一种渔用二联口服微球疫苗及其用途的制作方法

文档序号:11093778阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种渔用二联口服微球疫苗,其特征在于:它包括鮰爱德华氏菌微球疫苗以及鲁氏耶尔森氏菌微球疫苗,其中,鮰爱德华氏菌微球疫苗、鲁氏耶尔森氏菌微球疫苗按照如下方法制备:

(1)取鮰爱德华氏菌或者鲁氏耶尔森氏菌,制成菌液,灭活,得灭活疫苗;

(2)在灭活疫苗中加入海藻酸钠至终浓度为3.5%(w/v),混匀,得混合溶液,将混合溶液滴加到液体石蜡中,其中,混合溶液与液体石蜡的体积为为2.4:7.6,乳化,得乳液;

(3)将乳液滴加到等体积浓度为7%(w/v)的CaCl2溶液中,再加入浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液,静置,去除上层油相和水,离心,收集微球,清洗,即可。

2.根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:所述鮰爱德华氏菌微球疫苗与鲁氏耶尔森氏菌微球疫苗的体积比为1:1。

3.根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:步骤(1)中,所述菌液中,鮰爱德华氏菌或者鲁氏耶尔森氏菌的浓度为4×109cfu/mL。

4.根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:步骤(1)中,所述灭活的方式是:加入福尔马林至终浓度为0.3%(w/v),120r/min、28℃条件下灭活24h。

5.根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:步骤(2)中,所述液体石蜡中添加有乳化剂,乳化剂为Span-80,乳化剂的浓度为5.4%(w/v)。

6.根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:步骤(2)中,乳化的方式是:2000r/min搅拌13min。

7.根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:步骤(3)中,静置的时间是1h。

8.根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:步骤(3)中,离心的转速为8000r/min,离心的时间为5min。

9.根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:步骤(3)中,清洗的方式为乙醇清洗3次,再用去离子水清洗3-4次。

10.权利要求1-9任意一项所述的疫苗在制备预防鮰爱德华氏菌病和/或鲁氏耶尔森氏菌病中的用途。

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