本发明涉及药物组合，所述组合包括JAK抑制剂、CDK抑制剂和PIM抑制剂，其用于治疗癌症；所述组合在治疗癌症中的应用；以及治疗包括人在内的患癌温血动物的方法，所述方法包括向需要这类治疗的所述动物施用有效剂量的JAK抑制剂、CDK抑制剂和PIM抑制剂。
背景技术：
癌症是美国的第二大致死原因。尽管“癌症”用于描述许多不同类型的癌，如乳腺癌、前列腺癌、肺癌、结肠癌和胰腺癌，各类癌的表型水平和基因水平都不同。当一种或多种基因表达由于突变而失调且细胞生长不再受控时，出现未调节的癌生长特性。
骨髓增殖性肿瘤(MPN)是引起骨髓中过量生成血细胞(血小板、白血球和红细胞)的疾病。MPN包括真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性或特发性骨髓纤维化、慢性髓细胞性(粒细胞性)白血病(CML)、慢性中性粒细胞白血病(CNL)、幼年型粒单核细胞白血病(JML)和慢性嗜酸性粒细胞白血病(CEL)/高嗜酸性粒细胞综合征(HES)。这些疾病分组在一起，因为它们共有一些或所有以下特征：涉及多能造血祖细胞，转化克隆相比未转化造血祖细胞具有优势，缺乏可定义刺激时过量生成一个或多个造血细胞系，体外非生长因子依赖性集落形成，骨髓细胞过多，巨核细胞增生和发育不良，主要涉及染色体1、8、9、13和20的异常，血栓形成和出血性素质，旺盛的骨髓外造血和自发转化成急性白血病或发展出骨髓纤维化(但与CML相比速度较低)。MPN发生率差别很大，范围从每年每100,000个60岁以上的人中约3个患CML到每年每100,000个从出生到14岁的儿童中0.13个患JML(VardimanJW等.,Blood100(7):2292-302,2002)。因此，仍需要MPN以及其它癌症如实体瘤的新疗法。
技术实现要素：
本发明涉及含以下的药物组合：(1)第一药剂，其是JAK抑制剂或其药学上可接受盐，(2)第二药剂，其是CDK抑制剂或其药学上可接受盐，和(3)第三药剂，其是PIM抑制剂或其药学上可接受盐。更特定地，其涉及用所述组合治疗实体瘤和血液恶性肿瘤。
该组合可同时、分开或依序用于治疗癌症。
在一个实施方式中，所述JAK抑制剂是鲁索替尼，其在本文中也表示为化合物A，化学名为(3R)-3-环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡唑-1-基]丙腈。鲁索替尼以商品名和销售。
在一个实施方式中，所述CDK抑制剂是CDK4/6抑制剂。
所述CDK4/6抑制剂可以是例如
由下式B描述的化合物B，或其药学上可接受盐：
在一个实施方式中，所述PIM抑制剂是由下式C描述的化合物C(化学名：N-(4-((1R,3S,5S)-3-氨基-5-甲基环己基)吡啶-3-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶酰胺)，或其药学上可接受盐：
本发明还涉及上述药物组合以用于治疗癌症。
本发明还涉及治疗癌症的方法，包括向需要的温血动物(优选人)施用联合治疗有效量的上述药物组合。
根据本发明，所述药物组合中的化合物可作为单一药物组合物施用、作为分开的组合物施用或依序施用。
本发明还涉及含所述药物组合的药盒。
附图说明
图1显示用化合物A、化合物B和其组合在鼠MPN模型BA/F3-EpoR-JAK2V617F的研究终点时的总肿瘤负荷的降低。用IVISSpectrum临床前体内成像系统(珀金埃尔默(PerkinElmer))收集数据。
图2显示采用化合物A、化合物B单一疗法以及化合物A和化合物B的组合在鼠MPN模型BA/F3-EpoR-JAK2V617F的研究终点时的脾脏重量减少。
图3显示用化合物A以及化合物A和化合物B的组合在鼠MPN模型BA/F3-EpoR-JAK2V617F的研究终点时，PBMC中的JAK2V617F等位基因负担的调节。
图4显示用化合物A以及化合物A、化合物B和化合物C的三重组合在鼠MPN模型BA/F3-EpoR-JAK2V617F的研究终点时的总肿瘤负荷的降低。用IVISSpectrum临床前体内成像系统(珀金埃尔默)收集数据。
图5显示用化合物A以及化合物A、化合物B和化合物C的组合在鼠MPN模型BA/F3-EpoR-JAK2V617F的研究终点时的脾脏重量的减少。
图6显示用化合物A以及化合物A、化合物B和化合物C的组合在鼠MPN模型BA/F3-EpoR-JAK2V617F的研究终点时，PBMC中的JAK2V617F等位基因负担的下降。
图7显示化合物A、B或C各自对功效的剂量节约效果。
图8显示所有3种药剂(化合物A、B和C)对功效的剂量节约效果。
图9显示“间歇给药”对功效的效果。
具体实施方式
提供以下一般定义以更好理解本发明。
JAK抑制剂
JAK家族在参与免疫应答的细胞增殖和功能的细胞因子依赖性调节中起作用。4个哺乳动物JAK家族成员是：JAK1(也称为Janus激酶-1)、JAK2(也称为Janus激酶-2)、JAK3(也称为Janus激酶、白细胞、JAKL、L-JAK和Janus激酶-3)和TYK2(也称为蛋白-酪氨酸激酶2)。异常JAK-STAT信号传递参与多种人类发病机理。骨髓增殖性肿瘤(MPN)中的JAK2遗传变异和相关STAT活化是此通路参与人类肿瘤的一个示例。上游血小板生成素受体(MPLW525L)的突变和LNK(外显子2)对JAK调节的减少与骨髓纤维化相关(VainchenkerW等,Blood2011；118:1723；PikmanY等,PloxMed.2006,3:e270)。在大部分原发性骨髓纤维化患者中注意到导致JAK2组成型活化的JAK2突变，大多是JAK2V617F(KralovicsR等,NEngl.JMed2005,352:1779；BaxterEJ等,Lancet2005,365:1054；LevineRL等,CancerCell2005,7:387)。JAK2外显子12的其他突变已在真性红细胞增多症和特发性红细胞增多症中发现(ScottLM等,NEnglJMed2007,356:459)。另外，认为活化的JAK-STAT是人类癌症的生存机制(HedvatM等,CancerCell2009；16:487)。最近，有数据表明JAK2/STAT5抑制在转移性乳腺癌中会避开对PI3K/mTOR阻断的抵抗(BritschgiA等,CancerCell2012；22:796)。同样，在IL-6驱动的乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌中使用JAK1/2抑制剂可引起临床前模型中的肿瘤生长抑制(SansoneP和BrombergJ；J.ClinicalOncology2012,30:1005)。
CDK抑制剂
肿瘤发展与CDK的遗传改变和失调及其调节因子密切相关，表明CDK抑制剂可能是有用的抗癌疗法。确实，早期结果指示转化和正常细胞对于例如细胞周期蛋白D/CDK4/6的要求不同，且可开发新型抗肿瘤剂，其不具有使用常规细胞毒性和细胞抑制药所观察到的一般宿主毒性。
CDK的功能是磷酸化并因而使某些蛋白活化或灭活，包括例如成视网膜细胞瘤蛋白、核纤层蛋白、组蛋白H1和有丝分裂纺锤体组分。由CDK调节的催化步骤包括从ATP到大分子酶底物的磷酸转移反应。已发现数组化合物(综述参见例如Fischer,P.M.Curr.Opin.DrugDiscoveryDev.2001,4,623-634)通过CDK特异性ATP拮抗作用而具有抗增殖特性。
在分子水平，CDK/细胞周期蛋白复合物活性的调节需要一系列刺激和抑制性磷酸化或去磷酸化事件。CDK磷酸化通过一组CDK活化激酶(CAK)和/或激酶如wee1、Myt1和Mik1进行。去磷酸化通过磷酸酶如cdc25(a&c)、pp2a或KAP进行。
CDK/细胞周期蛋白复合物活性可进一步由两个内源细胞蛋白类抑制剂家族调节：Kip/Cip家族或INK家族。INK蛋白特异性结合CDK4和CDK6。p16ink4(也称为MTS1)是一种潜在的肿瘤抑制基因，其在大量原发性癌中突变或缺失。Kip/Cip家族包含蛋白如p21Cip1、Waf1、p27Kip1和p57kip2，其中p21由p53诱导并能使CDK2/细胞周期蛋白(E/A)复合物失活。已在乳腺癌、结肠癌和前列腺癌中观察到非典型性低p27表达水平。相反，细胞周期蛋白E在实体瘤中的过表达显示与较差的患者预后相关。细胞周期蛋白D1的过表达与食管癌、乳腺癌、鳞状和非小细胞肺癌相关。
CDK和其相关蛋白在协调和驱动增殖细胞的细胞周期中的关键作用如上所列。也描述了一些CDK发挥关键作用的生化通路。因此，可能极其需要开发使用普遍靶向CDK或靶向特定CDK的疗法治疗增殖性疾病(如癌)的单一疗法。因而，不断需要发现治疗人类疾病的新治疗剂。
PIM抑制剂
PIM蛋白(莫洛尼氏鼠白血病病毒的前病毒整合位点)是3个ser/thr激酶的家族，其序列中没有调节域且认为在翻译后具有组成型活性(Qian,K.C.等.J.Biol.Chem.2004.6130–6137页)。它们是参与细胞周期、增殖、凋亡和抗药性的癌基因(Mumenthaler等,MolCancerTher.2009；2882页)。发现其在造血系统肿瘤中的表达水平尤其高，但一些报道显示PIM1在胰腺癌、前列腺癌和肝癌中过表达以及PIM3在某些实体瘤中表达(综述参见Alvarado等,ExpertRev.Hematol.2012,81–96页)。PIM激酶由转录、翻译和蛋白酶体降解的速度调节，但对支配这些事件的因素仍然知之甚少。一种确定的且已知诱导PIM1/2表达的通路是JAK/STAT信号传导通路(Miura等,Blood.1994,4135–4141页)。STAT蛋白是转录因子，在细胞表面受体与其配体(如细胞因子)相互作用后于JAK酪氨酸激酶的下游活化。已知STAT3和STAT5都结合PIM启动子以诱导PIM表达(Stout等.JImmunol,2004；173:6409–6417)。除了JAK/STAT外，VEGF通路也显示在卵巢血管生成期间的内皮细胞以及人脐带静脉细胞中PIM表达上调(Zipo等,NatCellBiol.2007,932-944页)。
已发现施用本发明的JAK抑制剂、CDK抑制剂和PIM抑制剂的组合可提供治疗增殖性血液疾病的协同效应，所述疾病包括髓样肿瘤、白血病和其它血癌，而且也可能用于治疗实体癌。这种方法-组合或共施用两类药剂-能用于治疗不响应现有疗法或耐受现有疗法的患癌个体。对不响应现有癌症疗法的个体而言，本文提供的联合疗法还能用于提高这些疗法的功效和/或降低副作用。
“组合”指采用一个剂量单位形式的固定组合或联合施用的非固定组合(或成套药盒)，其中化合物和组合伴侣(如下述另一药物，也称为“治疗剂”或“助剂”)可同时独立施用或在一定时间间隔内分开施用，尤其是这些时间间隔使组合伴侣能显示协作(如协同)效应。本文所用的术语“联合施用”等意在涵盖向需要的单一对象(如患者)施用选定组合伴侣，且旨在包括那些试剂不必定通过相同的施应用径或同时施用的治疗方案。术语“固定组合”指活性成分(如式A化合物和组合伴侣)以单一实体或剂型同时施用于患者。术语“非固定组合”或“成套药盒”指活性成分(如式A化合物和组合伴侣)以单独实体同时、同步或依序施用于患者而没有特定时间限制，其中所述施用在患者体内提供治疗有效水平的两种化合物。
“治疗”包括癌症疾病或紊乱的预防性和治疗性处理(包括但不限于减轻、治愈、缓解症状、减少症状)以及进展延迟。术语“预防性”指防止癌症发病或复发。本文所用的术语“进展延迟”指将所述组合施用于处于待治疗癌症的病前阶段或早期的患者，对应癌症的预形式(pre-form)被诊断出和/或在被诊断处于对应癌症可能会发展的患者中。
“药物制剂”或“药物组合物”指含至少一种待施用于温血动物(如人)的治疗剂的混合物或溶液。
“共施用”、“共同施用”或“联合施用”等意在涵盖向单个患者施用选定治疗剂，且旨在包括那些试剂不必定通过相同施应用径或同时施用的治疗方案。
“药学上可接受”指在合理医学判断范围内适于接触哺乳动物(尤其是人)组织的那些化合物、材料、组合物和/或剂型，没有过度毒性、刺激、过敏反应和其它问题并发症，并具有合理的效益/风险比。
“治疗有效”优选涉及一定量的有疗效治疗剂，或在更广意义上也预防性有效抵御癌症进展。
“联合治疗有效”指治疗剂可以一定时间间隔分开(采用按时间顺序交叉方式，特别是顺序特异性方式)施用，从而其在待治疗的温血动物(尤其是人)中优选仍显示(优选协同)相互作用。情况是否如此能通过随后的显示两种化合物在至少某些时间间隔中存在于待治疗人的血液内的血液水平测定。
“单一药物组合物”指配制成向患者递送有效量的两种治疗剂的单一载体或载剂。所述单一载剂被设计成递送有效量的各药剂，以及任何药学上可接受的载体或赋形剂。在一些实施方式中，所述载剂是片剂、胶囊、药丸或贴片。在其它实施方式中，所述载剂是溶液或悬液。
“剂量范围”指指定的治疗剂含量的可接受变化的上限和下限。通常，量在指定范围内的试剂剂量能施用于接受治疗的患者。
“对象”、“患者”或“温血动物”意在包括动物。对象示例包括哺乳动物，如人、狗、牛、马、猪、绵羊、山羊、猫、小鼠、兔、大鼠和转基因非人动物。在某些实施方式中，所述对象是人，如患有、有风险患有、或潜在能患有脑肿瘤疾病的人。尤其优选所述对象或温血动物是人。
术语“约”或“大致”通常指给定值或范围的20％以内，更优选10％以内，最优选仍在5％以内。或者，特别是在生物系统中，术语“约”指给定值的大致一个对数范围(即一个数量级)内，优选在1/2到两倍范围内。
本发明涉及含以下的药物组合：(1)CDK抑制剂或其药学上可接受盐和(2)mTOR抑制剂或其药学上可接受盐。
这种组合可同时、分开或依序用于治疗癌症。
在一个实施方式中，所述JAK抑制剂是鲁索替尼，其在本文中也表示为化合物A，化学名为(3R)-3-环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡唑-1-基]丙腈。鲁索替尼以商品名和销售。
在一个实施方式中，所述CDK抑制剂是CDK4/6抑制剂。
所述CDK4/6抑制剂可以是例如
由下式B描述的化合物B(化学名：7-环戊基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-羧酸二甲酰胺)，或其药学上可接受盐：
在一个实施方式中，所述PIM抑制剂是由下式C描述的化合物C(化学名：N-(4-((1R,3S,5S)-3-氨基-5-甲基环己基)吡啶-3-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶酰胺)，或其药学上可接受盐：
本发明还涉及上述药物组合以用于治疗癌症。
本发明还涉及治疗癌症的方法，包括向需要的温血动物(优选人)施用联合治疗有效量的上述药物组合。
根据本发明，所述药物组合中的化合物可作为单一药物组合物、作为分开的组合物施用或依序施用。
本发明还涉及含所述药物组合的药盒。
化合物A、B和C能由本领域技术人员合成。具体地，化合物A在美国专利号7,598,257中公开；化合物B公开于WO2010/020675的实施例74；且化合物C公开于WO2010/026124的实施例70。
同样包括其药学上可接受盐、对应外消旋体、非对映异构体、对映异构体、互变异构体以及上面所公开化合物的相应晶体变体(若存在时)，如本文公开的溶剂合物、水合物和多晶型物。用作本发明组合活性成分的化合物能分别如所引用文献所述制备并施用。本发明范围也包括多于上述两种单独活性成分的组合，即本发明范围内的药物组合能包括三种或更多种活性成分。
认为本发明组合具有有益的治疗特性，如协同相互作用、强烈的体外或体内抗增殖活性和/或强烈的体外或体内抗肿瘤反应，对治疗癌症尤其有用。
本文提供用上述联合疗法治疗癌症(如骨髓增殖性肿瘤和实体瘤)的方法。
本文所用的“癌症”指由不恰当的高水平的细胞分裂、不恰当的低水平的细胞凋亡或两者引起或者导致的任何疾病。癌症示例包括但不限于白血病(如急性白血病、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性粒细胞性白血病、急性早幼粒细胞白血病、急性粒单核细胞白血病、急性单核细胞白血病、急性红白血病、慢性白血病、慢性粒细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病)、真性红细胞增多症、淋巴瘤(霍奇金病、非霍奇金病)、华氏巨球蛋白血症、重链病和实体瘤。
此外，本文提供的联合疗法涉及在包括人在内的温血动物中治疗实体瘤或液体瘤的药物组合物，包括抗肿瘤有效剂量的上述组合的化合物。
本文提供的联合疗法能用于治疗实体瘤如肉瘤和癌(如纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺瘤、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝癌、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎性癌、胚胎性癌肉瘤、宫颈癌、子宫癌、睪丸癌、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、胶质瘤、星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、成血管细胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、脑膜瘤、黑素瘤、成神经细胞瘤和成视网膜细胞瘤)。
在某个实施方式中，能用本文所提供组合治疗的癌症是骨髓增殖性疾病。骨髓增殖性疾病(MPD)现在通常称为骨髓增殖性肿瘤(MPN)，属于血液学恶性肿瘤类别，是造血祖细胞的克隆性疾病。Tefferi,A.和Vardiman,J.W.,《骨髓增殖性肿瘤的分类和诊断：2008年世界卫生组织标准和治疗点诊断法则》(Classificationanddiagnosisofmyeloproliferativeneoplasms:The2008WorldHealthOrganizationcriteriaandpoint-of-carediagnosticalgorithms),Leukemia,2007年9月,22:14-22，其通过引用纳入本文。其表现为一个或多个成熟髓系细胞类型的增殖和存活增加。此类别包括但不限于慢性髓细胞白血病(CML)、真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性或特发性骨髓纤维化(PMF)、慢性中性粒细胞白血病、慢性嗜酸性粒细胞白血病、慢性粒单核细胞白血病、幼年型粒单核细胞白血病、高嗜酸性粒细胞综合征、系统性肥大细胞增生症和不典型慢性髓细胞白血病。Tefferi,A.和Gilliland,D.G.,《骨髓增殖性疾病中的癌基因》(Oncogenesinmyeloproliferativedisorders),CellCycle.2007年3月,6(5):550-566，其通过引用全文纳入本文以用于所有目的。
本发明的一个目的是提供含一定量本发明各治疗剂的药物组合物，所述量是联合治疗有效靶向或防止癌症的量。
根据本发明，本发明组合物中的药剂可在单个药物组合物中一起施用，在两个或更多个分开的单位剂型中单独施用，或依序施用。所述单位剂型还可以是固定组合。
用于分开施用药剂或以固定组合(即含至少两种本发明所述治疗剂的单一盖仑组合物)施用的药物组合物可以本身已知的方式制备，且适合肠部施用(如口服或直肠)、局部施用和胃肠外施用于包括哺乳动物(温血动物)如人在内的对象，所述药物组合物包括治疗有效量的至少一种(例如上述的)单独药物活性组合伴侣，或其与一种或多种尤其适于肠部或胃肠外应用的药学上可接受载体或稀释剂联用。例如，合适的药物组合物包含约0.1％-约99.9％(优选约1％-约60％)的活性成分。
用于肠部施用或胃肠外施用的联合治疗的药物组合物是例如采用单位剂型(如糖衣片剂、片剂、胶囊或栓剂、安瓿、注射溶液或注射悬液)的那些。局部施用是例如施用于皮肤或眼睛，如采用洗液、凝胶、油膏或乳膏形式，或鼻剂或栓剂形式。除非另有说明，其以本身已知的方式制备，例如通过常规的混合、造粒、包糖衣、溶解或冻干工艺。应理解各剂型个体剂量所含的各药剂的单位内容物本身不需构成有效量，因为必需的有效量可通过施用多个剂量单位来实现。
药物组合物可包括一种或多种药学上可接受载体或稀释剂，其能以常规方式通过将组合伴侣之一或两者与药学上可接受载体或稀释剂混合来生产。药学上可接受稀释剂的示例包括但不限于乳糖、右旋糖、甘露醇、和/或甘油、和/或润滑剂和/或聚乙二醇。药学上可接受粘合剂的示例包括但不限于硅酸镁铝、淀粉(如玉米淀粉、小麦淀粉或米淀粉)、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮，以及若有需要，药学上可接受崩解剂包括但不限于淀粉、琼脂、藻酸或其盐(如藻酸钠)、和/或泡腾合剂、或吸附剂、染料、调味剂和甜味剂。还能采用胃肠外可施用组合物形式或输液形式使用本发明化合物。所述药物组合物可无菌和/或可包括赋形剂，例如防腐剂、稳定剂、润湿剂和/或乳化剂、增溶剂、调节渗透压的盐和/或缓冲剂。
具体地，治疗有效量的本发明组合各组合伴侣可同时或依序施用和以任何顺序施用，所述组分可分开或作为固定组合施用。例如，本发明所述预防或治疗癌症的方法可包括同时或以任何顺序依序：(i)施用游离或药学上可接受盐形式的第一药剂；和(ii)施用游离或药学上可接受盐形式的第二药剂，采用联合治疗有效量，优选协同有效量，例如对应于本文所述量的每日或间歇性剂量。本发明组合的个体组合伴侣可在治疗进程中的不同时间分开施用或者以分开或单个组合形式同步施用。此外，术语“施用”还包括使用体内自身转化成组合伴侣的组合伴侣前药。因此，本发明应理解成涵盖所有这类同时或交替治疗的方案且术语“施用”也进行相应解释。
本发明组合所用各组合伴侣药剂的有效剂量可根据所用特定化合物或药物组合物、施用模式、所治疗病症、所治疗病症的严重性而变化。因此，本发明组合的剂量方案根据多种因素选择，包括患者的类型、物种、年龄、体重、性别和医学状况；待治疗病症的严重性；施用途径；患者的肾及肝功能；和所使用的具体化合物。掌握普通技术的医师、临床医生或兽医能容易确定并处方预防、抵消或阻滞病症进展所需的有效量药物。达到产生功效范围内的药物浓度的最优精度需要基于药物对靶位点的可及性的动力学。这包括考虑药物的分布、平衡和消除。
在人中的多个实施方式中，化合物A的剂量可以是5mgBID、7.5mgBID、10mgBID、12.5mgBID、15mgBID、20mgBID或25mgBID。
在人中的多个实施方式中，化合物A的剂量可以是5mgQD、7.5mgQD、10mgQD、12.5mgQD、15mgQD、20mgQD或25mgQD。
在人中的多个实施方式中，化合物B的剂量可以是50mgQD、75mgQD、100mgQD、125mgQD、150mgQD、175mgQD或200mgQD。
在人中的多个实施方式中，化合物C的剂量可以是50mgQD、75mgQD、100mgQD、125mgQD、150mgQD、175mgQD、200mgQD、250mgQD、300mgQD或350mgQD。
在人中的另一个实施方式中，化合物A的剂量是10-20mgBID，化合物B的剂量是100-200mgQD，化合物C的剂量是150-300mgQD。在人中的另一个实施方式中，化合物A的剂量是15mgBID，化合物B的剂量是100mgQD且化合物C的剂量是250mgQD。
在人中的一个实施方式中，化合物A的剂量是25-30mgQD，化合物B的剂量是100mgQD且化合物C的剂量是250mgQD。
在人中的一个实施方式中，化合物A以10-20mgBID的剂量施用，化合物C以150-300mgQD的剂量施用且化合物B以100-200mgQD的剂量间歇性施用，如化合物B可持续每日施用指定时间段，随后中断指定时间，然后再在指定时间段施用。
在一个实施方式中，化合物B持续21天每日施用，接着不施用7天，随后再施用21天，接着不施用7天，等等。
另一益处是能采用更低剂量的本发明组合的活性成分，例如剂量不仅通常更小，而且施用频率更低，或能用于减少副作用发生。这符合待治疗患者的愿望和需求。
所述药剂的组合能合并于同一药物制品或采用联合制剂“成套药盒”形式，以使所述组合伴侣可独立给药或同时或在不同时间点使用有不同量组合伴侣的不同固定组合给药。随后成套药盒部分能同时施用或按时间顺序交叉施用，即就成套药盒任何部分而言在不同时间点和以相等或不等时间间隔施用。
本发明还涉及包括以下的药盒：第一化合物(化合物A或其药学上可接受盐)，第二化合物(化合物B或其药学上可接受盐)，以及包括癌症治疗指南的说明书或其它标签。
下列实施例阐明上述发明；但不意在以任何方式限制发明范围。本发明药物组合的有益效果还能由相关领域技术人员已知的其它测试模型确定。
在小鼠MPN模型中检测化合物A、化合物B和化合物C的组合。此模型中，Ba/F3细胞携带Epo受体和JAK2V617F突变。Ba/F3-EpoR-JAK2V617F用荧光素酶标签工程改造以进行实验成像。雌性SCID/Beige小鼠通过尾静脉接种1x10e6Ba/F3-EpoR-JAK2V617F细胞。总肿瘤负荷用IVISxenogen技术监测，其定义成背部和腹部光子信号之和。另外，定义为JAK2V617F与野生型JAK2的相对比例的JAK2V617F等位基因负担，在研究终点通过taqman在PBMC中测量。
实施例1
在第一实验中，带病小鼠根据疾病负担随机分入治疗组。小鼠用载剂、75mg/kg每天(QD)口服管饲(PO)的化合物B、60mg/kg每日二次(BID)PO的化合物A和两种药剂的组合处理。在研究终点，获得来自各研究组的脾脏重量。脾脏重量的相对变化如下计算：针对接受载剂治疗的组的平均脾脏重量，对个体脾脏重量进行标准化。化合物A和化合物B的组合引起疾病负担和脾脏重量下降更大。
图1，由生物发光水平测量的总肿瘤负荷，用化合物A和化合物B单一疗法时相对于载剂对照分别降低～79％和～77％。用化合物A和化合物B的组合时降低～92％。
图2显示化合物A以及化合物A和化合物B的组合对MPN临床前模型中脾脏重量的影响。相对于载剂对照，化合物A和化合物B单一疗法分别引起～62％和～38％脾脏重量减少。相对于载剂对照，化合物A和化合物B的组合引起～88％脾脏重量减少。
图3显示此模型中JAK2V617F等位基因负担的调节。化合物A、化合物B单一疗法和所述组合对JAK2V617F等位基因负担都有差不多的影响(相对于载剂对照下降～18-22％)。
实施例2
在第二实验中，带病小鼠根据疾病负担随机分入治疗组。小鼠用载剂、60mg/kg每日二次(BID)PO的化合物A以及化合物A、化合物B(75mg/kg,QD,PO)和化合物C(25mg/kg,QD,PO)的三重组合处理。在研究终点，获得来自各研究组的脾脏重量。脾脏重量的相对变化如下计算：针对接受载剂治疗的组的平均脾脏重量，对个体脾脏重量进行标准化。化合物A、化合物B和化合物C的组合引起更明显的总肿瘤负荷和脾脏重量减少。同样，三重组合在此模型中实现显著的JAK2V617F等位基因负担下降。
图4中，由生物发光水平测量的总肿瘤负荷，用化合物A治疗降低～70％。化合物A、化合物B和化合物C的三重组合使总肿瘤负荷降低超过99％。
图5显示化合物A以及化合物A、化合物B和化合物C的三重组合对MPN临床前模型中脾脏重量的影响。相对于载剂对照，化合物A单一疗法引起～53％脾脏重量减少。相对于载剂对照，化合物A、化合物B和化合物C的三重组合引起～96％脾脏重量减少。所得脾脏重量与未处理的非荷瘤小鼠类似。
图6显示此模型中JAK2V617F等位基因负担的调节。化合物A单一疗法使等位基因负担下调～15％。化合物A、化合物B和化合物C的三重组合使JAK2V617F等位基因下调～86％。
实施例3
此实验中，我们旨在评估当化合物A、B和C中的一种药剂剂量减小时的功效。带病小鼠根据疾病负担随机分入治疗组。小鼠根据以下剂量处理：
图7显示化合物C剂量(自25mg/kg)降低对功效的影响最小而化合物B剂量(自75mg/kg)降低大幅影响功效。
图8显示所有3种药剂同时剂量降低对功效产生显著影响。
宿主用全剂量三重组合处理时，残留疾病是xenogen信号(剩余疾病)。
实施例4
此实验中，我们旨在评估“间歇给药”方案的功效。带病小鼠根据疾病负担随机分入治疗组。小鼠根据以下剂量处理：
宿主用全剂量三重组合处理时，残留疾病是xenogen信号(剩余疾病)。
图9显示间歇给药引起BaF3模型中的功效明显下降。在BaF/JAK2V617F模型中，化合物A-B-C三重组合的“间歇给药”导致功效显著下降。
实施例5
计划在骨髓纤维化患者中口服施用的化合物A(鲁索替尼)和/或化合物B和/或化合物C的组合的Ib期、多中心、开放标签、剂量递增研究。
化合物A口服施用。化合物A的剂量可以是5mgBID、7.5mgBID、10mgBID、12.5mgBID或15mgBID。
化合物B口服施用。化合物B的剂量可以是50mgQD、75mgQD、100mgQD、125mgQD、150mgQD、175mgQD或200mgQD。
化合物C口服施用。化合物C的剂量可以是50mgQD、75mgQD、100mgQD、125mgQD、150mgQD、175mgQD或200mgQD。
该试验的主要目的是就骨髓纤维化患者的以下3个治疗组各自评估MTD和/或RDE：(1)化合物C+化合物A；(2)化合物B+化合物A；和(3)化合物A+化合物B+化合物C。
次要目的是：(1)鉴定以下组合的安全性和耐受性：化合物C+化合物A、化合物B+化合物A和化合物A+化合物B+化合物C三重组合；(2)评价以下组合的初步抗骨髓纤维化活性：化合物C+化合物A、化合物B+化合物A和化合物A+化合物B+化合物C三重组合；和(3)鉴定化合物A+化合物B+化合物C组合的PK分布。