组织填料组合物及使用方法与流程

本申请要求2014年4月1日提交的第61/973,659号美国临时专利申请的权益，该申请的内容通过引用以其全文结合到本申请中。

技术领域

本发明总体上涉及组织填料组合物及使用方法。具体地说，但不仅限于此，本发明涉及可注射或植入到软组织中的组织填料组合物。

背景技术：

组织填料在医学和美容领域用于组织填充、再生或整形。在美容领域，组织填料被称为真皮填料，并且是可注射材料，其可通过填充皱纹和皱褶、取代失去的组织或面部轮廓整形(例如面颊、下巴或下颌整形)来改善皮肤外观。组织填料还用于通过暂时地修复凹陷疤痕来治疗疤痕。

本发明的一个目的是提供用于医学和美容领域的新改进型组织填料组合物及使用方法。

技术实现要素：

根据各个方面，本发明了提供作为组织填料用于医学和美容指征的组合物及使用方法。

根据各个方面，本发明涉及一种用于刺激胶原蛋白合成的方法，包括：向软组织内待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；以及采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域，其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成。

根据各个方面，本发明涉及一种用于从美容角度增强软组织的方法，包括：皮内或皮下向待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域，其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成以从美容角度增强软组织。

根据各个方面，本发明涉及一种用于皮肤复原的方法，包括：皮内或皮下向待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域，其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成以从美容角度复原皮肤。

根据各个方面，本发明涉及一种用于抑制或治疗结疤的方法，该方法包括：向疤痕或伤口内或周围待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域，其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成以防止或减少疤痕形成。

根据各个方面，本发明涉及一种用于促进伤口愈合的方法，该方法包括：向伤口内待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域，其中所述方法刺激该区域内的伤口愈合。

通过本发明的某些实施例，荧光团所发出的光可诱导或刺激在胶原蛋白合成缺乏或胶原蛋白合成可能微乎其微的组合物周围软组织内的胶原蛋白合成。例如，除了通过机械方法(例如当组织填料介质包括透明质酸)或异物反应(例如，当组织填料介质是不可生物降解的材料)由组织填料介质固有诱导的任何胶原蛋白合成，还可以通过荧光团诱导胶原蛋白合成。当荧光团被激活发出荧光或磷光，周围的软组织采用光谱宽于从真皮外部或从单光源照射的光照射。同样，周围软组织可采用波长短于能够经皮肤到达软组织的光照射。这样，软组织(例如真皮/表皮/皮下层)可实现更有效且波长特定的照射，这导致达到治疗或美容效果。

在某些实施例中，待治疗区域为软组织。该待治疗区域可在身体的任何部分上，例如在受试者的脸上、脖子上、耳朵上、胸部上、臀部上、手臂上、腋窝上、手上、生殖器上、腿上或脚上。在某些实施例中，待治疗区域在疤痕中或在疤痕周围。该疤痕可为术后疤痕。该疤痕可为旧疤痕或新疤痕。在某些实施例中，待治疗区域在伤口内或在伤口周围。该伤口可为急性伤口或慢性伤口，包括烧伤。在某些实施例中，待治疗区域包含妊娠纹。待治疗区域可在妊娠纹中或在妊娠纹周围。

在某些实施例中，通过注射施用该组合物。可采用针头进行注射。该针头的规格为27G-40G，具体地为30G或32G。通过注射进行施用可为被称为直线注射或连续穿刺的连续注射，以沉积微滴。在某些实施例中，通过植入的方式施用组合物。

在某些实施例中，该组合物为硅凝胶。该组合物可为水合凝胶。该组合物可为透明的或半透明的。在某些实施例中，组织填料介质为硅凝胶。组织填料介质可为水合凝胶。该组织填料介质可为透明的或半透明的。

在某些实施例中，组织填料介质在施用组合物的过程中以及在至少部分照射过程中将荧光团保留在组合物内。或者，在某些实施例中，组织填料介质/组合物可使得荧光团在施用到组织后与该组合物/组织填料介质分离。

在某些实施例中，组织填料介质是可生物降解的。该组织填料介质可包括任何可生物降解材料和生物相容性材料，例如透明质酸(HA)、胶原蛋白和聚左旋乳酸。生物降解可在大约3-18个月内彻底完成。荧光团可能影响或可能不影响组织填料介质的生物降解速率。

在某些实施例中，组织填料介质包括交联的透明质酸(交联HA)。该交联的透明质酸可为组合物的大约0.1％-2％、大约2％-30％、大约2％-25％、大约2％-20％、大约2％-15％、大约2％-10％、大约2％-5％、大约4％-30％、大约4％-25％、大约4％-20％、大约4％-15％、大约4％-10％、大约4％-5％。在某些实施例中，交联的透明质酸为颗粒形态。该颗粒可为水合性的。该颗粒可为凝聚性的。在某些实施例中，荧光团在交联的透明质酸颗粒内。

在某些实施例中，组合物进一步包括负载颗粒的可注射介质。该可注射介质可为流体。该可注射介质的粘性和/或凝聚性与颗粒相比更小。例如，颗粒可为凝聚性的，而可注射介质为非凝聚性的。荧光团可在可注射介质或颗粒内或两者内。在某些实施例中，可注射介质包括透明质酸，该透明质酸为非交联的或与交联的透明质酸颗粒相比相对较少地交联。

在某些实施例中，组合物进一步包括光反射颗粒。该光反射颗粒可为玻璃或二氧化硅。

在某些实施例中，荧光团为亲水生色团。该荧光团可为水溶性的。在某些实施例中，在组合物中荧光团不为脂质体形态。在某些实施例中，荧光团可由波长在可见范围内的光激活。在某些实施例中，荧光团不吸收电磁光谱的紫外范围内的光。在某些实施例中，当激活时，荧光团可发出波长在可见范围内的光。所发出的光可在电磁光谱的紫色、蓝色、绿色、黄色、橙色或红色部分中的一种或多种之内。或者，该荧光团在红外范围内发射。在某些实施例中，荧光团在该区域照射后可被光漂白。在某些实施例中，荧光团在照射5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、25分钟、30分钟、35分钟、40分钟、45分钟、50分钟、55分钟、60分钟或65分钟后可被光漂白。照射可为连续的或脉冲的。照射可包括几小时或几天后对该组合物或该区域进行再次照射。在某些实施例中，通过光漂白，光敏性降低或避免。在某些实施例中，荧光团并非需要代谢的光增敏剂。例如，在某些实施例中，荧光团并非卟啉、卟啉原、血卟啉、脱镁叶绿酸、二氢卟酚、细菌卟吩、异菌卟吩、二氢四吡咯和四氢四吡咯。在某些实施例中，荧光团没有绑定到固有细胞或蜂窝状结构上。在某些实施例中，当或紧接着皮内或皮下施用后照射该区域。换句话说，在组合物施用和照射之间没有潜伏期。

在某些实施例中，照射的时间足以激活荧光团。在某些实施例中，照射的时间足以光漂白荧光团。在某些实施例中，照射时间为1-30秒、15-45秒、30-60秒、0.75-1.5分钟、1-2分钟、1.5-2.5分钟、2-3分钟、2.5-3.5分钟、3-4分钟、3.5-4.5分钟、4-5分钟、5-10分钟、10-15分钟、15-20分钟、20-25分钟或25-30分钟。治疗时间范围可高达大约90分钟、大约80分钟、大约70分钟、大约60分钟、大约50分钟、大约40分钟或大约30分钟。

在某些实施例中，组合物由位于真皮之外的光源照射。换句话说，照射是经皮的。

在某些实施例中，皮内或皮下施用提供了从外表面到真皮的HA受激细胞的轨迹，从而产生从光源到皮内或皮下的光导管，以激活该组合物。

在某些实施例中，方法进一步包括将局部组合物涂抹于治疗区域，其中该局部组合物包括荧光团。荧光化合物可具有能激活皮内/皮下组合物内的荧光团的发射光谱。这样，可以使得对软组织的照射更深。在某些实施例中，在光照射前涂抹该局部组合物。

根据各个方面，本发明涉及一种用于皮肤复原的方法，包括：皮内或皮下向待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；通常将生物光子组合物局部涂抹在待治疗区域上的皮肤上；以及用可被局部生物光子组合物中的荧光团吸收的具有一波长的光照射局部生物光子组合物，以使该荧光团发出光，其中该荧光团可从局部生物光子组合物中吸收所发出的光，其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成以从美容角度复原皮肤。在某些实施例中，组合物是可注射的，且可通过规格为23G-40G的针头进行注射。在某些实施例中，组合物在皱纹、皱褶或疤痕下注射，以立即修复该缺陷。然后，组合物的照射可刺激所注射的组合物周围的胶原蛋白合成，以提供进一步的皮肤复原。

从另一个方面，提供了一种组织填料组合物，包括：组织填料介质；和荧光团；其中该组合物适于注射或植入到人体中。

在一些实施例中，该组合物为硅凝胶。该组合物可为水合凝胶。该组合物可为透明的或半透明的。

在某些实施例中，组织填料介质在施用组合物的过程中并且在至少部分照射过程中将荧光团保留在组合物内。或者，荧光团可在施用到组织后与该组织填料介质分离。

在某些实施例中，组织填料介质是可生物降解的。该组织填料介质可包括任何可生物降解材料和生物相容性材料，例如透明质酸、胶原蛋白和聚左旋乳酸。生物降解可在大约3-18个月内彻底完成。荧光团可能影响或可能不影响组织填料介质的生物降解速率。

在某些实施例中，组织填料介质包括交联的透明质酸。该交联的透明质酸可为组合物的大约0.1％-2％、大约2％-30％、大约2％-25％、大约2％-20％、大约2％-15％、大约2％-10％、大约2％-5％、大约4％-30％、大约4％-25％、大约4％-20％、大约4％-15％、大约4％-10％、大约4％-约5％。在某些实施例中，交联的透明质酸为颗粒形态。该颗粒可为水合性的。该颗粒可为凝聚性的。在某些实施例中，荧光团在交联的透明质酸颗粒内。

在某些实施例中，组合物进一步包括负载颗粒的可注射介质。该可注射介质可为流体。该可注射介质的粘性和/或凝聚性与颗粒相比更小。例如，颗粒可为凝聚性的，而可注射介质为非凝聚性的。荧光团可在可注射介质或颗粒内或两者内。在某些实施例中，可注射介质包括透明质酸，该透明质酸为非交联的或与交联的透明质酸颗粒相比相对较少地交联。

在某些实施例中，组合物进一步包括光反射颗粒。该光反射颗粒可为玻璃或二氧化硅。

在某些实施例中，荧光团为亲水生色团。该荧光团可为水溶性的。在某些实施例中，在组合物中荧光团不为脂质体形态。

在某些实施例中，荧光团可由波长在可见范围内的光激活。在某些实施例中，荧光团不吸收电磁光谱的紫外范围内的光。在某些实施例中，当激活时，荧光团可发出波长在可见范围内的光。所发出的光可在电磁光谱的紫色、蓝色、绿色、黄色、橙色或红色部分中的一种或多种之内。或者，该荧光团在红外范围内发射。

在某些实施例中，荧光团在该区域照射后可被光漂白。在某些实施例中，荧光团在照射5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、25分钟、30分钟、35分钟、40分钟、45分钟、50分钟、55分钟、60分钟或65分钟后可被光漂白。在某些实施例中，在1-30秒、15-45秒、30-60秒、0.75-1.5分钟、1-2分钟、1.5-2.5分钟、2-3分钟、2.5-3.5分钟、3-4分钟、3.5-4.5分钟、4-5分钟、5-10分钟、10-15分钟、15-20分钟、20-25分钟或25-30分钟后，荧光团可被光漂白。治疗时间范围可高达大约90分钟、大约80分钟、大约70分钟、大约60分钟、大约50分钟、大约40分钟或大约30分钟。照射可为连续的或脉冲的。照射可包括几小时或几天后对该组合物或该区域再次照射。

在某些实施例中，荧光团并非需要代谢的光增敏剂。例如，在某些实施例中，荧光团并非卟啉、卟啉原、血卟啉、脱镁叶绿酸、二氢卟酚、细菌卟吩、异菌卟吩、二氢四吡咯和四氢四吡咯。在某些实施例中，荧光团没有绑定到固有细胞、癌细胞或其它蜂窝状结构上。

在某些实施例中，组合物不包括葡糖胺。在组合物包括透明质酸的某些实施例中，该组合物不包括葡糖胺。在某些实施例中，组合物不包括氧源，例如过氧化物。在某些实施例中，组合物不包括疏水荧光团。在某些实施例中，组合物并非光聚合性的。在某些实施例中，组合物不包括单体。在某些实施例中，组合物不包括带有功能化链的透明质酸。在任何上述或下述的某些实施例中，组合物不包括三乙醇胺(TEA)、N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)或N-乙烯基己内酰胺(NVC)中的一个或多个(例如1、2或3)。在某些实施例中，组合物不包括三乙醇胺(TEA)、N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)或N-乙烯基己内酰胺(NVC)中的任何一个。

在任何上述或下述的某些实施例中，组合物是无菌组合物。在某些实施例中，组合物可例如采用高压釜通过加热和/或加压进行消毒。在某些实施例中，组合物可通过γ辐射进行消毒。在以上任何方面的某些实施例中，皮下或皮内放置的组合物在某种程度上由于其具有凝聚性或粘弹性，因此可提供立即“修复”。这有利于使皮肤上的线条和皱褶平滑，以提供皮肤复原的外观。在某些实施例中，随着组织填料介质降解、压缩和/或分散，皮下或皮内放置的组合物的“修复”效果减小。因此，通过本发明的某些实施例，通过向皮肤提供随时间逐渐减小的立即修复效果并同时在皮内或皮下组合物处或周围合成随时间增加的新的胶原蛋白，可获得持久的皮肤复原效果。由于组织填料降解和胶原蛋白合成彼此衔接，因此可实现大体上连续的皮肤复原效果。

在某些实施例中，在胶原蛋白类型、胶原蛋白力学性质和胶原蛋白纤维走向方面，体内组合物上或周围的新的胶原蛋白大体上与细胞外基质匹配。这不同于现有的可降解组织填料介质，其诱导胶原蛋白合成但不提供修复效果(例如基于聚左旋乳酸的填料)，提供修复效果但不诱导重要的胶原蛋白合成(例如基于透明质酸的真皮填料)，或提供修复效果并诱导与细胞外基质性质不同的胶原蛋白合成(例如永久性真皮填料)。

根据各个方面，本发明涉及如本文所述的组合物的用途，用于刺激软组织内的胶原蛋白合成。从另一个方面，提供了如本文所述的组合物的用途，用于从美容角度增强软组织。从另一个方面，提供了如本文所述的组合物的用途，用于抑制或治疗结疤。从另一方面，提供了如本文所述的组合物的用途，用于皮肤复原。从另一个方面，提供了如本文所述的组合物的用途，连同局部生物光子组合物，用于皮肤复原。

根据各个方面，本发明涉及了包括组织填料介质和荧光团的组合物在用于刺激胶原蛋白合成的方法中的用途，其中该方法包括以下步骤：向软组织内待治疗区域施用该组合物，以及采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域；并且其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成。

根据各个方面，本发明涉及了包括组织填料介质和荧光团的组合物在用于从美容角度增强软组织的方法中的用途，其中该方法包括以下步骤：向软组织内待治疗区域施用该组合物，以及采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域；并且其中该方法从美容角度增强软组织。

根据各个方面，本发明涉及了包括组织填料介质和荧光团的组合物在用于抑制或治疗结疤的方法中的用途，其中该方法包括以下步骤：向软组织内待治疗区域施用该组合物，以及采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域；并且其中所述方法从美容角度抑制或治疗结疤。

根据各个方面，本发明涉及一种组织填料组合物，包括一种以上组织填料介质，其中该组合物适于注射或植入到人体中。

根据各个方面，本发明涉及一种用于刺激胶原蛋白合成的方法，包括：向软组织内待治疗区域施用第一组合物，其中该第一组合物包括组织填料介质；在待治疗区域之上的表面上施用包括荧光团的第二组合物；以及采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域；其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成。

附图说明

图1为示出了斯托克斯频移的简图。

图2是描述皮肤各层中光的吸收的图片(Samson等人证据报告/技术评定2004，111，第1-97页)。

图3为示出了供体和受体生色团的吸收和发射光谱的简图。图中还示出了受体生色团的吸收光谱与供体生色团的发射光谱之间的光谱重叠情况。

图4是雅布隆斯基图的示意图，其示出了供体发射和受体吸收之间涉及的耦合跃迁。

具体实施方式

本发明提供可用作组织填料且为生物光子性的组合物。本发明的组织填料组合物包括光敏外源生色团连同组织填料介质，并且可以任何其它方式可注射、植入或输送至软组织。本发明还提供用于刺激胶原蛋白合成的方法；用于从美容角度增强软组织的方法，例如软组织填充、复原或整形；用于抑制或治疗结疤的方法；或采用组织填料组合物促进伤口愈合的方法。

在继续进一步详细描述本发明之前，应该理解的是，本发明并不限于具体的组合物或工艺步骤，因为这些都可能变化。必须指出的是，正如本说明书和所附权利要求书中使用的那样，除非上下文清楚显示，否则，单数形式“一”、“一个”及“该”包括复数指示对象。

本发明中给出数值或范围时使用的词语“大约”指的是数值或范围与给出的数值或范围的差别在20％以内，优选在10％以内及更优选在5％以内。

本发明中使用的“和/或”是指具体公开了两种规定特征或成分的每一种特征或成分，两者可以同时兼具或者单独具有。例如，“A和/或B”是指公开了(i)A、(ii)B和(iii)A和B三种情形，每种情形都是独立的。

“生物光子性”是指在生物相关背景中产生、操作、检测和应用光子。换句话说，生物光子组合物主要是由于光子的产生和操作而施加其生理效应。生物光子组合物也可产生活性氧簇。本发明所述“生物光子组合物”是可以通过光活化而产生光子和/或活性氧簇的、用于生物相关应用的组合物。

词语“生色团”、“光活化试剂”和“光活化剂”可以互换使用。生色团是指在受到光照射时能够吸收光的化合物。生色团很容易被光激发，然后，生色团会将其能量传递给其它分子和/或让其能量以光的形式散发出来。生色团可为合成的生色团或自然存在的生色团。

本文所采用的“荧光团”是指当光激发(例如通过荧光、磷光或任何其它方式)时可发光的生色团。

本文所采用的“组织填料”是指一种适用于或通常用于组织填充、再生或整形的材料，例如适用于或在真皮区域使用的材料，例如真皮填料，或适用于或在任何其它软组织内作为支架或输送材料使用的材料。组织填料包括可生物降解和不可生物降解的材料，以及天然的材料和合成的材料，包括水凝胶。组织填料可通过任何方式进行施用，例如注射或植入。组织填料可施用于任何软组织部位，例如皮下、皮下组织或皮内。“真皮填料”是指一种可用于真皮区域的材料，例如表皮下方和/或皮下组织上方或下方，例如用于组织填充、再生或整形。真皮填料可通过皮下注射或皮内注射或通过任何其它方法(例如植入)进行输送。

本文所采用的词语“软组织”是指连接、支撑或包围身体的其它结构和器官的组织，而非骨骼。软组织包括肌腱、韧带、筋膜、皮肤、纤维组织、脂肪和滑膜(这些均为结缔组织)以及肌肉、神经和血管(这些为非结缔组织)。它有时是由它并非什么来定义的。软组织被定义为“除网状内皮系统和神经胶质外的非上皮、骨骼外的间充质”。

本文所采用的“可注射的”是指可通过针头抽入或推出由注射器注射到软组织内的可流动的材料。软组织包括肌腱、韧带、筋膜、皮肤、真皮、纤维组织、脂肪、滑膜、肌肉、神经和血管。

本文所采用的“抑制或治疗结疤”是指防止或将疤痕形成减至最少，或减少现有的疤痕。疤痕可以是任何伤口(例如烧伤或手术切口)的结果。

“光漂白”是指生色团的光化学破坏。

术语“光”或“光化光”指的是特定光源(例如灯、LED或激光器)发出的且能够被物质(例如，上文定义的生色团或光活化剂)吸收的光能。在一个优选实施例中，光在电磁光谱的可见范围内具有峰值波长，例如：360nm-760nm。

“伤口”指的是任何组织的损伤，包括，例如，急性、亚急性、延缓愈合或难以愈合的伤口以及慢性伤口。伤口的实例包括开放性伤口和闭合性伤口。伤口包括，例如，截肢、烧伤、切口、切除、损伤、撕裂伤、磨损、刺伤或贯通伤口、手术伤口、擦伤、血肿、压伤、溃疡(如压迫性、静脉、动脉或糖尿病)、牙周炎造成的伤口(牙周发炎)。

“皮肤复原”指的是减少、消除、延缓或逆转皮肤老化或皮肤损伤的一个或多个症状的过程。皮肤复原通常还指改善皮肤的美容外观或皮肤的美容美化。例如，其包括增加皮肤亮度；缩小毛孔；减少细纹或皱纹；改善皮肤变薄和透明；改善紧致度；改善饱满度；改善由于潜在的脂肪或骨的损失引起的组织损失或皮肤下垂；改善干燥皮肤(可能发痒)；减少或逆转斑点、老年斑、蛛状静脉或斑点肤质；改善粗糙和革质皮肤；或改善拉开时会消失的细纹。根据本发明，上文所述的一种或多种老化症状可以通过本发明的组合物、方法和用途的某些实施例减少、消除、延缓或甚至逆转。

在一些实施例中，本发明提供可注射或植入到软组织中作为组织填料的生物光子组合物。本发明提供生体内物光子组合物。生物光子组合物在广义上讲是由特定波长的光(如光子)活化的组合物。这些组合物包含至少一个外源生色团，其可通过具有适当波长的光激活，从而使该生色团发出光。激活和/或所发出的光可对自己本身具有治疗效果。激活的生色团和/或光也可导致组合物中所包含的或位于治疗部位的其它试剂的光化活化。例如，在存在释氧剂的情况下，该类试剂可会被激活，从而导致氧自由基的形成，例如纯态氧。释氧剂可为氧的内部来源，例如血液。

在一些方面，本发明提供包括至少一个第一生色团和组织填料介质的生物光子组合物。当吸收某一波长的光子时，生色团被激发。这是一种不稳定的状态，分子将试图返回到基态，释放出多余的能量。对某些生色团来说，当其返回到基态时，最好是以光的形式放出多余的能量。这个过程被称为荧光，并且这些生色团也被称为“荧光团”。由于转化过程失去能量，与吸收波长相比，所发射的荧光的峰值波长朝更长的波长移动。这种现象被称为斯托克斯频移，如图1所示。在合适的环境中(例如，在生物光子组合物中)，许多能量被转移给组合物的其它成分或直接转移到治疗部位。

人们认为，由于光活化生色团发射的荧光具有被生物细胞和组织认可的飞秒、皮秒或纳秒发射特性，导致有益的生物调节，因此，这种荧光具有治疗特性。但是，并不受限于这种理论。此外，所发出的荧光的波长更长，因此，比活化光能更深入地穿透到组织内部(图2)。采用范围如此宽的波长(某些实施例中包括穿过组合物的活化光)照射皮内、皮下或其它软组织，可对细胞和组织具有不同的和互补的效果。

在某些实施例中，包围生物光子组合物的组织将采用不同波长的光进行照射，若经皮照射，由于波长短和距离皮肤的深度，光通常无法到达软组织部位。在某些实施例中，在使用中，对于包围生物光子组合物的软组织，这可能会导致产生治疗或美容效益，例如刺激胶原蛋白产生。这可能是除了典型的组织填料的任何物理填充和修复效果，以及除了因从组织填料局部施加的应力所诱导而发生的任何胶原蛋白的产生。此外，通过利用一些现有组织填料观察到的异物反应，与纤维性胶原蛋白形成相比，所产生的胶原蛋白与正在治疗的区域的细胞外胶原蛋白基质的胶原蛋白可更紧密地匹配。即，胶原蛋白的类型、胶原蛋白的力学性质和胶原蛋白纤维的方向将与天然胶原蛋白更紧密地匹配。

在某些情况下，本发明的生物光子组合物可以能够触发细胞信令的改变，以通过成纤维细胞的刺激来增加胶原蛋白沉积，从而局部地改变细胞外基质。

本发明的生物光子组合物可基本上是透明/半透明的和/或具有较高的透光率，以允许光散发到组合物内和穿过组合物。这样，组合物周围的组织区可以利用组合物发出的荧光来治疗及利用光照射组合物使其活化的光来治疗。例如，利用Perkin-Elmer Lambda 9500系列UV-可见分光光度计在波长250nm至800nm范围测量生物光子组合物的％透光率。在一些实施例中，测定可见范围内的透光率并对数据进行平均。在一些其它实施例中，在将生色团脱除的情况下测定生物光子材料的透光率。在一些实施例中，本发明所述组合物的透光率在460nm处测定。由于透光率取决于厚度，在将样品装到分光光度计中之前，采用卡规测量每个样品的厚度。根据下式，将透光率值归一化到100μm的厚度(或任何厚度)：

式中，t₁＝试样实际厚度，t₂＝透光率测定归一化的厚度。在现有技术中，透过率测定通常归一化到1cm。在一些实施例中，生物光子组合物在可见范围内的透光率超过大约15％、大约20％、大约30％、大约40％、大约50％、大约55％、大约60％、大约65％、大约70％、大约75％、大约80％或大约85％。在一些实施例中，在电磁光谱的可见范围内(例如400-700nm)，透光率超过大约70％、大约86％、大约87％、大约88％、大约89％、大约90％、大约91％、大约92％、大约93％、大约94％、大约95％、大约96％、大约97％、大约98％或大约99％。

本发明的生物光子组合物为可以任何其它方式注射、植入或在体内输送至软组织部位。

这些组合物可根据构成组合物的成分进行说明。另外地或替代地，本发明的组合物具有功能和结构性质，这些性质也可用于定义和描述组合物。下面将对本发明的组合物的各个成分进行详细的说明。

本发明的组合物包括一个或多个生色团，这可被认为是外源性的，例如，非自然存在于皮肤或组织内。合适的生色团可以是荧光团或荧色物，例如荧光染料(或着色剂)，虽然也可以使用其它染料组或染料(生物学和组织学染料、食用色素、类胡萝卜素、自然产生的荧光和其它染料)。合适的光活化剂可以是那些通常被视为安全(GRAS)的光活化剂。皮肤或其它组织无法良好耐受的光漂剂可以封装或化学改性的形式包含在生物光子组合物内。

在某些实施例中，本发明的生物光子组合物包括第一生色团，在应用光时，第一生色团发生部分或完全光漂白。光漂白是指生色团的光化学破坏，这种破坏通常直观表现为褪色。在一些实施例中，第一生色团的吸收波长在可见光谱范围内，如在波长大约380-800nm、大约380-700nm、大约400-700nm或大约380-600nm处。在这些实施例中，第一生色团没有被紫外光激活。在其它实施例中，第一生色团吸收波长在大约200-800nm、大约200-700nm、大约200-600nm或大约200-500nm处。在一个实施例中，第一生色团吸收波长在大约200-600nm处。在一些实施例中，第一生色团在波长大约200-300nm、大约250-350nm、大约300-400nm、大约350-450nm、大约400-500nm、大约400-600nm、大约450-650nm、大约600-700nm、大约650-750nm或700-800nm处吸收光。

熟悉本领域的技术人员应该理解的是，具体生色团的光学特性可能根据生色团的周围介质而变化。因此，正如本发明所述，具体生色团的吸收和/或发射波长(或光谱)与本发明中的生物光子组合物中测定的波长(或光谱)对应。

本发明所述生物光子组合物包含至少一种其它生色团。组合生色团可通过组合染料分子而增加光吸收，并增强吸收和光-生物调节的选择性。这样为产生新的光敏性和/或选择性生色团混合物创造了几种可能性。

当用光照射这种多生色团材料时，在生色团之间发生能量转移。该过程被称为共振能量转移，是一种光物理过程，通过该过程，激发“供体”生色团(此处亦称为第一生色团)将其激发能量转移给“受体”生色团(此处亦称为第二生色团)。共振能量转移的效率和导向性取决于供体和受体生色团的光谱特征。特别是，生色团之间的能量流动取决于反映吸收光谱和发射光谱相对位置和形状的光谱重叠。要使能量转移发生，供体生色团的发射光谱应与受体生色团的吸收光谱重叠(图3)。供体发射减少或猝灭和伴随受体发射强度增加的激发态寿命的缩短，都证明了能量转移已经发生。图4是一份雅布隆斯基图，它说明了供体发射和受体吸收之间所涉及的耦合跃迁。为了提高能量转移效率，供体生色团应具有良好的吸收光子和发射光子的能力。此外，人们认为，供体生色团的发射光谱与受体生色团的吸收光谱之间重叠越多，供体生色团越能更好地将能量转移给受体生色团。

在某些实施例中，本发明的生物光子组合物进一步包括第二生色团。在一些实施例中，第一生色团的发射光谱与第二生色团的吸收光谱至少重叠大约80％、大约50％、大约40％、大约30％、大约20％或大约10％。在一个实施例中，第一生色团的发射光谱与第二生色团的吸收光谱至少重叠大约20％。在一些实施例中，第一生色团的发射光谱与第二生色团的吸收光谱重叠至少大约1-10％、至少大约5-15％、至少大约10-20％、至少大约15-25％、至少大约20-30％、至少大约25-35％、至少大约30-40％、至少大约35-45％、至少大约50-60％、至少大约55-65％或至少大约60-70％的。

本发明中所使用的光谱重叠％是指在光谱四分之一最大全宽(FWQM)时测量的供体生色团的发射波长范围与受体生色团的吸收波长范围的重叠％。例如，图2示出了供体生色团和受体生色团的归一化吸收光谱和发射光谱。受体生色团的吸收光谱的光谱FWQM是大约60nm(515nm至大约575nm)。供体生色团的光谱与受体生色团的吸收光谱重叠大约是40nm(从515nm至大约555nm)。因此，重叠％可以计算为40nm/60nm x 100＝66.6％。

在一些实施例中，第二生色团在可见光谱范围内的波长处吸收。在某些实施例中，第二生色团的吸收波长比第一生色团的吸收波长相对来说更长，波长在大约50-250nm、大约25-150nm或10-100nm的范围内。

如上文所述，本发明组合物照射光会在生色团之间造成能量转移级联。在某些实施例中，这种能量转移级联使得来自软组织内部的光子得以发射，与经皮移动相比，光子向更深处移动。在一些实施例中，这种能量转移级联并不伴随热量的产生。在一些实施例中，能量转移级联不会导致组织损伤。

可选地，当生物光子组合物包括第一生色团和第二生色团时，第一生色团的含量占组合物重量的大约0.001-40％，而第二生色团的含量占组合物重量的大约0.001-40％。在某些实施例中，生色团或生色团组合的总重量占组合物重量的大约0.001-40.001％。在某些实施例中，第一生色团占组合物重量的大约0.001-0.01％、大约0.001-0.05％、大约0.005-0.01％、大约0.01-1％、大约0.01-2％、大约0.05-1％、大约0.05-2％、大约1-5％、大约2.5-7.5％、大约5-10％、大约7.5-12.5％、大约10-15％、大约12.5-17.5％、大约15-20％、大约17.5-22.5％、大约20-25％、大约22.5-27.5％、大约25-30％、大约27.5-32.5％、大约30-35％、大约32.5-37.5％或大约35-40％。在某些实施例中，第二生色团占组合物重量的大约0.001-1％、大约0.001-2％、大约0.001-0.01％、大约0.01-0.1％、大约0.1-1.0％、大约1-2％、大约1-5％、大约2.5-7.5％、大约5-10％、大约7.5-12.5％、大约10-15％、大约12.5-17.5％、大约15-20％、大约17.5-22.5％、大约20-25％、大约22.5-27.5％、大约25-30％、大约27.5-32.5％、大约30-35％、大约2.5-37.5％或大约35-40％。在某些实施例中，生色团或生色团组合的总重量占组合物重量的大约0.001-1％、大约0.01-1％、大约0.01-2％、大约0.05-2％、大约0.5-1％、大约0.5-2％、大约1-5％、大约2.5-7.5％、大约5-10％、大约7.5-12.5％、大约10-15％、大约12.5-17.5％、大约15-20％、大约17.5-22.5％、大约20-25％、大约22.5-27.5％、大约25-30％、大约27.5-32.5％、大约30-35％、大约32.5-37.5％或大约35-40.05％。

在一些实施例中，选择一种或多种生色团，从而光活化时其发射荧光是电磁光谱中绿光、黄光、橙光、红光及红外光部分内的一种或多种，例如，峰值波长在大约450nm至大约500nm、大约490nm至大约800nm或大约470nm至大约700nm范围之内。在某些实施例中，发射荧光的峰值功率密度是0.005至大约10mW/cm²、或大约0.5至大约5mW/cm²。

本发明生物光子组合物中可以使用的合适的生色团包括但不限于：

叶绿素染料-示例性叶绿素染料包括但不限于叶绿素a；叶绿素b；叶绿酸；油溶叶绿素；菌叶绿素a；菌叶绿素b；菌叶绿素c；菌叶绿素d；原叶绿素；原叶绿素a；两亲叶绿素衍生物1；以及两亲叶绿素衍生物2。

呫吨衍生物-示例性呫吨染料包括但不限于曙红B(4′，5′-二溴-2′，7′-二硝基-荧光素二价阴离子)；曙红Y；曙红Y(2′，4′，5′，7′-四溴-荧光素二价阴离子)；曙红(2′，4′，5′，7′-四溴-荧光素二价阴离子)；曙红(2′，4′，5′，7′-四溴-荧光素二价阴离子)甲酯；曙红(2′，4′，5′，7′-四溴-荧光素单价阴离子)p-异丙基苄酯；曙红衍生物(2′，7′-二溴-荧光素二价阴离子)；曙红衍生物(4′，5′-二溴-荧光素二价阴离子)；曙红衍生物(2′，7′-二氯-荧光素二价阴离子)；曙红衍生物(4′，5′-二氯-荧光素二价阴离子)；曙红衍生物(2′，7′-二碘-荧光素二价阴离子)；曙红衍生物(4′，5′-二碘-荧光素二价阴离子)；曙红衍生物(三溴荧光素二价阴离子)；曙红衍生物(2′，4′，5′，7′-四氯-荧光素二价阴离子)；曙红；曙红联十六烷基吡啶氯离子对；赤藓红B(2′，4′，5′，7′-四碘-荧光素二价阴离子)；赤藓红；赤藓红二价阴离子；赤藓红B；荧光素；荧光素二价阴离子；荧光桃红B(2′，4′，5′，7′-四溴-3，4，5，6-四氯-荧光素二价阴离子)；根皮红B(四氯-四溴-荧光素)；根皮红B；玫瑰红(3，4，5，6-四氯-2′，4′，5′，7′-四碘荧光素二价阴离子)；派若宁G、派若宁J、派若宁Y；罗丹明染料，如罗丹明包括4，5-二溴-罗丹明甲酯；4，5-二溴-罗丹明正丁酯；罗丹明101甲酯；罗丹明123；罗丹明6G；罗丹明6G己酯；四溴-罗丹明123；及四甲基-罗丹明乙酯。

亚甲基蓝衍生物-示例性亚甲基蓝衍生物包括但不限于1-甲基亚甲基蓝；1，9-二甲基亚甲基蓝；亚甲基蓝；亚甲基蓝(16μM)；亚甲基蓝(14μM)；亚甲紫；溴亚甲基紫；4-碘亚甲基紫；1，9-二甲基-3-二甲基-氨基-7-二乙基-氨基-吩噻嗪；及1，9-二甲基-3-二乙基氨基-7-二丁基-氨基-吩噻嗪。

偶氮染料-示例性偶氮(或二偶氮-)染料包括但不限于甲基紫、中性红、对位红(颜料红1)、苋菜红(偶氮玉红S)、酸性红(偶氮玉红、食品红3、酸性红14)、诱惑红AC(FD&C 40)、酒石黄(FD&C黄5)、橙黄G(酸性橙10)、丽春红4R(食品红7)、甲基红(酸性红2)及紫脲酸铵-红紫酸铵。

在本发明的某些方面，本发明中的生物光子组合物的一个或多个生色团可以独立地选自以下任一种：酸性黑1、酸性蓝22、酸性蓝93、酸性品红、酸性绿、酸性绿1、酸性绿5、酸性洋红、酸性橙10、酸性红26、酸性红29、酸性红44、酸性红51、酸性红66、酸性红87，酸性红91，酸性红92，酸性红94，酸性红101，酸性红103，酸性品红、酸性品红、酸性紫19、酸性黄1、酸性黄9、酸性黄23、酸性黄24、酸性黄36、酸性黄73、酸性黄S、吖啶橙、吖啶黄、阿尔新蓝、阿尔新黄、醇溶曙红、茜素、茜素蓝2RC、茜素卡红、茜素花青BBS、茜素花青R、茜素红S、茜素红紫、试铝灵、酰胺黑10B、氨基黑、苯胺蓝WS、蒽蓝SWR、金胺O、Azocannine B、偶氮卡红G、偶氮重氮(Azoic diazo)5、偶氮重氮48、天蓝A、天蓝B、天蓝C、碱性蓝8、碱性蓝9、碱性蓝12、碱性蓝15，碱性蓝17、碱性蓝20、碱性蓝26、碱性棕1、碱性品红、碱性绿4、碱性橙14、碱性红2(Saffranin O)、碱性红5、碱性红9、碱性紫2、碱性紫3、碱性紫4、碱性紫10、碱性紫14、碱性黄1、碱性黄2、比布里希猩红、俾斯麦棕Y、亮结晶猩红6R、钙红、胭脂红、胭脂红酸(酸性4)、天青石蓝B、中国蓝、虫红、天青石蓝(Coelestine Blue)、铬紫CG、铬变素2R、铬花青R、刚果corinth、刚果红、棉染蓝、棉红、Croceine猩红、藏花素、结晶丽春红6R、结晶紫、大丽紫、金刚绿B、DiOC6、直接靛兰14、直接蓝58、直接红、直接红10、直接红28、直接红80、直接黄7、曙红B、蓝色曙红、曙红、曙红Y、黄色曙红、Eosinol、伊利石榴红B、铬花青R、赤藓红B、乙基曙红、乙基绿、乙基紫、伊文思蓝、坚牢蓝B、坚牢绿FCF、坚牢红B、坚牢黄、荧光黄、食品绿3、焦酚酞、加拉明蓝、倍花青、龙胆紫、氧化苏木精、苏木精、苏木紫、日光坚牢品红BBL、甲蓝、苏木因、苏木精、苏木紫、霍夫曼紫、皇家红、吲哚菁绿、阿利新蓝、阿利新蓝1、阿利新黄1、INT、洋红、胭脂酮酸、Kernechtrot、紫胶、紫胶酸、劳思氏紫、淡绿、丽丝胺绿SF、Luxol坚牢蓝、品红0、品红I、品红II、品红III、孔雀绿、曼彻斯特棕、马休黄、汞溴红、红汞、酸性间胺黄、亚甲基天蓝A、亚甲基天蓝B、亚甲基天蓝C、亚甲基蓝、亚甲基绿、甲基紫、甲基紫2B、甲基紫10B、媒染蓝3、媒染蓝10、媒染蓝14、媒染蓝23、媒染蓝32、媒染蓝45、媒染红3、媒染红11、媒染紫25、媒染紫39、萘酚蓝黑、萘酚绿B、萘酚黄S、天然黑1、天然红、天然红3、天然红4、天然红8、天然红16、天然红25、天然红28、天然黄6、NBT、天然红、新品红、尼亚加拉蓝3B、夜蓝、尼罗蓝、尼罗蓝A、尼罗红、硫酸尼罗蓝、尼罗红、硝基BT、硝基蓝四唑、核坚牢红、油红O、橙G、地衣红、副品红、荧光桃红B、藻胆素、藻青素、藻红素。藻红蓝蛋白(PEC)、酞菁、苦味酸、丽春红2R、丽春红6R、丽春红B、二甲苯胺丽春红、丽春红S、报春花、红紫素、派若宁B、派若宁G、派若宁Y、罗丹明B、玫瑰苯胺、玫瑰红、藏红、番红精O、猩红R、猩红、猩红R、紫胶、天狼猩红F3B、砂罗铬花青R、可溶蓝、溶剂黑3、溶剂蓝38、溶剂红23、溶剂红24、溶剂红27、溶剂红45、溶剂黄94、醇溶曙红、苏丹III、苏丹IV、苏丹黑B、硫黄S、瑞士蓝、酒石黄、硫黄素S、硫黄素T、劳氏紫、甲苯胺蓝、甲苯胺红、苯胺黄G、吖啶黄、锥虫蓝、荧光素钠、维多利亚蓝4R、维多利亚蓝B、维多利亚绿B、水溶蓝I、水溶曙红、二甲苯胺丽春红或黄色曙红。

在某些实施例中，本发明的组合物包括上文所列生色团中的任何一个生色团、或它们的组合，从而在治疗部位提供生物光子影响。这是这些试剂完全不同的应用，与生色团作为简单的染色剂或作为光聚合的催化剂的用途完全不同。在某些实施例中，组合物不包括可通过生色团活化进行聚合或交联的化合物。

生色团组合的协同效应指的是生物光子效用大于其各自效用的总和，但并不限于任一具体的理论。有利的是，这可以转化为生物光子材料的反应性增加，速度更快或改进的治疗时间。此外，要达到相同的或更好的治疗结果，不需要更改治疗条件，如暴露于光的时间、所用光源的功率及所用光的波长。换句话说，使用协同的生色团组合可以实现相同的或更好的治疗，而并不一定需要延长暴露于光源的时间、提高光源功率或采用不同波长的光源。

在一些实施例中，生物光子材料包括曙红Y作为第一生色团及玫瑰红、荧光素、赤藓红、荧光桃红B、叶绿酸中的一种或多种作为第二生色团。人们相信，这些组合具有协同效应，因为，当它们部分地因为与它们的吸收光谱和发射光谱重叠或接近而得到活化时，它们可以将能量从一个生色团转移到另一个生色团。然后，这种转移的能量以荧光形式放出或产生反应性的氧。这种吸收和再发射的光被认为在整个组合物中传输，还传输到治疗部位内。

在进一步实施例中，材料包括下述协同组合：曙红Y和荧光素；荧光素和玫瑰红；赤藓红和曙红Y、玫瑰红或荧光素；荧光桃红B和曙红Y、玫瑰红、荧光素和赤藓红中的一种或多种。也可以采用其它协同生色团组合。

通过材料中生色团组合的协同效应，通常无法被活化光(例如LED的蓝光)所活化的生色团，可以通过被活化光所活化的生色团的能量转移而得到活化。这样，可以根据要求的美容或医学治疗而利用和定制不同性质的光活化生色团。

例如，当玫瑰红在分子氧存在的情况下被活化时，它可产生较高产率的单线态氧。然而，从发射荧光方面来讲，玫瑰红的量子产率较低。玫瑰红的峰值吸收在540nm附近，因此，它可用绿光进行活化。曙红Y的量子产率高，可以采用蓝光活化。将玫瑰红和曙红Y相结合，得到的组合物蓝光活化时可以发射具有治疗作用的荧光和产生单线态氧。在这种情况下，蓝光将曙红Y光活化，曙红Y将其部分能量转移给玫瑰红，并以荧光形式放出部分能量。

本发明提供至少包括第一生色团和组织填料介质的生物光子组合物。组织填料介质可为真皮填料。在一些实施例中，组织填料介质由其来源进行表征。在一些实施例中，该来源可为天然的、生物的或合成的。生物的组织填料介质可为那些源自生物体的介质。在一些实施例中，组织填料介质可在没有外部干涉(例如可生物降解与不可生物降解)的条件下通过身体清理产品的能力进行表征。组织填料介质和/或生物光子组合物通常是生物相容性的。组织填料介质和/或生物光子组合物通常是无毒的。组织填料介质可包括聚合物。该聚合物可选自下组聚合物：蛋白质、肽、多肽、多熔素、胶原蛋白、型前胶原、弹性蛋白和层粘连蛋白。该聚合物可选自下组聚合物：具有羟基、胺和羧基官能团的合成聚合物：聚乙烯(乙烯醇)、聚乙二醇、聚乙烯基胺、聚丙烯胺、脱乙酰聚丙烯酰胺、聚丙烯酸和聚甲基丙烯酸。该聚合物可选自下组聚合物：树枝状聚合物或支链聚合物，包括树枝状多羟基化合物和树枝状聚胺。该聚合物可选自下组聚合物：具有羟基、胺和羧基官能团的固体表面聚合物。该聚合物可为，例如从一组多醣中选取的多醣，该组多醣包括淀粉其衍生物；右旋糖苷及其衍生物、纤维素及其衍生物；壳多糖和壳聚糖及藻朊酸盐及其衍生物。在一些实施例中，组织填料介质为交联的生物相容性多糖凝胶。

在一些实施例中，聚合物为粘多糖。组织填料介质可进一步包括两种或多种不同的粘多糖聚合物。本文所采用的术语“粘多糖”与“GAG”和“黏多糖”同义，是指由重复双糖单元组成的长直链多糖。该重复单元由己糖(六碳糖)或链接到氨基己糖(含氮的六碳糖)的己糖醛酸及其药学上可接受的盐组成。GAG族的成员在氨基己糖、己醣或己糖醛酸单元(包含例如葡糖醛酸、艾杜糖醛酸、半乳糖、半乳糖胺、葡糖胺)的类型方面发生变化，并且也可在配糖键的几何形状方面发生变化。粘多糖的非限制性实例包括硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素和透明质烷。粘多糖的可接受的盐的非限制性实例包括钠盐、钾盐、镁盐、钙盐及它们的组合。用于本文中所公开的组合物和方法中的粘多糖及它们的结果聚合物在例如以下专利中进行描述，Piron和Tholin，多醣交联、水凝胶制备、结果多醣和水凝胶、它们的用途，美国专利公开号为2003/0148995；Lebreton，，可注射的单相水凝胶的低分子量多醣和高分子量多醣的交联；Lebreton，包含透明质酸钠和羟丙基甲基纤维素的粘弹溶液、制备方法及用途，美国专利公开号为2008/0089918；Lebreton，含有利多卡因的基于透明质酸的凝胶，美国专利公开号为2010/0028438；和因此得到的多醣和水凝胶，美国专利公开号为2006/0194758；以及Di Napoli，用于皮内软组织填充的组合物和方法，国际专利公开号为2004/073759，该专利申请中的全部内容都通过引用以其全文结合到本申请中。本文所公开的方法中使用的GAG在市场上可买到，例如基于透明质酸的真皮填料JUVEDERM^TM、JUVEDERM^TM30、JUVEDERM^TM Ultra、JUVEDERM^TM Ultra Plus、JUVEDERM^TM Ultra XC、JUVEDERM^TM Ultra Plus XC、JUVEDERM VOLUMA^TM XC和JUVEDERM VOLUMA^TM(加利福尼亚州欧文市的爱力根制药公司)。

生物的和可生物降解的组织填料介质的实例为包含源自有机体、人的和/或动物的组织和/或产品的材料的介质。这些介质的实例包含：透明质酸(HA)(例如鸟的HA、牛的HA以及非动物稳定性HA(“NASHA”)(例如和可注射的真皮填料))、胶原蛋白(例如I型胶原蛋白、II型胶原蛋白、III型胶原蛋白、交联和/或非交联牛的、猪的、人的和自体胶原蛋白)。基于胶原蛋白的填料的额外实例包含(源自牛的组织的胶原蛋白)、I型(源自牛的组织的胶原蛋白)、II型(源自牛的组织的胶原蛋白)、EVOLENCE^TM(源自猪的胶原蛋白)和FIBREL^TM(源自猪的胶原蛋白)。基于胶原蛋白的组织填料通常源自动物，并且伴随有高于基于非动物性填料的过敏性反应发生率。NASHA组织填料，例如，源自细菌并且具有低于胶原蛋白基填料的过敏性反应发生率。许多NASHA组织填料提供立即填充效果，但也可以由于软组织部位处的成纤维细胞的本地机械变形诱导最小胶原蛋白形成。由于能够被本领域的普通技术人员理解，在一些实施例中，填料介质是自我复制的，并且可包括活细胞(例如胶原蛋白产生细胞或成纤维细胞)。因此，在一些实施例中，组合物包括生物的和可生物降解的组织填料介质。

合成的可生物降解的组织填料介质包括RADIANCE^TM和RADIESSE^TM(钙和磷酸盐基微球)、(羧甲基纤维素和聚氧化乙烯)、(聚左旋乳酸微球)、其它的多酸、多醚和聚合物。钙和磷酸盐基微球包括悬浮在充当用于新的胶原蛋白生长的支架的水基凝胶中的羟磷灰石钙颗粒。颗粒随着时间的推移降解成可通过正常代谢过程去除的钙离子和磷酸盐离子。降解通常耗时18个月乃至更长时间。由于被认为随着时间的推移刺激了胶原蛋白产生，基于聚左旋乳酸的填料认为是“起刺激作用的”。因此，并没有看到立即填充效果。而且，它们已与肉芽肿的形成和根瘤形成相关联。

合成的不可生物降解的组织填料介质包括并非在身体中立即分解的化合物。合成的不可生物降解的组织填料介质可包括生物成分(反之亦然)。在一些实施例中，至少一部分该产品不能被不同身体运作明显分解。合成的不可生物降解的填料介质的实例包括：ARTEFIL^TM和ARTECOL^TM(悬浮在牛胶原蛋白载体中的聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球)、(液体医用级硅酮)、DERMALIVE^TM和DERMADEEP^TM(稳定的透明质酸加丙烯酸水凝胶甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)和甲基丙烯酸乙酯(EMA)共聚体颗粒)和不同的其它聚合物、多酸和多醚。在一些实施例中，载体具有快速生物降解作用。这些不可降解的填料当中的一些会刺激不可降解的材料周围的胶原蛋白的成纤维细胞沉积，作为身体的免疫响应的一部分。在某些情况下，新形成的胶原蛋白不会与身体的天然胶原蛋白基质在类型、原纤排列和/或力学性质方面高度匹配。而且，由于材料的不可降解的性质并发症可能出现并可能持续时间更长并且比使用可降解的填料更难治疗。此外，永久填料还已与严重的纤维化反应相关联，在某些情况下导致疤痕形成。

由于能够被本领域的普通技术人员理解，在一些实施例中，上述填料的成分中的任何一种或其组合可与不同实施例中并用于特定结果的其它填料(或可选填料)组合。

在一些实施例中，组织填料介质选自：胶原蛋白、脂肪、源自人或动物的胶原蛋白、牛胶原蛋白、I型胶原蛋白、II型胶原蛋白、III型胶原蛋白、由戊二醛交联以形成网格结构的3.5％牛真皮胶原蛋白、天然人胶原蛋白、自体胶原蛋白、聚甲基丙烯酸甲酯微球(可选地悬浮在牛胶原蛋白中)、由受试者的组织配制而成的胶原蛋白纤维的悬浮液、源自尸体的真皮、多酸和多醚(例如羧甲基纤维素(CMC)和聚氧化乙烯)的人体组织胶原蛋白基质、已冻干的非细胞的人尸体的真皮、已冻干的微粒化的非细胞的人尸体的真皮、人工培养的自体成纤维细胞、透明质酸、非动物源稳定性透明质酸衍生物、悬浮在含水凝胶载体中的烃基磷灰石钙的微球、悬浮在非动物源的海兰凝胶中的葡聚糖珠(例如直径为40-60mu)、具有牛胶原蛋白的溶解的弹性蛋白肽、硅酮、具有牛胶原蛋白、聚左旋乳酸、聚四氟乙烯(PTFE)、糖基化的胶原蛋白、PMMA、成骨钙磷灰石、人工培养的人类细胞、膨体聚四氟乙烯(e-PTFE)、或ePTFE的或它们的一些组合。可注射填料介质的进一步实例包括：(包括水和交联的聚合物)、(悬浮在牛胶原蛋白中的PMMA微球)、真皮填料(合成的生物相容性聚合物、包括可吸收的医用聚合物的非HA凝胶)、(悬浮在牛胶原蛋白中的PMMA微球)、BIO-ALCAMID^TM(合成的网状聚合物(聚烷基酰亚胺)、CAPTIQUE^TM(非动物透明质酸)、COSMODERM^TM(人胶原蛋白皮肤填料)、COMOPLAST^TM、自体胶原、FASCIAN^TM(绷带)、绷带、脂肪、Hylaform^TM(禽用透明质酸)、JUVEDERM VOLBELLA、JUVEDERM VOLUMA、JUVADERM ESTHELIS、JUVADERM FORTELIS、(生化合成的非动物透明质酸)、RADIESSE^TM(基于钙和磷的微球)、(聚左旋乳酸(PLLA))、胶原蛋白、透明质酸、(源自牛组织的胶原蛋白)、(透明质酸和丙烯酸水凝胶颗粒)、(透明质酸和丙烯酸水凝胶颗粒)、(人工培养育的自体人成纤维细胞)、(羧甲基纤维素(CMC)和聚氧化乙烯(PEO)填料)、PURAGEN^TM(包括双交联的透明质酸分子的填料)、INTRA(包括悬浮在超螺旋的稳定性透明质酸中的柔性葡聚糖微珠的填料)、SCULPTRA^TM(Formerly NEW-FILL^TM、聚左旋乳酸的填料)、Teosyal、(涉及3D透明质酸透明质酸基质技术的透明质酸填料)、美容组织填充物(Anika的CTA)、及它们的组合。

组织填料的其它实例包括：Allergan的Galderm的Anika Therapeutics的Neogenesis的

在一些实施例中，添加剂可与组织填料介质结合。与聚合物结合的药剂可包括麻醉剂或镇痛剂(例如利多卡因)或维生素(例如维生素C)。添加剂可包括生物活性成分，例如生长因子、肽和细胞。

在一些实施例中，组织填料介质在室温下基本上稳定持续例如大约3个月、大约6个月、大约9个月、大约12个月、大约15个月、大约18个月、大约21个月、大约24个月、大约27个月、大约30个月、大约33个月或大约36个月。在本实施例的其它方面，真皮填料组合物在室温下基本上稳定持续例如大约至少3个月、至少6个月、至少9个月、至少12个月、至少15个月、至少18个月、至少21个月、至少24个月、至少27个月、至少30个月、至少33个月或至少36个月。在本实施例的其它方面，组织填料组合物在室温下基本上稳定持续例如大约3-12个月、大约3-18个月、大约3-24个月、大约3-30个月、大约3-36个月、大约6-12个月、大约6-18个月、大约6-24个月、大约6-30个月、大约6-36个月、大约9-18个月、大约9-24个月、大约9-30个月、大约9-36个月、大约12-18个月、大约12-24个月、大约12-30个月、大约12-36个月、大约18-24个月、大约18-30个月或大约18-36个月。

在一些实施例中，组织填料介质是可降解的并且在大约1个月、2个月、3个月、大约3-12个月、大约3-18个月、大约3-24个月、大约6-12个月、大约6-18个月、大约9-12个月、大约9-18个月、大约12-18个月在体内降解。

在某些实施例中，组织填料介质包括交联的透明质酸。透明质酸可被例如通过链球菌发酵工艺非动物地衍生，其然后通过交联稳定。这样的细菌源的透明质酸具有小于动物源性透明质酸的链长和分子量(与4-6兆道尔顿相比大约为1-3兆道尔顿)。

透明质酸的交联可使用交联剂，例如1，4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)(例如Restylane、Juvederm和Boletero真皮填料)、乙烯砜(DVS)(例如Hylaform、Captique和Prevelle真皮填料)、2，7，8-二环氧辛烷(DEO)、公开号为2014/0039062的美国专利申请中所描述的基于聚乙二醇的交联剂，其含量通过引用结合于此，以及专利号为8,124,120美国专利中所描述的存在pH缓冲液的双碳二亚胺，其内容通过引用结合于此。交联致使透明质酸降解较慢。交联的类型和程度将决定组织填料介质的降解速率、粘弹性以及稳定性。然而，对交联程度的可能限制可为生物相容性的降低(例如体内加重的炎症反应和肉芽肿形成)和致使填料不可非注射的高粘性。

组织填料介质可包括可溶的流体成分中的相对不可溶的交联的透明质酸成分。交联的透明质酸成分可包括粘附性颗粒。可溶的流体成分可包括游离透明质酸(非交联的)或能促进组织填料组合物通过细针头输送的任何其它流体成分。透明质酸(包括交联的透明质酸成分和非交联的透明质酸成分)的浓度可为大约4.5-40mg/mL、大约4.5-35mg/mL、大约4.5-30mg/mL、大约4.5-25mg/mL、大约4.5-20mg/mL、大约4.5-15mg/mL、大约4.5-10mg/mL。透明质酸(包括交联的透明质酸成分和非交联的透明质酸成分)的浓度可为大约10mg/mL、大约12mg/mL、大约14mg/mL、大约16mg/mL、大约18mg/mL、大约20mg/mL、大约22mg/mL或大约24mg/mL。非交联的透明质酸成分可包括大约总透明质酸的大约30％-100％、或组合物中的总透明质酸含量的大约40-100％、大约40-99％、大约40-98％、大约40-95％、大约40-90％、大约40-85％、大约40-80％、大约40-75％、大约40-70％、大约40-65％、大约40-60％、大约40-55％、大约40-50％、大约40-45％、大约50-100％、大约50-99％、大约50-98％、大约50-95％、大约50-90％、大约50-85％、大约50-80％、大约50-75％、大约50-70％、大约50-65％、大约50-60％、大约50-55％、大约60-100％、大约60-99％、大约60-98％、大约60-95％、大约60-90％、大约60-85％、大约60-80％、大约60-75％、大约60-70％。交联的透明质酸成分可包括组合物中总透明质酸含量的大约1％-20％。在某些实施例中，交联的透明质酸成分包括大约1％-15％、大约1％-14％、大约1％-13％、大约1％-12％、大约1％-11％、大约1％-10％、大约1％-9％、大约1％-8％、大约1％-7％、大约1％-6％、大约1％-5％、大约1％-4％、大约1％-3％、大约1％-2％。在某些实施例中，交联的透明质酸成分包括大约1％-12％、大约3％-10％、或大约4％-10％。

在某些实施例中，组织填料介质包括流体成分内的交联的透明质酸颗粒，该颗粒可为相同尺寸或不同尺寸。确定颗粒的尺寸以使得它们能穿过细针孔，例如规格为27-40G的针头。颗粒尺寸范围可为100-1000μm、或大约200-1000μm、大约250-1000μm、大约300-1000μm、大约350-1000μm、大约400-1000μm、大约450-1000μm、大约500-1000μm、大约550-1000μm、大约600-1000μm、大约650-1000μm、大约700-1000μm、大约200-900μm、大约250-900μm、大约300-900μm、大约350-900μm、大约400-900μm、大约450-900μm、大约500-900μm、大约550-900μm、大约600-900μm、大约650-900μm、大约700-900μm、大约200-800μm、大约250-800μm、大约300-800μm、大约350-800μm、大约400-800μm、大约450-800μm、大约500-800μm、大约550-800μm、大约600-800μm、大约650-800μm、或大约700-800μm。

组织填料组合物的粘结性可为应用中的预期性质，在所述应用中预期机械地修复植入或注射部位周围的软组织。弹性模量G′经常用于表征凝胶的牢固性，并且表示材料的抗变形的能力。在透明质酸中，交联程度和透明质酸浓度影响组合物的模量。增加透明质酸浓度和交联会增加填料模量。在某些实施例中，组织填料介质的弹性模量G′的范围为100-800Pa，大约100-700Pa、大约100-600Pa、大约100-500Pa、大约200-600Pa或大约200-500Pa。

在某些实施例中，组织填料介质是水合的。水合程度为用于确定一旦施用于软组织有多少介质会膨胀的因素。

本发明的生物光子组合物具有多种用途。本发明的生物光子组合物可用于皮肤复原，但并不限于任一具体的理论。本发明的生物光子组合物可以促进伤口愈合或组织修复，但并不受限于这种理论。本发明的生物光子组合物可从美容角度增强软组织。本发明的生物光子组合物可抑制或治疗疤痕。本发明的生物光子组合物可刺激胶原蛋白合成。本胶原蛋白合成可用于组织修复、皮肤复原、或从美容角度增强软组织。因此，本发明的目的是提供一种可以用生物光子疗法治疗伤口的方法，其中所述方法促进伤口愈合。本发明的目的是提供一种可以用生物光子疗法治疗伤口的方法，其中所述方法促进胶原蛋白合成。本发明的目的是提供一种可以用生物光子疗法治疗伤口的方法，其中所述方法防止疤痕形成。本发明还有一个目的是提供一种用生物光子疗法治疗皮肤组织的方法，其中所述方法用于促进皮肤复原。本发明还有一个目的是提供一种用生物光子疗法治疗皮肤组织的方法，其中所述方法用于促进胶原蛋白合成。

在某些实施例中，本发明提供一种用生物光子疗法治疗伤口的方法，该方法包括：向伤口内待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域；其中该方法刺激该区域内的伤口愈合。

在又一个方面，本发明提供一种促进皮肤复原的方法。在某些实施例中，本发明提供一种促进皮肤复原的方法，该方法包括：向软组织内待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域；其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成。该组织填料介质可提供立即填充效果，并且该组合物可诱导胶原蛋白合成。

在又一个方面，本发明提供一种用于从美容角度增强软组织的方法。在某些实施例中，本发明提供一种用于从美容角度增强软组织的方法，包括：皮内或皮下向待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域；其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成以从美容角度增强软组织。

在又一个方面，本发明提供一种用于抑制或治疗结疤的方法。在某些实施例中，本发明提供一种用于抑制或治疗结疤的方法，该方法包括：向疤痕或伤口内或周围的待治疗区域施用组合物，其中该组合物包括组织填料介质和荧光团；采用波长可被荧光团吸收的光照射该区域；其中该方法刺激该区域内的胶原蛋白合成以防止或减少疤痕形成。

在本文中所公开的方法中，生物光子组合物可通过注射或植入(例如使用注射器和针头等)施用到治疗部位处的软组织内或下面(例如皮下施用、皮内施用、真皮下施用)。本领域技术人员可根据待治疗的软组织选择恰当的针孔尺寸。在皮内应用中，可使用规格为27G-40G的针头，通常为30或32G。规格尺寸越高，针孔越细。本发明的生物光子组合物还可表面地注射或植入到，例如真皮的乳头层内，或可注射或植入到真皮的网织层内。

该生物光子组合物可通过连续方式(例如直线注射)或使用针刺(例如串行穿刺技术)皮内或皮下施用到真皮中，以皮内或皮下形成生物光子组合物的分离块。在将组合物施用到软组织部位的时候或者施用后同时照射该生物光子组合物。

在某些实施例中，大约1mL的生物光子组合物被皮内或皮下施用。在某些实施例中，小于大约1mL的生物光子组合物被皮内或皮下施用。在某些实施例中，大约0.1-0.2mL、大约0.2-0.3mL、大约0.3-0.4mL、大约0.4-0.5mL、大约0.5-0.6mL、大约0.6-0.7mL、大约0.7-0.8mL、大约0.8-0.9mL、大约0.9-1.0mL的生物光子组合物被皮内或皮下施用。

适合本发明方法用途的生物光子组合物选自上述生物光子组合物的任一实施例。例如，用于本发明方法的生物光子组合物可包括在应用光时发生至少部分光漂白的第一生色团。第一生色团吸收波长在大约200-800nm、大约200-700nm、大约200-600nm或大约200-500nm处。在一个实施例中，第一生色团吸收波长在大约200-600nm处。在一些实施例中，第一生色团在波长大约200-300nm、250-350nm、300-400nm、350-450nm、400-500nm、450-650nm、600-700nm、650-750nm或700-800nm处吸收光。在其它实例中，适合本发明方法的生物光子组合物进一步包括至少一个其它生色团(例如，第二生色团)。第二生色团的吸收光谱与第一生色团的发射光谱至少重叠大约80％、大约50％、大约40％、大约30％或大约20％。在一些实施例中，第一生色团的发射光谱与第二生色团的吸收光谱重叠至少大约1-10％、至少大约5-15％、至少大约10-20％、至少大约15-25％、至少大约20-30％、至少大约25-35％、至少大约30-40％、至少大约35-45％、至少大约50-60％、至少大约55-65％或至少大约60-70％。

用光照射生物光子组合物可能导致能量从第一生色团转移到第二生色团。随后，第二生色团可放出作为荧光的能量和/或产生活性氧物质。在本发明的方法的某些实施例中，光应用导致的能量转移并不伴随热量的产生，或者并不导致组织损伤。

在本发明的方法中，生物光子组合物可(例如使用光纤或光管道)经皮(从身体外部)或从软组织内部进行照射。在某些实施例中，生物光子组合物本身可形成从皮肤表面到组合物的光管道。为了形成这样的光管道，形成从皮肤穿刺点到软组织内的组合物的组合物轨迹。在本发明的方法中，当或紧接着将组合物施用给体内区域后同时照射生物光子组合物。

在本发明方法中，可以使用任何光化光光源。任何类型的卤素灯、LED或等离子弧灯或激光器都是合适的。合适的光化光光源的主要特点是其发射一个(或多个)波长适合活化组合物中一个或多个光活化剂的光。在一个实施例中，使用氩激光器。在另一个实施例中，使用磷酸钛氧钾(KTP)激光器(如GreenLight^TM激光器)。在另一个实施例中，可以采用日光。在又一个实施例中，光化光光源是LED光固化设备。在又一个实施例中，光化光光源是波长大约200-800nm的光源。在另一个实施例中，光化光光源是波长大约400-600nm或大约400-700nm的可见光光源。在又一个实施例中，光化光的光源是蓝光。在又一个实施例中，光化光的光源是红光。在又一个实施例中，光化光的光源是绿光。此外，光化光光源应具有合适的功率密度。非准直光源(LED、卤素灯或等离子灯)合适的功率密度为大约1mW/cm²-200mW/cm²。激光器光源合适的功率密度为大约0.5mW/cm²-0.8mW/cm²。

在本发明方法的一些实施例中，光源在受试者皮肤、伤口或粘膜表面处的能量为大约1mW/cm²-500mW/cm²、1-300mW/cm²或1-200mW/cm²，其中应用的能量至少取决于治疗条件、光的波长、受试者皮肤距光源的距离及生物光子组合物的厚度。在某些实施例中，受试者皮肤处的光是大约1-40mW/cm²、或20-60mW/cm²、或40-80mW/cm²、或60-100mW/cm²、或80-120mW/cm²、或100-140mW/cm²、或120-160mW/cm²、或140-180mW/cm²、或160-200mW/cm²、或110-240mW/cm²、或110-150mW/cm²、或190-240mW/cm²。

在本发明的方法的一些实施例中，局部生物光子组合物可为额外的照射源或唯一的照射源。在这些实施例中，局部生物光子组合物可包括荧光团，这样使得当用激活光(例如来自LED或激光源)照射时会发出具有更长波长的光(斯托克斯频移)。来自激活光和/或局部生物光子组合物的光可激活组织填料组合物内的荧光团。这样，包围组织填料组合物的组织用不同强度的宽频带光进行照射。该局部生物光子组合物可在WO2010/051636、WO2010/051641和WO2013/155620其中之一中进行描述，其内容通过引用结合于此。

在某些实施例中，组合物中的生色团可以通过包括日光和顶部照明的环境光进行光激发。在一些实施例中，生色团可以通过电磁光谱可见范围内的光光活化。这种光可以由任何光源发射，例如日光、灯泡、LED设备、电子显示屏，例如电视、计算机、电话、移动装置、移动装置上的电筒。在本发明方法中，可以使用任何光源。例如，可以结合使用环境光和直射光或人工直射光。环境光包括顶部照明，例如LED灯泡、荧光灯等，及非直射日光。

所需的暴露于光化光的持续时间将依赖于生物光子组合物的皮肤表面下方的深度；干预组织的厚度、密度和成分；干预组织的类型、组织填料组合物内的生色团的浓度、光源的功率密度、波长和带宽、生物光子组合物的厚度、以及到光源的治疗距离。荧光照射治疗区可在数秒内发生或甚至在不到一秒内发生，但是，为了利用吸收、反射和重新发射的光对本发明组合物的协调效应及其与治疗组织的相互作用，延长照射时间是有益的。

在一个实施例中，施用生物光子组合物的组织暴露于光化光的的时间是1-5分钟。在另一个实施例中，施用生物光子组合物的组织暴露于光化光的的时间是1-5分钟。在一些其它实施例中，生物光子组合物照射1-3分钟。在某些实施例中，光的应用时间为1-30秒、15-45秒、30-60秒、0.75-1.5分钟、1-2分钟、1.5-2.5分钟、2-3分钟、2.5-3.5分钟、3-4分钟、3.5-4.5分钟、4-5分钟、5-10分钟、10-15分钟、15-20分钟、20-25分钟或20-30分钟。治疗时间范围可高达大约90分钟、大约80分钟、大约70分钟、大约60分钟、大约50分钟、大约40分钟或大约30分钟。应该理解的是，可以通过调节传输给治疗部位的能量密度的传输速率来调节治疗时间，以保持剂量。例如，传输的积分能量是大约4至大约60J/cm²、大约10-60J/cm²、大约10-50J/cm²、大约10-40J/cm²、大约10-30J/cm²、大约20-40J/cm²、大约15J/cm²-25J/cm²，或大约10-20J/cm²。

在又一个实施例中，光化光的光源是在治疗部位上方连续移动适当的照射时间。在又一个实施例中，多次施用生物光子组合物和光化光。在一些实施例中，生物光子组合物或组织至少暴露于光化光两次、三次、四次、五次或六次。在一些实施例中，在暴露于光化光或施用于软组织的新生物光子组合物之前先新施用生物光子组合物。

该方法可根据需要重复进行。例如，在组织填料介质是可生物降解的材料的某些实施例中，在组织填料介质接近于完全降解或完全降解后可重复该方法。组织填料介质降解时间取决于填料介质的类型及其固有的降解特性，例如粘度、软组织内的填料数量、它在软组织内的位置、以及组织的深度。根据本发明的某些实施例的重复该方法的周期范围可为大约2-24个月。在某些实施例中，照射后荧光团没有降解，在这种情况下组合物可重新照射直至光漂白。

该方法可进一步包括：一旦组合物已施用就对该区域进行按摩推拿。

表皮和真皮分别是第一层皮肤和第二层皮肤。真皮含有皮肤的结构性元素结缔组织。真皮内有具有不同功能的各种类型的结缔组织。弹性纤维赋予皮肤弹性，胶原蛋白赋予皮肤强度。

真皮和表皮之间的接合处是一个非常重要的结构。真皮-表皮接合处连结形成与手指类似的表皮嵴。表皮细胞从真皮内的血管接收其营养物质。表皮嵴增加表皮暴露于这些血管和所需营养物质的表面积。

皮肤的老化伴随皮肤的显著生理变化。新皮细胞的产生减缓，真皮-表皮接合处的表皮嵴变平。虽然弹性纤维的数量增加，但是，其结构和凝聚性下降。此外，胶原蛋白的数量和真皮的厚度随着皮肤老化而降低。

胶原蛋白是皮肤细胞外基质的主要成分，提供结构性框架。在老化过程期间，胶原蛋白合成下降及胶原蛋白纤维不溶解，导致真皮变薄，丧失皮肤的生物力学性质。

皮肤的生理变化导致出现显著的老化症状，通常被称为时序老化、内在老化和光老化。皮肤变得更干燥、粗糙和脱屑增加，外表变得更暗淡无光，出现明显的细纹和皱纹。皮肤老化的其它症状包括但不限于：皮肤变薄和透明、底层脂肪流失(导致双颊凹陷和眼睛深陷，以及手部和颈部明显失去紧致度)、骨质疏松(由于骨质疏松，骨骼与皮肤分离，导致皮肤松驰)、皮肤干燥(可能发痒)、无法排汗充分冷却皮肤、面部长毛、雀斑、老年斑、蛛状静脉、皮肤粗糙和革质皮肤、拉开时会消失的细纹、皮肤松驰或长斑。

真皮-表皮接合处是基底膜，将表皮中的角化细胞与位于表皮下面的细胞外基质分离。该基底膜由两层组成：与角化细胞接触的基底层及与细胞外基质接触的下层网状层。基底层富含IV型胶原蛋白和层粘连蛋白，这些分子在为细胞连接而提供结构性网络和生物粘合特征方面起到作用。

层粘连蛋白是糖蛋白，仅存在于基底膜内。它由三种多肽链(α、β和γ)组成，以不对称交叉形状布置，通过二硫键保持在一起。这三种链以不同的亚型存在，导致层粘连蛋白有十二种不同的同分异构体，包括层粘连蛋白-1和层粘连蛋白-5。

真皮通过VII型胶原蛋白纤维被锚定在基底膜角化细胞的半桥粒处，半桥粒是位于角化细胞上的特异性接合点，由α-整联蛋白和其它蛋白组成。层粘连蛋白，特别是层粘连蛋白-5，在基底角化细胞中的半桥粒跨膜蛋白及VII型胶原蛋白之间构成实际的锚定点。

已经证明，在老化皮肤中，层粘连蛋白-5合成和VII型胶原蛋白表达减少。这导致真皮和表皮之间的接触丧失，导致皮肤失去弹性和松驰。

另一种类型的皱纹，通常指表情纹，要求弹性丧失，尤其是在真皮中，因此，当产生面部表情的面部肌肉施加应力到皮肤上时，皮肤不再能够恢复其原来状态，导致表情纹。

本发明的组合物和方法促进皮肤复原。在一些实施例中，本发明的生物光子组合物和方法促进胶原蛋白的合成。在一些实施例中，本发明的组合物和方法可以减少、消除、延缓或甚至逆转一种或多种皮肤老化的症状，包括但不限于出现细纹或皱纹、皮肤变薄和透明、底层脂肪流失(导致双颊凹陷和眼睛深陷，以及手部和颈部明显失去紧致度)、骨质疏松(由于骨质疏松，骨骼与皮肤分离，导致皮肤松驰)、皮肤干燥(可能发痒)、无法排汗充分冷却皮肤、面部长毛、雀斑、老年斑、蛛状静脉、皮肤粗糙和革质皮肤、拉开时会消失的细纹、皮肤松驰或长斑。在一些实施例中，本发明的组合物和方法可以诱导毛孔缩小、增强皮肤各部分的紧致性，和/或增强皮肤半透明性。此外，本发明的组合物和方法可通过例如提高亮度和纹理，减小毛孔尺寸及绷紧皮肤来增强皮肤的美观性外形。

本发明中的生物光子材料和方法可用于治疗伤口，促进伤口愈合，促进组织修复和/或消除或减少对美容的需要，包括改善运动机能(如关节运动)。本发明的生物光子材料和方法可以治疗的伤口包括，例如，不同方式引发的皮肤和皮下组织的伤口(如卧床时间太长引起的压迫性溃疡、外伤引起的伤口、牙周炎等症状引起的伤口)及具有不同特点的伤口。在某些实施例中，本发明提供治疗，例如灼伤、切口、切除术、撕裂、磨损、刺伤或贯通伤口、手术伤口、挫伤、血肿、压伤、疮和溃疡和/或促进这些伤口的愈合的生物光子材料和方法。

本发明的生物光子组合物和方法可用于治疗慢性皮肤溃疡或伤口和/或促进这些伤口的愈合，这些伤口无法通过一系列有序、及时的事件而实现持久的结构性、功能性及美观性闭合。绝大多数慢性伤口可以根据其病原学分为三类：压迫性溃疡、神经病变性(糖尿病足部)溃疡及血管性(静脉或动脉)溃疡。

例如，本发明提供用于治疗糖尿病溃疡和/或促进糖尿病溃疡愈合的生物光子组合物和方法。由于神经和血管并发症，糖尿病患者容易患足部溃疡和其它溃疡。周围神经病变会导致足部和/或腿部感觉改变或完全丧失。晚期神经病变的糖尿病患者完全丧失了辨别剧痛的能力。患神经病变的患者足部出现任何伤口或创伤时，它们可能数天或数周都完全没注意到。晚期神经病变患者丧失了感觉持续压力刺激的能力，结果，可能出现组织缺血和坏疽，导致，例如，足底溃疡。微血管疾病是糖尿病显著的并发症之一，也会导致溃疡。在某些实施例中，本发明提供了治疗慢性伤口的生物光子材料和方法，其中慢性伤口的特征在于因糖尿病神经病变和/或血管并发症而引起的糖尿病足部溃疡和/或溃疡。

在其它实例中，本发明提供用于治疗压迫性溃疡和/或促进压迫性溃疡愈合的生物光子组合物和方法。压迫性溃疡包括褥疮、褥疮性溃疡和坐骨结节溃疡，这些溃疡会给患者带来巨大的痛苦和不适。压迫性溃疡是由长期施加到皮肤上的压力引起的。因此，由于个人的重量或质量，压力可以施加到患者的皮肤上。当皮肤一个区域供血阻塞或中断两小时或三小时以上时，会形成压迫性溃疡。受影响的皮肤区域会变红、疼痛及坏死。如果不进行治疗，皮肤会露出来，受到感染。因此，压迫性溃疡是因长期卧床、坐轮椅和/或戴管型造成的压力下皮肤某一区域发生的皮肤溃疡。当一个人卧床不起、失去意识、无法感觉疼痛或不能动时，会发生压迫性溃疡。压迫性溃疡通常发生在身体的骨头突出部分，如臀部区(骶骨或髂嵴)或足跟。

本发明的生物光子材料和方法可以治疗的其它类型的伤口，包括公开号为20090220450的美国专利申请中所公开的材料和方法，其通过引用结合于此。

伤口愈合过程有三个明显的阶段。首先，在炎症阶段，通常从伤口出现到两天至五天，血小板聚集从而沉积肉牙，促进纤维蛋白的沉积及刺激生长因子的释放。白血球迁移到伤口部位，开始消解伤口处的碎片和将碎片运走。在此炎症阶段，单核细胞还转化为巨噬细胞，后者释放出生长因子，刺激血管的形成和成纤维细胞的产生。

其次，在增生阶段，通常发生在两天至三周，肉牙组织形成，并开始进行上皮形成和收缩。成纤维细胞是该阶段的关键细胞类型，它们通过增生和合成胶原蛋白来填充伤口，提供强大的基质供上皮细胞生长。当成纤维细胞产生胶原蛋白时，从附近血管延伸形成血管，导致形成肉牙组织。肉牙组织通常从伤口底部生长。上皮形成涉及上皮细胞从伤口表面迁移，从而封住伤口。上皮细胞被接触类似细胞的需求推动，并受到充当网格作用的纤维蛋白链网络的引导，这些细胞在网格上迁移。在伤口处出现称为肌成纤维细胞的收缩细胞，帮助伤口闭合。这些细胞显示出胶原蛋白合成和收缩性，并且在肉牙性伤口内比较常见。

再次，重塑阶段，即伤口愈合的最后阶段，从三周到几年，疤痕中的胶原蛋白经历反复降解和重新合成。在此阶段，新形成的皮肤的拉伸强度提高。

但是，当伤口愈合速度增加时，通常疤痕形成相应增加。结疤是大多数成年动物和人类组织愈合过程的结果。疤痕组织与其代替的组织不同，其功能质量通常更差。疤痕的类型包括但不限于萎缩性疤痕、增生性疤痕和癍痕瘤，以及瘢痕挛缩。萎缩性疤痕呈扁平，其表面低于周围皮肤下，形成谷或洞。增生性疤痕是留在原损伤边界内的隆起疤痕，通常含有以异常方式布置的过多的胶原蛋白。癍痕瘤是在原伤口边缘外扩散的隆起疤痕，以位点特异性方式侵入到正常皮肤附近，通常含有以异常方式布置的胶原蛋白螺旋。

与此相反的是，正常皮肤由以网织篮式方式布置的胶原蛋白纤维组成，有助于真皮的强度和弹性。因此，为了使伤口愈合过程更顺利，需要一种方法，不仅刺激胶原蛋白的产生，而且还以减少疤痕形成的方式刺激胶原蛋白的产生。

本发明的生物光子组合物和方法通过促进基本上均匀的上皮形成、促进胶原蛋白合成、促进控制收缩，和/或减少疤痕组织形成而促进伤口愈合。在某些实施例中，本发明的生物光子组合物和方法可通过促进基本上均匀的上皮形成而促进伤口愈合。在一些实施例中，本发明的生物光子组合物和方法促进胶原蛋白合成。在一些其它实施例中，本发明的生物光子组合物和方法促进控制性收缩。在某些实施例中，本发明的生物光子组合物和方法，例如，通过减少疤痕组织的形成而促进伤口愈合。在某些实施例中，生物光子组合物可在伤口闭合期间或伤口闭合后使用，用于优化疤痕修复。

生物光子组合物可定期施用，例如，一周一次，或医生认为合适的间隔。或者，一旦施用，生物光子组合物可每隔一定时间光激活直到生色团耗尽。

可以使用局部或全身的辅助治疗，例如抗生素治疗。也可使用负压辅助伤口闭合来帮助伤口闭合和/或清除组合物。

在一些实例中，本文中规定的生物光子组合物的施用频率可取决于最初施用的填料的类型和/或数量。根据其厚度、粘度和弹性，填料可早在几个月的时候和迟至2年后再施用。同样地，每单位时间施用量的问题可取决于填料类型、位置、组织部位的深度和所施用的数量。

本发明还提供用于制备和/或施用本发明任一组合物的试剂盒。试剂盒可包括容器，其包含本发明的生物光子组合物。容器可以是不透光的、不透气的和/或防泄漏的。示例性容器包括但不限于注射器、药水瓶或药水袋。在一些实施例中，组织填料介质和生色团组合物放在单独的容器中，以在施用前由使用者进行混合。在一些实施例中，组织填料介质和生色团组合物放在单一预混组合物中。在一些实施例中，试剂盒包括手持注射装置。

在其它实施例中，试剂盒包括用于增强组合物治疗效果的全身或局部药物。例如，试剂盒包括用于治疗痤疮或伤口愈合的全身性或局部性抗生素或激素治疗药物。

试剂盒中可以包含关于如何按照本发明使用生物光子组合物的书面说明书，或者书面说明书可以包括在包含本发明组合物的容器上，或与该容器放在一起。

在试剂盒的某些实施例中，试剂盒可进一步包含光源，例如波长适合用于活化生物光子组合物中的生色团的便携式灯。便携式灯可以用电池或可以充电。

在某些实施例中，试剂盒可进一步包含一种或多种波导。

在某些实施例中，该试剂盒可进一步包括WO2010/051636、WO2010/051641和WO2013/155620其中之一所描述的局部生物光子组合物，其含量通过引用结合于此。

根据本发明的教导，识别等效的组合物、方法和试剂盒是本领域技术人员熟悉的，除常规试验外不再需要进行其它实验。根据下述实例，将更全面地了解本发明，这些实例仅作解释之用，无论如何都不应视为限制本发明。

实例

下面给出实例以举例说明本发明的实践结果。它们并不旨在限制或定义本发明的全部范围。

实例1

根据本发明的包括荧光团和真皮填料的组合物被制备。使用以下真皮填料和荧光团的组合物。

1)JUVEDERM VOLBELLA+荧光素+曙红Y；

2)JUVEDERMVOLBELLA+曙红Y+曙红B；

3)JUVEDERM VOLBELLA+曙红Y；

4)JUVEDERM VOLUMA+荧光素+曙红Y；

5)JUVEDERM VOLUMA+曙红Y；

6)JUVEDERM VOLUMA+曙红Y+曙红B；

7)ESTHELIS+曙红Y+荧光素；

8)FORTELIS+曙红Y+荧光素；

9)+荧光素+曙红Y；

10)+曙红Y+曙红B；

11)+曙红Y；

12)+荧光素+曙红Y；

13)+曙红Y+曙红B；和

14)+曙红Y。

例如，组合物7)和8)按如下方法制备：

7)0.75g FORTELIS与9.38μl曙红Y(9.6mg/ml)和9.38μl荧光素(9.6mg/ml)混合，使得曙红Y的最终浓度是0.012％且荧光素的最终浓度是0.012％。

8)0.75g ESTHELIS与9.38μl曙红Y(9.6mg/ml)和9.38μl荧光素(9.6mg/ml)混合，使得曙红Y的最终浓度是0.012％且荧光素的最终浓度是0.012％。

实例2

对I型和III型胶原蛋白基因表达水平的真皮填料介导影响在人真皮成纤维细胞(DHF)中进行评估。真皮填料凝胶在体外进行评价以评估它们对胶原蛋白合成的潜在影响。胶原蛋白是皮肤细胞外基质(ECM)的主要成分并且胶原蛋白合成的增加在皮肤复原方面是有利的。

JUVEDERM VOLUMA(VB)、JUVADERM VOLBELLA(V15)、(RL)、ESTHELIS(EB)及JUVADERM VOLBELLA(V15)、(RL)和ESTHELIS(EB)(凝胶A)的混合物在研究中用作真皮填料凝胶。在人真皮成纤维细胞(DHF)中试验真皮填料对胶原蛋白合成的影响。由qRT-PCR量化I型和III型胶原蛋白mRNA。在玻璃底皿上培养DHF。真皮填料凝胶涂抹在玻璃皿(2mm厚)的另一侧并且使用蓝色可见光(KLOX THERA^TM灯)在5cm距离处照射5分钟(300秒)。试验过的真皮填料凝胶仅包含曙红Y或曙红Y和荧光素(各自0.011％)两者的组合物。没有生色团的真皮填料凝胶用作对照物。

DHF细胞也在没有凝胶情况下单独用光治疗，以评估蓝光照射对胶原蛋白表达模式的影响。16小时照射后，收集细胞以进行RNA提取，并且实施cDNA合成。不同条件下的胶原蛋白mRNA水平由qRT-PCR进行评估。TGFβ1(5ng/ml)用于触发胶原蛋白基因表达并在所有实验中用作正对照物。与未治疗的对照物相比结果表现为折叠mRNA表达水平。

数据在表1中进行了归纳。

表1：16小时后处理的DHF中的I型胶原蛋白和III型胶原蛋白mRNA表达与未治疗的对照物相比。

与未治疗的对照物相比，凝胶A+曙红Y+荧光素显示出对I型胶原蛋白和III型胶原蛋白基因表达的积极影响(分别多达2.9和2.33倍增长)。有趣地是，I型胶原蛋白和III型胶原蛋白的基因表达的轻微感应也被观察，以用于凝胶A而非生色团试样(分别为2.3和1.57)，其可归因于凝胶A传送蓝光的能力更高，该蓝光将其影响施加到导致胶原蛋白mRNA表达的DHF细胞上。

包括EB、RL和V15(凝胶A)的组织填料介质的混合物刺激DHF细胞中的I型胶原蛋白的mRNA表达比单独地涂抹以及与独自与光相比较的组织填料介质的水平更高。当与缺乏生色团的凝胶A相比时，当生色团添加到凝胶A中时DHF细胞中的I型胶原蛋白和III型胶原蛋白的mRNA表达的刺激增加。

实例3

该技术在无菌条件下实施。用0.5％的洗必太(或类似的抗菌剂)清洗上唇区域内的皮肤。在那时，采用HA填料进行缓慢的真皮或皮下注射。注意别溢出各个区域。完成注射后，轻轻地按摩该区域以达到预期的结果。按照上唇的每个分区涂抹生色团凝胶并且使用LED灯照射该区域5分钟。用光治疗后，用盐水擦拭去除凝胶。

实例4

根据本发明的包括荧光团和真皮填料(包括透明质酸)的组合物可皮内注射到患者脸上的皱褶下。组合物可采用与荧光团的吸收光谱重叠的光进行照射以原位光敏化荧光团。荧光团可向周围软组织发出荧光。

实例5

根据本发明的包括荧光团和真皮填料(包括透明质酸)的组合物可皮内注射到患者脸上的皱褶下。局部生物光子组合物的薄层可立即放置在所注射组合物上方的皱褶之上。局部组合物可采用与局部组合物中的荧光团的吸收光谱重叠的光进行照射以光敏化该荧光团并且可导致其发出具有可在本发明的所注射的组合物内与荧光团的吸收光谱重叠的发射光谱的光。荧光团可向周围软组织发出荧光。

尽管本发明是结合其具体实施例来描述的，但应当理解的是，它能够进一步进行修改并且本申请旨在遵照涵盖本发明的任何变化、用途或改编，总的来说遵照本方面的原理并且包括这种偏离本发明所涉及的领域内本发明范围内已知的或习惯做法，并且可应用于在上文中提出的基本特征，如所附权利要求的范围。

说明书中所提到的所有文件都通过引用结合于此。