生肌玉红胶原海绵药物及其制备方法与应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了生肌玉红胶原海绵药物，它由如下重量份数的组分制成：当归5～10份，甘草5～10份，白芷5～10份，紫草5～10份，血竭1～4份，诃子5～10份，黄蜀葵花5～10份，载体为胶原。本发明还公开了上述药物生肌玉红胶原海绵药物的制备方法和应用。本发明药物疗效优于传统生肌玉红膏制剂，不含重金属汞，并可植入体内促进修复。用于促进体表难愈性溃疡、糖尿病性溃疡等愈合及填充体内组织缺损。
【专利说明】生肌玉红胶原海绵药物及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001]本发明属于中药【技术领域】，涉及一种生肌玉红胶原海绵药物及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002]慢性体表溃疡常常由糖尿病、压疮、激素应用等原因造成，是临床最常见的难点与热点之一。随人口老龄化的趋势，发病率逐渐升高，大量耗费医疗资源与严重影响患者生活质量。美国约翰霍普金斯大学医学院研究及现代meta分析显示，影响愈合的两大关键因素为创面的感染及血液供应，标准的治疗原则为积极清创与改善微循环；并提出未来局部外治中功能性辅料的研制是其发展方向。我国人口已超13亿，估计老年人口占12%以上，每年患慢性溃瘍患者估计超过两千万。
[0003]生肌玉红膏可以显著改善下肢慢性创面肉芽微循环，促进肉芽生长，提高肉芽中血管内皮生长因子与羟脯氨酸含量。临床研究亦发现生肌玉红膏创面抑菌疗效不足。生肌玉红膏源自《外科正宗》，其主要成分当归、紫草、血竭、白腊、白芷、轻粉、甘草，具有活血解毒、润肤生肌功效，其中轻粉为含汞制剂，具有一定的毒性，且有致敏性，临床上可以抑制细菌呼吸酶而起到杀菌作用。传统制作方法为油提法:用芝麻油960g同置锅内炸枯，去渣。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是对古方生肌玉红膏进行改进，提供一种具有更强杀菌消炎功能的生肌玉红胶原海绵药物。
[0005]本发明还要解决的技术问题是提供上述生肌玉红胶原海绵药物的制备方法。
[0006]本发明最后要解决的技术问题是提供上述生肌玉红胶原海绵药物的应用。
[0007]为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下:
[0008]生肌玉红胶原海绵药物，它由如下重量份数的组分制成:当归5~10份，甘草5~10份，白芷5~10份，紫草5~10份，血竭I~4份，诃子5~10份，黄蜀葵花5~10份，载体为胶原。
[0009]优选的方案是，生肌玉红胶原海绵药物由如下重量份数的组分制成:当归6份，甘草6份，白芷6份，紫草6份，血竭2.4份，诃子6份，黄蜀葵花6份，载体为胶原。
[0010]上述生肌玉红胶原海绵药物，要求，每片50mmX50mmX2mm规格的胶原含血血竭素(C17H14O3)为 3.25mg 以上，甘草苷(C21H22O9)为 5.0mg 以上，欧前胡素(C46H14O4)为 0.9mg以上。
[0011]上述生肌玉红胶原海绵药物的制备方法，该方法包括如下步骤:
[0012](I)取配方量的当归、甘草、诃子和黄蜀葵花，用8倍重量的70V/V%乙醇水溶液浸泡30分钟，回流提取60分钟，固液分离收集滤液，固体部分再用乙醇水溶液浸泡30分钟，回流提取60分钟，固液分离合并滤液，回收乙醇至无醇味得到提取液，备用；
[0013](2)取配方量的白芷和紫草，粉碎成粗粉，过20目筛，以乙醇湿润后(乙醇的使用重量为白芷和紫草重量的0.75~1.6倍)，以8倍重量的70v/v%乙醇水溶液作溶剂，浸溃8小时后进行渗漉提取,渗漉速度为0.5mL.(min.kg)'收集渗漉液,加入配方量的血竭溶解，再加入步骤(1)得到的提取液，混匀，过滤，滤液加70v/v%乙醇水溶液定容，当当归、甘草、白芷、紫草、血竭、诃子和黄蜀葵花的总配方重量为31g~64g时，定容的总体积为100mL ；
[0014](3)将25ml步骤(2)得到的提取液载入胶原(即用每一块胶原吸收25mL液体)，冷冻干燥后制成，环氧乙烷消毒后即得生肌玉红胶原海绵药物，其中，所述的胶原，孔径在15~25 μ m之间，成孔率98%,胶原为长宽50mmX 50mm、高度为2mm的长方体。
[0015]按照上述制备方法制备得到的生肌玉红胶原海绵药物也在本发明的保护范围之内。
[0016]上述生肌玉红胶原海绵药物在制备治疗慢性体表静脉性溃疡、褥疮、缺血性创面、糖尿病足、放射性溃疡或麻风病溃疡药物中的应用也在本发明的保护范围之内。
[0017]上述生肌玉红胶原海绵药物在制备创面持续负压封闭引流治疗中的辅料植入药物中的应用。
[0018]上述生肌玉红胶原海绵药物的鉴别方法，取生肌玉红胶原样品，其规格为50mmX 50mmX 2mm,剪碎后加70v/v%乙醇水溶液50ml,超声处理30分钟，滤过,作为备用滤液；
[0019]该方法包括如下鉴别项目:
[0020](I)取备用滤液10ml，水浴蒸干，残渣加乙醚20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取当归对照药材0.6g，加10ml70v/v%乙醇水溶液浸泡30分钟，回流提取I小时，放冷，滤过，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；以正己烷-乙酸乙酯按体积比4:1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
[0021](2)取备用滤液10ml，水浴蒸干，残渣加60~90°C石油醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取紫草对照药材0.6g，粉碎，以70V/V%乙醇水溶液IOml作溶剂，浸溃8小时后进行渗漉提取，收集渗漉液，合并，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸按体积比5:5:0.5:0.1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的紫色斑点；
[0022](3)取血竭对照药材0.2g,以70v/v%乙醇水溶液IOml溶解，过滤，滤液同项目(I)制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液和项目(I)下的供试品溶液各ΙΟμΙ，分别点于同一硅胶G薄层板上；以三氯甲烷-甲醇按体积比19:1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的橙色斑点；
[0023](4)取备用滤液10ml，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取金丝桃苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上；以50V/V%冰醋酸水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0024]上述生肌玉红胶原海绵药物的含量测定:照高效液相色谱法测定。
[0025]⑴血竭素:
[0026]色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(72:28)为流动相；检测波长为440nm ;柱温40°C。理论板数按血竭素峰计算应不低于4000。
[0027]对照品溶液的制备:取血竭素高氯酸盐对照品9mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加3%磷酸甲醇溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml棕色量瓶中，加甲醇置刻度，即得每1ml含血竭素26 μ g的对照品溶液(血竭素重量=血竭素高氯酸盐重量/1.377)。
[0028]供试品溶液:精密吸取鉴别项下备用滤液2ml，水浴蒸干，残渣用3%磷酸甲醇溶液溶解，置IOml棕色量瓶中，定容，摇匀。用微孔滤膜(0.45μπι)滤过，取续滤液，即得。
[0029]测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0030]本品每片胶原(50mm X 50mm X 2mm)含血竭以血竭素(C17H14O3)计，不得少于3.25mg。
[0031]⑵甘草苷:
[0032]色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈(A)-0.08%磷酸溶液(B)梯度洗脱(见表1)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按甘草苷峰计算应不低于5000。
[0033]表1流动相梯度洗脱表
[0034]
【权利要求】
1.生肌玉红胶原海绵药物，其特征在于，它由如下重量份数的组分制成:当归5~10份，甘草5~10份，白?Ε 5~10份，紫草5~10份,血竭I~4份,诃子5~10份,黄蜀葵花5~10份，载体为胶原。
2.根据权利要求1所述的生肌玉红胶原海绵药物，其特征在于，它由如下重量份数的组分制成:当归6份，甘草6份，白芷6份，紫草6份，血竭2.4份，诃子6份，黄蜀葵花6份，载体为胶原。
3.根据权利要求1所述的生肌玉红胶原海绵药物，其特征在于，每片50mmX50mmX2mm规格的胶原含血血竭素为3.25mg以上,甘草苷为5.0mg以上,欧前胡素为0.9mg以上。
4.权利要求1所述的生肌玉红胶原海绵药物的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤: (1)取配方量的当归、甘草、诃子和黄蜀葵花，用8倍重量的70v/v%乙醇水溶液浸泡30~60分钟，回流提取60~120分钟，固液分离收集滤液，固体部分再用乙醇水溶液浸泡30~60分钟，回流提取60~120分钟，固液分离合并滤液，回收乙醇至无醇味得到提取液，备用; (2)取配方量的白芷和紫草，粉碎成粗粉，过20目筛，以乙醇湿润后，以8倍重量的70V/V%乙 醇水溶液作溶剂，浸溃8~16小时后进行渗漉提取，渗漉速度为.0.5mL.(min.kg)4,收集渗漉液,加入配方量的血竭溶解,再加入步骤⑴得到的提取液，混匀，过滤，滤液加70v/v%乙醇水溶液定容，当当归、甘草、白芷、紫草、血竭、诃子和黄蜀葵花的总配方重量为31g~64g时，定容的总体积为100mL ； (3)将25ml步骤(2)得到的提取液载入胶原即得生肌玉红胶原海绵药物，冷冻干燥后制成，环氧乙烷消毒后即得生肌玉红胶原海绵药物，其中，所述的胶原，孔径在15~25 μ m之间，成孔率98%，胶原为长宽50mmX 50mm、高度为2mm的长方体。
5.根据权利要求4所述的生肌玉红胶原海绵药物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，以乙醇湿润，乙醇的使用重量为白芷和紫草重量的I~1.5倍。
6.按照权利要求4所述的制备方法制备得到的生肌玉红胶原海绵药物。
7.权利要求1或6所述的生肌玉红胶原海绵药物在制备治疗慢性体表静脉性溃疡、褥疮、缺血性创面、糖尿病足、放射性溃疡或麻风病溃疡药物中的应用。
8.权利要求1或6所述的生肌玉红胶原海绵药物在制备创面持续负压封闭引流治疗中的辅料植入药物中的应用。
9.权利要求1或6所述的生肌玉红胶原海绵药物的鉴别方法，其特征在于，取生肌玉红胶原样品，其规格为50mmX50mmX2mm，剪碎后加70v/v%乙醇水溶液50ml，超声处理30分钟，滤过，作为备用滤液； 该方法包括如下鉴别项目: (1)取备用滤液10ml，水浴蒸干，残渣加乙醚20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取当归对照药材0.6g，加10ml70v/v%Z醇水溶液浸泡30分钟，回流提取I小时，放冷，滤过，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；以正己烷-乙酸乙酯按体积比4:1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取备用滤液10ml，水浴蒸干，残渣加60~90°C石油醚20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取紫草对照药材0.6g，粉碎，以70V/V%乙醇水溶液IOml作溶剂，浸溃8小时后进行渗漉提取，收集渗漉液，合并，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；以环己烧-甲苯-乙酸乙酯-甲酸按体积比5:5:0.5:0.1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的紫色斑点； (3)取血竭对照药材0.2g,以70v/v%乙醇水溶液IOml溶解，过滤，滤液同项目(I)制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液和项目(I)下的供试品溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；以三氯甲烷-甲醇按体积比19:1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的橙色斑点； (4)取备用滤液10ml，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取金丝桃苷对照品，加乙醇制成每1ml含.0.2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上；以50v/v%冰醋酸水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的突光斑点 。
【文档编号】A61P3/10GK104013760SQ201410290509
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年6月24日 优先权日:2014年6月24日
【发明者】姚昶, 吴旭彤, 卞卫和, 孙蕾 申请人:江苏省中医院