一种断血流片及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种经提取的断血流片及其制备方法，具体内容为取断血流，在10℃下进行研磨，过10目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25℃、萃取压力20MPa、CO2流量2L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min，随后动态萃取5-10min，一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环，重复该循环2次，萃取时加入以断血流总量计1.2ml/g的无水乙醇和0.08g/g的N2酰基赖氨酸，萃取完成后进行两级分离，分离温度为25℃、分离压力5MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。取断血流超临界CO2流体萃取物1份、微晶纤维素32份、交联羧甲基纤维素钠38份、处理琼脂16份、蛋白糖6份、乳糖7份，采用常规方法压制成片。
【专利说明】一种断血流片及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种用断血流片，具体地说是以断血流为原料制成的用于凉血止痛的片剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]断血流片由荫风轮(clinopodiumpolyeephalum)或风轮菜(ClinopodiumChinese)的提取物制成。原植物是民间止血药。近年研究和临床均已证明，该药对多种出血症有显著的止血作用，主要适用于功能性子宫出血、月经过多、产后出血、尿血和鼻觑等症。
[0003]自断上世纪70年代倍发现并记录之后，已对其活性成分、药效机理和制剂类型进行了多年研究。上世纪90年代初，《中国药典.一部》(1990)新增品种中收载此药，药名断血流。中药断血流的药用植物风轮菜和荫风轮中，含有皂苷类、黄酮类、氨基酸类、多糖类、酚性物质和挥发油等化合物，其中皂苷类和黄酮类化合物为断血流止血、抗炎的有效成分。
[0004]断血流来源广泛，全国各地均有产，为方便临床用药，90年代已有断血流片载入《中国药典.一部》(1990)作为规范用药，以后陆续有断血流口服液、断血流胶囊、断血流颗粒等不同的剂型面市，临床使用越来越广泛，常用于止血镇痛消炎等方面，疗效独到。现代药理实验表明其主要具有止血、抑菌、降低血压、收缩子宫功能等多种生物活性。
[0005]《中华人民共和国药典》2000年版一部收录了品种断血流片。该药具有凉血止痛之功效。用于功能性子宫出血、产后出血，尿血，呕血，便血，咯血以及外伤出血等等。经临床前期运用表明，该药对于上述病症，有一定疗效。
[0006]然而，该药的活性成分含量较低，在应对急性出血时，效果不显著，同时由于活性成分含量较低，导致本品服用量较大，一次3-6片，对于老人、儿童和吞咽困难的患者服用时顺应性差。
[0007]超临界CO2流体萃取技术是今年来发展起来的高效活性成分萃取技术，起在中药有效成分的提取分离方面与传统方法相比具有一系列的优点，如操作范围广，便于调节，选择性好，操作温度低 ，活性成分不容易被破坏等。然而，超临界αν流体萃取技术的一次性设备投资较大，给普及带来一定困难，而且超临界萃取技术对于一些大分子极性物质的萃取效果不显著，使得其在中药领域中的应用受到了一定程度的限制。
[0008]对此，CN101301349A公开了一种通过断血流提取物口服冻干片及其制备方法，以断血流提取物为活性成分加入适量辅料配制成溶液，经真空冷冻干燥制成的口服冻干片。本发明提供的断血流提取物口服冻干片，口感好、崩解快(完全溶化)、服用方便等。
[0009]CN1939399A公开了一种断血流分散片，以断血流为原料，制备断血流提取物的细粉，加入适量辅料制成3分钟内可完全崩解且达到均匀分散状态的断血流分散片，具有凉血止血功效。
[0010]CN101543528A公开一种断血流总苷元口服制剂及其制备方法和用途，将从断血流中提取的总苷进行水解，得到断血流总苷元，并将断血流总苷元配合特殊的辅料制成高效制剂，可以大大提高断血流总苷元的生物利用度。该制剂在治疗抗炎和/或治疗外伤、鼻血、妇科出血等病症中有明显的疗效。
[0011]然而，上述这些专利都存在以下显著问题:
[0012](I)采用传统方法提取断血流中的活性成分，使得活性成分的提取率低，活性物质提取不全面，杂质较多，生物利用率也不够高；
[0013](2)由于其有效成分含量较低，杂质较多使得提取物较愁厚，流动性差，不利于产品的后续制片；
[0014](3)产品中的药效成分含量低，使得或许加工中需要加入更多的提取物，进而使得制片困难，片剂不容易成型，对后续的运输包装的要求较高；
[0015](4)使用的辅剂较多使得工艺复杂，然而对产品的疗效几乎没有任何有益影响。
[0016]对此，一种以流动性好、药效成分含量高且生物利用率高的断血流提取物与较少种类的辅剂结合制备出药效显著、易于服用的断血流片是急待解决的技术问题。
【发明内容】
[0017]为解决上述问题，本发明提供了一种用于断血流片，具体地说提供一种以超临界CO2流体萃取技术萃取断血流的活性成分再与辅剂结合制成用于凉血止痛的片剂及其制备方法。
[0018]一种断血流片，由断血流超临界CO2流体萃取物和辅料组成，其特征在于所述断血流片中含有0.5-1 %的断血流超临界CO2流体萃取物，且所述断血流片中含有以重量计不低于0.32%的醉鱼草皂苷IVb。
[0019]一种断血流片，其特征在于所述辅料微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、预胶化淀粉、处理琼脂、蛋白糖、乳糖。
[0020]一种断血流片，其特征在于由下述重量配比得原料制成:断血流超临界CCV流体萃取物0.5-1份、微晶纤维素25-35份、交联羧甲基纤维素钠30-45份、预胶化淀粉8_12份、处理琼脂4-8份、蛋白糖5-8份、乳糖3-9份。
[0021 ] 一种断血流片，其特征在于由下述重量配比得原料制成:断血流超临界CO2流体萃取物1份、微晶纤维素32份、交联羧甲基纤维素钠38份、预胶化淀粉10份、蛋白糖6份、乳糖7份。
[0022]一种断血流片，其特征在于所述断血流超临界CO2流体萃取物是通过如下方法值得:取断血流，在0-10°C下进行研磨，过10-30目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25-35°C、萃取压力10-25MPa、C02流量2_3L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min，随后动态萃取5_10min，一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环，重复该循环1-3次，萃取时加入以断血流总量计1.0-1.2ml/g的无水乙醇和0.005-0.lg/g的N2酰基氨基酸型表面活性剂，萃取完成后进行两级分离，分离温度为20-30°C、分离压力2-8MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。一种断血流片，其特征在于所述断血流超临界CCV流体萃取物是通过如下方法值得:取断血流，在10°C下进行研磨，过10目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25°C、萃取压力20MPa、C02流量2L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min，随后动态萃取5_10min，一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环，重复该循环2次，萃取时加入以断血流总量计1.2ml/g的无水乙醇和0.08g/g的N2酰基氨基酸型表面活性剂，萃取完成后进行两级分离，分离温度为25°C、分离压力5MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。
[0023]一种断血流片，其特征在于所述断血流在进行超临界CO2流体萃取之前将所述过筛后的断血流粉进行微波处理，所述微波处理的功率为300-450W，处理时间为30-300S。
[0024]本发明所述的N2酰基氨基酸型表面活性剂优选为N2酰基赖氨酸。
[0025]本发明的断血流片具有如下有益效果
[0026](I)首次将超临界CCV流体萃取技术用于断血流药材活性成分的提取，并且通过大量的试验对其夹带剂进行了筛选，发现使用N2酰基赖氨酸可以使得萃取在接近室温且较低的大气压进行，这使得利用超临界CO2流体萃取技术的成本大大降低，并且得到的产品中活性成分的含量更高，热敏性成分不被破坏；
[0027](2)得到一种不经浓缩，提取物中就含有至少0.32%的醉鱼草皂苷IV b的断血流提取物。将该提取直接进行制片，使得单片所含有效成分的含量大大增加，并且可以缩小片剂的体积，使得该药用于老人和孩子时的顺应性大大增强，也使得该药更适用于急救治疗。 [0028](3)首次尝试在进行超临界CO2流体萃取之前，对产品进行微波处理，证明微波处理与超临界CO2流体萃取具有显著的协同作用，可以有效的提高其活性成分的提取率。
[0029]以下通过实施例形式的【具体实施方式】，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
【具体实施方式】
[0030]实施例1
[0031]断血流提取物的制备:取断血流，在0-10°C下进行研磨，过10目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25°C、萃取压力lOMPa、CO2流量3L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取15min，随后动态萃取5min,一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环,重复该循环I次,萃取时加入以断血流总量计1.0ml/g的无水乙醇和0.005g/g的N2酰基氨基酸型表面活性剂，萃取完成后进行两级分离，分离温度为25°C、分离压力5MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。
[0032]制片方法:取微晶纤维素32份、交联羧甲基纤维素钠38份、预胶化淀粉10份、蛋白糖6份、乳糖7份，粉碎过60目筛；加入断血流超临界CO2流体萃取物1份以及90%乙醇溶液适量，制成软材，40目筛制粒，40°C干燥，控制水分在2.0%，用20目筛整粒；加入处理琼脂6份混合均匀，测点颗粒含量，压片，调节填充量和压力，待药片的硬度、片重达到标准要求后，进行压片，每20分钟检查一次片重，发现有松片、裂片、粘冲、片重差异过大、变色异常情况应停车检查；将压制成片的素片加入高效包衣机内，进行包薄膜衣或糖衣，晾片，外包装，即得。
[0033]实施例2
[0034]取断血流，在10°C下进行研磨，过10目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25°C、萃取压力20MPa、C02流量2L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min，随后动态萃取5_10min，一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环，重复该循环2次，萃取时加入以断血流总量计1.2ml/g的无水乙醇和0.08g/g的N2酰基赖氨酸，萃取完成后进行两级分离，分离温度为25°C、分离压力5MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。采用实施例1的方法制片。
[0035]实施例3
[0036]取断血流，在10°C下进行研磨，过10目筛；过筛后的断血流粉经至于功率为400W的微波环境中，处理60s，随后放入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25°C、萃取压力20MPa、C02流量2L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min,随后动态萃取5_10min, 一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环,重复该循环2次，萃取时加入以断血流总量计1.2ml/g的无水乙醇和0.08g/g的N2酰基赖氨酸为夹带剂，萃取完成后进行两级分离，分离温度为25°C、分离压力5MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。采用实施例1的方法制片。
[0037]对照实施例1
[0038]按照中国药典2000年版中的方法制备的断血流片。
[0039]对照实施例2
[0040]根据CN1714808A中实施例1的方法制得的断血流分散片。
[0041]对照实施例3
[0042]取断血流，在10°C下进行研磨，过10目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25°C、萃取压力20MPa、C02流量2L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min，随后动态萃取5_10min，一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环，重复该循环2次，萃取完成后进行两级分离，分离温度为25°C、分离压力5MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。采用实施例1的方法制片。
[0043]对照实施例4
[0044]取断血流，在10°C下进行研磨，过10目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25°C、萃取压力20MPa、C02流量2L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min，随后动态萃取5_10min，一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环，重复该循环2次，萃取时加入以断血流总量计1.2ml/g的无水乙醇，萃取完成后进行两级分离，分离温度为25°C、分离压力5MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。采用实施例1的方法制片。
[0045]以下通过断血流片中的醉鱼草皂苷IVb含量及药效学试验证明本发明的有益效果O
[0046]1.断血流片中醉鱼草皂苷IV b的测定
[0047]按照标准制作醉鱼草皂苷IV b标准曲线，制备色谱条件:LiChr0SpherC18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m),测定波长:250nm,流动相:甲醇-水(80:20),流速:lmL/min,柱温:25°C，进样量:10yL。
[0048] 精密称取五氧化二磷中干燥至恒重的醉鱼草皂苷IV b5.08mg,甲醇溶解并定容于25mL量瓶中，从中分别移取0.1、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mL至IOmL量瓶中，甲醇定容至刻度，分别配制成 2.03、10.16,20.33,40.66,81.31、162.62 μ g/mL 的标准溶液，分别进样 10 μ L,于波长250nm处测定，得线性回归方程Y = 11778X+97.169，R2 = 0.9998，醉鱼草皂苷IV b在2.03~162.62 μ g/mL范围内成线性关系。加样回收试验、重复性试验、精密度试验、稳定性试验均符合要求。
[0049]醉鱼草皂苷IV b含量=(醉鱼草皂苷IV b质量/药片质量)X 100%，测定结果见表1。
[0050]表1各种断血流片中醉鱼草皂苷IV b的含量
[0051]
【权利要求】
1.一种断血流片，由断血流超临界0)2流体萃取物和辅料组成，其特征在于所述断血流片中含有0.5-1 %的断血流超临界CO2流体萃取物，且所述断血流片中含有以重量计不低于0.32%的醉鱼草皂苷IV b。
2.一种如权利要求1所述的断血流片，其特征在于所述辅料微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、预胶化淀粉、蛋白糖、乳糖。
3.—种如权利要求2所述的断血流片，其特征在于由下述重量配比得原料制成:断血流超临界CO2流体萃取物0.5-1份、微晶纤维素25-35份、交联羧甲基纤维素钠30-45份、预胶化淀粉8-12份、处理琼脂4-8份、蛋白糖5-8份、乳糖3-9份。
4.一种如权利要求4所述的断血流片，其特征在于由下述重量配比得原料制成:断血流超临界CO2流体萃取物1份、微晶纤维素32份、交联羧甲基纤维素钠38份、预胶化淀粉10份、处理琼脂6份、蛋白糖6份、乳糖7份。
5.一种如权利要求1所述的断血流片，其特征在于所述断血流超临界CO2流体萃取物是通过如下方法值得:取断血流，在0-10°C下进行研磨，过10-30目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25-35°C、萃取压力10-25MPa、CO2流量2-3L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min，随后动态萃取 5-10min,一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环,重复该循环1_3次,萃取时加入以断血流总量计1.0-1.2ml/g的无水乙醇和0.005-0.lg/g的N2酰基氨基酸型表面活性剂，萃取完成后进行两级分离，分离温度为20-30°C、分离压力2-8MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。
6.一种如权利要求5所述的断血流片，其特征在于所述断血流超临界CO2流体萃取物是通过如下方法值得:取断血流，在10°c下进行研磨，过10目筛；过筛后的断血流粉加入超临界CO2萃取装置中进行萃取，萃取温度25°C、萃取压力20MPa、CO2流量2L/h，采用动态萃取与动态萃取相结合的方式进行萃取，其中先静态萃取10-15min，随后动态萃取5_10min，一次动态萃取加一次静态萃取为一个萃取循环，重复该循环2次，萃取时加入以断血流总量计1.2ml/g的无水乙醇和0.08g/g的N2酰基氨基酸型表面活性剂，萃取完成后进行两级分离，分离温度为25°C、分离压力5MPa，将分离出的提取液回收乙醇得提取物备用。
7.—种如权利要求5所述的断血流片，其特征在于所述断血流在进行超临界CO2流体萃取之前将所述过筛后的断血流粉进行微波处理，所述微波处理的功率为300-450W，处理时间为30-300s。
8.—种如权利要求5述的断血流片，所述的N2酰基氨基酸型表面活性剂优选为N2酰基赖氨酸。
【文档编号】A61P29/00GK103977071SQ201410247510
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2014年6月6日 优先权日:2014年6月6日
【发明者】余中华 申请人:余中华