七彩菊提取液及其制备方法和应用与流程

本发明属于提取液领域，具体是涉及一种七彩菊提取液及其制备方法和应用，特别是一种具有美白抗氧化效果的七彩菊提取液及其制备方法和应用。

背景技术：

七彩菊又名洋菊花，变色菊，产于西藏高山之中，纯天然野生。其外观茶色、晶黄、透亮，具有散风清热、平肝明目的作用。其可内服、外用，具有抗疲劳，护肤养颜，明目清心；具有清润肺、清热解毒、明目之功效。还具有理气解郁，和血散瘀，治肝胃气痛，新风久痹，咯血吐血，月经不调，赤带白下，痢疾，乳痛，肿毒，以及护肤养颜，清新润肺，调经活血等功效。特别具有安定神经与助消化的作用，最适合餐后和睡前饮用，是失眠患者的最佳饮品之一。

酪氨酸酶活性抑制作用的测试是传统用来筛选美白药品的测试方法。当中酪氨酸会因为酪氨酸酶的作用而转化成左旋多巴(l-dopa)，再转化成为多巴色素(dopachrome)。多巴色素在492nm波长下有吸亮度，故此可以量化及计算酪氨酸酶的活性。多巴色素只是暂存物，它会转化成黑色素(melanin)。人类皮肤上的黑色素是由黑色素细胞(melanocytes)所产生的多巴色素转化而成的。黑色素会渐渐地在黑色素细胞内的黑色素体(melanosome)内成熟，成熟后黑色素体便会沿着黑色素细胞的树突(dentrite)转移到角质细胞(keratinocytes)，使肤色变深。抑制酪氨酸酶活性能有效减少多巴色素及黑色素的产生，从而使肤色变得更淡更白。现时大部份的美白药品如对苯二酚(hydroquinone)及熊果苷(arbutin)等均为针对酪氨酸酶活性而达至美白功效的。虽然对苯二酚的美白功效明显，却于2006年因为致癌的风险而被禁用。及后，熊果苷亦因为化学结构与对苯二酚相似而被禁用。现时科学界正找寻安全性较高的美白药品来取缔对苯二酚等药品。

近年来许多疾病的发生已证实与自由基有关,因此,利用抗氧化机理来治疗许多疾病也陆续受到重视,包括:心血管疾病,慢性肾炎,老年痴呆症(alzheimer’sdisease)及过敏性疾病等。具有抗氧化能力的天然产物,更被广泛用于抗皮肤衰老的化妆品上。本研究用学界认为可以准确测定抗氧化能力的试剂盒(totalantioxidantcapacitycolorimetricassaykit)来检测七彩菊的抗氧化能力。

美白和抗衰老的产品日新月异，对于天然原材料的开发需求殷切，本项目应用生物活性和安全性作为筛选指标,能快捷有效的进行筛选,目前市场上还没有七彩菊用于美白及抗衰老产品产品的报道,因此七彩菊将成为美白和抗衰老产品天然原材料的新的一员,可广泛用于保健品、食品和美容产品当中。

技术实现要素：

基于此，本发明的目的之一在于提供一种七彩菊的提取液的制备方法，该方法简单易操作，成本较低，适合大规模生产，且由该法得到的提取液具有最佳的美白抗氧化效果。

实现上述目的技术方案如下：

一种七彩菊的提取液的制备方法，包括以下步骤：

a)振摇：将七彩菊磨粉，过筛，以七彩花40～60倍重量的水在常温浸泡摇动，摇动时间为50～70分钟，振摇频率为150±10rev/min；或

热浸：将七彩菊磨粉，过筛，以40～60倍重量的水浸泡搅拌，浸泡温度为80±5℃，浸泡时间为50～70分钟；或

超声：将七彩菊磨粉，过筛，以七彩菊40～60倍重量的水，超声提取50～70分钟小时；

b)过滤：将七彩菊提取液过滤，滤液定容至浓度为0.02±0.005g/ml，得到七彩菊提取液。

在其中一个实施例中，包括以下步骤：a)振摇：将七彩菊磨粉，过筛，以粉末重量50倍体积的水浸泡振摇，温度为25℃，振摇时间为1小时，振摇频率为150rev/min，得七彩菊的水药液；或

热浸：将七彩菊磨粉，过筛，以50倍重量的水浸泡搅拌，浸泡温度为80℃，浸泡时间为1小时，得七彩菊的水药液；或

超声：将七彩菊其他7种花卉植物分别磨粉，过筛，以七彩菊50倍重量的水，超声提取1小时，得七彩菊的水药液；

b)过滤：将得到的七彩菊水药液过滤，滤液定容至浓度为0.02g/ml，得到七彩菊水提取液。

本发明的另一个目的是提供一种七彩菊的提取液，该提取液具有美白抗氧化效果。

具体技术方案为：根据上述制备方法得到的七彩菊提取液。

本发明的另一个目的是提供上述七彩菊的提取液在美白和/或抗氧化中的应用。

具体技术方案为：上述制备方法得到的七彩菊的提取液在制备美白产品中的应用。

上述制备方法得到的七彩菊的提取液在制备抗氧化的产品中的应用。

所述美白和/或抗衰老产品为保健品、食品、饮料、食品添加剂、营养强化剂或美容用品。

所述抗衰老产品为保健品、食品、饮料、食品添加剂、营养强化剂。

本发明所述的七彩菊提取液及其制备方法具有以下优点和有益效果：

本发明找到了适合七彩菊的提取方法，可应用于工业，具有简单易操作的特点，该工艺仅需在水浸和过滤两个主要步骤，极大地简化了制备工艺。而且，本发明通过优化七彩菊的提取方法,找出具有最佳的美白和抗氧化效果的提取方法。本发明得到的提取液对细胞无毒害及刺激增生作用，可安全应用在美容及相关的产品。

本发明所述的提取方法可以很好地用于七彩菊为原料的提取液的制备，得到的七彩菊的提取液可加工为各种产品，广泛地用于保健品、食品和美容产品中，具有巨大的市场潜力。

附图说明

图1为实施例2七彩菊与其他7种花卉植物的水提取液,包括金边玫瑰花、栀子花、玉兰花、金盏花、腊梅花、密蒙花和白桦树皮,对酪氨酸酶活性的抑制作用结果。

图2为实施例2使用不同提取方法的七彩菊水提取液对酪氨酸酶活性的抑制作用结果。

图3为实施例3trolox在570nm下的吸亮度的标准曲线。

图4为实施例3七彩菊与其他7种花卉植物的水提取液的抗氧化能力测试结果,包括金边玫瑰花、栀子花、玉兰花、金盏花、腊梅花、密蒙花和白桦树皮。

图5为实施例3使用不同提取方法的七彩菊水取液的的抗氧化能力测试结果。

图6为实施例4不同浓度七彩菊的水提取液对皮肤黑色素细胞b16的生长状态和密度的结果。

图7为实施例4不同浓度七彩菊的水提取液对皮肤黑色素细胞b16的存活率的结果。

图8为实施例4不同浓度七彩菊的水提取液对皮肤黑色素细胞b16的黑色素分泌抑制的结果。

具体实施方式

以下将结合附图和具体实施例，对本发明进行进一步的详细说明。

实施例1

本实施例所述的七彩菊水提取液的制备方法，包括以下步骤：

a)振摇：将七彩菊磨粉，过筛，以七彩菊原料50倍重量的水，室温放在摇床振摇1小时，振摇频率为150rev/min；或

b)热浸：将七彩菊磨粉，过筛，以50倍重量的水浸泡搅拌，浸泡温度为80℃，浸泡时间为1小时；或

c)超声：将七彩菊和其他7种花卉植物分别磨粉，过筛，以七彩菊50倍重量的水，超声提取1小时；

d)过滤：将a),b)和c)所得的七彩菊以及分别7种花卉植物的药液过滤，滤液定容至药液浓度为0.02g/ml，分别得到七彩菊提取液和7种花卉植物的提取液；

由该制备方法制得的七彩菊提取液，可用于美白抗衰老产品，包括保健品、食品、饮料、食品添加剂、营养强化剂或美容用品。

实施例2

本实施例所述的酪氨酸酶抑制作用实验，包括以下步骤：

a)将各提取液分别用于酪氨酸酶活性抑制作用测试，同时加入没有任何抑制剂的测试结果作为实验对照、维生素c(美白作用)的测试结果作为实验阳性对照。

b)同时还以实施例1制备方法分别得到七彩菊水提取液，用于酪氨酸酶活性抑制作用实验。

酪氨酸酶活性抑制作用测试是筛选美白药品的传统测试方法(journalofethnopharmacology129(2010)387–390screeningofchineseherbalmedicinesforantityrosinaseactivityinacellfreesystemandb16cellsyanye,gui-xinchoua,,dan-danmu,huiwan,jian-hongchu,alexanderkai-manleung，wang-funfong，zhi-lingyu)。由于酪氨酸酶可以将酪氨酸转化为多巴色素，故此在该测试中，多巴色素生成量越低，则说明提取液对酪氨酸酶的抑制作用越好。

请参阅图1。七彩菊和其他7种花卉植物的水提取液，对酪氨酸酶均有的抑制作用，七彩菊水提取液具有明显效果。

请参阅图2，使用不同提取方法的七彩菊水提取液对酪氨酸酶均有的抑制作用，其中以热浸的水提取液的作用最佳。

由此可知，本发明公开的七彩菊提取液制备方法，对酪氨酸酶活性具有显着抑制而起到美白作用，可用于制备各种美白产品。

实施例3

本实施例所述的抗氧化能力实验，包括以下步骤：

a)trolox(一种维生素e的类似物)的抗铜离子氧化能力来建立标准曲线。

b)各提取液分别用于抗氧化能力的试剂盒测试，同时以没有加入任何提取液的测试结果为实验阴性对照。

同时还以实施例1中以热浸方式的七彩菊水提取液，用于抗氧化能力实验。

请参阅图3。此图以trolox(一种维生素e的类似物)的抗铜离子氧化能力建立标准曲线，并根据该标准曲线来计算七彩菊与其他7种花卉植物提取液的总抗氧化能力。在此测试中，trolox等值越高，则说明提取液抗氧化能力越好。

请参阅图4。七彩菊与其他7种花卉植物提取液水取液，均有的抗氧化作用。而七彩菊水取液更好。

请参阅图5，使用不同提取方法的七彩菊水取液的抗氧化作用，热浸提取方法所得的提取液的抗氧化能力较强。

由此可知，本发明公开的七彩菊提取液，有抗氧化作用，可广泛用于抗皮肤衰老的化妆品上。

实施例4

另外有些美容药品可刺激皮肤细胞增生,可能会增加患皮肤癌的潜在风险,本发明将七彩菊水提取液与皮肤黑色素细b16细胞一起培养,对其细胞的生长状态,密度和细胞存活率进行测试,确认七彩菊对黑色素细胞的活性,从而间接评估七彩菊提取液的安全性。另外黑色素素在405nm波长下有吸亮度，故此将培胞培养液分离后量度405nm吸亮度，可以量化培养液中的黑色素含量，以计算七彩菊水提取液对黑色素形成的抑制作用。

本实施例所述的皮肤黑色素细b16的活性作用实验，包括以下步骤：

a)实施例1中以热浸方式的七彩菊水提取液过滤，稀释,其中，作为对照的维他命c的浓度为1mm。

b)向a)所得溶液加入b16黑色素细胞一起培养，于48小时后收取细胞。

c)使用显微镜观察b)所得细胞的生长状态和密度，同时拍下照片，与没有加入提取液的阴性对照做比较。

d)在不同时间收取细胞,应用血球计数器试验测试细胞存活率,与没有加入提取液的阴性对照作比较。

请参阅图6。七彩菊水提取液,对于黑色素细胞的生长状态和密度与对照没有明显分别,细胞密度适中，生长形态没有异常。不会影响细胞的存活率和生长形态,也不会刺激黑色素细胞增生。

请参阅图7。七彩菊水提取液，对于黑色素细胞的存活率与对照没有明显分别,不会影响细胞的生长率,也不会刺激黑色素细胞增生。

请参阅图8。七彩菊水提取液，对黑色素细胞的黑色素形成均有抑制作用，呈剂量依赖性。

由此可知，七彩菊水提取液可安全用于各种产品中。

由上述实验可知，本发明所述的七彩菊水提取液对酪氨酸酶和黑色素分泌有抑制作用而起到美白作用，同时具有抗氧化作用而起到抗衰老效果。提取液对细胞生长不会产生影响,也不会刺激黑色素细胞增生,可安全应用在美白抗衰老产品中，包括保健品、食品、饮料、食品添加剂、营养强化剂或美容用品。

本发明所公开七彩菊水提取液的制备方法，其工艺流程简单。按照该方法所制得的七彩菊水提取液，具有最佳的美白及抗氧化效果,同时不会刺激皮肤细胞增生。本发明所得的七彩菊水提取液提取液可加工为各种产品，使这种少为人知、价格相宜的天然补品以相对较低的原料成本和产品价格，广泛地用于保健品、食品和美容产品，具有巨大的市场潜力。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。