脂联素分泌调节剂的制作方法

本发明涉及一种含有岩藻糖作为有效成分的脂联素分泌调节剂。
背景技术：
：脂联素是由脂肪细胞分泌的蛋白质，是比较高浓度地在血液中循环的激素。其生理功能是维持能量的恒常性和糖、脂肪代谢等，例如，报道有通过AMP活化蛋白激酶(AMP-activatedproteinkinase：AMPK)的活化的脂肪酸的燃烧或胰岛素抵抗性的增大等(非专利文献1)。脂联素不仅以三聚体的形式在血液中循环，而且还以六聚体或其以上的多聚体(例如十二～十八聚体)的形式存在，尤其是明确可知利用多聚体可使脂肪酸燃烧或胰岛素抵抗性增大的效果好(非专利文献2)。此外，还明确可知三聚体或六聚体的脂联素通过血脑屏障，发动丘脑下部的摄食中枢，增进食欲(非专利文献3)。在以往，发现了促进脂联素的产生或调节分泌的活性物质、成分，并将其用于药品或化妆品、饮食品或动物饲料等。(例如专利文献1～3)。现有技术文献专利文献专利文献1：专利第4785140号公报专利文献2：专利第5004153号公报专利文献3：专利第5499415号公报非专利文献非专利文献1：YamauchiT.,Kamon,J.,MinokoshiY.,ItoY.,WakiH.,UchidaS.,YamashitaS.,NodaM.,KitaS.,UekiK.,EtoK.,AkanumaY.,FroguelP.,FoufelleF.,FerreP.,CarlingD.,KimuraS.,NagaiR.,KahnB.B.andKadowakiT.“Adiponectinstimulatesglucoseutilizationandfatty-acidoxidationbyactivatingAMP-activatedproteinkinase.”Nat.Med.(2002)8,1288-1295.非专利文献2：PajvaniU.B.,HawkinsM.,CombsT.P.,RajalaM.W.,DoebberT.,BergerJ.P.,WagnerJ.A.,WuM.,KnoppsA.,XiangA.H.,UtzschneiderK.M.,KahnS.E.,OlefskyJ.M.,BuchananT.A.,SchererP.E.“Complexdistribution,notabsoluteamountofadiponectin,correlateswiththiazolidinedione-mediatedimprovementininsulinsensitivity.”J.Biol.Chem.(2004)279,12152-62.非专利文献3：KubotaN.,YanoW.,KubotaT.,YamauchiT.,ItohS.,KumagaiH.,KozonoH.,TakamotoI.,OkamotoS.,ShiuchiT.,SuzukiR.,SatohH.,TsuchidaA.,MoroiM.,SugiK.,NodaT.,EbinumaH.,UetaY.,KondoT.,ArakiE.,EzakiO.,NagaiR.,TobeK.,TerauchiY.,UekiK.,MinokoshiY.,KadowakiT.“AdiponectinstimulatesAMP-activatedproteinkinaseinthehypothalamusandincreasesfoodintake.”CellMetab.(2007)Jul；6(1):55-68.技术实现要素：本发明要解决的技术问题然而，由于如上所述脂联素还伴随有增进食欲的作用效果，仅仅增加脂联素的血药浓度或增加来自脂肪细胞的产生量，对于避免过度饮食、实现健康的增进的情况等而言，非常不合适。因此，本发明的目的在于，提供一种能够在避免伴随脂联素的食欲增进的弊病的同时，有效表达由脂联素带来的效果的脂联素分泌调节剂，及提供具有这样的脂联素分泌调节作用的饮食品、功能性食品、化妆品、药品、及动物饲料。解决技术问题的技术手段本发明的发明人为实现上述目的而进行深入研究，其结果发现，岩藻糖具有减少脂联素的单体、三聚体及六聚体的生成，促进多聚体形成的作用效果，从而完成本发明。即，本发明如下所述构成。[1]一种脂联素分泌调节剂，其特征在于，所述脂联素分泌调节剂含有岩藻糖或其前驱物质作为有效成分。[2]根据上述[1]所述的脂联素分泌调节剂，其中，所述脂联素分泌调节剂用于增加脂联素多聚体相对于脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的相对量。[3]根据上述[1]或[2]所述的脂联素分泌调节剂，其中，所述脂联素分泌调节剂用于减少脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量。[4]根据上述[1]～[3]中任意一项所述的脂联素分泌调节剂，其中，所述脂联素分泌调节剂用于抑制食欲。[5]根据上述[1]～[3]中任意一项所述的脂联素分泌调节剂，其中，所述脂联素分泌调节剂用于燃烧脂肪。[6]根据上述[1]～[3]中任意一项所述的脂联素分泌调节剂，其中，所述脂联素分泌调节剂用于抗肥胖。[7]根据上述[1]～[3]中任意一项所述的脂联素分泌调节剂，其中，所述脂联素分泌调节剂用于改善胰岛素抵抗性。[8]根据上述[1]～[3]中任意一项所述的脂联素分泌调节剂，其中，所述脂联素分泌调节剂用于与具有使脂联素的血药浓度上升的作用的其它脂联素分泌调节剂一起给药。[9]一种具有脂联素分泌调节作用的饮食品，其中，以换算成岩藻糖含量计，所述饮食品含有0.0001～50质量％的岩藻糖或其前驱物质。[10]一种具有脂联素分泌调节作用的功能性食品，其中，以换算成岩藻糖含量计，所述功能性食品含有0.0001～100质量％的岩藻糖或其前驱物质。[11]一种具有脂联素分泌调节作用的化妆品，其中，以换算成岩藻糖含量计，所述化妆品含有0.0001～50质量％的岩藻糖或其前驱物质。[12]一种具有脂联素分泌调节作用的药品，其中，以换算成岩藻糖含量计，所述药品含有0.0001～100质量％的岩藻糖或其前驱物质。[13]一种具有脂联素分泌调节作用的动物饲料，其中，以换算成岩藻糖含量计，所述动物饲料含有0.0001～50质量％的岩藻糖或其前驱物质。发明效果根据本发明，由于岩藻糖具有减少脂联素的单体、三聚体及六聚体的生成，促进多聚体形成的作用效果，因此，能够在避免伴随脂联素的食欲增进的弊病的同时，有效地享受由脂联素带来的有用的效果。附图说明图1是表示调查波及脂肪细胞的脂联素生成的岩藻糖的影响的结果的图表，是表示利用无血清培养基培养24小时后，利用蛋白质印迹法调查作为核受体型转录因子的PPAR-γ、作为内标蛋白的肌动蛋白(actin)、及脂联素的表达量的结果的图表，其中所述无血清培养基含有0.1w/v％葡萄糖(泳道1)、0.1w/v％葡萄糖+0.1w/v％岩藻糖(泳道2)、0.45w/v％葡萄糖(泳道3)、或0.45w/v％葡萄糖+0.1w/v％岩藻糖(泳道4)。图2是表示调查波及脂肪细胞的脂联素生成的岩藻糖的影响的结果的图表，是表示利用无血清培养基培养24小时后，利用蛋白质印迹法调查脂联素的多聚体的表达量及形成状态的结果的图表，其中所述无血清培养基含有0.1w/v％葡萄糖(泳道1)、0.1w/v％葡萄糖+0.1w/v％岩藻糖(泳道2)、0.45w/v％葡萄糖(泳道3)、或0.45w/v％葡萄糖+0.1w/v％岩藻糖(泳道4)。具体实施方式本发明的脂联素分泌调节剂以岩藻糖(fucose)为有效成分。不仅适用于人，也适用于动物。此外，能够使岩藻糖的作用效果表达即可，对人或动物给药时，也可以以通过机体分解而必然生成岩藻糖的岩藻糖前驱物质为有效成分。作为岩藻糖前驱物质，可列举出菌体细胞壁、菌体分泌多糖、海藻提取物、马铃薯提取物、木薯提取物、猕猴桃提取物、拟南芥提取物、大豆提取物、四棱豆提取物、莼菜提取物、长叶车前提取物、家独行菜提取物、蜀葵提取物、木棉提取物、乌拉尔甘草提取物、羽扇豆提取物、胶黄蓍提取物、岩藻依聚糖、泡叶藻、果胶、粘蛋白、血液、岩藻糖甙、岩藻糖衍生物、乳寡糖、黄蓍等。本发明的脂联素分泌调节剂，以换算成岩藻糖含量计，优选含有0.0001～100质量％、更优选含有0.0005～70质量％、更进一步优选含有0.001～50质量％的上述有效成分。小于上述范围时，由于对人或动物给药时岩藻糖的量缺乏，因此，有脂联素分泌调节的作用降低的趋势。对本发明的脂联素分泌调节剂的制剂形态没有特别限制，可以直接使用上述有效成分，也可以根据需要，例如添加制剂上许可的基材或载体等，利用公知的方法，例如可以形成片剂、粉末剂、颗粒剂、胶囊剂、液体剂、含片剂、咀嚼片剂、糖状剂(飴状剂)、果冻状剂、注射剂、吸入剂、涂布剂等形态。对本发明的脂联素分泌调节剂的给药方式没有特别限制，例如可列举出经口给药、静脉内给药、脑内局部给药、腹腔内给药、吸入给药、经鼻给药、局部涂布给药等。作为本发明的脂联素分泌调节剂的给药量，根据给药方式、适用的人或动物的健康状态或患病状态、目的等，适当设定即可，没有特别限制，但在典型的经口给药时，以换算成岩藻糖计，优选为成人每日约0.1～20,000mg，更优选为0.1～10,000mg。本发明的脂联素分泌调节剂的有效成分，如后所述，表现出使脂联素多聚体相对于脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的相对量增加、或减少脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的作用效果，因此，适用于例如抑制食欲、燃烧脂肪、抗肥胖、改善胰岛素抵抗性等。此外，例如，也可以与具有使脂联素的血药浓度上升的作用的、其它脂联素分泌调节剂一起给药。由此，通常如果使脂联素的血药浓度上升，则由于脂联素的单体、三聚体及六聚体而产生食欲增进的弊病，但本发明的脂联素分泌调节剂的有效成分，如后所述，表现出使脂联素多聚体相对于脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的相对量增加、或减少脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的作用效果，因此，还能够抑制伴随着其它的脂联素分泌调节剂的食欲增进的弊病，作为整体有效享地受由脂联素带来的有用的效果。作为其它的脂联素分泌调节剂，可列举出噻唑烷衍生物、γ-谷维素和其组合物、肉桂酸苯乙酯、姜黄素等。另一方面，本发明的另一个侧面在于，提供一种含有岩藻糖或其前驱物质的、具有脂联素分泌调节作用的饮食品、功能性食品、化妆品、药品、动物饲料等。作为上述饮食品，以换算成岩藻糖含量计，优选含有0.0001～50质量％、更优选含有0.0005～30质量％、更进一步优选含有0.001～15质量％的岩藻糖或其前驱物质。小于上述范围时，摄取时岩藻糖的量缺乏，因此，有脂联素分泌调节的作用降低的趋势。例如，可列举出(1)软饮料、碳酸饮料、果汁饮料、蔬菜汁、乳酸菌饮料、乳饮料、豆浆、矿泉水、茶类饮料、咖啡饮料、运动饮料、酒精饮料、果冻饮料等饮料类，(2)番茄泥、蘑菇罐头、脱水蔬菜、腌制品等蔬菜加工产品，(3)干果、果酱、果泥、水果罐头等水果加工产品，(4)咖喱粉、芥末、生姜、混合香料、调味粉等调料，(5)意大利面、乌冬面、荞麦面、拉面、通心粉等面类(包括生面条、挂面)，(6)主食面包、糕点、烹饪面包、甜甜圈等面包类，(7)α化大米、燕麦片、麸皮、糊粉等，(8)焙烤甜食、饼干、大米甜食、糖果、巧克力、口香糖、零食点心、冷冻甜食、蜜饯糖果、日式甜点、西式甜点、日式半生甜食、布丁、冰淇淋等甜食类，(9)红豆、豆腐、纳豆、黄豆粉、豆皮、煮的豆、花生等豆类制品，(10)蜂蜜、蜂王浆加工食品，(11)火腿、香肠、培根等肉制品，(12)酸奶、布丁、炼乳、奶酪、发酵乳、黄油、冰淇淋等乳制品，(13)加工的蛋制品，(14)干鱼、鱼板、圆筒状鱼糕、鱼肉香肠等加工鱼，或干裙带菜、海带、咸烹海味等加工海藻，或咸鳕鱼子、干青鱼子、鲑鱼子、乌鱼子等加工鱼卵，(15)速溶汤、酱油、醋，料酒、清汤料、中华料理料、浓缩汤、色拉调料、蛋黄酱、番茄酱、味噌等调料，或色拉油、芝麻油、亚油酸油、甘油二酯、红花油等食用油脂，(16)汤(包括粉末、液体)等的熟食、半熟食品、或家常菜、软罐头食品、冷冻食品、半熟食品(例如菜肉焖饭的材料、蟹肉煎蛋的材料)等。作为上述功能性食品，以换算成岩藻糖含量计，优选含有0.0001～100质量％、更优选含有0.0005～70质量％、更进一步优选含有0.001～50质量％的岩藻糖或其前驱物质。小于上述范围时，摄取时岩藻糖的量缺乏，因此，有脂联素分泌调节的作用降低的趋势。例如，可列举出健康食品、健康饮料、营养补充剂、营养补充食品、保健功能食品、特定保健用食品、功能性显示许可食品、食品添加剂等。作为上述功能性食品的形态，没有特别的限制，也可以根据需要，例如组合食品许可的基材或载体、添加剂、营养成分等，利用公知的方法，形成例如片剂、粉末、颗粒、胶囊、液体状、糖、果冻等形态。作为上述化妆品，以换算成岩藻糖含量计，优选含有0.0001～50质量％、更优选含有0.0005～30质量％、更进一步优选含有0.001～15质量％的岩藻糖或其前驱物质。小于上述范围时，所适用的岩藻糖的量缺乏，因此，有脂联素分泌调节的作用降低的趋势。作为上述化妆品的形态，没有特别限制，可以根据需要，例如组合化妆品许可的基材或载体、添加剂、保湿成分等，利用公知的方法，形成例如乳霜、化妆水、喷雾剂、泡沫喷雾剂、肥皂、凝胶、面膜等形态。作为上述药品，以换算成岩藻糖含量计，优选含有0.0001～100质量％、更优选含有0.0001～70质量％、更进一步优选含有0.0001～50质量％的岩藻糖或其前驱物质。小于上述范围时，摄取时岩藻糖的量缺乏，因此，有脂联素分泌调节的作用降低的趋势。作为上述药品的形态，没有特别限制，可以根据需要，例如组合药品上许可的基材或载体、添加剂、药效辅助成分等，利用公知的方法，形成例如片剂、粉末剂、颗粒剂、胶囊剂、液体剂、含片剂、咀嚼片剂、糖状剂、果冻状剂、注射剂、吸入剂、涂布剂等形态。作为上述动物饲料，以换算成岩藻糖含量计，优选含有0.0001～50质量％、更优选含有0.0005～30质量％、更进一步优选含有0.001～15质量％的岩藻糖或其前驱物质。小于上述范围时，摄取时岩藻糖的量缺乏，因此，有脂联素分泌调节的作用降低的趋势。作为动物，可列举出狗、猫、鸟等宠物类，牛、猪、鸡、马、绵羊、山羊等家畜类，或金枪鱼、鰤鱼、鳗鱼、鲷鱼、河豚鱼等鱼类等。作为上述动物饲料的形态，没有特别限制，可以为固态、半固态、粉末状、液状等，也可以根据需要，例如除组合动物饲料中许可的基材或载体、饲料用赋形剂等以外，组合其它饲料材料等。作为其它饲料材料，例如可列举出谷粉、糖、盐、油脂、维生素、氨基酸、多酚类、核酸类、动物蛋白、植物蛋白、肉提取物、鱼提取物、酵母提取物、风味剂、色素、乳酸菌、抗生素、激素等。此外，根据本发明的见解，不仅提供含有岩藻糖或其前驱物质作为有效成分的脂联素分泌调节剂，还提供使人或动物摄取岩藻糖或其前驱物质以调节脂联素的分泌的方法、及用于调节脂联素的分泌的岩藻糖或其前驱物质的用途等。此外，在上述方法中，还提供了用于增加脂联素多聚体相对于脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的相对量的方法，用于减少脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的方法，用于抑制食欲的方法，用于燃烧脂肪的方法，用于抗肥胖的方法，用于改善胰岛素抵抗性的方法，用于与具有使脂联素的血药浓度上升的作用的、其它脂联素分泌调节剂一起给药的方法等。此外，在上述用途中，还提供了用于增加脂联素多聚体相对于脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的相对量的用途，用于减少脂联素的单体、三聚体及六聚体的总量的用途，用于抑制食欲的用途，用于燃烧脂肪的用途，用于抗肥胖的用途，用于改善胰岛素抵抗性的用途，用于与具有使脂联素的血药浓度上升的作用的、其它脂联素分泌调节剂一起给药的用途等。实施例以下列举出实施例，对本发明进行更具体的说明，但这些实施例并不限定本发明的范围。＜实验例1＞将小鼠成纤维细胞3T3－L1在汇合状态下利用胰岛素诱导分化成脂肪细胞。然后，利用含有10％FBS的DMEM培养基培养48小时。之后，在表1中所示的各实验区，以各浓度利用含有L-岩藻糖和/或D-葡萄糖的无血清DMEM培养基培养24小时。[表1]无血清DMEM培养基中的浓度实验区1(泳道1)0.1w/v％葡萄糖实验区2(泳道2)0.1w/v％葡萄糖+0.1w/v％岩藻糖实验区3(泳道3)0.45w/v％葡萄糖实验区4(泳道4)0.45w/v％葡萄糖+0.1w/v％岩藻糖培养后，取培养基上清液，与等量的还原SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)上样缓冲液混合，在100℃下保温10分钟，每1泳道将5－10μL的样品供给到SDS－PAGE，根据常规方法，利用使用了各个特异性抗体的蛋白质印迹法，检测作为核受体型转录因子的PPAR-γ、作为内标蛋白的肌动蛋白(actin)、及脂联素。此外，对于该检测，使用近红外荧光成像仪(“OdysseyFc”、LI-COR社)，比较各个蛋白质的相对的表达量。结果表示在图1中。如图1所示，在以0.1w/v％的浓度在培养基中添加有L-岩藻糖的实验区2、4中，与未添加岩藻糖的实验区1、3相比，在0.1w/v％及0.45w/v％这两个葡萄糖浓度区中，可见有脂联素的表达量降低的趋势。此时，调查作为调节脂联素的生成的核受体型转录因子的PPAR-γ的表达量的结果，在以0.1w/v％的浓度在培养基中添加有D-葡萄糖的同时以0.1w/v％的浓度在培养基中添加有L-岩藻糖的实验区2中，与以0.1w/v％的浓度在培养基中添加有D-葡萄糖的实验区1相比，几乎未见PPAR-γ的表达量变化。另一方面，在以0.45w/v％的浓度在培养基中添加有D-葡萄糖的同时以0.1w/v％的浓度在培养基中添加有L-岩藻糖的实验区4中，与以0.45w/v％的浓度在培养基中添加有D-葡萄糖的实验区3相比，可见PPAR-γ的表达量有一些降低。＜实验例2＞在与实验例1同样的实验区取细胞的培养基上清液，在各实验区将等量的样品供给到非还原SDS-PAGE，利用使用了相对于脂联素的特异性抗体的蛋白质印迹法，检测在分子量约30kDa的位置出现的单体、约100kDa的位置出现的三聚体、约200kDa的位置出现的六聚体、以及在其以上的分子量的位置出现的多聚体的脂联素。此外，对于该检测，使用近红外荧光成像仪(“OdysseyFc”、LI-COR社)，比较各个多聚体形成的状态。结果表示在图2中。如图2所示，在以0.1w/v％的浓度在培养基中添加有L-岩藻糖的实验区2、4中，与未添加岩藻糖的实验区1、3相比，在0.1w/v％及0.45w/v％这两个葡萄糖浓度区中，可明确看出单体、三聚体及六聚体减少，多聚体增加。该趋势在低葡萄糖浓度区(0.1w/v％)中更显著。根据以上的实验例1、2的结果，可以明确看出岩藻糖具有促进脂肪细胞分泌的脂联素的多聚体形成的作用效果。因此，认为本发明对于抑制伴随着脂联素的单体、三聚体及六聚体的食欲增进的弊病、及由脂联素的多聚体带来的有效的作用效果的表达有用。当前第1页1 2 3