用于人体舒经活络的中药制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明用于人体舒经活络的中药制剂，每60mL中药制剂中含有的冬青油、樟脑醑、薄荷脑、松节油及五种中药有效部位——没药挥发油、桂枝挥发油、红花黄酮、两面针生物碱和甘草总皂苷的至少两种。其制备方法包括：⑴将樟脑醑、薄荷冰、松节油加入冬青油中完全溶解；⑵添加没药挥发油、桂枝挥发油和/或两面针生物碱，获得混合溶液；⑶用95%医用酒精超声溶解红花黄酮和/或甘草总皂苷得混合溶液；⑷将步骤⑵的混合溶液与步骤⑶的混合溶液混合超声溶解，得近60mL用于人体舒经活络的中药制剂。本发明的中药制剂有效成分明确，药效好、副作用小；其制备方法可采用现代提取工艺对中药有效成分进行富集，从而提高药效并建立有效的产品检测及质量分析方法。
【专利说明】用于人体舒经活络的中药制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药【技术领域】，具体地说，是一种用于人体舒经活络的外用中药制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]人们在日常生活中发生跌打损伤、风湿骨痛是十分常见的事情，但这些病痛会给人们的生活和活动带来诸多不便。中医认为:风湿骨病是风寒湿邪侵入人体所致。风寒湿邪侵入人体之后，导致筋脉阻塞不通，“不通则痛”，由此引起人体关节、骨膜、肌肉等部位发生红肿疼痛。中医所述的“跌打损伤”包括跌仆、殴打、闪挫、刺伤、擦伤、运动损伤等等，伤处多有肿胀并且疼痛。此外，中医所述的“跌打损伤”还包括一些内脏损伤。“跌打损伤”主要以软组织损伤为主，如果血液流通顺畅，肿痛的症状就会好转。中医还认为:“疏通经脉”是治疗“跌打损伤”的根本。中药活络油治疗“跌打损伤、风湿骨痛”具有良好的效果，其作用是促进人体血液循环、行气活血，从而修复软组织并减轻肿痛症状。目前，市场上活络油中较有名的产品多产自东南亚国家及香港地区，在中国国内购买不易且无明确工艺与质量标准。对这类产品的推广应用带来很多困扰。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于解决上述问题，提供一种用于人体舒经活络的中药制剂。其所含中药有效部位明确，采用现代分离技术对中药有效部位提取分离，进一步采用分析测试技术进行质量检测，通过对这些有效部位进行合理组合，设计有效部位(或成分)、质量状况明确、具有显著抗炎镇痛效果的活络油；本发明的第二个目的是，提供所述中药制剂的制备方法，它步骤清晰、操作方便，容易掌握，而且可以进行有效的产品质量分析。
[0004]为实现上述目的，本发明采取了以下技术方案。
[0005]一种用于人体舒经活络的中药制剂，其特征是，每60mL所述中药制剂中含有冬青油27~35mL、樟脑醑4~5.5g、薄荷脑16~23g、松节油2.5~10.0mL以及五种中药有效部位，所述中药有效部位为没药挥发油、桂枝挥发油、红花黄酮、两面针生物碱和甘草总皂苷。
[0006]进一步,在每60mL所述中药制剂中至少含有两种以上所述中药有效部位。
[0007]进一步，所述中药有效部位的含量为:
没药挥发油0.11~0.362mL ；
桂枝挥发油0.11~0.362mL ；
红花黄酮0.062~0.5g;
两面针生物碱0.07~0.362g ；
甘草总皂苷0.157~0.5g。
[0008]进一步,所述中药有效部位中有效成分的含量范围为:
没药挥发油1.0%~5.0% ；桂枝挥发油0.1%~1.0% ；
红花黄酮中羟基红花黄色素A的含量为10.0%~50.0% ；
两面针生物碱中氯化两面针碱的含量为0.1%~3.0% ；
甘草总皂苷的含量为50.0%~90.0%。
[0009]为实现上述第二目的，本发明采取了以下技术方案。
[0010]一种用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，其特征为，包括以下步骤:
(1)将樟脑醑4~5.5g、薄荷冰16~23g、松节油2.5~IOmL加入冬青油27~35mL中；待其完全溶解后向内添加中药有效部位，所述中药有效部位包括没药挥发油、桂枝挥发油、红花黄酮、两面针生物碱和甘草总皂苷，应至少添加两种以上所述的中药有效部位；
(2)向步骤(1)的溶液中添加没药挥发油0.11~0.362mL、桂枝挥发油0.11~0.362mL和/或两面针生物碱0.07~0.362g，获得混合溶液；
(3)用95%医用酒精3~5mL将红花黄酮0.062~0.5g和/或甘草总皂苷0.157~
0.5g超声溶解30min，获得混合溶液；
(4)将步骤(2)获得的混合溶液与步骤(3)获得的混合溶液混合，然后超声溶解20min，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂(活络油)。
[0011]在本发明的中药制剂所含的中药有效部位中，中药挥发油占有重要的地位。所述中药挥发油是利用水蒸气蒸馏法、超临界萃取法、挤压、冷浸或者溶剂提取法等方法从植物的花、茎、叶、根或者果实中提取出来的具有挥发性的芳香物质，也称“精油”。利用中药挥发油对人体进行按摩，通过人体的透皮吸收，可使人体局部的血液循环和营养得到改善，达到疏通经络、放松肌肉、促进血气运行的功能，从而起到消除肿痛、去除疲劳、恢复体力、改善睡眠的功效。
[0012]本发明的用于人体舒经活络的中药制剂含有的中药挥发油包括桂枝挥发油和没药挥发油。
[0013]所述桂枝为樟科属肉桂的干燥嫩茎。桂枝作为中国传统中药被用于治疗关节痹痛以及血液循环障碍等疾病，具有发汗解肌、助阳化气、温经通脉、散寒止痛的功效。桂枝中起上述功效的有效部位主要为是挥发油，桂枝挥发油主要成分是桂皮醛，还含有反式桂皮醛、乙酸肉桂酯、邻甲氧基桂皮醛、苯甲醛等。研究表明桂枝挥发油有良好的镇痛与抗炎作用。
[0014]所述没药为橄榄科植物地丁树或哈地丁树的干燥树脂，性辛、苦，平；归心、肝、脾经。没药主要含2.5%~9%的挥发油、60%~70%的树脂、25%~35%的树胶，其中，挥发油和少量的树脂是其主要有效成分。没药挥发油中主要含有丁香油酚、间甲苯酚、枯醛、菔烯、柠檬烯、桂皮醛、罕没药烯等化合物。已有多篇文献表明:没药挥发油具有抗炎镇痛、促进伤口愈合的作用。
[0015]此外，本发明还选用了红花、两面针、甘草五味药材的中药有效部位。
[0016]所述红花为菊科植物红花的干燥花。性辛，温；归心、肝经；主治活血通经，散瘀止痛。红花主要含有红花黄色素及红花苷。目前的研究认为，红花中起到活血化瘀作用的主要成分为红花黄色素。红花黄色素具有保护脏器和细胞膜损伤、改善心脑缺血、扩张冠脉、抑制血小板聚集、控制血栓、清除自由基 、抗氧化、镇痛抗炎等多种药理作用。
[0017]所述两面针为芸香科植物两面针的干燥根，性苦、辛，平；有小毒；归肝、胃经；有活血化瘀、行气止痛、祛风通络、解毒消肿的功效。两面针的根和根皮中所含化学成分复杂，主要为生物碱类物质(已报道有30余种),包括氯化两面针碱、双氢两面针碱、两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、氧化两面针碱、氧化白屈菜红碱、α-别隐品碱、茵芋碱、木兰花碱、白鲜碱、氧化刺椒碱等，此外，还含有少量黄酮类和木脂素类；其中，氯化两面针碱是镇痛消炎、抗击肿瘤的主要活性成分。
[0018]所述甘草是双子叶豆科甘草属多年生草本植物，甘草主要化学成分为三萜皂苷和黄酮类化合物。研究表明甘草总皂苷在各类炎症细胞模型下都有很好的抗炎作用，同时保持良好的剂量依赖关系。甘草水提物高、中、低剂量组均对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用(ρ〈0.01，Ρ〈0.05)，且抑制率随剂量的增大而提高，并且三者抑制率均优于阿司匹林。甘草皂苷在受体镇痛模型中也表现出优良的镇痛作用。
[0019]本发明的积极效果是:
(I)本发明选用五味具有活血化瘀、抗炎镇痛、疏通经络的中药，通过提取所述中药的有效部位，将其按照一定配方配制溶于以冬青油为主的基础油中得到用于人体舒经活络的中药制剂，其有效成分明确，药效好、见效快、副作用小；动物实验的结果表明，本发明所制备的中药制剂具有显著的抗炎镇痛效果。
[0020](2)本发明的制备方法步骤简单合理，操作方便，容易掌握；其积极意义是:可采用现代提取工艺对中药有效成分进行富集，从而提高药效并建立有效的产品检测及质量分析方法。
【专利附图】
【附图说明】
[0021 ] 图1为实施例 2氯化两面针碱对照品HPLC谱图。
[0022]图2为实施例2两面针提取物HPLC谱图。
[0023]图3为实施例2阳性药HPLC谱图。
[0024]图4为实施例2缺两面针阴性药HPLC谱图。
【具体实施方式】
[0025]以下介绍本发明一种用于人体舒经活络的中药制剂的【具体实施方式】，提供8个实施例和3个应用实施例。但是应该指出，本发明的实施不限于以下的实施方式。
[0026]实施例1本发明用于人体舒经活络的中药制剂所用中药药材有效部位的提取
本发明用于人体舒经活络的中药制剂采用的中药有效部位有没药挥发油、桂枝挥发油、红花黄酮、两面针生物碱、甘草总皂苷。所述中药有效部位的提取方法以及有效成分的含量范围为:
(I)没药挥发油的提取
将适量没药粉碎后加入8倍量体积的水中，按2010版药典所述挥发油的提取方法提取5小时，得到淡绿色没药挥发油，得率(即有效成分的含量)为1.0%~5.0%。
[0027](2)桂枝挥发油的提取
将适量桂枝粉碎后加入8倍量体积的水中，按2010版药典所述挥发油的提取方法提取5小时，得黄色桂枝挥发油，得率(即有效成分的含量)为0.1%~1.0%。
[0028](3)红花黄酮的提取
取红花药材，分别用18倍量和14倍量体积的水在60°C下超声提取两次，提取时间都为I小时；将提取液合并后离心分离；将上清液浓缩至约ImL含Ig药材，利用HZ818大孔树脂洗脱，分别用水和10%乙醇洗脱，收集10%乙醇洗脱液，减压旋蒸后真空干燥，得到红花总黄酮。所述红花总黄酮中羟基红花黄色素A的含量(即有效成分的含量)为10.0%~50.0%。
[0029](4)两面针生物碱的提取
取适量两面针药材粉碎，用70%乙醇分别按8倍量、7倍量体积提取两次，提取时间都为2小时。将提取液合并后离心分离，将上层清液浓缩至浸膏，用适量2%盐酸超声溶解，离心后将清液浓缩。再用2%Na0H溶液调节PH为9~10，用氯仿萃取三次，收集氯仿层，浓缩干燥，得到两面针生物碱。所述两面针生物碱中氯化两面针碱的含量(即有效成分的含量)为
0.1% ~3.0%。
[0030](5)甘草总皂苷的提取
取适量甘草药材粉碎后用2%氨水+70%乙醇溶液加热回流提取3h，收集滤液。再次用2%氨水+70%乙醇溶液加热回流提取2h，合并两次回流提取的滤液，减压旋蒸、离心即得浓缩液。将甘草提取浓缩液过HZ-816大孔树脂柱收集乙醇洗脱液；旋蒸至干，干燥，称重，即得到含量(即有效成分的含量)为50~90.0%的甘草皂苷样品。
[0031]实施例2
一种用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，包括以下步骤:
(I)将4.5g樟脑醑、 17g薄荷冰、2.5mL松节油加入31mL冬青油中，待其完全溶解。
[0032](2)向步骤(1)的溶液中添加添加没药挥发油0.157mL、桂枝挥发油0.157mL及两面针生物碱0.096g,获得混合溶液。
[0033](3)用95%医用酒精5mL将红花黄酮0.062g及甘草总皂苷0.157g超声溶解30min，
获得混合溶液。
[0034](4)将步骤(2)获得的混合溶液与步骤(3)获得的混合溶液混合，然后超声溶解20min，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂(活络油)，标记为样品I。
[0035]对实施例2制备的样品I进行质量分析，方法如下。
[0036](I)甘草的定性分析
取甘草酸铵对照品，加甲醇制成每ImL含2mg甘草酸铵对照品的溶液，作为“对照品溶液”。
[0037]称取一定量的甘草总皂苷提取物溶于甲醇，制成每ImL含Img甘草总皂苷提取物的溶液，作为“提取物溶液”。
[0038]另外，配制样品I和缺甘草皂苷的阴性药物。
[0039]按照薄层色谱法(附录VI B)进行试验:
吸取上述四种溶液各I~2μ 1，分别点于同一用I %氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)为展开剂,展开,取出，晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。
[0040]从试验点板的结果能够明显看出:甘草皂苷提取物溶液、样品I以及对照品溶液在相应的位置上有相同颜色的点，缺甘草皂苷的阴性药物则没有。这表明:实施例2制备的样品I中含有甘草总皂苷。
[0041](2)红花的定性分析
取适量羟基红花黄色素A (HSYA)标准品溶于甲醇中，作为“标准品溶液”。[0042]称取一定量的红花黄色素提取物溶于甲醇，制成每ImL含Img红花黄色素提取物的溶液，作为“提取物溶液”。
[0043]另外配制样品I和缺红花阴性药物。
[0044]用毛细管吸取上述四种溶液各5μ I点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮:甲醇:水=10: 3: 2的混合溶液作为展开剂，展开，取出，晾干。分别在日光和365nm的紫外光下检视。
[0045]由分析的TLC定性展开图能够看出:在与对照品相应高度的位置上，“提取物溶液”和样品I存在相同颜色的荧光斑点，缺红花阴性药物则无干扰。这表明:实施例2制备的样品I中含有红花黄酮。
[0046](3)两面针的定量分析
配制一定浓度的氯化两面针碱“标准溶液”、两面针“提取物溶液”以及样品I (阳性药)和缺两面针生物碱的阴性药物，按照2010版中国药典所述的氯化两面针碱HPLC测试条件进行测试，所得色谱图1-4 提取物溶液”(参见图2)、样品I (参见图3)在与“标准溶液”(参见图1)出峰的相应位置上有吸收峰出现，而所述阴性药物(参见图4)则无干扰。通过峰面积结合标准曲线可求得样品I中氯化两面针碱的含量为28.02μ g/mL (共配置三份样品I样品，测得的氯化两面针碱的含量分别为28.96 μ g/mL,26.65 μ g/mL,28.44 μ g/mL,RSD=5.26%);样品I中理论上氯化两面针碱的含量应为30.56 μ g/mL。理论值与实际值相差不大，这表明:两面针生物碱能够稳定地存在于实施例2制备的样品I中。
[0047]实施例3
一种用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，包括以下步骤:
(I)将5g樟脑醑、19g薄荷冰、5mL松节油加入28mL冬青油中，待其完全溶解。
[0048](2)向步骤(1)的溶液中添加没药挥发油0.121mL、桂枝挥发油0.121mL及两面针生物碱0.241g，获得混合溶液。
[0049](3)用95%医用酒精3mL将红花黄酮0.241g超声溶解30min，获得混合溶液。
[0050](4)将步骤(2)获得的混合溶液与步骤(3)获得的混合溶液混合，然后超声溶解20min，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂(活络油)，标记为样品2。
[0051]对实施例3制备的样品2进行的质量分析方法同实施例2。
[0052]实施例4
一种用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，包括以下步骤:
(I)将4g樟脑醑、16g薄荷冰、IOmL松节油加入27mL冬青油中，待其完全溶解。
[0053](2)向步骤(1)的溶液中添加没药挥发油0.llmL、桂枝挥发油0.llmL，获得混合溶液。
[0054](3)用95%医用酒精3mL将红花黄酮0.5g超声溶解30min，获得混合溶液。
[0055](4)将步骤(2)获得的混合溶液与步骤(3)获得的混合溶液混合，然后超声溶解20min，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂(活络油)，标记为样品3。
[0056]对实施例4制备的样品3进行的质量分析方法同实施例2。 [0057]实施例5
一种用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，包括以下步骤:
(I)将4g樟脑醑、17g薄荷冰、4mL松节油加入35mL冬青油中，待其完全溶解。[0058](2)向步骤(1)的溶液中添加没药挥发油0.181mL、桂枝挥发油0.1SlmL及两面针生物碱0.362g，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂(活络油)，标记为样品4。
[0059]对实施例5制备的样品4进行的质量分析方法同实施例2。
[0060]实施例6
一种用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，包括以下步骤:
(I)将5.5g樟脑醑、16g薄荷冰、6mL松节油加入32.5mL冬青油中，待其完全溶解后。
[0061](2)向步骤(1)的溶液中添加没药挥发油0.362mL、桂枝挥发油0.362mL，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂(活络油)，标记为样品5。
[0062]对实施例6制备的样品5进行的质量分析方法同实施例2。
[0063]实施例7
一种用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，包括以下步骤:
(I)将4g樟脑醑、23g薄荷冰、3mL松节油加入27mL冬青油中，待其完全溶解。
[0064](2)向步骤(1)的溶液中添加两面针生物碱0.362g，获得混合溶液。
[0065](3)用95% 医用酒精3mL将红花黄酮0.362g超声溶解30min，获得混合溶液。
[0066](4)将步骤(2)获得的混合溶液与步骤(3)获得的混合溶液混合，然后超声溶解20min，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂(活络油)，标记为样品6。
[0067]对实施例7制备的样品6进行的质量分析方法同实施例2。
[0068]实施例8
一种用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，包括以下步骤:
(I)将4.5g樟脑醑、17g薄荷冰、5mL松节油加入28.5mL冬青油中，待其完全溶解。
[0069](2)向步骤(1)的溶液中添加两面针生物碱0.07g，获得混合溶液。
[0070](3)用95%医用酒精5mL将红花黄酮0.175g及甘草总皂苷0.5g超声溶解30min，获得混合溶液。
[0071](4)将步骤(2)获得的混合溶液与步骤(3)获得的混合溶液混合，然后超声溶解20min，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂(活络油)，标记为样品7。
[0072]对实施例8制备的样品I进行的质量分析方法同实施例2。
[0073]应用实施例1 小鼠耳肿胀实验
Cl)受试药物:本发明实施例2~8制备的样品I~7。
[0074](2)受试动物
KM小鼠，清洁级，18~20g，雄性，90只，上海斯莱克实验动物有限责任公司提供〔许可证号=SCXK (沪)2012 ~0002〕。
[0075](3)实验方法
将90只受试的小鼠以每组10只随机分为9组，即阴性对照组、阳性对照组、样品I~7组。阴性对照组小鼠左耳双面均匀涂抹大豆油10 μ L/只；阳性对照组左耳双面均匀涂抹市售活络油10 μ L/只；样品I~7组分别在小鼠左耳双面均匀涂抹相应受试药物10 μ L/只。
[0076](4)实验步骤
①按分组规定的要求剂量在9组实验小鼠左耳两侧均匀涂抹相应药物。[0077]②给药90min后，用棉球擦去左耳所涂药物，在左耳双面均匀涂抹二甲苯(50 μ L/只)致炎。
[0078]③至炎30min后,处死实验小鼠,剪下双耳,用7mm打孔器在鼠耳相同位置打下耳片，称重并记录。耳肿胀度和肿胀抑制率计算公式分别为:
【权利要求】
1.一种用于人体舒经活络的中药制剂，其特征在于，每60mL所述中药制剂中含有冬青油27~35mL、樟脑醑4~5.5g、薄荷脑16~23g、松节油2.5~10.0mL以及五种中药有效部位，所述中药有效部位为没药挥发油、桂枝挥发油、红花黄酮、两面针生物碱和甘草总皂苷。
2.根据权利要求1所述的用于人体舒经活络的中药制剂，其特征在于，在每60mL所述中药制剂中含有至少两种所述的中药有效部位。
3.根据权利要求1或2所述的用于人体舒经活络的中药制剂，其特征在于，所述的中药有效部位的含量为: 没药挥发油0.11~0.362mL ； 桂枝挥发油0.11~0.362mL ； 红花黄酮0.062~0.5g ;
两面针生物碱0.07~0.362g ； 甘草总皂苷0.157~0.5g。
4.根据权利要求3所述的用于人体舒经活络的中药制剂，其特征在于，所述中药有效部位中有效成分的含量范围为: 没药挥发油1.0%~5.0% ； 桂枝挥发油0.1%~1.0% ； 红花黄酮中羟基红花黄色素A的含量为10.0%~50.0% ； 两面针生物碱中氯化两面针碱的含量为0.1%~3.0% ； 甘草总皂苷的含量为50.0%~90.0%。
5.一种如权利要求1所述的用于人体舒经活络的中药制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)将樟脑醑4~5.5g、薄荷冰16~23g、松节油2.5~IOmL加入冬青油27~35mL中；待其完全溶解后向内添加中药有效部位，所述中药有效部位包括没药挥发油、桂枝挥发油、红花黄酮、两面针生物碱和甘草总皂苷，应添加至少两种所述的中药有效部位； (2)向步骤(1)的溶液中添加没药挥发油0.11~0.362mL、桂枝挥发油0.11~0.362mL和/或两面针生物碱0.07~0.362g，获得混合溶液； (3)用95%医用酒精3~5mL将红花黄酮0.062~0.5g和/或甘草总皂苷0.157~.0.5g超声溶解30min，获得混合溶液； (4)将步骤(2)获得的混合溶液与步骤(3)获得的混合溶液混合，然后超声溶解20min，获得近60mL的用于人体舒经活络的中药制剂。
【文档编号】A61P29/00GK103989794SQ201410206796
【公开日】2014年8月20日 申请日期:2014年5月15日 优先权日:2014年5月15日
【发明者】张立国, 薛志斌, 倪力军, 吴婷婷, 赵雯雯, 朱婷婷, 马东升, 赵丽丽, 钟霖, 王南南, 颜玮韬 申请人:华东理工大学