本发明涉及医药技术领域，具体来说涉及一种高粱根提取物，同时还涉及该高粱根提取物的制备方法，及该高粱根提取物用于制备治疗血管内栓塞或血栓、预防中风或其它血栓性疾病药物中的用途。
背景技术：
高粱根为禾本科高粱属植物高粱sorghomvulgarepers.的根，是一种传统的中草药，在《本草纲目》、《中药大辞典》、《中华本草》等中医药典籍中均有记载。其性味甘、平、无毒；有平喘、利尿，通络等功效，可用于治疗咳嗽喘满，小便不利，足膝疼痛等症。在贵州民间也多有应用，《贵州草药》中也记载高粱根有平喘，利尿；治咳嗽喘澜，胃气疼痛等功效。同时还附有“清热利湿，消肿止痛，安神定志”功效的药方(李时珍.本草纲目1(谷部第二十三卷)[m].北京:中国国际广播出版社:1994:1626；南京中医药大学.中药大辞典下册[m].上海:上海科学技术出版社(第二版),2006:2685；宋立人,胡烈,章国镇,等.中华本草[m].上海:上海科技出版社,1999:426；贵州省中医研究所编.贵州草药[m].贵州:贵州人民出版社,1970:1014.)。而高粱根在农业生产上常被作为废料丢弃，农户多将其焚烧，不仅造成空气污染，而且其中所含有效成分没有被利用而造成极大浪费。目前对它的开发利用非常有限，仅少量入药，大部分被白白丢弃。有关高粱根的化学成分及现代药理研究也少见报道，目前只有关于高粱根提取物在制备治疗呼吸系统疾病药物中的用途，尤其是在制备镇咳、祛痰、平喘药物中的用途的报道，如中国专利申请号201210102842.9]，公开了一种高粱根提取物及其制备方法和用途。目前国内外还没有对高粱根提取物及其制备方法和抗凝血作用的相关文献报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服上述缺点而提供的一种抗凝血效果好、安全性高，价格低廉，制备方法简单，生产成本低的高粱根提取物。
本发明的目的提供该高粱根提取物的制备方法。
本发明的再一目的在于提供该高粱根提取物用于制备治疗血管内栓塞或血栓、预防中风或其它血栓性疾病药物中的用途。
本发明目的及解决其主要技术问题是采用以下技术方案来实现的：
本发明的一种高粱根提取物，是将高粱根用乙醇回流提取，过滤，滤液浓缩、经乙酸乙酯萃取后的混悬液再经正丁醇萃取得到。
本发明的一种高粱根提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)干燥高粱根铡成小段，加入料液重量比为1:8～1:12的体积浓度为30～80％的乙醇溶液，提取1～3次，每次2～3h，提取温度50～90℃，合并提取液并浓缩至无乙醇味；
(2)醇提物加适量水使其混悬后，加入乙酸乙酯萃取，萃取后的水层再加入正丁醇萃取。将正丁醇萃取液浓缩，真空干燥至恒重，得到干燥浸膏即为高粱根提取物。
本发明的高粱根提取物在制备治疗血管内栓塞或血栓形成的疾病，预防中风或其它血栓性疾病药物中的用途。
本发明与现有技术相比，具有明显的有益效果，从以上技术方案可知：本发明的高粱根提取物有效性、安全性高，价格低廉，制备方法简单，生产成本低。药效学试验结果表明：高粱根提取物药物具有抗凝血的作用，可用于制备治疗血管内栓塞或血栓形成的疾病，预防中风或其它血栓性疾病的药物。
具体实施方式
实施例1
一种高粱根提取物的制备方法，包括：干燥高粱根铡成小段，加入料液重量比为1:12的体积浓度为30％的乙醇溶液，提取3次，每次3h，提取温度90℃，合并提取液并浓缩至无乙醇味；取醇提物经乙酸乙酯萃取，萃取后的水层再经正丁醇萃取，将正丁醇萃取液浓缩，真空干燥至恒重，得到干燥浸膏即为高粱根提取物。
实施例2
一种高粱根提取物的制备方法，包括：干燥高粱根铡成小段，加入料液重量比为1:8的50％的乙醇溶液，提取3次，每次2h，提取温度80℃，合并提取液并浓缩至无乙醇味；取醇提物经乙酸乙酯萃取，萃取后的水层再经正丁醇萃取，将正丁醇萃取液浓缩，真空干燥至恒重，得到干燥浸膏即为高粱根提取物。
实施例3
一种高粱根提取物的制备方法，包括：干燥高粱根铡成小段，加入料液重量比为1：10的80％的乙醇溶液，提取1次，每次2h，回流提取，提取温度50℃，合并提取液并浓缩至无乙醇味；取醇提物经乙酸乙酯萃取，萃取后的水层再经正丁醇萃取，将正丁醇萃取液浓缩，真空干燥至恒重，得到干燥浸膏即为高粱根提取物。
试验例、高粱根提取物抗凝血作用的药效学试验
1、高粱根提取物对小鼠出血时间(bt)的影响
取昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组、云南白药组(0.5g/kg)、实施例1制得的高粱根提取物高、中、低剂量组(8.0g，4.0，2.0g/kg)。将各组灌胃给药7d，0.2ml/10g，一日一次，末次给药30min后，分别减去各鼠尖1.5cm，血液流出时开始计时，用滤纸蘸血，每30s进行1次，以血液流出至滤纸上血迹消失的时间为出血时间，结果见表1。
2、高粱根提取物对小鼠凝血时间(ct)的影响
分组、给药浓度及时间同“高粱根提取物对小鼠出血时间(bt)的影响”部分。末次给药30min，小鼠眼内眦球后静脉丛取血，深约4mm，轻轻转动再缩回。自血液流入管内开始计时，待血液注满后，取出毛细玻璃管平放于桌面，每隔30s折断毛细管两端各约0.5cm，并缓慢向左右拉开，观察折断处是否有血凝丝，直至出现血凝丝为止，所历时间即为凝血时间，结果见表1。
3、高粱根提取物对小鼠耳廓微动脉口径的影响
分组、给药浓度及时间同“高粱根提取物对小鼠出血时间(bt)的影响”部分。末次给药30min后，腹腔注射0.6％戊巴比妥钠溶液麻醉小鼠，用医用胶布将已麻醉的小鼠耳廓上的毛黏除，将其俯视固定于观察台，调节观测仪的光源亮度及观察台位置，用50倍镜通过显示屏测量小鼠耳廓微动脉口径，结果见表1。
由表1结果可知，与空白对照组比较，高粱根提取物能显著延长小鼠的出血时间(p<0.01)和凝血时间(p<0.05)、扩张耳廓微动脉口径(p<0.01)；说明其具有抗凝血作用，且能有效地改善小鼠耳廓微循环。
表1高粱根提取物对小鼠出血时间，凝血时间及耳廓微动脉口径的影响
与空白对照组比较，*p<0.05，**p<0.01
4、高粱根提取物对小鼠血浆复钙时间的影响
昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，每组10只，分别为空白对照组、华法林钠组(0.80mg/kg)、高粱根提取物高、中、低剂量组(8.0g，4.0，2.0g/kg)。除华法林钠组第5天开始ig给药外，其他组连续灌胃给药7d，0.2ml/10g，每日一次，末次给药40min后，股动脉取血0.9ml于加有枸橼酸钠溶液的刻度试管中，加生理盐水0.2ml，以1000r/min离心10min。取上清(无钙血浆)0.2ml于试管中，置37℃水浴温育1min后。加入2.8mg/mlcacl2水溶液0.2ml，混匀后计时，30s后每隔10s缓慢倾斜试管1次，观察血浆是否凝固，记录小鼠血浆复钙时间。结果见表2。由表2可知，高粱根提取物各个剂量均有显著延长小鼠血浆复钙时间的作用(p<0.05)。
表2对小鼠血浆复钙的影响
与空白对照组比较，*p<0.05
5、高粱根提取物对大鼠凝血功能的影响
选取健康sd大鼠48只，雌雄各半，随机分成6组，每组8只，分别为空白对照组、模型组、阿司匹林组(16.8mg/kg)、华法林钠组(0.56mg/kg)、高粱根提取物高、中、低剂量(5.6，2.8，1.4g/kg)。除华法林钠组第5d开始灌胃给药外，其他组连续灌胃给药4d，第5、6、7d灌胃给药30min后，除空白对照组外，其他各组鼠均皮下注射0.02％盐酸肾上腺素注射液0.1ml，造成血瘀症模型。第7d皮下注射肾上腺素0.5h后，腹腔注射3％戊巴比妥钠溶液，按45mg/kg麻醉大鼠，下腔静脉穿刺取血6ml，0.109mol/l枸橼酸钠抗凝管抗凝(9:1)，取3ml抗凝血液，以3000r/min离心10min，分离血浆备用。按各测试试剂盒的要求进行凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原的检测，测试在静脉穿刺2h内完成。另外3ml用于血小板聚集率实验，结果见表3。
为模拟动物交感神经兴奋时，肾上腺素分泌增多的现象，采用短期皮下注射肾上腺素进行气滞血瘀症的造模。模型组与空白对照组比较，虽然凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间无明显改变，但纤维蛋白原含量显著升高(p<0.05)，说明形成纤维蛋白单体的机会增多，促使血凝过程和血栓形成，使凝血功能异常，血瘀症模型复制成功。高粱根提取物高、中剂量组均能显著延长凝血酶原时间(p<0.05)，说明二者能通过影响外源性凝血途径的凝血酶原、凝血因子v、vii、x的活性产生抗凝血作用，且均有显著延长活化部分凝血活酶时间的作用(p<0.01)，表明高粱根提取物能通过影响内源性凝血系统以及血浆中凝血因子viii、ix、xi、xii的活性产生抗凝血作用；高粱根提取物能延长凝血酶时间(p<0.05)，说明能较好的降低凝血过程中纤维蛋白原的利用度。
表3高粱根提取物对大鼠凝血四项的影响
与空白对照组比较，*p<0.05；与模型组比较，△p<0.05，△△p<0.01
6、高粱根提取物对二磷酸腺苷诱导的大鼠血小板聚集的影响
将血小板聚集仪打开，待温度上升至37℃，可以开始检测。取0.109mol/l枸橼酸钠抗凝血3ml，以1500r/min离心6min，取上层清液得富血小板血浆,再以3000r/min离心10min，取上层清液得乏血小板血浆。打开血小板聚集仪系统控制软件，按下聚集仪通道一按钮，将装有270μl乏血小板血浆的比色杯放入一号孔，仪器显示p值，此步骤为调零，再按一下按钮，将装有270μl富血小板血浆和搅拌子的的比色杯放入孔内，此刻显示r值，再按一下按钮，向比色杯中加入3mmol/l的二磷酸腺苷5μl，按一下按钮，聚集仪开始记录聚集率。3h以内完成，结果见表4。
与空白对照组比较，大鼠肾上腺素血瘀模型组对二磷酸腺苷诱导的血小板最大聚集率显著升高；高粱根提取物中、低剂量对肾上腺素血瘀模型大鼠血小板聚集率升高具有显著的抑制作用，抑制率分别达到37.0％、40.7％，高剂量也对血小板聚集有一定的抑制作用。同时发现高粱根提取物随着给药剂量的加大，最大聚集抑制率反而下降，提示其含有多种影响血小板聚集的成分，且作用效果相反，低剂量时，抑制血小板聚集的成分的作用占有优势，表现出对血瘀模型大鼠血小板聚集性升高的抑制作用，随着剂量的加大，促进血小板聚集的成分的作用优势凸显出来，表现为促进血小板的聚集。
表4对大鼠血小板聚集的影响
与空白对照组比较，*p<0.05；与模型组比较，△p<0.05，△△p<0.01
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，任何未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。