一种抗氧化的复合中药提取分离物及其制备方法
【专利摘要】本发明属于中药领域，公开了一种抗氧化的复合中药提取分离物及其制备方法，所述的抗氧化的复合中药提取分离物包括下述重量份的提取分离物：马齿苋水提物为4～8份、冬葵子乙醇提取物为6～14份、鱼腥草乙醇提取物为2～5份、柏子仁超临界萃取物为5～10份。所述的抗氧化的复合中药提取分离物制备方法包括水提、醇提、超临界萃取、柱分离等步骤。制备得到的复合中药提取分离物具有显著的清除超氧阴离子自由基的作用，提高了中药的抗氧化性能。
【专利说明】一种抗氧化的复合中药提取分离物及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于中药领域，涉及一种复合中药提取分离物及其制备方法，特别是涉及一种抗氧化的复合中药提取分离物及其制备方法。
【背景技术】
[0002]自由基(Free radical)是人体生命活动中各种生化反应的中间代谢产物,具有高度的化学活性，是机体有效的防御系统，若不能维持一定水平则会影响机体的生命活动。但自由基产生过多而不能及时地清除，它就会攻击机体内的生命大分子物质及各种细胞器，造成机体在分子水平、细胞水平及组织器官水平的各种损伤，加速机体的衰老进程并诱发各种疾病。
[0003]超氧阴离子自由基是从黄嘌呤氧化酶、NADPH氧化酶通过酶的电子还原作用释放的氧产生的或由呼吸链裂解生成的。
[0004]自由基具有高度的活泼性和极强的氧化反应能力，能通过氧化作用攻击体内的生命大分子，如核酸、蛋白质、糖类和脂质等，使这些物质发生过氧化变性、交联和断裂，从而引起细胞结构和功能的破坏，导致机体的组织破坏和退行性变化。自由基的强氧化作用，损伤了机体的生命大分子，弓I起人体细胞免疫和体液免疫的功能减弱，最终导致免疫疾病的出现。
[0005]专利号为CN100450541的专利公开了具有美容抗氧化功效的中药保健制剂，所述的技术方案在美容方面作用较大，而在抗氧化方面的作用较低。因此需要开发具有较高抗氧化作用的中药提取分离物。
【发明内容】
[0006]要解决的技术问题:常规的中药中有很多成分具有抗氧化的作用，但是其抗氧化作用都较弱，不能有效的清除自由基，需要将具有抗氧化作用的中药成分进行提取和分离，再进行合理组合，来提高其抗氧化的活性，因此需要一种抗氧化的复合中药提取分离物及其制备方法。
[0007]技术方案:针对上述问题，本发明公开了一种抗氧化的复合中药提取分离物，所述的抗氧化的复合中药提取分离物包括下述重量份的提取分离物:马齿苋水提物为4?8份、冬葵子乙醇提取物为6?14份、鱼腥草乙醇提取物为2?5份、柏子仁超临界萃取物为5?10份。
[0008]优选的，所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物，包括下述重量份的提取分离物:马齿苋水提物为4?8份、冬葵子乙醇提取物为6?14份、鱼腥草乙醇提取物为2?5份、柏子仁超临界萃取物为5?10份、鸭跖草水提物为5?12份、鸡矢藤提取分离物为5?7份。
[0009]优选的，所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物，包括下述重量份的提取分离物:马齿苋水提物为6份、冬葵子乙醇提取物为9份、鱼腥草乙醇提取物为4份、柏子仁超临界萃取物为7份、鸭跖草水提物为8份、鸡矢藤提取分离物为5份。
[0010]一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，所述的复合中药提取分离物的制备方法如下:(I)将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提后取上清液，将上清液浓缩后得到马齿苋水提物；(2)将冬葵子粉碎后加入乙醇进行提取，提取后过滤，将滤液真空浓缩后为冬葵子乙醇提取物；(3)将鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取后离心分离，将上层清液浓缩得到鱼腥草乙醇提取物；(4)将柏子仁粉碎后采用超临界二氧化碳萃取法进行萃取，收集分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物；(5)将鸭跖草粉碎，粉碎后用水浸提、过滤、浓缩得到鸭跖草水提物；(6)将鸡矢藤先用水进行提取，提取后将提取液过硅胶柱，收集流出液，浓缩后得到鸡矢藤提取分离物；(7)按重量取马齿苋水提物为4?8份、冬葵子乙醇提取物为6?14份、鱼腥草乙醇提取物为2?5份、柏子仁超临界萃取物为5?10份、鸭跖草水提物为5?12份、鸡矢藤提取分离物为5?7份，将上述提取分离物混合后为抗氧化的复合中药提取分离物。
[0011]优选的，所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，所述的马齿苋提取物制备方法如下:将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提温度为室温，浸提时间为4h，水的重量为马齿苋重量的4倍，浸提后取上清液，将上清液真空浓缩后得到马齿苋水提物。
[0012]优选的，所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，所述的冬葵子乙醇提取物制备方法如下:将冬葵子用粉碎机进行粉碎，粉碎后加入乙醇进行提取，提取温度为50°C,提取时间为40min,料液比为1:7,提取后将提取液用滤布过滤,过滤后将滤液进行真空浓缩至无乙醇流出后，收集浓缩物，浓缩物为冬葵子乙醇提取物。
[0013]优选的，所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，所述的鱼腥草乙醇提取物制备方法如下:将晾干后的鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取温度为65°C，提取时间为30min，料液比为1: 3，提取后离心分离，收集上清液，将上层清液真空浓缩得到鱼腥草乙醇提取物。
[0014]优选的，所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，所述的柏子仁超临界萃取物的制备方法如下:取柏子仁，将柏子仁烘干至柏子仁的水分含量为3wt%，再将柏子仁粉碎，粉碎后进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为30MPa，一级分离压力为8.5MPa，二级分离压力为6.5MPa，萃取时间为2h，萃取温度为45°C，收集一级和二级分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物。
[0015]优选的，所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，所述的鸭跖草水提物的制备方法如下:将鸭跖草粉碎，粉碎后用水进行搅拌浸提，浸提温度为室温，浸提时间为120min，浸提料液比为1:4，浸提结束后过滤、浓缩得到鸭跖草水提物。
[0016]优选的，所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，所述的鸡矢藤提取分离物制备方法如下:将鸡矢藤粉碎，粉碎后用水浸泡3h，浸泡后再用水进行提取，提取温度为室温，提取时间为150min，提取料液比为1:6，再将提取液过滤，过滤得到上清液；将上清液通过活化过的300目的硅胶柱，硅胶柱的径高比为1:10，上样流速为lBV/h，收集流速也为lBV/h，流出液共收集100管，将最后30管流出液合并后浓缩，得到鸡矢藤提取分离物。
[0017]常规的中药成分中一些多糖、黄酮都具有抗氧化的作用，但是其抗氧化作用都较差，不能有效的清除自由基。本发明中对马齿苋和鸭跖草进行了水提，得到了马齿苋和鸭跖草中的一些活性水溶性成分，如多糖等。另外还对冬葵子和鱼腥草进行醇提，获得了冬葵子和鱼腥草中的一些活性成分。另外还对柏子仁进行了超临界萃取获得了柏子仁中的活性非极性成分，还对鸡矢藤中的活性成分进行了提取和分离，最终组合在一起的复合中药提取分离物具有较好的抗氧化作用。
[0018]有益效果:测定了本发明的抗氧化的复合中药提取分离物的超氧阴离子自由基清除率。本发明的复合中药提取分离物的自由基清除率在81.5%至99.3%，都具有显著的抗氧化的作用。最佳的复合中药提取分离物的自由基清除率最高，达到了 99.3%。显著的高于其他实施方案的清除率。
[0019]
【具体实施方式】
[0020]实施例1
(I)将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提温度为室温，浸提时间为4h，水的重量为马齿苋重量的4倍，浸提后取上清液，将上清液真空浓缩后得到马齿苋水提物；(2)将冬葵子用粉碎机进行粉碎，粉碎后加入乙醇进行提取，提取温度为50°C，提取时间为40min，料液比为1:7，提取后将提取液用滤布过滤，过滤后将滤液进行真空浓缩至无乙醇流出后，收集浓缩物，浓缩物为冬葵子乙醇提取物；(3)将晾干后的鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取温度为65°C，提取时间为30min，料液比为1: 3，提取后离心分离，收集上清液，将上层清液真空浓缩得到鱼腥草乙醇提取物；(4)取柏子仁，将柏子仁烘干至柏子仁的水分含量为3wt%，再将柏子仁粉碎，粉碎后进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为30MPa，一级分离压力为8.5MPa，二级分离压力为6.5MPa，萃取时间为2h，萃取温度为45°C，收集一级和二级分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物；(5)将鸭跖草粉碎，粉碎后用水进行搅拌浸提，浸提温度为室温，浸提时间为120min，浸提料液比为1:4，浸提结束后过滤、浓缩得到鸭跖草水提物；(6)将鸡矢藤粉碎，粉碎后用水浸泡3h，浸泡后再用水进行提取，提取温度为室温，提取时间为150min，提取料液比为1:6，再将提取液过滤，过滤得到上清液；将上清液通过活化过的300目的硅胶柱，硅胶柱的径高比为1:10，上样流速为lBV/h，收集流速也为lBV/h，流出液共收集100管，将最后30管流出液合并后浓缩，得到鸡矢藤提取分离物；(7)按重量取马齿苋水提物为6份、冬葵子乙醇提取物为9份、鱼腥草乙醇提取物为4份、柏子仁超临界萃取物为7份、鸭跖草水提物为8份、鸡矢藤提取分离物为5份，将上述提取分离物混合后为抗氧化的复合中药提取分离物。
[0021]实施例2
(I)将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提温度为室温，浸提时间为4h，水的重量为马齿苋重量的4倍，浸提后取上清液，将上清液真空浓缩后得到马齿苋水提物；
(2)将冬葵子用粉碎机进行粉碎，粉碎后加入乙醇进行提取，提取温度为50°C，提取时间为40min，料液比为1:7，提取后将提取液用滤布过滤，过滤后将滤液进行真空浓缩至无乙醇流出后，收集浓缩物，浓缩物为冬葵子乙醇提取物；(3)将晾干后的鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取温度为65°C，提取时间为30min，料液比为1: 3，提取后离心分离，收集上清液，将上层清液真空浓缩得到鱼腥草乙醇提取物；(4)取柏子仁，将柏子仁烘干至柏子仁的水分含量为3wt%，再将柏子仁粉碎，粉碎后进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为30MPa，一级分离压力为8.5MPa，二级分离压力为6.5MPa，萃取时间为2h，萃取温度为45°C，收集一级和二级分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物；(5)将鸭跖草粉碎，粉碎后用水进行搅拌浸提，浸提温度为室温，浸提时间为120min，浸提料液比为1:4，浸提结束后过滤、浓缩得到鸭跖草水提物；(6)将鸡矢藤粉碎，粉碎后用水浸泡3h，浸泡后再用水进行提取，提取温度为室温，提取时间为150min，提取料液比为1:6，再将提取液过滤，过滤得到上清液；将上清液通过活化过的300目的硅胶柱，硅胶柱的径高比为1:10，上样流速为lBV/h，收集流速也为lBV/h，流出液共收集100管，将最后30管流出液合并后浓缩，得到鸡矢藤提取分离物；(7)按重量取马齿苋水提物为8份、冬葵子乙醇提取物为6份、鱼腥草乙醇提取物为2份、柏子仁超临界萃取物为10份、鸭跖草水提物为5份、鸡矢藤提取分离物为6份，将上述提取分离物混合后为抗氧化的复合中药提取分离物。
[0022]实施例3
(I)将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提温度为室温，浸提时间为4h，水的重量为马齿苋重量的4倍，浸提后取上清液，将上清液真空浓缩后得到马齿苋水提物；
(2)将冬葵子用粉碎机进行粉碎，粉碎后加入乙醇进行提取，提取温度为50°C，提取时间为40min，料液比为1:7，提取后将提取液用滤布过滤，过滤后将滤液进行真空浓缩至无乙醇流出后，收集浓缩物，浓缩物为冬葵子乙醇提取物；(3)将晾干后的鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取温度为65°C，提取时间为30min，料液比为1: 3，提取后离心分离，收集上清液，将上层清液真空浓缩得到鱼腥草乙醇提取物；(4)取柏子仁，将柏子仁烘干至柏子仁的水分含量为3wt%，再将柏子仁粉碎，粉碎后进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为30MPa，一级分离压力为8.5MPa，二级分离压力为6.5MPa，萃取时间为2h，萃取温度为45°C，收集一级和二级分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物；(5)将鸭跖草粉碎，粉碎后用水进行搅拌浸提，浸提温度为室温，浸提时间为120min，浸提料液比为1:4，浸提结束后过滤、浓缩得到鸭跖草水提物；(6)将鸡矢藤粉碎，粉碎后用水浸泡3h，浸泡后再用水进行提取，提取温度为室温，提取时间为150min，提取料液比为1:6，再将提取液过滤，过滤得到上清液；将上清液通过活化过的300目的硅胶柱，硅胶柱的径高比为1:10，上样流速为lBV/h，收集流速也为lBV/h，流出液共收集100管，将最后30管流出液合并后浓缩，得到鸡矢藤提取分离物；(7)按重量取马齿苋水提物为4份、冬葵子乙醇提取物为14份、鱼腥草乙醇提取物为5份、柏子仁超临界萃取物为5份、鸭跖草水提物为12份、鸡矢藤提取分离物为7份，将上述提取分离物混合后为抗氧化的复合中药提取分离物。
[0023]实施例4
(I)将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提温度为室温，浸提时间为4h，水的重量为马齿苋重量的4倍，浸提后取上清液，将上清液真空浓缩后得到马齿苋水提物；
(2)将冬葵子用粉碎机进行粉碎，粉碎后加入乙醇进行提取，提取温度为50°C，提取时间为40min，料液比为1:7，提取后将提取液用滤布过滤，过滤后将滤液进行真空浓缩至无乙醇流出后，收集浓缩物，浓缩物为冬葵子乙醇提取物；(3)将晾干后的鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取温度为65°C，提取时间为30min，料液比为1: 3，提取后离心分离，收集上清液，将上层清液真空浓缩得到鱼腥草乙醇提取物；(4)取柏子仁，将柏子仁烘干至柏子仁的水分含量为3wt%，再将柏子仁粉碎，粉碎后进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为30MPa，一级分离压力为8.5MPa，二级分离压力为6.5MPa，萃取时间为2h，萃取温度为45°C，收集一级和二级分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物；(5)按重量取马齿苋水提物为8份、冬葵子乙醇提取物为6份、鱼腥草乙醇提取物为2份、柏子仁超临界萃取物为10份，将上述提取分离物混合后为抗氧化的复合中药提取分离物。
[0024]实施例5
(I)将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提温度为室温，浸提时间为4h，水的重量为马齿苋重量的4倍，浸提后取上清液，将上清液真空浓缩后得到马齿苋水提物；
(2)将冬葵子用粉碎机进行粉碎，粉碎后加入乙醇进行提取，提取温度为50°C，提取时间为40min，料液比为1:7，提取后将提取液用滤布过滤，过滤后将滤液进行真空浓缩至无乙醇流出后，收集浓缩物，浓缩物为冬葵子乙醇提取物；(3)将晾干后的鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取温度为65°C，提取时间为30min，料液比为1: 3，提取后离心分离，收集上清液，将上层清液真空浓缩得到鱼腥草乙醇提取物；(4)取柏子仁，将柏子仁烘干至柏子仁的水分含量为3wt%，再将柏子仁粉碎，粉碎后进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为30MPa，一级分离压力为8.5MPa，二级分离压力为6.5MPa，萃取时间为2h，萃取温度为45°C，收集一级和二级分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物；(5)按重量取马齿苋水提物为4份、冬葵子乙醇提取物为14份、鱼腥草乙醇提取物为5份、柏子仁超临界萃取物为5份，将上述提取分离物混合后为抗氧化的复合中药提取分离物。
[0025]超氧阴离子自由基清除率测定
取离心管，分别加入0.05mol/L的pH=7.5的tris盐酸缓冲液5mL，分别加入实施例1至5的复合中药提取分离物的水溶液0.5mL，质量分数为5wt%。混合均匀后在25°C下水浴15min。取出后马上加入0.4mmol/L的邻苯三酹溶液为4.5mL。反应3min后加入10wt%的维生素C溶液0.05mL来终止反应。1min后，在420nm处测定各实施例的紫外吸光度，对照例以纯水0.3mL作为待测样品。计算对照例与实施例1至5的吸光度值的差值，再将差值除以对照例的吸光度值为清除率。同时进行对比实验，对比实验中药为三七重量为4份、山楂为5份、丹参为6份、五味子为3份，用水煎熬后得到中药提取液，清除率测定方法同上。测定结果如下。
[0026]实施例1至5和对比例的超氧阴离子自由基清除率分别为:99.3%,90.3%,89.6%、81.5%, 82.4%, 66.8%。
[0027]可以看出，实施例1至5的复合中药提取分离物都具有非常高的自由基清除率，都具有显著的抗氧化的作用。实施例1的复合中药提取分离物的自由基清除率最高，达到了99.3%。显著的高于实施例2至5的清除率。对比例的超氧阴离子自由基清除率最低，只有
66.8%ο
【权利要求】
1.一种抗氧化的复合中药提取分离物，其特征在于所述的抗氧化的复合中药提取分离物包括下述重量份的提取分离物:马齿苋水提物为4?8份、冬葵子乙醇提取物为6?14份、鱼腥草乙醇提取物为2?5份、柏子仁超临界萃取物为5?10份。
2.根据权利要求1所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物，其特征在于所述的抗氧化的复合中药提取分离物包括下述重量份的提取分离物:马齿苋水提物为4?8份、冬葵子乙醇提取物为6?14份、鱼腥草乙醇提取物为2?5份、柏子仁超临界萃取物为5?10份、鸭跖草水提物为5?12份、鸡矢藤提取分离物为5?7份。
3.根据权利要求2所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物，其特征在于所述的抗氧化的复合中药提取分离物包括下述重量份的提取分离物:马齿苋水提物为6份、冬葵子乙醇提取物为9份、鱼腥草乙醇提取物为4份、柏子仁超临界萃取物为7份、鸭跖草水提物为8份、鸡矢藤提取分离物为5份。
4.一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，其特征在于所述的复合中药提取分离物的制备方法如下:(I)将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提后取上清液，将上清液浓缩后得到马齿苋水提物；(2)将冬葵子粉碎后加入乙醇进行提取，提取后过滤，将滤液真空浓缩后为冬葵子乙醇提取物；(3)将鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取后离心分离，将上层清液浓缩得到鱼腥草乙醇提取物；(4)将柏子仁粉碎后采用超临界二氧化碳萃取法进行萃取，收集分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物；(5)将鸭跖草粉碎，粉碎后用水浸提、过滤、浓缩得到鸭跖草水提物；(6)将鸡矢藤先用水进行提取，提取后将提取液过硅胶柱，收集流出液，浓缩后得到鸡矢藤提取分离物；(7)按重量取马齿苋水提物为4?8份、冬葵子乙醇提取物为6?14份、鱼腥草乙醇提取物为2?5份、柏子仁超临界萃取物为5?10份、鸭跖草水提物为5?12份、鸡矢藤提取分离物为5?7份，将上述提取分离物混合后为抗氧化的复合中药提取分离物。
5.根据权利要求4所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，其特征在于所述的马齿苋提取物制备方法如下:将马齿苋干燥后粉碎，粉碎用水进行浸提，浸提温度为室温，浸提时间为4h，水的重量为马齿苋重量的4倍，浸提后取上清液，将上清液真空浓缩后得到马齿苋水提物。
6.根据权利要求4所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，其特征在于所述的冬葵子乙醇提取物制备方法如下:将冬葵子用粉碎机进行粉碎，粉碎后加入乙醇进行提取，提取温度为50°C，提取时间为40min，料液比为1: 7，提取后将提取液用滤布过滤，过滤后将滤液进行真空浓缩至无乙醇流出后，收集浓缩物，浓缩物为冬葵子乙醇提取物。
7.根据权利要求4所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，其特征在于所述的鱼腥草乙醇提取物制备方法如下:将晾干后的鱼腥草打碎，打碎后用乙醇进行提取，提取温度为65°C，提取时间为30min，料液比为1: 3，提取后离心分离，收集上清液，将上层清液真空浓缩得到鱼腥草乙醇提取物。
8.根据权利要求4所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，其特征在于所述的柏子仁超临界萃取物的制备方法如下:取柏子仁，将柏子仁烘干至柏子仁的水分含量为3wt%，再将柏子仁粉碎，粉碎后进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为30MPa，一级分离压力为8.5MPa，二级分离压力为6.5MPa，萃取时间为2h，萃取温度为45°C，收集一级和二级分离釜中的萃取物，为柏子仁超临界萃取物。
9.根据权利要求4所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，其特征在于所述的鸭跖草水提物的制备方法如下:将鸭跖草粉碎，粉碎后用水进行搅拌浸提，浸提温度为室温，浸提时间为120min，浸提料液比为1:4，浸提结束后过滤、浓缩得到鸭跖草水提物。
10.根据权利要求4所述的一种抗氧化的复合中药提取分离物的制备方法，其特征在于所述的鸡矢藤提取分离物制备方法如下:将鸡矢藤粉碎，粉碎后用水浸泡3h，浸泡后再用水进行提取，提取温度为室温，提取时间为150min，提取料液比为1:6，再将提取液过滤，过滤得到上清液；将上清液通过活化过的300目的硅胶柱，硅胶柱的径高比为1:10，上样流速为lBV/h，收集流速也为lBV/h，流出液共收集100管，将最后30管流出液合并后浓缩，得到鸡矢藤提取分离物。
【文档编号】A61K36/78GK104306519SQ201410489049
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年9月23日 优先权日:2014年9月23日
【发明者】李建华 申请人:苏州市天灵中药饮片有限公司