金属硫蛋白复合制剂作为制备穴位介入治疗脑中风后遗症药物的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种金属硫蛋白复合制剂作为制备穴位介入治疗脑中风后遗症药物的应用。所述金属硫蛋白复合制剂为纯度大于95％的冻干粉兔肝金属硫蛋白，其重量比例为MT-Ⅰ 50％，MT-Ⅱ 50％。本发明在治疗脑中风后遗症过程中，对整体器官组织的代谢改善及脑损伤后修复非常显著，加快了对脑内环境的代谢和净化，加速修复受损的脑神经细胞，恢复脑神经细胞的正常分化，使由其控制的运动、语言神经系统体征得到改善，从根本上改善脑中风后遗症的语言不利，肢体功能障碍等症状，并且有效防止病症复发。患者康复时间短，临床治愈高，值得推广。
【专利说明】金属硫蛋白复合制剂作为制备穴位介入治疗脑中风后遗症 药物的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于金属硫蛋白医药用途领域，具体地说是一种金属硫蛋白（MT)复合制 剂作为制备穴位介入治疗脑中风后遗症药物的应用。
【背景技术】
[0002] 目前在治疗脑中风后遗症方面，西医采用口服或注射药物以抗血小板聚集类，钙 离子拮抗剂：卡托普利阿斯匹林，氯吡格雷，尼莫地平，甘露醇，脑活素为主，是通过扩张血 管，抗凝血，改善脑组织供血。减轻脑中风后遗症症状、降低高复发率的有效方法，被动恢复 锻炼的同时，通过可靠的药物治疗，对脑中风诱因动脉粥样硬化斑块形成、血液粘度高等基 础病变进行有效治疗，防止动脉硬化血栓再次形成；改善脑组织供血供氧量，为脑组织创造 一个良好的内环境，恢复脑神经系统，使由其控制的运动、语言神经系统，肢体功能障碍等 体征得到改善，并且有效防止病症复发进展。
[0003] 多数西药，包括阿司匹林都有不同程度的耐药性，而绝大多数西药的副作用明显， 对胃肠、肝肾造成不同程度的损伤。所以在脑中风急性发作期多以西药治疗为主，但不适合 在恢复期和预防期长期服用。
[0004] 中医采用中药为主，结合针刺、艾灸、电针、拔罐、刺络放血、药物穴位注射为辅、中 药方剂用活血化瘀、芳香开窍疗法；中药治疗脑中风疾病，具有无耐药性、药效持久、安全适 合长期服用的优势，但缺点是质量不稳定，服用剂量大。
[0005] 目前传统疗法治疗脑中风后遗症不论中药或西药，都是扩张血管。抗凝血，活血化 瘀、芳香开窍进行康复治疗，康复时间长。
【发明内容】
[0006] 所要解决的技术问题：本发明目的是提供一种金属硫蛋白（MT)复合制剂的新用 途，即在作为制备穴位介入治疗脑中风后遗症药物的应用。
[0007] 技术方案：一种金属硫蛋白（MT)复合制剂作为制备穴位介入治疗脑中风后遗症 药物的应用。所述金属硫蛋白制剂重量比例为金属硫蛋白MT- I 50%，金属硫蛋白MT-II 50%，纯度大于95 %的冻干粉兔肝金属硫蛋白。
[0008] 本发明作用机理如下：
[0009] -、本发明采用金属硫蛋白复合制剂（金属硫蛋白MT- I与金属硫蛋白MT- II,以 下简称为：MT- I、MT- II)介入人体穴位内能直接吸收并发挥其生理作，在治疗脑中风后遗 症中，是通过清除体内及病灶垃圾（清除自由基，消除脑内因血管破裂出血后未吸收的残 余物及血管栓塞物，通过降低颅内压，修复受损神经细胞，激活处于休眠状态的神经细胞， 实现神经细胞的正常分化，并清除已经受损残和死亡的神经细胞。修复损伤的DNA，提升体 液PH值，恢复脑细胞正常功能），为脑细胞提供良好的洁净生理环境，分化年轻细胞，使脑 组织得于修复活化，恢复脑神经系统，使由其控制的运动、语言神经系统体征得到改善。从 根本上改善脑中风后遗症的语言不利，肢体功能障碍等症状，并且有效防止病症复发及进 展。金属硫蛋白（MT)参与体内微量金属元素的运输、储存和代谢，使人体内金属元素的重 新分配，对体内重金属元素铅，汞，镉，铜等有强力清除力，对治疗脑中风后遗症神经轴突的 修复再生起着重要的作用，使脑内及整体代谢处于动态平衡来实现的。
[0010] 细胞是组成人体最基本的单位，一切生命活动都在细胞之间完成，能量的供给最 终是为细胞服务；只有健康的细胞；人体才能发挥正常的生理功能。人体在生命活动过程 中；不断地进行新陈代谢，在代谢过程中不断产生代谢产物（垃圾）。代谢产物存在于细胞 间质之间，如得不到及时的清除则成为内毒素不断攻击健康细胞。致使细胞脂质过氧化而 成病态，加速细胞钙内流，直接影响血管平滑肌细胞的正常弹性功能，使血管钙化变性。值 得指出的是；体内积蓄过多代谢产物及过量重金属元素是导致体液PH值降低的因素，也是 影响血管平滑肌细胞的正常弹性功能和血液稠度增大而成血栓的原因。
[0011] 金属硫蛋白（MT)从上世纪50年代发现至今，越来越多的科学家被奇特的金属硫 蛋白吸引，对金属硫蛋白的结构，性质，生理功能及其在生物，医学，环境等方面的应用进行 了广泛的研究，目前金属硫蛋白（MT)在世界上召开过五次国际研讨会议。
[0012] 发明人从事临床医学三十余年，对金属硫蛋白（MT)的临床应用已有十余年，自 2003年起把金属硫蛋白（MT)作为强抗氧化剂（自由基强力清除剂）和重金属解毒剂及促 进细胞生长剂，应用于治疗脑中风后遗症至今，收到非常理想的治疗效果。清除体内自由基 (清除脑内垃圾，促进细胞生长分化，恢复脑细胞功能，从而改善功能障碍等症状），疗效已 超过传统治疗标淮，金属硫蛋（MT)无毒，无不良反应，金属硫蛋（MT)穴位介入比任何中西 药制剂的穴位介入都安全。因此，为尽快解除广大患者的疾苦，得于临床普及应用。
[0013] 金属硫蛋白（Metallothionein)，简称MT是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属 结合蛋白。1957年Margoshes. M和Vallee. B.L[1]首次从马肾中分离出该物质，当时并未 引起重视，直到80年代之后，逐步发现其具有多种重要的生物学功能，才引起科学家们的 重视。现已发现MT同时存在于所有的生物体中，包括哺乳动物、各种低等动物、植物和微生 物中，从广义上讲，金属硫蛋白和其类似物可分为三大类：第一类即人，哺乳动物的具有全 部金属硫蛋白结构和特性的。第二类存在于较低等动、植物和微生物中的类似金属硫蛋白。 第三种广泛地存在于低等植物中的根部，实为谷胱甘肽类聚合物。第一类也就是真正的金 属硫蛋白的生物功能的效果最强，尤其是人，其次是各种哺乳动物。目前市场上销售的多为 兔肝金属硫蛋白。当然从猪、牛、羊等哺乳动物肝脏中也可制得兔肝类似MT，但由于其中对 兔肝MT研究得最深，且易获得，所以还是使用兔肝MT比较安全可靠。
[0014] 兔肝MT与其它哺乳动物MT -样，是由68个氨基酸构成的一个单肽链蛋白质分 子，分子量约为6500,分子中富含7个二价金属，主要为锌，其次为铜，钴等，在有毒环境下 也会含有毒重金属如汞、镉、铅等。它也能与一价金属如一价铜、金、银结合。在正常体内主 要为锌，少量的铜，钴等，其分子最大特点是富含半胱氨酸，即占全部氨基酸中约30% (即 20个左右），最有意思的是它们在分子中都是以金属一巯基簇形式存在，使整个分子结构 十分紧密和牢固，稳定。在金属存在下，它可以有效地拮抗高温和蛋白酶对其的分解。但在 酸性条件下极不稳定，在PH4. 0以下，就易脱掉金属，暴露自由巯基而使整个分子松弛（变 性态），此时易受蛋白酶的攻击而被降解，导致生物活性的丧失。所以MT不能口服，否则易 被胃液所破坏导致失效，因此，制成肠溶衣胶囊不失为一种有效的方法，但它一进入肠道就 不易再被蛋白酶所破坏，人体对MT吸收最有效的途径是舌下或皮下粘膜。
[0015] 金属硫蛋白是一种诱导蛋白，在体内主要由肝脏合成，通常情况下含量甚微，但当 受环境刺激下，诸如锌和重金属，烷基化试剂，某些细胞因子（如干扰素，白介素…）和细 菌，病毒的侵入，也可因在对机体严重不利的情况下（诸如极度寒冷，高温，紧张，危急，饥 饿等）会加速其体内的生物合成，所以这也可被看作是机体的一种自卫手段。
[0016] 二、金属硫蛋白（MT)具有多种生物学作用。
[0017] (1)参与体内微量金属元素的运输、储存和代谢等。研究表明体内很多参与新陈 代谢的酶类，包括参与体内蛋白质、核酸生物合成的多种酶，参与体内能量合成的某些酶， 参与体内解毒作用的酶，以及参与体内蛋白质分子折叠（保持蛋白质的天然构象与生物功 能的蛋白质分子），以及参与体内金属代谢的蛋白质、酶类，都需要有某种一定量的金属参 与，否则就不会有生物活性和功能。类似老年人与儿童缺锌、缺铁等等都会引起某些疾病的 发生和影响健康。但如单纯补锌补微量元素，体内多数未被吸收而被排出，如在肝脏内富有 MT，它就可从食物中吸收和固定金属元素，贮藏下来，一旦机体需要，它就可以将其运输和 缓慢释放，起到"银行""仓库"的作用。尤其是老年人、幼儿的补锌。
[0018] (2)参与体内重金属解毒作用。目前由于环境的污染，尤其是土壤与水域中大量重 金属（如镉，汞，铅，铬等）的存在，通过食物链（粮食，蔬菜，水果，空气，饮用水…）进入体 内，严重危害人体健康，尤其是铅对儿童神经系统的破坏最为严重。由于MT结构的特殊性， 它能有效地将细胞内游离的有毒重金属结合（高度专一性和亲和性）而排出体外，起到解 毒作用。
[0019] (3)抗氧化，抗衰老作用及护肝作用。通过多年分子、细胞和整体动物水平研究发 现，它是自然界抗氧化、抗衰老的最有效的生物活性物质之一。在细胞内发现它具有大幅度 地提高抗氧化活性物质谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶，SOD等的含量，反之，却能降低氧化 作用产物如肝脏脂质过氧化物，心肌脂褐素的含量。通过抗小鼠D-半乳糖拟老化（衰老） 效应模型试验结果发现MT可明显改善小鼠的学习记忆能力，降低MDA(丙二醛，一种致癌促 衰老化学物质）的含量及提高SOD活性，说明MT对D-半乳糖的致衰老效应有很好的对抗 作用。同时还发现MT对D-半乳糖诱导果蝇寿命缩短具有保护作用（延缓寿命1/10)，其它 诸如抗静态缺氧效应，对小鼠尾静脉栓子LD50的影响，对大鼠脑多发性栓塞致死效应的影 响以及对小鼠脑栓塞记忆功能衰退的影响等都显示出良好的抗衰老作用。
[0020] (4)参与抗辐射，保护机体，尤其是细胞核，DNA的辐射受损进行修复。实验证明， 它不单可修复受损细胞DNA，而且还可预防，效果显著，它能提高因辐射而引起的淋巴细胞、 白细胞的下降，且呈量效关系，高剂量的MT可以抵御高剂量的辐射，同样动物因辐射的死 亡率也大大下降，提高了存活率和存活时间。因而明显地具有提高机体抵抗放射性辐射的 能力，由此可见可被用于预防辐射损伤的诸行业人员的劳保和预防，也可用于肿瘤病人放 疗中的保护。
[0021] (5)清除自由基，尤其是羟基自由基。经研究发现，MT具有很强的清除自由基能 力，值得注意的是它尤其对危害人类健康最甚的羟基自由基，远远强于S0D，是目前最强的 天然产物。这与上述MT具有强抗氧化作用是一致的，可用于抗肿瘤、糖尿病、心血管疾病及 神经退行性病变（如老年性痴呆症等）的改善和缓解。有关MT对这些老年性疾病的关系， 尚在进行研究，将有可能成为这方面的医药产品（目前尚无医药产品）。
[0022] (6)促进细胞生长，机体发育和能量代谢等。这很显然与MT本身的结构与功能有 关。由于它是体内多种参与代谢的蛋白质、酶的活性必须成份一微量金属元素的供应者和 运输者，由它才能调节体内物质的新陈代谢，包括能量代谢与细胞的生长、分化。另外又据 近来利用蛋白质组学技术的研究，发现它还能抑制细胞凋亡和促进蛋白质正确折叠（使具 有正常的生物学功能）和抗氧化作用，即抗衰老作用。因而可以判断MT将可发展成为营养 保健，抗衰老和治疗药物。
[0023]目前在国内外，有关MT的研究主要已涉及医学和环保，尤其是老年性疾病。但是， 金属硫蛋白（MT)在用于治疗脑中风后遗症尚无这方面的应用报道。
[0024] 三、技术来源和先进性。
[0025] 本技术来自北京大学生命科学学院以茹炳根教授领导的蛋白质课题组，其MT研 究处于国际领先地位，先后获得七五、八五、九五国家科委的国家攻关项目，七五、八五、 九五的[863]项目，和国家自然科学基金多项。1995年5月获国家教委科技进步一等奖， 1999年5月通过了国家教育部组织的产业化技术鉴定，2001年和2004年又分别获中国高 校科学技术二等奖（2个）。其中兔肝金属硫蛋白产品已为国家九五攻关产品。受国际组织 委托，由北京大学茹炳根教授主持在2005年10月在北京胜利召开了第五届金属硫蛋白国 际会议。
[0026] 四、金属硫蛋白对神经系统疾病的作用。
[0027] 1、金属硫蛋白（MT)在中枢神经系统中的表达及生物学功能。
[0028] 金属硫蛋白（metallothioneins, MTs)是一种具有广泛生物学活性的蛋白质。MTs 作为一种多功能蛋白，在抗氧化、抗凋亡、清除自由基、维持必需金属稳态、重金属解毒等 方面具有重要作用。（以下称MTs表示MT家族）。
[0029]现已知的MT家族包括MT-I，MT-II，MT-III，MT-IV四种亚型，其中MT-I和 MT-II存在于各种组织中，MT-III的表达局限于脑组织中，MT-IV仅在复层磷状上皮中表达。
[0030] 脑组织表达的MTs中，MT- I和MT- II是最具代表性的亚型，占脑中金属硫蛋白总 含量的2/3;而MT-III仅存在于脑中。使用不同抗体进行免疫组织化学研究脑组织中MT- I 和MT- II的表达，结果都一致地显示MT- I和MT- II主要存在于脑和脊髓中，它的主要表 达细胞是星形胶质细胞，并在脑室脉络丛上皮细胞、软脑（脊）膜细胞、血管内皮细胞中表 达，而神经元很少表达MT- I / II，但也有少数报告显示神经元中有MT- I / II的阳性表 达。原位杂交结果与免疫细胞化学和细胞培养结果一致，显示MT- I和MT-II mRNAs主要 存在于星形胶质细胞中，但在个别神经元中有低水平的mRNAs，特别是海马CA3区的神经 元。与MT- I / II不同，MT-III存在于哺乳动物脑的神经元和胶质细胞中，而且MT-IIImRNA 和MT-III蛋白研究结果不一致，所以MT-III在细胞内的定位尚存在争议，但是目前一致认 为MT- I，MT- II和MT-III都主要在星形胶质细胞内表达，在神经元中有低水平的表达（且 MT-III >MT- I和MT- II )。关于区域分布，星形胶质细胞内的MT-III和MT- I / II多数在 相同中枢神经系统区域中表达，包括皮层、脑干和脊髓。而神经元内MT-III在海马齿状回 颗粒细胞中表达较多，特别是在突触小泡中储存锌的神经元。
[0031] MTs在中枢神经系统中的功能是调节必需金属的内环境稳态和代谢，调节非必需 金属的贮存和解毒，以及抗凋亡、清除自由基和调节细胞内氧化还原平衡。锌、铜、镉等金 属对MTs的表达调控具有重要的作用，均能诱导MTs的产生。其中，锌与MTs的相互作 用对正常生理功能的维持具有重要的调节作用。锌缺乏可以影响生长、免疫活性以及脑功 能，但过量锌也可以对细胞产生毒性，因此动物体内必须有一个精密的系统来维持锌的稳 态平衡。MTs参与锌离子的贮存和转运，同时锌又在转录水平调节MTs的合成，这种调节 是通过金属反应转录因子 _1 (metal responsive transcrip tion factor-l，MTF_l)与MTs 基因启动子上的金属反应元件（metal respon-sive elements, MRE)的相互作用来实现的。 而且研究显示，锌的抗氧化作用是通过诱导MTs的合成而实现的，所以MTs作为一种抗氧 化蛋白在中枢神经系统损伤中的作用日益得到关注。目前研究表明脑损伤后MT- I /11的 神经生物功能明显不同于MT-III。MT- I /11在中枢及外周神经系统中具有神经保护作用 和抑制迟发性损伤如氧化应激和退化。而脑中MT- III具有神经生长抑制、神经保护及神经 再生调控等生物学功能。MT家族在中枢神经系统损伤中具有重要的作用，研究中枢神经系 统损伤中MT不同亚型表达的调控机制具有重要意义。
[0032] 2、金属硫蛋白（MT)在中枢神经系统损伤中的表达调控及其保护作用。
[0033] MT- I / II在损伤后的表达及其保护作用研究表明MT- I / II在中枢神经系统损 伤后的表达上调对脑组织具有保护作用。MT- I / II除了在神经系统退行性疾病中表达上 调之外，在许多的中枢神经系统损伤实验模型中也出现表达上调，如由海人藻酸、6-氨基 烟酰胺和NMDA等引发的化学性脑损伤，以及低温、局部缺血等物理性损伤。这种表达升高 主要发生在损伤后最初几小时至几天内损伤附近的星形胶质细胞和小胶质细胞中。转基 因小鼠的研究进一步确证了 MT- I /11的这种表达上调对中枢神经系统损伤的保护作用。 MT- I / II基因敲除小鼠对海人藻酸诱导癫痫发作的中枢神经系统损伤更敏感，与对照组 相比惊厥的次数显著增加，时间显著增长。具体表现在给予海人藻酸3d后，MT2 I /11基 因敲除小鼠显示出海马星形胶质细胞和小胶质细胞的减少，神经元的损伤和凋亡都增强， 并出现明显的氧化应激，表现在核因子κ B、Cu, Zn-超氧化物歧化酶（Cu, Zn-SOD)和酪氨 酸蛋白硝基化水平的升高。同样，MT- I /11表达缺失小鼠给予6-氨基烟酰胺3d后可引 起星形神经胶质细胞和小胶质细胞/巨噬细胞浸润减少，粒细胞2巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF)和其受体表达的降低。在中枢神经系统低温损伤模型中，MT- I / II基因敲除小 鼠脑组织的愈合能力明显低于对照组，其神经胶质细胞出现损伤，大多数细胞发生凋亡 (主要是神经元），且明显高于对照组，这间接表明MT具有抑制中枢神经系统细胞凋亡的 作用。在缺锌饮食大鼠的低温脑损伤中也观察到相似的结果，同时伴随着MT- I / II的表 达降低。在皮层局部缺血损伤中，MT- I过表达小鼠比同类野生型小鼠恢复能力要快。除 了这些损伤模型的研究外，最近一些研究显示MT- I / II还能够显著影响其他细胞因子/ 生长因子和皮层低温损伤后的血管发生。
[0034] 以上研究都表明MT- I / II的表达升高主要发生在损伤后的星形胶质细胞以及 小胶质细胞中，且对神经损伤有保护作用。在其他转基因模型小鼠的研究也得到相似 的结果，髓鞘遗传性缺损小鼠的星形胶质细胞和小胶质细胞中可观察到MT- I /11的 强诱导效应，这种突变鼠的遗传性障碍导致严重的中枢神经系统病理性改变，包括髓 质减少、少突神经胶质细胞死亡、星形胶质细胞和小胶质细胞活动增强。在具有临床症状 的GFAP-L6, GFAP-TNF，GFAP-L3和GFAP-干扰素（IFN) - α等转基因小鼠中也能观察到 MT- I /11表达升高，而且在这些转基因小鼠上都可观察到神经胶质增生及神经元的损伤。
[0035] 以上研究有力地支持了中枢神经系统损伤后MT- I / II的保护作用，其机制可能 与它的锌和铜的结合能力及抗氧化能力有关。锌是脑必需金属，而过多的锌具有神经毒 性。MT- I / II基因敲除小鼠中锌鳌合酶水平升高，这可能是由于这些小鼠的神经退行性 变性增强。体外和体内试验表明在中枢神经系统中MT- I / II有抗氧化功能。此外近期采 用组织培养方法研究发现在脑损伤中，MT- I /11的表达上调是通过星形胶质细胞调节的， 这种调节是通过一种尚未确定的神经元和星形胶质细胞之间的相互作用来进行的。然而， 神经元损伤后介导星形胶质细胞表达MT- I / II的信号通路尚不明确。神经元和星形胶质 细胞共培养的环境中加入谷氨酸可以引起MT- I / II的表达增强，而谷氨酸的受体阻断剂 则明显减少这种MT- I / II的表达。由此，他们认为谷氨酸是一种重要的介导神经元和星 形胶质细胞损伤后联系的信号因子之一，同时其他一些信号因子如细胞因子、锌以及自由 基可能与谷氨酸共同调控MT- I / II的表达。
[0036] 3、金属硫蛋白（MT)在中枢神经系统损伤后免疫应答中的作用。
[0037] 近期研究发现MTs能够直接减轻伴随着中枢神经系统损伤发生的炎症应答，并 增强修复能力。中枢神经系统损伤后的过度炎症反应是引起再次损伤及影响神经再生的 重要因素。研究表明介导损伤后炎症反应的大多数急性细胞因子如IL-1，IL_6, TNF-α和 interferon-γ都能够诱导MT表达。此外，还观察到MT和免疫细胞的直接作用，其中包 括淋巴细胞和巨噬细胞。这种相互作用可能改变细胞与细胞识别的免疫过程。
[0038] Hidalgo等广泛研究了中枢神经系统损伤后MT基因敲除小鼠的炎症应答的变化， 发现一些动物实验性损伤模型中，给予MT- I / II可以调节损伤后的炎症应答。脑皮层损 伤后，MT- I / II能够明显减少促炎症反应细胞因子的表达，以及降低反应性神经胶质增 生。实验性自身免疫脑脊髓炎小鼠给予MT- II处理后，脑中促炎症反应细胞因子（如IL-6 和TNF-α)表达降低，神经元的凋亡也明显减少。还有研究显示MTs能够显著降低T淋巴 细胞（CTL)的诱导作用并抑制同源靶细胞的溶解活性。由于CTLs在保护性免疫应答中起 到重要作用，所以MT对免疫系统有重要的保护作用。体内试验中，MT也能够调节T细胞 依赖性抗原引起的体外体液免疫应答，这与注射外源性MT后观察到的免疫应答降低和注 射单克隆MT抗体后卵白蛋白免疫应答性增高是一致的。同样，MT- I /11基因敲除小鼠呈 现出对T细胞依赖性抗原引起的体液免疫反应升高。以上研究表明MTs参与了中枢神经系 统损伤后的免疫应答，而且可能通过减少损伤后的免疫应答而对神经系统起保护作用。
[0039] 4、金属硫蛋白（MT)对中枢神经系统损伤后神经元的修复作用。
[0040] 研究表明MT- I / II对损伤后的神经元有营养作用，能够加速损伤神经元的修 复。MT- I / II的这种作用可能是通过两种不同的机制：一是通过减少损伤引起的炎症应 答；二是通过直接作用于神经元而加速损伤神经元的修复。MT- I / II对于损伤后的修复 过程是必不可少的。例如星形细胞的激活和迁移，以及减少免疫应答。还有一些明显的证 据表明MT- I / II对神经元的死亡有保护作用，但不确定这种保护效应是由于减少免疫应 答还是直接作用于神经元，或两者皆有。通过采用缺少免疫系统的神经元损伤组织培养模 型进行研究，发现MT- I / II可通过直接作用于神经元或增加神经元存活率和损伤部位轴 突的后续再生而加快损伤愈合。有研究表明MT- I / II能够加速轴突横断面处突起反应性 增生，而MT-III能够抑制这种再生反应应答。此外在成年大鼠大脑皮层局部损伤后给予外 源性MT- I / II能够明显加速神经元的修复。
[0041] 金属硫蛋白MT- I / II，是生物界最理想的极强的抗氧化剂和自由基清除剂，对人 体全身各组织器官的代谢性及损伤性疾病有显著疗效。是目前无任何药物可比的对脑神经 细胞特效修复和保护的物质，也是对脑中风后遗症治疗的首选的理想制剂。
[0042] 金属硫蛋白（MT)在治疗脑中风后遗症过程中，虽局部穴位介入，但对整体器官 组织的代谢改善及损伤后修复非常显著。金属硫蛋白（MT)使用一个细胞周（90天使用 MT150mg至300mg)后，体内环境空前洁净，既治愈了疾病，患者又显得明显的年轻化。金属 硫蛋白（MT)是自然界抗氧化、清除自由基的最有效的生物活性物质，是目前最理想的细胞 保护剂之一。
【具体实施方式】
[0043] 脑中风后遗症穴位介入治疗：
[0044] 金属硫蛋白（MT)为通过特殊的诱导技术处理后的兔肝为原料，经分离、纯化，制 得的冻干粉的兔肝金属硫蛋白。
[0045] 金属硫蛋白复合制剂重量比例为MT- I 50%，MT- II 50%，纯度大于95%的冻干 粉兔肝金属硫蛋白。
[0046] 兔肝金属硫蛋白（MT)复合制剂溶剂：灭菌注射用水。
[0047] 兔肝金属硫蛋白（MT)复合制剂冻干粉与溶剂稀释配比：5-10mg/ml。（每毫升溶 液中含5-10毫克金属硫蛋白）。
[0048] 取穴方法：主穴：哑门透风府，辅穴，心俞，关元，内关，绝骨，平衡功能障碍加针刺 长强。
[0049] 用法：
[0050] A、用2 - 5ml -次性注射器吸取金属硫蛋白（MT)稀释液。
[0051] B、距离穴位0· 5Cm斜刺深至0· 4寸行针至气至，退至皮下介入0· 25-10mg，（即金 属硫蛋白（MT)复合制剂冻干粉稀释后的溶液0.4-2ml)至覆盖穴位。
[0052] 用量：
[0053] -个疗程90天。分15次穴位介入：前5次，1次/3天；后10次，1次/7天，10-20mg/ 次。三个月一疗程，一般一至三个疗程即可治愈。
[0054] 发明人把金属硫蛋白（MT)复合制剂应用于对照治疗脑中风后遗症73例，随访到 62例，治疗效果如下。
[0055] 诊断与病例选择标准，临床资料：
[0056] 1、一般资料：本组62例患者，为2003年03月?2012年04月治疗，病例入选标 准：脑中风后遗症诊断标准。男36例，女26例；年龄38?81岁，平均年龄54岁；
[0057] 脑出血24例，脑血栓18例，脑栓塞20例。
[0058] 病程在3个月之内7例，3个月?半年21例，7个月?1年20例，1年以上14例。 均排除有严重的心、肾疾病，无感染、手术、妊娠等应激情况。
[0059] 2、治疗方法：用随机数字表将患者随机分为治疗组和对照组，每组各31例患者， 两组均给予相同的基础治疗（复方丹参片，脑活素胶囊）口服，治疗组在此基础上用金属硫 蛋白（MT)复合制剂穴位介入，对照组口服复方丹参片，脑活素胶囊，两组年龄、性别、病程 等一般资料比较，差异无统计学意义（P > 〇. 05)，可以进行组间比较。
[0060] 其中，治疗组31例，男性17例，女性14例；年龄38?78岁，平均51. 6岁；病 程03?8年，平均3. 5年；除偏瘫外，合并口眼歪斜病者3例，合并言语不利者4例，合并 偏盲者3例，合并嘴歪眼斜者4例，合并上肢患侧障碍重者4例，合并下肢患侧障碍重者 5例。合并上下肢患侧障碍重者8例。
[0061] 对照组31例，男性19例，女性12例。年龄40?81岁，平均52. 4岁；病程03? 10年，平均2. 4年；除偏瘫外，合并口眼歪斜病者2例，合并言语不利者5例，合并偏盲者2 例，合并嘴歪眼斜者4例，合并上肢患侧障碍重者5例，合并下肢患侧障碍重者6例。合 并上下肢患侧障碍重者7例
[0062] 3、临床表现及实验室检查：
[0063] MRl或CT显示：
[0064] (1)治疗组左脑溢血5例，右脑溢血9例，左脑血栓8例，右脑血栓9例，
[0065] (2)对照组左脑溢血6例，右脑溢血8例，左脑血栓11例，右脑血栓6例
[0066]血压：
[0067] (1)治疗组；收治时；130 ?139/80 ?89mmHg 7 例，140 ?149/90 ?95mmHg，13 例，小于 130/80mmHg 11 例。
[0068] (2)对照组；收治时；130 ?139/80 ?89mmHg 11 例，140 ?149/90 ?95mmHg，10 例，小于 130/80mmHg 10 例。
[0069] 治疗实施：两组均相同的基础治疗（复方丹参片，脑活素胶囊）口服，疗程均为3 个月。
[0070] 治疗组在上述基础上加用金属硫蛋白（MT)复合制剂穴位介入，取穴标准；按中医 脑中风后遗症辨证诊断；主穴；哑门透风府，辅穴，心俞，关元，内关，绝骨，平衡功能障碍加 针刺长强；用量：一个疗程90天。分15次穴位介入：前5次，1次/3d ;后10次，1次/7d， 10-20mg/次。复方丹参片，4片/次，脑活素胶囊，2粒/次，3次/d，餐后30min 口服，疗程 为3个月。
[0071] 对照组；复方丹参片，4片/次，脑活素胶囊，2粒/次，3次M餐后30min 口服，疗 程为3个月。
[0072] 4、统计学分析：建立FOXPRO数据库，用SAS6. 12软件进行数据分析，统计学方法用 t检验和X 2检验。P〈0. 05为差异有统计学意义。
[0073] 5、疗效判定标准（1);临床治愈：患侧肢体有力，能徒步行走，生活可自理。（2);显 效：患侧肢体功能明显改善，可扶杖行走，生活可基本自理。（3);好转：患侧肢体功能恢复 有进步。（4);无效：治疗前后症状无改善。治疗总有效率=(临床治愈例数+显效例数+ 有效例数）/总例数X 100 %。
[0074] 6、临床治疗结果见下表。
[0075]治疗1个疗程治疗组与对照组患者疗效比较（例）
[0076]
【权利要求】
1. 一种金属硫蛋白复合制剂作为制备穴位介入治疗脑中风后遗症药物的应用。
2. 根据权利要求1所述的金属硫蛋白复合制剂作为制备穴位介入治疗脑中风后遗症 药物的应用，其特征在于：所述金属硫蛋白复合制剂为纯度大于95 %的冻干粉兔肝金属硫 蛋白，其重量比例为金属硫蛋白MT- I 50%，金属硫蛋白MT- II 50%。
【文档编号】A61K38/17GK104399060SQ201410597049
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2014年10月29日 优先权日:2014年10月29日
【发明者】刘添如 申请人:刘添如