油茶籽壳原花青素的制备方法
【专利摘要】本发明涉及植物产品提取加工【技术领域】，具体来说是一种油茶籽壳原花青素的制备方法，包括：粉碎、提取、过滤，浓缩、浓度调整、上样、洗脱、浓缩干燥后得原花青素；本发明方法能从油茶籽壳中提取原花青素，所需时间短，提取物纯度高，所用试剂均为乙醇，具有操作简单、成本低的特点，可广泛运用于油茶籽壳中原花青素的提取分离。
【专利说明】油茶籽壳原花青素的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物产品提取加工【技术领域】，具体来说是一种油茶籽壳原花青素的制 备方法。
【背景技术】
[0002] 原花青素有非常强的抗氧化和清除自由基的性能，具有保护心血管和预防高血 压、抗炎、抗诱变、抗溃疡、抗肿瘤、抑制微生物活性、促进毛发生长、调节免疫活性等作用， 是一种高效、低毒的天然活性物质，广泛分布于自然界中。虽然原花青素的需求量日益增 大，但目前国际市场上流行的相关产品来源较单一，以葡萄籽、松树皮为主。有一些文章报 道过对其它材料的研究，但可能由于含量太低或其他原因，大多数没有利用性开发与生产。
[0003] 油茶广泛分布在我国华中、华南、华东、西南等地，随着我国农业结构调整和国家 退耕还林工程的实施，油茶以其经济、防护兼用林的突出产品优势、经济优势和比较优势， 成为我国发展最快和最具发展潜力的木本油料之一。长期以来油茶种子主要用于茶油的制 取，而油茶籽壳的利用率较低。本研究以油茶籽壳为原料，提取纯化其中的原花青素，一方 面开辟新的原花青素来源，另一方面可充分利用油茶的资源提高油茶籽壳的利用价值，增 加附加值，具有重要现实意义。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是上述存在的问题，提供一种油茶籽壳原花青素的制备方法，该方 法可快速地从油茶籽壳提取原花青素。
[0005] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种油茶籽壳原花青素的制备方法， 步骤为：取油茶籽壳粉碎，加入油茶籽壳5?10倍重量的质量浓度为50?60%的乙醇， 90°C条件下连续提取两次，过滤，合并滤液，55°C真空条件下浓缩回收乙醇，得油茶籽壳原 花青素提取液，加入适量的水调整提取液浓度，使其中原花青素含量为1. 12?1. 68mg/ml， 以2?3BV/h的流速通过装有AB-8大孔吸附树脂的层析柱，上样液体积3?7BV，上样完毕 后关闭层析柱活塞，静置〇. 5h，然后打开活塞，用6BV的蒸馏水通过层析柱至流出水为无色 后，再用质量浓度为10?60%的乙醇洗脱，洗脱液在55°C真空条件下浓缩干燥后得原花青 素。
[0006] 进一步的，所述提取时间为60?90min。
[0007] 进一步的，所述洗脱时，乙醇溶液的流速为2?3BV/h。
[0008] 本发明中，利用乙醇洗脱时，分别用3BV的质量浓度为10%，30%、40%的乙醇以 2?3BV/h依次洗脱层析柱，并分别收集，将质量浓度为30%乙醇洗脱注液在55°C真空浓缩 后干燥，干粉中原花青素含量大于90% ;将质量浓度为乙醇洗脱液合并在55°C 真空浓缩后干燥，干粉中原花青素含量大于50% ;
[0009] 或用3?5BV的质量浓度为60 %乙醇以2?3BV/h的流速洗脱层析柱，洗脱液在 55°C真空浓缩后干燥，干粉中原花青素含量大于50%。
[0010] 本发明的有益技术效果是：本发明方法能从油茶籽壳中提取原花青素，所需时间 短，提取物纯度高，所用试剂均为乙醇，具有操作简单、成本低的特点，可广泛运用于油茶籽 壳中原花青素的提取分离。
【具体实施方式】
[0011] 实施例1
[0012] 油茶籽壳原花青素的制备方法，取油茶籽壳粉碎，加入油茶籽壳5倍重量的质量 浓度为50%的乙醇，90°C条件下连续提取两次，过滤，提取时间为60min，合并提取的滤液， 用旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司）在55°C条件下真空浓缩回收乙醇，得油茶籽壳 原花青素提取液，加入适量水调整提取液浓度，使其中原花青素含量为1. 12mg/ml，以2BV/ h的流速通过装有AB-8大孔吸附树脂的层析柱，上样液体积3BV，上样完毕后关闭层析柱活 塞，静置0. 5h，然后打开活塞，用6BV的蒸馏水通过层析柱至流出水为无色后，再依次用3BV 质量浓度为1〇%、40%的乙醇分别洗脱，流速为2BV/h，将两种浓度的洗脱液合并在55°C真 空条件下浓缩干燥，干粉中原花青素含量大于50%。
[0013] 实施例2
[0014] 油茶籽壳原花青素的制备方法，取油茶籽壳粉碎，加入油茶籽壳7倍重量的质量 浓度为55%的乙醇，在90°C条件下连续提取两次，过滤，提取时间为75min，合并提取的滤 液，用旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司）在55°C条件下真空浓缩回收乙醇，得油茶 籽壳原花青素提取液，加入适量水调整提取液浓度，使其中原花青素含量为1. 44mg/ml，以 3BV/h的流速通过装有AB-8大孔吸附树脂的层析柱，上样液体积5BV，上样完毕后关闭层析 柱活塞，静置〇. 5h，然后打开活塞，用6BV的蒸馏水通过层析柱至流出水为无色后，再用5BV 质量浓度为60%的乙醇洗脱，速度为3BV/h，洗脱液在55°C真空条件下浓缩干燥，干粉中原 花青素含量大于50%。
[0015] 实施例3
[0016] 油茶籽壳原花青素的制备方法，取油茶籽壳粉碎，加入油茶籽壳10倍重量的质量 浓度为60%的乙醇，在90°C条件下连续提取两次，过滤，提取时间为90min，合并提取的滤 液，用旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司）在55°C条件下真空浓缩回收乙醇，得油茶 籽壳原花青素提取液，加入适量水调整提取液浓度，使其中原花青素含量为1. 68mg/ml，以 3BV/h的流速通过装有AB-8大孔吸附树脂的层析柱，上样液体积5BV，上样完毕后关闭层析 柱活塞，静置〇. 5h，然后打开活塞，用6BV的蒸馏水通过层析柱至流出水为无色后，再依次 用3BV质量浓度为30 %的乙醇洗脱，洗脱速度为3BV/h，将质量浓度为30 %乙醇洗脱液在 55°C真空条件下浓缩干燥，干粉中原花青素含量大于90%。
[0017] 实施例4
[0018] 1、油茶籽壳原花青素的检测方法
[0019] 采用香草醛一盐酸法：配制浓度为1. 〇mg/ml原花青素标准品溶液，分别取0、 0· 1、0· 2、0· 3、0· 4、0· 5、0· 6、0· 7、0· 8、0· 9ml，加 60 % 乙醇至 1. Oml，加入 6. 0ml4 % 香草 醛-甲醇溶液和3. Oml的浓盐酸，摇匀，避光，在30°C恒温水浴中保持30min，取出后在 510nm波长下测其吸光值，吸光值与原花青素含量进行线性回归处理，线性回归方程y = 1. 007x-0. 0138, R2 = 0. 9999
[0020] 取样品溶液1. 0ml与标样同法显色，根据标准曲线计算样品中原花青素含量。
[0021] 2、正交试验确定油茶籽壳原花青素提取工艺
[0022] 根据原花青素在醇水中溶解度较大的特性，选择四个有关因素进行提取实验，提 取次数为两次。因素为：温度（A)，时间（B)，料液比（C)，醇浓度（D)，设计因素见表1，结 果见表2,方差分析见表3,表明A 3B3C2D2，即温度为90°C，时间为90min，料液比为1:10， 醇度为60%时提取效果最佳。方差结果分析表明，在实验设计水平中四因素只有温度具 有显著性差异，其他因素无显著性差异，因此，工业上为减少操作时间及后续浓缩消耗，提 取工艺实际操作条件可以为：温度为901：，时间为60-901^11，料液比为1 :5-1:10，醇浓度 50% -60%，提取 2 次。
[0023] 表1因素表
[0024]
【权利要求】
1. 油茶籽壳原花青素的制备方法，其特征在于，步骤为：取油茶籽壳粉碎，加入油茶籽 壳5?10倍重量的质量浓度为50?60%的乙醇，90°C条件下连续提取两次，过滤，合并滤 液，55°C真空条件下浓缩回收乙醇，得油茶籽壳原花青素提取液，加入适量的水调整提取液 浓度，使其中原花青素含量为1. 12?1. 68mg/ml，以2?3BV/h的流速通过装有AB-8大孔 吸附树脂的层析柱，上样液体积3?7BV，上样完毕后关闭层析柱活塞，静置0. 5h，然后打开 活塞，用6BV的蒸馏水通过层析柱至流出水为无色后，再用质量浓度为10?60%的乙醇洗 脱，洗脱液在55 °C真空条件下浓缩干燥后得原花青素。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取时间为60?90min。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱时，乙醇溶液的流速为2?3BV/ h〇
【文档编号】A61K36/82GK104083534SQ201410347223
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月21日 优先权日:2014年7月21日
【发明者】陆英, 刘仲华, 谭斌, 林海燕, 庄凌 申请人:湖南农业大学