一种治疗糖尿病肾病的中药组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种治疗糖尿病肾病的中药组合物，该中药组合物是由下述重量配比的中药饮片制成：黄芪15～25份、金樱子7～13份、川芎7～13份、黄蜀葵花10～20份、大黄2～8份、葛根7～13份、倒扣草10～20份。该中药的口服制剂是通过采用黄芪、川芎、黄蜀葵花、葛根用乙醇提取，收集提取液并浓缩至相对密度为1.08～1.15的清膏，与金樱子、大黄、倒扣草用水提取，收集提取液并浓缩至相对密度为1.08～1.15的清膏，合并两种清膏，继续浓缩至相对密度为1.30～1.40的稠膏，加入辅料制成适合临床使用的剂型。本发明的制备的中药口服制剂，有效成分提取效率高、含量稳定，中药药效好，服用量低，制备成型容易。
【专利说明】一种治疗糖尿病肾病的中药组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药，具体涉及一种治疗糖尿病肾病的中药组合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002]糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)是糖尿病常见和严重的慢性并发症之一，也是糖尿病患者主要死亡原因。糖尿病持续10~20年，据报道DN的发病率在I型糖尿病中约为40~50%，2型糖尿病中DN发生率约为30~40%。DN为糖尿病主要的微血管并发症,主要指糖尿病性肾小球硬化症,一种以血管损害为主的肾小球病变。早期多无症状，其发生率随着糖尿病的病程延长而增高。糖尿病早期肾体积增大，肾小球滤过率增加，呈高滤过状态，以后逐渐出现间断性蛋白尿或微量白蛋白尿，随着病程的延长出现持续蛋白尿、水肿、高血压、肾小球滤过率降低，进而肾功能不全、尿毒症。糖尿病肾病已是终末期肾脏病(ESRF)中最重要的原因，也是糖尿病患者致死的主要原因之一，对此国内外进行了大量的研究，但至今发病机制尚未完全阐明，尚无有效的药物阻止其发生与恶化。
[0003]从中医角度讲，糖尿病肾病规范化的中医病名为消渴肾病，即消渴病日久，久病入络所引起的尿浊、水肿、腰疼、关格等肾系并发症，病位在肾，继发于消渴病。
[0004]从西医角度讲，糖尿病肾病的基本病理特征是系膜细胞增生、细胞外质增多、肾小球硬化与基底膜增厚等。其确切发病机制尚未阐明，现普遍认为长期的高血糖导致的体内三大物质代谢紊乱、肾血流动力学改变是DN病变基础，细胞因子被激活是导致DN的直接因素，氧化应激是DN发生的共同机制。临床表现主要为肾小球滤过率增高，蛋白尿，高血压，肾功能不全(蛋白尿出现、血清BUN、Scr含量明显升高)等。目前临床主要诊断依据主要是尿蛋白的检测。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种治疗糖尿病肾病的中药组合物及中药制剂，本发明的另一目的是提供一种治疗糖尿病肾病中药组合物的制备方法。
[0006]为实现上述目的，本发明采用以下技术方案: [0007]一种治疗糖尿病肾病的中药组合物，该中药组合物是由下述重量配比的中药饮片制成:黄芪15~25份、金樱子7~13份、川弯7~13份、黄蜀葵花10~20份、大黄2~8份、葛根7~13份、倒扣草10~20份。
[0008]如上所述的治疗糖尿病肾病的中药组合物，优选地，所述中药组合物是由下述重量配比的中药饮片制成:黄芪20份、金樱子10份、川芎10份、黄蜀葵花15份、大黄5份、倒扣草15份、葛根10份。
[0009]一种治疗糖尿病肾病中药组合物的制备方法，该方法包括:按如上所述的重量配比称取中药饮片，将黄芪、川弯、黄蜀葵花、葛根按重量加入8~14倍的50~80体积％乙醇回流提取I~4次，每次0.5~3小时，收集提取液并浓缩至相对密度为1.08~1.15的清膏；将金樱子、大黄、倒扣草按重量加入8~12倍的水回流提取I~4次，每次0.5~2小时，收集提取液并浓缩至相对密度为1.08~1.15的清膏；将以上两种清膏合并，继续浓缩至相对密度为1.30~1.40的稠膏。
[0010]如上所述的制备方法，优选地，所述方法包括:按如上的重量配比称取中药饮片，将黄芪、川芎、黄蜀葵花、葛根按重量加入12倍的63%乙醇回流提取2次，每次2.5小时，收集提取液并浓缩至相对密度为1.1的清膏；将金樱子、大黄、倒扣草按重量加入10倍的水回流提取3次，每次1.5小时，收集提取液并浓缩至相对密度为1.1的清膏；将以上两种清膏合并，继续浓缩至相对密度为1.4的稠膏。
[0011]一种治疗糖尿病肾病的中药组合物，其是按照如上所述方法制备的。
[0012]一种治疗糖尿病肾病的中药口服制剂，其是由如上所述的中药组合物和药用或食品用辅料组成。
[0013]如上所述的中药口服制剂，优选地，所述口服制剂为口服液、片剂、颗粒剂或胶囊剂。
[0014]如上所述的治疗糖尿病肾病中药口服制剂，优选地，所述口服制剂为颗粒剂，该颗粒剂由下述重量配比的物质组成:所述稠膏400~600份、糊精200~300份、甘露醇200~300份和阿斯巴甜I~5份。
[0015]如上所述的治疗糖尿病肾病中药口服制剂，优选地，所述颗粒剂由下述重量份的物质组成:所述稠膏500份、糊精250份、甘露醇250份和阿斯巴甜2.5份。
[0016]如上所述中药组合物的检测方法，优选地，乙醇提取部分以黄芪甲苷、金丝桃苷、葛根素的含量为测定指标，最小值分别为0.8214mg/g、26.3417mg/g、5.4362mg/g,水提取部分以大黄酸的含量为测定指标，最小值为2.5141mg/g。
[0017]一种同时测定如上所述中药组合物中金丝桃苷和葛根素含量的方法，该方法是将被检测样品通过高效液相色谱法进行测定，该高效液相色谱法的流动相为乙腈和0.05%~
0.3% (体积百分含量)的磷酸水溶液组成的混合液，乙腈和磷酸水溶液的体积比为(10~30): (90~70);高效液相色谱法采用的色谱柱为C18，流动相的流速为(0.8~1.2)mL/min ；检测波长:葛根素为250nm,金丝桃苷为360nm,进样量为8~12 μ I。
[0018]如上所述的方法，优选地，该方法是将被检测样品通过高效液相色谱法进行测定，该高效液相色谱法的流动相为乙腈和体积百分含量为0.1%的磷酸水溶液组成的混合液，乙腈和磷酸水溶液的体积比为15:85 ;高效液相色谱法的色谱柱为C18，流动相流速为
1.0mL/min ;检测波长:葛根素为250nm,金丝桃苷为360nm,进样量为10 μ I。
[0019]一种测定如上所述中药组合物中大黄酸含量的方法，该方法是将被检测样品通过高效液相色谱法进行测定，高效液相色谱法的流动相为甲醇和体积百分含量为0.05~0.3%的磷酸水溶液组成的混合液，甲醇在混合液中的体积百分比为60~85% ;高效液相色谱法的色谱柱为C18，流动相流速为0.8~1.2mL/min ;检测波长为436nm，进样量为8~12 μ I。
[0020]如上所述的方法，优选地，该方法是将被检测样品通过高效液相色谱法进行测定，高效液相色谱法的流动相为甲醇和体积百分含量为0.1%的磷酸水溶液组成的混合液，甲醇和磷酸水溶液的体积比为75:25 ;高效液相色谱法的色谱柱为C18，流动相流速为1.0mL/min ;检测波长为436nm，进样量为10 μ I。
[0021]本发明的有益效果在于:本发明提供的治疗糖尿病肾病的中药组合物具有益气固肾、化瘀降浊的功效，可明显降低DN患者尿蛋白，改善肾功能。本发明方法制备的中药制剂，有效成分提取效率高、含量稳定，按照本发明制备的中药药效好，服用量低，制备成型容易。
【专利附图】
【附图说明】
[0022]图1为乙醇提取浸膏中黄芪甲苷HPLC-ELSD测定图谱。
[0023]图2为乙醇提取浸膏中葛根素HPLC-UV测定图谱。
[0024]图3为乙醇提取浸膏中金丝桃苷HPLC-UV测定图谱。
[0025]图4为乙醇提取部分星点设计响应面等高线图及3D图。
[0026]图5为药典测定条件下水提取浸膏中大黄成分的HPLC-UV检测图谱。
[0027]图6为确定条件下水提取浸膏中大黄成分的HPLC-UV检测图谱。
[0028]图7为单一辅料所制颗粒吸湿曲线。
[0029]图8为糊精与甘露醇不同比例混合所制颗粒吸湿曲线。
[0030]图9为最优工艺所制颗粒吸湿曲线。
【具体实施方式】
[0031]本发明将中医络病理论引入中医药防治DN的研究，认为络病是广泛存在于消渴病肾病早、中、晚期的病理状态。DN其病机特点是肾元亏虚、肾气不固为本，肾络瘀阻、浊毒内停为标。肾元亏虚，肾气不固，开阖失司，则出现水肿、尿浊、腰痛；肾络瘀阻，浊毒内停，壅塞三焦，则出现吐逆、肿满、关格。针对上述病机，本发明采用益气固肾、化瘀降浊的治法研制出一种中药复方制剂。
[0032]本发明中的中药复方中原料药采用黄芪、金樱子、川芎、黄蜀葵花、大黄、葛根、倒扣草。
[0033]其中黄芪为君药，甘，微温；归肺、脾、肝、肾经；益气固表、利水消肿，可消除实验性肾炎蛋白尿，增强心肌收缩力，调节血糖含量，治疗慢性肾炎，蛋白尿，糖尿病等。
[0034]金樱子为臣药，甘、微酸、涩，平；归脾、肾、大肠、膀胱经；固精缩尿，增加血清尿素和肌酐清除率达到保护肾功能的作用。
[0035]川芎为臣药，辛，温；归肝、胆、心经；活血行气化瘀。大黄苦，寒，清湿热、凉血、祛瘀、解毒。黄蜀葵花甘，辛，凉；利尿通淋、活血、止血、消肿解毒。两药为佐，共奏降浊之功。
[0036]葛根，甘、辛，凉；归脾、胃经；可解热、生津、止渴，还可降低血糖。
[0037]倒扣草，苦辛，寒；归肝、肺、膀胱经；可利水，活血，养胃阴、生津液、除虚热。
[0038]葛根、倒扣草两者为使，辅助上述药物发挥作用。
[0039]确定本发明中药有效成分提取方法包括如下步骤:
[0040](一)确定提取路线
[0041]按下述重量配比的称取中药饮片:黄芪20份、金樱子10份、川芎10份、黄蜀葵花15份、大黄5份、倒扣草15份、葛根10份。
[0042]1.拟定提取路线
[0043]拟定三条提取路线:(a)黄芪、金樱子、川芎、黄蜀葵花、大黄、倒扣草、葛根用水提取，(b)黄芪、川芎、黄蜀葵花、葛根用乙醇提取与大黄、金樱子、倒扣草用水提取合并，(C)黄芪、川芎、黄蜀葵花、葛根用乙醇提取一次，药渣与金樱子、大黄、倒扣草共用水提取合并。
[0044]2.提取路线的药效学筛选
[0045](I)模型建立和分组
[0046]以药效学实验及含量测定进行筛选，采用8周龄2型糖尿病KK-Ay小鼠(北京华阜康生物科技股份有限公司，生产许可号=SCXK京2009-0004)建立糖尿病肾病模型，设立C57BL/6J小鼠(北京华阜康生物科技股份有限公司，生产许可号:SCXK京2009-0007)为空白组(CTL)。空白组8周龄C57BL/6J小鼠予以普通饲料喂养，KK-Ay小鼠予以高脂饲料喂养。4周后KK-Ay小鼠随机血糖≤16.7mmol/L，认为造模成功。造模成功的KK-Ay小鼠随机分为模型组(M)、a组、b组、c组。
[0047](2)给药
[0048]造模成功次日开始给药，对a组、b组、c组分别给予上述线路a组、b组、c组的提取物20g (生药).1ig-1Cf1灌胃，模型组予等体积蒸馏水，连续给药12周。
[0049](3)指标检测
[0050]实验期间，于12周龄、16周龄、20周、24周龄时，将各组小鼠直于代谢笼中收集24h尿液并记录尿量，采用酶联免疫法测定24h尿微量白蛋白含量，每月测定一次。结果(见表1)表明:三种提取物给药后小鼠尿白蛋白排泄率与模型组比较均降低且有统计学差异，但b组均值最低，小鼠的一般状态如精神状态、毛色更接近空白对照组，同时出膏率在三者中最低。
[0051]表1不同时间点各组小鼠尿白蛋白排泄率比较(x±s)n=7_8
[0052]
【权利要求】
1.一种治疗糖尿病肾病的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由下述重量配比的中药饮片制成:黄芪15~25份、金樱子7~13份、川芎7~13份、黄蜀葵花10~20份、大黄2~8份、葛根7~13份、倒扣草10~20份。
2.如权利要求1所述的治疗糖尿病肾病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物是由下述重量配比的中药饮片制成:黄芪20份、金樱子10份、川芎10份、黄蜀葵花15份、大黄5份、倒扣草15份、葛根10份。
3.一种治疗糖尿病肾病中药组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括:按如权利要求I或2所述的重量配比称取中药饮片，将黄芪、川芎、黄蜀葵花、葛根按重量加入8~14倍的50~80体积％乙醇回流提取I~4次，每次0.5~3小时，收集提取液并浓缩至相对密度为1.08~1.15的清膏；将金樱子、大黄、倒扣草按重量加入8~12倍的水回流提取I~4次，每次0.5~2小时，收集提取液并浓缩至相对密度为1.08~1.15的清膏；将以上两种清膏合并，继续浓缩至相对密度为1.30~1.40的稠膏。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述方法包括:按如权利要求1或2所述的重量配比称取中药饮片，将黄芪、川芎、黄蜀葵花、葛根按重量加入12倍的63%乙醇回流提取2次，每次2.5小时，收集提取液并浓缩至相对密度为1.1的清膏；将金樱子、大黄、倒扣草按重量加入10倍的水回流提取3次，每次1.5小时，收集提取液并浓缩至相对密度为1.1的清膏；将以上两种清膏合并，继续浓缩至相对密度为1.4的稠膏。
5.一种治疗糖尿病肾病的中药组合物，其特征在于，其是按照权利要求3或4所述方法制备的。
6.一种治疗糖尿病肾病的中药口服制剂，其特征在于，其是由权利要求5所述的中药组合物和药用或食品用辅料组成。
7.如权利要求 6所述的治疗糖尿病肾病中药口服制剂，其特征在于，所述口服制剂为颗粒剂，该颗粒剂由下述重量配比的物质组成:所述稠膏400~600份、糊精200~300份、甘露醇200~300份和阿斯巴甜I~5份。
8.权利要求5所述中药组合物的检测方法，其特征在于，乙醇提取部分以黄芪甲苷、金丝桃苷、葛根素的含量为测定指标，最小值分别为0.8214mg/g、26.3417mg/g、5.4362mg/g,水提取部分以大黄酸的含量为测定指标，最小值为2.5141mg/g。
9.一种同时测定权利要求5所述中药组合物中金丝桃苷和葛根素含量的方法，其特征在于，该方法是将被检测样品通过高效液相色谱法进行测定，该高效液相色谱法的流动相为乙腈和0.05%~0.3% (体积百分含量)的磷酸水溶液组成的混合液，乙腈和磷酸水溶液的体积比为(10~30):(90~70);高效液相色谱法采用的色谱柱为C18，流动相的流速为(0.8~1.2)mL/min ;检测波长:葛根素为250nm，金丝桃苷为360nm，进样量为8~12 μ I。
10.一种测定权利要求5所述中药组合物中大黄酸含量的方法，其特征在于，该方法是将被检测样品通过高效液相色谱法进行测定，高效液相色谱法的流动相为甲醇和体积百分含量为0.05~0.3%的磷酸水溶液组成的混合液，甲醇在混合液中的体积百分比为60~85% ;高效液相色谱法的色谱柱为C18，流动相流速为0.8~1.2mL/min ;检测波长为436nm，进样量为8~12 μ I。
【文档编号】A61P13/12GK103830380SQ201410133378
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2014年4月3日 优先权日:2014年3月19日
【发明者】龚慕辛, 翟永松, 尚雅文, 高彦彬 申请人:首都医科大学