本发明属于医药领域，特别涉及一种含有美洲大蠊和伊马替尼的药物及其应用。
背景技术：
癌症，是一大类恶性肿瘤的统称，由控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞除了生长失控外，还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。癌细胞的特点是无限制、无止境地增生，使患者体内的营养物质被大量消耗，癌细胞释放出多种毒素，使人体产生一系列症状；癌细胞还可转移到全身各处生长繁殖，导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等等。
伊马替尼(imatinib)是一种小分子酪氨酸激酶抑制剂，主要靶向抑制abl、c-kit、血小板源性生长因子受体(platelet-derivedgrowthfactorreceptor,pdgfr)这三种酪氨酸激酶的活性。它可通过竞争性抑制酪氨酸激酶与atp的结合，以阻断酪氨酸激酶的磷酸化所致的信号转导，从而达到抗肿瘤的目的。迄今为止，伊马替尼己被美国fda批准用于多种癌症的治疗。伊马替尼最初主要用于治疗慢性粒细胞白血病和胃肠道间质瘤，临床研究发现伊马替尼也可用于控制脊索瘤的发展。
美洲大镰(periplanetaamerican)属昆虫纲，蜚镰科。美洲大镰作为药用最初见于《神农本草经》，用于治血痰症、寒热、破积聚、喉咽痹、内寒无子。目前研究中发现美洲大蠊乙醇提取物体外对慢性髓源性白血病(k562)、原髓细胞白血病(hl60)、小鼠白血病(p388d1)细胞株，鼻咽癌(cne)、肺癌(a549)、口腔上皮癌(kb)细胞株，卵巢癌(ho8910)、宫颈癌(hela)和前列腺癌(pc3)细胞株，食管癌(ecal09)、胃腺癌(bgc823)、结肠癌(ls174t)细胞株具有生长抑制作用。
各种抗肿瘤药物都具有不同程度的副作用，有研究表明，某些中药联合抗肿瘤药物可明显提高对肿瘤细胞的杀伤作用，同时降低肿瘤药物在治疗的过程中产生的副作用。目前，未见美洲大蠊与伊马替尼的联合用药物用于癌症治疗的相关报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种美洲大蠊和伊马替尼的药物，所述的药物在癌症治疗方面有显著的效果，并且能够降低单独使用伊马替尼治疗癌症时所产生的副作用。
1.本发明所述的药物由美洲大蠊和伊马替尼组成。
其中，所述的美洲大蠊为美洲大蠊提取物或美洲大蠊药粉。
进一步，所述的药物的活性成分具体重量配比为：美洲大蠊提取物：伊马替尼＝11～18:1；
优选地，美洲大蠊提取物：伊马替尼＝15:1。
所述的美洲大蠊提取物的制备方法为：
称取美洲大蠊，粉碎，加入原药材重量的10～12倍的70～85％的乙醇，75～90℃下回流提取3次，时间为1～3h，过滤，滤液减压浓缩后，在60～65℃测其比重为1.10～1.20，浓缩液加入其重量的10～12倍的纯水，70～85℃下搅拌20min，冷藏静置，并用滤纸吸去上层油脂，下层液经过滤后再减压浓缩、干燥、粉碎，即为美洲大蠊提取物。
进一步，所述的药物的活性成分具体重量配比为：美洲大蠊药粉：伊马替尼＝8～12:1；
优选地，美洲大蠊药粉：伊马替尼＝10:1。
所述的美洲大蠊药粉的制备方法为：
将美洲大蠊成虫置于真空干燥器中，在20～55℃下干燥至含水量为2～5％，得干燥的美洲大蠊成虫，将所得成虫置于超低温粉碎机中粉碎，温度设置为-200℃～-50℃，粉碎至80～300目，即得美洲大蠊药粉。
2.本发明还提供了美洲大蠊和伊马替尼的联合用药物在制备治疗癌症药物上的应用。
其中，所述的美洲大蠊是美洲大蠊提取物或美洲大蠊药粉。
进一步，所述的癌症或恶性肿瘤包含慢性粒细胞白血病、胃肠道间质瘤、脊索瘤、胃癌、子宫内膜癌、乳腺癌、头颈部癌、卵巢癌、肺癌、结直肠癌、前列腺癌、宫颈癌、肝癌、膀胱癌。
进一步，所述的治疗癌症的药物为美洲大蠊和伊马替尼联合用药物；还可以加上药学上可接受的辅料或辅助性成分。
本发明所述的药物中将美洲大蠊与伊马替尼作为活性成分，经实验验证得到，所述的药物对癌症治疗的效果显著，并且能够降低单独使用伊马替尼治疗癌症时所产生的副作用。
具体实施方式
以下结合实施例的具体实施方式对本发明的内容作进一步的详细说明。以下的具体实施方式并不是对本发明的限制，根据本发明的内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
实施例1美洲大蠊提取物的制备
称取美洲大蠊，粉碎，加入原药材重量的12倍的80％乙醇，80℃下回流提取3次，每次提取时间1h，过滤，滤液减压浓缩后，在60～65℃测其比重为1.10～1.20，浓缩液加入其重量的12倍的纯水，80℃下搅拌20min，冷藏静置，并用滤纸吸去上层油脂，下层液经过滤后减压浓缩、干燥、粉碎，即为美洲大蠊提取物。
所述的美洲大蠊提取物根据需要可以按照常规的制备工艺制备成液体制剂、片剂、胶囊剂等。
实施例2美洲大蠊药粉的制备
将美洲大蠊成虫置于真空干燥器中，在45℃下干燥至含水量为2％，得干燥的美洲大蠊成虫，将干燥的美洲大蠊成虫置于温度设置为-100℃的超低温粉碎机中粉碎至200目，即得美洲大蠊药粉。
实施例3
所述美洲大蠊与伊马替尼的联合用药物按照重量份计包括：实施例1所述的美洲大蠊提取物4500mg，伊马替尼300mg。
实施例4
所述美洲大蠊与伊马替尼的联合用药物按照重量份计包括：实施例2所述的美洲大蠊药粉3000mg，伊马替尼300mg。
实施例5
所述的美洲大蠊与伊马替尼联合用药物按照重量份计包括：实施例1所述的美洲大蠊提取物3300mg，伊马替尼300mg。
实施例6
所述的美洲大蠊与伊马替尼的联合用药物按照重量份计包括：实施例1所述美洲大蠊提取物5400mg，伊马替尼300mg。
实施例7
所述的美洲大蠊与伊马替尼的联合用药物按照重量份计包括：实施例2所述的美洲大蠊药粉2400mg，伊马替尼300mg。
实施例8
所述的美洲大蠊与伊马替尼的联合用药物按照重量份计包括：实施例2所述的美洲大蠊药粉3600mg，伊马替尼300mg。
以上实施例3～实施例8任意一项所述的美洲大蠊与伊马替尼的联合用药物可以加上药学上常用的辅料或辅助性成分，制成胶囊剂、片剂、缓释制剂、液体制剂等口服制剂。
以下将通过实验例对本发明所述的药物在制备治疗癌症药物中的应用做进一步的说明。
实验例1本发明所述的药物在制备治疗慢性粒细胞白血病药物中的应用
1材料
1.1实验动物
spf级balb/c-nu/nu裸鼠由成都达硕实验动物有限公司提供。
1.2细胞株
人慢性粒细胞白血病细胞k562细胞，系四川大学生物治疗国家重点实验室惠赠。
1.3主要试剂
本实施例中使用的美洲大蠊提取物为实施例1中所述的美洲大蠊提取物，美洲大蠊药粉为实施例2中所述的美洲大蠊药粉。
伊马替尼(imatinib，im)购自瑞士novartis公司，用ddh2o溶解配成10mg/ml母液，直径0.22um滤器过滤。药品分装为20ml小管，-20℃保存。
rpmi-1640培养基、胰酶、二甲基亚砜(dmso)、噻唑蓝(mtt)和结晶紫均购自sigma公司；胎牛血清购自thermo公司产品；生理盐水、青霉素/链霉素为solarbio公司产品；annexin-v/pi试剂盒购自碧云天生物技术有限公司。
2方法
2.1细胞培养
白血病细胞株k562细胞，培养体系为含10％胎牛血清的rpmi-1640培养基，并加入青霉素(100u/ml)和链霉素(100ug/ml)，培养条件为37℃、5％co2，饱和湿度环境孵育，每2-3天换液传代一次，实验采用对数生长期细胞。
2.2mtt检测细胞增殖
取对数生长期细胞，调整细胞浓度为1×105/ml，接种于96孔板，每孔200ul，贴壁培养24h，分组给药。
实验分组如下：空白对照组，不加任何药物；伊马替尼组；美洲大蠊提取物单药组；美洲大蠊药粉单药组；伊马替尼+美洲大蠊提取物组(实施例3)；伊马替尼+美洲大蠊药粉组(实施例4)。48h后离心弃上清，加入5mg/ml的mtt20ul孵育4h，弃上清液，每孔加入dmso150ul，于摇床上震荡十分钟，于波长490nm处测od值，重复三次。统计分析细胞存活率，计算公式：细胞存活率(％)＝(实验组od值/对照组od值)×100％。
2.3流式细胞分析检测凋亡
采用annexin-v/pi法测定细胞凋亡，取对数生长期的k562细胞，以2×105/ml的密度接种于6孔板中，每孔2ml，实验分组如上。37℃、5％co2条件下培养48h，收集细胞上流式细胞仪检测。
2.4裸鼠移植瘤模型检测药物的体内杀伤作用
收集对数生长期k562细胞，600g离心5min，无血清培养基洗2次后重悬，调整细胞浓度为2×106/ml。75％酒精消毒裸鼠皮肤后取0.1ml细胞悬液接种于裸鼠腋下。当肿瘤体积达到肉眼可见时，开始给药，每天一次，持续15天。称量小鼠体重后剥离、称重肿瘤块，并根据肿瘤重量计算肿瘤抑制率，按照以下公式计算：
肿瘤抑制率＝(对照组平均瘤重-用药组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100％。
2.5肝脏毒性实验
停止给药后，取材，剖杀前12h禁食，5％戊巴比妥钠按1ml/kg剂量腹腔注射麻痹，股动脉取血后立即离心，取血清进行血清学检测。
3.统计方法
所有实验数据均采用统计软件spss17.0进行正态性检验，若各组均呈正态性分布，则用one-wayanova进行单因素方差分析比较组间差异，用lsd法比较两组间差异，各组实验结果均采用均数±标准差
4.结果
4.1美洲大蠊抑制k562细胞增殖
表1mtt实验检测的k562细胞存活率(％，
注：与对照组相比(*p<0.05，**p<0.01)；与伊马替尼组相比(△p<0.05，△△p<0.01)。
由表1可知，美洲大蠊提取物和美洲大蠊药粉作用于k562细胞48h后，都有一定程度的抑制肿瘤细胞增殖的能力，与对照组相比，差异显著。联合伊马替尼后发现美洲大蠊能显著改善伊马替尼的耐药现象，对肿瘤细胞增殖的抑制作用明显，联合用药组与伊马替尼单药组间差异显著(p＝0.009)。
4.2美洲大蠊促进k562细胞凋亡
表2对k562细胞凋亡的影响
注：与对照组相比(*p<0.05，**p<0.01)；与伊马替尼组相比(△p<0.05，△△p<0.01)。
由表2可知，美洲大蠊药粉和美洲大蠊提取物分别联合伊马替尼作用48h后，k562细胞出现典型的凋亡，其形态学表现为胞膜完整，核固缩，可见凋亡小体。流式细胞分析显示，其早期凋亡率分别为9.78±1.01％，14.11±1.62％，16.20±1.64％，均显示高于对照组和伊马替尼单药组。提示美洲大蠊可以影响k562细胞的周期分布，使得大量肿瘤细胞停滞于g0/g1期，不能进入s期进行dna的合成，从而抑制肿瘤细胞的增殖。
4.3美洲大蠊联合伊马替尼能协同抑制k562细胞移植瘤的生长
表3对裸鼠细胞移植瘤的抑制作用
注：与对照组相比(*p<0.05，**p<0.01)；与伊马替尼组相比(△p<0.05，△△p<0.01)。
由表3可知，单用伊马替尼，小鼠有一定程度的耐受，但与对照组相比，仍具有统计学差异。美洲大蠊提取物、美洲大蠊药粉单药即表现出抑制肿瘤生长的作用，与伊马替尼联合应用，可以削弱小鼠对伊马替尼的耐受，提高肿瘤的抑制率，与伊马替尼单药组比较具有显著差异。
4.4各组裸鼠的肝脏血清学指标比较
表4肝脏血清指标比较
注：与对照组相比(*p<0.05，**p<0.01)；与伊马替尼组相比(△p<0.05，△△p<0.01)。
由表4可知，从肝脏血清学指标可以看出，一定条件下，伊马替尼对肝脏具有毒副作用，美洲大蠊提取物、美洲大蠊药粉与伊马替尼联合用药对balb/c-nu/nu裸鼠均没有明显可见的毒副作用，包括小鼠体重、食欲、活动能力、精神状态等方面。实验结束后，联合用药组小鼠均没有明显的脏器损害且体重下降不明显。说明美洲大蠊与伊马替尼的联合用药能有效的降低伊马替尼的毒副作用。
综上所述，通过实验例中的研究表明，本发明所述的药物对白血病细胞k562具有明显的抑制作用，可以影响k562细胞的周期分布，使得大量肿瘤细胞停滞于g0/g1期，不能进入s期进行dna的合成，从而抑制肿瘤细胞的增殖，其抑瘤率可达到81.11％～81.64％；美洲大蠊提取物、美洲大蠊药粉以及伊马替尼单药即表现出抑制肿瘤生长的作用，二者联合使用后可以削弱小鼠对伊马替尼的耐受，提高肿瘤的抑制率，说明美洲大蠊和伊马替尼的联合具有明显的增效作用；从肝脏血清学指标可以看出，一定条件下，伊马替尼对肝脏具有毒副作用，与美洲大蠊联合用药可有效的减轻伊马替尼对肝脏的毒副作用。因此，美洲大蠊与伊马替尼的联合用药具有增效减副的作用。