结合CTLA4的抗体治疗剂的制作方法

技术特征：

1.一种分离的IgG类全人抗-CTLA4抗体，包含：

包含与选自以下的氨基酸序列至少95％同一的氨基酸序列的重链可变域：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.27、SEQ ID NO.29、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.33、SEQ ID NO.35、SEQ ID NO.37、SEQ ID NO.39和SEQ ID NO:43；和

包含与选自以下的氨基酸序列至少95％同一的氨基酸序列的轻链可变域：SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.40和SEQ ID NO.44。

2.如权利要求1的全人抗体，其中所述抗体具有选自以下的重链/轻链可变域序列：SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2(本文中称为A1)、SEQ ID NO.3/SEQ ID NO.4(本文中称为A2)、SEQ ID NO.5/SEQ ID NO.6(本文中称为A4)、SEQ ID NO.7/SEQ ID NO.8(本文中称为A7)、SEQ ID NO.9/SEQ ID NO.10(本文中称为A12)、SEQ ID NO.11/SEQ ID NO.12(本文中称为B6)、SEQ ID NO.13/SEQ ID NO.14(本文中称为C2)、SEQ ID NO.15/SEQ ID NO.16(本文中称为D6)、SEQ ID NO.17/SEQ ID NO.18(本文中称为F1)、SEQ ID NO.19/SEQ ID NO.20(本文中称为F3)、SEQ ID NO.21/SEQ ID NO.22(本文中称为F5)、SEQ ID NO.23/SEQ ID NO.24(本文中称为F6)、SEQ ID NO.25/SEQ ID NO.26(本文中称为F7)、SEQ ID NO.27/SEQ ID NO.28(本文中称为G1)、SEQ ID NO.29/SEQ ID NO.30(本文中称为G2)、SEQ ID NO.31/SEQ ID NO.32(本文中称为G3)、SEQ ID NO.33/SEQ ID NO.34(本文中称为G5)、SEQ ID NO.35/SEQ ID NO.36(本文中称为G12)、SEQ ID NO.37/SEQ ID NO.38(本文中称为D5)、SEQ ID NO.39/SEQ ID NO.40(本文中称为E7)和SEQ ID NO:43/SEQ ID NO:44(本文中称为CT1E1)。

3.如权利要求1或2的全人抗体，其中所述抗体具有至少1x10^-6M的KD。

4.一种抗-CTLA4全人抗体Fab片段，包含：

包含与选自以下的氨基酸序列至少95％同一的氨基酸序列的重链可变域：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.27、SEQ ID NO.29、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.33、SEQ ID NO.35、SEQ ID NO.37、SEQ ID NO.39和SEQ ID NO:43；和

包含与选自以下的氨基酸序列至少95％同一的氨基酸序列的轻链可变域：SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.40和SEQ ID NO:44。

5.如权利要求4的全人抗体Fab片段，其中所述抗体片段具有选自以下的重链/轻链可变域序列：SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3/SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5/SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7/SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9/SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11/SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13/SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15/SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.17/SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.19/SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.21/SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.23/SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.25/SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.27/SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.29/SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.31/SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.33/SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.35/SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.37/SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.39/SEQ ID NO.40和SEQ ID NO:43/SEQ ID NO:44。

6.如权利要求4或5的全人抗体Fab片段，其中所述抗体具有至少1x10^-6M的KD。

7.一种抗-CTLA4单链人抗体，包含通过肽接头连接的重链可变域和轻链可变域，其中所述重链可变域包含与选自以下的氨基酸序列至少95％同一的氨基酸序列：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.27、SEQ ID NO.29、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.33、SEQ ID NO.35、SEQ ID NO.37、SEQ ID NO.39和SEQ ID NO:43；和所述轻链可变域包含与选自以下的氨基酸序列至少95％同一的氨基酸序列：SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.40和SEQ ID NO:44。

8.如权利要求7的单链人抗体，其中所述全人单链抗体具有选自以下的重链/轻链可变域序列：SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3/SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5/SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7/SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9/SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11/SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13/SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15/SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.17/SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.19/SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.21/SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.23/SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.25/SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.27/SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.29/SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.31/SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.33/SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.35/SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.37/SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.39/SEQ ID NO.40、SEQ ID NO.41/SEQ ID NO.42和SEQ ID NO:43/SEQ ID NO:44。

9.如权利要求7或8的全人单链人抗体，其中所述抗体具有至少1x10^-6M的KD。

10.一种治疗需要的受试者的癌症的方法，该方法包括施用有效量的权利要求1-9中任一项的抗体或抗体片段，从而治疗所述癌症。

11.如权利要求10的方法，其中所述癌症选自膀胱癌、血癌、脑癌、乳腺癌、结肠癌、纤维肉瘤、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、黑素瘤、淋巴瘤、间皮瘤和浆细胞瘤。

12.一种治疗需要免疫反应的刺激或抑制的疾病的方法，包括施用有效量的抗-CTLA4多肽，其中所述抗-CTLA4多肽选自下组：

分离的IgG类抗-CTLA4全人抗体，其包含重链可变域和轻链可变域，

抗-CTLA4全人抗体Fab片段，其包含重链可变域和轻链可变域，和

具有重链可变域和轻链可变域的单链人抗体，其中所述重链可变域和轻链可变域通过肽接头连接；

其中所述重链可变域包含与选自以下的氨基酸序列至少95％同一的氨基酸序列：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.27、SEQ ID NO.29、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.33、SEQ ID NO.35、SEQ ID NO.37、SEQ ID NO.39和SEQ ID NO:43，和

其中所述轻链可变域包含与选自以下的氨基酸序列至少95％同一的氨基酸序列：SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.40和SEQ ID NO:44。

13.如权利要求12的方法，其中所述抗体或抗体片段具有选自以下的重链/轻链可变域序列：SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3/SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5/SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7/SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9/SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11/SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13/SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15/SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.17/SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.19/SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.21/SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.23/SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.25/SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.27/SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.29/SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.31/SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.33/SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.35/SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.37/SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.39/SEQ ID NO.40和SEQ ID NO:43/SEQ ID NO:44。

14.如权利要求12或13的方法，其中所述疾病选自前列腺、肾、结肠、肺或乳腺的癌症；病原体感染；与CNS相关的疾病，成淀粉样阿尔兹海默病；和具有炎性或变应性成分的疾病、移植物抗宿主病、宿主抗移植物病、过敏症、自身免疫性疾病和其它炎性疾病。

15.一种分离的抗-CTLA4抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如选自以下的重链可变区氨基酸序列中所示的互补决定区(CDR)：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.27、SEQ ID NO.29、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.33、SEQ ID NO.35、SEQ ID NO.37、SEQ ID NO.39和SEQ ID NO:43；和所述轻链可变区包含如选自以下的轻链可变区氨基酸序列中所示的CDR：SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.40和SEQ ID NO:44。

16.如权利要求15的抗体或其抗原结合片段，其具有至少1x10^-6M的KD。

17.一种药物组合物，包含如权利要求15或16的抗-CTLA4抗体或其抗原结合片段和药学上可接受的载体。

18.一种治疗需要的人类受试者的癌症的方法，包括向所述受试者施用有效量的如权利要求15或16的抗-CTLA4抗体或其抗原结合片段，从而治疗所述癌症。

19.如权利要求18的方法，其中所述癌症选自膀胱癌、血癌、脑癌、乳腺癌、结肠癌、纤维肉瘤、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、黑素瘤、淋巴瘤、间皮瘤和浆细胞瘤。