一种用于治疗放射性肺损伤的药物组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于治疗放射性肺损伤的中药组合物，所述中药组合物的原料药组成为：生地10-20重量份、玄参10-20重量份、连翘5-15重量份、甘草3-9重量份和马鞭草10-20重量份。所述中药组合物在治疗放射性肺损伤方面具有显著的治疗效果。
【专利说明】一种用于治疗放射性肺损伤的药物组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于中药制剂领域，具体涉及一种用于治疗放射性肺损伤的药物组合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002]放射性肺损伤是胸部肿瘤在放疗过程中最常见的并发症，其产生的原因在于肺是对放射线非常敏感的器官，当在放射性治疗胸部恶性肿瘤过程中的放射剂量超过肺组织生物效应的阈值时，放射线会对肺产生不同程度的损伤。放射性肺损伤有两种常见的临床表现形式，即早期急性放射性肺炎和后期的放射性肺纤维化，轻症者可无症状，炎症可自行消散，重症者肺脏发生广泛纤维化，导致呼吸功能损害，甚至呼吸衰竭。放射性肺损伤还严重限制了胸部肿瘤的放疗剂量，从而直接影响了肿瘤局部控制率及患者的预后和放疗后的生存质量。
[0003]放射性肺损伤的发生机制尚未完全阐明，目前普遍认为放射性肺损伤的发生，并不是单一因素所引起，而是由多种因素共同存在、相互影响、综合作用的结果。很多学者提出不同的观点来阐明放射性肺损伤的作用机制，归纳起来主要有以下几种学说:细胞外基质代谢失衡学说、肺血管内皮细胞损伤学说、肺泡巨噬细胞参与学说、细胞生长因子学说和自由基产生过多学说。
[0004]目前研究表明放射性肺损伤最重要的生理病理基础是细胞外基质(ECM)代谢失衡。ECM主要由胶原蛋白、弹性蛋白、糖蛋白和蛋白多糖等按一定比例组成，上述物质构成了基底膜和间质结构。细胞外 基质的完整性由局部蛋白成分的合成和降解的动态平衡维持。近年许多研究表明，金属基质蛋白酶(matrixmetalloproteinases, MMPs)及其组织抑制剂(Tissue-1nhibitors of Metallo-Proteases, TIMPs)在 ECM 的降解与重塑的过程中发挥着重要作用，而且其可以与细胞因子、生长因子之间相互激活、制约，通过对细胞外基质的降解连接炎症细胞与肺结构细胞之间的信息交流，介导了肺泡炎症与肺纤维化的进程。MMPs是一类依赖于锌离子和钙离子的活性蛋白水解酶，其主要的生理作用是降解ECM。按作用底物不同，将MMPs分为胶原酶、明胶酶、间质胶原酶及弹性蛋白酶等。MMPs的活性主要是TIMPs调节，TIMPs的高表达可抑制MMPs酶活性，因而胶原不能被MMPs迅速降解，即胶原合成与降解代谢失衡，造成了胶原异常沉积。最近，MMPs因在肺实质中过度表达对肺组织造成严重损伤而受到重视。已有研究证明肺泡上皮基底膜在维持肺泡上皮的完整性和肺组织结构正常修复中具有关键性作用，而放射线会使肺泡上皮基底膜遭到破坏，导致肺泡上皮细胞受损，炎性细胞等迁移到肺泡腔致使ECM成分过度降解，使得基底膜的完整性遭到严重破坏，肺通透性增加，最终导致肺损伤。许多研究发现，MMPs在急性呼吸窘迫综合症(ARDS)、慢性阻塞性肺疾病(COPD)及肺间质纤维化(IPF)等肺疾病所致的纤维化中起关键作用。研究显示，MMPs也是肺纤维化形成过程中细胞外基质蛋白降解的主要原因。杨坤禹等发现放射性肺损伤过程中基底膜断裂与MMP-2和MMP-9高表达有关。MMP-12是金属基质蛋白酶家族中的一种，主要由巨噬细胞产生，其作用底物主要是弹力纤维，与许多疾病，如动脉粥样硬化、肺癌的有关。在一些动物实验研究和临床研究中发现MMP-12在肺部炎症性疾病如哮喘，COPD等中起着重要作用，在体内可以诱导炎性反应，降解细胞外基质，参与气道重塑，调节其他金属蛋白酶(如MMP-2和MMP-9)和细胞因子。2007年Matute-Bello [6]等人研究发现，小鼠肺损伤早期，MMP-12基因表达增高，激活纤维化基因引起肺纤维化发生；敲除MMP-12基因的小鼠则未发生肺纤维化。李明等发现，对大鼠右胸进行照射后肺组织中MMP-12蛋白表达明显升高。从而可以认为MMP-12对放射性肺损伤的发生有重要作用。
[0005]放射性肺损伤的发生是一个由多细胞、多因子、多环节参与的复杂过程，目前尚无一种药物能够针对多个靶点，阻断各个环节，从而预防和治疗放射性肺损伤。西医对放射性肺损伤的治疗主要是应用糖皮质激素、血管紧张素转换酶抑制剂、己酮可可碱和细胞因子抑制剂等，但这些药物的效果并不明显，而且存在很多副作用，多数药物还处在动物实验阶段，尚不成熟。然而研究表明传统中医在对放射性肺损伤的防治方面体现出了很好的效果，且有毒副作用低的优势。同时，中医学的整体观，注重整体调理，改善人体免疫功能，保护造血系统，从而改善生存质量。
【发明内容】
[0006]为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于治疗放射性肺损伤的中药组合物及其制备方法。
[0007]为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于治疗放射性肺损伤的中药组合物，所述中药组合物的原料药组成为:生地10-20重量份、玄参10-20重量份、连翘5-15重量份、甘草3-9重量份和马鞭草10-20重量份。
[0008]所述的用于治疗放射性肺损伤的中药组合物，所述组合物的原料药组成为:生地15重量份、玄参15重量份、连翘10重量份、甘草6重量份和马鞭草15重量份。
[0009]所述的用于治疗放射性肺损伤的中药组合物制备成临床可接受的剂型。
[0010]所述临床上可接受的剂型包括胶囊剂、散剂、颗粒剂、丸剂、片剂。
[0011]本发明提供了一种制备所述的用于治疗放射性肺损伤的中药组合物的方法，包括如下步骤:
[0012](a)按照选定的重量份数取生地加水煎煮，过滤后将所得煎煮液浓缩成浸膏；
[0013](b)按照选定的重量份数取所述连翘、甘草和马鞭草混合，加入乙醇加热回流提取，将提取液过滤并减压回收乙醇后得到醇提液；
[0014](C)按照选定的重量份数取所述玄参加水煎煮，过滤后将所得煎煮液与上述步骤(b)中获得的提取液混合均匀，浓缩至清膏；
[0015](d)将步骤(C)所得清膏与步骤(a)所得的浸膏混合并干燥，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的剂型。
[0016]所述的制备方法，包括如下步骤:
[0017](a)按照选定的重量份数取所述生地加水煎煮1-3次，每次加入4-8倍药物重量的水，每次煎煮1-3小时,合并煎液,过滤后将所得煎煮液浓缩成浸膏；
[0018] (b)按照选定的重量份数取所述连翘、甘草和马鞭草混合均匀后，加入6-10倍药物重量的浓度为50-100%的乙醇，加热回流2-4次，每次回流1-3小时，合并乙醇提取液，过滤并减压回收乙醇，得醇提液；[0019](c)按照选定的重量份数取所述玄参加水煎煮2-4次，每次加入8-12倍药物重量的水，每次煎煮2-4小时，合并煎液，过滤后将所得煎煮液与步骤(b)获得的提取液混合均匀，浓缩至45-55°C下相对密度为1.20-1.25的清膏；
[0020](d)将步骤(C)所得清膏与步骤(a)所得的浸膏混合并干燥，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受剂型。
[0021]所述的制备方法，包括如下步骤:
[0022](a)按照选定重量份数取生地加水煎煮2次，每次加入6倍所述药物重量的水，每次煎煮2小时，合并煎液，过滤后将所得煎煮液浓缩成浸膏；
[0023](b)按照选定重量份数取所述连翘、甘草和马鞭草混合均匀后，加入8倍所述药物重量的浓度为75%的乙醇，加热回流3次，每次回流2小时，合并乙醇提取液，过滤并减压回收乙醇，得醇提液；
[0024](c)按照选定重量份数取所述玄参加水煎煮3次，每次加入10倍所述药物重量的水，每次煎煮3小时，合并煎液，过滤后将所得煎煮液与上述步骤(b)获得的提取液混合均匀，浓缩至50°C下相对密度为1.20-1.25的清膏；
[0025](d)将步骤(C)所得清膏与步骤(a)所得的浸膏混合并干燥，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的剂型。
[0026]所述的制备方法，所述步骤(d)中，所述常规辅料占所述药物组合物总重量的20-25%。
[0027]本发明提供了一种由上述的方法制备得到的中药组合物。
[0028]本发明提供了一种中药组合物在制备治疗放射性肺损伤的药物中的用途。
[0029]本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点:
[0030](I)本发明所述的用于治疗放射性肺损伤的中药组合物，通过选取生地、玄参、连翘、甘草和马鞭草为原料药制成的中药组合物在治疗放射性肺损伤方面具有显著的治疗效果;
[0031](2)本发明所述的用于治疗放射性肺损伤的中药组合物制备方法，步骤简单，易操作，通过调整原料药选择合适的提取方法，使得制成的中药组合物中有效成分含量提高，进而提高对放射性肺损伤的治疗效果。
[0032]实验例
[0033]1.实验方法
[0034]1.1动物分组
[0035]用随机数字法将75只雄性Wistar大鼠，体重(200±20) g，级别二级(清洁级)，随机分为空白对照组(A)、单纯照射组(B)、本实施例1制备的中药组合物低剂量组(C组，2g/kg.d)、本实施例1制备的中药组合物中剂量组(D组，6g/kg.d)、本实施例1制备的中药组合物高剂量组Φ组，18g/kg.d),每组15只。
[0036]1.2照射方法
[0037]用1%戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔麻醉固定于板架上，用60Co Y射线照射大鼠的右胸部，照射野为4.5cmX4.0cm,源靶距3m，吸收剂量为25Gy，照射剂量率为288.77cGy/min。A组大鼠同时进行相同麻醉，不进行照射。
[0038]1.3给药方法[0039]三个本实施例1制备的中药组合物的高、中、低剂量组分别按成人(按60kg计算)每公斤体重剂量的2倍、6倍、18倍计算给药量，分别为低剂量组(2g/kg*d)、中剂量组(6g/kg *d)、高剂量组(18g/kg *d),于照射前I周开始用灌胃法按每公斤体重Iml等体积给药，空白对照组和单纯照射组给予等体积生理盐水，生理盐水浓度为为0.9%，每日I次。每周根据体重变化调整给药量。至处死前每日灌胃I次。每周根据体重变化调整给药量。空白对照组及单纯照射组给予等体积生理盐水灌胃。
[0040]2.观察指标
[0041]2.1动物一般情况观察:精神、饮食、活动、毛发、大便等。
[0042]2.2肺脏组织大体观察:颜色、形态、质地、出血点、切面情况等；右肺湿重并计算右肺系数(右肺系数=右肺湿重/体重X 100% )。
[0043]2.3HE染色:肺组织形态学变化。
[0044]2.4rt-PCR 和 Westernblot 观察 MMP-12、TIMP-2mRNA 和蛋白表达。
[0045]3.实验结果
[0046]3.1大鼠一般情况观察
[0047]A组大鼠在整个实验过程中精神、活动、进食量、大便均无明显异常表现。B组大鼠自照射后第4天开始出现精神萎靡，活动减少，鼻周及眼角红赤，大便发干，照射后I周开始出现照射野毛色变暗，继而开始出现脱毛现象，照射后第2-4周照射野脱毛现象严重，附近皮肤出现糜烂、溃疡。与B组大鼠比较，C、D、E组大鼠精神萎靡，大便干结、鼻周及眼角红赤、脱毛症状较B组轻，皮肤无糜烂、溃疡现象。本实施例1制备的中药组合物的各剂量组之间比较，以D组症状最轻，E组大鼠出现腹泻现象。
[0048]3.2 体重
[0049]体重情况:与A组比较，B、C、D、E组大鼠体重增加明显延缓(p〈0.01)。照射后第I周D组与B组体重有显著性差异(P〈0.05)，C、E组与B组体重无显著性差异(P>0.05)。照射后第2周时C组、D组体重与B组有显著性差异(P〈0.01)，E组与B组体重无显著性差异(P>0.05)。第4周时C组与B组体重有显著性差异(P>0.05)，D组体重与B组亦有显著性差异(P〈0.01)，E组与B组体重无显著性差异(P>0.05)。(见表1)
[0050]表1不同实验组不同时间大鼠体重比较d.丨:S )
[0051]
【权利要求】
1.一种用于治疗放射性肺损伤的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的原料药组成为:生地10-20重量份、玄参10-20重量份、连翘5-15重量份、甘草3_9重量份和马鞭草10-20重量份。
2.根据权利要求1所述的用于治疗放射性肺损伤的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为:生地15重量份、玄参15重量份、连翘10重量份、甘草6重量份和马鞭草15重量份。
3.根据权利要求1-2任一所述的用于治疗放射性肺损伤的中药组合物制备成临床可接受的剂型。
4.根据权利要求3所述的剂型，其特征在于，所述临床上可接受的剂型包括胶囊剂、散剂、颗粒剂、丸剂、片剂。
5.一种制备权利要求1或2所述的用于治疗放射性肺损伤的中药组合物的方法，其特征在于，包括如下步骤: (a)按照选定的重量份数取生地加水煎煮，过滤后将所得煎煮液浓缩成浸膏； (b)按照选定的重量份数取所述连翘、甘草和马鞭草混合，加入乙醇加热回流提取，将提取液过滤并减压回收乙醇后得到醇提液； (C) 按照选定的重量份数取所述玄参加水煎煮，过滤后将所得煎煮液与上述步骤(b)中获得的提取液混合均匀，浓缩至清膏； (d)将步骤(C)所得清膏与步骤(a)所得的浸膏混合并干燥，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的剂型。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: (a)按照选定的重量份数取所述生地加水煎煮1-3次，每次加入4-8倍药物重量的水，每次煎煮1-3小时,合并煎液,过滤后将所得煎煮液浓缩成浸膏； (b)按照选定的重量份数取所述连翘、甘草和马鞭草混合均匀后，加入6-10倍药物重量的浓度为50-100%的乙醇，加热回流2-4次，每次回流1-3小时，合并乙醇提取液，过滤并减压回收乙醇，得醇提液； (c)按照选定的重量份数取所述玄参加水煎煮2-4次，每次加入8-12倍药物重量的水，每次煎煮2-4小时，合并煎液，过滤后将所得煎煮液与步骤(b)获得的提取液混合均匀，浓缩至45-55°C下相对密度为1.20-1.25的清膏； (d)将步骤(c)所得清膏与步骤(a)所得的浸膏混合并干燥，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受剂型。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: (a)按照选定重量份数取生地加水煎煮2次，每次加入6倍所述药物重量的水，每次煎煮2小时，合并煎液，过滤后将所得煎煮液浓缩成浸膏； (b)按照选定重量份数取所述连翘、甘草和马鞭草混合均匀后，加入8倍所述药物重量的浓度为75%的乙醇，加热回流3次，每次回流2小时，合并乙醇提取液，过滤并减压回收乙醇，得醇提液； (c)按照选定重量份数取所述玄参加水煎煮3次，每次加入10倍所述药物重量的水，每次煎煮3小时，合并煎液，过滤后将所得煎煮液与上述步骤(b)获得的提取液混合均匀，浓缩至50°C下相对密度为1.20-1.25的清膏；(d)将步骤(c)所得清膏与步骤(a)所得的浸膏混合并干燥，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的剂型。
8.根据权利要求5-7任一所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(d)中，所述常规辅料占所述药物组合物的原料药总重量的20-25%。
9.根据权利要求5-8任一所述的方法制备得到的中药组合物。
10.根据权利 要求1、2或9所述的中药组合物在制备治疗放射性肺损伤的药物中的用途。
【文档编号】A61P11/00GK104013737SQ201410251286
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年6月6日 优先权日:2014年6月6日
【发明者】蔡少华, 李洪霞, 武红英, 梁小燕, 左震华 申请人:中国人民解放军总医院