两个抗病毒化合物的联用制剂的制作方法

文档序号:14722846发布日期:2018-06-17 23:27阅读:332来源:国知局
相关申请的交叉引用本申请在35U.S.C.§119(e)下要求2013年1月31日提交的美国临时申请号61/759,320、2013年3月4日提交的美国临时申请号61/772,292、2013年5月30日提交的美国临时申请号61/828,899、2013年8月27日提交的美国临时申请号61/870,729、2013年10月30日提交的美国临时申请号61/897,793和2013年11月21日提交的美国临时申请号61/907,332的权益。将这些临时申请的全部内容通过引用合并入本文中。
背景技术
:丙肝被认为是肝的慢性病毒性疾病,其特征是肝疾病。尽管已广泛使用以肝为靶的药物,它们也具有疗效,但毒性和其他副作用限制了这些药物的使用。丙肝病毒(HCV)抑制剂可用于限制HCV感染的建立和发展,以及HCV的诊断分析。Ledipasvir是非结构蛋白5A(NS5A)的选择性抑制剂,此前已有介绍(参见,例如WO2010/132601)。Ledipasvir的化学名是(1-{3-[6-(9,9-二氟-70{2-[5-(2-甲氧羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-5-氮杂-螺[2.4]庚-6-基]-3H-咪唑-4-基}-9H-芴-2-基)-1H-苯并咪唑-2-基]-2-氮杂-双环[2.2.1]庚烷-2-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯。Sofosbuvir(SOF)是非结构蛋白5B(NS5B)的选择性抑制剂(参见,例如WO2010/132601和美国专利申请7,964,580)。Sofosbuvir的化学名是(S)-2-(((S)-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。技术实现要素:本发明在一些实施方案中提供了一种含有ledipasvir和sofosbuvir的药学组合物,其中ledipasvir基本上为非晶体形式,sofosbuvir基本上为晶体形式。Ledipasvir的化学名为(1-{3-[6-(9,9-二氟-70{2-[5-(2-甲氧羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-5-氮杂-螺[2.4]庚-6-基]-3H-咪唑-4-基}-9H-芴-2-基)-1H-苯并咪唑-2-基]-2-氮杂-双环[2.2.1]庚烷-2-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯,化学式如下:Sofosbuvir(SOF)的化学名为(S)-2-(((S)-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯,化学式如下:在一些实施方案中,提供了一种药学组合物,包含:a)有效量的ledipasvir,其中ledipasvir基本上为非晶体;和b)有效量的sofosbuvir,其中sofosbuvir基本上为晶体。此外,本发明的实施方案涉及药物剂型和片剂。本发明还提供了使用该组合物治疗丙肝的方法。附图简述图1是包含药物:聚合物比例为1:1的共聚维酮的ledipasvir固体分散剂的XRPD图。根据XRPD所示,所述固体分散物是非晶体状态。图2是包含药物:聚合物比例为1:1的共聚维酮的ledipasvir固体分散剂的调整差示扫描量热(DSC)曲线。所述固体分散物的玻璃化转变温度大约为140℃。图3显示了包含药物:聚合物比例为1:1的共聚维酮的ledipasvir固体分散剂通过固态核磁共振(SS-NMR)得到的固态表征。图4是包含药物:聚合物比例为1:1的共聚维酮的ledipasvir固体分散物的傅里叶变换拉曼光谱图。图5显示了实施例7中描述的sofosbuvir(400mg)/ledipasvir(90mg)组合物中sofosbuvir的溶出度。图6显示了实施例3中描述的sofosbuvir(400mg)/ledipasvir(90mg)组合物中ledipasvir的溶出度。图7A-D显示了在使用sofosbuvir(SOF)和病毒唑(RBV)治疗初治(treatmentnaive)(图7A)或无反应(nullresponder)(图7B)患者以及使用sofosbuvir(SOF)、ledipasvir和病毒唑(RBV)治疗初治(图7C)或无反应(图7D)患者的12周治疗期间和治疗后24周期间的HCVRNA水平。在实施例5中进一步描述数据和试验方法。图8A-B列出了图表来显示所有三种制剂具有相当的溶出表现,与单药物对照的溶出表现相似。实施例7中有更为全面的描述。图9显示了ledipasvir在室温(RT)下的pH-溶解度曲线。该曲线是使用方程ST=S0[(1+10(pKa1-pH)+10(pKa1+pKa2-2·pH))]和0.04μg/mL的固有溶解度(S0)和弱碱性pKa1和pKa2值5.0与4.0进行的非线性最小二乘回归拟合。实施例8中有更为全面的描述。图10显示了使用sofosbuvir(SOF)和ledipasvir固定剂量组合物在病毒唑(RBV)存在或不存在下治疗初治(无肝硬化)和无反应(50%肝硬化)患者8和12周的研究设计。在实施例9中描述数据和试验方案。图11显示了使用sofosbuvir(SOF)和ledipasvir固定剂量组合物在病毒唑(RBV)存在或不存在下治疗初治(非肝硬化)和无反应者(50%肝硬化)患者8和12周的结果。在实施例9中进一步描述数据和试验方案。具体实施方式1.定义如本说明书所用的以下字词和短语通常具有以下规定的含义,除非其使用的文义另有所指。如本文所用的术语“大约”在定量检测的上下文是指所示量±10%,或者±5%,或±1%。例如,“大约2:8”根据±10%范围是指1.8-2.2:7.2-8.8。术语“非晶形”是指物质在分子水平上缺乏长程有序性,并且根据温度可显示固体或液体的物理性质的状态。通常来说这种物质不会给出独特的X射线衍射图案,并且即使是显示固体性质,也会更正式地描述为液体。在加热时,会出现固体性质至液体性质的改变,主要特征是状态的改变,通常为二级改变(玻璃化转变)。术语“晶体”是指物质在分子水平上具有规律有序的内部结构的固相,具有独特的X射线衍射图案和特定峰。该物质在加热充分时也将显示液体的性质,但固体至液体改变的特征是相变,通常为一级变化(熔点)。如本文所用的术语“基本上非晶形”是指组合物中的化合物超过70%;或超过75%;或超过80%;或超过85%;或超过90%;或超过95%;或超过99%是非晶体形式。“基本上非晶形”还可指具有不超过大约20%结晶度,或不超过大约10%结晶度,或不超过大约5%结晶度,或不超过大约2%结晶度的物质。如本文所用的术语“基本上晶体”是指组合物中的化合物超过70%;或超过75%;或超过80%;或超过85%;或超过90%;或超过95%;或超过99%是晶体形式。“基本上晶体”还可指具有不超过大约20%,或不超过大约10%,或不超过大约5%,或不超过大约2%非晶体形式的物质。术语“聚合物”是指由通过聚合方法形成的由重复结构单位组成的化学化合物或化合物混合物。本发明中可用的适合聚合物得到了全面描述。如本文所用的术语“聚合物基质”是指含有一种或多种聚合物的组合物,其中活性药物分散或包含在该基质中。术语“固体分散物”是指通过多种方法制成的一种或多种活性药物在一种聚合物基质中的固态分散物,所用方法包括喷雾干燥、熔化(融合)、溶剂或熔化-溶剂方法。如本文所用的术语“非晶体固体分散物”是指含有一种非晶体活性药物和一种聚合物的稳定固体分散物。对于“非晶体活性药物”,它是指非晶体固体分散物含有基本上为非晶体固态形式的活性药物。在某些方面,如图1的XRPD所示,固体分散物是非晶体状态,该固体分散物的玻璃化转变温度为大约140℃(参见图2)。术语“药学上可接受”表示该物质不具有将使一名相当谨慎的医生因考虑到待治疗的疾病或病症及各自的给药途径而避免将该物质给药于患者的性质。例如,通常需要材料是基本无菌的,如用于注射剂时。术语“药学上可接受的聚合物”是指不具有将使一名相当谨慎的医生因考虑到待治疗的疾病或病症及各自的给药途径而避免将该物质给药于患者的性质。术语“载体”是指一种与化合物一起给药而没有限制的助流剂、稀释剂、佐剂、辅料或赋形剂等等。本文以及E.W.Martin的“雷明登氏药学全书”中描述了载体的实例。术语“稀释剂”是指用于在运输前稀释目的化合物的化学化合物。稀释剂还可用于稳定化合物。稀释剂的非限制性实例包括淀粉、糖类、二糖、蔗糖、乳糖、多糖、纤维素、纤维素醚、羟丙基纤维素、糖醇、木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、微晶纤维素、碳酸钙或碳酸钠、乳糖、一水乳糖、磷酸氢钙、纤维素、可压缩糖、二碱式磷酸钙脱水物、甘露醇、微晶纤维素和磷酸三钙。术语“粘合剂”在本文中使用时是指任何药学上可接受的薄膜,其可用于将载体中的活性和惰性组分粘合在一起以共同维持结合和分离的部分。粘合剂的非限制性实例包括羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚维酮、共聚维酮和乙基纤维素。术语“崩解剂”是指当添加至固体制剂中时可促进其在给药后的分解或崩解并允许活性成分尽可能有效释放从而快速溶出的物质。崩解剂的非限制性实例包括玉米淀粉、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、微晶纤维素、改性玉米淀粉、羧甲基淀粉钠、聚维酮、预胶凝淀粉和海藻酸。术语“润滑剂”是指加入至粉状混合物中以避免压缩的粉末物质在压片或封装过程中与设备粘连的辅料。它有助于片剂自模具中喷出,并可提高粉末的流动性。润滑剂的非限制性实例包括硬脂酸镁、硬脂酸、二氧化硅、脂肪、硬脂酸钙、聚乙二醇、硬脂酰醇富马酸钠或滑石;和增溶剂例如脂肪酸包括月桂酸、油酸和C8/C10脂肪酸。术语“薄膜包衣”是指基片(例如片剂)表面上的一层薄的均匀的膜。薄膜包衣对于保护活性成分不受光降解格外有用。薄膜包衣的非限制性实例包括聚乙烯醇基、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇4000和邻苯二甲酸乙酸纤维素薄膜包衣。如本文所用的术语“助流剂”是指用于片剂和胶囊剂以改善压片期间的流动性并产生抗结块作用的物质。助流剂的非限制性实例包括胶体二氧化硅、滑石、雾化二氧化硅、淀粉、淀粉衍生物和膨胀土。术语“有效量”是指在如下定义的向需要治疗的哺乳动物给药时足以有效治疗的量。治疗有效量根据待治疗的患者、患者体重和年龄、疾病的严重程度、给药方式等等而有所改变,本领域普通技术人员即可很容易地确定治疗有效量。术语“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”根据涉及的疾病或病症包括避免疾病或病症发生、抑制疾病或病症、消除疾病或病症和/或缓解疾病或病症的一种或多种症状。术语“持续病毒性应答”是指停止治疗后的一段特定时间内在病人样品(即血样)中没有可检出的病毒RNA(或RNA低于检测限)。例如,4周的SVR表示在停止HCV治疗后4周时病人体内未检出RNA或RNA低于检测限。如本文所用的术语“%w/w”是指基于含有某组分的组合物的总重量的该组分的重量。例如,如果组分A在100mg组合物中的量为50%w/w,则组分A的量为50mg。2.药学组合物药学组合物包含有效量的ledipasvir和有效量的sofosbuvir的组合,其中ledipasvir基本上为非晶体,sofosbuvir基本上为晶体。试验性实施例证明这种联用的组合物展现出意想不到的性质。Sofosbuvir和ledipasvir此前均已被证明时有效的抗HCV药物。当以传统制剂形式单独给药时,ledipasvir显示出负食物作用,证据是当将在高脂肪饮食下给药与禁食状态下给药进行比较时,药物暴露大约有2倍降低(参见,例如表10和表11,实施例3)。当ledipasvir以固体分散剂且与sofosbuvir联合给药时,则没有出现这种负食物效应(表12,实施例3)。在联用的组合物中,ledipasvir基本上是非晶体形式。与晶体药物相比,非晶体药物预计是不稳定的,并且具有非线性的溶解度和暴露曲线。但本文所列的数据显示联用组合物中的ledipasvir在多种条件下,无论是短期还是长期,均是稳定的,并且维持了始终如一的高溶解度和暴露曲线(实施例6)。此外,根据传统观点,并不建议将非晶体药物和晶体药物共同制备,因为晶体可作为种子诱导非晶体药物结晶,从而导致非晶体药物的不稳定。但现有数据表明,与同一层或整合为单独层的sofosbuvir无论是共制粒还是共混合,ledipasvir均保持稳定且不会在组合物中形成晶体(实施例6)。还发现在联用组合物的片剂形成时,即sofosbuvir和ledipasvir共制粒或共混合时,没有发生药物-药物相互作用(实施例7)。A.LedipasvirLedipasvir此前已有描述(参见例如WO2010/132601),可通过其中描述的方法进行制备。在一个实施方案中,所述药学组合物包含制为分散在聚合物基质中的固体分散物的ledipasvir,其中聚合物基质是由药学上可接受的聚合物形成的。该固体分散物的起始原料可以是多种形式的ledipasvir,包括晶体形式、非晶体形式、盐、溶剂化物和游离基。例如,可使用ledipasvir的丙酮溶剂化物、D-酒石酸盐、无水晶体游离基、非晶体游离基、溶剂化物或去溶剂化物。Ledipasvir的溶剂化物包括例如美国专利2013/0324740(通过引用合并入本文中)中描述的那些,例如单丙酮溶剂化物、二丙酮溶剂化物、乙基丙酮溶剂化物、乙酸异丙酯溶剂化物、乙酸甲酯溶剂化物、甲酸乙酯溶剂化物、乙腈溶剂化物、四氢呋喃溶剂化物、甲基乙基酮溶剂化物、四氢呋喃溶剂化物、甲基乙基酮溶剂化物和甲基叔丁基醚溶剂化物。预计有用的特殊起始原料是单丙酮溶剂化物、二丙酮溶剂化物、无水晶体游离基、D-酒石酸盐、无水晶体游离基和非晶体游离基。这些形式在美国公开号2013/0324496中进行了特征鉴别和描述。在聚合物中分散后,所述固体分散物是非晶体形式的。图1-4描述了含有ledipasvir的非晶体固体分散物的特征。如图1中的XRPD所示,该固体分散物处于非晶体状态,该固体分散物的玻璃化转变温度为大约140℃。本领域众所周知多种技术可制备固体分散物,包括但不限于熔融挤出、喷雾干燥、冻干和溶液蒸发。熔融挤出是将一个化合物植入热塑性载体的过程。在升高的温度和压力下处理混合物,在分子水平下将化合物分散至基质中以形成固体溶液。挤出材料可被进一步处理为多种剂型,包括胶囊、片剂和转化粘液质系统。对于溶液蒸发方法,固体分散物可通过在适合的液体溶剂中溶解化合物,然后将该溶液直接合并至聚合物的熔化物中,然后蒸发至残留一层透明、无溶剂的薄膜来制备。所述薄膜进一步干燥至恒重。对于冻干技术,化合物和载体可于一个常用溶剂中共同溶解,冷冻并升华以获得冻干的分子分散物。对于干燥固体分散物的喷雾,固体分散物可通过a)在溶剂中混合所述化合物和聚合物以得到进料溶液;和b)喷雾干燥进料溶液以得到固体分散物来制备。相较于其他制剂方法,例如湿法制粒和干法制粒的制剂,喷雾干燥的ledipasvir固体分散物可得到改善的体内和体外表现以及生成能力/扩展能力。Ledipasvir还可以提供作为游离碱、D-酒石酸盐、晶体状的丙酮溶剂化物,或如本文中所述的其他溶剂化物。固体分散物的聚合物选择取决于ledipasvir在溶液中的稳定性和物理特性。羟丙甲纤维素和共聚维酮固体分散物均显示了充分的稳定性和物理特性。因此,在一个实施方案中,固体分散物所用的聚合物选自羟丙甲纤维素和共聚维酮。此外,当以2:1API:聚合物比例制备时,共聚维酮基分散物的生物利用度的增加高于同等的羟丙甲纤维素基制剂(分别为F=30%和22%)。共聚维酮基制剂的生物利用度随着聚合物组分增加至1:1的比例而进一步增高,在法莫替丁预处理的犬中生物利用度达到了35%。在一个实施方案中,ledipasvir固体分散物所用的聚合物是亲水的。亲水性聚合物的非限制性实例包括多糖、多肽、纤维素衍生物例如甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、乙基纤维素、醋酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸乙酸纤维素、羟丙甲纤维素、聚维酮、共聚维酮、羟丙甲纤维素、硝酸纤维素聚氧化乙烯、聚乙烯醇和异丁烯酸共聚物。在另一个实施方案中,所述聚合物是非离子型的。非离子型聚合物在溶解性筛选试验中表现出优势。非离子型聚合物的非限制性实例包括羟丙甲纤维素、共聚维酮、聚维酮、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、乙基纤维素、硝酸纤维素、聚氧化乙烯、聚乙烯醇、聚乙二醇和聚乙烯基己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇。在另一个实施方案中,所述聚合物是离子型的。离子型聚合物的实施例包括乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、乙酸邻苯二甲酸纤维素和异丁烯酸共聚物。在另一个实施方案中,所述聚合物选自由羟丙甲纤维素、共聚维酮和聚维酮组成的组。羟丙甲纤维素和共聚维酮固体分散物均显示了充分的稳定性和物理特性。当以2:1ledipasvir:聚合物比例喷雾干燥时,共聚维酮基分散物的生物利用度的增加高于同等的羟丙甲纤维素基制剂(分别为F=30%和22%)。因此,在一个特定的实施方案中,所述聚合物是共聚维酮。在某些实施方案中,ledipasvir与聚合物的重量比范围是大约5:1至大约1:5。在其他实施方案中,ledipasvir与聚合物的重量比范围是大约5:1至大约1:4,或大约5:1至大约1:3,或大约5:1至大约1:2,或大约2:1至大约1:2,或大约2:1至大约1:1。在一个特定的实施方案中,ledipasvir与聚合物的重量比是大约1:1。在另一个实施方案中,ledipasvir与聚合物的重量比是大约2:1。在其他实施方案中,ledipasvir与聚合物的重量比是大约5:1、1:4、1:3或1:2。在一些例子中,增加聚合物的组分至1:1比例可能导致生物利用度增加。例如,1:1比例的ledipasvir:共聚维酮导致法莫替丁预处理的犬中的生物利用度增加(F=35%)。药学组合物中可存在治疗有效量的含有ledipasvir的固体分散物。在一些实施方案中,药学组合物包含自大约1%至大约50%w/w固体分散物的ledipasvir。在其他实施方案中,组合物包含自大约5%至大约40%w/w,或自大约5%至大约35%w/w,或自大约5%至大约30%w/w,或自大约10%至大约30%w/w,或自大约10%至大约25%w/w,或自大约15%至大约20%w/w固体分散物的ledipasvir。在其他实施方案中,药学组合物包含大约1%w/w,大约5%w/w,大约10%w/w,大约20%w/w,大约25%w/w,大约30%w/w,大约35%w/w,大约40%w/w固体分散物的ledipasvir。在一个特定的实施方案中,药学组合物包含大约18%w/w固体分散物的ledipasvir。药学组合物中可存在治疗有效量的ledipasvir。在一些实施方案中,药学组合物包含自大约1%至大约50%w/w的ledipasvir。在其他实施方案中,组合物包含自大约1%至大约40%w/w,或自大约1%至大约30%w/w,或自大约1%至大约20%w/w,或自大约5%至大约15%w/w,或自大约7%至大约12%w/w的ledipasvir。在其他实施方案中,药学组合物包含大约1%w/w,大约3%w/w,大约5%w/w,大约7%w/w,大约11%w/w,大约13%w/w,大约15%w/w,大约17%w/w,大约20%w/w,大约23%w/w,大约25%w/w,或大约28%w/w,大约30%w/w的ledipasvir。在一个特定实施方案中,药学组合物包含大约9%w/w的ledipasvir。如上所述,将ledipasvir与聚合物混合后,混合物可溶解于一个溶剂中。本领域技术人员可根据药物和/或聚合物的性质例如溶解性、玻璃化转变温度、粘性和分子量来选择适当的溶剂。可接受的溶剂包括但不限于水、丙酮、乙酸甲酯、乙酸乙酯、含氯溶剂、乙醇、二氯甲烷和甲醇。在一个实施方案中,所述溶剂选自由乙醇、二氯甲烷和甲醇组成的组。在另一个实施方案中,所述溶剂是乙醇或甲醇。在一个特定实施方案中,所述溶剂是乙醇。化合物和聚合物的混合物在溶剂中溶解,然后该混合物可能进行喷雾干燥。喷雾干燥是一个众所周知的方法,其中液体原料分散为液滴进入干燥室,伴有加热的处理气流以帮助去除溶剂并生成粉末产品。适合的喷雾干燥参数在本领域内是公知的,本领域技术人员掌握有如何选择合适的喷雾干燥参数的知识。目标进料浓度通常为大约10%至大约50%,目标是大约20%,粘度为大约15cP至大约300cP。喷雾干燥装置的入口温度通常为大约50-190℃,而出口温度为大约30-90℃。两个液体喷嘴和液压喷嘴可用于喷雾干燥ledipasvir。两个液体喷嘴的气体流速可以是大约1-10kg/hr,液压喷嘴的流速可以是大约15-300kg/hr,小室的气体流速可以是大约25-2500kg/hr。喷雾干燥的材料通常粒径(D90)在80μm之下。在一些例子中,如果需要进一步降低粒径,可以使用研磨步骤。喷雾干燥法和其他形成非晶体分散物的技术的更多描述参见美国专利号6,763,607和美国专利公开号2006-0189633,将每一篇的完整内容通过引用合并入本文中。在大范围的喷雾干燥出口温度(30-90℃)下从醇喷雾干燥可得到高收率(88、90、92、95、97、98、99%),且在喷雾干燥室中没有原料蓄积,而自DCM喷雾干燥所获得的收率为60%、78%和44%。此外,ledipasvir在乙醇进料溶液中具有良好的化学稳定性。B.SofosbuvirSofosbuvir此前已在美国专利7,964,580和美国专利公开号:2010/0016251、2010/0298257、2011/0251152和2012/0107278中进行了描述。本文描述的药学组合物中提供的sofosbuvir基本上为晶体。制备晶体形式sofosbuvir的实例参见美国专利公开号:2010/0298257和2100/0251152,将这两篇通过引用合并入本文中。晶体形式即形式1-6的sofosbuvir在美国专利公开号:2010/0298257和2100/0251152中进行了描述,将这两篇通过引用合并入本文中。形式1-6的sofosbuvir具有以下根据该专利中公开的XRPD方法测得的特征的X射线粉末衍射(XRPD)图案2θ值:(1)2θ-反射(°±0.2θ)位于大约:7.5、9.6和18.3(形式1);(2)2θ-反射(°±0.2θ)位于大约:5.0,7.3和18.1(形式1);(3)2θ-反射(°±0.2θ)位于大约:6.9、24.7和25.1(形式2);(4)2θ-反射(°±0.2θ)位于大约:19.7、20.6和24.6(形式3);(5)2θ-反射(°±0.2θ)位于大约:5.0、6.8和24.9(形式4);(6)2θ-反射(°±0.2θ)位于大约:5.2、6.6和19.1(形式5);和(7)2θ-反射(°±0.2θ)位于大约:6.1、20.1和20.8(形式6)。形式6如上述专利所述可以参考形式2,例如由食品与药物管理局。根据在美国专利公开号:2010/0298257和2100/0251152中公开的方法测得的以下特征性XRDP图案2θ值交替地表征了的形式1和形式6:(1)2θ-反射(°)位于大约:5.0和7.3(形式1);和(2)2θ-反射(°)位于大约:6.1和12.7(形式6)。在一个实施方案中,sofosbuvir晶体具有XRPD2θ-反射(°±0.2θ),所述XRPD2θ-反射(°±0.2θ)在约:(1)7.5、9.6和18.3;(形式1A)(2)5.0、7.3和18.1;(形式1B)(3)6.9、24.7和25.1;(形式2)(4)19.7、20.6和24.6;(形式3)(5)5.0、6.8和24.9;(形式4)(6)5.2、6.6和19.1;(形式5)或(7)6.1、20.1和20.8;(形式6)。在某些实施方案中,sofosbuvir晶体具有XRPD2θ-反射(°±0.2θ),所述XRPD2θ-反射(°±0.2θ)在约:(1)5.2、7.5、9.6、16.7、18.3和22.2(形式1);(2)5.0、7.3、9.4和18.1(形式1);(3)4.9、6.9、9.8、19.8、20.6、24.7、25.1和26.1(形式2);(4)6.9、9.8、19.7、20.6和24.6(形式3);(5)5.0、6.8、19.9、20.6、20.9和24.9(形式4);(6)5.2、6.6、7.1、15.7、19.1和25.0(形式5);或(7)6.1、8.2、10.4、12.7、17.2、17.7、18.0、18.8、19.4、19.8、20.1、20.8、21.8和23.3(形式6)。在另一个实施方案中,sofosbuvir晶体在大约:6.1、8.2、10.4、12.7、17.2、17.7、18.0、18.8、19.4、19.8、20.1、20.8、21.8和23.3具有XRPD2θ-反射(°±0.2θ)。在另一个实施方案中,sofosbuvir晶体在大约:6.1和12.7具有XRPD2θ-反射(°±0.2θ)。药学组合物中可存在治疗有效量的sofosbuvir。在一些实施方案中,所述药学组合物中包含自大约10%至大约70%w/w的sofosbuvir。在其他实施方案中,所述组合物包含自大约15%至大约65%w/w,或自大约20%至大约60%w/w,或自大约25%至大约55%w/w,或自大约30%至大约50%w/w,或自大约35%至大约45%w/w的sofosbuvir。在其他实施方案中,所述药学组合物包含大约10%w/w,大约15%w/w,大约20%w/w,大约25%w/w,大约30%w/w,大约35%w/w,大约45%w/w,大约50%w/w,大约55%w/w,大约60%w/w,大约65%w/w,或大约70%w/w,或大约75%w/w的sofosbuvir。在一个特定实施方案中,所述药学组合物包含大约40%w/w的sofosbuvir。C.辅料根据本发明提供的药学组合物通常为口服给药。因此本发明提供了包含固体分散物的药学组合物,其中固体分散物含有如本文所述的ledipasvir和一种或多种药学上可接受的辅料或载体,包括但不限于惰性固体稀释剂和填充剂,稀释剂包括无菌水溶液和多种有机溶剂、促渗剂、增溶剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、助流剂、佐剂及它们的组合。这种组合物以制药领域众所周知的方法进行制备(参见例如雷明登氏药学全书,MacePublishingCo.,Philadelphia,PA,第17版(1985);和现代制药学,MarcelDekker,Inc.第3版(G.S.Banker&C.T.Rhodes,Eds.))。药学组合物可以单剂量或多剂量口服给药。给药可通过胶囊、片剂等等进行。在一个实施方案中,ledipasvir为片剂形式。在另一个实施方案中,该片剂是压制片。在制备包括本文所述的固体的药学组合物时,活性成分通常通过辅料稀释和/或封在载体内,载体可以是胶囊、片剂、小袋、纸或其他容器的形式。当辅料作为稀释剂时,它可以是固体、半固体或液体材料的形式(如上),将其作为活性成分的溶媒、载体或介质。药学组合物可以制成速释或缓释的。“缓释制剂”是设计为在体内于较长的一段时间内缓慢释放治疗药物的一种制剂,而“速释制剂”是设计为在体内于较短的一段时间内快速释放治疗药物的一种制剂。在一些情况下速释制剂可进行包衣,因此治疗药物仅在达到体内的预计靶点(例如胃)时释放。在一个特定的实施方案中,药学组合物制成了速释制剂。药学组合物还可包含药学辅料例如稀释剂、粘合剂、填充剂、助流剂、崩解剂、润滑剂、增溶剂及它们的组合。适合辅料的一些实例在本文中进行了描述。当药学组合物制成片剂时,该片剂可不包衣,也可通过已知技术包括微型包囊技术进行包衣以延迟在胃肠道的崩解和吸收,从而提供在较长一段时间内的缓释作用。例如可以使用时间延迟材料如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯单独或与蜡合用。在一个实施方案中,药学组合物包含选自由磷酸氢钙、纤维素、可压缩糖、二碱式磷酸钙脱水物、乳糖、乳糖一水合物、甘露醇、微晶纤维素、淀粉、三碱式磷酸钙及它们的组合组成的组的稀释剂。在另一个实施方案中,药学组合物包含乳糖一水合物,所述乳糖一水合物的量为自大约1%至大约50%w/w,或自大约1%至大约45%w/w,或自大约5%至大约40%w/w,或自大约5%至大约35%w/w,或自大约1%至大约25%w/w,或自大约10%至大约20%w/w。在特定的实施方案中,所述乳糖一水合物为大约5%w/w,大约10%w/w,大约15%w/w,大约20%w/w,大约25%w/w,大约30%w/w,大约35%w/w,大约40%w/w,大约45%w/w,或大约50%w/w。在另一个特定的实施方案中,所述乳糖一水合物的量为大约16.5%w/w。再在另一实施方案中,药学组合物包含微晶纤维素,所述微晶纤维素的量为自大约1%至大约40%w/w,或自大约1%至大约35%w/w,或自大约1%至大约25%w/w,或自大约5%至大约25%w/w,或自大约10%至大约25%w/w,或自大约15%至大约20%w/w。在特定的实施方案中,所述微晶纤维素的量为大约5%,或大约10%,或大约15%,或大约20%,或大约25%,或大约30%,或大约35%,或大约40%w/w。在另一个特定的实施方案中,所述微晶纤维素的量为18%w/w。在其他实施方案中,药学组合物包含选自由交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、微晶纤维素、改性玉米淀粉、聚维酮、预胶凝淀粉、羧甲基淀粉钠及它们的组合组成的组的崩解剂。在某些实施方案中,药学组合物包含交联羧甲基纤维素钠,所述交联羧甲基纤维素钠的量为自大约1%至大约20%w/w,或自大约1%至大约15%w/w,或自大约1%至大约10%w/w,或自大约1%至大约8%w/w,或自大约2%至大约8%w/w。在特定实施方案中,所述交联羧甲基纤维素钠的量为大约1%,或大约3%,或大约6%,或大约8%,或大约10%,或大约13%,或大约15%w/w。在另一个特定实施方案中,所述交联羧甲基纤维素钠的量为大约5%w/w。在其他实施方案中,药学组合物包含选自由胶体二氧化硅、滑石、淀粉、淀粉衍生物及它们的组合组成的组的助流剂。在其他实施方案中,药学组合物包含胶体二氧化硅,所述胶体二氧化硅的量为自大约0.1%至大约5%w/w,或自大约0.1%至大约4.5%w/w,或自大约0.1%至大约4%w/w,或自大约0.5%至大约5.0%w/w,或自大约0.5%至大约3%w/w,或自大约0.5%至大约2%w/w,或自大约0.5%至大约1.5%w/w。在特定实施方案中,所述胶体二氧化硅的量为大约0.1%w/w,0.5%w/w,0.75%w/w,1.25%w/w,1.5%w/w,或2%w/w。在另一个特定实施方案中,所述胶体二氧化硅的量为大约1%w/w。在其他实施方案中,药学组合物包含选自由硬脂酸钙、硬脂酸镁、聚乙烯醇、硬脂酰醇富马酸钠、硬脂酸、滑石及它们的组合组成的组的润滑剂。在其他实施方案中,药学组合物包含硬脂酸镁,所述硬脂酸镁的量为自大约0.1%至大约3%w/w,或自大约0.1%至大约2.5%w/w,或自大约0.5%至大约3%w/w,或自大约0.5%至大约2.5%w/w,或自大约0.5%至大约2%w/w,或自大约1%至大约3%w/w,或自大约1%至大约2%w/w。在特定实施方案中,所述硬脂酸镁的量为大约0.1%,或大约0.5%,或大约1%,或大约2%,或大约2.5%,或大约3%w/w。在另一个特定实施方案中,所述硬脂酸镁的量为大约1.5%w/w。在一个实施方案中,药学组合物包含a)大约30%至大约50%w/w的sofosbuvir和b)大约5%至大约35%w/w的含有ledipasvir的固体分散物。在一个相关实施方案中,所述组合物包含a)大约40%w/w的sofosbuvir和b)大约18%w/w的含有ledipasvir的固体分散物。再在另一个相关的实施方案中,所述组合物还包含a)大约5%至大约25%w/w乳糖一水合物,b)大约5%至大约25%w/w微晶纤维素,c)大约1%至大约10%w/w交联羧甲基纤维素,d)大约0.5%至大约3%w/w胶体二氧化硅,和e)大约0.1%至大约3%w/w硬脂酸镁。在另一个实施方案中,药学组合物包含a)大约40%w/wsofosbuvir,b)大约18%w/w含有ledipasvir的固体分散物,c)大约16.5%w/w乳糖一水合物,d)大约18%w/w微晶纤维素,e)大约5%w/w交联羧甲基纤维素,f)大约1%w/w胶体二氧化硅,和g)大约1.5%w/w硬脂酸镁。3.药物剂型本发明提供了片剂、丸剂等等,包含本文描述的药学组合物或剂型。本发明的片剂或丸剂可进行包衣以提供具有缓释作用或是不受胃的酸性条件影响的剂型。片剂还可如前所述制成速释制剂。在某些实施方案中,片剂包含薄膜包衣。薄膜包衣可用于限制光降解。可通过市售制剂的常规筛选选择适合的薄膜包衣。在一个实施方案中,薄膜包衣是聚乙烯醇基包衣。片剂可制成单层或双层片剂。一般来说,单层片剂包含与均匀的单层共同混合的活性成分(即ledipasvir和sofosbuvir)。为了制备单层片剂,示例方法包括但不限于共混合(或双制粒)和共干燥制粒。共混合制粒是由每个活性成分与辅料单独干法制粒以及将两次制粒混合在一起组成的多步骤工艺。共干燥制粒由两个活性成分和辅料一起干法制粒组成。双层片剂包含在不同层的活性成分(即ledipasvir和sofosbuvir),可通过制造含有辅料和一个活性成分(即ledipasvir)的混合物并制成一个含有第二个活性成分(即sofosbuvir)和辅料的单独混合物来进行制备。然后预压缩一个混合物,然后可将第二个混合物加入至第一个预压缩的混合物的上部。所获片剂包含单独两层,每层含有一个不同的活性成分。在一个实施方案中,片剂包含a)大约30%至大约50%w/wsofosbuvir和b)大约10%至大约40%w/w含有ledipasvir的固体分散物。在一个相关实施方案中,片剂包含a)大约40%w/wsofosbuvir和b)大约18%w/w含有ledipasvir的固体分散物。在另一个实施方案中,片剂包含a)大约300mg至大约500mgsofosbuvir和b)大约50mg至130mgledipasvir。在另一个实施方案中,片剂包含a)大约400mgsofosbuvir和b)大约90mgledipasvir。在一个相关实施方案中,片剂还包含a)大约5%至大约25%w/w乳糖一水合物,b)大约5%至大约25%w/w微晶纤维素,c)大约1%至大约10%w/w交联羧甲基纤维素钠,d)大约0.5%至大约3%w/w胶体二氧化硅,和e)大约0.1%至大约3%w/w硬脂酸镁。在一些实施方案中,本文所述的药学组合物制成单位剂量或药物剂型。术语“单位剂型”或“药物剂型”是指适合作为单一剂量用于人类患者和其他哺乳动物的物理分散单位,每个单位含有经计算可产生预期治疗效果的预定数量的活性物质与适合的药学辅料(例如片剂或胶囊)。化合物通常以药学有效量进行给药。在一些实施方案中,每个剂量单位含有自3mg至2gledipasvir。在其他实施方案中,药物剂型含有自大约3mg至大约360mg,或大约10mg至大约200mg,或大约10mg至大约50mg,或大约20mg至大约40mg,或大约25mg至大约35mg,或大约40mg至大约140mg,或大约50mg至大约130mg,或大约60mg至大约120mg,或大约70mg至大约110mg,或大约80mg至大约100mg。在特定实施方案中,药物剂型含有大约40mg,或大约45mg,或大约50mg,或大约55mg,或大约60mg,或大约70mg,或大约80mg,或大约100mg,或大约120mg,或大约140mg,或大约160mg,或大约180mg,或大约200mg,或大约220mgledipasvir。在另一个特定实施方案中,药物剂型含有大约90mgledipasvir。再在另一个特定实施方案中,药物剂型含有大约30mgledipasvir。在其他实施方案中,药物剂型含有自大约1mg至大约3gsofosbuvir。在其他实施方案中,药物剂型含有自大约1mg至大约800mg,或大约100mg至大约700mg,或大约200mg至大约600mg,或大约300mg至大约500mg,或大约350mg至大约450mgsofosbuvir。在特定实施方案中,药物剂型含有大约50mg,或大约100mg,或大约150mg,或大约200mg,或大约250mg,或大约300mg,或大约350mg,或大约450mg,或大约500mg,或大约550mg,或大约600mg,或大约650mg,或大约700mg,或大约750mg,或大约800sofosbuvir。在另一个特定实施方案中,药物剂型含有大约400mgsofosbuvir。但是应当理解ledipasvir和/或sofosbuvir实际给药的量通常由医生根据相应情况包括待治疗病症、所选给药途径、实际给药的化合物及其相对活性、个别病人的年龄、体重和应答、病人症状的严重程度等等来决定。在一个特定实施方案中,药物剂型含有大约400mgsofosbuvir和大约90mgledipasvir。在一个实施方案中,药学组合物或是药物剂型或片剂含有大约90mg制在固体分散物中的非晶体ledipasvir(其中聚合物:ledipasvir的比例为1:1)、大约400mg晶体sofosbuvir、含量为自大约5%至大约25%w/w的乳糖一水合物、含量为自大约5%至大约25%w/w的微晶纤维素、含量为自大约1%至大约10%w/w的交联羧甲基纤维素钠、含量为自大约0.5%至大约3%w/w的胶体二氧化硅和含量为自大约0.1%至大约3%w/w的硬脂酸镁。在一个实施方案中,所述聚合物是共聚维酮。在其他实施方案中,本文所述的药学组合物、药物剂型或片剂没有负面药物-药物相互作用。在一个相关实施方案中,药学组合物、药物剂型或片剂与酸抑制治疗没有负面药物-药物相互作用。在另一个实施方案中,本文所述的药学组合物、药物剂型或片剂不需考虑食物且考虑或不考虑病人是否在进行酸抑制治疗即可给药。4.使用方法本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂以每日剂量通过口服给药于患有丙肝病毒(HCV)感染的患者。在一个实施方案中,所述患者是人。此前ledipasvir已被证明在单独给药时具有负食物作用。出乎意料的是,ledipasvir和sofosbuvir的联合治疗并未显示负食物作用。因此,含有sofosbuvir和ledipasvir的药学组合物在给药时无需考虑食物。在一些实施方案中,联用组合物取得了降低的食物影响。在一些方面,所述组合物在饭后向病人给药时所达到的初次暴露,比不是在饭后向病人给药时的第二次暴露要低不超过25%,或不超过20%,15%或10%。所述暴露可被检测为Cmax、AUClast或AUCinf。在一些方面,给药在饭后的四、三、二或一小时内进行。在一个实施方案中,本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂可有效治疗基因型1HCV感染患者、基因型2HCV感染患者、基因型3HCV感染患者、基因型4HCV感染患者、基因型5HCV感染患者和/或基因型6HCV感染患者的一种或多种。在一个实施方案中,本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂可有效治疗基因型1HCV感染患者,包括基因型1a和/或基因型1b。在另一个实施方案中,本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂可有效治疗基因型2HCV感染患者,包括基因型2a、基因型2b、基因型2c和/或基因型2d。在另一个实施方案中,本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂可有效治疗基因型3HCV感染患者,包括基因型3a、基因型3b、基因型3c、基因型3d、基因型3e和/或基因型3f。在另一个实施方案中,本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂可有效治疗基因型4HCV感染患者,包括基因型4a、基因型4b、基因型4c、基因型4d、基因型4e、基因型4f、基因型4g、基因型4h、基因型4i和/或基因型4j。在另一个实施方案中,本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂可有效治疗基因型5HCV感染患者,包括基因型5a。在另一个实施方案中,本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂可有效治疗基因型6HCV感染患者,包括基因型6a。在一个实施方案中,所述组合物是泛基因型的,意思是它们对于所有基因型及其耐药突变体均有效。在一些实施方案中,本文所述的ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂即可单独给药,也可与一种或多种治疗HCV的治疗药物(例如HCVNS3蛋白酶抑制剂或HCVNS5B聚合酶抑制剂)联合给药,持续大约24周,大约16周或是大约12周或更短。在其他实施方案中,ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂即可单独给药,也可与一种或多种治疗HCV的治疗药物(例如HCVNS3蛋白酶抑制剂或HCVNS5B聚合酶抑制剂)联合给药,持续大约24周或更短,大约22周或更短,大约20周或更短,大约18周或更短,大约16周或更短,大约12周或更短,大约10周或更短,大约8周或更短,大约6周或更短,或是大约4周或更短。该固体分散物、药学组合物、药物剂型和片剂可以每日一次、每日两次、每两日一次、一周两次、一周三次、一周四次或一周五次给药。在其他实施方案中,在大约4周、6周、8周、12周或16周,或在大约20周,或在大约24周,或在大约4个月,或在大约5个月,或在大约6个月,或在大约1年,或在大约2年达到持续性病毒应答。在一个实施方案中,每日剂量是以片剂形式给药的90mgledipsvir和400mgsofosbuvir。在另一个实施方案中,每日剂量是含有a)大约30%至大约50%w/wsofosbuvir,b)大约10%至大约40%w/w含有ledipasvir的固体分散物,c)大约5%至大约25%w/w乳糖一水合物,d)大约5%至大约25%w/w微晶纤维素,e)大约1%至大约10%w/w交联羧甲基纤维素钠,f)大约0.5%至大约3%w/w胶体二氧化硅和g)大约0.1至大约3%w/w硬脂酸镁的片剂。在其他实施方案中,病人还患有肝硬化。再在另一个实施方案中,病人未患有肝硬化。5.联合治疗在本文描述的方法中,该方法还可包含另一种治疗HCV和其他病症例如HIV感染的治疗药物的使用。在一个实施方案中,适合的其他治疗药物的非限制性实例包括一种或多种干扰素、病毒唑或其类似物、HCVNS3蛋白酶抑制剂、α-葡萄糖苷酶1抑制剂、保肝药、HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制剂、HCVNS5B聚合酶的非核苷或抑制剂、HCVNS5A抑制剂、TLR-7激动剂、亲环蛋白抑制剂、HCVIRES抑制剂、药代动力学增强剂和其他治疗HCV的药物或治疗剂。更为具体来说,所述其他治疗药物可以选自由以下药物组成的组:1)干扰素,例如PEG化的rIFN-α2b(PEG-Intron)、PEG化的rIFN-α2a(Pegasys)、rIFN-α2b(Intron-A)、rIFN-α2a(Roferon-A)、干扰素α(MOR-22、OPC-18、Alfaferone、Alfanative、Multiferon、subalin)、复合α干扰素(Infergen)、干扰素α-n1(Wellferon)、干扰素α-n3(Alferon)、干扰素-β(Avonex、DL-8234)、干扰素-ω(ωDUROS、Biomed510)、albinterferonα-2b(Albuferon)、IFNα-2bXL、BLX-883(Locteron)、DA-3021、糖基化干扰素α-2b(AVI-005)、PEG-干复津(PEG-Infergen)、PEG化的干扰素λ-1(PEG化的IL-29)和beleronfon;2)病毒唑及其类似物,例如病毒唑(Rebetol、Copegus)和taribavirin(Viramidine);3)HCVNS3蛋白酶抑制剂,例如波普瑞韦(SCH-503034,SCH-7)、特拉普韦(VX-950)、TMC435350、BI-1335、BI-1230、MK-7009、VBY-376、VX-500、GS-9256、GS-9451、BMS-605339、PHX-1766、AS-101、YH-5258、YH5530、YH5531、ABT-450、ACH-1625、ITMN-191、MK5172、MK6325和MK2748。4)α-葡萄糖苷酶1抑制剂,例如西戈斯韦(MX-3253)、米格列醇和UT-231B。5)保肝药,例如emericasan(IDN-6556)、ME-3738、GS-9450(LB-84451)、silibilin和MitoQ;6)HCVNS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制剂,例如R1626、R7128(R4048)、IDX184、IDX-102、BCX-4678、valopicitabine(NM-283)、MK-0608和INX-189(现称BMS986094);7)HCVNS5B聚合酶的非核苷抑制剂,例如PF-868554、VCH-759、VCH-916、JTK-652、MK-3281、GS-9190、VBY-708、VCH-222、A848837、ANA-598、GL60667、GL59728、A-63890、A-48773、A-48547、BC-2329、VCH-796(nesbuvir)、GSK625433、BILN-1941、XTL-2125、ABT-072、ABT-333、GS-9669、PSI-7792和GS-9190;8)HCVNS5A抑制剂,例如AZD-2836(A-831)、BMS-790052、ACH-3102、ACH-2928、MK8325、MK4882、MK8742、PSI-461、IDX719、ABT-267和A-689;9)TLR-7激动剂,例如咪喹莫特、852A、GS-9524、ANA-773、ANA-975、AZD-8848(DSP-3025)和SM-360320;10)亲环蛋白抑制剂,例如DEBIO-025、SCY-635和NIM811;11)HCVIRES抑制剂,例如MCI-067;12)药代动力学增强剂,例如BAS-100、SPI-452、PF-4194477、TMC-41629、GS-9350、GS-9585和罗红霉素;和13)其他治疗HCV的药物,例如胸腺素α1(日达仙(Zadaxin))、硝唑尼特(Alinea、NTZ)、BIVN-401(virostat)、PYN-17(altirex)、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、GS-9525、KRN-7000、civacir、GI-5005、XTL-6865、BIT225、PTX-111、ITX2865、TT-033i、ANA971、NOV-205、tarvacin、EHC-18、VGX-410C、EMZ-702、AVI4065、BMS-650032、BMS-791325、巴维昔单抗、MDX-1106(ONO-4538)、Oglufanide和VX-497(merimepodib)。更为具体来说,其他治疗药物可与一个或多个选自由HCVNS5B蛋白酶抑制剂(ABT-072和ABT-333)、HCVNS5A抑制剂(ACH-3102和ACH-2928)和HCVNS3蛋白酶抑制剂(ABT-450和ACH-125)组成的组的化合物联用。在另一个实施方案中,与本文所述的药学组合物联用的治疗药物可以是当与本文所述的药学组合物联用时具有治疗作用的任何药物。例如,与本文所述的药学组合物联用的治疗药物可以是干扰素、病毒唑类似物、NS3蛋白酶抑制剂、NS5B蛋白酶抑制剂、α-葡萄糖苷酶1抑制剂、保肝药、HCV的非核苷抑制剂和其他治疗HCV的药物。在另一个实施方案中,与本文所述的药学组合物联用的其他治疗药物是亲环蛋白抑制剂,包括例如在WO2013/185093中公开的一种亲环蛋白抑制剂。非限制性实例包括选自由以下化合物和它们的立体异构体及立体异构体混合物组成的组的化合物:在另一个实施方案中,与本文所述的药学组合物联用的其他治疗药物是HCVNS5B聚合酶的非核苷抑制剂。非限制性实例包括化合物E(如下所述)。其他可与本文提供的组合物联用的抗HCV药物的实例包括但不限于以下:A.干扰素,例如PEG化的rIFN-α2b(PEG-Intron)、PEG化的rIFN-α2a(Pegasys)、rIFN-α2b(Intron-A)、rIFN-α2a(Roferon-A)、干扰素α(MOR-22、OPC-18、Alfaferone、Alfanative、Multiferon、subalin)、复合干扰素(interferonalfacon-1)(Infergen)、干扰素α-n1(Wellferon)、干扰素α-n3(Alferon)、干扰素-β(Avonex、DL-8234)、干扰素-ω(ωDUROS、Biomed510)、albinterferonα-2b(Albuferon)、IFNαXL、BLX-883(Locteron)、DA-3021、糖基化干扰素α-2b(AVI-005)、PEG-干复津(PEG-Infergen)、PEG化的干扰素λ(PEG化的IL-29)或beleronfon、IFNα-2bXL、rIFNα-2a、复合干扰素α(consensusIFNα)、干复津(infergen)、rebif、PEG化的INF-β、口服干扰素a、feron、reaferon、intermaxa、r-INF-β和干复津(infergen)+actimmuneribavirin和病毒唑类似物,例如rebetol、copogus、VX-497和viramidine(taribavirin);B.NS5A抑制剂,例如,化合物B(下述)、化合物C(下述)、ABT-267、化合物D(下述)、JNJ-47910382、daclatasvir(BMS-790052)、ABT-267、MK-8742、EDP-239、IDX-719、PPI-668、GSK-2336805、ACH-3102、A-831、A-689、AZD-2836(A-831)、AZD-7295(A-689)和BMS-790052;C.NSB5聚合酶抑制剂,例如化合物E(下述)、化合物F(下述)、ABT-333、化合物G(下述)、ABT-072、化合物H(下述)、tegobuvir(GS-9190)、GS-9669、TMC647055、setrobuvir(ANA-598)、非利布韦(PF-868554)、VX-222、IDX-375、IDX-184、IDX-102、BI-207127、valopicitabine(NM-283)、PSI-6130(R1656)、PSI-7851、BCX-4678、nesbuvir(HCV-796)、BILB1941、MK-0608、NM-107、R7128、VCH-759、GSK625433、XTL-2125、VCH-916、JTK-652、MK-3281、VBY-708、A848837、GL59728、A-63890、A-48773、A-48547、BC-2329、BMS-791325和BILB-1941;D.NS3蛋白酶抑制剂,例如化合物I、化合物J、化合物K、ABT-450、化合物L(下述)、simeprevir(TMC-435)、波普瑞韦(SCH-503034)、narlaprevir(SCH-900518)、vaniprevir(MK-7009)、MK-5172、丹诺普韦(ITMN-191)、sovaprevir(ACH-1625)、neceprevir(ACH-2684)、Telaprevir(VX-950)、VX-813、VX-500、faldaprevir(BI-201335)、asunaprevir(BMS-650032)、BMS-605339、VBY-376、PHX-1766、YH5531、BILN-2065和BILN-2061;E.α-葡萄糖苷酶1抑制剂,例如西戈斯韦(MK-3253)、米格列醇和UT-231B;F.保肝药,例如IDN-6556、ME3738、MitoQ和LB-84451;G.HCV的非核苷抑制剂,例如苯并咪唑衍生物、苯并-1,2,4-噻二嗪衍生物和苯基丙氨酸衍生物;和H.其他抗HCV药物,例如日达仙、硝唑尼特(alinea)、BIVN-401(virostat)、DEBIO-025、VGX-410C、EMZ-702、AVI4065、巴维昔单抗、oglufanide、PYN-17、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、KRN-7000、civacir、GI-5005、ANA-975、XTL-6865、ANA971、NOV-205、tarvacin、EHC-18和NIM811。化合物B是NS5A抑制剂,通过以下化学结构表示:化合物C是NS5A抑制剂,通过以下化学结构表示:化合物D是NS5A抑制剂,通过以下化学结构表示:参见美国专利公开号2013/0102525及其引用的参考文献。化合物E是NS5BThumbII聚合酶抑制剂,通过以下化学结构表示:化合物F是设计为通过HCVNS5B聚合酶抑制病毒RNA复制的核苷酸抑制剂前药,通过以下化学结构表示:化合物G是HCV聚合酶抑制剂,通过以下化学结构表示:参见美国专利公开号2013/0102525及其引用的参考文献。化合物H是HCV聚合酶抑制剂,通过以下化学结构表示:参见美国专利公开号2013/0102525及其引用的参考文献。化合物I是HCV蛋白酶抑制剂,通过以下化学结构表示:参见美国专利公开号2014/0017198及其引用的参考文献。化合物J是HCV蛋白酶抑制剂,通过以下化学结构表示:参见美国专利号8,178,491及其引用的参考文献。化合物K是HCV蛋白酶抑制剂,通过以下化学结构表示:化合物L是HCV蛋白酶抑制剂,通过以下化学结构表示:参见美国专利公开号2013/0102525及其引用的参考文献。在一个实施方案中,与本文所述的药学组合物联用的其他治疗药物是HCVNS3蛋白酶抑制剂。非限制性实例包括但不限于选自由以下化合物组成的组的一种或多种化合物:和在另一个实施方案中,本发明申请提供了一种治疗人类患者丙肝的方法,包含向患者给药治疗有效量的本文所述药学组合物和一种其他治疗药物和一种药学上可接受的载体或辅料,其中其他治疗药物选自由PEG化的rIFN-α2b、PEG化的rIFN-α2a、rIFN-α2b、IFNα-2bXL、rIFN-α2a、consensusIFNα、干复津(infergen)、利比、locteron、AVI-005、PEG-干复津、PEG化的IFN-β、口服干扰素α、feron、reaferon、intermaxα、r-IFN-β、干复津+干扰素γ-1b、IFN-ω和DUROS、albuferon、rebetol、copegus、左旋韦林、VX-497、利巴韦林前体(taribavirin)、A-831、A-689、NM-283、valopicitabine、R1626、PSI-6130(R1656)、HCV-796、BILB1941、MK-0608、NM-107、R7128、VCH-759、PF-868554、GSK625433、XTL-2125、SCH-503034(SCH-7)、VX-950(特拉匹韦)、ITMN-191、和BILN-2065、MX-3253(西戈斯韦)、UT-231B、IDN-6556、ME3738、MitoQ、和LB-84451、苯并咪唑衍生物、苯并-1,2,4-噻二嗪衍生物、和苯基丙氨酸衍生物、日达仙(zadaxin)、硝唑尼特(alinea)、BIVN-401(virostat)、DEBIO-025、VGX-410C、EMZ-702、AVI4065、巴维昔单抗、oglufanide、PYN-17、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、KRN-7000、civacir、GI-5005、ANA-975(艾沙托立利宾)、XTL-6865、ANA971、NOV-205、tarvacin、EHC-18、和NIM811组成的组。再在另一个实施方案中,本申请提供了一种联用的药物,包含:a)第一个药学组合物,其包含如本文所述的基本上为非晶体的有效量ledipasvir;和基本上为晶体的有效量sofosbuvir和b)第二个药学组合物,其包含至少一个其他选自由HIV蛋白酶抑制化合物、HIV逆转录酶非核苷抑制剂、HIV逆转录酶核苷抑制剂、HIV逆转录酶核苷酸抑制剂、HIV整合酶抑制剂、gp41抑制剂、CXCR4抑制剂、gp120抑制剂、CCR5抑制剂、干扰素、病毒唑类似物、NS3蛋白酶抑制剂、α-葡萄糖苷酶1抑制剂、保肝药、HCV非核苷抑制剂和其他治疗HCV的药物及它们的组合组成的组的治疗药物。所述其他治疗药物可以是治疗其他病症例如HIV感染的药物。因此,所述其他治疗药物可以是用于治疗HIV的化合物,例如HIV蛋白酶抑制化合物、HIV逆转录酶非核苷抑制剂、HIV逆转录酶核苷抑制剂、HIV逆转录酶核苷酸抑制剂、HIV整合酶抑制剂、gp41抑制剂、CXCR4抑制剂、gp120抑制剂、CCR5抑制剂、干扰素、病毒唑类似物、NS3蛋白酶抑制剂、NS5b聚合酶抑制剂、α-葡萄糖苷酶1抑制剂、保肝药、HCV非核苷抑制剂和其他治疗HCV的药物。更为具体来说,所述其他治疗药物可以选自由以下组成的组:1)HIV蛋白酶抑制剂,例如安泼那韦、阿扎那韦、福沙那韦、茚地那韦、洛匹那韦、利托那韦、洛匹那韦+利托那韦、奈非那韦、沙奎那韦、替拉那韦、贝卡那韦、地瑞那韦、TMC-126、TMC-114、莫兹那韦(DMP-450)、JE-2147(AG1776)、AG1859、DG35、L-756423、RO0334649、KNI-272、DPC-681、DPC-684和GW640385X、DG17、PPL-100,2)HIV逆转录酶非核苷抑制剂,例如卡普韦林、乙米韦林、地拉韦定(delaviridine)、依法韦仑、奈韦拉平、红厚壳属植物提取物((+)calanolideA)、依曲韦林、GW5634、DPC-083、DPC-961、DPC-963、MIV-150和TMC-120、TMC-278(利匹韦林)、依法韦仑、BILR355BS、VRX840773、UK-453,061、RDEA806,3)HIV逆转录酶核苷抑制剂,例如齐多夫定、恩曲他滨、地达诺新、司他夫定、扎西他滨、拉米夫定、阿巴卡韦、氨多索韦、艾夫他滨、阿洛夫定、MIV-210、拉西韦(±-FTC)、D-d4FC、恩曲他滨、叠氮磷、福齐夫定替酯、磷夫定酯、阿立他滨(AVX754)、安道索韦、KP-1461、阿巴卡韦+拉米夫定、阿巴卡韦+拉米夫定+齐多夫定、齐多夫定+拉米夫定,4)HIV逆转录酶核苷酸抑制剂,例如替诺福韦、富马酸替诺福韦二吡呋酯+恩曲他滨、富马酸替诺福韦二吡呋酯+恩曲他滨+依法韦仑和阿德福韦,5)HIV整合酶抑制剂,例如姜黄素、姜黄素衍生物、菊苣酸、菊苣酸衍生物、3,5-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸衍生物、金精三羧酸、金精三羧酸衍生物、咖啡酸苯乙酯、咖啡酸苯乙酯衍生物、酪氨酸磷酸化抑制剂、酪氨酸磷酸化抑制剂衍生物、槲皮素、槲皮素衍生物、S-1360、zintevir(AR-177)、L-870812和L-870810、MK-0518(雷特格韦)、BMS-707035、MK-2048、BA-011、BMS-538158、GSK364735C,6)gp41抑制剂,例如恩夫韦地、西夫韦肽、FB006M、TRI-1144、SPC3、DES6、基因座gp41(Locusgp41)、CovX和REP9,7)CXCR4抑制剂,例如AMD-070,8)进入抑制剂,例如SP01A、TNX-355,9)gp120抑制剂,例如BMS-488043和BlockAide/CR,10)G6PD和NADH-氧化酶抑制剂,例如免疫素(immunitin),10)CCR5抑制剂,例如aplaviroc、维克利诺、INCB9471、PRO-140、INCB15050、PF-232798、CCR5mAb004和吗拉维诺,11)干扰素,例如PEG化的rIFN-α2b、PEG化的rIFN-α2a、rIFN-α2b、IFN-α2bXL、rIFN-α2a、共识干扰素α(consensusIFNα)、干复津、利比、locteron、AVI-005、PEG-干复津、PEG化的IFN-β、口服干扰素α、feron、reaferon、intermaxα、r-IFN-β、干复津+actimmune、干扰素-ω与DUROS、和albuferon,12)病毒唑类似物,例如rebetol、copegus、左旋韦林、VX-497和利巴韦林前体(taribavirin)13)NS5a抑制剂,例如A-831、A-689和BMS-790052,14)NS5b聚合酶抑制剂,例如NM-283、valopicitabine、R1626、PSI-6130(R1656)、HCV-796、BILB1941、MK-0608、NM-107、R7128、VCH-759、PF-868554、GSK625433和XTL-2125,15)NS3蛋白酶抑制剂,例如SCH-503034(SCH-7)、VX-950(Telaprevir)、ITMN-191和BILN-2065,16)α-葡萄糖苷酶1抑制剂,例如MX-3253(西戈斯韦)和UT-231B,17)保肝药,例如IDN-6556、ME3738、MitoQ和LB-84451,18)HCV非核苷抑制剂,例如苯并咪唑衍生物、苯并-1,2,4-噻二嗪衍生物和苯基丙氨酸衍生物,19)其他治疗丙肝的药物,例如日达仙、硝唑尼特(alinea)、BIVN-401(virostat)、DEBIO-025、VGX-410C、EMZ-702、AVI4065、巴维昔单抗、oglufanide、PYN-17、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、KRN-7000、civacir、GI-5005、ANA-975(艾沙托立宾)、XTL-6865、ANA971、NOV-205、tarvacin、EHC-18和NIM811,20)药代动力学增强剂,例如BAS-100和SPI452、20)RNAseH抑制剂、例如ODN-93和ODN-112,和21)其他抗HIV药物,例如VGV-1、PA-457(bevirimat)、ampligen、HRG214、cytolin、polymun、VGX-410、KD247、AMZ0026、CYT99007、A-221HIV、BAY50-4798、MDX010(iplimumab)、PBS119、ALG889和PA-1050040。在一个实施方案中,所述其他治疗药物是病毒唑。因此,本文所述的方法包括在需要的人类患者中治疗丙肝的方法,包含向患者给药治疗有效量的病毒唑和本文所述的治疗有效量的药学组合物、药物剂型或片剂。在另一个实施方案中,病毒唑和含有sofosbuvir和ledipasvir的药学组合物、药物剂型或片剂给药大约12周或更短。在其他实施方案中,病毒唑和含有sofosbuvir和ledipasvir的药学组合物、药物剂型或片剂给药大约8周或更短,大约6周或更短,或是大约4周或更短。考虑到所述其他治疗药物将以本领域公知的方法进行给药并且剂量可由本领域技术人员选择。例如,所述其他药物可以以每天大约0.01毫克至大约2克的剂量给药。实施例在以下实施例及本发明全文中,本文中使用的缩略语分别具有以下意义:实施例1:非晶体Ledipasvir的合成制备多种形式ledipasvir的方法可参见美国公开号2013/0324740和2013/0324496。这两个申请均通过引用合并入本文中。以下是分离ledipasvir非晶体游离碱的方法。在一个反应容器中合并ledipasvir丙酮溶剂化物(191.4g)和乙腈(1356g),混合内含物直至形成溶液。将此ledipasvir的乙腈溶液缓慢加入至另一个反应容器中,此容器中含有剧烈搅拌的水(7870g)。在大约23℃下搅拌内含物大约30分钟。过滤内含物并在大约40-45℃下干燥直至达到恒重,以得到ledipasvir的非晶体固体(146.4g,82%收率)。实施例2:片剂的制备和配制A.片剂的剂量选择i.Sofosbuvir片剂选择的sofosbuvir剂量是400mg每日一次。EmaxPK/PD模型和早期病毒学及人体暴露数据支持400mgsofosbuvir的剂量,其他试验也支持400mgsofosbuvir的剂量选择。400mgsofosbuvir剂量的sofosbuvir主要代谢产物平均AUCtau为根据此模型测得的HCVRNA自基线起最大改变的大约77%,此值是暴露-应答S形曲线的平台顶点。在S形Emax模型中,在20%至80%最大效应范围期间具有相对线性的暴露-应答关系。因此,鉴于200mg片剂的sofosbuvir暴露与高达1200mg的单剂量是呈剂量正比的,低于400mg的剂量在HCVRNA自基线改变的幅度上预计会出现相当大的降低。同样,为了提高暴露-应答曲线平台中77%的疗效预测,抗病毒作用的大量增长将需要暴露(和由此产生的剂量)的大幅度增加。当与其他HCV治疗联用24周时,与每日一次200mg的剂量相比,每日一次400mgsofosbuvir的剂量与基因型1HCV感染病人出现较高SVR率有关。两个剂量水平具有相似的安全性和耐受性。此外,当向基因型2或3的HCV感染病人给予每日一次400mgsofosbuvir与其他HCV治疗时,可观察到100%SVR24。ii.Ledipasvir所有给药剂量为≥3mgledipasvir的分组中,HCVRNAlog10的最大中值降低了3或更多。EmaxPK/PD模型显示30mg剂量给药后达到的暴露在基因型1aHCV感染病人中提供了>95%的最大抗病毒应答。根据对响应ledipasvir暴露而出现的NS5A突变体进行的分析,还观察到30mg或更多的ledipasvir可能提供一些低于30mg的剂量无法提供的药物相关突变的覆盖范围。因此,选择30mg和90mgledipasvir作为本文描述的制剂的剂量。其他研究表明当ledipasvir与其他治疗药物联用时,30mg剂量(BT=33%,11/33;30mgledipasvir)下的突破(BT)率(达到vRVR后HCVRNA>定量下限(LLOQ)的病人的数量/达到vRVR的病人的总数量)高于90mg的剂量(BT=12%,9/74;90mgledipasvir)。因此,90mg剂量的ledipasvir可得到防止病毒突破的较大抗病毒范围。B.含有Ledipasvir的固体分散物为了制备本文所述的含有sofosbuvir和ledipasvir组合物的片剂,将含有ledipasvir的固体分散物与晶体sofosbuvir共配制。如本文所述,固体分散物的起始原料可以是多种形式的ledipasvir,包括晶体形式、非晶体形式、盐、溶剂化物和游离碱。由于在有机溶剂和辅料中的高溶解性和分离ledipasvir游离碱晶体丙酮溶剂化物的能力,将此形式用于ledipasvir的非晶体固体分散物。与其它配制方法相比,喷雾干燥固体分散物的方法可得到最符合预期的特性,包括改善的体内和体外表现以及生产能力/扩展能力。通过将ledipasvir丙酮溶剂化物和聚合物溶于进料溶剂中来制备喷雾干燥进料溶液。进行剧烈混合或均化以避免组合物凝集。为了得到固体分散物的优选特性,检测不同的聚合物。非离子型聚合物例如羟丙甲纤维素和共聚维酮固体分散物均表现出充分的稳定性和物理特性。首先根据溶解性、稳定性和粘性评估进料溶液以选择合适的溶剂。乙醇、甲醇和二氯甲烷(DCM)均表现出良好的溶解性(ledipasvir溶解性>500mg/mL)。评估乙醇和基于DCM进料储备液的制备简便性,在一系列入口和出口温度进行喷雾干燥来评估喷雾干燥工艺的稳健性。这两种溶剂均可使得ledipasvir和共聚维酮快速溶出。在较宽范围的喷雾干燥出口温度(49-70℃)下从乙醇喷雾干燥均可获得高收率(88、90、92、94、95、97、98、99%),且在喷雾干燥室中没有材料蓄积。从DCM喷雾干燥可获得60%、78%和44%的收率。总而言之,ledipasvir与共聚维酮比例为1:1的ledipasvir固体分散物(50%w/w)在乙醇进料溶液中具有良好的化学稳定性。使用均化过程来制备10%ledipasvir丙酮溶剂化物和10%共聚维酮的乙醇溶液。根据30%的固体内含物进行测量,Ledipasvir:共聚维酮的乙醇溶液的粘度很低(~65cP)。使用两个液体喷嘴或一个液压喷嘴进行喷雾干燥。表1列出了100g–4000g总进料溶液使用AnhydroMS35喷雾干燥器进行评估所得的喷雾干燥工艺参数,表2显示了使用液压喷嘴的喷雾干燥工艺参数。粒径数据表明粒径足够大(10-14μm平均PS),并且使用较高的喷雾速度或较大直径的喷雾喷嘴基本没有影响。没有调整喷嘴气体流速来增加粒径。表1.使用两个液体喷嘴的AnhydroMS35喷雾干燥器上的Ledipasvir喷雾干燥参数参数试验1试验2试验3试验4批次规模(g)1002502504000固体%20202020进料速度(mL/min)30404040喷雾喷嘴(mm)1.01.01.21.2喷嘴气流(kg/hr)6.06.06.06.0喷雾室气流(kg/hr)35.035.035.035.0入口温度(℃)125165165165出口温度(℃)70737276PSd10/d50/d90/平均值(μm)4/9/18/105/10/20/125/10/19/116/12/22/14喷雾后LOD(%)5.564.864.293.42表2.使用一个液压喷嘴的Ledipasvir喷雾干燥参数的实例参数试验1批次规模(g)200固体%20进料速度(kg/hr)178进料压力(bar)52入口温度(℃)158出口温度(℃)65PSd10/d50/d90/平均值(μm)3/14/34喷雾后LOD(%)0.6有机挥发性杂质,包括喷雾干燥溶剂乙醇和自ledipasvir丙酮溶剂化物残留的丙酮可在60℃下的第二次干燥期间快速去除。较小规模的生产可在托盘中干燥。对于较大规模的批次,可使用双锥体干燥机或搅拌干燥机。干燥失重(LOD)成比例地变慢归因于水,随后可通过KarlFischer滴定进行确认。通过6小时干燥(或是较大规模为8小时),残留的乙醇降低至低于ICH指导原则的0.5%w/w。干燥结束时乙醇含量为0.08%w/w,残留的丙酮为0.002%,表明第二次干燥工艺足以去除残留溶剂。C.片剂的制备i.单层片Ledipasvir:共聚维酮固体分散物(1:1)是通过在乙醇中溶解ledipasvir和共聚维酮,然后将混合物喷雾干燥而制成的。喷雾干燥的ledipasvir:共聚维酮固体分散物还在第二个干燥器中进行干燥。含有ledipasvir的非晶体固体分散物与sofosbuvir和辅料混合,磨碎以便于混合均匀。可以使用共混合或是共干燥制粒工艺。共混合制粒是一个多步骤工艺,包括将每个活性成分与辅料单独干法制粒,随后将两份颗粒混合在一起。共干燥制粒包括一起干燥制粒有效成分和赋形剂。共混合与共干燥工艺具有相当的物理和化学片剂性质。示例性共混合和共干燥制剂参见以下列出的表3和表4。表3.不同填充重量的Sofosbuvir/Ledipasvir共干燥(共制粒)片剂的代表性组成实例表4.Sofosbuvir/Ledipasvir共混合(双制粒)片剂的代表性组成实例然后在压片前将颗粒与润滑剂混合。所得片芯总重为1000mg。对片剂进行薄膜包衣以降低光降解。包衣后片剂重量增加3%。薄膜包衣材料时聚乙烯醇基包衣。示例性片剂参见表5。表5.含有Ledipasvir和Sofosbuvir固体分散物的片剂的代表性组成实例成分%w/w成分重量(mg/片)Sofosbuvir40.00400Ledipasvir固体分散物18.00180.0乳糖一水合物16.50165.0微晶纤维素18.00180.0交联羧甲基纤维素钠5.0050.0胶体二氧化硅1.0010.0硬脂酸镁1.5015片芯总重100.01000.0薄膜包衣3.0030.029-->纯水----包衣片总重1030.0ii.双层片含有固体分散物共制剂的片剂还可制成双层片,其中固体分散物包含ledipasvir和晶体sofosbuvir,每个活性成分各在一层。为了制备双层片,通过在乙醇中溶解ledipasvir和共聚维酮,然后喷雾干燥该混合物来制备ledipasvir:共聚维酮(1:1)固体分散物。喷雾干燥的ledipasvir:共聚维酮固体分散物还在第二个干燥器中进一步干燥。随后,将喷雾干燥的ledipasvir:共聚维酮固体分散物与辅料混合。磨碎该混合物,然后在干法制粒前于润滑剂混合。将ledipasvir颗粒与粒外润滑剂混合。另外单独将sofosbuvir原料药与辅料混合,然后磨碎该混合物并在干法制粒前将其与润滑剂混合。然后将sofosbuvir颗粒与粒外润滑剂混合。最后,将sofosbuvir粉末混合物与ledipasvir粉末混合物压成双层片芯。然后在包装前对该双层片芯进行包衣。含有ledipasvir和sofosbuvir的固体分散物的双层片的代表性组成实例参见表6。在此表格中,固体分散物包含为1:1比例的ledipasvir:共聚维酮。表6.含有ledipasvir和sofosbuvir固体分散物的双层片的代表性组成实例实施例3:Ledipasvir单药物片剂和Ledipasvir/Sofosbuvir片剂的PK、稳定性和溶出性质以及食物效应和胃酸抑制剂作用的降低A.Ledipasvir单药物片剂的生物利用度进行了一系列体内试验来评估该固体分散物方法与常规制剂相比的潜在的益处,并且通过鉴别最优聚合物类型和分散物内的相对聚合物浓度对固体分散物进行了优化。在五肽胃泌素预处理的犬模型中,含有游离碱非晶体形式的制剂(4%w/w,10mg非晶体游离碱片)和含有ledipasvirD-酒石酸盐的制剂(5.85%w/w,10mgD-酒石酸盐片)具有等效生物利用度,其中这两种制剂均是常规制剂,结果参见表7。五条胃泌素是一种可刺激胃酸、胃蛋白酶和内在因子分泌的合成多肽。表7.片剂口服给药后Ledipasvir的平均(RSD)药代动力学参数,25mg,比格犬中(n=6)由于这些制剂显示了相似的PK性质,而D-酒石酸盐的单独性质优于游离碱非晶体形式,所以选择晶体D-酒石酸盐制剂来与非晶体固体分散物组合物进行比较。在这些研究中,使用含有ledipasvir晶体D-酒石酸盐的30mg片剂与含有ledipasvir非晶体固体分散物的30mg或90mg片剂。选择含有ledipasvir固体分散物的速释ledipasvir片剂的犬药代动力学结果参见表8。表8.Ledipasvir片剂口服给药后Ledipasvir的平均(RSD)药代动力学参数,禁食比格犬中(n=6)与晶体D-酒石酸盐ledipasvir制剂相比,非晶体固体分散物片显示了较高的生物利用度和较低的变异性。在五肽胃泌素预处理的动物中,观察到暴露大约增加了40%而变异性降低了2倍。更重要的是在法莫替丁预处理的动物中,与D-酒石酸盐片剂相比,观察到生物利用度增加了多达3.5倍。当以2:1的API:聚合物比例进行喷雾干燥时,共聚维酮基分散物的生物利用度的增加要高于同等的基于羟丙甲纤维素制剂(分别为F=30%和22%)。随着聚合物组分增加至1:1比例,共聚维酮基制剂的生物利用度进一步增高,在法莫替丁预处理的犬中得到了35%的生物利用度。由于改善的体内表现和可接受的稳定性和物理特性,选择ledipasvir:共聚维酮的1:1混合物作为喷雾干燥的原料。含有非晶体固体分散物的制剂经证明优于含有非晶体游离碱或D-酒石酸盐的制剂。据观察非晶体游离碱制剂的生物利用度与D-酒石酸盐制剂相似。其他数据表明当ledipasvir与胃酸抑制剂(法莫替丁)一起给药时生物利用度有所降低,表明ledipasvir的游离碱非晶体和D-酒石酸盐制剂出现了不利的药物-药物相互作用。使用喷雾干燥且带有亲水性聚合物的固体分散物经鉴别具有可接受的稳定性、物理特性和体内表现。使用干法制粒工艺和常用辅料开发了一种快速崩解片。一项比较含有D-酒石酸盐的制剂与含有非晶体固体分散物的制剂的生物利用度研究表明,在D-酒石酸盐制剂中观察到改善的生物制药表现,并且克服了大部分与酸抑制治疗的消极药物-药物相互作用。B.Ledipasvir+Sofosbuvir片的生物利用度Sofosbuvir与ledipasvir联用(其中固体分散物中的ledipasvir与共聚维酮为1:1)的PK结果参见表9,此结果表明sofosbuvir与ledipasvir之间没有明显的相互作用。表9.Sofosbuvir与Ledipasvir单独或联合给药时Sofosbuvir和Ledipasvir的药代动力学数据Sofosbuvir血浆暴露被ledipasvir增加了~2.3倍。Ledipasvir对sofosbuvir的作用可能是由于抑制P-gp造成的,其中Sofosbuvir已知是P-gp的底物。Sofosbuvir的增加被认为是不显著的,因为与总药物相关物质(DRM)暴露(DRM,计算为每个分析物的AUCs的总和,根据分子量校正)相比它的暴露很低而且是短暂的。根据此计算,sofosbuvir与ledipasvir的AUC仅为DRMAUC的~5.7%。Sofosbuvir的主要循环代谢物即代谢物II的暴露,不受ledipasvir给药的影响,表明sofosbuvir和ledipasvir之间没有明显的相互作用。C.Ledipasvir固体分散物和Ledipasvir/Sofosbuvir片的食物效应的降低单独ledipasvir的常规制剂(不是固体分散物)已被证明具有消极的食物效应。表10总结了在禁食和进食条件下30mg单剂量ledipasvir给药后ledipasvir的PK参数。在食物的存在下ledipasvir的PK曲线有所改变。具体来说,高脂饮食可延迟ledipasvir的吸收,延长Tmax(Tmax中值为8小时),并减少ledipasvir的血浆暴露(Cmax、AUClast和AUCinf平均值分别降低了大约45%)。表10:伴随食物摄入状态下Ledipasvir单剂量给药后的血浆LedipasvirPK曲线表11显示了每个主要PK参数的GLSMs比率(禁食条件下30mgledipasvir/进食条件下30mgledipasvir)。表11:LedipasvirPK参数的食物效应统计学评估无论是在禁食还是进食条件下给药均可观察到类似的ledipasvir半衰期中值(禁食条件下的t1/2为39.82小时,禁食条件下为36.83小时),表明食物可通过降低ledipasvir的溶解性和/或吸收来降低其生物利用度。由于已证明ledipasvir具有消极的食物效应,因此对含有sofosbuvir和ledipasvir(为与共聚维酮(1:1)形成的固体分散物)的组合物进行食物效应的检测。这些结果参见表12。食物可减慢sofosbuvir的吸收速度(Tmax中值:1.00与2.00小时),但仅轻微改变生物利用度,sofosbuvir和sofosbuvir代谢物I的血浆暴露增加了2倍或不到对此进行了证明。至于sofosbuvir代谢物II,sofosbuvir与食物一起给药时可观察到Cmax降低了大约20-30%,而AUC没有改变。Sofosbuvir代谢物IIAUC的%GMR及相关的90%CI(进食/禁食治疗)位于70%至143%的等效界限内。由于sofosbuvir代谢物IICmax的降低很轻微,并且AUC参数符合等效标准,因此认为食物对sofosbuvir代谢物II的影响是不明显的。在禁食或进食条件下进行ledipasvir给药可达到相似的ledipasvir血浆暴露(AUC和Cmax)。%GMR及相关的90%CI(进食/禁食治疗)位于70%至143%的等效界限内。此前在单独给药(以非晶体游离碱而不是固体分散物)时观察到ledipasvir具有“消极”食物效应,但与sofosbuvir联合给药的ledipasvir(非晶体固体分散物;共聚维酮(1:1))的药代动力学并未受到食物的影响。因此,sofosbuvir和ledipasvir联用在给药时可不考虑食物。表12:Sofosbuvir/Ledipasvir片在禁食或与中脂饮食或高卡路里/高脂饮食条件下给药时Sofosbuvir、Sofosbuvir代谢物I和II和Ledipasvir的药代动力学数据D.Ledipasvir/Sofosbuvir片中胃酸抑制剂作用的降低30mgledipasvir单独于常规制剂中(作为D-酒石酸盐)和作为固体分散物均已证明在与一些胃酸抑制剂一起给药时生物利用度有所降低;最明显的是质子泵抑制剂(PPI’s,例如奥美拉唑),但还包括组胺-2拮抗剂(H2RA’s,例如法莫替丁,未显示数据)。表12A总结了ledipasvir常规单药物片30mg、ledipasvir固体分散物片(ledipasvir:共聚维酮1:1)30mg和sofosbuvir/ledipasvirFDC片(90mgledipasvir固体分散物一起给药的ledipasvir的PK参数,所述sofosbuvir/ledipasvirFDC片含有或者没有奥美拉唑的共聚维酮1:1)一起。当与奥美拉唑一起给药时ledipasvir作为单药物片的生物利用度降低了大约2倍;但是,ledipasvir作为sofosbuvir/ledipasvirFDC片的一部分与奥美拉唑一起给药时,相较于sofosbuvir/ledipasvirFDC片在没有奥美拉唑给药时,ledipasvir的暴露(AUC和Cmax)没有明显降低。表12A:Ledipasvir单药物片或Sofosbuvir/Ledipasvir片与奥美拉唑一起或单独给药时Ledipasvir的药代动力学数据E.Ledipasvir/Sofosbuvir片的溶出度进行溶出度研究比较sofosbuvir400mg/ledipasvir90mg片剂(ledipasvir:共聚维酮(1:1))。sofosbuvir:ledipasvir片剂(LOT1-5)显示两片剂制剂在30分钟内高于85%溶解的sofosbuvir(图5)和ledipasvir(图6)。在图5和图6中显示这些结果。实施例4:Sofosbuvir/Ledipasvir共同制剂的稳定性对sofosbuvir无水晶体原料药与ledipasvir:共聚维酮固体分散物的相容性进行了评估。以代表最终400mgsofosbuvir/90mgledipasvir片剂的比例制备sofosbuvir和ledipasvir:共聚维酮(1:1)的混合物。将该混合物压为小球并置于40℃/75%RH和60℃/环境湿度的稳定性小室中,于开口玻璃瓶中储存两周和四周后进行检测。表13中总结的结果表明无论是sofosbuvir还是ledipasvir均未观察到降解,说明sofosbuvir和ledipasvir:共聚维酮固体分散物之间具有化学相容性。表13:在40℃/75%RH和60℃下储存的Sofosbuvir和Ledipasvir:共聚维酮固体分散物混合物的规格和杂质含量实施例5:Sofosbuvir/Ledipasvir/病毒唑治疗在HCV感染病人中的疗效使用sofosbuvir、ledipasvir和病毒唑联用或sofosbuvir和病毒唑联用来治疗HCV感染的病人。用于研究的病人包括那些初治即此前没有进行过HCV治疗的患者,和那些无反应即此前进行过HCV治疗但对治疗没有响应的患者。向患者给予每个药物的标准剂量(例如90mgledipasvir、400mgsobosbuvir和1000mg病毒唑),持续12周。在治疗过程中检测HCVRNA,停止治疗后检测持续性病毒应答(SVR)。治疗四周时,几乎所有患者的HCVRNA检测结果均达到检测限(LOD为15IU/mL)之下,治疗结束时,100%的患者达到了HCVRNA水平低于LOD(表14)。表14:HCVRNA随时间低于检测限的患者令人吃惊的是,接受sofosbuvir、ledipasvir和病毒唑联用治疗的病人在治疗后第4周和第12周时100%获得了持续性病毒应答。与此相反,接受sofosbuvir和病毒唑联用治疗的病人仅有88%的初治者和10%的无反应者在治疗后第4周时获得了SVR,且接受sofosbuvir和病毒唑联用治疗的病人仅有84%的初治者和10%的无反应者在治疗后第12周时获得了SVR(表15)。表15:持续性病毒应答这些结果在图7A-D中以图表进行了描述,表明在治疗方案中加入ledipasvir可在第4周和第12周时100%得到SVR。以下的实施例9显示低于12周的治疗方案(即大约8周或6周的治疗方案)也可得到相似的结果,这些相似结果是由sofosbuvir和ledipasvir且不加入病毒唑的治疗方案得到的。实施例6.SOF400mg/Ledipasvir90mg固定剂量联用片剂的稳定性此实施例总结了包装的Sofosbuvir(SOF)400mg/ledipasvir90mg蓝色薄膜包衣固定剂量联用(FDC)片在25℃/60%相对湿度(RH)和40℃/75%RH存在干燥剂下的物理化学稳定性。该片剂中的ledipasvir部分包含比例为1:1的ledipasvir:共聚维酮。此外,在40℃/75%RH的开放环境中于长达4周的时间对SOF/ledipasvirFDC片的化学和物理稳定性进行了评估。评估的物理化学性质包括性状、效力、降解产物的形成、溶出速率和含水量。使用FT-拉曼光谱仪和调整的差示扫描量热仪(mDSC)在24周后评估在没有干燥剂条件下的该片剂的物理稳定性。SOF400mg/ledipasvir90mg蓝色薄膜包衣FDC片在25℃/60%RH和40℃/75%RH以及0、1和3g干燥剂存在下在长达24周的时间中均显示了良好的稳定性。效力、杂质含量或溶出速率均为观察到明显改变。但是,在所有条件下均存在一种ledipasvir的光降解产物,含量为0.1%。在没有干燥剂的情况下储存的片剂的FT-拉曼分析表明24周后没有可检出的结晶化现象。方法和材料材料表16列出了用于生产片剂的SOF原料药和ledipasvir固体分散物的物理化学性质。SOF原料药和ledipasvir固体分散物的数量根据它们各自的药物含量系数(DCF)进行调整并伴随调整乳糖一水合物的数量。用于SOF和ledipasvir固体分散物粉末50%w/w的DCF分别是0.997和0.497(当调整共聚维酮量时为0.994)。表16.用于生产SOF400mg/Ledipasvir90mg薄膜包衣FCD片的SOF原料药和Ledipasvir固体分散物50%w/w散装粉末的物理化学性质设备用于生产SOF400mg/Ledipasvir90mg薄膜包衣FDC片的主要设备包括一个12qt.V-混合机、一个装有0.094格栅筛板的筛分机(Comil197S,Quadro,Waterloo,加拿大)、一个装有1.0mm磨筛和光滑/光滑滚筒装置的滚筒压片机/造粒机(MiniPactor,Gerteis,Jona,瑞士)、一个12位转盘式压片机(XM-12,Korsch,Berlin,德国)和一个片剂包衣机(LabCoat,O’HaraTechnologiesInc.,Ontario,加拿大)。菱形片剂模具(ElizabethCarbideDieCo.,Inc.,McKeesport,PA,USA)由菱形、标准凹面D型冲模组成,尺寸为0.7650inx0.4014in(19.43mmx10.20mm)。使用一个15英寸带孔盘薄膜包衣机来对片芯进行包衣。容器密封Sofosbuvir/LedipasvirFDC片装在一个100mL白色高密度聚乙烯(HDPE)瓶中。每瓶含有30个药片以及0、1或3g二氧化硅胶体干燥剂筒或袋和聚酯包装材料。每瓶用一个白色连续螺纹的儿童防护螺旋盖和一个电磁感应封口的铝面内衬密封。将选定数量的瓶子保持开口并在没有干燥剂的情况下包装以评估在加速的加热和湿度条件下40℃/75%RH的物理和化学稳定性。通用研究设计以以下组合评估包装批次的固体状态和化学稳定性:1)在有干燥剂的25℃/60%RH和40℃/75%RH下。样品于密封条件下储存最少24周。2)在40℃/75%RH的开放条件下长达4周。在预定时间点抽取样品。进行性状、效力、降解产物形成、溶出速率和含水量的化学稳定性检测。还进行其他监测潜在结晶化和相分离的物理稳定性分析。物理稳定性评估物理稳定性检测包括性状和FT-拉曼分析。对压制的薄膜包衣片进行目视检查以鉴别片剂颜色和包衣完整性的变化。使用FT-拉曼光谱检测薄膜包衣片中潜在的晶体ledipasvir(形式III)。在所有时间点和储存条件目视检查片剂的性状变化。与此相反,FT-拉曼分析仅对0g干燥剂下24周(25℃/60%RH和40℃/75%RH)时的片剂进行。性状在所有时间点检测片剂的物理完整性(即颜色、形状、包衣完整性和击凹)。FT-拉曼分析进行FT-拉曼试验。使用FT-拉曼光谱仪分析在密封容器中于25℃/60%RH和40℃/75%RH下储存的24周SOF/ledipasvir薄膜包衣FDC片,以检测晶体ledipasvir(形式III)的形成。简而言之,使用XactoTM小刀小心去除片剂的包衣随后使用臼杵研磨片剂。然后将片剂粉末装入杯中,使用背向散射几何学来采集光谱。化学稳定性评估进行化学稳定性分析,包括通过KarlFischer(KF)法检测的含水量、效力、杂质/降解产物的形成和溶出速率。KF含水量根据USP<921>报告SOF400mg/ledipasvir薄膜包衣FDC片的含水量。通过UPLC检测的效力和杂质/降解产物形成根据STM-2542[5]分析10个片剂的组合物样品溶液,据此对SOF400mg/ledipasvir薄膜包衣FDC片的效力和降解产物形成进行评估。SOF和ledipasvir的对照标准品浓度分别是2.0mg/mL和0.45mg/mL。使用外标和面积归一化法通过UPLC分别在262nm和325nm波长下测定SOF和ledipasvir的规格和降解产物含量。溶出方法对SOF400mg/ledipasvir薄膜包衣FDC片进行溶出试验。使用USP2型溶出装置和900mL溶出介质,桨转速为75rpm。介质是1.5%聚山梨醇酯80的10mM磷酸钾缓冲液,pH为6.0,分析期间温度维持在37℃。使用UPLC通过面积归一化法和外部对照标准品在250nm波长下监测SOF和ledipasvir随时间释出的程度。结果A.物理稳定性A1.性状在所有时间点对所有稳定性条件和干燥剂水平下的样品进行目视检查,发现类蓝色、菱形薄膜包衣片。A2.FT-拉曼分析片剂在没有干燥剂的条件下储存24周,随后提取粉末,对此粉末进行FT-拉曼分析。使用PLS模型计算得到的%结晶度表明在所有储存条件下均没有超过3%LOD的晶体ledipasvir(形式III)存在迹象。这与原始样品(t=0)的结果一致,在该样品中ledipasvir(形式III)也低于LOD。选定样品的光谱参见图中自1577cm-1至1514cm-1,基线是根据透明度人为调整的。此区域是四个通过PLS模型用来评估片剂中%ledipasvir(形式III)的光谱区域之一。图中上部两个光谱(用作PLS模型的标准)来自于加标10%w/w和3%w/w晶体ledipasvir(形式III)的片剂。接下来两个光谱代表在40℃/75%RH和25℃/60%RH下储存24周的压制片。最后一个光谱代表初始时间点(t=0)。Ledipasvir(形式III)在1552cm-1处具有明显的峰,在加标片剂中可清楚地看到此峰且强度自3%增加至10%。储存24周的压制样品在此区域的强度与t=0样品相比并未增加,表明结晶度没有改变。T=0样品和24周样品中的ledipasvir(形式III)低于加标3%形式IIIledipasvir的片剂中的存在量,即此分析技术的当前检测限。B.化学稳定性B.1KF含水量在开放条件下储存4周的压制样品的含水量自2.28%增加至5.23%。在25℃/60%RH下分别在无干燥剂、1g干燥剂和3g干燥剂下储存的压制样品的含水量降至1.91%、1.58%和1.65%。在40℃/75%RH下,分别在无干燥剂、1g干燥剂和3g干燥剂下储存的压制样品的含水量降至2.03%、1.79%和1.46%。B.2效力和杂质/降解产物形成在25℃/60%RH和40℃/75%RH下测定SOF400mg/ledipasvir90mg薄膜包衣FDC片的效力和杂质/降解产物含量。得到在40℃/75%RH下储存的稳定性样品的代表性色谱图。数据显示在25℃/60%RH和40℃/75%RH下储存24周的SOF400mg/ledipasvir90mg薄膜包衣FDC片中的SOF和ledipasvir具有化学稳定性。SOF和ledipasvir的标示规格在25℃/60%RH和40℃/75%RH下保持不变。溶出度得到SOF400mg/ledipasvir90mg薄膜包衣FDC片中的SOF和ledipasvir的溶出曲线。在24周时间点时,在25℃/60%RH和40℃/75%RH的所有检测干燥剂水平下,片剂中SOF在45分钟的溶出范围是99%至100%,而ledipasvir是99%至98%之间。根据前述结果,此实施例表明SOF400mg/ledipasvir90mg薄膜包衣FDC片在25℃/60%RH和40℃/75%RH于0、1g和3g干燥剂下,在长达24周的时间中保持良好的稳定性。此外,储存24周后FT-拉曼分析未检测到晶体ledipasvir(形式III)。实施例7.SOF400mg/Ledipasvir90mg固定剂量联用(FDC)片的制剂开发此实施例显示了含有ledipasvir:共聚维酮(1:1)的SOF400mg/ledipasvir90mg固定剂量联用(FDC)片的开发。根据每个单独药物的现有制剂,预计此开发有很多困难,其中之一预计是粉末流动性很差,其他困难与不均匀的混合物相关。检测了三种片剂,包括(1)单层共制粒片剂,(2)单层共混合片剂和(3)双层片剂。在所有这三种制剂中,SOF是无水晶体形式II而ledipasvir是非晶体固体分散物(ledipasvir:共聚维酮(1:1))。制剂(1)通常与最高风险的药物-药物相互作用相关,但在生产期间是成本效益最高的。双层制剂(3)则相反,具有最低的药物-药物相互作用风险。检测该制剂的溶出能力,溶出介质包括10mM磷酸盐缓冲液,pH6.0(1.5%80)。如图8A-B所示,所有这三种制剂具有相当的溶出能力,与单药物对照相似。还对每种制剂的药代动力学(PK)表现进行了测试。SOF/ledipasvirFDC和对照片剂口服给药于禁食犬(100mg/22.5mg固定/犬)后,测定了SOF/ledipasvir的血浆浓度。以下的表17显示了PK结果。表17.制剂在法莫替丁预处理的犬中的药代动力学表现根据这些结果,选择单层共制粒片用于进一步分析。此制剂的组成参见表18。表18.SOF400mg/Ledipasvir90mgFDC片的组成在24名禁食条件的健康病人中对此制剂进行一项生物利用度临床研究,使用单药物片作为对照。结果参见表19。表19.SOF/Ledipasvir固定剂量联用片和单药物片的生物利用度因此,这些结果表明SOF/ledipasvir固定剂量联用(共制粒)片和单药物片具有生物等效性。实施例8.非晶体Ledipasvir的溶解性研究此实施例检查了不同ledipasvir形式,包括非晶体和晶体游离碱、溶剂化物和盐,在溶解性方面的物理化学性质。A.材料和方法pH-溶剂度曲线在pH范围1至10内测定ledipasvir非晶体游离碱的水溶性。在一系列pH调整的水溶液(HCl或NaOH滴定)中加入过量固体ledipasvir,于室温下搅拌48小时。然后通过再生纤维素注射过滤器过滤混悬液。测定上清液的pH值,用50:50H2O+0.1%TFA:ACN适量稀释上清液,通过HPLC-UV方法分析ledipasvir的含量。模拟肠道介质中的溶解度在pH6.5或pH5.0、模拟肠胆盐和pH6.4的卵磷脂混合物(SIBLM)的三种模拟肠液中评价ledipasvir非晶体游离碱的溶解度。在各自的SIFs中加入过量固体ledipasvir,室温下搅拌48小时。然后通过再生纤维素注射过滤器过滤所获混悬液。用50:50H2O+0.1%TFA:ACN适量稀释上清液,通过HPLC-UV方法分析ledipasvir的含量。辅料的溶解度在一系列药学上可接受的溶剂包括助溶剂、表面活性剂、脂肪酸、甘油三酯或它们的混合物中测定ledipasvir非晶体游离碱和ledipasvir晶体D-酒石酸盐的溶解性。称取材料至闪烁瓶中,于室温下搅拌长达48小时。在许多情况下,溶解度高于样品中所用固体的量,因此,如果浓度没有通过HPLC-UV进行定量检测,许多结果报告为“高于”或是“高于或等于”。此外,检测在pH2(50mM柠檬酸盐)和pH5(50mM柠檬酸盐)时于0.1%w/w表面活性剂和聚合物存在下随时间变化的水溶性。对ledipasvir晶体形式(丙酮溶剂化物形式II;非晶体FB形式III;D-酒石酸盐)和非晶体形式进行评估以鉴别溶出行为的差异。将过量固体加入至缓冲水溶液中;在预定时间(2、5、8、10、15、20、30、45、60分钟和24小时)取出样品,通过再生纤维素过滤器过滤,稀释,通过HPLC-UV方法进行浓度检测。B.结果溶解度和溶出速率在室温下检测所有现有ledipasvir形式的pH-溶解度曲线并在图9中生动地显示。溶解度曲线的平滑部分(pH>5)代表游离碱的内在水溶性。当溶液的pH低于可电离基团的pKa时ledipasvir的水溶性明显增加。所有形式失去结晶性,在水溶液中回复为非晶体游离碱,一次表现出相似的稳态水溶性。但是,溶出性质是形式依赖的,下文中将详细描述。Ledipasvir非晶体游离碱Ledipasvir非晶体游离碱(FB)的内在溶解度大约是0.04μg/mL。在酸性条件下,pH2.3时溶解度增加为1mg/mL,峰值为pH1.6时的大约7mg/mL,如表20和图9所示。模拟肠液中ledipasvir的溶解度受介质的pH以及胆盐和卵磷脂是否存在这两方面支配。在pH6.5的禁食状态的模拟肠液(FaSSIF)和室温下,溶解度为0.025mg/mL,在模拟胆汁和卵磷脂混合物(SIBLM,pH6.5)中由于胆盐和卵磷脂浓度的增加,溶解度增加大约10倍,为0.232mg/mL。在含有低于SIBLM的胆盐和卵磷脂混合物的禁食状态模拟肠液(FeSSIF,pH5)中,观察到溶解度出现相似的增强,为0.230mg/mL。此混合物中溶解度增加的主要原因是pH5时分子的离子化状态。表20.室温下Ledipasvir非晶体游离碱随pH变化的溶解度水性介质溶解度(mg/mL)水性,pH1.6(HCl)6.855水性,pH2.3(HCl)1.096水性,pH3.1(HCl)0.0132水性,pH4.1(HCl)0.00011水性,pH5.5(HCl)0.00003水性,pH6.2(不变)0.00003水性,pH7.2(NaOH)0.00001FaSSIF1pH=6.50.025FeSSIF2pH=5.00.230SIBLM3pH=6.40.2321.FaSSIF是含有3mM牛磺胆酸钠和0.75mM卵磷脂的水溶液,pH用磷酸盐缓冲液调整为6.5,离子强度用NaCl调整为0.15M。2.FaSSIF是含有15mM牛磺胆酸钠和3.75mM卵磷脂的水溶液,pH用磷酸盐缓冲液调整为6.5,离子强度用NaCl调整为0.15M。3.SIBLM是含有30mM甘氨胆酸钠、30mM鹅去氧甘氨胆酸钠、15mM甘氨脱氧胆酸钠(sodiumglycodesoxycholate)、10mM牛磺胆酸钠、10mM牛磺熊脱氧胆酸钠(sodiumtaurochenodesoxycholate)、5mM牛磺脱氧胆酸钠(sodiumtaurodesoxycholate)、50mM氯化钠和11mM卵磷脂的水溶液,pH用磷酸盐缓冲液调整为6.4,离子强度用NaCl调整为0.15M。还对pH3和6时ledipasvir非晶体游离碱的溶出速率进行了检测。在pH3时,非晶体游离碱形式的溶出度比晶体游离碱和丙酮溶剂化物形式的溶出度更快。然而,在pH6时,所有游离碱形式表现出相似的溶出速率曲线。如表21所示,ledipasvir非晶体游离碱在乙醇和其他有机溶剂例如丙二醇和PEG400中是易溶的(>500mg/mL)。它在表面活性剂(例如聚山梨醇酯80、CremophorEL、酸甘油酯(Labrasol))和脂质混合物中的溶解度高于200mg/mL。它在油酸和辛酸中的溶解度高于500mg/mL。Ledipasvir在短链甘油三酯(SCTs,三丁酸甘油酯)中的溶解度限制为20mg/mL,在长链甘油三酯(LCTs,大豆油)中降低至低于1mg/mL。它在毒理研究所选的媒介物:45%丙二醇、15%辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(SolutolHS)和40%水(HCl调为pH2.5)中的溶解度为25mg/mL。表21.室温下Ledipasvir游离碱形式和LedipasvirD-酒石酸盐在有机溶剂和辅料中的溶解度1.RSSEDDS:10%乙醇、10%PG、40%聚乙二醇硬脂酸酯-15(SolutolHS-15)、40%辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯如表22中所示,在pH2和pH5时非离子型稀表面活性剂通常可增加ledipasvir的溶解度。对非离子型聚合物也可观察到类似作用,但程度较低。十二烷基硫酸钠(SLS)是一种阴离子型表面活性剂,在pH5时可提高ledipasvir的溶解度。但是,在酸性条件下(pH2),在SLS存在下可观察到溶解度显著降低。此结果符合具有低内在水溶性的弱碱性化合物推测会形成不溶性丙酸酯十二烷基硫酸盐的现象。表22.Ledipasvir非晶体游离碱在稀释于水溶性介质的表面活性剂或聚合物辅料中于pH2和5及室温下的溶解度Ledipasvir晶体丙酮溶剂化物(Ledipasvir-03)Ledipasvir丙酮溶剂化物(ledipasvir-03)与其他形式具有相似的稳态溶解度。Ledipasvir-03在所有检测的形式中具有最缓慢的溶出速率。在pH6时,由于极差的内在溶解度(<0.1μg/mL),它的溶出度与其他形式没有差别。Ledipasvir-03在许多有机溶剂和药学上可接受的溶剂中是可溶的,其溶解度与ledipasvir非晶体游离碱所列的溶解度相当,也可参见表21。Ledipasvir晶体游离碱(形式III)Ledipasvir晶体游离碱形式III与其他形式具有相似的稳态溶解度(图9)。此形式比非晶体游离碱溶解的慢,但快于ledipasvir-03。由于极差的内在溶解度(<0.1μg/mL),它在pH6时的溶出度与其他形式没有差别。并未对其在广泛的有机媒介物中的溶解度进行探索,但预计与其他游离碱形式是相似的。Ledipasvir晶体D-酒石酸盐(Ledipasvir-02)Ledipasvir晶体酒石酸盐(ledipasvir-02)表现出与其他形式相似的稳态溶解度(图9)。与所有游离碱形式相比,ledipasivr-02的溶出行为有所改善。在pH3时,显示出比游离碱形式快大约5至10倍的初始溶出速率,与非晶体形式相比,60分钟后溶液中ledipasvir的量大约翻倍。在pH6时,提高的溶出速率也很明显。但是,在此pH下这种盐于数分钟内快速溶出所致的溶解度值与其他形式是等效的。Ledipasvir-02在多种有机介质中不溶,如表21所示。Ledipasvir-02在任何有机媒介物中的最大溶解度是在乙醇中的20mg/mL;这限制了ledipasvir-02在要求溶解于有机介质中的溶解性制剂或工艺中的用途。Ledipasvir具有低水溶性和高透过性,是BCS2类化合物。此实施例中列出的数据表明在水中,所有形式的ledipasvir:非晶体游离碱、晶体游离碱丙酮溶剂化物(ledipasvir-03)、晶体无水游离碱(形式III)和晶体D-酒石酸盐(ledipasvir-02),转化为非晶体游离碱,具有相似的稳态水溶性。Ledipasvir的水溶性在中性形式(pH>5)下低于0.1μg/mL,但在酸性条件下由于两个碱性部分的质子化作用基本有所增加。Ledipasvir非晶体游离碱的水性溶出速率快于晶体游离碱形式。但是,所有游离碱形式的溶出速率均慢于晶体D-酒石酸盐(ledipasvir-02)。Ledipasvir-02在水溶性介质中具有改善的润湿性。晶体和非晶体的ledipasvir游离碱形式在一系列助溶剂和表面活性剂中都是高度可溶的。与此相反,ledipasvir-02难溶于有机辅料,这个性质可能会限制其应用。在I期临床研究中使用ledipasvir非晶体游离碱,经鉴别原料药生产是该形式的关键限制点。然后经鉴别Ledipasvir晶体D-酒石酸盐(ledipasvir-02)是较大量的盐和形式,用于2期临床研究,但是在有机辅料中很差的溶解性限制了它在非常规制剂中的应用。使用晶体ledipasvir丙酮溶剂化物(ledipasvir-03)开发喷雾干燥的分散物制剂以支持未来的临床研究,因为它在有机溶剂和辅料中的溶解性相较晶体ledipasvirD-酒石酸盐更好且与其他游离碱形式相比生产能力有提高。实施例9:Sofosbuvir和Ledipasvir与或不与病毒唑的固定剂量联用对HCV感染病人的疗效使用sofosbuvir和ledipasvir与或不与病毒唑的固定剂量联用治疗HCV感染病人。研究中所用的病人包括那些初治者(无肝硬化),即此前未进行过HCV治疗的患者,和那些此前蛋白酶抑制剂(PI)治疗失败的无反应者(有和没有肝硬化),即此前进行过HCV治疗但对治疗没有应答的患者。初治的患者治疗6、8和12周,无反应者治疗12周。研究1研究1的组群1包括初治者,没有肝硬化的基因型1病人。将病人1:1:1随机分配至三组以接受1)持续8周的SOF/ledipasvir固定剂量联用,2)持续8周的病毒唑与SOF/ledipasvir固定剂量联用,或3)持续12周的SOF/ledipasvir固定剂量联用(图10)。研究1的群组2包括有蛋白酶抑制剂治疗经验的病人,基因型1病人(在蛋白酶抑制剂治疗失败前,有50%具有补偿性肝硬化)。将病人随机分配以接受12周:1)SOF/ledipasvir固定剂量联用或2)SOF/ledipasvir固定剂量联用和病毒唑(图10)。在群组2中,病人不能在治疗前因为不良事件停止用药。在研究1中,入选标准很宽泛,没有年龄或BMI的上限。血小板≥50,000/mm3。研究1的人口统计数据参见下表23。表23.人口统计数据在参与研究1的100名病人中,97%达到了持续性病毒应答。在失败的病人中,两名复发(一名来自于组1(即SOF/Ledipasvirx8周),一名来自于组4(即SOF/Ledipasvirx12周))。但是,失去随访的病人在8周时达到了SVR并在后续回访中下降。在研究1的群组1中(即初治者,无肝硬化病人),治疗8周或12周的60名病人中有58名达到SVR。在研究1的群组2中(即有治疗经验者,PI失败病人),治疗12周的40名病人中有39名达到了SVR12。患有肝硬化的21名病人均达到了SVR12(图11)。在研究1中,具有NS5A耐受相关变异体(RAVs)的九名病人中有七名达到了持续性病毒应答。此外,所有具有NS3/4A耐受相关变异体的病人均达到了持续性病毒应答。有趣的是,在组1中失败的病人复发时检测出S282T突变和多重NS5ARAVs(表24)。安全性概述和不良作用分类分别参见表25和表26。表24.耐受性分析*群组2中曾经接触过蛋白酶抑制剂的病人数表25.安全性概述*胃溃疡,脊椎压迫性骨折**谵妄、自杀念头表26.不良事件(≥5%的全体病人)研究2在研究2中,初治者接受SOF/ledipasvir固定剂量联用和病毒唑,而此前的无反应者随机分配接受十二周的:1)SOF/ledipasvir固定剂量联用或2)SOF/ledipasvir固定剂量联用与病毒唑,其中这些无反应者均患有肝硬化。结果在研究1和研究2中治疗的144名病人中,136名(94%)在治疗后四周时达到了SVR。在这两项研究的85名初治病人中,SOF/ledipasvir固定剂量联用和病毒唑治疗6周后,25名病人有3名未能达到SVR,而SOF/ledipasvir与或不与病毒唑的固定剂量联用治疗8周或12周后,100%(60/60)的病人达到了SVR。在这两项研究的59名有治疗经验病人中,三名肝硬化病人在接受12周SOF/ledipasvir不与病毒唑的固定剂量联用治疗后复发。与此相反,在SOF/ledipasvir与病毒唑的固定剂量联用治疗组中没有观察到病毒治疗失败,但这些组中有两名病人失去随访。SOF/ledipasvir与或不与病毒唑的固定剂量联用治疗具有良好的耐受性,SAEs和不良事件均很少。结论SOF/ledipasvir固定剂量联用+/-病毒唑可最少给予8周以治疗初治的无肝硬化患者。有治疗经验的患者,即使患有肝硬化,在SOF/ledipasvir与或不与病毒唑的固定剂量联用治疗12周后可达到高SVR率。实施例10:多重抗HCV联用疗法在丙肝病毒慢性感染患者中的疗效为了评估SOF与ledipasvir单独或与化合物E和/或化合物J联用4至12周在HCV患者中的安全性、耐受性和疗效,如表27所示对HCV患者进行给药。表27.给药方案安全性分析的主要分析设置包括接受了最少一次研究药物给药的病人。对治疗数据进行分析,规定自研究药物第一次给药时至研究药物最后一次给药日期再加30天所采集的数据为治疗数据。根据接受的研究药物对接受研究药物的病人而不是病人被分配的药物进行分析。抗病毒活性分析的分析设置包括参与本研究且接受至少一次研究药物给药的病人。药代动力学分析设置包括所有参与且接受了至少一次研究药物给药的病人。病人在第0天确认合格且充分了解研究的其他部分并签署治疗分组的具体知情同意书(如果此前没有进行)之后开始研究治疗。抽血以进行HCV病毒载量、研究药物水平、脂质水平的研究,如果在筛查期间未抽血,还用于免疫学研究,并作为筛查同意书的一部分在给药前保存血液。对有生育可能的女性进行妊娠试验,在研究药物给药前的第0天妊娠试验必须是阴性的。病人可能会被要求填写一份基线依从性调查问卷,在所有研究药瓶上放置了一个可记录药瓶打开情况的电子药瓶盖。如有需要将提供帮助来填写问卷。向组B和H的病人提供了日记来记录第0天、第2周、第4周(仅组B)的胃肠道副作用。在到达诊所进行预定的研究访视时,测定病人的生命体征,女性要进行妊娠试验(如果按计划适合且有生育可能),临床实验室抽血检测和研究限制的审查。在每个预定的研究访视时(不包括第1、3、5、10天、第2、3、6周(不适用于组F、G或H)或治疗后第2周和第8周(这两次仅用于实验室抽血)),将询问病人自前次研究访视以来的健康状态和任何伴随药物的使用。按照研究流程进行生命体征、体重检测和检查。待进行的研究步骤和实验室检查的完整列表参见下面的试验计划。此外,可在未计划的访视时观察病人的3级或4级不良事件或任何预期之外的不良事件或可能的毒性。病人可能会被要求填写随访依从性调查问卷,在第7天(组A)、第4周(组A)、第6周(组B和C)、第8周(组A)和第12周(组A)时用电子瓶盖记录药瓶开启情况。如有需要可提供帮助以填写问卷。组B和H的病人将被要求在第2、4、6(仅B组)周携带他们的副作用日记来进行访视。一些访视可具有少量的灵活性,取决于何时需要它们。在病人接受研究药物的时间段内进行的访视灵活性十分有限,因为它们非常频繁,所以在此阶段跳过一次访视可能会被认为是缺失的访视。访视计划的窗口阶段参见表28。表28.访视计划的窗口阶段在四周访视时,可获得HCVRNA以确定是否符合基于病毒应答的治疗停止标准。此时未能达到>2log10HCVRNA下降(除非>2log下降将低于LLOQ)的病人应停止治疗,除非经PI/LAI/申请人医学监测员审查有另外决定(参见9.3.1)。在研究组决定的治疗阶段结束时,病人可停止SOF和ledipasvir、化合物E和/或化合物J的给药。此外,如果病人的参与在预定的研究药物给药阶段之前即已停止,则可在任何治疗结束访视时进行治疗结束评估。用于研究目的的可选研究肝活检可在此时于每个研究组最多10名病人中进行。这一额外的肝活检数据将用于探索肝HCVRNA序列分析。如果病人正在进行可选研究肝活检,他们可以在手术和成像之前按照医嘱完成安全性实验室检查。HCVVL<LLOQ的病人可接受关于如何避免HCV再次感染的教育。所有病人均在治疗结束访视后12周时进行持续性病毒应答的评估。HCVVL<LLOQ的病人可接受关于如何避免HCV再次感染的教育。治疗药物停药后,病人可在治疗结束后第2、4、8、12、24、36和48周时接受随访。如有必要可在每次访视时进行血清妊娠试验。治疗结束后第2周和第8周可仅包括实验室抽血。受试者(n=18)在禁食条件下接受单独的单剂量sofosbuvir(400mg)或与化合物E(500mgQD)联用。Sofosbuvir与化合物E联用的初步PK结果参见表29,显示了在Sofosbuvir与化合物E之间没有临床显著的相互作用。表29:SOF、化合物E和ledipasvir单独和共同给药的药代动力学数据应当理解的是尽管本发明已通过优选实施方案具体公开,且本发明呈现的可选特征、变更、改良和变化可由本领域技术人员采取,但这些变更、改良和变化被认为是在本发明的范围之内。这里提供的材料、方法和实施例是优选实施方案的代表、示例,且不预计用作本发明范围的限制。本发明在本文中进行了广泛和一般地描述。在一般说明之内的每个较窄种类和亚属分组也构成本发明的一部分。这包括具有一个附带条件或负面限制自种属中去除任意物质的本发明一般性描述,无论去除的物质在本文中是否有具体叙述。此外,当本发明的特征或方面以Markush结构描述时,本领域技术人员将认识到本发明也可通过Markush结构的任意单个成员或成员亚组来进行描述。本文提及的所有著作、专利申请、专利和其他参考文献均清楚地以其全部内容通过引入合并入本文中,程度与每一篇单独通过引入合并入本文相同。如果出现矛盾之处,以本说明书包括定义为准。当前第1页1 2 3 
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