岩藻糖减少的 抗HER2抗体治疗是联合疗法，尤其联合
[0322] ⑴至少一种化疗药；和/或
[0323] (ii)至少一种与岩藻糖减少的抗HER2抗体不同的其他治疗性抗体；和/或
[0324] (iv)癌症手术和/或放疗法。
[0325] 25.根据实施方案1至24中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中
[0326] a)在患者的先期治疗中使用的至少一种化疗药可以选自环磷酰胺；拉帕替 尼；卡培他滨；阿糖胞苷；长春瑞滨；贝伐珠单抗；吉西他滨；美坦辛；蒽环类如佐柔比 星、多柔比星、表柔比星、伊达比星、戊柔比星和米托蒽醌；紫杉烷如紫杉醇（Taxol)、多 西紫杉醇（Taxotere)和SB-T-1214;芳香酶抑制剂如氨鲁米特、睾内酯（Teslac)、阿那 曲唑（Arimidex)、来曲唑（Femara)、依西美坦（Aromasin)、伏氯唑（Rivizor)、福美坦 (Lentaron)、法倔唑（Afema)、4_轻雄留烯二酮、1，4, 6-雄留三烯-3, 17-二酮（ATD)和4-雄 留烯_3, 6, 17-二酮（6-0X0);拓扑异构酶抑制剂如依立替康、拓扑替康、喜树喊、片螺素D、 依托泊苷（VP-16)、替尼泊苷、多柔比星、佐柔比星、米托蒽醌、安吖啶、椭圆玫瑰树碱、金精 三羧酸和HU-331 ;基于钼的化疗药如顺-二氯二氨合钼（II)(顺钼）、顺-二氨（1，1-环丁 烷基二羧酸根合）钼（II)(卡钼）和[(1R，2R)_环己烷-1，2-二胺](乙二酸根合-0,0'） 钼（II)(奥沙利钼）；和抗代谢物、尤其抗叶酸如甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞和普拉曲 沙、嘧啶类似物如氟尿嘧啶、吉西他滨、氟尿苷、5-氟尿嘧啶和替加氟-尿嘧啶以及嘌呤类 似物；和/或
[0327] b)其中用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗是采用至少一种不同抗癌药的联合疗 法，其中所述抗癌药选自（i)化疗药，其中化疗药优选地是紫杉烷，和（ii)抗癌症治疗性 抗体，其中治疗性抗体优选地是在其作用模式方面与岩藻糖减少的抗ffiR2抗体不同的抗 HER2抗体如培妥珠单抗（如果岩藻糖减少的抗HER2抗体对应于曲妥珠单抗）、抗EGFR抗 体如西妥昔单抗（爱必妥（Erbitux))和/或抗VEGF抗体如贝伐珠单抗（阿瓦斯汀）。
[0328] 26.根据实施方案1至25中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中患者的先期 治疗涉及使用至少一种治疗性抗体，所述治疗性抗体与岩藻糖减少的抗J1ER2抗体不同 并且尤其选自在其作用模式方面与岩藻糖减少的抗ffiR2抗体不同的抗HER2抗体、尤其 培妥珠单抗、抗EGFR抗体如西妥昔单抗（Erbitux)、帕木单抗（Vectibix)和尼妥珠单抗 (Theraloc);抗VEGF抗体如贝伐珠单抗（Avastin);抗⑶52抗体如阿伦珠单抗（Campath); 抗CD30抗体如贝伦妥单抗（Adcetris);抗CD33抗体如吉妥珠单抗（Mylotarg);和抗CD20 抗体如利妥昔单抗（1^1^111311，1&1131：116以)、托西莫单抗（1361131')和替伊莫单抗（26￥31；[11)。
[0329] 27.根据实施方案1至26中任一个实施方案的抗HER2抗体，每周、每两周、每三周 或每四周或更低频率以1至l〇mg/kg患者体重的量、优选地每三周或更低频率以2至5mg/ kg患者体重的量施用岩藻糖减少的抗HER2抗体。
[0330] 28.根据实施方案1至27中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中当岩藻糖减少的 抗HER2抗体以相同剂量、但以低于高岩藻糖抗HER2抗体的频率施用时或者当岩藻糖减少 的抗HER2抗体以相同频率施用、但以低于高岩藻糖抗HER2抗体的剂量施用时，岩藻糖减少 的抗HER2抗体具有高于高岩藻糖抗HER2抗体的治疗功效。
[0331] 29.根据实施方案1至28中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中：
[0332] ⑴患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的缬氨酸纯合（Fc YRIIIa_158V/ V)；
[0333] (ii)患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合 (Fc YRIIIa-158F/F)或患者对Fc Y受体（Ilia)的氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸 杂合（Fc YRIIIa-158V/F);
[0334] (iii)岩藻糖减少的抗HER2抗体用于治疗患者，无论他们的Fc Y Rllla同种异型 是什么；或
[0335] (iv)患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的苯丙氨酸（Fc YRIIIa_158F/ F)纯合或患者对Fc Y受体（Ilia)的氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸 (FcyRIIIa-158V/F)杂合并且其中HER2阳性癌症和/或转移具有程度2+或更低、优选地 1+或更低的J1ER2过表达，如通过免疫组织化学所确定并且其中优选地，HER2阳性癌症和/ 或转移对J1ER2基因扩增呈阳性，如通过FISH或CISH所确定。
[0336] 30.根据实施方案1至29中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中抗HER2抗体治 疗与用具有镇痛和/或退热特性的药物、尤其用N-(4-羟苯基）乙酰胺对患者作前驱用药 组合。
[0337] 31.根据实施方案30的抗HER2抗体，其中前驱用药包括至少两个分立剂量的具有 镇痛和/或退热特性的药剂，其中第一剂量在施用抗体之前8小时至48小时给予并且第二 剂量在施用抗体之前5分钟至6小时给予。
[0338] 32.根据实施方案30的抗HER2抗体，其中每个剂量含有250mg和1500mg、尤其 lOOOmg具有镇痛和/或退热特性的药剂。
[0339] 33.根据30至32实施方案之一的抗HER2抗体，其中前驱用药还包括施用类固醇、 优选地糖皮质激素、尤其甲泼尼龙。
[0340] 34.根据实施方案33的抗HER2抗体，其中类固醇在施用抗体之前5分钟至4小 时、尤其30分钟施用。
[0341] 35.根据实施方案30至34之一的抗HER2抗体，其中前驱用药包括以下步骤或由 其组成：
[0342] a)在施用抗体之前晚间lOOOmg N-(4-羟苯基）乙酰胺的第一剂量，
[0343] b)在施用抗体之前1小时lOOOmg N-(4-羟苯基）乙酰胺的第二剂量，和
[0344] c)在施用抗体之前30分钟125mg甲泼尼龙的一个剂量。
[0345] 36.根据实施方案1至35中任一个实施方案的抗HER2抗体，用于治疗HER2阳性 癌症，所述HER2阳性癌症选自结肠癌、唾液腺癌如腮腺癌、肺癌如非小细胞肺癌和支气管 癌。
[0346] 37. -种镇痛和/或退热药，用于根据实施方案30至35中任一个实施方案的前驱 用药，治疗或预防由施用包含抗HER2抗体的组合物引起的输注相关反应。
[0347] 在又一个方面，本发明涉及一种在高用岩藻糖抗HER2抗体治疗后治疗患有HER2 阳性肿瘤性疾病、尤其HER2阳性癌症的患者的方法，所述方法包括向所述患者以足够治疗 该肿瘤性疾病的量施用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体。特别地，岩藻糖减少的抗HER2抗体在 CH2结构域中具有50%或更少的岩藻糖量并且高岩藻糖抗HER2抗体在CH2结构域中具有 60%或更多的岩藻糖量。在优选的实施方案中，在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前， 所述患者已经用以下治疗过 ：
[0348] a)至少一种化疗药；
[0349] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体），或至少一种未糖基化的抗HER2抗体；
[0350] c)任选地放疗法；和
[0351] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0352]其中先期治疗a)、b)、c)和d)以任何顺序依次或同时进行。
[0353] 上文描述的全部实施方案和特征均还同样适用于本发明的治疗方法。
[0354] 治疗具有低HER2表达的癌的具体实施方案
[0355] 在下文中，列出根据第三方面的本发明具体实施方案，其涉及治疗具有低HER2表 达的癌症。上文所述的全部特征和实施方案还适用于以下实施方案并且可以与之组合。
[0356] 1. 一种在CH2结构域中具有50%或更少岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减少的 抗HER2抗体），用于治疗患有HER2阳性肿瘤性疾病、尤其HER2阳性癌症的患者，其中HER2 阳性肿瘤具有程度2+或更低、优选地程度1+的HER2过表达，如通过免疫组织化学（IHC) 所确定。
[0357] 2.根据实施方案1的抗HER2抗体，其中HER2阳性肿瘤性疾病是转移性癌症。
[0358] 3.根据实施方案1或2的抗HER2抗体，其中：
[0359] (i)患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合 (Fc YRIIIa-158F/F)或患者对Fc Y受体（Ilia)的氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸 杂合（FcYRIIIa-158V/F);或
[0360] (ii)患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合 (Fc YRIIIa-158F/F)或患者对Fc Y受体（Ilia)的氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸 杂合（FcyRIIIa-158V/F)并且其中HER2阳性癌症和/或转移具有程度2+或更低、优选地 1+或更低的J1ER2过表达，如通过免疫组织化学所确定并且其中HER2阳性癌症和/或转移 对HER2基因扩增呈阳性，如通过FISH或CISH所确定。
[0361] 4.根据实施方案1至3中任一个所述的抗HER2抗体，其中在用岩藻糖减少的抗 HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗：
[0362] a)至少一种化疗药；和/或
[0363] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体），或至少一种未糖基化的抗HER2抗体；
[0364] c)任选地放疗法；和
[0365] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0366]其中先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行。
[0367]5.根据实施方案4的抗HER2抗体，其中HER2阳性癌症在先期治疗后复发或进展。
[0368] 6.根据实施方案4或5的抗HER2抗体，其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗 之前，患者已经用至少2种、优选地至少3种、至少4种或至少5种不同的抗癌药、尤其化疗 药和/或治疗性抗体以单一疗法或联合疗法治疗过。
[0369] 7.根据实施方案4至6中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中先期治疗包括一种 或多种，优选地至少2种、至少3种、至少4种或至少5种或以下全部疗法：
[0370] (i)至少一次采用曲妥珠单抗(赫赛汁?>作为单一疗法治疗；
[0371] (ii)至少一次采用曲妥珠单抗（赫赛汀）联合一种化疗药、优选地联合紫杉烷如 多西紫杉醇和长春瑞滨治疗；
[0372] (iii)至少一次采用一种紫杉烷治疗，优选地采用不同紫杉烷、优选地采用紫杉醇 和多西紫杉醇的至少两次独立治疗；
[0373] (iv)至少一次采用基于钼的化疗药如顺钼的治疗，优选地联合一种化疗药如吉西 他滨；
[0374] (V)放疗法，优选地作为辅助疗法；
[0375] (vi)至少一次采用不同化疗药组合如多柔比星和环磷酰胺组合、拉帕替尼和卡培 他滨组合、伊达比星和依托泊苷及阿糖胞苷组合以及贝伐珠单抗和长春瑞滨及卡培他滨组 合的治疗。
[0376] 8.根据实施方案4至7中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中患者的先期治疗涉 及癌症手术，优选地手术摘除原发肿瘤和/或转移灶。
[0377] 9.根据实施方案1至8中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中癌选自乳腺癌、胃 癌、癌、结肠癌、移行细胞癌、膀胱癌、尿路上皮瘤、子宫癌、晚期食管腺癌、胃腺癌或食管胃 结合部腺癌、卵巢癌、肺癌、肺腺癌、子宫内膜癌、肾癌、胰腺癌、甲状腺癌、结直肠癌、前列腺 癌、脑癌、宫颈癌、肠癌和肝癌、优选地结肠癌、唾液腺癌症如腮腺癌、肺癌如非小细胞肺癌 和支气管癌，并且尤其前述癌的转移形式。
[0378] 10.根据实施方案2至9中一个或多个实施方案的抗HER2抗体，其中转移灶包括 皮肤转移灶、内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶及淋巴结转移灶中的一种或多种。
[0379] 11.根据实施方案10的抗HER2抗体，其中患者具有一个或多个溃疡性皮肤转移 灶。
[0380] 12.根据实施方案1至11中任一个实施方案的抗HER2抗体，用于治疗具有以下一 个或多个特征的J1ER2阳性癌症：
[0381] ⑴它是乳腺癌，优选地转移化乳腺癌；
[0382] (ii)它是浸润性乳腺导管癌，优选地伴发淋巴结受累；
[0383] (iii)它是结肠癌；
[0384] (iv)它是膀胱癌；
[0385] (V)它与淋巴结转移灶和/或皮肤转移灶相关，尤其与淋巴结转移灶引起的纵隔 腺病和/或皮肤转移灶引起的皮肤溃瘍相关；
[0386] (vi)它与内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶相关。
[0387] 13.根据实施方案1至12中任一个实施方案的抗HER2抗体，用于治疗具有以下一 个或多个特征的J1ER2阳性肿瘤和/或转移灶：
[0388] ⑴雌激素受体阴性（ER-)和/或孕酮受体阴性（PgR_)
[0389] (ii)它们对HER2基因扩增呈阳性，如通过荧光原位杂交（FISH)或生色原原位杂 交（CISH)确定。
[0390] 14.根据实施方案4至13中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中HER2阳性癌症 抵抗用至少一种化疗药治疗或在所述治疗后已经进展和/或抵抗用高岩藻糖曲妥珠单抗 (赫赛汀）和/或高岩藻糖培妥珠单抗（Omnitarg)治疗或在所述治疗后已经进展。
[0391] 15.根据实施方案1至14中任一个实施方案的抗HER2抗体，用于
[0392] (i)治疗原发肿瘤；
[0393] (ii)治疗复发性肿瘤；
[0394] (iii)抑制肿瘤生长；
[0395] (iv)用于治疗转移灶，包括皮肤转移灶、尤其溃疡性皮肤转移灶、淋巴结转移灶、 内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶；和/或
[0396] (V)治疗由肿瘤或转移灶引起的损害、尤其皮肤损害或淋巴结损害、更具体地皮肤 溃瘍。
[0397] 16.根据实施方案1至15中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中用岩藻糖减少的 抗HER2抗体治疗导致以下一种或多种情况：
[0398] ⑴抑制肿瘤生长；
[0399] (ii)缩减肿瘤尺寸；
[0400] (iii)阻止其他转移灶；
[0401] (iv)减少由原发肿瘤和/或一个或多个转移灶引起的损害，尤其皮肤溃疡；
[0402] (V)减少转移灶数目；
[0403] (vii)无进展存活期增加；和/或
[0404] (viii)寿命增加。
[0405] 17.根据实施方案1至16中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中用岩藻糖减少的 抗HER2抗体治疗用于辅助治疗、用于新辅助治疗、用于新辅助-辅助治疗或用于姑息治疗。
[0406] 18.根据实施方案1至17中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中将岩藻糖减少的 抗HER2抗体反复地施用至患者并且其中至少在第二次施用岩藻糖减少的抗HER2抗体后、 优选地已经在第一次施用岩藻糖减少的抗HER2抗体后获得治疗效果。
[0407] 19.根据实施方案18的抗HER2抗体，其中治疗效果包括减少皮肤病灶、尤其溃疡 性皮肤病灶、减少纵隔腺病和/或减少内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶和/或导 致疼痛减少。
[0408] 20.根据实施方案1至19中任一个实施方案的抗HER2抗体，其在CH2结构域中具 有20%或更少、15%或更少、10%或更少、5%或更少、10%至3%或0%，优选地2%至20%、 3%至15%或5%至10%的岩藻糖量。
[0409] 21.根据实施方案1至20中任一个实施方案的抗HER2抗体，其在CH2结构域中具 有20 %或更少、优选地15 %或更少、更优选地10 %或更少的岩藻糖量和一种或多种，优选 地全部以下糖基化特征：
[0410] (1)至少8%的对分型61〇嫩(：量；
[0411] (ii)至少65%的半乳糖量；
[0412] (iii)任选地无可检出NeuGc ;
[0413] (iv)任选地无可检出 Gal a 1，3-Gal ;
[0414] (v)任选地可检测的a 2, 6-偶联NeuAc。
[0415] 22.根据实施方案1至21中任一个实施方案的抗HER2抗体，其具有一个或多个、 优选地至少两个、更优选地全部以下特征：
[0416] (i)它包含一个重链可变区，所述重链可变区包含具有SEQ ID NO: 1的氨基酸序 列的〇?1、具有3￡0 10勵:2的氨基酸序列的〇)1?2和具有3￡0 10勵:3的氨基酸序列的 CDR3 ;
[0417] (ii)它包含一个重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列或 与其至少80 %相同的氨基酸序列；
[0418] (iii)它包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含具有SEQ ID N0:4的氨基酸序 列的〇?1、具有3￡0 10勵:5的氨基酸序列的〇)1?2和具有3￡0 10勵:6的氨基酸序列的 CDR3 ;
[0419] (iv)它包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQIDN0:8的氨基酸序列或 与其至少80 %相同的氨基酸序列；
[0420] (V)它与抗体曲妥珠单抗显示交叉特异性；
[0421] (vi)它包含与抗体曲妥珠单抗的氨基酸序列相同至少90 %的重链和轻链氨基酸 序列；
[0422] (vii)它在结合作用和Fv介导的抗肿瘤反应方面等同于抗体曲妥珠单抗；
[0423] (viii)它在人细胞系中重组产生。
[0424] 23.根据实施方案1至22中任一个实施方案的抗HER2抗体，能够比相应的高岩藻 糖抗HER2抗体诱导更强烈的ADCC。
[0425] 24.根据实施方案4至23中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中在先期治疗中使 用的高岩藻糖抗J1ER2抗体在CH2结构域中具有70%或更多的岩藻糖量。
[0426] 25.根据实施方案4和24中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中在先期治疗中使 用的高岩藻糖抗J1ER2抗体具有一个或多个、优选地至少三个以下特征：
[0427] ⑴它是IgG抗体；
[0428] (ii)它与岩藻糖减少的抗HER2抗体显示交叉特异性；
[0429] (iii)它能够特异性结合与岩藻糖减少的抗HER2抗体相同的表位；
[0430] (iv)其重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列与岩藻糖减少的抗HER2抗体的那 些氨基酸序列相同至少80%、至少90%或至少95%、更优选地100% ;
[0431] (V)它是抗体曲妥珠单抗(赫赛汁?);
[0432] (vi)它能够与HER2特异性结合，其中高岩藻糖抗HER2抗体的表位与岩藻糖减少 的抗HER2抗体的表位不同；和/或
[0433] (vii)它是抗体培妥珠单抗（Omnitarg)。
[0434] 26.根据实施方案1至25中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中用岩藻糖减少的 抗HER2抗体治疗是单一疗法。
[0435] 27.根据实施方案1至26中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中用岩藻糖减少的 抗HER2抗体治疗是联合疗法，尤其联合
[0436] ⑴至少一种化疗药；和/或
[0437] (ii)至少一种与岩藻糖减少的抗HER2抗体不同的其他治疗性抗体；和/或
[0438] (iii)癌症手术和/或放疗法。
[0439] 28.根据实施方案1至27中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中
[0440] a)在根据实施方案4的患者先期治疗中使用的至少一种化疗药可以选自环磷酰 胺；拉帕替尼；卡培他滨；阿糖胞苷；长春瑞滨；贝伐珠单抗；吉西他滨；美坦辛；蒽环类如 佐柔比星、多柔比星、表柔比星、伊达比星、戊柔比星和米托蒽醌；紫杉烷如紫杉醇（Taxol)、 多西紫杉醇（Taxotere)和SB-T-1214;芳香酶抑制剂如氨鲁米特、睾内酯（Teslac)、阿 那曲唑（Arimidex)、来曲唑（Femara)、依西美坦（Aromasin)、伏氯唑（Rivizor)、福美坦 (Lentaron)、法倔唑（Afema)、4_轻雄留烯二酮、1，4, 6-雄留三烯-3, 17-二酮（ATD)和4-雄 留烯_3, 6, 17-二酮（6-0X0);拓扑异构酶抑制剂如依立替康、拓扑替康、喜树喊、片螺素D、 依托泊苷（VP-16)、替尼泊苷、多柔比星、佐柔比星、米托蒽醌、安吖啶、椭圆玫瑰树碱、金精 三羧酸和HU-331 ;基于钼的化疗药如顺-二氯二氨合钼（II)(顺钼）、顺-二氨（1，1-环丁 烷基二羧酸根合）钼（II)(卡钼）和[(1R，2R)_环己烷-1，2-二胺](乙二酸根合-0,0'） 钼（II)(奥沙利钼）；和抗代谢物、尤其抗叶酸如甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞和普拉曲 沙、嘧啶类似物如氟尿嘧啶、吉西他滨、氟尿苷、5-氟尿嘧啶和替加氟-尿嘧啶以及嘌呤类 似物；和/或
[0441] b)其中用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗是采用至少一种不同抗癌药的联合疗 法，其中所述抗癌药选自（i)化疗药，其中化疗药优选地是紫杉烷，和（ii)抗癌症治疗性 抗体，其中治疗性抗体优选地是在其作用模式方面与岩藻糖减少的抗ffiR2抗体不同的抗 HER2抗体如培妥珠单抗（如果岩藻糖减少的抗HER2抗体对应于曲妥珠单抗）、抗EGFR抗 体如西妥昔单抗（爱必妥（Erbitux))和/或抗VEGF抗体如贝伐珠单抗（阿瓦斯汀）。
[0442] 29.根据实施方案1至28中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中患者的先期 治疗涉及使用至少一种治疗性抗体，所述治疗性抗体与岩藻糖减少的抗J1ER2抗体不同 并且尤其选自在其作用模式方面与岩藻糖减少的抗ffiR2抗体不同的抗HER2抗体、尤其 培妥珠单抗、抗EGFR抗体如西妥昔单抗（Erbitux)、帕木单抗（Vectibix)和尼妥珠单抗 (Theraloc);抗VEGF抗体如贝伐珠单抗（Avastin);抗⑶52抗体如阿伦珠单抗（Campath); 抗CD30抗体如贝伦妥单抗（Adcetris);抗CD33抗体如吉妥珠单抗（Mylotarg);和抗CD20 抗体如利妥昔单抗（1^1^1?311，1&1131：116以)、托西莫单抗（1361131')和替伊莫单抗（26￥31；[11)。
[0443] 30.根据实施方案1至29中任一个实施方案的抗HER2抗体，每周、每两周、每三周 或每四周或更低频率以1至l〇mg/kg患者体重的量、优选地每三周或更低频率以2至5mg/ kg患者体重的量施用岩藻糖减少的抗HER2抗体。
[0444] 31.根据实施方案4至30中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中当岩藻糖减少的 抗HER2抗体以相同剂量、但以低于高岩藻糖抗HER2抗体的频率施用时或者当岩藻糖减少 的抗HER2抗体以相同频率施用、但以低于高岩藻糖抗HER2抗体的剂量施用时，岩藻糖减少 的抗HER2抗体具有高于相应的高岩藻糖抗HER2抗体的治疗功效。
[0445] 32.根据实施方案1至31中任一个实施方案的抗HER2抗体，其中抗HER2抗体治 疗与用具有镇痛和/或退热特性的药物、尤其用N-(4-羟苯基）乙酰胺对患者作前驱用药 组合。
[0446] 33.根据实施方案32的抗HER2抗体，其中前驱用药包括至少两个分立剂量的具有 镇痛和/或退热特性的药剂，其中第一剂量在施用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体之前8小时至 48小时给予并且第二剂量在施用岩藻糖减少的抗HER2抗体之前5分钟至6小时给予。
[0447] 34.根据实施方案33的抗HER2抗体，其中每个剂量含有250mg和1500mg、尤其 lOOOmg具有镇痛和/或退热特性的药剂。
[0448] 35.根据32至34实施方案之一的抗HER2抗体，其中前驱用药还包括施用类固醇、 优选地糖皮质激素、尤其甲泼尼龙。
[0449] 36.根据实施方案35的抗HER2抗体，其中类固醇在施用岩藻糖减少的抗HER2抗 体之前5分钟至4小时、尤其30分钟施用。
[0450] 37.根据实施方案32至34之一的抗HER2抗体，其中前驱用药包括以下步骤或由 其组成：
[0451] a)在施用岩藻糖减少的抗HER2抗体之前晚间lOOOmg N-(4_羟苯基）乙酰胺的第 一剂量，
[0452] b)在施用岩藻糖减少的抗HER2抗体之前1小时1000mgN-(4_羟苯基）乙酰胺的 第二剂量，和
[0453] c)在施用抗体之前30分钟125mg甲泼尼龙的一个剂量。
[0454] 38. -种镇痛和/或退热药，用于根据实施方案32至37中任一个实施方案的前驱 用药，治疗或预防由施用包含岩藻糖减少的抗J1ER2抗体的组合物引起的输注相关反应。
[0455] 下文中将再次描述这个方面的具体和特别优选的实施方案：
[0456] 下文将描述本发明的具体实施方案和特别优选的实施方案：
[0457] 在第一具体实施方案中，本发明涉及用于治疗患有HER2阳性癌症的患者的岩藻 糖减少的抗J1ER2抗体，其中HER2阳性癌症具有程度2+或更低、优选地程度1+的HER2过 表达，如通过免疫组织化学（IHC)所确定，并且其中优选地，癌症是转移性癌症，其中岩藻 糖减少的抗J1ER2抗体
[0458] (i)在CH2结构域中具有20%或更少、优选地15%或更少、更优选地10%至0%或 10%至3%量的岩藻糖、至少8%量的对分型GlcNAc和至少65%量的半乳糖；
[0459] (ii)包含一个重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列或与 其至少80%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID NO: 1的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:2的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:3的氨基酸序列；
[0460] (iii)包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID N0:8的氨基酸序列或与 其至少80%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID N0:4的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:5的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:6的氨基酸序列；
[0461] 并且其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗过：
[0462] a)至少一种、至少两种和优选地至少三种不同化疗药；和/或
[0463] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体），其中其重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列与岩藻糖减少的抗HER2抗 体，优选地曲妥珠单抗（赫赛〗丁?)的那些氨基酸序列至少80%、优选地90%相同；
[0464] c)任选地放疗法；和
[0465] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0466]其中先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行。优选 地，在这个第一实施方案中先期治疗包括以下一种或多种
[0467] ⑴至少一次采用高岩藻糖抗HER2抗体曲妥珠单抗(赫赛汀?)治疗作为单一疗 法的治疗和/或至少一次采用一种化疗药、优选地采用紫杉烷如多西紫杉醇和长春瑞滨的 联合治疗，尤其至少一次采用高岩藻糖抗ffiR2抗体曲妥珠单抗(赫赛幻的单一疗法和 额外地至少一次、优选地至少两次采用高岩藻糖抗HER2抗体曲妥珠单抗（赫赛汀）的联合 治疗；
[0468] (ii)至少一次采用至少一种紫杉烷的治疗，优选地采用一种、两种或更多种不同 紫杉烷、优选地采用紫杉醇和多西紫杉醇的至少两次独立治疗；
[0469] (iii)至少一次采用基于钼的化疗药如顺钼的治疗，优选地与化疗药如吉西他滨 组合；
[0470] (iv)放疗法，优选地作为辅助疗法；
[0471] (V)至少一次、优选地至少2次、至少3次或至少4次采用化疗药或不同化疗药组 合如多柔比星和环磷酰胺组合、拉帕替尼和卡培他滨组合、伊达比星和依托泊苷及阿糖胞 苷组合以及贝伐珠单抗和长春瑞滨和卡培他滨组合的治疗；
[0472] 和 / 或
[0473] (vi)手术摘除原发肿瘤和/或一个或多个转移灶的至少部分。
[0474] 特别地，在这个第一实施方案中，先期治疗患者包括治疗（i)至（vi)的至少2种、 优选地至少3种、至少4种、至少5种或全部6种。优选地，先期治疗包括至少治疗（i)、（v) 和（vi)。
[0475] 在第二具体实施方案中，本发明涉及用于治疗患有HER2阳性癌症的患者的岩藻 糖减少的抗J1ER2抗体，其中HER2阳性癌症具有程度2+或更低、优选地程度1+的HER2过 表达，如通过免疫组织化学（IHC)所确定，并且其中优选地，癌是转移性癌症，其中岩藻糖 减少的抗J1ER2抗体
[0476] ⑴在CH2结构域中具有15%或更少，优选地10%至0%或10%至2%的岩藻糖 量、至少8%的对分型GlcNAc量和至少65%的半乳糖量，具有不可检出的NeuGc，具有不可 检出的Gal a 2, 6-偶联的NeuAc，并且优选地，岩藻糖减少的抗HER2抗体在人细胞系中重组 地产生；
[0477] (ii)包含一个重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列或与 其至少80%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID NO: 1的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:2的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:3的氨基酸序列；
[0478] (iii)包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID N0:8的氨基酸序列或与 其至少80%相同的氨基酸序列，其中⑶R1具有SEQ ID N0:4的氨基酸序列，⑶R2具有SEQ ID N0:5的氨基酸序列并且CDR3具有SEQ ID N0:6的氨基酸序列；
[0479] (iv)能够诱导比曲妥珠单抗(赫赛汀?)更强的ADCC ;
[0480] 并且其中在用岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之前，所述患者已经用以下治疗过：
[0481] a)至少两种、优选地至少三种不同的化疗药；和
[0482] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体），其中其重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列与岩藻糖减少的抗HER2抗 体，优选地曲妥珠单抗(赫赛汀?)的那些氨基酸序列至少so %、优选地9〇 %相同；
[0483] c)任选地放疗法；和
[0484] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0485]其中先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行并且其 中岩藻糖减少的抗J1ER2抗体用于治疗选自以下的转移灶：皮肤转移灶、尤其溃疡性皮肤转 移灶、淋巴结转移灶和内脏转移灶、尤其肺或肝转移。优选的先期治疗是在上文结合第一具 体实施方案一起描述，将它相应的发明公开中提及。
[0486] 在第一或第二具体实施方案中的治疗的患者可以具有以下特征：
[0487] (i)患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的缬氨酸纯合（Fc YRIIIa_158V/ V);或
[0488] (ii)患者对Fc Y受体Ilia的氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合 (Fc YRIIIa-158F/F)或患者对Fc Y受体（Ilia)的氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸 杂合（FcyRIIIa-158V/F)。
[0489] 特别地，第一和第二具体实施方案的岩藻糖减少的抗HER2抗体可以用于治疗患 者，无论他们的FcyRIIla同种异型是什么。在第一和第二具体实施方案中，HER2阳性癌症 和/或转移可以具有程度2+或更低、优选地1+或更低的HER2过表达，如通过免疫组织化学 所确定。优选地，J1ER2阳性癌症和/或转移对HER2基因扩增呈阳性，如通过FISH或CISH 所确定。根据一个方面，在第一或第二具体实施方案中待治疗的患者对Fc Y受体Ilia的 氨基酸位置158中的苯丙氨酸纯合（FcYRIIIa-158F/F)或该患者对Fcy受体（Ilia)的 氨基酸位置158中的缬氨酸和苯丙氨酸杂合$(^1?1113-158￥/^)，并且另外任选地，册1?2 阳性癌症和/或转移具有程度2+或更低，优选地1+或更低的HER2过表达，如通过免疫组 织化学所确定。
[0490] 上文描述了合适的和优选的岩藻糖减少的抗HER2抗体剂量以及适用和优选的前 驱用药方案；参考也适用于第一和第二具体实施方案的以上公开内容。根据第一和第二具 体实施方案的岩藻糖减少的抗ffiR2抗体可以用作单一疗法或用作联合疗法。上文描述了 实施方案并且参考相应的发明公开。
[0491] 如上文所述的，本发明涉及一种治疗患有HER2阳性癌症的人类患者的方法，其中 HER2阳性癌症具有程度2+或更低、优选地程度1+的HER2过表达，如通过免疫组织化学 (IHC)所确定，并且其中优选地，癌是转移性癌症，所述方法包括施用在CH2结构域中具有 50%或更少、优选地30%或更少、更优选地15%至0%岩藻糖量的抗HER2抗体（岩藻糖减 少的抗J1ER2抗体）。
[0492] 如上文描述，本发明涉及一种在高用岩藻糖抗HER2抗体治疗后治疗患有HER2阳 性肿瘤性疾病、尤其J1ER2阳性癌症的患者的方法，所述方法包括向所述患者以足够治疗该 肿瘤性疾病的量施用岩藻糖减少的抗J1ER2抗体。特别地，岩藻糖减少的抗HER2抗体在CH2 结构域中具有50%或更少的岩藻糖量并且高岩藻糖抗HER2抗体在CH2结构域中具有60% 或更多的岩藻糖量。在优选的实施方案中，在用岩藻糖减少的抗ffiR2抗体治疗之前，所述 患者已经用以下治疗过：
[0493] a)至少一种化疗药；
[0494] b)至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖 抗HER2抗体）；
[0495] c)任选地放疗法；和
[0496] d)任选地至少一种其他治疗性抗体；
[0497]其中先期治疗a)、b)、c)和d)以任何顺序依次或同时进行。该癌症可以是HER2 阳性癌症，具有程度2+或更低、优选地程度1+的HER2过表达，如通过免疫组织化学（IHC) 所确定，
[0498] 上文描述的全部实施方案和特征均还同样适用于本发明的治疗方法。
[0499] 本申请要求以下在先申请的权益：2012年7月18日提交的US 61/673, 20U2012 年7月18日提交的US 61/673, 216、2012年7月18日提交的US61/673, 229和2012年12 月18日提交的EP 12 197 768.0,所述申请均通过引用的方式并入本文。
[0500] 本文所述的数值范围包括界定该范围的数值。本文提供的小标题不是本发明的各 个方面或实施方式的限制，其中可以通过参考作为一个整体的本说明书来阅读本发明。根 据一个实施方案，本文在方法的情况下作为包括某些步骤或在组合物的情况下作为包含某 些成分所述的主题物指由相应步骤或成分组成的主题物。优选的是选择并组合本文所述的 优选方面和实施方案并且源自优选实施方案相应组合的具体主题物也属于本公开。

【专利附图】

【附图说明】
[0501] 图1显示在第一次输注后随输注剂量/体重变化而变化的血清半寿期tl/2。 Fuc-曲妥珠单抗：黑色圆圈；Fuc+曲妥珠单抗丨赫赛：?丁灰色圆圈。
[0502] 图2显示在第1次给药后8日内开始并在（第2次给药）6周后完成的溃疡性皮 肤转移灶大幅度愈合。剂量：每三周240mg Fuc-曲妥珠单抗。A :在治疗之前（基线）；B :1 周后（周期1，第8日），1个剂量的240mg Fuc-曲妥珠单抗；C:3周后（周期2,第1日），1 个剂量的240mg Fuc-曲妥珠单抗；D :5周后（周期2,第15日），2个剂量的240mg Fuc-曲 妥珠单抗；E :6周后（周期3,第1日），2个剂量的240mg Fuc-曲妥珠单抗。
[0503] 图3显示通过流式细胞术分析的Fuc-曲妥珠单抗和Fuc+曲妥珠单抗(赫赛幻~_?) 在不同细胞系上的结合作用。显示重复的均值土SD。A :赫赛：?丁_? B :Fuc-曲妥珠单抗。
[0504] 图4A显示与Fuc-曲妥珠单抗和Fuc+曲妥珠单抗(赫赛彡丁_?>温育4日后ZR-75-1 细胞上的HER2/neu表达。显示从各自一式两份进行的两个独立流式细胞术实验中相对于 培养基对照获得的J1ER2阳性细胞百分比的均值土 SD。
[0505] 图4B显示来自ZR-75-1细胞的裂解物的蛋白质印迹，所述ZR-75-1细胞与浓度 0? 1 ii g/ml的Fuc-曲妥珠单抗、Fuc+曲妥珠单抗(赫赛丁'&)或hlgGl及作为阴性对照的 培养基温育3日。
[0506]图5显示Fuc-曲妥珠单抗和Fuc+曲妥珠单抗丨赫赛？T_?^t SK-BR-3细胞的增殖 抑制作用。与抗体温育的时间是4日。与培养基对照相比显示增殖百分比。给出以6个重 复测量进行的3个独立实验的均值+SEM。
[0507] 图6显示使用与Fuc-曲妥珠单抗和Fuc+曲妥珠单抗(赫赛汀?)和蛋白G温育6 小时后的BT474细胞的活性胱天蛋白酶-3凋亡测定法。显示了重复测量的切割的胱天蛋 白酶-3阳性细胞（凋亡细胞）百分比的均值土SD。
[0508] 图7显示使用具有不同Fc Y Rllla同种异型的供体的原代人PBMC，在SK-BR-3细 胞上采用Fuc-曲妥珠单抗和Fuc+曲妥珠单抗(赫赛幻的ADCC测定法。给出三次重复 的特异性溶解的均值土SEM。A :VV供体；B :FV供体；C :FF供体。
[0509] 图8显示采用具有不同Fc yRIIIa同种异型的供体的原代人PBMC，在MCF-7细 胞上的ADCC测定法。温育时间5小时，E:T比：50:1。给出三次重复的特异性溶解的均值 土 SEM。A :VV 供体；B :FV 供体；C :FF 供体。
[0510] 图9 (A和B)显示在MCF-7细胞上实现相同特异性溶解所需要的Fuc-曲妥珠单抗 浓度和赫赛彡丁?浓度的比较（在赫赛汀95%最大溶解作用的某个特异性溶解）以及降低 Fuc-曲妥珠单抗浓度以实现与95 %赫赛彡丁?最大溶解相同的特异性溶解的倍数（改善 倍数）。黑色符号代表各位供体，红色符号全部供体的均值（参见A)。全部供体的均值显 示为B中的线。对于HER2表达较低的肿瘤（MCF-7)，Fuc -曲妥珠单抗介导的最大ADCC增 加直至140倍，平均42。因此，对于全部患者同种异型均实现明显改善的抗肿瘤ADCC。
[0511] 图10、图11和图12显示与图6至图8中显示的那些实现相似的实验的结果。在 相应的实施例15的描述中提供进一步解释。
[0512] 图13A显示Fuc-曲妥珠单抗和赫赛$丁_?在携带BT474人乳腺癌异体移植物的裸 鼠中的体内抗肿瘤活性。当肿瘤达到可触及尺寸时，以所指示的剂量水平处理小鼠。将抗体 每周二次静脉内施用4周。每个符号表示一组8只动物的均值和SEM。图13B显示不同浓 度的Fuc-曲妥珠单抗在携带BT474人乳腺癌异体移植物的裸鼠中的体内抗肿瘤活性。当 肿瘤达到可触及尺寸时，以所指示的剂量水平处理小鼠。将抗体每周二次静脉内施用4周。 每个符号表示一组8只动物的均值和SEM。
[0513] 图14显示Fuc-曲妥珠单抗在携带患者衍生的#7268胃癌异体移植物（MV9138)的 裸鼠中的体内抗肿瘤活性。当肿瘤达到可触及尺寸时，以所指示的剂量水平处理小鼠。将 抗体每周二次静脉内施用4周。每个符号表示一组8只动物的均值和SEM。
[0514] 图15A显示在单剂量静脉内施用30mg/kg体重后Fuc-曲妥珠单抗和赫赛^丁_?的 药物代谢动力学。在给药后的10个时间点测量动物的抗体血清浓度。每个符号表示一组 3只动物的均值和SEM。用1/Y2加权的两级指数衰减拟合数据点。图15B显示在单次静脉 内输注后Fuc-曲妥珠单抗和赫赛幻'⑧的血清浓度。每个符号表示一组3m只动物的均值 和标准偏差。 实施例
[0515] 实施例1 :曲妥珠单抗变体的糖基化分析
[0516] 通过如WO 2008/028686A2中所述在具有减少的岩藻糖化活性的人髓样白血病细 胞系中表达，获得了本发明的岩藻糖减少的抗HER2抗体，在此为曲妥珠单抗的低岩藻糖化 变体（Fuc-曲妥珠单抗，随后又称作TrasGEX?)，所述专利通过引用的方式并入本文。高 岩藻糖抗J1ER2抗体曲妥珠单抗（Fuc+曲妥珠单抗）在仓鼠CH0细胞中产生并且因此基本 上对应于曲妥珠单抗.(赫赛汀?)。
[0517] 为了更详细地表征Fuc-曲妥珠单抗的糖基化模式，进行糖谱分析研究。人源化 IgGl抗体曲妥珠单抗在重链恒定区2中包含一个N-糖基化位点。对于糖谱分析，从蛋白 质芯释放完整的N聚糖并将N-聚糖的还原性末端用荧光标志物标记。通过UPLC分离标记 的N-聚糖的纯化样品。将基于荧光测量检测的峰面积用于计算N-聚糖结构的相对摩尔丰 度。表1中汇总抗体的估计数据。这些值代表含有目的类型单糖（例如岩藻糖）的N-聚 糖的相对摩尔含量。
[0518] 表 1

【权利要求】
1. 一种用于治疗患有HER2阳性癌症的人类患者的抗HER2抗体，所述抗体在CH2结构 域中具有50%或更少的岩藻糖量（岩藻糖减少的抗HER2抗体），其中所述癌症是转移性癌 症。
2. 根据权利要求1所述的抗HER2抗体，其中所述岩藻糖减少的抗HER2抗体在CH2结 构域中具有以下糖基化特征： (i) 20%或更少相对量的携带岩藻糖的糖链； (ii) 至少8%相对量的携带对分型GlcNAc的糖链； (iii) 至少65%相对量的携带至少一个半乳糖单位的糖链；和 (iv) 至少15%相对量的携带至少两个半乳糖单位的糖链。
3. 根据权利要求2所述的抗HER2抗体，其中用所述岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗之 前，所述患者已经用至少一种在CH2结构域中具有60%或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高 岩藻糖抗HER2抗体）治疗。
4. 根据权利要求1至3中任一项所述的抗HER2抗体，其用于治疗转移灶，其中所述转 移灶包括皮肤转移灶、尤其溃疡性皮肤转移灶、内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移灶 及淋巴结转移灶中的一种或多种。
5. 根据权利要求4所述的抗HER2抗体，其中患者具有一个或多个内脏转移灶、尤其肺 转移灶和/或肝转移灶。
6. 根据权利要求1至5中任一项所述的抗HER2抗体，其用于治疗HER2阳性癌症，所述 HER2阳性癌症是转移性乳腺癌、尤其浸润性乳腺导管癌，优选地伴发淋巴结受累。
7. 根据权利要求1至6中任一项所述的抗HER2抗体，其用于治疗HER2阳性转移性癌 症，所述HER2阳性转移性癌症选自结肠癌、唾液腺癌如腮腺癌、肺癌如非小细胞肺癌和支 气管癌。
8. 根据权利要求1至7中任一项所述的抗HER2抗体，其用于治疗具有程度2+或更低、 优选地程度1+或更低的HER2过表达的HER2阳性转移灶，如通过免疫组织化学所确定。
9. 根据权利要求1至8中任一项所述的抗HER2抗体，其用于治疗由转移引起的皮肤损 害或淋巴结损害，特别地是皮肤溃疡。
10. 根据权利要求1至9中任一项所述的抗HER2抗体，其中在用所述岩藻糖减少的抗 HER2抗体治疗之前,所述患者已经用以下治疗： a) 至少一种化疗药；和/或 b) 至少一种在CH2结构域中具有60 %或更多岩藻糖量的抗HER2抗体（高岩藻糖抗 HER2抗体），或至少一种未糖基化的抗HER2抗体； c) 任选地放疗法；和 d) 任选地至少一种其他治疗性抗体； 其中先期治疗a)、b)、任选地c)和任选地d)以任何顺序依次或同时进行。
11. 根据权利要求10所述的抗HER2抗体，其中在用所述岩藻糖减少的抗HER2抗体治 疗之前，患者已经在单一疗法或联合疗法中用至少5种不同的抗癌药、尤其化疗药治疗。
12. 根据权利要求10或11所述的抗HER2抗体，其中所述HER2阳性癌症抵抗用至少一 种化疗药治疗或在所述治疗后已经进展和/或抵抗用高岩藻糖曲妥珠单抗（赫赛汁⑧） 和/或高岩藻糖培妥珠单抗（Omnitarg)治疗或在所述治疗后已经进展。
13. 根据权利要求1至12中任一项所述的抗HER2抗体，其中将所述岩藻糖减少的抗 HER2抗体反复地施用至患者并且其中至少在第二次施用所述岩藻糖减少的抗HER2抗体 后、优选地已经在第一次施用所述岩藻糖减少的抗HER2抗体后获得治疗效果。
14. 根据权利要求13所述的抗HER2抗体，其中所述治疗效果包括：减少皮肤损害、尤 其溃疡性皮肤损害；减少纵隔腺病；和/或减少内脏转移灶、尤其肺转移灶和/或肝转移 灶。
15. 根据权利要求1至14中任一项所述的抗HER2抗体，其在CH2结构域中具有20% 或更少、15%或更少、10%或更少、5%或更少或0%，优选地2%至20%、3%至15%或5%至 10%的岩藻糖量。
16. 根据权利要求1至15中任一项所述的抗HER2抗体，其在CH2结构域中具有以下糖 基化特征： ⑴至少8%的对分型GlcNAc量； (ii) 至少65 %的半乳糖量； (iii) 无可检出NeuGc ; (iv) 无可检出 Gal a 1，3_Gal ;和 (V)可检出的α 2, 6-偶联NeuAc。
17. 根据权利要求1至16中任一项、尤其权利要求14所述的抗HER2抗体，其具有以下 特征： (i) 其包含一个重链可变区，所述重链可变区包含具有SEQ ID Ν0:1的氨基酸序列的 CDRl、具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR3 ; (ii) 其包含一个重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列或与其 至少80 %相同的氨基酸序列； (iii) 其包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含具有SEQ ID NO: 4的氨基酸序列的 CDRl、具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR3 ; (iv) 其包含一个轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID N0:8的氨基酸序列或与其 至少80 %相同的氨基酸序列； (V)其与抗体曲妥珠单抗显示交叉特异性；以及 (vi)其是IgG抗体。
18. 根据权利要求1至17中任一项所述的抗HER2抗体，其中用所述岩藻糖减少的抗 HER2抗体治疗是单一疗法；或其中用所述岩藻糖减少的抗HER2抗体治疗是联合疗法，尤其 与如下联合 (i) 至少一种化疗药；和/或 (ii) 至少一种与岩藻糖减少的抗HER2抗体不同的其他治疗性抗体；和/或 (iv)癌症手术和/或放疗法。
19. 根据权利要求1至18中任一项所述的抗HER2抗体，每周、每两周、每三周或每四周 或更低频率以1至15mg/kg患者体重的量、优选地每三周或更低频率以2至8mg/kg患者体 重的量施用所述岩藻糖减少的抗HER2抗体。
20. 根据权利要求1至19中任一项所述的抗HER2抗体，其中所述岩藻糖减少的抗HER2 抗体用于治疗患者，无论其Fe γ RIIIa同种异型如何。
【文档编号】A61K39/395GK104394887SQ201380034959
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2013年7月18日 优先权日:2012年7月18日
【发明者】S·戈莱茨, A·丹尼尔奇克 申请人:葛莱高托普有限公司