治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物、中药合剂的制备方法及中药合剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物，其原料包括植物药和矿物药，植物药和矿物药的重量比为300︰0.5-1.5；所述植物药的组成及其重量配比包括：黄连2-4份，黄芩4-6份，黄柏4-6份，穿心莲2-4份，大青叶3-5份，金银花4-6份，连翘4-6份，白头翁4-6份，野菊花4-6份，大黄2-4份，板蓝根3-5份，苦参2-3份、青蒿2-3份；所述矿物药为雄黄。上述中药组合物可制成合剂或颗粒剂。本发明疗效显著，毒副作用小，无药物残留，制作简单，使用方便。
【专利说明】治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物、中药合剂的制备方法及中药合剂
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物、中药合剂的制备方法及中药合剂。
【背景技术】
[0002]鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌(俗称大肠杆菌)的某些血清型引起的一类疾病的总称。鸡大肠杆菌病是常见的鸡病之一，具有发病快、死亡率高、病程长的特点，给养鸡业造成了极大的危害。目前，国内外大多采用抗生素和化学药物防治大肠杆菌病，而抗生素和化学药物的大量使用，已导致大肠杆菌的耐药谱不断扩大，药物防治效果下降，同时抗菌药物在机体内的残留，降低了肉、蛋产品的品质，影响了人类健康和公共卫生安全。中药具有低残留、低毒性、不易产生耐药性等特点，因此发明一种对鸡大肠杆菌病防治效果好、治愈率高的中药就显得十分必要。
【发明内容】
[0003]本发明的目的之一是提供一种治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物。
[0004]为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案之一是制成治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物的有效成分的原料包括植物药和矿物药，植物药和矿物药的重量比为300:
0.5-1.5 ;所述植物 药的组成及其重量配比包括:黄连2-4份，黄芩4-6份，黄柏4_6份，穿心莲2-4份，大青叶3-5份，金银花4-6份，连翘4-6份，白头翁4_6份，野菊花4_6份，大黄2-4份,板蓝根3-5份，苦参2-3份、青蒿2-3份；所述矿物药为雄黄。
[0005]为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案之二是制成治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物的有效成分的原料包括植物药和矿物药，植物药和矿物药的重量比为300:1 ；所述植物药的组成及其重量配比包括:黄连3份，黄芩5份，黄柏5份，穿心莲3份，大青叶4份，金银花5份，连翅5份，白头翁5份,野菊花5份，大黄3份，板蓝根4份，苦参2.5份、青蒿2.5份；所述矿物药为雄黄。
[0006]本发明的目的之二是提供一种治疗鸡大肠杆菌病的中药合剂的制备方法。
[0007]为了实现上述发明目的，本发明提供的制备方法包括以下步骤:
(O按上述技术方案一或二的配比关系取各味中药；
(2)先将黄连浸泡，然后将黄连和水一起送入蒸馏器进行蒸馏，待蒸馏器不再流出淡黄色液体时停止蒸馏，收集到的淡黄色液体为蒸馏液，将蒸馏器内的固液混合物进行过滤，获得的滤液为黄连水煎液；
(3)将上述蒸馏液进行重蒸馏，制得重蒸馏液，向重蒸馏液中加入二倍于其体积的无水乙醇，混匀后制得挥发油溶液；
(4)将黄连之外的其余中药混合后加水煎煮，制取水煎液，共煎煮两次，每次煎煮I小时，合并两次煎煮所得水煎液制得混合药水煎液；(5)将上述黄连水煎液和混合药水煎液混合,然后减压浓缩制得浓缩液；向浓缩液中加入其质量的0.5%的苯甲酸钠，待苯甲酸钠溶解和浓缩液冷却后，再加入浓缩液质量的2-20%的101澄清剂溶液，搅拌均匀后静置至浓缩液中有沉淀物形成，接着加入挥发油溶液，搅拌均匀后静置过夜，经离心处理后制得上清液，用无菌水将上清液调配成药液即制得中药合剂，药液浓度要求为Iml药液中含的有效成分相当于Ig生药。
[0008]本发明的目的之三是提供一种治疗鸡大肠杆菌病的中药合剂。
[0009]为了实现上述发明目的，本发明所述的中药合剂由本发明所提供的制备方法制备得到。
[0010]按照中兽医辨证理论，禽大肠杆菌病为湿热壅积肠道而引起的里热证。目前规模化养殖都是采用全封闭或半封闭方式饲养，鸡舍内空气湿度大，温度高，特别是在育雏期间。鸡为阳中之阴，喜燥而恶湿。久处湿地，易感外湿；伤于外湿，湿邪困脾，脾失健运，则湿从内生；而脾阳不振，水湿不化，则更易招致外湿侵袭。鸡的病毒病、细菌病为常见病和多发病，多表现湿热之证，或以热为主而兼湿，或以湿为主而兼热。治宜清热解毒、燥湿止痢，君臣佐使配合，互相协调为用，可以达到标本兼治、扶正祛邪的效果。
[0011]本发明根据鸡大肠杆菌病的致病机理和中医辨证施治的理念而做出，优选各味中药对症下药，各味中药的药效作用及相互作用如下所述。
[0012]黄连，味苦性 寒，具泻火、清热、解毒、燥湿之功效；黄连的成分包括多种生物碱，而大量研究表明，黄连中抗菌消炎成分主要是黄连碱、药根碱、小檗碱和巴马亭等物质，具有抵抗病原微生物、增强机体免疫力、增强胃粘膜屏障等功效。
[0013]白头翁，性寒味苦，具有清热解毒，燥湿杀虫，凉血止痢等功效，白头翁具有抗肿瘤、抗寄生虫、抗氧化、抗炎症的作用，能够增强机体的免疫功能。
[0014]黄芩，性寒味苦，具有泻火解毒、凉血止血、清热燥湿等功效，主要活性成分是黄酮类化合物，具有抗微生物感染、抗肿瘤、抗炎症、抗氧化及清除自由基等作用。
[0015]黄柏，味苦性寒，具有泻火除蒸、清热燥湿等功效，具有抗炎症、抗病原微生物等作用。
[0016]大黄，味苦性寒，具有泻火解毒、利湿退黄、凉血止血、活血化瘀、泻下通便等功效，主要成分为大黄素、大黄酚、大黄酸等组分。其药理作用主要包括抗肿瘤、抗病原微生物、抗炎症、调节胃肠功能、保护心血管、增强机体免疫等功能。大黄的抗炎作用及抗病原微生物作用与其清热解毒功效相关，具有抗多种病毒的功能，如抗流感病毒，抗流行性出热病毒，抗风疹病毒等。
[0017]穿心莲，味苦，性寒，无毒。具有清热解毒，凉血消肿之功效。能够治疗急性菌痢，胃肠炎，感冒，流脑，气管炎，肺炎，百日咳，肺结核，肺脓疡等。主要成分为穿心莲内酯，药理作用主要为抗菌和抗病毒作用。
[0018]大青叶，味苦性寒，清热，解毒，凉血，止血；治温病热盛烦渴,菌痢,急性胃肠炎。
[0019]金银花，味甘性寒，具有清热解毒之功效。主要成分为木犀草素、肌醇、皂甙、鞣质等。药理上主要有抗菌作用，在体外对多种细菌均有抑制作用，一般而言，对沙门氏菌属作用较强，尤其对伤寒及副伤寒在体外有较强的抑制。金银花在体外对人型结核杆菌有某些抑制作用，金银花能减少肠道对胆留醇的吸收。
[0020]连翅，味苦性凉，具有清热，解毒，散结，消肿等功效。治温热，丹毒，斑疫，痈疡肿毒。
[0021]野菊花，苦辛，凉，主用于疏风清热，消肿解毒。主要成分为其花含刺槐素-7-鼠李糖葡萄糖甙、野菊花内酯、矢车菊甙、苦味素；又含挥发油及维生素A类物质及维生素B。药理作用主要有降压作用、抗菌抗病毒作用。
[0022]板蓝根，味苦性寒，清热，解毒，凉血。板蓝根有极好的抗菌抗病毒作用，还有抗钩端螺旋体作用及解毒作用。
[0023]雄黄，辛苦，温，有燥湿、祛风、杀虫解毒之功效。药理作用主要有抗菌及抗血吸虫作用。
[0024]白头翁、黄连、黄柏相合治疗热毒痢疾，白头翁味苦性寒，以黄连之苦寒，清热解毒，燥湿厚肠，黄柏泻下焦湿热，黄柏黄连相合，共祝白头翁清热解毒，尤能燥湿止痢，三药相合，清热解毒，凉血止痢，作用强。
[0025]黄芩、黄连苦寒，解肠中热毒，大黄苦寒，泻热祛积，破肠中之瘀，使积滞除，瘀血下，则下痢可止，此乃通因通用之法。
[0026]金银花、连翘清热解毒，治疗热毒炽盛，用金银花、连翘透热外出，合黄连苦寒，清热解毒，泄热之功，治肠腐溃烂，尤为捷效。
[0027]大青叶、板蓝根重于瘟毒疫病，配合金银花、黄芩尤清热毒，治疗热毒入血，毒热炽盛；野菊花配合金银花，清糜治疗热毒炽盛作用大。
[0028]苦参味苦、寒，含多种生物碱、黄酮类等。清热、燥湿、凉血、解热毒，治热毒血痢、肠风下血、赤白带下等。
[0029]青蒿气香、味微苦，含苦味质、挥发油和青蒿碱、维生素等。具有清热、解毒，治温病、痢疾等功效。 [0030]穿心莲配黄连治疗下痢。
[0031]雄黄对常见肠道致病菌有明显抑制作用，中医以为雄黄清秽浊之气，因秽浊之气充塞肠中，致肠腐溃烂，雄黄辟秽解毒，合大黄泄泻祛积，为强力猛药，故用量少。
[0032]本发明以黄连为君药，白头翁、黄芩、黄柏、大青叶、金银花、雄黄为臣药，穿心莲、连翘、野菊花、板蓝根、苦参、青蒿为佐药，大黄为使药，君臣佐使配合，互相协调为用，可以达到标本兼治、扶正祛邪的效果。
[0033]本发明的优点在于:成本低、制作方便、使用简单，对预防和治疗鸡大肠杆菌病效果显著，无耐药性，毒副作用小，无药物残留，能生产出营养、优质、安全无污染的无公害绿色禽广品。
[0034]本发明可以制成颗粒剂或合剂，颗粒剂混入饲料中即可，合剂加入到饮用水中即可，用量为每公斤体重每天I 一 2克，连用3 -7天。
[0035]本发明中，黄连应单独蒸馏防止有效成分损失，加入乙醇是为了增加黄连挥发油的溶解性，挥发油溶液中含有药物防治所需的有效成分。减压浓缩需要旋转蒸发仪，将浓缩液盛于蒸馏瓶中，采用适当的温度，接上真空泵即可，减压浓缩可降低液体沸点这样就可以在低温条件下蒸出溶剂从而保护产物。101澄清剂为食品级，由上海沃逊生物工程有限公司生产，其作用在于可吸附除去蛋白质、胶体及杂质。
[0036]本发明中，浸泡黄连的用水量以将黄连完全浸没为底限，浸泡时间为15-60分钟，蒸馏过程中，若水量不够可加水后继续蒸馏，直至蒸馏器不再流出淡黄色液体时停止蒸馏。将黄连之外的其余中药混合后加水煎煮的用水量以将药物完全浸没为底限。
【具体实施方式】
[0037]实施例1
制成治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物的有效成分的原料包括植物药和矿物药，植物药和矿物药的重量比为300: 0.5;所述植物药的组成及其重量配比包括:黄连2份，黄芩4份，黄柏4份，穿心莲2份，大青叶3份，金银花4份，连翘4份，白头翁4份，野菊花4份，大黄2份，板蓝根3份，苦参2份、青蒿2份；所述矿物药为雄黄。
[0038]实施例2
制成治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物的有效成分的原料包括植物药和矿物药，植物药和矿物药的重量比为300:1 ;所述植物药的组成及其重量配比包括:黄连3份，黄芩5份，黄柏5份，穿心莲3份，大青叶4份，金银花5份，连翘5份，白头翁5份，野菊花5份，大黄3份，板蓝根4份，苦参2.5份、青蒿2.5份；所述矿物药为雄黄。
[0039]实施例3
制成治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物的有效成分的原料包括植物药和矿物药，植物药和矿物药的重量比为300: 1.5;所述植物药的组成及其重量配比包括:黄连4份，黄芩6份，黄柏6份，穿心莲4份，大青叶5份，金银花6份，连翘6份，白头翁6份，野菊花6份，大黄4份，板蓝根5份，苦参3份、青蒿3份；所述矿物药为雄黄。
`[0040]实施例4
(O按实施例1的配比关系取各味中药；
(2)先将黄连浸泡，然后将黄连和水一起送入蒸馏器进行蒸馏，待蒸馏器不再流出淡黄色液体时停止蒸馏，收集到的淡黄色液体为蒸馏液，将蒸馏器内的固液混合物进行过滤，获得的滤液为黄连水煎液；
(3)将上述蒸馏液进行重蒸馏，制得重蒸馏液，向重蒸馏液中加入二倍于其体积的无水乙醇，混匀后制得挥发油溶液；
(4)将黄连之外的其余中药混合后加水煎煮，制取水煎液，共煎煮两次，每次煎煮I小时，合并两次煎煮所得水煎液制得混合药水煎液；
(5)将上述黄连水煎液和混合药水煎液混合，然后减压浓缩制得浓缩液；向浓缩液中加入其质量的0.5%的苯甲酸钠，待苯甲酸钠溶解和浓缩液冷却后，再加入浓缩液质量的2%的101澄清剂溶液，搅拌均匀后静置至沉淀物形成，接着加入挥发油溶液，搅拌均匀后静置过夜，经离心处理后制得上清液，用无菌水将上清液调配成药液即制得中药合剂，药液浓度要求为Iml药液中含的有效成分相当于Ig生药。
[0041]实施例5
(O按实施例2的配比关系取各味中药；
(2)该步骤与实施例4的步骤(2)相同；
(3)该步骤与实施例4的步骤(3)相同；
(4)该步骤与实施例4的步骤(4)相同；
(5)该步骤与实施例4的步骤(5)基本相同，不同之处仅在于101澄清剂溶液的用量不同，该步骤中101澄清剂溶液的用量为浓缩液质量的5%。[0042]实施例6
(O按实施例3的配比关系取各味中药；
(2)该步骤与实施例4的步骤(2)相同；
(3)该步骤与实施例4的步骤(3)相同；
(4)该步骤与实施例4的步骤(4)相同；
(5)该步骤与实施例4的步骤(5)基本相同，不同之处仅在于101澄清剂溶液的用量不同，该步骤中101澄清剂溶液的用量为浓缩液质量的10%。
[0043]实施例7
(O按实施例3的配比关系取各味中药；
(2)该步骤与实施例4的步骤(2)相同；
(3)该步骤与实施例4的步骤(3)相同；
(4)该步骤与实施例4的步骤(4)相同；
(5)该步骤与实施例4的步骤(5)基本相同，不同之处仅在于101澄清剂溶液的用量不同，该步骤中101澄清剂溶液的用量为浓缩液质量的20%。
[0044]以下通过实验对本发明在安全性、疗效等方面进行评价。
[0045]一、安全性评价
1.急性毒理实验预实验
随机取昆明系小鼠10只，对其禁食不禁水12h，按1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、
8.0,9.0和10.0g/kgBff的剂量用实施例5制备的合剂分别对10只小鼠进行I次灌胃操作，连续观察7d，对实验动物进行常规饲养，观察小鼠的行为活动、外观变化、呼吸运动、排便情况、分泌物状况及死亡情况。
[0046]预实验结果表明，用药后实验组小鼠，体重增加，活动自如，食欲增加，皮毛光滑，叫声正常，呼吸正常，无惊厥、流泪、腹泻等症状出现；观察7d，小鼠没有出现死亡现象，剖检发现主要器官无病理变化。因无法检测半致死量(LD50)，采用最大耐受量(MTD)鉴定药物对小鼠的急性毒理作用。
[0047]2.最大耐受量实验
取SPF级balB/C小鼠20只(体重18_22g)，雌雄兼有，随机分为2组(空白对照组和实验组)，每组10只，禁食不禁水12h ;实验组以日用剂量为60g/kgBW的最大剂量和以每IOg体重给药0.4ml作为最大给药体积用实施例5制备的合剂分别对10只小鼠进行灌胃操作，空白对照给予等量生理盐水灌胃；连续观察14d，记录实验动物每天的反应情况、体重变化、摄食量变化、死亡情况。
[0048]实验结果表明，以最大剂量和最大给药体积灌胃后，实验小鼠短期出现静卧不动、活动减少、反应迟钝等症状，但无抽搐、惊厥、竖毛、翻倒等异常，2_3h后逐渐恢复正常；连续观察14d，没有出现死亡小鼠，并且体重、饮食均增加。
[0049]实验结束，将全部动物处死，剖检，观察其主要器官组织的外观变化，实验组和对照组均无明显的病理变化，说明复方中药对小鼠没有明显的毒副作用。
[0050]二、疗效试验
1.试验方法
210只15日龄肉鸡随机分成1-7组，每组30只，第7组注射无菌生理盐水1ml，1-6组中每只雏鸡均注射同剂量078血清型大肠杆菌悬液(浓度为9 X IO8 CFU/mL),078血清型大肠杆菌购自中国兽药监察所；将078血清型大肠杆菌菌株接种于普通营养肉汤培养基中，于37°C振荡培养16-18小时，收集培养好的细菌并用分光光度计调整细菌浓度为9 X IO8 CFU/mL，便制得上述大肠杆菌悬液。攻毒实验34h后，1-6组中各组均出现大肠杆菌病典型症状，第7组无任何发病症状；当实验组雏鸡出现相应症状后，1-5组中每组均采用将药物加到饮用水中并每天两次饮水的方式进行治疗，第6组和第7组不进行任何药物治疗，试验期间以上各组均采用常规饲养。1-3组均用本发明实施例5制备的中药合剂进行治疗，其中第I组的用药量为每300ml水中含Iml中药合剂，第2组的用药量为每300ml水中含0.5ml中药合剂，第3组的用药量为每300ml水中含0.25ml中药合剂。第4组用2.5%恩诺沙星针剂治疗，用药量为每升水中含1.25g该针剂；第5组用2%盐酸环丙沙星针剂治疗，用药量为每升水中含2g该针剂。连续给药6天，观察用药后的雏鸡临床症状变化，每天对雏鸡的临床症状变化、死亡率等做好记录；对死亡雏鸡进行剖检、取病变器官进行病原细菌分离培养和鉴定。
[0051]2.药效评价标准
治愈:实验期间，雏鸡经混饮用药后，拉稀等症状停止，其食欲、呼吸、精神状态等状况逐渐恢复正常均视为治愈。
[0052]死亡:实验期间，出现大肠杆菌相应症状并死亡，病料剖检后肝脏、气囊、心脏等均有大肠杆菌病的典型症状，并从中分离出大肠杆菌菌落，视为感染死亡。
[0053]3.试验结果
第I组28只治愈，2只死亡；第2组27只治愈，3只死亡；第3组25只治愈，5只死亡；第4组21只治愈，9只死亡 ；第5组22只治愈，8只死亡；第6组10只自愈，20只死亡；第7组无有死亡。
[0054]4.结论
从上述试验结果中不难看出，采用本发明中药合剂治疗鸡感染大肠杆菌病的三组，其死亡率明显低于环丙沙星和恩诺沙星治疗对照组，治愈率明显高于环丙沙星和恩诺沙星治疗对照组；说明本发明治疗效果优异。
[0055]通过以上安全性评价试验和治疗对比试验，可以充分说明本发明用于治疗鸡感染大肠杆菌病时，不但疗效显著，而且无毒副作用。
【权利要求】
1.一种治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物，其特征在于制成该组合物有效成分的原料包括植物药和矿物药，植物药和矿物药的重量比为300: 0.5-1.5 ;所述植物药的组成及其重量配比包括:黄连2-4份，黄芩4-6份，黄柏4-6份，穿心莲2-4份，大青叶3_5份，金银花4-6份，连翘4-6份，白头翁4-6份，野菊花4-6份，大黄2_4份，板蓝根3_5份，苦参2_3份、青蒿2-3份；所述矿物药为雄黄。
2.一种治疗鸡大肠杆菌病的中药组合物，其特征在于制成该组合物有效成分的原料包括植物药和矿物药，植物药和矿物药的重量比为300:1 ;所述植物药的组成及其重量配比包括:黄连3份，黄芩5份，黄柏5份，穿心莲3份，大青叶4份，金银花5份，连翘5份，白头翁5份，野菊花5份，大黄3份，板蓝根4份，苦参2.5份、青蒿2.5份；所述矿物药为雄黄。
3.一种治疗鸡大肠杆菌病的中药合剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤: (O按权利要求1或2的配比关系取各味中药； (2)先将黄连浸泡，然后将黄连和水一起送入蒸馏器进行蒸馏，待蒸馏器不再流出淡黄色液体时停止蒸馏，收集到的淡黄色液体为蒸馏液，将蒸馏器内的固液混合物进行过滤，获得的滤液为黄连水煎液； (3)将上述蒸馏液进行重蒸馏，制得重蒸馏液，向重蒸馏液中加入二倍于其体积的无水乙醇，混匀后制得挥发油溶液； (4)将黄连之外的其余中药混合后加水煎煮，制取水煎液，共煎煮两次，每次煎煮I小时，合并两次煎煮所得水煎液制得混合药水煎液； (5)将上述黄连水煎液和混合药水煎液混合,然后减压浓缩制得浓缩液；向浓缩液中加入其质量的0.5%的苯甲酸钠，待苯甲酸钠溶解和浓缩液冷却后，再加入浓缩液质量的2-20%的101澄清剂溶液，搅拌均匀后静置至浓缩液中有沉淀物形成，接着加入挥发油溶液，搅拌均匀后静置过夜，经离心处理后制得上清液，用无菌水将上清液调配成药液即制得中药合剂，药液浓度要求为Iml药液中含的有效成分相当于Ig生药。
4.一种治疗鸡大肠杆菌病的中药合剂，其特征在于所述中药合剂由权利要求3所述的制备方法制备得到。
【文档编号】A61K36/756GK103830404SQ201410087077
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2014年3月11日 优先权日:2014年3月11日
【发明者】李伟跃, 张兰凤, 李胜美, 朱先忠, 任慧英, 王清吉, 王传春 申请人:李伟跃