1.一种干燥综合征小鼠模型的造模方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一,小鼠颌下腺抗原的制备:按需要取C57BL/6小鼠,脱颈椎处死,新洁尔灭消毒,无菌条件下取出双侧颌下腺,剥离包膜及结缔组织,用PBS洗净后放入无菌青霉素小瓶中,按照每个颌下腺加入0.5ml PBS的量,向无菌青霉素小瓶中加入PBS,将瓶内的颌下腺剪碎,在冰浴中充分匀浆,3000r/15min/4℃的条件离心,弃去上层脂质,取上清液,采用BCA蛋白定量法定量颌下腺抗原浓度,用PBS将颌下腺抗原浓度调整至4mg/ml,加入等量FCA弗氏完全佐剂或FIA弗氏不完全佐剂,将小鼠颌下腺抗原浓度稀释至2mg/ml,反复吹打直至两液相互溶并呈乳白色状,即制得注射用的2mg/ml小鼠颌下腺抗原;
步骤二,将C57BL/6小鼠随机分组,保证各组的小鼠数量、体重、状态尽可能地相近;用剪刀或电动剃须刀将小鼠尾背部的毛剃掉以备注射抗原,正常对照组小鼠不作处理;
步骤三,分别在第0天,第7天于小鼠的尾背部皮内多点注射步骤一制备的FCA配制的2mg/ml小鼠颌下腺抗原,注射量为0.1ml/只;在第14天用同样的方法注射等量的步骤一制备的FIA配制的颌下腺抗原;对照组小鼠用同样的方法注射等量的生理盐水;
步骤四,造模6周左右,检测指标,筛选造模成功的小鼠。
2.如权利要求1所述的干燥综合征小鼠模型的造模方法,其特征在于:所述步骤四中的检测指标包括:
饮水量检测:于造模前一周开始检测,每周测一次;造模后饮水量开始逐渐上升;
小鼠状态观察:在造模后第3周左右开始,小鼠出现搔抓口唇、舔爪现象,随后这种现象逐渐明显;
唾液量检测:在造模第5周进行;在造模第5周及此后,模型组小鼠的唾液应比正常组低,并且逐渐减少;
颌下腺组织病理学检测:在第6周,分别从模型组和正常组中取出2~3只小鼠,处死,取颌下腺做病理检查,用H&E染色法检测,模型组颌下腺存在明显的淋巴细胞浸润、成灶,而正常组无明显浸润。
3.如权利要求1所述的干燥综合征小鼠模型的造模方法,其特征在于:所述步骤一中的C57BL/6小鼠为8周龄的雌性C57BL/6小鼠。
4.如权利要求2所述的干燥综合征小鼠模型的造模方法,其特征在于:所述唾液量检测:方法是测量前小鼠腹腔注射2.4%的戊巴比妥钠0.05ml,以呼吸平稳,眼角膜反射消失,四肢肌群松弛为麻醉标准;完全麻醉后使小鼠处于头低的稍稍倾斜状态可以用取暖器给予温度,腹腔注射0.025mg/mL毛果芸香碱溶液0.1ml,5min后,将事先称好的棉花小球塞入小鼠口中,10min后取出;用湿重法求出小鼠唾液重量。
5.如权利要求2所述的干燥综合征小鼠模型的造模方法,其特征在于:所述颌下腺组织病理学检测,在第6周,分别从模型组和正常组中取出2~3只小鼠,处死,取颌下腺做病理检查,用H&E染色法检测,颌下腺的处理应先放于10%的福尔马林中浸泡24h后,依次进行冲洗、脱水和透明、浸蜡、包埋、石蜡切片以及最终的H&E染色;模型组颌下腺存在不同程度的淋巴细胞浸润,而正常组无浸润或存在轻度浸润。